伊红美蓝能不能检测大肠杆菌的含量

伊红美蓝为苯胺类染料.苯胺类可抑制革兰氏阳性菌生长.
有报道称苯胺类杀菌剂作用机制主要是抑制蛋氨酸的合成.

大肠杆菌在麦康凯琼脂培养基上的形态学特征：红色块状物；可能环绕着胆汁沉淀环

配培养基时加
具体步骤如下：
①制作伊红美蓝培养基,趁热注入培养皿中,凝成平板,待用.
②用灭过菌的锥形瓶盛取河水或沟水,按1：10稀释.
③取0.1毫升稀释液接种于伊红美蓝培养基上.用平板划线分离法进行分离.
④将划线后的培养皿倒置37℃温箱中培养18～24小时.培养基中会出现大肠杆菌菌落,菌落中心呈暗蓝黑色,发金属光泽.
⑤将菌落接种于斜面培养基上（由营养琼脂培养基制成）.

瑞氏（Wright's staim；美蓝－伊红Y）染色：
1．瑞氏染料是由碱性染料美蓝（Methvlem blue）和酸性染料黄色伊红（Eostm Y）合称伊红美蓝染料即瑞氏（美蓝－伊红Y）染料.
2．用甲醇作瑞氏染料溶剂,即成瑞氏染液.甲醇是瑞氏染料良好溶剂,有两种作用：
（1）甲醇使瑞氏染料中美蓝（M）与伊红（E）在溶液中离解,可使细胞成分选择性吸附其中的有色物质而着色.
甲 醇
ME（瑞氏染料）----→M+ + E-
在配制的瑞氏染液中美蓝如放置过久即可氧化而含有天青,美蓝天青与伊红化合物能使核染成紫红色,但不能使胞浆染为蓝色,多余美蓝就可以使胞浆染成蓝色,染色主要是化学作用,是离子彼此结合的反应.
（2）甲醇具有强大的脱水力,可将细胞固定在一定形态及增加细胞结构的表面积,提高细胞对染料吸收作用,同时由于甲醇吸附染色液中的水,使染色液升温,加速染色反应.
3.瑞氏染液配制：
(1) 瑞氏染液配制：
瑞氏染料 830gm或1g
甲醇（AR） 500ml或600ml
○先称干燥（事先放入温箱干燥过夜）瑞氏染料放置乳钵内,用乳棒轻轻敲碎染料成粉末,再行研磨至听不到研芝麻声即呈细粉末,加少许甘油或甲醇溶解研磨,使染料在乳缸内显“一面镜”光泽,而无染料粉粒沉着.
○再加较多量甲醇研磨呈一面镜光亮,静置片刻,将上层液体倒入一清洁储存瓶内（最好用甲醇空瓶）,再加甲醇研磨,重复数次,至乳钵内染料及甲醇用完为止,摇匀,密封瓶口.
○存室温暗处,储存愈久,则染料溶解、分解就越好,一般储存3个月以上为佳.
(2) 缓冲液：
●缓冲液作用：
○染色对氢离子浓度是十分敏感的,据观察pH值的改变,可使蛋白质与染料形成的化合物重新离解.
○缓冲液须保持一定的pH使染色稳定,PBS的pH 一般在***~6.8,
○偏碱性染料可与缓冲液中酸基起中和作用,偏酸性染料则与缓冲液中的碱基起中和作用,使pH恒定.
●缓冲液配制（pH6.6.8,弱酸性）：
配方1 ：配方2：
1% KH2PO4 30ml M/15 KH2PO4 73.5 ml
1% Na2HPO4 20ml M/15 Na2HPO4 26.5ml
H2O(新鲜) 加至1000ml
置室温黑暗处,瓶口密封,防止霉菌污染,如有污染则应报废.

志贺氏菌一般用的是SS平板和MAC平板（推荐SS）,一般不用伊红美蓝平板的（在EMB平板上几乎没什么特别的特征,尽管国家标准上有,但是一般不用的）.
在SS平板上为透明或半透明、直径1-2mm的较小菌落、圆形、光滑、湿润
MAC平板上长的比SS上的大一些,颜色形态相近
EMB平板上其实也是透明或半透明的菌落,但是只要不发酵或迟缓发酵乳糖的细菌在EMB上长的差不多也就是这样,而且EMB选择性比较弱,杂菌较多.
无论上面哪个平板,只要有颜色的、长得太大的、不规则的、粗糙的就可以排除了.最后关键还是要看生化试验和血清凝集.
其实做细菌这样说说你完全感觉不出来的,哪怕说得再详细也是如此,不如亲自看看实际是长什么样的,那样印象就深刻多了.