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eyeshadow-primer是什么意思

2023-07-10 21:20:57
共2条回复
再也不做稀饭了

eyeshadow-primer

眼影打底膏;眼影底

比如:【E.L.F】Mineral Eyeshadow Primer 一个很熟悉的牌子

这个女士都知道

too faced :shadow insurance

urben decay: Eyeshadow Primer Potion

这两个比较有名

Chen

eyeshadow-primer

眼影打底

很高兴为您解答

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2023-07-10 13:14:411

哪里能下 Primere

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2023-07-10 13:14:481

primere pro 版本中,加入什么插件可以编辑rm,rmvb格式的短片

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2023-07-10 13:15:021

要以单位的名义购买adobe的正版软件(photoshop/flash/primere),要如何做才妥当?

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primere 2.0

基本支持AVI,WMV,MPEG格式,其他的格式要转换成这些常见格式才能被导如,转换格式可以使用视频转换大师,下载地址http://www.skycn.com/soft/12521.html.
2023-07-10 13:15:201

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2023-07-10 13:15:291

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c++与c++ primer的区别

C++ 是微软的C++编译工具C++ primer是一本C++语言的书籍
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primer5引物设计结果怎么看

通过引物的参数检测引物设计参数:a引物长度一般在20bp左右,上下游引物碱基长度不要相差超过4个碱基。 b引物退火温度一般在58度,不同软件TM使用不同的算法,primer3,primer5,primer6,primerexpress等一般可以设置在55-58度,beacondesign可以设置在65左右。 cGC含量一般没什么特殊要求,40-60最好,如果不好设计,30-80也是可以的。 d产物长度在100-150,80-200也可以,不要在50bp左右,那样和引物二聚体不好区分,超过200bp可能会影响PCR扩增。 e软件给出的引物不能有发卡结构和超过3-4个碱基的匹配,特别是3`端不能有碱基匹配,那样更容易形成二聚体。 f引物设计好以后,在NCBI上做一个primer-blast,检测一下是否有非特异性扩增。 最好还是通过实验验证,如果是定量PCR引物a溶解曲线单峰,窄而尖,否则可能有非特异性扩增;
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二楼正解。。。。Primer比较难的。。。。
2023-07-10 13:16:4610

摄影师简历自我介绍

摄影师简历自我介绍   众所周知,自我介绍是日常工作中与陌生人建立关系、打开局面的一种非常重要的手段,因此,让自己通过自我介绍或得到对方的认识甚至认可是一种非常重要的职场技术。以下是我为大家整理的摄影师简历自我介绍,欢迎大家阅读!   摄影师简历自我介绍 篇1   美感好,悟性强,勤奋好学,有良好的组织纪律性和强烈的团队意识,热爱影视业,知识面相当广泛;有较好的艺术表现力和良好的艺术节奏感及扎实的影视基础知识和寻求艺术的表现渴求;有熟练的Photoshop数码后期、primere等非线编辑能力和AE的使用能力。本人主攻人像摄影、广告摄影及数码后期;兼做摄像及非编剪辑。   我以优异的成绩获得北京市劳动部门颁发的.高级摄影师资格证!能独立操作大画副相机,能熟练操作做各种佳能、尼康相机,自带索尼千万像数135数码单反相机。   摄影师简历自我介绍 篇2   我是一名摄影专业的应届毕业生,看到贵公司正在招聘一名摄影学徒,于是我写了这封自荐书,希望能够到贵公司就职。我是一名应届毕业生,从大学开始,由于自己学习专业的关系,需要买一部相机,学习摄影。   大学学习了一段时间的摄影知识之后,然后自己拍照片交功课。开始拍照片,就是为了完成老师的任务,而后来慢慢的发现自己悄悄地喜欢上摄影了。很多时候,自己一个人拿着相机,走在校园的操场、篮球场、足球场、饭堂、图书馆、校道、宿舍开始按下快门,记录我们共同拥有的大学生活。用相片来记录我曾经走过的这段大学时光。   后来,我的照片投稿到大学的校报,被采用了。加入了学校的摄影社、开始了我的摄影道路。此外,还兼职拍过一些广告图片、人像图片等等。为了继续我这个兴趣,我选择当一名摄影学徒,从最基础的东西学起,一步步成为一名职业的摄影师。希望经理看完这自荐书后可以给一个机会我到贵公司当一名摄影学徒。   最后,感谢经理在百忙中抽空阅读了我的自荐书,希望经理可以给一次圆梦的机会我,哪怕是再苦再累,我也会坚持,继续我的摄影梦。   摄影师简历自我介绍 篇3   生在长沙,长在长沙。因为户外想过一种自己想要的生活,改行做户外领队、兼职摄影师。幸运的把自己的爱好当成自己的工作。非常热衷于徒步,对于我来说爬山涉水不是一个抽象的概念,那是用自己的双脚一步一步真实的行走。   一年多的时间,我徒步过不少地方,比如说梅里雨崩、虎跳峡、贡嘎、黄山、稻城亚丁、四姑娘山等等。我真心希望每一个朋友能在我的带领下能用自己的双脚去感受这片土地的美丽与神奇。   因为爱户外,自己成立了一个乐享户外小组。小组成员来自于集体,为民间自由组织机构。以户外和摄影为主题开展户外旅行、户外摄影、露营、徒步、登山、等户外和摄影活动。   摄影师简历自我介绍 篇4   在大学期间自修了摄影课程以及相关的美术课程,毕业后曾到北京进修摄影,立志成为一名出色的专业摄影师。多年来孜孜不倦地钻研摄影技术,在不断的工作、学习、总结中,技术逐渐成熟起来,具备了专业的素养,全面而精湛的摄影技术。丰富的工作经验,从事专业摄影八年多,拍摄范围涉及食品、卫浴、五金、塑料制品、工业外景、建筑、家居、首饰、化妆品、服装服饰、人像等。擅长商业广告摄影以及与摄影有关的领域。工作态度认真诚恳,勤奋能干,为影象的完美做出不懈的努力!   我性格诚实稳重,极具耐心,富有创新精神,在工作中,身为职业摄影师,我时常严格要求自己:吃透客户、设计师的意图,本着“专业、敬业、乐业”的原则,以一丝不苟的敬业精神和追求完美的恒心毅力,程度地把产品特有的魅力挖掘出来,让产品的商业价值得到程度的凸现,为客户提供质、最适合需要的照片。在职期间,精心拍摄每一张照片,照片的质量普遍得到了设计师、客户的好评。   多年的工作,厌倦了四处奔波,我一直期望能够找到一个好的发展空间,安稳的工作环境,能够一展所长。 ;
2023-07-10 13:17:401

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2023-07-10 13:17:573

vivo手机怎样才能把录音剪去一段?

vivo手机怎样才能把录音剪去一段? vivo手机的录音格式不支援在手机上剪辑;但是可以汇出到电脑上用录音编辑软体剪裁。 怎样才能把小米手机的录音机声音变大 如果方便的话建议你通过手机自带的系统与安全-使用者反馈将手机出现故障的LOG反馈给小米公司,以便小米公司的工程师可以更快速的排查处理。也可以直接登入MIUI社群发帖反馈给开发组处理。 vivo手机怎样才能把流量关掉? 开启设定选项。 找到状态与通知进入。 在通知页面把流量开关关掉。 或开启手机管家。 点选流量监控。 在监控页面点选右上角的设定选项。 进入设定页面。 把每日自动流量校正关闭。 把超额自动断闸道器闭。 怎样才能把录音变成文字 第一种方法:自己边听录音,边把录音内容记录下来 第二种方法:将录音下载到电脑,电脑上有音讯转文字的软体,使用就可以了 注意:第一种方法自己可以根据录音内容准确描述出内容,使用转文字软体会出现描述有误或者不清的情况 怎样才能把电话录音和手机自制相簿传到电脑 首先你得知道电话录音的音讯和视讯相簿的名字分别在哪个资料夹里。 第一个方法使用第三方工具。 在电脑和手机分别登入聊天工具,点选传送档案,也就几分钟就能搞定。 手机QQ本身也有“传送到电脑”的功能,同一个帐号允许同时登入两个装置。 第二个办法是用优盘,先在手机里把档案放到记忆体卡,再把记忆体卡插到优盘转移到电脑。 第三个办法是云设定共享,手机上的档案放到云空间,电脑上开启就能看到,下载就可以了。 这个方法是最方便的,但是受监督。云空间有系统过滤,有些它认为不符合规定的档案,不能通过。隐私档案还是不要使用它。 怎样才能把手机的录音档案,传送给好友? 找到录音档案点选分享,选择模式 怎样才能把一段录影中间不想要的剪掉 用“FormatFactory(格式工厂)”就可以。(格式工厂属于傻瓜软体,使用简单,容易操作) 格式工厂是套万能的免费的多媒体格式转换软体,支援多种格式媒体在多种解析度下的相互转化、剪接、合成。 1、支援几乎所有型别多媒体格式到常用的几种格式; 2、转换过程中可以修复某些损坏的视讯档案; 3、多媒体档案减肥; 4、支援iPhone/iPod/PSP等多媒体指定格式; 5、转换图片档案支援缩放,旋转,水印等功能; 6、DVD视讯抓取功能,轻松备份DVD到本地硬碟。 另外,会声会影、EDIUS、PRIMERE等软体都可以剪辑视讯、音讯。 聊天记录里面有别人发给我的一段手机录音,要怎样才能把它储存下来? 你加他好友,然后让他传送给你,而不是发在聊天记录了。 或者在群里共享下。 怎样才能把录音里的杂音去掉保留人声 这要看录音里面的杂音是什么杂音,如果是本底噪音,可用软体(如cool edit pro)的降噪功能把底噪去除,如果是其他干扰音,就不好办。总之,要看档案的具体情况而定。有关软体的使用及下载可在百度搜索,满意我的回答请及时采纳! 手机录音太小怎样才能放大 普通录音软体和手机自带录音软体不稳定,容易出现档案损坏、丢失、漏录、杂音、声音失衡等情况,需要安装专业的有法律效力的通话录音软体,开启应用商店搜寻软体“移动公证”,安装该软体之后,使用本机手机号注册,注册完成即可双向通话录音,录音机功能,并存储到云端平台,通过云端储存的录音音质清晰,具备相当高的法律效力,而且录音不易丢失,普通录音没有法律效力。 录音可以在软体上听,也可以在官网上直接下载,还可以通过QQ、微信进行分享传送,也可进入官网下载录音到电脑储存,同时支援中国电信、中国联通、中国移动三家。
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C++ Primer, Fifth EditionPre GCC 4.7.0Code Distribution READMEBarbara E. Moobmoo@att.netAugust 16, 2012************************楼主有话说分割线***********************************************************************此为C++ Primer第五版源代码说明文档,包含在GCC_pre_C11.zip压缩包内。C++ Primer第五版源代码下载地址:informit.com/store/c-plus-plus-primer-9780321714114网页中包含4个源代码压缩包,分别适用于不同的编译器。Download the source files forGCC 4.7.0.适用于GCC 4.7.0.或更高版本GCCDownload the source code files forMS Visual Studio 2012适用于Visual Studio 2012或更高版本Download the source code files forGCC pre-C++ 11 compilers 2012.适用于GCC 4.7.0之前版本,不使用c++0x或c++11的新标准。Download the source code files forMicrosoft pre-C++ 11 compilers.适用于Visual Studio 2012之前版本本人的编译器版本:[****@localhost primer]$ gcc --versiongcc (GCC) 4.1.2 20080704 (Red Hat 4.1.2-44)Copyright (C) 2006 Free Software Foundation, Inc.This is free software; see the source for copying conditions. There is NOwarranty; not even for MERCHANTABILITY or FITNESS FOR A PARTICULAR PURPOSE.所以使用GCC_pre_C11。************************楼主有话说分割线***********************************************************************************************以下为粗略翻译*********************************************************************OverviewThis distribution contains the source code of all the complete programs andmany of the program fragments from C++ Primer. The code in this distributionhas been edited to work with pre C++11 GNU compilers. We tested this codeusing the GCC 4.5.3 compiler, but it should work with earlier versions of thecompiler as well. Please see CompilerNotes.pdf in this directory for moreinformation on the missing features and workarounds.概述这个发行版包含了C++ Primer里所有完整程序的源代码和一些代码片段。这些代码工作在C++11 GNU之前的编译器环境下。我们用GCC 4.5.3 测试过这些代码,在之前的编译器版本下也应该可以适用。请查看本目录下的CompilerNotes.pdf文档以获得更多信息。Building Executables构建可执行文件The code is divided into 19 subdirectories corresponding to the Chapters inC++ Primer. Each subdirectory contains a makefile thatmakes the source in thatdirectory. Thesemakefiles rely on the file named GNU makefile template inthe top-level directory. The makefiles are fairly simple and we have providedcomments in the hope that even those who are not familiar with makefiles canunderstand how to compile these programs by hand if so desired.代码根据C++ Primer中的章节分布在19个子目录下。每个子目录包含一个makefile文件,用来make当前目录的代码。这些makefile文件都依赖顶层目录的GNU makefile template文件。这些makefile文件都很简单,如果需要,我们还是提供了一些备注,希望那些不熟悉makefile的人也可以了解如何手工编译这些程序。The top level directory also has its own makefile that will make the entiresource tree. The top level makefile also has targets clean and clobber toremove the object files or object and executable files respectively.顶层目录中同样有自己的makefile文件,他可以make整个目录文件。这个makefile还包含了 clean and clobber两个标示,可以删除对象文件或分别删除对象文件和执行程序。To use make on most UNIX based operating systems you invoke the commandnamed make:在大多数基于UNIX的操作系统中你调用make命令:# UNIX machines $ make # compiles all the programs 编译所有的程序$ make clean # removes all the object files and stackdumps 删除所有的对象文件和堆栈转储文件$ make clobber # removes executable, object and stackdump files 删除可执行文件、对象文件和堆栈转储文件Input and Output输入和输出The code in these subdirectories includes all of the complete programs coveredin C++ Primer.这些子目录里的代码覆盖了C++ Primer所有的完整项目。In addition, we include executable versions of some of the otherwise incompleteprogram fragments. In general, such programs print details aboutthe internal state of the program. To understand the output, you will have tounderstand the program. This is intentional.此外,我们包含了一些其他不完整程序片段的可执行版本。一般来说,这样的程序打印了程序的内部状态的细节。为了了解输出,你将不得不去理解程序。这是故意的。The input, if any, to these programs varies:对于这些程序的输入,如果有的话,是不同的:u2022 Some programs print a prompt and wait for input on the standard input u2022一些程序打印一个提示,等待输入的标准输入u2022 Other programs read the standard input but do not print a prompt u2022一些程序读取标准输入但不打印一个提示u2022 Others take one or more arguments specifying a file name to read u2022另外一些带一个或多个参数来指定一个用来读取的文件名u2022 Yet others take a file name argument and read the standard input u2022但其他一些则带一个文件名参数,并读取标准输入Each Chapter subdirectory contains a README that explains the input, if any,expected by each executable file.如果可执行文件期待一个输入的话,每一章的子目录包含一个README解释输入。Sample Data Files示例数据文件For those programs that expect input, we have provided small, sample inputfiles. Input files are always found in a subdirectory named data. For example,the program add_item in directory 1 reads Sales_item transactions fromthe standard input but does not prompt for input. If the program is invoked:add_itemit will wait for input, which you can provide by typing appropriate transactions.Alternatively, you can pass the data file we provide. Assuming the followingis executed in the directory named 1 writingadd_item < data/add_item # UNIXwill bind the standard input to the add_item file in the data subdirectoryand will execute the program add_item on the data in that file.Some of the programs take argument(s) that must be supplied when theprogram is executed. These programs will fail if they are invoked with noargument. For example, the word_transform program in the Chapter 11directory requires two input files. You might invoke this program as follows:# word_transform takes two files, samples are in the data directory# this execution uses the file data/rules to transform the text in data/textword_transform data/rules data/text # UNIXSee Section 1.1.1 for a description of how C++ programs are run, page 22 forhow files are bound to the standard input and standard output, and Section6.2.5 for how arguments are passed to a C++ program.对于那些需要输入的程序,我们提供了一个简单的实例输入文件。输入文件往往可以在子目录的data文件夹下找到。比如,目录1中的add_item程序需要从标准输入读取Sales_item交易,但不提示输入。如果程序被如下调用:add_item它将等待输入,您可以通过输入适当的交易提供。另外,您可以通过我们提供的数据文件。假设在目录1下执行了如下命令add_item < data/add_item # UNIX它会将data子目录下的add_item文件绑定到标准输出上,并在这个文件里的数据上执行add_item程序。对于一些带参数的项目,执行时必须提供的参数列表。如果没有参数,这些程序会执行失败。例如,在第11章目录下的word_transform程序需要两个输入文件。你可能会这样调用这个程序:# word_transform takes two files, samples are in the data directory# this execution uses the file data/rules to transform the text in data/textword_transform data/rules data/text # UNIX参见1.1.1节了解c++程序是如何运行的,22页了解如何将文件绑定到标准输入和标准输出,参加6.2.5节了解如何将参数传递给一个c++程序。
2023-07-10 13:18:591

3M 94 primer底涂剂 对人的身体有什么样的危害??长时间接触会有什么问题?

你可以要求查看该底涂剂的物性表MSDS,找出其成分含量再到网上需要对应说明!
2023-07-10 13:20:332

急急急!!!!求primer5的激活码或是注册机,我的机器ID是91!!

注册机产生的是4579
2023-07-10 13:20:401

c primer plus怎么样

c++primerplus不错,很适合初学入门者,是在这个档次上很经典的书籍。c++primer和c++primerplus相比要深一些,需要有一定c++基础不过说老实话,c++primer很值得一看,尤其是原版(如果你e文好的话)你到网上书店去看看大家对c++primer的热情就知道它在c++fans眼中是多么的经典了,呵呵我的提议就是,你先看c++primerplus吧,建议是,一定要看懂例子,多上机亲身试验。就这么多了,祝顺利
2023-07-10 13:20:471

学习c语言看什么书好?

适合新手学习C语言的书目有很多,简单列举如下: 1、《c语言程序设计》:本书面向程序设计初学者编写,以“注重基础、注重方法、注重编程、注重应用”为指导思想,灵活运用案例教学、任务驱动、启发式教学等多种教学方法,对C语言程序设计的语言知识和程序设计的方法过程进行了系统介绍,特别适合将“C语言程序设计”作为第一门程序设计课程的高校学生。 2、《C语言程序设计基础》是适合作为高等院校各类专业“C语言程序设计”课程的教材,亦适合初学者自学或供广大程序设计及开发人员参考。本书概念清楚、内容全面、题例和习题丰富,每个程序都遵循标准化的编程风格,便于学生理解和自学。 3、《C语言程序设计教程》:本书可作为高等学校大学本科、高职高专学生“C语言程序设计”课程教学用书,也可作为全国计算机水平考试及各类短训班的培训教材。本书注重教材的可读性和适用性,全书共11章,适合初学者使用。
2023-07-10 13:21:1015

生物翻译

5? 3 RACE从上述的叶或花的组织提取总RNA。5 RACE和3 RACE进行使用的首选RLMRACE的试剂盒(Ambion公司,美国德克萨斯州奥斯汀)。对于标准的5? RACE,5克总结扎RNA治疗后用小牛肠的RNA适配器磷酸酶和烟草酸焦磷酸酶。 5 RLM-RACE,RNA连接的RNA寡核苷酸适配器无需预处理。 cDNA为合成使用3?RACE的寡聚d(T)适配器所提供的制造商。进行巢式PCR使用嵌套的适配器引物和引物具体为声压级,SPL4的和SPL5。 RACE产品凝胶纯化并克隆到pGEM T Easy载体(Promega公司)为测序转基因植物声压级(ORF加上3吗?UTR)和一个序列缺乏3? UTR(声压级)PCR-扩增与pfu的TURBO(Stratagene公司),使用cDNA为模板。SPL3m所产生的预测miR156 7突变利用重组PCR的结合位点。扩增GUS-Plus是从pCAMBIA1305.1矢量和稠合在帧5?结束这些基因产生GUS标记的蛋白质。所有这些构造中克隆下游的CaMV 35S启动子在pEZR-CL。构造过表达公认的miR156前体所产生的克隆0.3-0.8 kb的基因间的基因组序列,含有该前体在这矢量。植物转化用蘸花法(贝尔德等人。1993)。GUS活性检测视觉(即非定量)进行分析GUS表达染色根据的Senecoff等人的方法的植物。 (Senecoff等人,1996)。上的表达35S :: GUSSPL3的各种突变的效果构造如下测定。 T1植物的种子处理用农杆菌1/2 MS培养基上生长50毫克/升卡那霉素,以确定转基因植物。抗性植株在96 - 孔的单位,并转移至土壤中,在持续光照下生长在22°C。叶3和4时采收植物大约有五个完全展开叶,并储存在-80℃下用于随后的分析。上视觉检测GUS开花,成人花环或茎生叶活性,以确定含有活性的转基因的植物。定量GUS存储从这些植物的叶子上进行分析。叶片呈地在液氮中的细粉末在微型离心管中,并悬浮在含有50mM磷酸钠(pH 7.0)中,10的缓冲mM的? - 巯基乙醇,10mM的EDTA,0.1%月桂酰肌氨酸钠和0.1%的Triton X-100。离心分离后,10升的上清液的时间是添加到预热GUS分析缓冲液(2毫摩尔4 - 甲基伞形酮-DGlucuronide的在GUS提取缓冲液)在37℃下,温育30分钟。停止反应升的0.2M碳酸钠,通过加入900?LS-50B荧光光谱仪和荧光测定(珀金埃尔默),激发和发射滤波器设置为455 nm和365
2023-07-10 13:21:392

E基因_人HTRIE基因在不同细胞系和多种组织中的表达及其功能

  摘 要:人的HTRIE基因是五羟色胺受体(HTR)家族中的一员,这个家族里面的基因都和精神分裂症、抑郁症以及人的自杀活动有关,但是对于其具体的作用机制目前研究不多,采用实时定量PCR方法分析了HTRIE基因在各个组织和不同细胞系中的表达情况,亚细胞定位发现HTRIE位于细胞膜上,萤光素酶实验分析确定HTRIE可以抑制原癌基因erbB2启动子的转录活性,这些研究结果为进一步研究HTRIE基因在疾病发生中的作用奠定了一定的基础。   关键词:HTRIE;表达谱;实时定量PCR:转录活性   中图分类号:Q7 文献标识码:A 文章编号:1007-7847(2007)04-0311-05      人类的五羟色胺受体可以分为7种类型,即5-HTRI~7,这7种类型又可以分为14种亚型,分别为:HTR1A,HTR1B,HRTIC,HTRID,HTRIE,HTI1F,HTR2A,HTR2B,HTR2C,HTR3A,HTR4,HTR5A,HTR6,HTR7,有研芋云表明HTR7和HTR4都可以激活转录因子固醇反应元件(serumresponse element,SRE)的转录活性,在NIE-115细胞系中过表达5-HT4(a)可以使其变圆,在海马神经元中,HTR7有使神经轴突变长的功能,HTRlB能够和S100A10,Pll(annexin 2 lightchain)蛋白质发生相互作用,而且发现HTRlB对下游ERK1/2的Thr202/TYr204磷酸化具有调控作用,而且可以通过和pll相互作用抑制神经冲动的传导,人HTRIE基因位于染色体的6q14-q15,并且含有7个跨膜结构域,因此属于G-蛋白偶联受体家族,目前发现此蛋白质在背根神经中枢有表达,并且具有抑制cAMP的形成,而且在去甲肾上腺素、肾上腺素、组氨、多巴胺和褪黑激素的刺激下,其蛋白质的表达情况没有任何变化,研究发现在阻断剂methiothepin的刺激下,HTRlE抑制cAMP的形成作用消失,有研究表明,五羟色胺诱导钙离子释放是通过激活HTR1E来实现的,而且发现HTtR1E可以调节细胞因子IL-6和CXCL8/IL8的释放,因此HTR1E可能在激活各种细胞信号途径以及调节细胞因子的释放起到了很重要的作用,我们通过对HTRIE基因在各个组织和细胞系中的表达情况以及亚细胞定位分析,为以后对HTRIE功能的研究打下基础。      1 材料与方法      1.1 材料   真核表达载体pEGFP-C3和含有erb B2启动子的报告基因pTAL-luc-erbB2购自Clontech公司,pMDl8-T载体、不含erbB2启动子区域的报告基因的载体pTAL-luc、各种限制性内切酶、T4DNA连接酶、T4聚合酶及反转录试剂盒购自TaKaRa,LipofectamineTM 2000转染试剂盒,总RNA提取的TRIZOL试剂购自Invitrogen,luciferase assay试剂盒购自Promega,SYBRGreen I荧光染料实时定量PCR试剂盒购自Applied Bio systems公司,倒置荧光显微镜为Zeiss产品,PE全自动荧光定量PCR仪为美国ABI 7900产品,荧光分光光度计TD-20/20为美国产品,T47D、HeLa、HepG2、Hep3B、SW480、MCF7等14种细胞系以及人的各种组织由实验室保存。      1.2 方法   1.2.1 细胞培养、总RNA的提取、cDNA的合成T47D、HeLa、HepG2、Hep3B、SW480、MCF7等细胞在37℃,5%CO2,相对湿度95%条件下,用完全培养液DMEM(补加10%新生牛血清、2mol/L谷氨酰胺和100mg/L青霉素和100mg/L链霉素)培养,24h以后用PBS将细胞洗两次,然后用细胞刮收集细胞,各种细胞系和组织按照Invitrogen公司试剂盒提供的方法进行,用反转录试剂盒合成各细胞系和组织的cDNA片段。   1.2.2 目的基因的扩增以及重组载体的构建   从人大脑组织中提取RNA,然后以反转录的cDNA为模板,以HTRIE引物对(sense primer:5′-CTCGAGATGAACATCACAAACTGTACCAC-3′,添加Xho I位点anti-sense primer 5′-GGTACCCTAAGTATGCTCTCGGCATCT-3′,添加gpn I)克隆人HTRlE编码序列(1098bp),然后亚克隆到pMDl8-T载体中,用Xho I/Kpn I酶切鉴定正确后,用Xho I/Kpn I酶切将目的片段切下,再亚克隆到同样酶切处理的pEGFP-C3表达载体中,酶切验证后测序分析,以确保读码框和序列的正确性。   1.2.3 实时定量PCR   用Trizol抽提各种细胞系的细胞总RNA,取总RNA 2μg用SuperscriptⅡ逆转录试剂盒进行逆转录反应,再以逆转录反应液2μL作为模板,对TNFAIP l基因的表达采用实时荧光定量PCR检测,定量引物采用Primer Express 3.0软件设计(sense primer:5′-TCCACCAG CCTGCCAACTAC-3′anti-sense primer 5′-CCGTCCTCq"TCCTGGCGTAT-3′);反应体系为:1×SYBR Green PCRMaster Mix,50mmol/L sense primer,50 mmol/Lanti-sense primer,100ng模板进行,反应条件为:95℃变性15s、60℃复性60s,72℃延伸60s,共40个循环,以β-actin作为内参照,用去离子水取代模板作阴性对照,用美国PE Biosystems公司提供的SDS2软件进行数据处理,以RO值为纵坐标做直方图,比较表达差异,每个样品重复3次。   1.2.4 HTRIE亚细胞定位   用完全培养液DMEM培养Hep3B细胞长到70%~80%时,将pEGFP-C3-HTRIE转染到Hep3B细胞,细胞培养24h后,用PBS洗细胞一次,然后用4%的多聚甲醛室温固定10min,PBS洗两次,随后将50%的丙酮和50%甲醇混合液加入到细胞中室温放置30s后,PBS洗两次,然后加入终浓度为0.5mg/L的Hochest染色液,室温放置30min,用PBS洗两次后在荧光显微镜下观察细胞。   1.2.5 萤光素酶实验检测HTR1E对erbB2转录活性的影响   用完全培养基DMEM培养HEK293Fr细胞,等到细胞长到70%~80%时,将pTAL-luc-erbB2与pEGFP-C3-HTRIZ,pTAL-luc与pEGFP-C3-HTRIE,pEGFP-C3与pTAL-luc-erbB2,pTAL- luc与pEGFP-C3分别共转染到培养好的HEK293Fr细胞中,每组重复3次,每孔用LacZ共转染到细胞中来平衡用量,转染24h后,将细胞用PBS洗两次,裂解细胞抽提蛋白,测定各组分蛋白的荧光强度。      2 结果      2.1 细胞和组织的总RNA的提取及构建真核表达载体的成功   将细胞和组织中提取的RNA各取2μL进行琼脂糖电泳,可以观察到清晰的28S、18S、5S条带,RNA的提取效果理想,然后检测各RNA的A260/A280值,其A260/A280值都在1.85左右,说明提取的RNA有着较高的浓度(图1),反转录后,克隆的人HTRIE基因片段在约1000bp处获得单一目的条带,与克隆基因1098bp的大小基本一致(图2),克隆基因亚克隆到真核表达载体pEGPF-C3中,Xho I/xpn I酶切验证得到一条约1000 bp的条带(图3),测序结果进一步说明HTRIE基因亚克隆到表达载体中,而且读码框正确。      2.2 HTRIE在各个组织和细胞系中表达分析   用RT-PCR检测HTR1E在常见的细胞系和组织中的表达情况(图4),结果显示HTRIE基因在细胞中的表达情况为:人的乳腺癌细胞T47D和纤维素瘤细胞HTl080-Tetoff表达量最低,而在人的肝癌细胞HepG2表达量最高,在所有检测的组织中都有较高的表达,但是在肝脏组织表达量最高,在脾脏组织表达量最低,在实验过程中,目的基因和内参β-actin在琼脂糖电泳后都只有单一的一条带,说明两个基因都是特异性的扩增,实验没有污染(结果没有显示)。      2.3 HTRIE定位于细胞膜上   在Hep3B细胞中转染pEGFP-C3-HTR1E,经过Hocheset染色后,然后在荧光显微镜下观察细胞核和目的基因的分布情况,结果发现HTR1E定位于细胞膜上(图5)。          2.4 HTRIE可以抑制原癌基因erbB2的转录活性   将p7AL-luc-erbB2与pEGFP-C3-HTRIE,pTAL-luc与pEGFP-C3-HTRIE,空载体pEGFP-C3与pTAL-luc-erbB2,pTAL-luc与空载体pEGFP-C3分别共转染到HEK293FT细胞中,每组重复3次,转染24h后,测定报告基因的荧光值,结果发现在HEK293Fr细胞中过表达H7R1E后,报告基因erbB2的荧光值明显下降,没有erbB2启动子的报告基因的pTAL-luc在过表达H7R1E后荧光值没有明显的下降的趋势,这说明HTRlE对原癌基因erbB2的转录有抑制作用(图6)。      3 讨论      原癌基因ERBb2是表皮生长因子受体(EGFR)家族中的一员,研究发现,在小鼠中敲除erbB2基因11d后小鼠死去,并且其运动神经和颅神经嵴衍生感官神经节的发育也受到了严重的影响EGFR(erbBl),erbB3和erbB4 3个基因都需要与配体的结合才能够被激活,但是erbB2的激活并不需要与配体的结合,这意味着其他的信号分子也可以通过erbB2来传递信号,目前对与erbB2致癌的研究主要集中在细胞水平,并已经证实了erbB2可以通过G-蛋白偶联受体的信号通路来激活,在许多类型癌症中erbB2都出现过表达的情况,所以在治疗癌症时,erbB2也成为药物治疗的靶标,我们通过对HTREI的亚细胞定位发现,作为G-蛋白偶联受体的HTRIE定位于细胞膜上,而且发现此基因在各个组织和细胞中都有表达,并可以抑制erbB2的启动子的转录活性,这也就意味着HTRIE基因可能在癌症的发生中扮演了重要角色,为以后HTRIE功能的研究打下了基础。      作者简介:吴艳阳(1981―),男,湖南张家界人,硕士研究生,主要从事转录因子调控机理的研究;张健(1963―),男,湖南长沙县人,湖南师范大学教授,通讯作者,主要从事转录因子调控机理的研究。
2023-07-10 13:21:461

pcr试验是什么意思?

聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction),简称PCR,是一种分子生物学技术,用于放大特定的DNA片段。可看作生物体外的特殊DNA复制。 DNA聚合酶(DNA polymerase I)最早于1955年发现 ,而较具有实验价值及实用性的Klenow fragment of E. Coli 则是于70年代的初期由Dr. H. Klenow 所发现,但由于此酶不耐高温,高温能使之变性, 因此不符合使用高温变性的聚合酶链式反应。现今所使用的酶(简称 Taq polymerase), 则是于1976年从 温泉中的细菌(Thermus aquaticus)分离出来的。它的特性就在于能耐高温,是一个很理想的 酶,但它被广泛运用则于80年代之后。PCR最初的原始雏形概念是类似基因修复复制,它是于1971年由 Dr. Kjell Kleppe 提出。他发表了第一个单纯且短暂性基因复制(类似PCR前两个周期反应)的实验。而现今所发展出来的PCR则于1983由 Dr. Kary B. Mullis发展出的,Dr. Mullis当年服务于PE公司,因此PE公司在PCR界有着特殊的地位。Dr. Mullis 并于1985年与 Saiki 等人正式表了第一篇相关的论文。此后,PCR的运用一日千里,相关的论文发表质量可以说是令众多其它研究方法难望其项背。随后PCR技术在生物科研和临床应用中得以广泛应用,成为分子生物学研究的最重要技术。Mullis也因此获得了1993年诺贝尔化学奖。DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。在实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。 但是,DNA聚合酶在高温时会失活,因此,每次循环都得加入新的DNA聚合酶,不仅操作烦琐,而且价格昂贵,制约了PCR技术的应用和发展。 发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 PCR技术的基本原理 类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟, 2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。
2023-07-10 13:21:552

想从事软件工程师的工作,本人零基础,底子也差,希望稳扎稳打的打好硬基础,推荐几本书以供自学

去上下夜校!
2023-07-10 13:22:067

【输卵管积水对窗口期子宫内膜基因谱的影响】 输卵管积水对子宫内膜

  摘 要:应用Affymetrix U133A 2.0基因表达谱芯片分析正常志愿者、输卵管积水和输卵管阻塞三者在胚泡植入窗期子宫内膜基因的差异表达,正常样本与积水样本有显著差异表达的基因588个,正常样本与阻塞样本180个,积水样本与阻塞样本750个,三者均有显著差异表达的基因28个,该结果表明输卵管积水患者的低妊娠率可能与其容受性受影响相关。   关键词:子宫膜容受性;基因芯片;输卵管积水;窗口期   中图分类号:R711.6 文献标识码:A 文章编号:1007-7847(2007)04-0367-06      据WHO预测,21世纪不孕症将成为仅次于肿瘤和心脑血管疾患的第三大疾病,输卵管性疾病导致的不孕约占女性不孕症的1/3,而其中输卵管积水引起的不孕又占输卵管性不孕的10%~30%,体外受精一胚胎移植(IVF-ET)在解决输卵管病变引起的不孕症中发挥了很大的作用,但是大量研究表明输卵管性不孕患者接受IVF-ET治疗的成功率偏低,特别是伴有输卵管积水者成功率更低,这些表明输卵管积水可能影响IVF-ET的成功率,本文应用AffYmetrix U133A 2.0基因表达谱芯片分析正常志愿者、输卵管阻塞不伴积水和输卵管阻塞并积水三者在胚泡植入窗期子宫内膜基因的差异表达,阐述输卵管积水对子宫内膜容受性影响的可能机制,为进一步探讨输卵管积水对IVF-ET影响机制及如何提高妊娠率提供理论依据。      1 材料与方法      1.1 标本采集   我院生殖中心2005年收治的分别因双侧输卵管阻塞伴积水和双侧输卵管间质部阻塞拟行IVF-ET的两名患者及一名有生育史的健康志愿者,年龄分别为26、28和30岁,月经规则、周期正常(28~32d),B超检查未发现子宫肌瘤、子宫内膜异位症、多囊卵巢综合征等疾病,在月经周期的第10d开始使用尿LH试纸,测出LH峰,在LH峰值后的第7d(LH+7,着床窗口期)取出内膜组织(3例组织标本均经病理学检查证实),以生理盐水漂洗样本,于液氮中保存,正常样本、积水样本和阻塞样本的编号分别为A、B、C,互为对照比较。      1.2 实验方法   1.2.1 寡核苷酸微阵列芯片   AffYmetrix U133A 2.0,代表了18400个转录本,包含了14 500个来自Unigene基因库全长人类基因。   1.2.2 样品制备   用TRIzol法抽提3份样品的总RNA,使用QIAGEN RNeasy试剂盒纯化总RNA,使用分光光度计测定OD值及琼脂糖凝胶电泳质控总RNA,以T7(d7)24 Primer为引物,反转录完成cDNA第1条链的合成,以第1条链为模板进行cDNA第2条链的合成,纯化后的双链cDNA,使用Genechip IVT Labeling Kit试剂盒直接进行体外转录合成cRNA,同时完成cRNA生物素标记。再将纯化并用分光光度计定量的体外转录后的cRNA产物经高温高盐片段化为35~200bp。   1.2.3 芯片杂交及洗涤   将片段化的cRNA和其他试剂混合,配制杂交液,将杂交液注入芯片中,将3张芯片在杂交炉中杂交16h后取出芯片,用基因芯片洗涤工作站400洗脱和染色探针阵列。   1.2.4芯片扫描及结果分析   用基因芯片扫描仪3000扫描芯片,将芯片扫描结果用Affymetrix公司自带的软件GCOS1.2分析生物素荧光信号的强度,3例样本的扫描数据均统一到500,通过计算完全匹配的探针信号同碱基错配的探针信号之间的比值Ratio,采用系统的默认值,来确定核酸杂交信号为存在(presentP)、边界(marginal M)、不存在(absent A),规定显著差异表达基因筛选标准为Signal Log Ratio(实验样本和对照样本比值取Log2后的值)≥2或≤-2,即Signal Log Ratio值≥2说明该基因在实验样本较对照样本表达显著上调,Signal LogRatio值≤-2说明该基因在实验样本较对照样本表达显著下调。      2 结果      2.1 总RNA抽提及cRNA片段化结果   从3例样本中提取的总RNA OD260/OD280值均在1.8~2.1(见表1),琼脂糖凝胶电泳结果分析RNA(见图1)28S、18S条带清晰,并且28S条带的亮度和宽度为18S条带的2倍,说明所提取的总RNA纯度较高、完整性良好,样品合格,符合芯片杂交的要求,cRNA片段化后为35~200 bp,均一性程度高,进行基因芯片杂交条件好。       2.2 差异表达基因筛选结果   积水样本与正常样本相比,显著表达差异的基因共588个,表达上调为351个,下调为237个,阻塞样本与正常样本相比,显著性差异的基因共180个,表达上调为106个,下调为74个,积水样本与阻塞样本相比,显著性差异的基因共750个,表达上调为302个,下调为448个,将积水样本与正常样本比较得到的数据和阻塞样本与正常样本比较得到的数据取交集,即在两组数据中都出现2倍以上差异表达的基因共28个,表达均上调为7个,均下调为15个,两组上下调方向不一致6个,这些差异基因的功能分类见表2和表3。        3 讨论      基因芯片又称DNA微阵列,是指采用原位合成或直接点样的方法将大量DNA片段或寡核苷酸片段排列在硅片、玻璃等固体介质上形成微矩阵,样品核酸分子经过标记,与固定在载体上的DNA阵列中的各点同时进行杂交,通过检测杂交信号的强度而获取样品分子的基因信息,从而对基因序列及功能进行研究,本课题进行输卵管积水、输卵管阻塞及有生育史健康妇女窗口期子宫内膜基因表达差异研究,以期筛查出输卵管积水对子宫内膜容受性影响的差异基因。      3.1 子宫内膜容受性相关基因   胚胎着床是从受精卵植入子宫内膜开始的一系列细胞、分子信号传递过程,胚胎着床成功与否与子宫内膜容受性密切相关,影响子宫内膜容受性的相关因素较多,其分类尚无公认的标准,本研究将筛选出子宫内膜容受性相关基因按功能分为以下几类。   3.1.1 酶   S.Mirkin等分析分泌早期(LH+3)与分泌晚期(LH+7)的子宫内膜:上调大于等于2倍的49个基因中,产物为酶的占11%;下调大于等于2倍的58个基因中,产物为酶的占25%,本研究显示积水样本与正常样本、阻塞样本与正常样本及积水样本与阻塞样本相比差异基因中酶约占20%,这些酶有基质金属蛋白酶类、环氧合酶、脂氧合酶类、醛氧化酶、单胺氧化酶、谷胱甘肽过氧化酶,3(GPx-3)等。   3.1.2 细胞黏附分子和细胞骨架蛋白   S.MirkinEll等报道49个上调基因,产物发挥 细胞黏附分子和细胞骨架蛋白功能的占19%;58个下调基因,发挥细胞黏附分子和细胞骨架蛋白功能的占11%,本研究显示各样本比较差异基因中产物发挥细胞黏附分子和细胞骨架蛋白功能的约占5%,结果差异较大是因为各基因产物具有多重功能,分类有交叉重叠性,细胞黏附分子(CAMs)是一类参与细胞与细胞,细胞与细胞外基质黏附作用的糖蛋白,在着床过程中发挥重要作用,分为5大类:整合素、选择素、钙黏附分子、黏液素、免疫球蛋白超家族,其中研究较多的是整合素,细胞骨架蛋白是一类与细胞骨架相关的蛋白质,差异表达的有角蛋白、COMP、LOMD、OPN、肌动蛋白等。   3.1.3 细胞周期调节因子、金属离子结合蛋白和信号转导蛋白   S.Mirkin等报道49个上调基因,产物为细胞周期调节因子、离子结合蛋白和信号转导蛋白占38%,58个下调基因,为细胞周期调节因子、离子结合蛋白和信号转导蛋白占中占46%,本研究也显示各样本比较差异基因中产物为细胞周期调节因子、离子结合蛋白和信号转导蛋白的约占20%,产物为细胞周期调节因子的上调基因有生长抑制和DNA损伤基因、丝裂原活化蛋白激酶等,差异表达的离子结合蛋白大多数是钙离子结合蛋白,有膜连蛋白、金属硫蛋白等,差异表达的信号转导蛋白有DKKl、成纤维细胞生长因子9、卷缩相关蛋白等。   3.1.4 免疫反应相关蛋白和载体蛋白   与子宫内膜容受性相关的差异基因为免疫反应相关蛋白有细胞分化抗原CD55、CD44、白介素、补体Clr、Cls等;载体蛋白有溶质载体家族成员、PDZKl、SNXl0等。   3.1.5 其它   其它功能的蛋白有:细胞增殖、离子通道、分泌期蛋白、受体蛋白等,与子宫内膜容受性相关且研究较多的有分泌期蛋白:胎盘蛋白-14。         3.2 输卵管积水患者对子宫内膜容受性影响的可能差异基因   目前采用Affymetrix公司芯片最完整的关于子宫内膜容受性相关基因的5份研究(Kao、Carson、Risesewijik、Brothwick、Mirkin)中共同认定的植入窗期标志性上调基因有骨桥蛋白、衰变加速因子、单胺氧化酶A、分裂激活蛋白激酶5、DNA诱导损伤抑生长因子、补体1R亚单位、白介素-15、AnnexinⅣ、Apolipoprotein D、Dickkopfl、DNA结合抑制因子-4、Placetal protein-14、Adipsin、丝氨酸蛋白酶抑制因子、GTP-binding protein 2、Claudin 4、Nip 2;下调基因有:Olfactomedinrelated、ER Localized protein、Msh同源盒1、GATA结合蛋白2,在本研究中,输卵管积水样本中差异表达的植入窗期标志性基因主要有以下几种。   3.2.1 骨桥蛋白   骨桥蛋白(OPN或SPPI)是唯一一个在5份研究中一致上调的基因,本研究显示积水样本较正常样本、阻塞样本表达分别下调2.8、3,阻塞样本与正常样本无显著差异,骨桥蛋白通过其分子中的精一甘,天冬氨酸(Arg-Gly-Asp,RGD)序列一细胞黏附结构域,识别细胞表面的受体整和素,与细胞结合,调节细胞的黏附、迁移和增殖分化等,其基因水平的增加促使分泌中期腔上皮细胞表面受体整合素αv、β3表达增加,因此OPN-αvβ3,复合体将会在种植窗内膜腔上皮细胞顶侧缘形成,以促进胚泡的着床,推测若其中一种表达减弱或两者均减弱,导致该复合体不能有效的形成,将会影响胚泡的植入,另外,OPN还可以和CD44结合形成复合物覆盖在于宫腔上皮的表面以募集淋巴细胞,从而使Th2型细胞因子增多,调节围着床期子宫内膜对胚胎的适应性,以利胚胎成功地植入和维系妊娠。   3.2.2 胎盘蛋白-14   胎盘蛋白-14(placenta protein-14,PP-14,Glycodelin,PAEP)在3项研究中表达均上调,本研究中积水样本较正常样本、阻塞样本表达分别下调6.1、6.6,阻塞样本与正常样本表达无显著差异,PP-14最早是在胎盘中提取出来的,故命名为PP-14,但迄今尚无证据显示胎盘能合成这种蛋白,故又将其更名为Glycodelin,不同组织Glycodelin的糖基化形式不同,其功能也不同,末端包被有唾液酸化的LacNAC或LandNAC天线的寡糖系列能特异性的阻断细胞黏附及抑制由CD22(B细胞受体)介导的免疫活性,它们还能与凝集素样受体结合,阻碍该受体的信号转导作用,NK细胞和巨噬细胞就是通过凝集素样结合反应来识别异种细胞,因此Glycodelin可以抑制这两种细胞的免疫活性,由于E-选择素的岩藻糖化抗原也在Glycodelin上表达,所以Glycodelin通过这种有岩藻糖化天线结构的寡糖系列阻断E,选择素的连接位点而抑制细胞的黏附作用。Glycodelin对胚泡的成功植入及正常妊娠的维持有重要意义。   3.2.3 Dickkopfl   Dickkopfl(DKKl)在4项研究中表达均上调,本研究中积水样本较正常样本、阻塞样本表达分别下调3.5、3.9。阻塞样本与正常样本表达无显著差异,DKKl是一种分泌性糖蛋白质,与细胞膜上的Wnt受体LRP5(或LRP6)和DKKl共受体Kremenl(或Kremen2)结合,形成内吞小体,从而关闭Wnt信号通路,通过对Wnt信号转导途径的调控决定细胞的分化、增殖、极性、迁移和癌变等特性,在肿瘤的发生和胚胎的发育方面发挥重要作用,DKKl在人类子宫内膜分泌中期突发性地高表达,与着床窗的开启在时间上一致,提示DKKl可能是介导胚胎着床的关键因子之一,文献报道,DKKl在人胎盘中转灵活性增强,蛋白表达丰富,提示DKKl在胎盘构建,胚胎早期的分化发育中可能发挥一定的作用。   3.2.4 其它   衰变加速因子(DAF,CD55,)在4项研究中表达均上调,本研究中积水样本较正常样本、阻塞样本表达分别下调4.8、4.2,阻塞样本与正常样本无显著差异,DAF是一种重要的补体调节蛋白,因能加速C3转化酶的衰变而将其命名为衰变加速因子,在保护胎儿维持妊娠方面起重要作用。   单胺氧化酶A(MAOA)在4项研究中表达均上调,本研究中积水样本较正常样本、阻塞样本表达分别下调3.8、3.6,阻塞样本与正常样本无显著差异,人胎盘中MAOA活性较高,与去甲肾上腺素和肾上腺素的灭活有关,对维持妊娠起着重要作用。   DNA诱导损伤抑生长因子(GADD45A)在4项研究中表达均上调,本研究中积水样本较正常样本、阻塞样本表达分别下调3.2、3.4,阻塞 样本与正常样本无显著差异,GADD45基因可能在细胞周期控制、DNA损伤修复及细胞信号传导过程中有重要作用。   DNA结合抑制因子-4(ID4)在3项研究中表达均上调,本研究中积水样本较正常样本、阻塞样本表达分别下调2.5、2.4,阻塞样本与正常样本表达无显著差异,ID4具有抑制肿瘤细胞生长及促进细胞凋亡作用。   补体D(Adipsin,DF)在3项研究中表达均上调,本研究中积水样本较正常样本、阻塞样本表达分别下调2.4、2.9,阻塞样本与正常样本表达无显著差异,Adipsin由脂肪组织合成并分泌,是第一个从脂肪细胞系克隆的补体成分,在脂类代谢中起着重要作用。   嗅素相关蛋白-1(Olfactomedin related ERLocalized protein,OLFMl)在4项研究[2-5]中表达均下调。本研究中积水样本较正常样本表达上调2.3,积水样本与阻塞样本及阻塞样本与正常样本表达均无显著差异,OLFMl产物为分泌期糖蛋白,与发育相关,参与多器官发育,特别是神经系统的发育。   Msh同源盒1(MSXl)在3项研究中表达均下调,本研究中积水样本较正常样本表达上调2.8,积水样本与阻塞样本及阻塞样本与正常样本表达无显著差异,Msx基因是同源基因盒(homeobox)基因家族的成员,即Hoxa 7,表达于上皮组织中,其表达水平与上皮细胞的增生能力有关,下调该基因表达水平可以使基底细胞增殖能力下降。   大部分共同认定的植入窗期标志性基因在积水样本与正常样本、阻塞样本表达均有差异,且改变方向相反,说明输卵管积水患者子宫内膜容受性受到影响,可能导致其IVF时低妊娠率,但限于样本含量较小、研究对象个体差异、取材时间差异、使用基因芯片种类不同、结果分析软件不同及随机误差等造成基因芯片在子宫内膜容受性研究方面重复性、可比性差,子宫内膜容受性相关基因研究结果不一致,其重复性、再现和可比性还有待进一步提高。此外,基因芯片技术筛查出的差异基因尚需进一步的生物学分析和机制研究。但是,随着基因芯片技术的不断成熟,很多问题能被逐渐解决,基因芯片技术作为一个技术平台必然给众多不孕症患者带来新的希望。      作者简介:李艳萍(1962―),女,湖南长沙人,中南大学湘雅医院教授,博士,通讯作者,主要从事辅助生殖临床工作及研究;赵红翠(1984―),女,安徽铜陵人,硕士研究生,主要从事辅助生殖研究。
2023-07-10 13:22:211

PCR是医学上的?它代表什么??

是的,聚合酶链式反应
2023-07-10 13:22:333

隔离防晒霜要用卸妆水吗

隔离防晒霜要用卸妆水吗   隔离防晒霜要用卸妆水吗,盛夏即将来临,防晒霜的使用量也在逐渐加大,防晒霜正确的使用方法是要将所有外露皮肤都进行涂抹,那么,以下了解隔离防晒霜要用卸妆水吗   隔离防晒霜要用卸妆水吗1    用防晒乳需要用卸妆液吗   要用。防晒霜里面添加了很多的化学成分,而且有些成分不会被肌肤吸收,如果不清掉的花,就很容易堆积在肌肤毛孔中,擦了防晒霜需要用卸妆液尤其是防水型的防晒霜,一定要用卸妆产品,因为用水是无法清除的。    眼唇卸妆液能卸脸部吗   可以。   卸眼唇妆容的卸妆产品,可以用来卸脸上的妆容,因为眼唇卸妆产品非常温和,刺激少,清洁力也是足够的,因此用来卸脸上的妆容没有什么问题。眼唇卸妆液当然是可以用来卸除脸妆的,因为眼唇是很敏感的部位,用的产品也是最温和的,刺激性比较少,所以能够卸除眼睛唇部,同时也能够卸除脸部妆容,使用感也会比卸妆油清新很多,卸妆力度却丝毫不差于卸妆油。    卸妆液和卸妆水一样吗   卸妆水和卸妆液是一样的,都是液体形态的卸妆产品,只不过叫法不同。卸妆水(卸妆液)是用于卸除淡妆的水剂化妆用品,通常配方中含有较多的表面活性剂、保湿剂和乙醇,增加对皮肤的清洁作用。    卸妆液和卸妆水的区别   卸妆水卸妆液的区别就是在于,卸妆液适用于干性或中性皮肤的"美眉,而卸妆水更加适合于油性皮肤的美眉们。现在市面上来说卸妆产品按质地可分为三种,它们的本质区别主要在于,油性卸妆产品的清洁性会更加的强,他们比较适合清除浓妆,也比较适合容易出油的皮肤。   隔离防晒霜要用卸妆水吗2    防晒隔离霜是防晒霜吗   1、防晒隔离霜不是防晒霜。通俗点来讲,防晒霜主要是用来防晒的,防晒霜的作用原理是将皮肤与紫外线隔离开来,有效预防黑色素的产生,晒不黑、晒不伤。   隔离霜除具有基本防晒功能,还能防止脏空气等对皮肤的伤害,如果你比较少接触阳光,擦些隔离霜就行了;如果是长期在日照强烈的户外,那得使用防晒霜才安全。具体是用防晒霜还是隔离霜取决于你在太阳底下的时间以及当时日照的强度。   2、从颜色上来看,防晒霜和隔离霜的区别,防晒霜通常是透明的,没有修饰肤色的效果,而隔离霜会增加一些调整肤色的功能,比如说有粉色、紫色、绿色等。需要根据自己的肤色选择合适的隔离霜。   3、从是否可以隔离彩妆上来看隔离霜和防晒霜的区别,一般隔离霜可以起到隔离彩妆的效果,在一定程度上可以防止彩妆残留对皮肤造成的伤害,所以使用粉底之前最好先用隔离产品;一般说来,防晒霜则没有这个效果。    防晒隔离霜和防晒霜的使用顺序   1、正确答案“先防晒再隔离”。为什么要”先防晒再隔离“呢..因为一般防晒霜都是化学防晒,也就是说是要被皮肤吸收才能起到作用,如果先涂隔离霜,那防晒霜的效果就会被减弱哦,隔离霜的主要作用是隔离空气中的灰尘和脏东西,涂在最外层才能发挥其最大的作用,当然你也可以选带有防晒系数的隔离产品啦。   2、教你怎么选择保养顺序:防晒、隔离、粉底。防晒霜保护的是肌肤不受紫外线的伤害,要用在最底层;而隔离一般是指防止肌肤被空气、粉尘和彩妆的侵害,要用在彩妆之前;粉底本身只是对肤色起到的修饰作用。当然,如果你想图省事,用一瓶防晒值SPF25以上的隔离霜也能替代防晒霜。   3、隔离霜一般是用在基础护肤后和彩妆或者其它防护之前。日常护肤基础的步骤:一般是用洗面乳洗脸后,用爽肤水(或者柔肤水),之后用润肤乳,然后隔离,然后防晒。而隔离霜一般是将脏空气与皮肤隔离开的,有防晒和防辐射的作用,但是一般隔离霜防晒系数较低,比一般防晒霜对皮肤的刺激小的多,所以不需要重度防晒的时候一般直接在基础护肤之后涂抹隔离霜就OK了。    防晒隔离霜的功效   1、对于需要长时间对着电脑的OL来说,如果没有适当的保护,肌肤很容易产生色素沉积、细纹及早衰。用隔离霜来对抗电脑辐射是一种不错的办法,它们的成分中大多含有丰富的抗氧化因子及高浓度的营养滋润成分,如绿茶成分、精纯维他命E等,抑制自由基产生的功能,防止皮肤过早老化,使肌肤在薄薄的呵护下同时拥有完整的保护,令肌肤在面对电脑时变得安全而且轻松。   2、有的隔离霜有特殊的润色功能,隔离霜最大的功劳,是抵挡紫外线给皮肤带来的伤害,但同时还能隔离脏空气、脏东西,以减少自由基对皮肤的伤害。如果你是个办公室族,只是上下班的路上与阳光相遇,就只擦些隔离霜就可以。   3、隔离霜是底妆产品,主要减少彩妆对肌肤的伤害。隔离霜不仅有防晒的作用还有隔离彩妆的作用,隔离霜是底妆产品,可以应付日常的防晒隔离工作。另外,大多数隔离产品能防止皮肤过早老化,减少彩妆对肌肤的伤害。   隔离防晒霜要用卸妆水吗3    擦防晒霜需要卸妆吗    防晒霜需要卸妆   一般的防晒霜,按照防晒剂,可分为两类:物理防晒和化学防晒,物理防晒剂的作用原理是靠反射作用,屏蔽紫外线,达到防晒的目的,这就好比是给肌肤穿件防护衣,阳光照射到这件防护衣上后,就被放射走了,肌肤也就不会和紫外线接触。   物理防晒剂是“趴”在肌肤表面,由于要把这类防晒剂与其他成分稳定地调和成防晒霜,一般都采用油性溶剂,因此,物理型防晒霜都比较厚重,涂抹在面部,肌肤泛白,颗粒性较重。   防晒需不需要卸妆这个问题要看个人. 在判断你自己需不需要卸妆的时候需要考虑以下几个主要因素:   1. 1. 防晒的防水强度. 不用解释, 当然防水越强的防晒越难清洗.   2. 2. 防晒以涂多久. 防晒的防水成分—大部分是聚合物成膜剂(polymeric film-former)—随着UV光, 空气中的水份, 和氧气自由基的攻击会降解.   3. 3. 洗面奶强度或者配方. 如果配方(乳化)正确,有些温和的洗面奶一样可以有良好的清洁防水成分的能力.   4. 4. 还有再用什么护肤/化妆品. 如果用防晒之前用了primer,面霜,或者扑粉,可能可以帮助或者加难清洁.   5. 5. 皮肤出油程度. 如果皮肤很油的mm应该了解“脱妆”的意义,而只用防晒的话就是“脱防晒”咯.   6. 6. 出了多少汗.   当考虑到这六个因素后,大家就可以决定到底需不需要卸妆防水防晒了.    防晒霜的使用方法   首先要使用洗面奶清洁脸部皮肤,减少多余的油脂附着和老化的角质,让脸部干净清透,接着正常上爽肤水和轻薄的乳液即可。   将防晒霜挤在手心,大约硬币一半大小即可,然后在额头、脸颊,下巴,鼻梁等各个部位点一点。   接着使用指腹部位轻轻涂抹均匀即可,如果觉得厚重,可以使用粉扑和上粉底一样,将防晒霜压实即可。   防晒霜一半过2个小时就需要补涂一次,不然会失去防晒的效果,所以,最好随身携带一瓶在身上哦。   由于防晒霜,是需要卸掉的,不然会造成毛孔的堵塞,导致长痘痘等问题,因此,我们需要使用卸妆类产品去做清洁。   可以使用带有乳化效果的卸妆油清洁脸部的防晒霜和其他彩妆污垢,然后,用清水将脸部的脏污清洗干净。   也可以先使用卸妆湿纸巾,让皮肤上的防晒霜被大部分清洁之后,再使用泡沫洗面奶对脸部进行清洗。   脸部清洗干净后,按照你的护肤习惯,正常上保养品就行了,没有其他特别的需要注意的事项了。
2023-07-10 13:22:411

刊行的诗词刊行的诗词是什么

刊行的诗词有:《饶固庵宗颐为詹无庵安泰刊行遗集无庵哲嗣伯慧索题因书》《赠许秀才·祖工俪句集刊行》。刊行的诗词有:《赠许秀才·祖工俪句集刊行》《饶固庵宗颐为詹无庵安泰刊行遗集无庵哲嗣伯慧索题因书》。注音是:ㄎㄢㄒ一ㄥ_。拼音是:kānxíng。结构是:刊(左右结构)行(左右结构)。刊行的具体解释是什么呢,我们通过以下几个方面为您介绍:一、词语解释【点此查看计划详细内容】谓书稿刻印行世。二、引证解释⒈谓书稿刻印行世。引宋苏轼《东坡志林·记梦》:“或劝诵《金光明经》,具言世所传本多误,惟咸平六年刊行者最为善本。”清方维甸《校刊<抱朴子·内篇>序》:“伯渊叙_篇目,将以刊行。”关德栋《冯梦龙<山歌>序》:“《童痴二弄·山歌》刊行后的情况,限于一时文献不足,难于具体论述了。”三、国语词典刊印发行。宋.苏轼《东坡志林.卷一.记梦》:「具言世所传本多误,惟咸平六年刊行者,最为善本。」也作「刊布」。词语翻译英语toprintandcirculate德语druckenundverlegen(V)_,herausgeben(V)_法语imprimeretfairecirculer四、网络解释刊行刊行是汉语词汇,读音kānxíng,解释为书稿刻印行世。关于刊行的诗句有稿刊行多得助别板刊行亦听渠祖工俪句集刊行关于刊行的成语万世不刊刊心刻骨苦行僧景行行止不刊之论东行不见西行利行行蛇蚓丈人行行行出状元关于刊行的词语苦行僧不刊之说不刊之论万世不刊不刊之典丈人行刊心刻骨不刊之书鸟兽行关于刊行的造句1、这些非主流的言行,其实都是死了的,斩断了思惟之根的流行语、商品,是可以大规模刊行出售的武功秘笈,注定,不能继续前进。2、其他一些国家经常正逝世界各地刊行邮票和钱币的硬币,以纪念农历新年。3、今由萧平实老师详细讲解之后,整理成文,以易读易懂之语体文刊行天下,以利学人。4、书完稿后,庄廷钱病故,他父亲庄允城为成全儿子的心愿,雇工刻印,于顺治十七年冬刊行。5、书编成后,庄廷拢死,其父庄允城为之刊行。点此查看更多关于刊行的详细信息
2023-07-10 13:22:481

帮忙翻译一下这篇文章,急急!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!

支原体支原体是一种属的细菌缺乏细胞壁。因为他们缺乏细胞壁,他们不会受到一些抗生素如青霉素或其他β -内酰胺类抗生素这一目标的细胞壁合成。他们可以寄生或saprotrophic 。几个物种在人类致病,包括米,肺炎,这是一个重要原因,非典型肺炎和其他呼吸系统疾病,生殖和文字,这是被认为参与在盆腔炎。他们可能会导致或有助于某些癌症。 属支原体是其中的几个属内部的阶级mollicutes 。 mollicutes是细菌,其中有小的基因组,缺乏细胞壁有一个低的GC -内容( 18-40 mol %时) 。有超过100个公认的属种支原体。其基因组大小范围从0.58 -1 .38m egabase-对。 mollicutes是寄生虫或commensals人类,动物(包括昆虫) ,和植物;属支原体是根据定义,仅限于脊椎动物宿主。胆固醇是需要的增长,种支原体,以及某些其他属的mollicutes 。他们的最佳生长温度,往往是温度的东道国,如果warmbodied (如37摄氏度,在人类)或常温如果主机是无法规范其自身的内部温度。分析16核糖体RNA序列,以及基因的内容,强烈建议该mollicutes ,包括支原体,有密切的关系,无论是乳酸菌或梭菌分行的进化树( firmicutes严格意义上) 。 支原体经常发现在研究实验室作为污染物在细胞培养。支原体细胞培养污染的发生是由于污染的个人或受污染的细胞培养基成分的药物。支原体细胞,通常小于1 μ m和因此,他们难以察觉,与传统的显微镜。支原体可引起细胞的变化,包括染色体aborations的变化,代谢及细胞的生长。严重的支原体感染,可能摧毁一个细胞系。检测技术,包括聚合酶链反应,镀上敏感的琼脂和染色的DNA染色包括dapi或Hoechst的。 细菌属支原体(小事名称:支原体)和他们的近亲,主要特点是缺乏一个细胞壁。尽管这样,形状,这些细胞往往符合一几种可能性与不同程度的复杂性。例如,成员属螺承担一细长螺旋形状没有援助的刚性结构细胞的信封。这些细胞形状假设作出贡献的能力,支原体的蓬勃发展,在各自的环境。米肺炎细胞具有延长,所谓的"秘诀结构" ,伸出由球形细胞体。这个结构是所涉及的粘附在宿主细胞,在运动沿固体表面(滑翔运动) ,并在细胞分裂。米肺炎细胞体积小和多形性,但与一个粗略的形状在纵向截面相似,即1轮-谷底瓶。 支原体是不寻常的细菌之间在这方面最需要甾醇为稳定他们的胞质膜。甾醇是由后天的环境,通常是由于胆固醇从动物宿主。支原体也普遍拥有一个相对较小的基因组0.58-1.38 megabases ,结果在急剧减少的生物合成能力,并解释他们的依赖于东道国。此外,他们使用替代遗传代码的密码子uga是编码氨基酸色氨酸而不是平常的蛋白石停止密码子。 在1898年诺卡尔和空肠Roux报道,培养病原体的牛传染性胸膜肺炎放线杆菌( cbpp ) ,这是在当时的严重和普遍的疾病在牛群。今天,疾病仍是风土病在非洲和欧洲南部。这种疾病是造成米mycoides亚。 mycoides资深大律师(小殖民地型) ,和工作诺卡尔和空肠Roux代表首次分离的一支原体物种。 cultiviation是,现在仍然是困难的,因为复杂的增长要求。这些研究人员成功地接种一半透水袋无菌中等肺流体从受感染的动物和沉积,这袋腹腔内成为一个活兔。后15至二十天,流体内部的回收袋是不透明的,这表明增长的一个微生物。 opacitiy的流体是没有看到在控制。这肉汤混浊,然后可以用来接种第二和第三轮和随后引入一个健康的动物,造成疾病。然而,这并不工作,如果材料的加热,显示出生物制剂的工作。 uninoculated媒体,在邮袋,取出后从兔,可被用来成长的有机体,在体外,显示的可能性细胞自由种植和排除病毒的原因,虽然这是不充分体会到在时间(诺卡尔和空肠Roux , 1890年) 。名称支原体,从希腊mykes (真菌)和等离子(形成) ,提出了在1950年的,一词取代传染性胸膜肺炎样的生物体( pplo )是指生物体类似病原体的cbpp (何承天和弗罗因特, 1956年) 。它后来被发现,该真菌样生长模式米mycoides是独一无二的物种。 这种混乱约支原体和病毒表面再次五十年后,当伊顿和他的同事培养的病原体的人原发性非典型肺炎(子宫颈抹片)或步行肺炎。这剂可以增加,鸡胚胎和通过过滤器,排除正常的细菌。不过,它不能所应遵守的高倍光镜,它引起了肺炎无法治疗与抗菌药物sulphonamides和青霉素(伊顿,等人, 1945a ) 。伊顿确曾考虑的可能性,即疾病所造成的一支原体,但代理人没有成长,关于标准的pplo媒体的时间。这些意见,导致得出的结论是病原体的子宫颈抹片是一种病毒。研究人员认为,时间显示,培养剂可诱导疾病的实验感染棉花大鼠和仓鼠。尽管如此,争议是否有真正的研究人员分离病原体的子宫颈抹片(主要基于不正常的免疫反应患者的子宫颈抹片) ,在回顾他们的证据,一直与同事和竞争对手似乎已相当定论( marmion , 1990年) 。在上世纪60年代初,有报道说,连接伊顿的代理人向pplos或支原体,人所共知,然后作为寄生虫牛和啮齿动物,由于敏感性抗菌化合物(即有机金盐) ( marmion和goodburn , 1961年) 。能力成长伊顿的代理人,现在被称为肺炎支原体,在细胞自由媒体获准爆炸研究了什么一夜之间成为最重要的医学支原体和什么是成为研究得最多的支原体。 最近的进展,在分子生物学和基因组学研究带来了基因简单的支原体,尤其是米,肺炎和其近亲米生殖,一个更大的观众。第二次公布的细菌的完整基因组序列是分枝杆菌生殖,这是其中一个最小的基因组的自由活的生物体(弗雷泽等人, 1995年) 。该米肺炎基因组序列公布不久,并且是第一的基因序列,确定引走了一个粘粒图书馆,而是整个基因组鸟枪法( himmelerich ,等人, 1996年) 。支原体基因组学和蛋白质组学继续在努力去理解那些所谓最小的细胞(和记和蒙塔古, 2002年) ,产品目录,整个蛋白质含量的细胞(古拉,等人, 2000年) ,和一般继续利用小基因组中这些生物体的了解广泛的生物学概念。 科学家也一直在探索的一个协会之间的支原体感染和癌症。尽管许多很有意思的研究,这种癌症的细菌协会尚未明确确立,并已尚未得到充分阐述了(宁守和, 2004年) , (蔡瑞月等人, 1995年) 。 医疗和农业的重要性,成员属支原体及相关属导致了广泛的编目许多这些微生物的文化,血清学,和小亚基rRNA基因和整个基因组测序。近期重点在小组的纪律,分子系统学,既澄清和混乱,某些方面的组织的阶级mollicutes ,而休战的各种已经达成,该地区仍是有点一个移动的目标(约翰森和pettersson , 2002年) 。 名称mollicutes是来自拉丁美洲树(软)和cutes (皮肤) ,以及所有这些细菌做缺乏细胞壁和遗传的能力,合成肽聚糖。而琐碎的名称"支原体"已普遍标注的所有成员这一阶层,这个用法是有点不确切的,并不会被用来作为,例如在这里。尽管缺乏一个细胞壁,支原体和亲属已被列为在该门firmicutes构成的低中G + C革兰氏阳性菌如梭菌,乳杆菌,链球菌的基础上16S rRNA基因分析。培养成员mollicutes目前正安排分为四个命令: acholeplasmatales , anaeroplasmatales , entomoplasmatales , mycoplasmatales 。该命令mycoplasmatales包含一个单一的家庭, mycoplasmataceae ,其中载有两个属:支原体,溶脲脲。从历史上看,说明细菌缺乏细胞壁是足够的分类,它属支原体,正因如此,它是历史最悠久,规模最大的属类与大约半数的工人阶级的物种( 107有效描述) ,每个通常只限于特定的主机和许多主机包藏一个以上的物种,有些致病性和一些commensal 。在稍后的研究,许多这些物种被认为phylogenetically分布在至少三个不同的命令。一个限制的标准,列入属支原体是生物体有脊椎动物宿主。事实上,在类型的物种,米mycoides ,连同其他重大支原体物种一样,米capricolum ,是进化关系更为密切属螺在该命令entomoplasmatales比对其他成员的支原体属。这和其他的差异可能会仍然悬而未决因为它的极端混乱,这种改变可能产生之间的医疗和农业社区。其余的物种属支原体分为两个非生物分类群, hominis和肺炎的基础上, 16S rRNA基因序列。该hominis组包含的系统发育群牛米,米肺,和M. hominis ,等等。该肺炎组包含集群的米老鼠,米fastidiosum ,溶脲脲原体,目前unculturable haemotrophic mollicutes ,非正式地称为haemoplasmas (最近转移到属haemobartonella和附红细胞体) ,以及米肺炎集群。这组包含的物种(和一般的或可能的主机)米alvi (牛) ,米amphoriforme (人力) ,米gallisepticum (禽流感) ,米生殖(人力) ,米imitans (禽流感) ,米。 pirum (不确定/人) ,米testudinis (龟) ,和M.肺炎(人力) 。最如果不是所有这些物种分享一些,否则特色,包括附件的细胞器,同系物的米肺炎cytadherence -配件蛋白质,和专门的修改细胞司器具。 详细分析了16 S rRNA基因从秩序mollicutes由马尼洛夫已引起了看法的演变,这些细菌,其中包括一估计的时间,规模,为出现的一些团体或功能(马尼洛夫, 2002年) 。这个分析表明,约6.0亿年前(吴妙丹) ,下旬,在古代的时代, mollicutes支远离低中G + C革兰氏阳性祖先的链球菌,失去细胞壁。在这个时候地球上,分子氧是目前在大气中在1 % ,和化石记录表明,多海洋动物,最近蔓延在寒武纪爆炸。一亿年后的规定,甾醇在胞质膜演变随着改变,候补遗传密码。此外,祖先的属螺和entomoplasma (主要是植物和昆虫病原体)及支原体出现在这个时候,并会本身发散到螺- entomoplasma和支原体谱系大约1.0亿年后。这种多样性的符合原产地的土地,植物500妙丹。看来,计算速度演变为支原体组增加了几倍约190妙丹后不久,出现了脊椎动物,而螺- entomoplasma的祖先不断演变,在以前的共同速度,直到约100妙丹,当被子植物和他们的相关的传粉昆虫出现。然后演变率这些细菌似乎也有显着上升。这是一个具吸引力的假说,但它的轨道的同时,出现了几个不寻常的特点,支原体和相关的有机体,它不涉及选择性的压力,驾驶他们的演变,除了或许广泛密切联系的寄生虫与特定的主机。的优势,减少了基因组,细胞壁少的结构,和候补委员的遗传代码仍然不明朗
2023-07-10 13:22:595

primere pro cs4打不开怎么办?高手们,怎么解决啊?

下载重装
2023-07-10 13:23:271

英超意甲德甲西甲英文怎么说啊?

意甲: Italian Serie A 英超:England Primere League 德甲: German Bunds Liga 西甲:Spanish Primere League
2023-07-10 13:23:362

PCR引物设计时有哪些注意事项

引物设计参数:a引物长度一般在20bp左右,上下游引物碱基长度不要相差超过4个碱基。b引物退火温度一般在58度,不同软件TM使用不同的算法,primer3,primer5,primer6,primerexpress等一般可以设置在55-58度,beacondesign可以设置在65左右。cGC含量一般没什么特殊要求,40-60最好,如果不好设计,30-80也是可以的。d产物长度在100-150,80-200也可以,不要在50bp左右,那样和引物二聚体不易区分,超过200bp可能会影响PCR扩增效率。e软件给出的引物不能有发卡结构和超过3-4个碱基的匹配,特别是3`端不能有碱基匹配,那样更容易形成二聚体。f引物设计好以后,在NCBI上做一个primer-blast,检测一下是否有非特异性扩增。
2023-07-10 13:23:451

今天去看了心理医生;医生说我得了轻微的抑郁症

多多运动!
2023-07-10 13:23:547

c++primer是什么东西

一本介绍C++的书
2023-07-10 13:24:102

如何看一个引物设计的好坏

通过引物的参数检测引物设计参数:a引物长度一般在20bp左右,上下游引物碱基长度不要相差超过4个碱基。b引物退火温度一般在58度,不同软件TM使用不同的算法,primer3,primer5,primer6,primerexpress等一般可以设置在55-58度,beacondesign可以设置在65左右。cGC含量一般没什么特殊要求,40-60最好,如果不好设计,30-80也是可以的。d产物长度在100-150,80-200也可以,不要在50bp左右,那样和引物二聚体不好区分,超过200bp可能会影响PCR扩增。e软件给出的引物不能有发卡结构和超过3-4个碱基的匹配,特别是3`端不能有碱基匹配,那样更容易形成二聚体。f引物设计好以后,在NCBI上做一个primer-blast,检测一下是否有非特异性扩增。最好还是通过实验验证,如果是定量PCR引物a溶解曲线单峰,窄而尖,否则可能有非特异性扩增;峰的位置横坐标一般在80度以上,这个温度为PCR产物的解链温度,如果在75度附近,可能是引物二聚体,miRNA染料法检测时,溶解曲线的峰的位置可能在75度附件b琼脂糖电泳为明亮的一条带,条带一般在100bp以上,如果设计引物时PCR产物在100bp一下,需要仔细辨认是否为引物二聚体;引物二聚体的条带一般在50bp左右,条带弥散,暗。c扩增曲线呈“S”形,一般情况下,S形越陡,扩增效率越高,S形越平,扩增效率低。有时会出现扩增曲线只有线性期,没有指数期的情况,这时一般扩增效率较低,建议检测一下扩增效率,用标准曲线法计算相对表达量。染料法的扩增曲线比探针法的扩增曲线要好看。d样品Ct值小于30,对于Ct大于30的情况,建议重新设计一对引物,重新调试。如果几对引物的Ct值都较大,可以适当放宽Ct至35。但是Ct值肯定不能大于35。
2023-07-10 13:24:281

C++Primer Plus和C++Primer有什么区别

《C++ Primer Plus》作者:(美国)蒂芬u2022普拉达(Stephen Prata)《C++ Primer Plus中文版》是根据2003年的ISO/ANSI C++标准编写的,通过大量短小精悍的程序详细而全面地阐述了C++的基本概念和技术,并专辟一章介绍了C++11新增的功能。《C++ Primer Plus中文版》针对C++初学者,书中从C语言基础知识开始介绍,然后在此基础上详细阐述C++新增的特性,因此不要求读者有C语言方面的背景知识。《C++ Primer 》本书是久负盛名的C++经典教程,其内容是C++大师Stanley B. Lippman丰富的实践经验和C++标准委员会原负责人Josée Lajoie对C++标准深入理解的完美结合,已经帮助全球无数程序员学会了C++。本版对前一版进行了彻底的修订,内容经过了重新组织,更加入了C++ 先驱Barbara E
2023-07-10 13:24:394

c++ primer 最新版是第几版

第四版···人民邮电出版社
2023-07-10 13:25:353

primer-blast怎么读

a 引物长度一般在20bp左右,上下游引物碱基长度不要相差超过4个碱基。b 引物退火温度一般在58度,不同TM使用不同的算法,primer3,primer 5,primer 6,primer express等一般可以设置在55-58度,beacon design可以设置在65左右。c GC含量一般没什么特殊要求,40-60最好,如果不好设计,30-80也是可以的。d 产物长度在100-150,80-200也可以,不要在50bp左右,那样和引物二聚体不易区分,超过200bp可能会影响PCR扩增效率。e 给出的引物不能有发卡结构和超过3-4个碱基的匹配,特别是3`端不能有碱基匹配,那样更容易形成二聚体。f 引物设计好以后,在NCBI上做一个primer-blast,检测一下是否有非特异性扩增。
2023-07-10 13:25:441

C++primerplus和C++primer有什么区别?

C++ primer plus如果没学过其他的编程语言推荐先看.因为解释很详细.但是没有很深的东西...C++ primer 公认的经典,但是如果基础不行只会打击你的自信心(亲身体验过...)...等对C++有了一定认识的时候一定要看完...如果英文基础好当然是读英文版的比较好...对后来看MSDN也是一种锻炼...所以我推荐你先看完C++ primer plus吧.
2023-07-10 13:25:513

关于PCR引物设计的求助

a 引物长度一般在20bp左右,上下游引物碱基长度不要相差超过4个碱基。b 引物退火温度一般在58度,不同软件TM使用不同的算法,primer3,primer 5,primer 6,primer express等一般可以设置在55-58度,beacon design可以设置在65左右。c GC含量一般没什么特殊要求,40-60最好,如果不好设计,30-80也是可以的。d 产物长度在100-150,80-200也可以,不要在50bp左右,那样和引物二聚体不易区分,超过200bp可能会影响PCR扩增效率。e 软件给出的引物不能有发卡结构和超过3-4个碱基的匹配,特别是3`端不能有碱基匹配,那样更容易形成二聚体。f 引物设计好以后,在NCBI上做一个primer-blast,检测一下是否有非特异性扩增。
2023-07-10 13:26:121

c语言初学者!要学的是c primer plus(第五版),想要个支持c99的编译器!我的电脑是w

不要玩了。重新安装系统解决问题。(不兼容的)
2023-07-10 13:26:283

隔离霜的英文是什么? 好几个问题呢,进来看。

(1)UV Base或UV Blocker。因为隔离霜都是有防晒功效的,所以都有“UV”。 现在的隔离霜多数都有颜色,大多分为紫色,绿色,粉红色。 紫色可以修饰偏黄肌肤,绿色可以修饰泛红肌肤,粉红色修饰苍白肌肤. (2)是。化妆前用隔离霜可以使妆容更贴。 (3)是。隔离霜不仅隔离阳光紫外线,还可隔离灰尘,电脑辐射等。
2023-07-10 13:26:362

急求法语作文:春节

Chaque année, à la fin de l"hiver et au début du printemps, les Chinois ont l"habitude de célébrer de manière à la fois solennelle et joyeuse la Fête du Printemps, la première fête traditonnelle de l"année. la Fête du Printemps était la fête du Nouvelle An, car selon le calendrier lunaire utilisé depuis l"antiquité par les Chinois, la fête est le premier jour du premier mois de l"année. La veille de la Fête du Printemps est un moment important où tous les membres de la famille se réunissent et prennent ensemble un repas copieux pour le réveillon; après le repas, il bavardent joyeusement ou s"amusent ensemble. Beaucoup de personnes ne dorment pas toute le nuit. Le lendemain, les parents et les amis se rendent visite pour se souhaiter une bonne année. Au cours de la Fête, des spectacles et des divertissements traditionnels sont organisés localement, parmi lesquels figurent le plus souvent la danse du lion, la danse des lanternes-dragons, la danse du bateau et la marche sur des échasses.
2023-07-10 13:26:551

环状DNA的复制

环状DNA有两种复制方式,一种是从复制起点开始双向复制,生成两个DNA双链,然后分开,符合半保留复制的机制,细菌的基因组就是采用这种复制方式。另一种是滚环状复制,以双链DNA中的一条链为模板,在另一条DNA链的3"端延伸,生成多拷贝或单拷贝的DNA单链,DNA单链或经过互补配对形成双链,然后切割、成环;或切割、成环后,再形成双链。噬菌体基因组采用滚环式复制方式。 细菌基因组通常是单一的环状复制子,从唯一的起始点启动双向复制。Figure 10.5展示了细菌环状DNA的复制方式。大肠杆菌起始位点oriC的长度为245bp。在起始点启动复制后,两个复制叉沿着相反方向前进。在这一阶段的环状染色体由于其特殊外表像希腊字母θ,有时被称为θ结构。环状结构的结果就是复制过程完成后会产生两条相连的染色体,因为一条染色体穿过了另一条染色体(这也称为链接),这就需要特定的酶系统去分开它们。 两个复制叉通常在圆环的半途相遇,但是如果他们速度不同,先到达ter位点的一个会停止前进,等待后到的复制叉。这是噬菌体中常见的DNA复制方式[1]。滚环式复制的一个特点是以一条环状单链DNA为模板,进行新的DNA环状分子合成。噬菌体的双链DNA环状分子先在一条单链的复制起点上产生一个切口(nick),然后以另一条单链为模板不断地合成新的单链。释放出的新合成的单链或是先复制成双链DNA,被酶切割成单位长度后,再形成环状双链DNA分子;或是释放出的新合成的单链DNA,先被酶切成单位长度形成单链环状DNA分子后再复制成双链环状DNA分子。见FIGURE 12.5, 12.6和12.7。滚环式复制在噬菌体中是很常见的。基因组单元可以从被取代的尾部上切割下来,产生单体,可以包装进入噬菌体颗粒内,也可用于下一步的复制循环。FIGURE 12.8更详细的描述了以滚环复制为主的噬菌体复制模式。 噬菌体 X174由一个单链环状DNA组成,这条链称为正(+)链。合成的互补链称为负(-)链。产生双链体环的行为如图12.8的上部所示,随后,这个双链DNA通过滚环进行复制。 双链体环转化成一种共价闭合形式,随后形成超螺旋。由噬菌体基因组编码的A蛋白,在双链DNA正链的特定位点上产生缺口,这一位点就被定义为复制起始点。切开复制起始点之后,A蛋白与切口产生的5"端保持连接的状态,而其3"端则在DNA聚合酶作用下延伸。 DNA的结构在该反应中具有重要作用,因为DNA只有在负超螺旋状态下才能被切割(在空间中以双螺旋手性的相反方向,围绕双螺旋的轴进行缠绕)A蛋白需要结合到围绕切口位点的单链十联体DNA片段。这说明需要超螺旋帮助才能形成单链区,为A蛋白提供结合位点。(具有能够切割双链DNA并且能与释放出的5"端相结合的酶活性蛋白称为松弛酶(relaxase))。切口产生了一个3‘-羟基端和一个5"-磷酸端(与A蛋白共价连接),这两个末端在phiX174噬菌体的复制中都发挥作用。 利用滚环机制,切口的3"-羟基端延伸为一条新链。新链围绕着环状(-)链模板延伸,直至到达起始位置,并置换起始点。在这里A蛋白又再次实现其功能。它仍然与滚环和被替代链的尾部5‘端连接,因此它又回到起始点的成长点附近。所以同一个A蛋白再次识别起始点并进行切割,继而连接到新切割产生的末端上,理论上,这可无限的、周而复始的循环进行下去。 缺口形成后,被置换的(+)单链以环状形式释放,A蛋白则参与环化事件。事实上,(+)链产物的3"端和5‘端的连接由A蛋白完成,这是A蛋白在整个反应中的一部分:在每个复制周期末尾释放,并启动下一轮循环。质粒与上述噬菌体的复制方式类似,也采用滚环复制的方式,如下图所示,但质粒本身为DNA双链。( Step I ) A supercoiled plasmid containing the double-strand origin (dso) and single-strand origin (sso) is the substrate for DNA replication and is first nicked by a RepC dimer. A secondary structure at the dso facilitates binding and/or nicking of the DNA by RepC which becomes covalently attached to the 5′-P end of the DNA after nicking. ( Step II ) PcrA helicase interacts with RepC and unwinds the duplex DNA displacing the leading strand of the plasmid and leaving a free 3′-OH end at the dso. ( Step III ) DNA polymerase III loads at the free 3′end and synthesize a new leading strand. The displaced leading strand is protected by SSB proteins. ( Step IV ) A covalently closed single-stranded DNA is produced that can be subsequently converted to dsDNA which involves the synthesis of an RNA primer at the sso by the RNA polymerase followed by DNA synthesis by DNA polymerases I and III. 1. 现代遗传学(第二版),赵寿元,乔守怡 2. LEWIN"S GENES XII,JOCELYN E. KREBS,ELLIOTT S. GOLDSTEIN,STEPHEN T. KILPATRICK 3.Pastrana, Cesar & Carrasco Pulido, Carolina & Akhtar, Parvez & Leuba, Sanford & Khan, Saleem & Moreno-Herrero, Fernando. (2016). Force and twist dependence of RepC nicking activity on torsionally-constrained DNA molecules. Nucleic Acids Research. 44. gkw689. 10.1093/nar/gkw689.
2023-07-10 13:27:031