女声 歌词里有 i think about it all the time 英文歌

at all time总是，随时E.g. No man is wise at all times. 人总会有聪明一世糊涂一时的时候。at all times始终，随时，不管什么时候E.g. The girl is ready at all times to go to parties. 那女孩随时都准备着去参加聚会。

[110408] [ALL-TiME] 規制不可～俺は実在しないので、ナニをヤッても許される～种子下载地址： 请采纳

没歌词还真不好找~

All this time - OneRepublic始终。Six on the second hand till new year"s resolutions（*）离要许下新年决心，还有六秒钟There"s just no question what this man should do 只是并没有一个疑问说这个男人到底应该做些什么（就是他已经决定好了的意思）Take all the time lost all the days that I cost 拿回所有早已逝去的时间所有我已度过的岁月Take what I took and give it back to you 拿出那些我曾从你那里拿走的，然后将它们全部还与你All this time we were waiting for each other 一直以来我们都在等待着对方All this time I was waiting for you 这么久我都在等待着你We got all these words can"t waste them on another 我们心中所有所有这些歌词情话它们怎能浪费在另一个人的身上So I"m straight in a straight line running back to you 所以我直接沿直线向你奔回I don"t know what day it is， 我不清楚今天是何日I had to check the paper 我需要拿出日历来查看I don"t know the city but it isn"t home 我不认识这个城市，我只知道它不是故乡You say I"m lucky to love something that loves me 你说我很幸运 因为我爱的人她也爱我But I don"t as I could be wherever I roam 但是我不觉得自己幸运 因为我一直在到处流浪All this time we were waiting for each other 一直以来我们都在等待着对方All this time I was waiting for you 这么久我都在等待着你We got all these words can"t waste them on another 我们心中所有所有这些歌词情话它们怎能浪费在另一个人的身上So I"m straight in a straight line running back to you 所以我直接沿直线向你奔回yeah Oh， running back to you Oh， running back to you Yeah 是啊，向你奔回。Oh， I would travel so far 哦，我旅行了那么那么远I would travel so far 旅行了那么那么远To get back where you are 只是为了能回到你所在的地方All this time we were waiting for each other 一直以来我们都在等待着对方All this time I was waiting for you 这么久我都在等待着你Got all this love 我所有所有的爱can"t waste it on another 它怎能浪费在另一个人的身上？So I"m straight in a straight line running back to you 所以我直接沿直线向你奔回Straight in a straight line running back to you Straight in a straight line running back to you 立刻沿直线向你奔回立刻沿直线向你奔回--------------------------翻译by芊魅飞-----------------------------------（*）注:首先第一句话，很多网站用的是revolution但我的耳朵告诉我这是resolution~ 并且有个短语new year"s resolutions是新年决心的意思，况且“革命”的话也不合逻辑挖~所以我就擅自把找到的英文歌词校正了~恩~~~然后呢，我是刚刚才听了这首歌 真的好深情>< 也谢谢你推荐了这么一首好歌让我淘到。

时间状语放在句尾

可以用很多时态，关键是看用于何时，如用一般现在时，现在完成进行时，过去完成进行时等等：allthetime:一直例句与用法:1.I"vekeptonthinkingaboutthatallthetime.我一直惦记着这件事.2.Inhisjobhe"srubbingshoulderswithfilmstarsallthetime.他在工作中一直与电影明星有来往.3.Thenthescalesfellfrommyeyes:hehadbeenlyingallthetime.我恍然大悟:他一直在撒谎.

复合词语timetable (时间表；时刻表);time-honored (历史悠久的);time-consuming (耗费时间的)常见搭配 Useful Phrases时空--- time & space首次 --- for the first time最后一次 --- for the last time暂时 --- for the time being有时 --- from time to time长时间 --- for a long time一次又一次 --- time and time again从前 --- once upon a time/long time ago过得很快乐 --- to have a good time钟表走得准时/不准时 --- to keep good/bad time开快车，快速前进--- make a good time一直 --- all the time依次、逐一 --- be at a time曾经、一度 --- at one time来得及 --- be in time for...准时 --- be on time提前 --- ahead of times具有超前意识 --- ahead of one"s time随时 --- at all time多次，常常 --- many a time与此同时 --- at the same time习语与俗语 Idioms & Slangstime flies --- 光阴似箭the time is ripe --- 时机成熟time on one"s hands --- 闲暇time limit --- 时限good timing --- 正是时候nine times out of ten --- 十之八九，几乎总是take one"s time --- 不着急have a rough/hard time --- 吃苦have time to kill --- 没事可做it"s high time to do --- 该做什么it"s only a matter of time --- 迟早会发生behind the times --- 过时，落后的 (out of date)long time no see---好久不见

always是经常,比较平凡,但不用每次都是all the time是每次都是所以all the time表示的程度更深两个词的位置也不一样,always在动词前,all the time在句尾　always是频度最高的词，表示动作的重复，状态的继续，中间没有间断。　　　　 意为“总是、一直”，其反义词是never。　　　　 当它与现在进行时连用时，常译作“老是”，“总是”，带有赞扬、厌烦、不满等感情色彩。　　　　 eg ▲ The sun always rises in the east and sets in the west.　　　　　　　 太阳一直东升西落。　　　　　　▲ She is always coming late. （厌烦、不满）　　　　　　　 她老是迟到。

time[英][tau026am][美][tau026am]n.时间；时刻；时代；次vt.为…安排时间；测定…的时间；调准（机械的）速度；拨准（钟、表）的快慢vi.合拍；和谐；打拍子adj.定时的；定期的；[美国英语]分期（付款）的int.[体育]时间到，（一场或一局等的）比赛时限，暂停复数: times双语例句1.I can only carry two at a time.我一次只能带两个。2.The system has the ability to run more than one program at the same time.该系统能够同时运行一个以上的程序。3.The time has come for action if these beautiful animals are to survive.若要使这些美丽的动物能生存下去，现在就要行动起来。4.I completed the test within the time allotted .我在限定的时间内完成了试验。5.one of the all-time great players历来最杰出的选手之一

　　最忙的人有最多的时间。能够让我们更好的理解时间的重要。以下是我带来的的内容，希望你喜欢! 　　语录 　　在时间的轨道上，人们想象有一条线，超脱了这条线，当前的痛苦便不复存在。 　　In the track of time, people think there"s a line, devoid of the line, the current pain ceased to exist. 　　当真正机会来临，而自己没有把握的时候，才会醒悟平时没有准备才是浪费时间。 　　When the real opportunity es along, and myself when I"m not sure, will wake up at ordinary times is a waste of time without preparation. 　　时间是无声的脚步，不会因为我们有许多事情需要处理而稍停片刻。 　　Time silent footsteps, not because we have many things need to be addressed and pause for a moment. 　　谁吝啬时间，时间对谁就慷慨。 　　Who is stingy, time to who is generous. 　　时间是一切财富中最宝贵的财富。 　　Time is the most precious wealth of all wealth. 　　是你浪费在我身上的时间，使我变得如此珍贵。 　　Is you waste time on me, make me bee so precious. 　　照片是被摄体和时间组成的。我们拍摄的不是空间，是时间。我们在框架取的其实是时间啊! 　　Pictures are of your subject and time. We shot is not the space, it is time. We take the frame is actually the time! 　　你知道思念一个人的滋味吗，就像喝了一大杯冰水，然后用很长很长的时间流成热泪。 　　Do you know miss a person"s taste, like drinking a large glass of ice water, then use a long time into tears. 　　不可逆转的是时间，不可侮辱的是人格。 　　Irreversible time, do not insult is personality. 　　我原有的勇敢被时间抽空，剩下的只是你给我无望的恐惧。 　　The rest of my original brave time by time, is you give me with no hope of fear. 　　总是报怨你没时间陪我，可还是没注意，你一直都在我身后。 　　Always plain that you don"t have enough time to acpany me, but still didn"t pay attention to, you are always behind me. 　　养成读书的习惯，等于把寂寞的时间兑换为储备的黄金。 　　Get into the habit of reading, is equal to the lonely time to exchange for the reserves of gold. 　　最忙的人有最多的时间。 　　Busiest men find the most time. 　　有时候，感情就像害羞的花朵，要经过时间的考验才会绽放。 　　Sometimes, feeling like a shy flower, should pass the test of time will not. 　　摘抄 　　如果能够对时间有更多的把握性，也许我们会对彼此更为郑重。 　　If you can have more fits the time, maybe we will be more serious about each other. 　　当你想念你爱的人，时间就会过得尤其的慢。 　　When you miss the one you love, especially time will slow. 　　时间带来的一切，时间终会带走。 　　Of all time, time will take away. 　　珍惜一切时间，用于有益之事，不搞无谓之举。 　　Cherish all the time, for good things, don"t do meaningless. 　　用时间和心看人，而不是用眼睛。 　　Use time and heart to see people, but not with the eyes. 　　时间总会过去的，让时间流走你的烦恼吧! 　　Time is always the past, let the time bring you trouble! 　　成功需要成本，时间也是一种成本，对时间的珍惜就是对成本的节约。 　　Success need to cost, time is also a kind of cost, to cherish time is to cost savings. 　　给时间一点时间，让过去的过去，让开始的开始。 　　Give time a little time, let the past in the past, let began to start. 　　我愿意手拿帽子站在街角，请过路人把他们用不完的时间投在里面。 　　I will hand hat standing on a corner, please passers-by time to burn them into the inside. 　　答案很长，我准备用一生的时间来回答，你准备要听了吗? 　　The answer is very long, I"m going to use lifetime to answer, are you ready to listen to? 　　大全 　　你和时间开玩笑，它却对你很认真。 　　You joke with time, it is very serious to you. 　　时间是人类发展的空间。 　　Time is the space of human development. 　　据我观察，大部分人都是在别人荒废的时间里崭露头角的。 　　According to my observation, most people are other people waste time on the map. 　　时间，让深的东西越来越深，让浅的东西越来越浅。 　　Time, let the deep things more and more deep, let light things more and more shallow. 　　你不喜欢我了以后，有很长一段时间我也很不喜欢自己。 　　You don"t like me, it"s a long time I don"t like yourself. 　　我就担心丧失机会。不抓呀，看到的机会就丢掉了，时间一晃就过去了。 　　I"m worried about the loss of opportunity. Don"t scratch ah, see opportunity is lost, the time went quickly in the past. 　　时间顺流而下，生活逆水行舟。 　　Time down the river, the life stream. 　　只要决定了就一直往前走，朝自己的方向走，不要回头。回头会浪费很多时间。 　　As long as decided to just go straight ahead, in their own direction, don"t look back. Will waste a lot of time later. 　　时间就像海绵里的水，只要愿意挤，总还是有的。 　　Time is like the water in sponge, as long as willing to squeeze, always some. 　　世上真不知有多少能够成功立业的人，都因为把难得的时间轻轻放过而致默默无闻。 　　I don"t know how many people can succeed in the world, all because of the rare time lightly and obscurity. 　　时间几乎会愈合所有的事情。请给时间一点时间。 　　Time heals almost everything. Give time time. 　　善于掌握自己时间的人，是真正伟大的人。 　　Good at to master their time, is really great. 　　时间是最让人惋惜的东西，也是最令人伤心的东西。 　　Time is the most let a person regret things, is also the most sad thing. 　　时间种下的伤害，却无法用时间来填埋。 　　Time of injury, but not in time to the landfill. 　　心情就像毛毛虫变蝴蝶，自己想明白了，时间也到了，才能起飞。 　　Mood is like caterpillars bee butterflies, I want to see, time is up, to take off. 　　我喜欢并习惯了对变化的东西保持着距离，这样才会知道什么是最不会被时间抛弃的准则。 　　I love and used to keeping a distance with changes, so will know what will not be abandoned by time. 　　一个快乐的人总是满足于当下，而不太浪费时间去想未来的事。 　　A happy person is always satisfied with the present, not is a waste of time to think about the future. 　　每个人都会累，没人能为你承担所有的伤悲和疲惫，所以人总有那么一段时间要学会自己长大。 　　Everyone tired, no one for you bear all the pain and tired, so there is always a period of time to learn oneself grow up. 　　人类所有的力量，只是耐心加上时间的混合。所谓强者既有意义，又有等待时机。 　　All human power, is just the mixture of patience and time. The so-called strong, both meaning and wait. 　　时间不是让人忘了痛，而是让人习惯了痛。 　　Time is not let a person forget pain, but let a person accustomed to pain. 　　所谓幸福，我想我可以理解为，在对的时间，遇到对的人。于是没有错过没有彷徨。 　　The so-called happiness, I think I can be understood as, at the right time, meet the right person. So no miss without hesitation.

keep保持的意思 固定搭配吧

undivided love是这个吗？不确定

he belongs to not a time but all times.

牛人制作的混音kanye west vs charlie bit me试听http://mp3.baidu.com/m?f=ms&tn=baidump3&ct=134217728&lf=&rn=&word=Kanye+West+vs+Charlie+Bit+Me&lm=-1 参考http://zhidao.baidu.com/question/126758114.html

With you all the time： 时时刻刻；时刻相伴；今生相伴；永远的和你在一起 时时刻刻

我可以他妈的你所有的时间双语对照例句:1.How could you not say a word all this time? 你怎么这次一句话都不说了?

青春只有一次

ADQOIDOWFHWEOFHW;

做最好的自己Be the best version of you

为什么总是你？

ALL THAT MATTERS

1.珍惜时间的励志英语句子 1、最浪费不起的是时间。 Is the most can"t afford to waste time. 2、浪费时间是一桩大罪过。 Wasting time is a great sin. 3、最忙的人有最多的时间。 Busiest men find the most time. 4、一万年太久，只争朝夕。 Is too long, seize every minute. 5、逝者如斯夫，不舍昼夜。 The deceased, thereby generate. 6、时间会平息最大的痛苦。 The greatest sorrow of time will calm. 7、光景不待人e69da5e6ba90e799bee5baa6e79fa5e9819331333363353932，须臾发成丝。 Time and tide wait for no man, a moment into thin shreds. 8、白日去如箭，达者惜今阳。 The day to get such as arrows to cherish this Yang. 9、时间是人类必须珍惜的东西。 Time is the human must cherish things. 10、把握住今天，胜过两个明天。 Seize this day, is worth two tomorrow. 11、最严重的浪费就是时间的浪费。 The most serious waste is waste of time. 12、放弃时间的人，时间也放弃他。 Abandoning time person, time also give up him. 13、辛勤的蜜蜂永没有时间的悲哀。 Diligent bees have no time to sad. 14、时间就是能力等等发展的地盘。 Time is ability and so on the development of the site. 15、利用时间是一个极其高级的规律。 Use of time is a very advanced. 16、等时间的人，就是浪费时间的人。 Such as time, is a waste of time. 17、一切经济最后都归结为时间经济。 All end all boils down to time economy. 18、过于求速是做事的最大危险之一。 Speed is one of the biggest danger of working too. 19、合理的安排时间，就等于节约时间。 Reasonable arrangement of time, is to save time. 20、静静地流淌的青春也会让人受伤吗？ Quietly flowing youth also can let a person get hurt? 21、劝君着意惜芳菲，莫待行人攀折尽。 Advise you cherish wheatgrass mainly, the mo for pedestrians plundering. 22、时间是我的财产，我的田亩是时间。 Time is my property, my field is time. 23、落日无边江不尽，此身此日更须忙。 Sunset over the endless river, the body is the day to be more busy. 24、金钱宝贵，生命更宝贵，时间最宝贵。 Money is precious, life is more valuable, the most precious time. 25、“年”教给我们许多“日”不懂的东西。 "Year" teach us many things they don"t understand "day". 2.关于时间英语短语 1.表达“突然，突发”的词 a fit of 突发一阵，阵发 break away (from) 突然离开，脱离；放弃（传统等） break off 折断；突然中断或停止 break out 爆发；突然发生 burst out 突然说出；突然（哭、笑、叫）起来 cross one"s mind 突然想起；突然从脑海中掠过，想起来 jump out at 突然出现；一下子吸引住 on short notice 在很短的时间内（突如其来，无充分的准备时间） pop up 突然出现 spring up 突然出现；迅速生长 2.表达“以前，刚才”的词 a while back 不久以前，刚才 at birth 刚出生 at one time 1.曾经，一度 2.每次，一次 emerge from 从。出来，出现；曾经一度遭到。 just now 刚才 the other day 前几天，最近 3.表达“现在，迄今”的词 as yet 迄今为止 at present 现在，目前 by far 到目前为止；最 even now 即使在现在 ever since 从那时起一直到现在 for the moment 暂时；目前 for the time being 暂时，眼下 not yet 尚未（到目前为止某事没有发生） on the spot 在现场，当场；立即 so far 迄今为止；到目前为止 to date 到目前为止，迄今 4.表达“马上，立刻”的词 at once 马上，立刻 in a hurry 匆忙；立即，很快地 in a little while 不久，立刻 in a moment 立即，立刻 in no time 马上，立即 jump at 急忙接受；立即抓住 no sooner 。 than 一。就。；马上，立即 right away 立即，马上 3.关于时间的英语短语 复合词语timetable （时间表；时刻表）；time-honored （历史悠久的）；time-consuming （耗费时间的）常见搭配 Useful Phrases时空--- time & space首次 --- for the first time最后一次 --- for the last time暂时 --- for the time being有时 --- from time to time长时间 --- for a long time一次又一次 --- time and time again从前 --- once upon a time/long time ago过得很快乐 --- to have a good time钟表走得准时/不准时 --- to keep good/bad time开快车，快速前进--- make a good time一直 --- all the time依次、逐一 --- be at a time曾经、一度 --- at one time来得及 --- be in time for。 准时 --- be on time提前 --- ahead of times具有超前意识 --- ahead of one"s time随时 --- at all time多次，常常 --- many a time与此同时 --- at the same time习语与俗语 Idioms & Slangstime flies --- 光阴似箭the time is ripe --- 时机成熟time on one"s hands --- 闲暇time limit --- 时限good timing --- 正是时候nine times out of ten --- 十之八九，几乎总是take one"s time --- 不着急have a rough/hard time --- 吃苦have time to kill --- 没事可做it"s high time to do --- 该做什么it"s only a matter of time --- 迟早会发生behind the times --- 过时，落后的 （out of date）long time no see---好久不见。 4.写15个关于时间的英语句子,（有汉语） 1、Gather ye rosebuds while ye may, Old Time is still a-flying: And this same flower that smiles to-day, To-morrow will be dying. --- Robert Herrick 摘花需趁早，岁月催人老：今夕花含笑，翌日即残凋。---罗伯特-赫里克 2、You must remember this, a kiss is still a kiss, A sigh is just a sigh; The fundamental things apply, As time goes by. --- Herman Hupfeld 你一定要记住这点，一个亲吻仍然是一个亲吻，一个叹息就是一个叹息。时光流转，这 是万物不变的基本法则。---赫尔曼 3、The inaudible and noiseless foot of Time. --- Shakespeare 时间的不可听见的无声脚步。---莎士比亚 4、No hand can make the clock strike for me the hours that are passed. --- Byron 光阴如流水，一去不复返。---拜伦 5、All my possessions for a moment of time. --- Queen Elizabeth I"s last words 我的一切都是为了那辉煌的一刻。---伊丽莎白一世的临终遗言 6、A day is a miniature of eternity. ---Emerson 一天是永恒的缩影。---爱默生 7、Write it on your heart that every day is the best of the year. ---Emerson 把这铭记在你心里：每天都是一年中最好的日子。 ---爱默生 8、Do you love life? Then do not squander time; for that"s the stuff life is made up of. ---Benjamin Franklin, American president 你热爱生命吗？那么，别浪费时间，因为生命是由时间组成的。---美国总统富兰克林. B. 9、No time like the present. 现在正是时候/只争朝夕。 10、Time gives good advice. 时间给予金玉良言。 11、Time works wonders. 时间能创造奇迹。 5.关于珍惜时间的句子有哪些 关于珍惜时间的英语名人名言 1、e79fa5e98193e4b893e5b19e31333330333533 Gather ye rosebuds while ye may, Old Time is still a-flying: And this same flower that smiles to-day, To-morrow will be dying. --- Robert Herrick 摘花需趁早，岁月催人老：今夕花含笑，翌日即残凋。 ---罗伯特-赫里克2、You must remember this, a kiss is still a kiss, A sigh is just a sigh; The fundamental things apply, As time goes by. --- Herman Hupfeld 你一定要记住这点，一个亲吻仍然是一个亲吻，一个叹息就是一个叹息。时光流转，这 是万物不变的基本法则。 ---赫尔曼3、The inaudible and noiseless foot of Time. --- Shakespeare 时间的不可听见的无声脚步。---莎士比亚4、No hand can make the clock strike for me the hours that are passed. --- Byron 光阴如流水，一去不复返。 ---拜伦5、All my possessions for a moment of time. --- Queen Elizabeth I"s last words 我的一切都是为了那辉煌的一刻。---伊丽莎白一世的临终遗言6、A day is a miniature of eternity. ---Emerson 一天是永恒的缩影。 ---爱默生7、Write it on your heart that every day is the best of the year. ---Emerson 把这铭记在你心里：每天都是一年中最好的日子。 ---爱默生8、Do you love life? Then do not squander time; for that"s the stuff life is made up of. ---Benjamin Franklin, American president 你热爱生命吗？那么，别浪费时间，因为生命是由时间组成的。 ---美国总统富兰克林. B.9、No time like the present. 现在正是时候/只争朝夕。10、Time gives good advice. 时间给予金玉良言。 11、Time works wonders. 时间能创造奇迹。12、Time discovered truth. 时间发现真理。 13、Time is the father of truth. 时间是真理之父。14、Time and tide wait for no man. 时光如逝水，岁月不待人。 15、As every thread of gold is valuable, so every moment of time. 一寸光阴一寸金。16、An hour in the morning is worth two in the evening. 一日之计在于晨。 17、Time dresses the greatest wounds. 时间能愈合最大的创伤。18、To save time is to lengthen life. 节省时间就是延长生命。 19、If you want your dreams to come true, don"t sleep. 要想梦成真，少睡多用心。20、Make hay while the sun shines. 趁着大晴天，赶紧晒饲草。 21、Never put off till tomorrow what you can do today.今日事今日毕/勿将今事待 明日。22、No hand can make the clock strike for me the hours that are passed. 光阴如流水，一去不复返。 23、Seize the day, for fleeting youth never returns.阴勿虚度，青春 不再来。24、Those that make the best use of their time have none to spare. 充分利用时间的人不会有余暇。 25、What I do today is important because I am exchanging a day of my life for it. 我今天做的事情很重要， 因为我为它付了一天的代价。26、Every flow has its ebb. 潮有涨落日，人有盛衰时。 27、Youth and white paper take any impression. 青年犹如白纸，可以打上任何印记。 6.求日常英语短句,生活中常用的英语 第1册A版 一、Greetings 问候语1. Hello! / Hi！ 你好！2. Good morning / afternoon / evening！ 早晨（下午/晚上）好！3. I"m Kathy King. 我是凯西·金。 4. Are you Peter Smith？ 你是彼得·史密斯吗？5. Yes, I am. / No, I"m not. 是，我是。/ 不，我不是。 6. How are you？ 你好吗？7. Fine, thanks. And you？ 很好，谢谢，你呢？8. I"m fine, too. 我也很好。9. How is Amy / your wife / your husband？ 爱米好吗？/你妻子好吗？/你丈夫好吗？10. She is very well, thank you. 她很好，谢谢。 11. Good night, Jane. 晚安，简。12. Good-bye, Mike. 再见，迈克。 13. See you tomorrow. 明天见。14. See you later. 待会儿见。 15. I have to go now. 我必须走了。二、Expression In Class 课堂用语16. May I come in？ 我能进来吗？17. Come in, please. 请进。 18. Sit down, please. 请坐。19. It"s time for class. 上课时间到了。 20. Open your books and turn to page 20. 打开书，翻到第20页。21. I"ll call the roll before class. 课前我要点名。 22. Here！ 到！23. Has everybody got a sheet？ 每个人都拿到材料了吗？24. Any different opinion？ 有不同意见吗？25. Are you with me？ 你们跟上我讲的了吗？26. Have I made myself clear？ 我讲明白了吗？27. Could you say it again？ 你能再说一遍吗？28. Any questions？ 有什么问题吗？29. That"s all for today. 今天就讲到这里。30. Please turn in your paper before leaving. 请在离开前将论文交上。 三、Identifying Objects 辨别物品31. What"s this？ 这是什么？32. It"s a pen. 是支笔。33. Is this your handbag？ 这是你的手提包吗？34. No, it isn"t. / Yes, it is. 不，它7a686964616fe59b9ee7ad9431333337613737不是。 /是的，它是。35. Whose pen is this？ 这是谁的笔？36. It"s Kate"s. 是凯特的。 37. Is that a car？ 那是一辆小汽车吗？1/27页38. No, it isn"t. It"s a bus. 不，那是一辆公共汽车。39. What do you call this in English？ 这个用英语怎么说？40. What is the color of your new book？ 你的新书是什么颜色的？41. How big is your house？ 你的房子有多大？42. How long is the street？ 这条街有多长？43. What"s the name of the cat？ 这猫叫什么名字？44. Where"s the company？ 那个公司在哪儿？45. Which is the right size？ 哪个尺码是对的？四、About Belongings 关于所有物46. What"s this？ 这是什么？47. It"s an air-conditioner. 这是空调。 48. Is this yours？ 这是你的吗？49. Yes, it"s mine. 是的，是我的。50. Where are my glasses？ 我的眼镜在哪儿？51. Do you know where I"ve put my glasses？ 你知道我把眼镜搁哪儿了吗？52. Over there. 在那边。 53. On the desk. 在桌上。54. Is this your pen? I found it under the desk. 这是你的笔吗？我在桌下捡的。 55. No. Mine is blue. 不。

歌曲名:Time Bomb歌手:G.B.H.专辑:Race Against Time - The Complete Clay RecordingsAll Time Low - Time-BombFrom the get-go, I knew this was hard to holdLike a crash, the whole thing spun out of controlOh, on a wire, we were dancingTwo kids, no consequencesPull the trigger without thinkingThere"s only one way down this roadIt was like a time bomb, set it in motionWe knew that we"re destined to explodeAnd if I had to pull you out of the wreckageYou know I"m never gonna let you goWe"re like a time bombGonna lose it, let"s defuse itBaby, we"re like a time bombBut I need it, wouldn"t have itAny other wayWell, there"s no way out of this, so let"s stay inHave a storm that comes that"ll soak us to an endOh, resistance is uselessJust two kids, stupid and fearlessLike a bullet shooting a lessonThere"s only one way down this roadIt was like a time bomb, set it in motionWe knew that we"re destined to explodeAnd if I had to pull you out of the wreckageYou know I"m never gonna let you goWe"re like a time bombGonna lose it, let"s defuse itBaby, we"re like a time bombBut I need it, wouldn"t have itAny other wayGot my heart in your handsLike a time bomb tickingIt goes off, we start againIf it breaks, we fix itGot your heart in my handsLike a time bomb tickingWe should know better we won"t let goIt was like a time bomb, set it in motionWe knew that we"re destined to explodeAnd if I had to pull you out of the wreckageYou know I"m never gonna let you let me goWe"re like a time bombGonna lose it, let"s defuse itBaby, we"re like a time bombBut I need it, wouldn"t have itAny other wayhttp://music.baidu.com/song/7344855

《AllTimeLow》。lowlowlowlowlow是歌曲《AllTimeLow》中的歌词。歌手：LUNA，发行日期：2022-09-07，《AllTimeLow》表示的作者的心情总是非常的低落，是一首伤感的的情歌。

She was ill that day .Otherwise she ____to the concert. 选项: a、would have gone These boxes are very heavy so you had better carry only one _____. 选项: b、 at a time Please place the medicine ____the reach of child. 选项: a、out of " at times" can be replaced by _______. 选项: c、 sometimes My alarm did not ____ this morning and I overslept. 选项: c、 go off They came all the way to Canada for promoting friendship ____for making money. 选项: d、 rather than Peter is as ______as I am. 选项: a、poor a speaker If you look at this ______,you will see where the equator is. 选项: b、 globe This is a very difficult mission because there will be many unexpected obstacles _____. 选项: d、in the way _____ a hot day !I decided to go for a swim. 选项: a、What

00:00/04:14Koreana-hand in handSee the fire in the skyWe feel the beating of our hearts togetherThis is our time to rise aboveWe know the chance is here to live foreverFor all timeHand in hand we standAll across the landWe can make this world a better place in which to liveHand in hand we canStart to undrestandBreaking down the walls that come between us for all timeA li laEverytime we give it allWe feel the flame eternally inside usLift our hands up to the skyThe morning calm helps us to live in harmonyFor all timeHand in hand we standAll across the landWe can make this world a better place in which to liveHand in hand we canStart to undrestandBreaking down the walls that come between us for all timeA li laHand in hand we standAll across the landWe can make this world a better place in which to liveHand in hand we canStart to undrestandBreaking down the walls that come between us for all timeA li laHand in handBreaking down the walls between usThe End

圣威美发logo怎么设计好看圣威美发logo这样设计,深色底如黑色或者深灰色带浅色发光的字体标志如白色吸塑灯箱之类的好看。目前比较流行深色底如黑色或者深灰色带浅色发光的字体标志如白色吸塑灯箱之类的,看上去比较酷,这方面最好找广告公司设计,一个好的字体好的标志很重要,他们比较专业。12种LOGO设计风格，总有一款适合你不同风格的LOGO设计可以体现出不同的行业定位和品牌风格,下面整理了12种LOGO设计风格,希望大家可以从中获得一些设计思路和灵感噢!极简化设计看到这多大品牌都不约而同地极简化了自己的logo,其趋势已不言自明。手绘手绘的趋势几年前就很受关注,这种风格完美契合现代“嬉皮”的潮流。适用于餐饮业,造型、艺术和工艺等行业。负空间这是一个很老的趋势了,但最近几年似乎又有回返之势并且仅限2017,因此绝对值得关注。拼接这种风格就是尽可能的发挥极简主义,只要能然观者看到所需要表达的内容即可,没有一笔多余。几何化这绝对是一个老掉牙的设计风格了,但却是经典的,永不出错。线状这种趋势十分符合当代流行的新产业。图案纹样这种通过重复和叠加组成图案的方式是一种新的流行趋势,让品牌能够容易的脱颖而出。动态logo动态logo在今年势不可挡,在几乎所有设计领域都能看到它的出现。复古复古的设计风格仍然没有退出,即便已经出现了一段时间了,但似乎还有更多发挥的空间。渐变渐变设计今年会无处不在,在logo上也一样。插图logo插图是个很好的方式让logo脱颖而出起来,尤其对于商业logo来说,今年会越来越流行。摄影logo这种图片与图形结合起来的方式在今年真的很火热,两者之间结合的很完美,还能创造出不同的意境。(转自:TOP创意广告)美容行业的LOGO如何设计？最好能以简单干净为主要设计思想,美容行业的LOGO主要突出个人品牌。美容店的logo设计最主要,要有健康,年轻,美丽方向开发设计,且不能太复杂,要简约大气明了。设计出来一眼就能看出来了是美容店的标志,能让爱美的女士容易记住标牌logo,在加上美容店里的装饰有个性点,就能让女士来店里面印象深刻,流连忘返,且会四处宣传此店,生意自然就会好了,所以一个店面的logo设计很重要的。。。一个典型美容美发行业连锁品牌的VI设计2017年,接到客户委托电话。客户需要委托我们做一个连锁美容院的LOGO和VI设计,名字叫(每刻ALLTIME)诉求有三点:表现美容美发行业。光电美容产品需体现科技感(光电物理美肤)表现出和谐美感。有点懵逼,为啥,因为这是我在设计了众多美容连锁店的行业LOGO中第一次要求加入科技感的甲方......(以往的美业品牌LOGO一般都是在表现行业的同时体现出柔美感)不管咋样,需求了解了,告知价格OK,收定金,开工!打开百度App,看更多图片_在开始设计之前,我的习惯是根据关键词先在网络检索一番,看是否有重名的LOGO,同时对关键词所检索的LOGO内容快速浏览一番,做到心中有数,这样做的好处是可以避免为下一步自己设计LOGO时在图形上避开相似性,避免“山寨”。_在经过手稿绘制后,综上,基本上有了一个比较清晰的意向,以英文字母(ALLTIME)为主,通过对字体和字形的变化,对M进行变形处理,使M像是3个有着不同发型造型的人的形象,运用今年的潘通流行色紫色+绿色+黄色细分不同的人群和顾客,同时用三色也体现出ALLTIME的年轻团队和时尚朝气的气息,也体现了行业特点,透过对ALLTIME的字体进行设计,使之在具有识别性的同时具有物理美肤的科技感。__至此,LOGO设计基本完成了,接下来是做品牌VI设计了(当然,这里呈现的是历经几次修改过后的最终版本,通常会出几轮设计方案供客户选择,留下几个深入设计,形成最终方案)VI整体颜色以紫红色为主,这里摘取其中几张图结尾..____这款LOGO设计获得了客户的赞同!●0●最后,再放几张出街应用图logo设计首先需要了解企业的需求,用户群体,产品风格。因为logo不仅仅是用在招牌,网站上,后续的宣传单产品等等都会要用到,所以第一步分析企业的需求,产品面向的客户群体,产品的风格功能。第二步:根据分析结果头脑风暴,做出logo设计的思维导图。第三步在思维导图的基础上选择元素画出草图,完善并对比(草图一般会出三个不同的logo小样)第四步在AI或者别的绘图软件上将草图呈现成完整logo。第五步回归第一步的分析结果对比三个及以上的最终稿选择最适合的,这样一个logo就完成了,当然给甲方报告时用好对比法。什么行业的logo,首先是让你的用户群体读懂,记住,喜欢,这是初心,而每个行业有自己的独特的行业特性。体现其特性,结合品牌名字寓意,展现企业特殊元素。logo设计容易看懂易记忆,易传播,化妆品logo也是同样。

百度提供的校时服务器<%Function TimeToSecond(Str)"时间转为秒函数Str = DateDiff("s",Str,"1970-01-01 08:00:00")TimeToSecond = StrEnd FunctionFunction SecondToTime(Str)"秒转为时间函数Str = DateAdd("s",Str,"1970-01-01 08:00:00")SecondToTime = StrEnd Function""得到北京时间 function getBeijingTime() SinaHtml=GetURL("https://gss0.baidu.com/8aQDcnSm2Q5IlBGlnYG/app?module=beijingtime") SinaHtml=Bytes2BStr(SinaHtml) SinaHtml=cutStr(SinaHtml) SinaHtml=SecondToTime(SinaHtml) alltime=split(SinaHtml," ") getBeijingTime=alltime(1) End function "得到北京日期 function getBeijingDate() SinaHtml=GetURL("https://gss0.baidu.com/8aQDcnSm2Q5IlBGlnYG/app?module=beijingtime") SinaHtml=Bytes2BStr(SinaHtml) SinaHtml=cutStr(SinaHtml) SinaHtml=SecondToTime(SinaHtml) getBeijingDate=SinaHtml End function ""截取取回字符串 获得时间的长字符串格式 function cutStr(str) times="" times=right(str,15)times=left(times,10) cutStr=times end function " 二进制转字符串 function bytes2bstr(vin) strreturn = "" for i = 1 to lenb(vin) thischarcode = ascb(midb(vin,i,1)) if thischarcode < &h80 then strreturn = strreturn & chr(thischarcode) else nextcharcode = ascb(midb(vin,i+1,1)) strreturn = strreturn & chr(clng(thischarcode) * &h100 + cint(nextcharcode)) i = i + 1 end if next bytes2bstr = strreturn end function " 获取远程HTML Function GetURL(url) Set Retrieval = CreateObject("Microsoft.XMLHTTP") With Retrieval .Open "GET", url, False .Send set GetURL=server.CreateObject("adodb.stream")GetURL = .responseBody if len(.responsebody)<10 then response.write "获取远程文件 <a href="&url&" target=_blank>"&url&"</a> 失败。" response.end end if End With Set Retrieval = Nothing End Function response.Write(getBeijingTime()&"<br/>") response.Write(getBeijingDate())%>

2.(1) sometime意为“某个时候”，可用于将来或过去来。如：Come to see us sometime. 什么时候来看看我们。I"ll speak to him about it sometime. 我什么时候将和他谈谈这事。We"ll meet again sometime next week. 我们下星期什么时候再碰头。We will hold a meeting sometime next week. 下个星期的某个时候我们将要开个会。下个星期的某个时候我们将要开个会。I saw him sometime in May. 我是五月什么时候见到他的。I bought it sometime last spring. 我是去年春天什么时候买的。Our house was built sometime around 195o. 我们的房子是195o年前后什么时候盖的。年前后什么时候盖的。【注】这样用的 sometime 也可写成 some time (即分开写)。如：He died some time last year. 他是去年什么时候死的。 (2) some time 有两个用法：用作副词词组，意为“任何时候”或“某个时候”(= sometime)；用作名词词组，意为“一段时间”(不能写成 sometime)。如：It takes quite some time. 它要花相当多时间。Please phone me some time next week. Please phone me some time next week. 下个星期什么时候给我打个电话吧。We lived in the country for some time. 我们在农村住过一段时间。I"m afraid it"ll take some time to repair your car. 恐怕修你的车要花相当多时间。 (3) sometimes 意为“有时”。如：He sometimes writes to me. 他有时给我写信。We sometimes act on instinct. 我们有时凭本能行事。Sometimes he went there by bus. 有时他坐公共汽车去那儿。有时他坐公共汽车去那儿。He is sometimes not responsible for what he does. 他有时对所做的事不负责任。Sometimes we"re busy and sometimes we"re not. 我们有时很忙，有时不忙。Living conditions in the city are sometimes unbearable. 城市的生活条件有时很难忍受。Everyone is a fool sometimes, and none at all time. 每个人总有时会发傻，可没有人老是发傻。She likes sometimes the one and sometimes the other. 她有时喜欢这一个，有时又喜欢那一个。3.always 总是 -- usually 通常 -- often 经常 -- sometimes 有时 - never从不用法：放在be动词和助动词后面；行为动词前。

Due West - I Get That All The Time歌词He stopped me on the street, he was wearing a backwards baseball hat. I"d never seen the devil smile but I bet it looks a lot like that. From his coat of worn out rags, he flashed me a plastic bag and said, Hey, this will get you high tonight, and I said, No thanks, I get that all the time. When I walk into my kitchen, kids are screaming, dinner"s burning, and I"m reminded we"ve got PTA tonight. When I"m kneeling down and feeling all those little arms around me and my wife has got the bedroom in her eyes, Yeah, Buddy, when you get that kind of love, it"s the world best kind of drug, and I get that all the time. She wore a cotton dress so thin the sunlight came right through. I"ve been a man for long enough to know that come on look she used. She sat down next to me, brushed her hand across my knee Find More lyrics at www.sweetslyrics.com and said, I"ll give you the best night of your life, and I said, No thanks, you see, I get that all the time. When I walk into my kitchen, kids are screaming, dinner"s burning, and I"m reminded we"ve got PTA tonight. When I"m kneeling down and feeling all those little arms around me and my wife has got the bedroom in her eyes. Yeah, Buddy, when you get that kind of love, it"s the world"s best kind of drug, and, man, I get that all the time. When I"m kneeling down and feeling all those little arms around me and my wife has got the bedroom in her eyes. Yeah, Buddy, when you get that kind of love, it"s the only kind of drug, that gives peace of mind in this crazy life of mine. I get that all the time. Yeah, I get that all the time.

【 #励志名言# 导语】在学习、工作或生活中，大家都对那些经典的名言很是熟悉吧，名言是对生活、对世界的综合浓缩，简短的一句话，蕴含着深刻的道理。名言的类型有很多，你都知道吗？下面是 考 网为大家收集的值得珍藏的英语励志名言，欢迎大家借鉴与参考，希望对大家有所帮助。 1.值得珍藏的英语励志名言 　　1、To be both a speaker of words and a doer of deeds. 　　既当演说家，又做实干家。 　　2、Variety is the spice of life. 　　变化是生活的调味品。 　　3、Bad times make a good man. 　　艰难困苦出能人。 　　4、There is no royal road to learning. 　　求知无坦途。 　　5、Doubt is the key to knowledge. 　　怀疑是知识的钥匙。 　　6、The greatest test of courage on earth is to bear defeat without losing heart. 　　世界上对勇气的考验是忍受失败而不丧失信心。 　　7、A man"s best friends are his ten fingers. 　　人的朋友是自己的十个手指。 　　8、Only they who fulfill their duties in everyday matters will fulfill them on great occasions. 　　只有在日常生活中尽责的人才会在重大时刻尽责。 　　9、The shortest way to do many things is to only one thing at a time. 　　做许多事情的捷径就是一次只做一件事。 　　10、Sow nothing, reap nothing. 　　春不播，秋不收。 2.值得珍藏的英语励志名言 　　1、Life is real, life is earnest. 　　人生真实，人生诚挚。 　　2、Life would be too smooth if it had no rubs in it. 　　生活若无波折险阻，就会过于平淡无奇。 　　3、Life is the art of drawing sufficient conclusions form insufficient premises. 　　生活是一种艺术，要在不充足的前提下得出充足的结论。 　　4、Life is fine and enjoyable, yet you must learn to enjoy your fine life. 　　人生是美好的，但要学会如何享用美好的生活。 　　5、Life is but a hard and tortuous journey. 　　人生即是一段艰难曲折的旅程，人生无坦途。 　　6、Life is a horse, and either you ride it or it rides you. 　　人生像一匹马，你不驾驭它,它便驾驭你。 　　7、Life is a great big canvas, and you should throw all the paint on it you can. 　　人生是一幅大画布，你应该努力绘出绚丽多彩的画面。 　　8、Life is like music. It must be composed by ear, feeling and instinct, not by rule. 　　人生如一首乐曲，要用乐感，感情和直觉去谱写，不能只按乐律行事。 　　9、Life is painting a picture, not doing a sum. 　　生活是绘画，不是做算术。 　　10、The wealth of the mind is the only wealth. 　　精神的财富是的财富。 3.值得珍藏的英语励志名言 　　1、You can"t judge a tree by its bark. 　　人不可貌相。 　　2、Sharp tools make good work. 　　工欲善其事，必先利其器。 　　3、Wasting time is robbing oneself. 　　浪费时间就是掠夺自己。 　　4、Nurture passes nature. 　　教养胜过天性。 　　5、There is no garden without its weeds. 　　没有不长杂草的花园。 　　6、A man is only as good as what he loves. 　　一个人要用他所爱的东西有多好来衡量。 　　7、Wealth is the test of a man"s character. 　　财富是对一个人品格的试金石。 　　8、The best hearts are always the bravest. 　　心灵尚的人，也总是最勇敢的人。 　　9、One never lose anything by politeness. 　　讲礼貌不吃亏。 　　10、There"s only one corner of the universe you can be sure of improving, and that"s your own self. 4.值得珍藏的英语励志名言 　　这个宇宙中只有一个角落你肯定可以改进，那就是你自己。 　　1、The world is like a mirror: Frown at itand it frowns at you; smile, and it smiles too. 　　世界犹如一面镜子：朝它皱眉它就朝你皱眉，朝它微笑它也吵你微笑。 　　2、Death comes to all, but great achievements raise a monument which shall endure until the sun grows old. 　　死亡无人能免，但非凡的成就会树起一座纪念碑，它将一直立到太阳冷却之时。 　　3、The reason why a great man is great is that he resolves to be a great man. 　　伟人之所以伟大，是因为他立志要成为伟大的人。 　　4、Suffering is the most powerful teacher of life. 　　苦难是人生最伟大的老师。 　　5、A bosom friend afar brings a distant land near. 　　海内存知己，天涯若比邻。 　　6、A common danger causes common action. 　　同舟共济。 　　7、A contented mind is a continual / perpetual feast. 　　知足常乐。 　　8、A fall into the pit, a gain in your wit. 　　吃一堑，长一智。 　　9、A guest should suit the convenience of the host. 　　客随主便。 　　10、A letter from home is a priceless treasure. 　　家书抵万金。 5.值得珍藏的英语励志名言 　　1、All rivers run into the sea. 　　殊途同归。 　　2、All time is no time when it is past. 　　机不可失，时不再来。 　　3、An apple a day keeps the doctor away. 　　一日一个苹果，身体健康不求医。 　　4、As heroes think, so thought Bruce. 　　英雄所见略同。 　　5、A young idler, an old beggar. 　　少壮不努力，老大徒伤悲。 　　6、Behind the mountains there are people to be found. 　　天外有天，山外有山。 　　7、Bad luck often brings good luck. 　　塞翁失马，安知非福。 　　8、Business is business. 　　公事公办。 　 9、Clumsy birds have to start flying early. 　　笨鸟先飞。 　　10、Do one thing at a time, and do well. 　　一次只做一件事，做到!搞自读书名言网 6.值得珍藏的英语励志名言 　　1、Custom makes all things easy. 　　习惯成自然。 　　2、Desire has no rest. 　　人的欲 望无止境。 　　3、Difficult the first time, easy the second. 　　一回生，二回熟。 　　4、Do not change horses in mid-stream. 　　别在河流中间换马。 　　5、Do not have too many irons in the fire. 　　贪多嚼不烂。 　　6、Do not teach fish to swim. 　　不要班门弄斧。 　　7、East or west, home is the best. 　　东奔西跑，还是家里好。 　　8、Experience is the best teacher. 　　实践出真知。 　　9、Faith can move mountains. 　　信念能移山。(精诚所至，金石为开。) 7.值得珍藏的英语励志名言 　　1、Good wine needs no bush. 　　酒香不怕巷子深。 　　2、Haste makes waste. 　　欲速则不达。 　　3、He that promises too much means nothing. 　　轻诺者寡信。 　　4、He who has an art has everywhere a part. 　　一招鲜，吃遍天。 　　5、He would climb the ladder must begin at the bottom. 　　千里之行始于足下。 　　6、Home is where the heart is. 　　心在哪里，哪里就是家。 　　7、If you are not inside a house, you don not know about its leaking. 　　不在屋里，不知漏雨。(亲身经历才有体会。) 　　8、It is never too late to mend. 　　亡羊补牢，犹未为晚。 　　9、It six of one and half a dozen of the other. 　　彼此彼此。 　　10、Just has long arms. 　　天网恢恢，疏而不漏。 8.值得珍藏的英语励志名言 　　1、Keep something for a rainy day. 　　未雨绸缪。 　　2、Life is a span. 　　人生如朝露。 　　3、Man proposes, God disposes. 　　谋事在人，成事在天。 　　4、Meet plot with plot. 　　将计就计。 　　5、Merry meet, merry part. 　　好聚好散。 　　6、Mind acts upon mind. 　　心有灵犀一点通。 　　7、Never hit a man when he is down. 　　不要落井下石。 　　8、Never judge by appearances. 　　切莫以貌取人。 　　9、No fire without smoke. 　　无风不起浪。 　　10、Nurture passes nature. 　　教养胜过天性。 9.值得珍藏的英语励志名言 　　1、One is never too old to learn. 　　活到老，学到老。 　　2、One swallow does not make a summer. 　　一燕不成夏。(一花独放不是春。) 　　3、One who has seen the ocean thinks nothing of mere rivers. 　　曾经沧海难为水。 　　4、Out of sight, out of mind. 　　眼不见，心不烦。 　　5、Practice makes perfect. 　　熟能生巧。 　　6、Poverty is stranger to industry. 　　勤劳之人不受穷。 　　7、Rome was not built in a day. 　　罗马不是一日建成的。(伟业非一日之功。) 　　8、Sense comes with age. 　　老马识途。 　　9、So many men, so many minds. 　　人心各不同。 　　10、Some thing is learned every time a book is opened. 　　开卷有益。 10.值得珍藏的英语励志名言 　　1、Strike while the iron is hot. 　　趁热打铁。 　　2、The car will find its way round the hill when it gets there. 　　车到山前必有路。 　　3、The heart is seen in wine. 　　酒后吐真言。 　　4、The worse luck now, the better another time. 　　风水轮流转。 　　5、Time tries all things. 时间检验一切。 　　6、Use legs and have legs. 　　经常用腿，健步如飞。 　　7、Virtue never grows old. 　　美德常青。 　　8、Walls have ears. 　　隔墙有耳。 　　9、What is done cannot be undone. 　　覆水难收。 　　10、Wine in, truth out. 　　酒后吐真言。

歌名：All This Time所属专辑：Waking Up时长：4:02歌手：OneRepublic歌词：Six on the second hand距离新年钟声敲响，till new year"s revolutions还剩下六秒钟。There"s just no question一切已经敲定，what this man should do我将何去何从？Take all the time lost花光所有时间，all the days that I cost度尽每时每刻，Take what I took and give it back to you带上你给我的 向你急速奔回。All this time we were waiting for each other一直以来我们都在等待着彼此。All this time I was waiting for you一直以来我都在等待着你。We got all these words所有的甜言蜜语，can"t waste them on another不能被人所知。So I"m straight in a straight line所以我沿着直线，running back to you向你飞快奔回。I don"t know what day it is,我不知道今天是什么日子I had to check the paper我必须拿出报纸来查看I don"t know the city but it isn"t home不了解这座城市 但我知道它 不是家。You say I"m lucky你说我很幸运to love something that loves me爱着一个也爱我的人But I don"t as I could be wherever I roam但我不是每时每刻 都能从容自若All this time we were waiting for each other一直以来我们都在等待着彼此。All this time I was waiting for you一直以来我都在等待着你。Got all these words所有的甜言蜜语，can"t waste them on another不能被人所知。So I"m straight in a straight line所以我沿着直线，running back to you, yeah向你飞快奔回。Oh, running back to you向你飞快奔回。Oh, running back to you向你飞快奔回。YeahYeahOh, I would travel so far从未想到我将要远行I would travel so far但我现在确要远行To get back where you are有你的地方便是天堂All this time we were waiting for each other一直以来我们都在等待着彼此。All this time I was waiting for you一直以来我都在等待着你。Got all this love全部的浓浓爱意can"t waste it on another不能被人所动。So I"m straight in a straight line所以我沿着直线，running back to you向你飞快奔回。Straight in a straight line running back to you所以我沿着直线 向你飞快奔回。Straight in a straight line running back to you沿着直线 向你飞快奔回

歌曲名:WithYouAllTheTime歌手:GarethGates专辑:WhatMyHeartWantsToSayWithyouallthetimegarethgatesIlivebeneaththeheartIwatchyoufromthedarkI"meverybreathI"meverydreamI"veknownyouforeverI"vefollowedyoueverywhereI"meveryscarI"mwhoyouarewhenyouthinkyou"realonewhenyoucrycossomeone"sunfairyoucanrestassuredI"malwaysthereevenwhenyoufeellikeyoudon"tbelongevenwhenyoufallanditallgoeswrongyouknowthatI"mwithyouthatI"mwithyouallthetimesayalittleprayerfortherestlessheartweshallnevereverdriftapartknowthatI"mwithyouknowthatI"mwithyouwithyouallthetimeI"mwalkingroundtheroomI"mlaughingwhenyousmileandwhenyoucryIcrytooImadeyouapromisethatIshallforeverbeyou"reonyourownbutnotalonewhenyou"redownandyou"rerifeandtheworldtellsyouno-onecaresyoucanrestassuredimalwaysthereevenwhenyoufeellikeyoudontbelongevenwhenyoufallanditallgoeswrongyouknowthatI"mwithyouthatI"mwithyouallthetimesayalittleprayerfortherestlessheartweshallnevereverdriftapartknowthatI"mwithyouI"mwithyouallthetimesavealittleloveformeyou"llseesavealittleloveformeyou"llseesavealittleloveformeyou"llseeandyou"llseeevenwhenyoufeellikeyoudontbelongevenwhenyoufallanditallgoeswrongyouknowthatI"mwithyouthatI"mwithyouallthetimesayalittleprayerfortherestlessheartweshallnevereverdriftapartknowthatI"mwithyouI"mwithyouallthetimeknowthatI"mwithyouI"mwithyouallthetimesayalittleprayerfortherestlessheartweshallnevereverdriftapartknowthatI"mwithyouknowthatI"mwithyouI"mwithyouallthetimehttp://music.baidu.com/song/2169975

哈

Funny day

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这题的正确答案：选C.broad 宽阔的 这个房间是三米长,两米宽. broad 是形容词作表语,和前面的形容词long对应,其它的词都不对 width是名词,board 是名词,板的意思,abroad 是国外的,与题意不符, 所以只有C是正确的.

组合介绍： Shinhwa是SM Entertainment唱片公司精心组建的六人男子组合。他们六人是通过S.M公司的选秀大赛相识的。其中四位成员曾为同公司的女子组合SES配过说唱。 96年神话的第一名成员申赫森在美国求学时，被挑选为这支组合的主唱。队伍在97年11月正式成立。神话与重视歌唱强于跳舞的H.O.T不同，他们的说唱及舞蹈在目前的韩国歌坛独树一帜，吸引众多年轻人的目光。其中Eric和李珉雨(Lee Minwoo)在入选神话前分别夺得过美国及韩国舞蹈大赛的冠军。值得一提的是来自美国的Andy是H.O.T的原始成员之一，95年他随H.O.T在韩国训练了两个月，但因其父母的强烈反对而回美国继续求学，在两年后当他的父母认为他可以照顾自己后来到了神话。 也许是受到美国黑人音乐的影响，他们的乐曲以HIP-H0P为主。98年年初，神话第一次在众多期待的目光中亮相，六个高大帅气的男孩子得到了歌迷的首肯。他们出了两支单曲后发行了第一张片，但最成功的应数《Chunil Yuhon》，此曲由金牌制作人刘永进作词作曲，风格轻松明快，值得一听！在歌迷等待数月后，神话推出了第二张专辑《Millenium of Innocent Love》，其中主打歌《T.O.P》是将柴可夫斯基遗留下来的的不朽之作《天鹅湖》接轨到Hit Hot里面。《T.O.P》和《YO!》使他们由普通的跳舞组合迈入韩国顶尖乐坛组合之列。 神话是韩国SM Entertainment唱片公司经过精心挑选而组建的六人男子团体. 96年神话的第一名成员申彗星在美国求学时,被挑选为神话组合的主唱.队伍在97年11月正式成立. 神话的说唱及舞蹈在韩国乃至全亚洲独树一帜,其中Eric和Minwoo在入选神话前分别夺得过美国和韩国舞蹈大赛冠军. 神话的音乐以HIPHOP为主,98年年初,神话第一次闪亮登场.六个可爱帅气的男孩得到了观众的首肯,在他们推出了两张单曲后便发行了属于他们的第一张唱片.其后神话陆续推出自己的大碟,并得到不俗的成绩,<>和<>使神话完全成功,逐步越伸韩国顶尖组合! 各成员简介. 主唱:申彗星(Shin Hye Sung) 本名:郑弼教 绰号:音速小子 出生:1979/11/27/ 星座:射手座 担任的工作:主唱 身高/体重:179/61 血型:A型 视力:右-1.5/左1.5 家庭成员:父母，一弟 宗教信仰:基督教 学历:天安大学主修英文 嗜好:听音乐，唱歌 专长:跆拳道（黑带）唱歌 个性:第一次和他接触会觉得他是个沉默寡言的人 但相处久了 他会主动跟你聊天 主唱:金烔完 本名:金烔完(Kim Dongwan) 出生:1979/11/21 星座:天蝎座 担任的工作:Vocal 家族名:燕安 金(Yun-ahn Kim) 绰号:Saoh-jungneem 家庭成员:父母和一只3岁的狗Mellungee 身高/体重:175/60 血型:O型 视力:右-2.0/左-1.5 宗教信仰:基督教 学校:大田 Shilub 专门大学:主修电视音乐一年级 嗜好:冲浪游戏 composing songs 专长:钢琴和直排溜冰 主唱:MINWOO 本名:李珉雨(Lee Minwoo) 出生:1979/7/28/上午9点 星座:狮子座 担任的工作:Vocal,higher和middle rap 家族名:全州 李(Junju Lee) 绰号:Cool Guy 家庭成员:父母 哥哥 姊姊 身高/体重:174/58 血型:A型 视力:右-0.3/左-0.2(正在矫正) 宗教信仰:基督教 学校:大田Shilub 专门大学:电视音乐一年级 嗜好:画画和听音乐 专长:舞蹈(breaking,hiphop dance)beat box,唱歌,表演 RAP:Eric(虫虫的最爱) 本名:文晸赫(Moon Junghyuk) 英文:Eric Moon 出生:1979/2/16 星座:水瓶座 担任的工作:团长 英文Rap Middle和低音Rap 家族名:南平 文(Nampyung Moon) 绰号:GON Imkkukjung 家庭成员:父母和两位姊姊 身高/体重:180/65 血型:B型 视力:右-1.0/左-0.75 宗教信仰:基督教 学校:东国大学 主修戏剧科一年级 嗜好:听音乐 和 making rap 专长:Clarinet & 萨克斯风 & rap making & beat box & break dancing 还有freestyle rap RAP:JUNJIN 本名:朴忠裁(Park Choongjae) 艺名:Junjin 出生:1980/8/19 星座:狮子座 担任的工作:Higher and middle pitched rap,vocal 家族名:密阳 朴(Milyang Park) 绰号:Meduse 家庭成员:父母,一个弟弟一个妹妹 身高/体重:181/62 血型:B型 视力:右-0.1/左-0.5 宗教信仰:基督教 学校:玉音(Okeum)高中 嗜好:听音乐 专长:Electric boogie dance,跳爵士舞 RAP:Andy 本名:李先皓(Lee Sunho) 英文:Andy Lee 出生:1981/1/21 星座:牡羊座 担任的工作:Middle和bass rap 英文rap 家族名:Andy自己也不太确定 外号:Bogus 家庭成员:父母和一个姊姊 身高/体重:177/58 血型:O型 视力:右-0.2/左-0.4 宗教信仰:基督教 学校:韩国外侨学校(KFS)高中二年级 嗜好:打篮球和讲电话 专长:篮球和跳舞参考资料：http://photo-media.hanmail.net/200607/27/newsen/20060727161811.131.0.jpg

Let us use your ladder truck . - get up now 让我使用你的云梯车吧起来了！ When a new york fire department ladder truck .纽约消防队的一辆云梯车 We " ve got no business with you . - we need a ladder truck 我们和你没有生意来往我们需要云梯车！ We " ve got a ladder truck ing . have them move their cars 我们有辆云梯车要进来叫他们把车子移一下 We " re waiting for the ladder truck 我们正在等云梯车 Three days later fireman bob picked up billy , dressed him in his fire uniform and escorted him from his hospital bed to the ladder truck 三天后，消防员鲍勃来接比利，为他穿上消防制服，从医院病床一直陪同来到装著长梯的消防车上。 About five minutes later a ladder truck arrived at the hospital , extended its ladder up to billy " s third floor open window and 5 firefighters cpmbed up the ladder into billy " s room 约莫五分钟后，装著长梯的消防车到了医院，将梯子伸到三楼比利敞开的窗户上，五名消防员爬上梯子进入比利的房间。 It"s difficult to find ladder truck in a sentence. 用 ladder truck 造句挺难的

暖的近义词是温，热

克蘇鲁神话其实并不是由一个人所创作的，而是由全球众多传说（神之类的东西）而交织而成，就是说，这个其实是一个腐男的二次创作。蘇鲁克神话虽以蘇鲁克来命名，但是其实最主要的神并不是他，而是两大触手星人：阿撒托斯(Azathoth)跟我们认识的呆毛触手星人奈亚拉托提普（Nyarlathotep）。克蘇鲁的头部像章鱼，脸部长有像乌贼的无数触手，手脚拥有巨大的钩爪，如一座山般巨大的橡胶状身体覆盖了溼黏的鳞片，背部有像蝙蝠的皮质膜翼.

Ph.D=DoctorofPhilosophyDegree博士学位（是一个学位）Dr.博士（获得博士学位的人）（是一种称呼）

是的

编辑本段编码输入纵横码：604　五笔86：JEFC五笔98：JEGC仓颉：ABME四角号码：62047　UniCode：CJK 统一汉字 U+6696总笔画：13编辑本段详细字义形容词字形及读音：暖nuǎn ㄋㄨㄢˇ，同“煖”（xuan）、“餪”、“煗”（nuǎn） 字义：(形声。从日,爰( yuán)声。“煗”,从火,耎( ruǎn)声。本义:温度不冷也不热) 同本义 [warm][1]示例：（1）诗句：字形海多大风,冬煗。——《国语·鲁语上》孔席不煗。——《汉书·系传上》七十非帛不煖。——《礼记·王制》清暖寒热,不得不救。——《韩非子·有度》爆竹声中一岁除,春风送暖入屠苏。——王安石《元日》早莺争暖树。——唐· 白居易《钱塘湖春行》狐裘不暖。——唐 · 岑参《白雪歌送武判官归京》歌台暖响。——唐· 杜牧《阿房宫赋》春江水暖鸭先知。——宋· 苏轼《惠崇春江晚景》（2）词组：暖谷(冬温的山谷);暖阳阳(形容温暖宜人);暖景(春暖时的景色);暖丝(形容温暖的感觉);暖煦(温暖);暖意(温暖的意味;温暖的情味);暖炉(冬日御寒取暖的火炉);暖霁(雨止天气和暖)动词字形及读音： 暖nuǎn ㄋㄨㄢˇ字义：使温暖，使温和 [warm]示例：(1)诗句：到来日牵羊担酒,与叔父暖痛去。——李直夫《虎头牌》(2)词组：暖心话(使人心里感到温暖的话);暖耳(保暖耳朵的器物);暖酒(温酒);把手暖一暖;兄弟情谊暖胸怀编辑本段常用词组◎ 暖调nuǎndiào[warm colour tone;warm tone] 给人以温暖感觉的色调◎ 暖房nuǎnfáng[greenhouse] 温室◎ 暖房nuǎnfáng[call on sb.who has moved into a new home to congratulate him] 旧俗在结婚的前一天亲友到新房贺喜;备礼祝贺乔迁新居◎ 暖风nuǎnfēng[warm braw;genial breeze] 新几内亚北部海岸舒霍顿(Schouten)群岛东季风期间持续8天的一种干热焚风◎ 暖阁nuǎngé[warm room;heated room for entertainments]为防寒取暖而从大房间中隔出的小间◎ 暖烘烘nuǎnhōnghōng[nice and warm] 形容温暖宜人炉火正旺,屋子里暖烘烘的◎ 暖壶nuǎnhú(1) [thermos bottle]∶暖水瓶(2) [teapot with a cosy]∶用棉套或其他方法保暖的水壶◎ 暖和nuǎnhuo[warm up] 温暖;和暖◎ 暖流nuǎnliú[warm current] 水温高于周围海水的海流,通常自低纬流向高纬,水温沿途逐渐降低,对沿途气候有增温、增湿作用◎ 暖瓶nuǎnpíng[thermos flask] 暖水瓶◎ 暖气nuǎnqì[central heating] 锅炉烧出的热水或蒸汽通过管道进入建筑物内的散热器(俗称暖气片)中,散热后增高室温。管道中的热水或蒸汽就叫暖气。一般上述设备也称暖气◎ 暖融融nuǎnróngróng[nice and warm] 暖洋洋◎ 暖色nuǎnsè[warm colour] 让人看了有温暖感的颜色,如黄、红、橙◎ 暖水瓶nuǎnshuǐpíng[thermos bottle] 一种保温瓶,瓶口小,用来保存热水。又称“热水瓶”,一些地区也叫“暖壶”或“暖瓶”◎ 暖袖nuǎnxiù[warm sleeve] 为了御寒缝在棉袄袖口里面增加袖长的一截棉袖子◎ 暖洋洋nuǎnyángyáng[warm] 温暖、舒适太阳照在身上,暖洋洋的编辑本段文献记载《说文解字》煖,温也。从火而声。——《说文解字》。字亦作煗、作暖。《康熙字典》⑴《辰集上》《日字部》⑵《广韵》同u3b09。《礼·月令》行春令则暖风来至。《楚辞·天问》何所冬暖。　又《集韵》许元切，音暄。柔貌。《庄子·徐无鬼》有暖姝者。《音义》吁爰反。柔貌。又《集韵》火远切，音咺。义同。[2]

不行

影响目的基因在大肠杆菌中表达的因素？ 浏览次数：904次悬赏分：0 | 提问时间：2009-4-28 17:30 | 提问者：lys2126 影响目的基因在大肠杆菌中表达的因素？推荐答案 ⑴外源基因的拷贝数⑵ 外源基因的表达效率 ①启动子的强弱 ②核糖体接合位点的有效性 ③SD序列和起始密码ATG的间距 ④密码子组成⑶表达产物的稳定性 ⑷细胞代谢负荷 ⑸工程菌的培养条件设计构建一个载体，将目的基因在植物根系表达并向根细胞外分泌。请详细写出个步骤 浏览次数：842次悬赏分：20 | 解决时间：2009-2-14 09:13 | 提问者：370629225 考研的 问题 最佳答案 先给你贴个东西你先看一下 希望对你有帮助 将特定的外源基因构建在植物表达载体中并转入受体植物，并不是植物遗传转化的最终目的。理想的转基因植物往往需要外源基因在特定部位和特定时间内高水平表达，产生人们期望的表型性状。然而，近二十年的发展历史却表明，外源基因在受体植物内往往会出现表达效率低、表达产物不稳定甚至基因失活或沉默等不良现象，导致转基因植物无法投入实际应用。另外，转基因植物的安全性问题已在许多国家引起人们的关注，例如，转基因有可能随花粉扩散，抗生素筛选标记基因有可能使临床上的某些抗生素失去作用等等。以上问题的出现使得植物基因工程这一高新技术正处于一种前所未有的困扰时期。针对这些问题，近几年人们对植物转基因技术进行了多方面的探索和改进，植物表达载体的改进和优化就是其中最重要的一项内容，本文就已经取得的进展进行综述。 1 启动子的选用和改造 外源基因表达量不足往往是得不到理想的转基因植物的重要原因。由于启动子在决定基因表达方面起关键作用，因此，选择合适的植物启动子和改进其活性是增强外源基因表达首先要考虑的问题。 目前在植物表达载体中广泛应用的启动子是组成型启动子，例如，绝大多数双子叶转基因植物均使用CaMV35S启动子，单子叶转基因植物主要使用来自玉米的Ubiquitin启动子和来自水稻的Actinl启动子。在这些组成型表达启动子的控制下，外源基因在转基因植物的所有部位和所有的发育阶段都会表达。然而，外源基因在受体植物内持续、高效的表达不但造成浪费，往往还会引起植物的形态发生改变，影响植物的生长发育。为了使外源基因在植物体内有效发挥作用，同时又可减少对植物的不利影响，目前人们对特异表达启动子的研究和应用越来越重视。已发现的特异性启动子主要包括器官特异性启动子和诱导特异性启动子。例如，种子特异性启动子、果实特异性启动子、叶肉细胞特异性启动子、根特异性启动子、损伤诱导特异性启动子、化学诱导特异性启动子、光诱导特异性启动子、热激诱导特异性启动子等。这些特异性启动子的克隆和应用为在植物中特异性地表达外源基因奠定了基础。例如，瑞士CIBA-GEIGY公司使用PR-IA启动子控制转基因烟草中Bt毒蛋白基因的表达，由于该启动子可受水杨酸及其衍生物诱导，通过喷酒廉价、无公害的化学物质，诱导抗虫基因在虫害重发生季节表达，显然是一个十分有效的途径。 在植物转基因研究中，使用天然的启动子往往不能取得令人满意的结果，尤其是在进行特异表达和诱导表达时，表达水平大多不够理想。对现有启动子进行改造，构建复合式启动子将是十分重要的途径。例如，Ni等人将章鱼碱合成酶基因启动子的转录激活区与甘露碱合成酶基因启动子构成了复合启动子，GUS表达结果表示：改造后的启动子活性比35S启动子明显提高。吴瑞等人将操作诱导型的PI-II基因启动子与水稻Actinl基因内含子1进行组合，新型启动子的表达活性提高了近10倍（专利）。在植物基因工程研究中，这些人工组建的启动子发挥了重要作用。 2 增强翻译效率 为了增强外源基因的翻译效率，构建载体时一般要对基因进行修饰，主要考虑三方面内容： 2.1添加5‘-3‘-非翻译序列 许多实验已经发现，真核基因的5‘-3‘-非翻译序列（UTR）对基因的正常表达是非常必要的，该区段的缺失常会导致mRNA的稳定性和翻译水平显著下降。例如，在烟草花叶病毒（TMV）的126kDa蛋白基因翻译起始位点上游，有一个由68bp核苷酸组成的Ω元件，这一元件为核糖体提供了新的结合位点，能使Gus基因的翻译活性提高数十倍。目前已有许多载体中外源基因的5‘-端添加了Ω翻译增强序列。Ingelbrecht等曾对多种基因的 3‘-端序列进行过研究，发现章鱼碱合成酶基因的3‘-端序列能使NPTII基因的瞬间表达提高20倍以上。另外，不同基因的3‘-端序列增进基因表达的效率有所不同，例如，rbcS3‘-端序列对基因表达的促进作用比查尔酮合酶基因的3‘-端序列高60倍。 2.2 优化起始密码周边序列 虽然起始密码子在生物界是通用的，然而，从不同生物来源的基因各有其特殊的起始密码周边序列。例如，植物起始密码子周边序列的典型特征是AACCAUGC,动物起始密码子周边序列为CACCAUG，原核生物的则与二者差别较大。Kozak详细研究过起始密码子ATG周边碱基定点突变后对转录和翻译所造成的影响，并总结出在真核生物中，起始密码子周边序列为ACCATGG时转录和翻译效率最高，特别是-3位的A对翻译效率非常重要。该序列被后人称为Kozak序列，并被应用于表达载体的构建中。例如，有一个细菌的几丁质酶基因，原来的起始密码周边序列为UUUAUGG，当被修饰为ACCAUGG，其在烟草中的表达水平提高了8倍。因此，利用非植物来源的基因构建表达载体时，应根据植物起始密码子周边序列的特征加以修饰改造。 2.3对基因编码区加以改造 如果外源基因是来自于原核生物，由于表达机制的差异，这些基因在植物体内往往表达水平很低，例如，来自于苏云金芽孢杆菌的野生型杀虫蛋白基因在植物中的表达量非常低，研究发现这是由于原核基因与植物基因的差异造成了mRNA稳定性下降。美国Monsanto公司Perlak等人在不改变毒蛋白氨基酸序列的前提下，对杀虫蛋白基因进行了改造，选用植物偏爱的密码子，增加了GC含量，去除原序列下影响mRNA稳定的元件，结果在转基因植株中毒蛋白的表达量增加了30～100倍，获得了明显的抗虫效果。 3 消除位置效应 当外源基因被移人受体植物中之后，它在不同的转基因植株中的表达水平往往有很大差异。这主要是由于外源基因在受体植物的基因组内插入位点不同造成的。这就是所谓的"位置效应"。为了消除位置效应，使外源基因都能够整合在植物基因组的转录活跃区，在目前的表达载体构建策略中通常会考虑到核基质结合区以及定点整合技术的应用。 核基质结合区（matrix association region,MAR）是存在于真核细胞染色质中的一段与核基质特异结合的DNA序列。一般认为，MAR序列位于转录活跃的DNA环状结构哉的边界，其功能是造成一种分割作用，使每个转录单元保持相对的独立性，免受周围染色质的影响。有关研究表明，将MAR置于目的基因的两侧，构建成包含MAR-gene-MAR结构的植物表达载体，用于遗传转化，能明显提高目的基因的表达水平，降低不同转基因植株之间目的基因表达水平的差异，减少位置效应。例如，Allen等人研究了异源MAR（来自酵母）和同源MAR（来自烟草）对Gus基因在烟草中表达的影响，发现酵母的MAR能使转基因表达水平平均提高12倍，而烟草本身的MAR能使转基因的表达水平平均提高60倍。使用来源于鸡溶菌酶基因的MAR也可起到同样作用。 另一可行的途径是采用定点整合技术，这一技术的主要原理是，当转化载体含有与寄主染色体同源的DNA片段时，外源基因可以通过同源重组定点整合于染色体的特定部位。实际操作时首先要分离染色体转录活性区域的DNA片段，然后构建植物表达载体。在微生物的遗传操作中，同源重组定点整合已成为一项常规技术，在动物中外源基因的定点整合已获得成功，而在植物中除了叶绿体表达载体可实现定点整合以外，细胞核转化中还很少有成功的报道。 4 构建叶绿体表达载体 为了克服细胞核转化中经常出现的外源基因表达效率低，位置效应及由于核基因随花粉扩散而带来的不安全性等问题，近几年出现的一种新兴的遗传转化技术--叶绿体转化，正以它的优越性和发展前景日益为人们所认识并受到重视。到目前为止，已在烟草、水稻、拟南芥、马铃薯和油菜（侯丙凯等，等发表）5种植物中相继实现了叶绿体转化，使得这一转化技术开始成为植物基因工程中新的生长点。 由于目前多种植物的叶绿体基因组全序列已被测定，这就为外源基因通过同源重组机制定点整合进叶绿体基因组奠定了基础，目前构建的叶绿体表达载体基本上都属于定点整合载体。构建叶绿体表达载体基本上都属于定点事例载体。构建叶绿体表达载体时，一般都在外源基因表达盒的两侧各连接一段叶绿体的DNA序列，称为同源重组片段或定位片段（Targeting fragment）。当载体被导入叶绿体后，通过这两个片段与叶绿体基因组上的相同片段发生同源重组，就可能将外源基因整合到叶绿体基因组的特定位点。在以作物改良为目的的叶绿体转化中，要求同源重组发生以后，外源基因的插入既不引起叶绿体基因原有序列丢失，又不致于破坏插入点处原有基因的功能。为满足这一要求，已有的工作都选用了相邻的两个基因作为同源重组片段，例如rbcL/accD，16StrnV/rpsl2rps7,psbA/trnK,rps7/ndhB。当同源重组发生以后，外源基因定点插入在两个相邻基因的间隔区，保证了原有基因的功能不受影响。最近，Daniel等利用烟草叶绿体基因trnA和trnI作为同源重组片段，构建了一种通用载体（universal vector）。由于trnA和trnI的DNA序列在高等植物中是高度保守的，作者认为这种载体可用于多种不同植物的叶绿体转化。如果这种载体的通用性得到证实，那么这项工作无疑为构建方便而实用的新型叶绿体表达载体提供了一个好的思路。 由于叶绿体基因组的高拷贝性，定点整合进叶绿体基因组的外源基因往往会得到高效率表达，例如McBride等人首次将Bt CryIA(c)毒素基因转入烟草叶绿体，Bt毒素蛋白的表达量高达叶子总蛋白的3%～5%，而通常的核转化技术只能达到0.001%～0.6%。最近，Kota等将Bt Cry2Aa2蛋白基因转入烟草转入烟草叶绿体，也发现毒蛋白在烟草叶子中的表达量很高，占可溶性蛋白的2%～3%，比细胞核转化高出20～30倍，转基因烟草不仅能抗敏感昆虫，而且能够百分之百地杀死那些产生了高抗性的昆虫。Staub等最近报道，将人的生长激素基因转入烟草叶绿体，其表达量竟高达叶片总蛋白的7%，比细胞核转化高出300倍。这些实验充分说明，叶绿体表达载体的构建和转化，是实现外源基因高效表达的重要途径之一。 5 定位信号的应用 上述几种载体优化策略主要目的是提高外源基因的转录和翻译效率，然而，高水平表达的外源蛋白能否在植物细胞内稳定存在以及积累量的多少是植物遗传转化中需要考虑的另一重要问题。 近几年的研究发现，如果某些外源基因连接上适当的定位信号序列，使外源蛋白产生后定向运输到细胞内的特定部位，例如：叶绿体、内质网、液泡等，则可明显提高外源蛋白的稳定性和累积量。这是因为内质网等特定区域为某些外源蛋白提供了一个相对稳定的内环境，有效防止了外源蛋白的降解。例如，Wong等将拟南芥rbcS亚基的转运肽序列连接于杀虫蛋白基因之前，发现杀虫蛋白能够特异性地积累在转基因烟草的叶绿体内，外源蛋白总的积累量比对照提高了10～20倍。最近，叶梁、宋艳茹等也将rbcS亚基的转运肽序列连接于PHB合成相关基因之前，试图使基因表达产物在转基因油菜种子的质体中积累，从而提高外源蛋白含量。另外，Wandelt等和Schouten等将内质网定位序列（四肽KDEL的编码序列）与外源蛋白基因相连接，发现外源蛋白在转基因植物中的含量有了显著提高。显然，定位信号对于促进蛋白质积累有积极作用，但同一种定位信号是否适用于所有的蛋白还有待于进一步确定。 6 内含子在增强基因表达方面的应用 内含子增强基因表达的作用最初是由Callis等在转基因玉米中发现的，玉米乙醇脱氢酶基因（Adhl）的第一个内含子（intron 1）对外源基因表达有明显增强作用，该基因的其他内含子（例如intron8,intron9）也有一定的增强作用。后来，Vasil等也发现玉米的果糖合成酶基因的第一个内含子能使CAT表达水平提高10倍。水稻肌动蛋白基因的第三个内含子也能使报道基因的表达水平提高2～6倍。至今对内含子增强基因表达的机制不不清楚，但一般认为可能是内含子的存在增强了mRNA的加工效率和mRNA稳定性。Tanaka等人的多项研究表明，内含子对基因表达的增强作用主要发生在单子叶植物，在双子叶植物中不明显。 由于内含子对基因表达有增强作用，Mcelroy等在构建单子叶植物表达载体时，特意将水稻的肌动蛋白基因的第一个内含子保留在该基因启动子的下游。同样，Christensen等在构建载体时将玉米Ubiquitin基因的第一个内含子置于启动子下游，以增强外源基因在单子叶植物中的表达。然而，有研究指出，特定内含子对基因表达的促进作用取决于启动子强度、细胞类型、目的基因序列等多种因素，甚至有时会取决于内含子在载体上的位置。例如，玉米Adhl基因的内含子9置于Gus基因的5‘端，在CaMV35S启动子调控下，Gus基因的表达未见增强；当把内含子置于Gus基因3端，在同样的启动子控制下，Gus基因的表达水平却增加了大约3倍。由此可见，内含子对基因表达的作用机制可能是很复杂的，如何利用内含子构建高效植物表达载体，目前还缺乏一个固定的模式，值得进一步探讨。 7 多基因策略 迄今为止，多数的遗传转化研究都是将单一的外源基因转入受体植物。但有时由于单基因表达强度不够或作用机制单一，尚不能获得理想的转基因植物。如果把两个或两个以上的能起协同作用的基因同时转入植物，将会获得比单基因转化更为理想的结果。这一策略在培育抗病、抗虫等抗逆性转基因植物方面已得到应用。例如，根据抗虫基因的抗虫谱及作用机制的不同，可选择两个功能互补的基因进行载体构建，并通过一定方式将两个抗虫基因同时转入一个植物中去。王伟等将外源凝集素基因和蛋白酶抑制剂基因同时转入棉花，得到了含双价抗虫基因的转化植株。Barton等将Bt杀虫蛋白基因和蝎毒素基因同时转入烟草，其抗虫性和防止害虫产生抗性的能力大为提高（专利）。在抗病方面，本实验室蓝海燕等构建了包含β-1，3-葡聚糖酶基因及几丁质酶基因的双价植物表达载体，并将其导入油菜和棉花，结果表明，转基因植株均产生了明显的抗病性。最近，冯道荣、李宝健等将2～3个抗真菌病基因和hpt基因连在一个载体上，两个抗虫基因与bar基因连在另一个载体上，用基因枪将它们共同导入水稻植株中，结果表明，70%的R。代植株含有导入的全部外源基因（6～7个），且导入的多个外源基因趋向于整合在基因组的一个或两个位点。 一般常规的转化，尚不能将大于25kb的外源DNA片段导入植物细胞。而一些功能相关的基因，比如植物中的数量性状基因、抗病基因等，大多成"基因簇"的形式存在。如果将某些大于100kb的大片段DNA，如植物染色体中自然存在的基因簇或并不相连锁的一系列外源基因导入植物基因组的同一位点，那么将有可能出现由多基因控制的优良性状或产生广谱的抗虫性、抗病性等，还可以赋予受体细胞一种全新的代谢途径，产生新的生物分子。不仅如此，大片段基因群或基因簇的同步插入还可以在一定程度上克服转基因带来的位置效应，减少基因沉默等不良现象的发生。最近，美国的Hamilton和中国的刘耀光分别开发出了新一代载体系统，即具有克隆大片段DNA和借助于农杆菌介导直接将其转化植物的BIBAC和TAC。这两种载体不仅可以加速基因的图位克隆，而且对于实现多基因控制的品种改良也会有潜在的应用价值。目前，关于BIBAC和TAC载体在多基因转化方面的应用研究还刚刚开始。 8 筛选标记基因的利用和删除 筛选标记基因是指在遗传转化中能够使转化细胞（或个体）从众多的非转化细胞中筛选出来的标记基因。它们通常可以使转基因细胞产生对某种选择剂具有抗性的产物，从而使转基因细胞在添加这种选择的培养基上正常生长，而非转基因细胞由于缺乏抗性则表现出对此选择剂的敏感性，不能生长、发育和分化。在构建载体时，筛选标记基因连接在目的基因一旁，两者各有自己的基因调控序列（如启动子、终止子等）。目前常用的筛选标记基因主要有两大类：抗生素抗性酶基因和除草剂抗性酶基因。前者可产生对某种抗生素的抗性，后者可产生对除草剂的抗性。使用最多的抗生素抗性酶基因包括NPTII基因（产生新霉素磷酸转移酶，抗卡那霉素）、HPT基因（产生潮霉素磷酸转移酶，抗潮霉素）和Gent基因（抗庆大霉素）等。常用的抗除草剂基因包括EPSP基因（产生5-烯醇式丙酮酸莽草酸-3-磷酸合酶，抗草甘磷）、GOX基因（产生草甘膦氧化酶、降解草甘膦）、bar基因（产生PPT乙酰转移酶，抗Bialaphos或glufosinate）等。 上面这些当中1、2、3、5、6都是值得注意的，特别是5，因为你要向细胞外分泌。骨架载体可以选择PB I121，然后你可以在上面改动基因型。 后面的就是克隆的步骤了，相对简单。 1 首先获得目的基因加酶切位点，连入改好的载体中。 2 将质粒转入大肠杆菌DH5a扩增 3 将扩增好的质粒转入植物细胞内进行表达 4 收集根细胞外培养基检测是否有该蛋白的表达和分泌。 至于改造载体那几个步骤要是答题的话简单说说就可以了，毕竟如果真的做出一个好载体都可以自己开公司了。

不定式作 目的状语

B 本题我们极易错选A或C。That"s all 意思是“就这些”，表示讲话或文章的结束，而That"s all right 意思是“行；可以；没关系”。That"s it 为固定搭配，意思是“这正是所需要的”。

Doctor of Philosophy, 简写 Ph.D. or PhD 来自拉丁文 Philosophi03 Doctor 博士Ph.D.s are awarded under different circumstances and with different requirements in many different English-speaking countries. 全球多学科博士

(b)