大谷敦士的个人资料

黑色

看起来很靓

不知道，看上去身材挺不错的。

《恋爱情结》

还是有很多这样的女汉子

第一集

今天就和大家分享下，这种彩虹色彩混合在设计中的一些运用和技巧！什么是彩虹混合风格？顾名思义，这个风格就是在色彩上融合了大自然中彩虹的物理变化，色彩就像彩虹一样颜色丰富、美丽，同时色彩之间有着很柔和的融合感，形成视觉冲击力很强的形式风格！ ▲国外经典的服装设计师 Bianca Luini也在自己服装作品中，大量运用这种自然里面最神奇的色彩作为服装设计灵感。那么彩虹色，究竟有哪些特点呢？？？ 色彩 现在早已经不再是过去的彩虹1.0设计时代，彩虹混合也绝对不是普通的拉一个七种颜色的渐变，现在我们统称的彩虹渐变，它的颜色界限过渡会更加柔和，绝不是那种不讲究美感的粗暴渐变！ 图形彩虹渐变的形式类似海水、水银。多为不规则流动感的形态，色彩融合比较丰富，也有彩虹色和超现实人物元素一起运用！ ▲几何图形：几何图形运用，运用在商品上，背景上，氛围元素装饰上 质感彩虹色质感可以扁平、可以3D，可以像水彩颜料一样丰富，也可以像丝绸一样顺滑，可以像海浪一样波澜起伏，也可以像光影一样华丽，总之他的质感运用场景，都可以根据你想要表达的情绪去营造。 ▲可以像海水，水银海浪一样起伏波澜 ▲可以像光影几何图形般耀眼 ▲也可以像水银一样流动 在UI设计中的运用提到这个风格就不得不说起众所周知的Instagram图标，ins的设计主管是这么描述的：如果镜头是个桥梁，那么镜头拍摄出来的那些美丽的照片，五彩缤纷，美丽多彩，要用颜色来定义这个桥梁的话，就是彩虹！▲在一些封面、banner图，以及引导页面的设计中运用，能很好的和其他产品拉开设计差异性 ▲在很多电商大促中，如天猫之前的双11以及618都大量采用这种彩虹渐变作为色彩主风格 在图标设计中的运用▲instagram在logo上对彩虹渐变的极致运用，使得整体品牌极具辨识度，让人印象深刻 ▲instagram的品牌手册也是运用了与logo一致的渐变色彩。 ▲Ramotion工作室为火狐设计的一组图标也是运用了彩虹渐变处理技法，看起来非常有质感 在网页设计中的运用▲伦敦Grammar的宣传页面也是采用的一个彩虹色水滴可以慢慢移动的形式作为主视觉，应用到项目中去。 ▲Southwest在官网设计中，采用的是另外一种设计手法，彩虹背景和元素成为画面一个容器，很好的把文字放置进去，彩虹线条背景很好的在页面中形容前后关系的呼应 ▲在Sourav Maity作品中，很好的运用了整体插画都是运用彩虹色的体现，使得作品整体色温下有一个很好的形式感和统一性！ ▲Natoni网站的登录页面；运用彩虹渐变当做主体背景，做出与其他网站的差异性

声优表示顺序为TV动画/广播剧CD ★小泉理沙（小泉リサ こいずみ りさ Koizumi Risa）年龄：17岁 CV：冈村明美/早水理沙 本作的女主角，高一时身高170cm，高二时172cm，体重50kg，生日是8月3日，血型为O型，大谷通常叫他『女巨人』。读书成绩不佳，但跟大谷一起时就化身为顶级的搞笑艺人，主要担演白痴。她是公认的游戏迷，跟大谷一样是『海坊主』的歌迷。最初喜欢铃木，但后来喜欢大谷。性格开朗好动，但亦会因传达不了自己的心意给大谷而失落，但是经好友信子鼓励后就会立刻回复精神，性情单纯乐观。高中毕业后进了专业学校，以成为化妆师为目标。跟大谷交往后，受双方父母承认关系。 ★大谷敦士（おおたに あつし Ootani Atsushi）年龄： 17岁 CV：永田彬/樱井孝宏 本作的男主角，高一时身高156cm，高二时156.2cm，体重45kg，生日是3月25日，血型为A型，跟理沙一样是『海坊主』的歌迷。跟理沙3年同班兼当了3年班长，主要担演吐槽角色。他是篮球队队员，虽然有著身高的障碍，但从高二开始便成为正式队员，后来更担任队长。对于恋爱的事情相当迟钝。当初对理沙的心意感到困惑犹豫，但MAITY（后述）登场后，心境明显出现变化。原本固执笨拙、阳光性格的他，意外地容易吃醋嫉妒。家人叫他『敦敦』，他似乎讨厌他们在人前这样称呼他。以小学教师为目标，谁都认为他无可能做到，但他临考前努力补习，终于取得大学入学资格。跟理沙交往后，受双方父母承认关系。 ★石原信子（いしはら のぶこ Ishihara Nobuko）年龄：16岁 CV：东纱织/同左 爱称为『小信』，身高153cm，体重42kg，生日是5月28日，血型为B型。她是一个理性懂事的人，是理沙的好友兼倾谈对象，一直照顾著理沙。十分喜欢流行打扮而特意选一间可以穿便服上学的高中。跟中三开始交往的中尾热恋中，通常叫他『Darling』。毕业后入读北海道的短大，预定报读营养师，梦想是成为中尾的妻子。 ★中尾平吉（なかお へいきち Nakao Heikichi） CV：德山靖彦/津田健次郎 和大谷是中学时代起的好友，小信的男朋友，身高180cm，体重58kg，生日是1月15日，血型为B型。篮球队的治愈队及后补。总是随随便便，亦有喜欢男扮女装的一面。一直默默守望著大谷和理沙的恋爱。虽然与小信远距离恋爱，但仍十分爱她。预定继承祖父的和菓子店。 ★田中千春（たなか ちはる Tanaka Chiharu） CV：小岛加寿子/前田爱 和理沙是中学时代起的好友，跟铃木交往中，身高150cm，体重40kg，生日是6月23日，血型为A型。学年成绩第一位，读书时戴著眼镜。跟理沙和小忍不一样，性格保守老实且温柔，容易受感动，当理沙幸福时自己也感到开心。可是当她发怒时，会做出撕破笔记，乱扔桌子等举动，十分可怕。 ★铃木凉二（すずき りょうじ Suzuki Ryouji） CV：津田健次郎/小野坂昌也 千春的男朋友，身高182cm，体重56kg，生日是2月4日，血型为AB型。高一时跟上述5人同班，因当时被理沙喜欢而成为好朋友。表面冷酷，但实质性格沉默害羞，稍为胆小。截至跟理沙他们高三完结之前貌似未笑过。因考试失败而成为浪人，后来决意来年跟千春考进同一所大学。 ★寿圣子郎（ことぶき せいしろう Kotobuki Seishirou） CV：泷本富士子/小松里歌 自称『圣子（せいこ Seiko）』，身高148cm，体重43kg，生日是12月25日，血型为O型，喜欢打扮，总是带著笑容。比起那里的女生都更可爱，可惜是男儿身。本人说：「一定是上帝给我身体的时候弄错了！」比理沙他们小一年级，对大谷一见锺情而”横刀夺吻”。被大谷知道他是男生的事后，积极的为理沙的恋爱加油打气。后来，喜欢上小堀。遥退任后，他成为家政部部长。 ★深川 遥（ふかがわ はるか Fukagawa Haruka） CV：小野坂昌也/置鲇龙太郎 名字像女生，但是个不折不扣的男生，身高185cm，体重57kg，生日是9月9日，血型为AB型。祖母是英国人，高一完结前都在海外生活，是理沙的青梅竹马。为了追求理沙，高二开始入读舞戸学园。视小时候被欺负时拯救他的理沙为英雄，希望理沙成为他的女朋友以保护他的胆小鬼。相当美形，有7个女朋友（后来增加至9个）。他是家政部部长，可是完全不顶用，所以被圣子”解雇”。跟『MAITY』是表兄弟关系。 喜欢理莎。 ★吉冈美美（よしおか みみ Yoshioka Mimi） CV：荒木香惠/- 住在大谷隔壁的青梅竹马，比大谷小4年，身高跟理沙一样是172cm，体重52kg，生日是3月3日，血型为A型。跟大谷的家人一样，称呼他为『敦敦』。从小时候就喜欢大谷，为了让大谷增高，每天都送牛奶给他喝。在大谷面前装作清纯可爱，可在理沙面前凶神恶煞。担任杂志的模特儿，梦想是成为超级名模，工作不会休息。 ★小堀和希（こほり かずき Kohori Kazuki） CV：下和田裕贵/- 跟高三秋天开始兼职的理沙在同一间餐厅工作的同事。他很矮，但比大谷稍微高，身高158cm，体重48kg，生日是5月3日，血型为A型，性格率直。在男校读书，比理沙小2年。喜欢理沙，有时会做出大胆的举动。跟理沙和大谷一样，喜欢海坊主。 　　★海坊主（うみぼうず Umibozu） CV：スモーキー?テツニ/江川央生 Rap Group『海坊主』的MC，理沙、大谷，还有小堀都超喜欢他。有一个美丽的妻子，和一个跟他长得很像的儿子。儿子叫他『坊主』，但海坊主希望儿子能叫他『爸爸』。外表凶恶，但为人亲善。十分爱海、北海道、妻子和儿子。 　　★舞竹国海（まいたけ くにうみ Maitake Kuniumi） CV：诹访部顺一/同左 通称『MAITY』，生日是4月12日，血型为O型。担任理沙他们高三时的副班主任及英语老师，亦是遥的表哥。跟理沙经常玩的模拟恋爱游戏「Love Love Fantasy2」的登场角色『肯恩大人』长得超像，又是理沙喜欢的身材高大的恋爱对象。他的一举一动都令大谷对他十分不爽。经常穿著性感的开胸白衬衣，令女同学神魂颠倒，还存在名为「MAITY社」的后援会（设立者为理沙，可是后来退了部）。理沙和大谷恋爱的重要助阵。另外，亦是这部作品少有用标准语说话的角色。

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恋爱情结？

爱丽丝学园。。。。。汗，纯属占位子

摘要： HAP转录因子(HAP2/HAP3/HAP4/HAP5) 是存在于酿酒酵母中的一种异源多聚蛋白，它能与酵母中许多启动子上游的CCAAT盒（顺式作用元件）专一性结合， 以增强基因的转录。在酵母hap5突变株的细胞中，用酵母单杂交系统从水稻cDNA-GAL4表达文库中筛选出的阳性克隆是编码谷胱甘肽氧还蛋白的cDNA，提示细胞内的氧化还原系统可能作用于HAP蛋白，从而对CCAAT盒的结合活力起调节作用。 对HAP3亚基分子中半胱氨酸残基的突变实验结果支持上述推测。关键词： CCAAT，HAP复合物， 转录因子，氧化还原系统DNA-Binding Activity of the Transcription Factor HAP Is Regulated by Cellular RedoxYAO Quan-Hong, XING Yan-Yan, WANG Zong-Yang, ZHANG Jing-Liu and HONG Meng-MinShanghai Institute of Plant Physiology, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200032Abstract：The CCAAT binding factor of brewer"s yeast Saccharomyces cerevisiae has been shown previously to be a heteromeric complex containing HAP2, HAP3, HAP4 and HAP5 subunits. This factor can bind specifically to CCAAT-containing upstream sites within the promoters of numerous yeast genes, and then activate the transcription. By using a yeast one-hybrid system, we tried to isolate the counterpart of the yeast HAP5 gene from rice cDNA-Gal4 fusion library constructed in a E.coli-yeast shuttle vector pPC86. However, we identified a cDNA encoding glutaredoxin (Fig．1). The results indicte that the cellular redox environment of yeast cell may be a factor regulating the CCAAT-box-binding activity of the HAP3 subunit (Table 1). The results of the HAP3 mutants in which the highly conserved cysteine residues at positions 68 and 72 had been converted to serine support the above suggestion (Table 2).Key words: CCAAT, HAP complex, transcription factor, redox system 真核基因转录起始时，有一些被称为转录因子的核蛋白会结合在真核基因启动子上游的顺式作用元件上，以增强或阻遏真核基因的转录(Wolberger 1993)。 有些转录因子要经过磷酸化或二聚化，引起蛋白分子的构型发生一些改变后，才具有与DNA结合的能力（Hunter和 Karin 1992）。最近Zheng 等（1998）报告，有些转录因子与DNA 的结合活力受细胞中的氧化还原状态的调节。例如，用凝胶滞后试验在体外研究Jun和Fos转录因子与含Ap-1结合位点的DNA的结合作用时，观察到硫氧还蛋白(thioredoxin)、还原辅酶Ⅱ(NADPH)与硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase)可明显提高它们的异源二聚体与DNA的结合能力(Abate等1990)。 在一些真核基因转录起始点上游存在核心序列为CCAAT的顺式元件，该元件可呈正、反两种方向(Van Huijsduijnen等 1987)。 已知酿酒酵母中至少有16种基因的5"端上游都含CCAAT元件。与这些基因上游的CCAAT结合以调节基因转录的反式作用因子是HAP复合物(Pinkham和Keng 1992)， 它是由HAP2、HAP3、HAP4和HAP5 四个蛋白亚基组成的异源多聚体，其中HAP2和HAP3都含有DNA结合域，但单独的HAP2和HAP3蛋白都不具DNA结合活性，只有当HAP2与HAP3 通过它们的亚基结合域形成二聚体蛋白时才构成一个完整的CCAAT盒结合功能域(Xing 等1993) 。而且体内与体外的研究都证实，这种复合功能域的形成还需要HAP5亚基的参与（McNabb等1995）。HAP4亚基含有活化结构域(activation domain)，起活化基因转录的作用(Foraburg和Guarente 1989)。近年来，已从粟酒裂殖酵母、小鼠、大鼠、人等生物中克隆了编码CCAAT盒结合蛋白的基因， 这些CCAAT结合蛋白与酵母HAP转录因子类似蛋白间存在高度同源的结构域(Van Huijsduijnen等1990)；在高等植物中， 也已从油菜中克隆了与HAP2亚基中DNA结构域高度同源的基因(Albani和Robert 1995)。 我们曾报告，用酿酒酵母CYC1基因启动子上游含CCAAT盒的DNA片段为“鱼铒”，在HAP2基因突变的酵母细胞中，用酵母单杂交方法从水稻cDNA-GAL4 表达文库中筛选出了编码HAP2类似蛋白的cDNA克隆(姚泉洪等待发表)。本研究用相似的方法，在HAP5突变的酵母细胞中，用酵母单杂交方法， 试图从水稻cDNA-GAL4 表达文库中筛选出编码水稻HAP5类似蛋白的cDNA。但HAP5类似cDNA没有筛到，却几次筛选到水稻中编码谷胱甘肽氧还蛋白(glutaredoxin)的cDNA。这一意外的结果提示我们HAP转录因子与DNA结合受氧化还原（redox）调节的可能性。 本文报告上述实验结果以及对HAP3亚基中半胱氨酸残基进行的突变实验，并就HAP转录因子的DNA结合活力是否受氧化还原调节的问题进行了讨论。1 材料与方法1.1 工具酶与化学试剂 限制性内切酶和其它基因工程工具酶为德国Boeringer公司产品，X-gal购自Sigma公司，其它化学试剂为美国Sigma公司或国产AR级试剂。1.2 菌种和质粒 MC8为氨基酸缺陷型大肠杆菌菌株(thi－,trp－,ura－,leu－,his－)。酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）hap5缺陷型菌株为Δhap5-10 (MATα,leu 2-3,112,ura3-52,his4-519,adel-100,trp1 Δhap5)。大肠杆菌-酵母穿梭载体pLG Δ-265 UP1带有lacZ报告基因、URA选择标记、2μ复制序列和酵母CCAAT盒。lacZ报告基因由CYC1的基本启动子控制，而含CCAAT盒的DNA片段位于CYC1的基本启动子上游，此元件被转录因子结合后，即可调节lacZ基因的表达。酿酒酵母-大肠杆菌穿梭载体pPC86带有色氨酸合成酶基因，系朱群博士赠送。pDB20(HAP5)质粒带LEU选择标记，该载体由ADH1启动子控制酵母HAP5基因的表达用作鉴定水稻类似HAP5 cDNA时的阳性对照。pYP2质粒由本实验室构建，它带有PGK启动子及色氨酸合成酶基因，PGK启动子后的BamHⅠ和KpnⅠ切点间插入用于表达的cDNA。1.3 PCR引物 酵母pPC86载体cDNA插入5"端Gal4激活功能域侧的引物为：GAL4(5"-GGATGTTTAATACCACT-3"）,3"端ADH终止子侧的引物为：TAD4(5"-TTGATTGGAGACTTGACC-3")。水稻谷胱甘肽氧还蛋白cDNA(Minakichi等1994)两侧的引物分别为：5"端翻译启始密码子ATG附近的引物Gluta1(5"AAGGATCCATGGCGCTCGCCAAGGCCAAG 3"), 3"端翻译终止密码子TAG附近的引物Gluta2(5"TTGTGGTACCTATGCGGTGATTGTCGTCTTTG 3")。酿酒酵母HAP3基因(Hahn等1988)两侧的引物分别为：5"端翻译起始密码子ATG附近的引物HAP3Z1(5"AAGGATCCATGAATACCAACGAGTCC 3")，3"端翻译终止密码子TGA附近的引物HAP3F1(5"TTGTGGTACCTCAAGGCACCTCTTCG 3")。用于酿酒酵母HAP3基因第68位Cys突变为Ser的内侧突变引物分别为：含突变碱基的5"端引物HAP3Z2(5" CGAAAGAGTCCATGCAGGAG 3")，含突变碱基的3"端引物HAP3F2(5"CTCCTGCATGGACTCTTTCG 3")。用于酿酒酵母HAP3基因第72位Cys突变为Ser的内侧突变引物分别为：含突变碱基的5"端引物HAP3Z3( 5"CATGCAGGAGTCTGTCAGTG 3") ，含突变碱基的3"端引物HAP3F3(5"CACTGACAGACTCCTGCATG 3")。1.4 酵母表达型水稻cDNA库 构于酵母载体pPC86的水稻IR36幼苗的表达型cDNA库由美国Salk研究所的朱群博士提供。1.5 培养基 大肠杆菌MC8生长于添加亮氨酸、尿嘧啶、组氨酸、维生素B1的M9基本培养基， 用于选择带有水稻cDNA的pPC86质粒。含2％葡萄糖或2％乳酸的酿酒酵母丰富培养基YPD、基本培养基SC及酵母X-gal培养基的制备参照Sherman（1991）的方法。1.6 酵母感受态细胞的制备及质粒转化 酿酒酵母的质粒转化选用Gietz等(1992)的醋酸锂法。于30℃过夜培养5 ml酿酒酵母至OD600为0.5左右，扩大培养至50ml,再生长4h后，5000×g离心8min收集细胞。以20ml无菌水洗，然而把离心收集的酵母以10ml新配的LiAc溶液100mmol/L(用pH 8.0的Tris 10mmol/L、 EDTA 0.1mmol/L 缓冲液配制)洗1次。7000×g离心8min后，最终将酵母细胞悬于0.5ml的LiAc溶液中。50μl的酵母悬液中加入 1μg的质粒DNA、50μg的鲑鱼精DNA及300μl含40% PEG3350的LiAc溶液，充分混匀后于30℃保温30min。接着于42℃热激15min。把离心收集的酵母细胞重悬于TE溶液中，并涂于酵母选择培养基。1.7 DNA操作 酵母DNA的快速抽提按Robzyk和Kassir（1992）的方法。DNA操作按标准的分子克隆步骤（Sambrook等1989）。大肠杆菌的电击转化按Dower等(1988)的方法。抽提含水稻cDNA阳性质粒的双链DNA，在ABI 377型DNA自动化测序仪上进行序列测定。 引物GAL4与TAD4间的PCR扩增反应条件为：94℃ 40s, 42℃ 50s, 72℃ 3min，共扩增30个循环。水稻谷胱甘肽氧还蛋白cDNA两侧引物Gluta1和Gluta2间的PCR扩增反应条件为：94℃ 30s, 66℃ 45s， 72℃ 30s，共扩增30个循环。酵母HAP3基因的定点突变采用重叠延伸法(Ho等1989)。HAP3外侧引物间及外侧引物与内侧引物突变间的PCR扩增反应条件为：94℃ 30s, 48℃ 40s，72℃ 30s，共扩增30个循环。2 结果2.1 酵母单杂交法筛选水稻中类似酵母HAP5基因的cDNA 酵母单杂交体系最初是由Wang和Reed (1993)所设计,它含两个质粒：其一为酵母表达质粒，用于表达cDNA与GAL4激活功能域的融合蛋白;另一质粒将一个顺式作用元件与带有基本启动子的细菌lacZ报告基因连接，该载体称作鱼饵质粒。本实验酵母单杂交体系中所用的鱼饵质粒为pLGΔ-265 UP1，该载体是把含CCAAT的顺式作用元件插入到178载体中CYC1基本启动子上游构建而成。我们先将鱼饵质粒pLGΔ-265 UP1转化入酵母菌株Δhap5-10，在不含尿嘧啶的平皿上得到转化子Δhap5-10(pLGΔ-265 UP1)。然后将30μg含水稻cDNA的pPC86载体转化到感受态酵母中，于不含尿嘧啶和色氨酸的培养基上培养。得到3×106左右的转化子，用硝酸纤维膜将这些转化子复印至X-gal平板上进行显色反应。作为阳性对照，含HAP5基因表达载体pDB20(HAP5）及鱼饵质粒pLGΔ-265 UP1的Δhap5-10酵母菌株经培养6 h后已显蓝色。而含水稻cDNA库的质粒pPC86的Δhap5-10(pLGΔ-265 UP1)酵母菌株2 d后才出现蓝色菌落。此实验重复进行了4次，一共获45个蓝色酵母菌落。2.2 酵母阳性菌落的重复筛选 为了验证初筛得到的酵母阳性菌落中是否含有相似于HAP5功能的cDNA克隆，从上述45个酵母阳性菌落中抽提DNA，用电击法将DNA转化到大肠杆菌MC8中，培养于2YT+Ap平板，然后复印至不含色氨酸的M9培养基平板上培养。因为pPC86质粒上带有编码TRP合成酶的标记基因，因此能生长出的菌落表明它带有pPC86质粒。然后再从能在不含色氨酸M9培养基上生长的大肠杆菌中抽提质粒DNA，将这些质粒DNA分别转化到酵母Δhap5-10(pLGΔ-265 UP1)菌株中，于X-gal平板上进行显色，从中鉴定出能使酵母菌落重复变蓝的cDNA克隆17个。2.3 阳性克隆的鉴定和测序 由于hap5缺陷型酵母不能在含非发酵性碳源的培养基上生长，我们将4次酵母单杂交筛选并经复筛后留下的17个阳性质粒转化入Δhap5-10缺陷型酵母进行功能互补法鉴定。结果表明，这些含水稻cDNA的阳性质粒都不能使hap5缺陷型酵母在非发酵性碳源的培养基上生长。它们都没有补偿缺陷型酵母中所缺失的HAP5的功能，因此不是编码类似HAP5的cDNA克隆。为了弄清它们的结构，我们以GAL4和TAD4为引物进行PCR扩增。并对扩增出的cDNA顺序分别进行Sau3AⅠ酶切，根据酶切带型对各批筛出的cDNA进行归类。结果表明，17个中有6个筛出的阳性cDNA具类似酶切带型；4次筛库中有3次获得该类cDNA克隆。我们以GAL4和TAD4两引物直接对具相似酶切带型、编号为C3的cDNA进行DNA序列分析，图1的结果显示其核苷酸与已报道的水稻谷胱甘肽氧还蛋白cDNA序列完全相同(Minakichi等1994)。我们又按照所测出的水稻谷胱甘肽氧还蛋白cDNA的核苷酸顺序，合成了cDNA两端的寡核苷酸引物gluta1和gluta2，并对所获的6个具相同酶切带型的cDNA克隆进行PCR扩增，结果也确证它们都是编码水稻谷胱甘肽氧还蛋白的cDNA。图1 水稻C3 cDNA克隆的核苷酸顺序及推导的氨基酸序列Fig.1 Sequence of the C3 cDNA clone and predicted amino acid sequence2.4 C3所编码的谷胱甘肽氧还酶对HAP复合物DNA结合活性的影响 以C3的DNA为模板，用两端分别存在BamHⅠ和KpnⅠ酶切点的gluta1和gluta2为引物进行PCR扩增。将此含glutaredoxin基因完整编码区的PCR扩增片段经BamHⅠ和KpnⅠ酶切后克隆到酵母表达载体pYP2中PGK启动子后的相应酶切点间，构成酵母重组质粒pYP3。接着将pYP2、pDB20、pDB20(HAP5)与pYP3等4种质粒分别转化到已经带有质粒p178或pLGΔ-265 UP1的两酵母菌株Δhap5-10(p178)和Δhap5-10(pLGΔ-265 UP1)中。将上述4种质粒分别转化两株酵母菌株。这两株酵母菌株为hap5突变株，但含有具激活功能的HAP4蛋白，有结合功能的HAP2、HAP3蛋白。在不含尿嘧啶和色氨酸的培养基上得到转化子，并将这8种酵母转化子用硝酸纤维素膜分别复印至X-gal平板上进行显色反应，2 d后转化子Δhap5-10( pYP3+pLGΔ-265 UP1)显蓝色，阳性对照菌株Δhap5-10(pDB20(HAP5)+pLGΔ-265 UP1)菌落呈深蓝色，而阴性对照菌株Δhap5-10(pYP2+pLGΔ-265UP1)和Δhap5-10(pDB20+pLGΔ-265 UP1)以及4种质粒在酵母菌株Δhap5-10(178)中的转化子都没有蓝色显现(表1)。说明glutaredoxin能使HAP2、HAP3与HAP4在没有HAP5的情况下使lacZ基因得到表达。表1 C3所编码的glutaredoxin对鱼饵质粒上lacZ基因表达的影响Table 1 Effects of glutaredoxin encoded by C3 on the lacZ gene expression in bait plasmidPlasmid Expression of lacZ gene p178 pLGΔ-265 UP1 pYP2 － － pDB20 － － pDB20(HAP5) － +++ pYP3 － + 2.5 HAP3蛋白Cys位点突变对HAP复合物DNA结合活性的影响 在hap5缺失型酵母细胞中，glutaredoxin能使HAP2、HAP3与HAP4一起使lacZ表达。由于已知glutaredoxin是参与调节细胞氧化还原状态（redox）的主要成分，因此我们推测它对HAP蛋白的作用可能是调节HAP蛋白中－SH与－S－S的可逆反应。为弄清它是否起这种作用，我们将HAP3基因第68位及第72位Cys突变为Ser，来验证此种推测是否正确。方法是以Δhap5-10菌株DNA为模板，分别以HAP3Z1、HAP3F2及HAP3Z2、HAP3F1这两对引物进行PCR扩增。再以回收的两个PCR产物为模板，通过HAP3Z1和HAP3F1引物扩增出第68位Cys突变为Ser的HAP3基因。并以同样的方法获得第72位Cys突变为Ser的HAP3基因。分别将HAP3基因及两突变基因的BamHⅠ和KpnⅠ酶切产物克隆入pYP2酵母表达载体，构成带有HAP3基因的质粒pYP4、带有第68位Cys突变为Ser的HAP3基因的质粒pYP5及第72位Cys突变为Ser的HAP3基因的质粒pYP6。接着把pYP4、pYP5和pYP6质粒分别转化入含质粒p178和pLGΔ-265 UP1的酵母Δhap5-10菌株中，在不含尿嘧啶和色氨酸的培养基上选择酵母转化子。转化子用硝酸纤维膜复印至X-gal平板上进行显色反应，2 d后两种带有HAP3发生突变基因的质粒的转化子在没有glutaredoxin存在的情况下都显示出蓝色。而带有正常HAP3基因质粒的转化子没有显示蓝色，且转化到Δhap5-10(178)菌株中的4种转化子也没有显示蓝色(表2)。该结果说明在hap5基因突变酵母细胞中，－SH被突变后的HAP3亚基与细胞中的HAP2、HAP4，即能在单杂交系统中使lacZ基因组成性地表达，而无需glutaredoxin的氧还调节。表2 HAP3蛋白Cys位点突变对鱼饵质粒上lacZ基因表达的影响Table 2 Effects of mutant HAP3 at cysteine residues on the lacZ gene expression in bait plasmidPlasmid Expression of lacZ gene p178 pLGΔ-265 UP1pYP2 － － pYP4 － － pYP5 － + pYP6 － + 3 讨论 细胞中存在多个调节细胞氧化还原(redox)状态的系统，其中之一为谷胱甘肽氧还蛋白系统，此系统包含谷胱甘肽、谷胱甘肽还原酶与谷胱甘肽氧还蛋白(Holmgren 1989)。该系统通过谷胱甘肽氧还蛋白中半胱氨酸残基上的－SH氧化成－S－S－键或可逆地还原成－SH来调节细胞中的redox状态。这种redox状态也促使某些功能性蛋白分子上的－SH或－S－S－随即发生可逆的氧化或还原，并引起蛋白分子的构型改变，从而影响蛋白分子的活性、稳定性与正确的折叠等重要功能(Holmgren 1989)。 我们在HAP2酵母突变株细胞中，用酵母单杂交方法从水稻cDNA-GAL4 表达文库中成功地筛选到水稻中与HAP2类似的基因RAPB，且RAPB基因可互补酵母的hap2缺陷。这表明用此套单杂交系统来筛选转录因子基因是有效的。按推理，用相同的酵母单杂交系统，在酵母hap5突变株细胞中也应能筛选到水稻的HAP5类似基因，但是所得到的阳性cDNA克隆都不能互补酵母HAP5的缺陷性状。对所得到的阳性cDNA克隆进行核苷酸顺序分析的结果表明，从水稻cDNA文库中得到的这些cDNA所编码的是谷胱甘肽氧还蛋白，而不是期望的水稻编码类似酵母HAP5蛋白。Minakichi等(1994)曾报告水稻glutaredoxin基因的表达主要集中于种子中，而在叶片中的表达很低。而4次筛水稻叶片表达型库过程中有3次筛到glutaredoxin基因，这说明这一实验结果并非偶然。至于为何未筛到HAP5类似基因，是由于我们所用的水稻cDNA-GAL4表达文库中没有HAP5-cDNA，还是由于水稻中没有类似此功能的基因，这还有待进一步研究。 酵母功能互补试验显示水稻glutaredoxin基因没有明显的互补HAP5基因的活性；酵母单杂交试验的结果也说明水稻glutaredoxin基因增强lacZ基因表达的活性远低于HAP5基因。有人推测酵母HAP5蛋白的功能可能是与HAP2和HAP3两亚基间发生疏水相互作用，从而促使形成一种稳定的能结合CCAAT盒的复合结构(McNabb等1995)。如果这种推测是正确的话，那么glutaredoxin的作用也可能是使HAP3亚基保持－SH基状态，从而使HAP2和HAP3之间形成一种不稳定的与CCAAT盒结合较弱的复合结构。glutaredoxin对HAP复合物DNA结合活性的促进及HAP3亚基中半胱氨酸残基突变成丝氨酸残基实验的结果与上述推测较相符。即第68和72位Cys突变为Ser的HAP3蛋白和HAP2蛋白相互作用即具有CCAAT盒结合活性。 到目前为止，已经报告过许多转录因子，如c-fos和c-jun(Abate等1990)，NFκB/Rel(Matthews等 1992)，c-Myb(Guehmann等1992)，BPV-1(McBride等1992)，USF(Pognonec等1992)和NF-Y(Nakshatri等1996)等的DNA 结合活力均受redox调节。其中NF-Y是从人与小鼠细胞中克隆出的能与CCAAT盒结合的转录因子， 它也是异源多聚体蛋白。NF-YA、NF-YB分别为酿酒酵母的HAP2、HAP3的类似基因，两者中有高度同源的结构域，且功能上可互换(Maity等1992, Kim等1996，Coustry等1995)。另外至今所发表的HAP3类似蛋白中3个半胱氨酸残基的位置是保守的(Xing等1993)。 Nakshatri等(1996)报告小鼠的NF-Y转录因子与CCAAT盒在体外的结合活力受redox 状态的调节。硫氧还蛋白可以增强NF-Y异源多聚蛋白与CCAAT盒结合的活力，当－SH基被烷化后NF-Y与CCAAT的结合活性受到破坏。通过将蛋白分子的半胱氨酸残基逐个突变去除，证明受调节的是NF-YB亚基中的第85位与89位上的两个半胱氨酸，已知硫氧还蛋白与谷胱甘肽氧还蛋白一样，也是细胞中一种氧化还原调节系统， 因此我们报告的glutaredoxin在没有HAP5的情况下能使HAP2 与HAP3 结合在CCAAT盒上的发现，与他们的结果特别是硫氧还蛋白对NF-Y蛋白与CCAAT盒结合活性的调节作用可以互为佐证，并对进一步了解HAP5(NF-YC)亚基的功能有重要的意义。国家自然科学基金(39893320)资助项目。作者单位：中国科学院上海植物生理研究所，上海 200032

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　目前研究发现，红茶提取物有抗溃疡效果，对阿司匹林等药物和酒精引起的溃疡有促进愈合的作用。茶的提取物还能调控胃酸的分泌，促进胃动力。在小鼠实验当中，红茶能够提高胃肠道的动力，研究者认为，这可能与茶中成分对前列腺素等激素和一氧化氮的调控有关。用豚鼠所做实验发现，红茶提取物能促进肠道蠕动，其中对肠动力起作用的活性成分很可能是茶红素（Chaudhurietal，2000）。　　还有研究发现，包括红茶、绿茶、普洱茶，都有一定的抑菌作用，喝红茶能降低消化道中的有害细菌，比如金黄色葡萄球菌，而喝中国茶较多的人当中，幽门螺杆菌的感染率明显降低（Yeeetal，2002）。　　有研究证明红茶提取物在动物实验当中具有抗腹泻的效应，有调节肠粘膜细胞通透性的作用。还有研究提示茶提取物对肠道菌群平衡可能有所帮助。在药物引发结肠炎的动物模型当中，从红茶中提取的茶红素具有预防腹泻和减少结肠结构损伤的作用。研究者认为红茶对肠道炎症的保护作用可能是由于调控一氧化氮形成、调节细胞因子以及抗氧化作用等机制（Maityetal，2003）。　　可见，红茶对肠胃有益的说法，看来并非空穴来风。肠胃功能改善之后，对各种营养物质的消化吸收能力都会增强，即便茶本身所含多酚类物质能结合少量的蛋白质和铁，整体效果来说，仍然有助于改善人体的营养状况。　　总之，茶的好处甚多。用餐时喝一杯茶不会影响消化吸收，而且，如果用茶替代各种汤菜，能减少一日中食盐的摄入量（一小碗咸味的汤，约含1克盐），对于控制血压是有利的，非常值得提倡。　　不过必须提到的是，不同人可能适合不同的茶。　　红茶对消化道的动力作用和保护比较显著，可能适合那些胃肠功能比较弱或消化道有损伤的人。　　绿茶的抗菌、抗炎作用比较强，帮助控制血脂和减少脂肪吸收的效果比较明显，可能更适合那些食欲旺盛、消化功能强的人。　　普洱茶和红茶对于胃酸过多的人可能是不适合的，其中咖啡因含量比较高，而咖啡因不利于控制胃酸返流到食管。　　如果不知道自己适合喝什么，可以先试一试。身体感觉最舒服的，就是最适合自己的，完全无需勉强。　　此外，如果买不到脱咖啡因的茶，又对咖啡因比较敏感，那么最好还是在下午4点以后停止喝茶，避免影响晚上睡眠。　　有些人对咖啡因特别敏感，空腹喝茶会发生头晕心悸等不适，那么也要避免喝浓茶，而且在餐后再喝比较稳妥。

素有“绿茶伤胃，红茶养胃”之说，这种说法可能是因为绿茶的茶多酚含量高于红茶。但事实上，虽然红茶的茶多酚比绿茶的茶多酚含量低，但红茶的咖啡因含量却高于绿茶。 具体来讲，茶叶中含有的两种主要成分，一种是茶多酚，另一种是咖啡因（与咖啡中含有的相同），这两种物质对胃肠道都是有刺激作用的，尤其在空腹状态下刺激性更强。绿茶是不发酵茶，而红茶是全发酵茶，鲜叶中的茶多酚在加工过程中，发生了酶促反应，衍生出红茶独特于绿茶的茶红素、茶多糖等功能成分，且红茶中茶多酚的含量也因此低于绿茶，但红茶中仍有较高含量的茶多酚。 另外，有研究显示茶叶的发酵时间与咖啡因含量呈正相关，红茶在发酵后咖啡因的含量有所增加，且高于绿茶的咖啡因含量。目前研究表明咖啡因除可以通过兴奋中枢神经系统的迷走中枢，刺激迷走神经胃支从而引起胃酸分泌增加和胃腺分泌亢进外，还可通过局部刺激胃肥大细胞组织胺而引起胃壁细胞泌酸增加，因此在空腹下饮用高咖啡因含量的红茶，特别是浓茶，会产生更多的胃酸，对胃肠道的刺激性更强，尤其会加重对本身存在胃溃疡等胃病患者的病情，故胃病患者不建议饮茶。如丁发银等研究发现长期大量吸食咖啡因可延长消化性溃疡常规治疗的疗程和降低疗效。而且，美国最权威的内视镜外科医生新谷弘实表示，大量临床资料显示有大量饮茶习惯的人多数胃功能并不良好，且发现用内视镜来观察常喝红茶、绿茶等富含茶多酚的茶的人的胃部，常可发现粘膜变薄的萎缩性变化，而目前已知萎缩性变化或萎缩性胃炎很容易发展为胃癌。因此，大量饮茶是非常不建议的。Dubey等对比正常人与十二指肠溃疡患者饮茶后的胃酸分泌情况也建议十二指肠溃疡患者最好少喝茶，尤其不要喝浓茶。 虽然目前也有相关红茶对胃肠道生理调节与疾病预防作用的研究，但这些实验大多是基于动物实验或体外实验，且部分结论是红茶的某些单独的功能成分对胃肠道的作用，而红茶汤内成分复杂含，以上研究并不能简单推断出红茶汤作为一个完整体经人体饮用后，对人体也会产生相应的作用。 总结：喜欢喝茶的正常人要规律适量饮用，浓茶不可取。而胃肠功能较弱、胃酸分泌过多或有胃溃疡的胃病患者并不适合饮用茶，切不可听信“红茶养胃”而过多地饮用红茶。 当然，不容否认的是，部分研究发现引用红茶可以预防胃癌的发生，所以 健康 人可以适量饮用红茶，不过最好能换成绿茶，绿茶的 健康 效应最为明显 参考文献： [1] 罗婧, 顾颖颖, 刘易成, 等. 不同茶叶中茶多酚和咖啡因成分的对比分析[J]. 贵州茶叶, 2013, 41(1): 10-15. [2] 武晓英. 四类茶叶的成分研究（硕士学位论文） [D]. 辽宁师范大学, 2011, 05. [3] 丁发银, 马海红. 长期大量吸食咖啡因对消化性溃疡常规治疗影响的观察[J]. 长治医学院学报, 1999, (4): 261-261. [4] 易超然, 卫中庆. 咖啡因的药理作用和应用[J]. 医学研究生学报, 2005, 18(3): 270-272. [5] 杜钰, 袁海波, 陈小强, 等. 红茶对胃肠道生理调剂与疾病预防作用的研究进展[J]. 茶叶科学, 2017, 37(1): 10-16. 　　饮茶是中国的传统，很多人每天都离不开茶，但是肠胃不好的人能喝茶吗？要喝什么茶好呢？中医认为人的体质有燥热跟虚寒之别，而我们今天要讲的茶叶也是有凉性以及温性之分的。那饮茶有什么讲究呢？燥热体质的人喝什么茶呢？虚寒的人又适合喝什么茶呢？下面我们一起来看看喝茶要怎样喝？肠胃不好的人得选择什么茶？ 　　常见的茶叶分主要分为绿茶、清茶、红茶、黑茶等几大类。这些分类大致上是依据茶叶的发酵程度由低至高划分的，绿茶和清茶中的铁观音由于发酵很低，所以是属于凉性茶，清茶中的乌龙茶、大红袍等属于中性茶，而我们常见的红茶、普洱茶属于温性茶。 　　体质比较燥热，容易上火，爱熬夜，经常抽烟的人就得多喝凉性茶，抽烟的人多喝绿茶是很有作用的。肠胃比较虚弱的人就要注意啦，最好就不要和凉性茶，要多喝温性茶，比如红茶之类的。老年人肠胃比较虚弱，适合饮用的是中性茶或者温性茶，例如红茶跟普洱茶。苦丁茶凉性比较重，但是其清热解毒跟降血脂的功能比其他茶叶更好，比较适合燥热体质的热饮用。 　　要想养胃的人在日常生活中就应该多喝温性以及中性的茶，例如大红袍、红茶以及普洱茶等，如果加入几点牛奶进去做成奶茶效果会更好哦！或者不加奶，直接加糖也是可以的，有些人吸收功能比较差，喝奶茶可能会腹泻，那就喝熟普洱茶吧，熟的普洱茶的发酵程度比较高，因为熟普洱发酵之后会产生很多微量元素，能够促进食欲和营养吸收。 　　 下面我们来看看不同茶叶的性质有什么不同吧！ 　　绿茶：过敏体质的人注意要尽量少喝绿茶，因为这很容易引起呕吐，我国大部分名茶都是属于绿茶类的，绿茶的制作工艺中没有发酵的环节，所以其中含有的营养成分比其他种类的茶叶高，同时所含的叶绿素业比较多，对肠胃的刺激比较大，肠胃比较弱，以及老人家尽量要少喝或者不喝绿茶哈。 　　铁观音：铁观音属于半发酵茶，铁观音的发酵期是很短的，所以它的性质是偏寒性的，消脂功效很好，能够促进消化。但是要注意啦！空腹不能喝铁观音哈，很容易造成醉茶的哈。 　　大红袍：大红袍属于温性茶，大红袍的性质是温而不寒不伤胃的，滋味醇厚，饭后齿颊留香，冲泡多次之后还有原茶的桂花香味。 茶对身体有益，这是不争的事实，茶伤胃这也是实事，相比之下红茶比绿茶对胃的伤害轻，并不能说是红茶养胃，任何茶单纯对胃来讲，都有多少危害，对胃真正有益的还是白开水。 正常情况下，可以养胃的。 祖国医学认为红茶甘温，可养人体阳气，可生热暖腹，增强人体的抗寒能力。因此说红茶可以养胃，特别适合冬季来饮用。 那在现代营养学来说，红茶的加工方式是经过发酵烘制之后，茶叶里的茶多酚在氧化酶的作用下发生酶促化反应后导致茶多酚含量减少，氧化成茶色素，因此对胃部的刺激性就随之减小。另外茶叶本身就有能够促进消化，去油腻的功效，对胃肠道消化功能弱的人、胃动力不足的人来说，确实可以起到“养胃”作用。 研究证明，茶叶有一定的抑菌作用，喝红茶能降低消化道中的有害细菌，比如金黄色葡萄球菌，还有就是经常喝茶的人，胃内幽门螺杆菌的感染率明显降低。[Yee et al,2002] 茶与胃癌关系的研究认为茶可以降低胃癌的发病风险，研究结果显示增加饮茶（每天>20g）可降低胃癌的发病风险，综合评价等级为B级（B级的意思是在大多数情况下该证据体的结论指导实践是可信的）[食物与 健康 科学证据共识] 中国胃病专业委员会研究发现，口服红茶提取物茶色素6周，溃疡病胃镜复查愈合，慢性胃炎（包括慢性萎缩性胃炎）食欲恢复正常，精神明显好转，上腹疼痛消失者达到96%，腹胀消失者达到90%。 还有研究证明红茶提取物在动物实验当中具有抗腹泻的效应，有调节肠黏膜细胞通透性的作用，对肠道菌群平衡可能有所帮助。在药物引发结肠炎的动物模型当中，从红茶中提取的茶红素具有预防腹泻和减少结肠结构损伤的作用。研究者认为红茶对肠道炎症的保护作用可能是由于调控一氧化氮形成、调节细胞因子以及抗氧化作用等机制( Maity et al ,2003) 从以上查到的一些关于红茶和胃方面的资料来看，说红茶对胃和肠道有益的说法，并非空穴来风。 红茶除了对胃肠道好以外，还具有预防心血管疾病、调节血脂异常、预防帕金森病、降血糖等好处。 参考资料：[茶与 健康 ] [食物与 健康 科学证据共识] 作者：崇珊珊 国家二级公共营养师/国家高级 健康 管理师/王兴国教授营养特训班三期学员 不同的茶有不同的味道，有时候喝一杯茶，浸泡的不光是经过炒制的叶片，更是疲倦的身心，烦躁的心也能在喝茶的清静下慢慢恢复本真。喝茶不光是喝的茶水，更是一种心情。 喝茶也是一件十分风雅的事，也可以借茶道来修身养德，一边喝茶一边也能谈生意，所以茶文化也很深的学问。 “吃的苦中苦，方为人上人”，有时候茶和人也有着惊人的相似度，茶只有经历了与自然的博弈与抗争，才能在热水的冲泡下散发出淡淡的香味，这也和人一样，只有经历了不同的命运，才能够成熟。 十大名茶主要有，西湖龙井、福建乌龙、洞庭碧螺春、黄山毛峰、庐山云雾茶、安徽铁观音、君山银针、六安瓜片、信阳毛尖、祁门红茶。祁门红茶是全发酵茶中极品，主要生产安徽黄山支脉区的祁门， 红艳明亮的茶汤，相似兰花的香气，有甘鲜醇厚的味道，实在是回味无穷。 对于有些来说喝红茶真的能养胃，任何东西并不一定都有益处，包括喝红茶，所以我们是否该喝红茶应该根据自身的状况来选择，有功效的食物不一定对所有人都有效，当然对于大部分人是肯定有效的，喜欢红茶的人比较多，现在有胃病的人太多，我们是否该选择喝红茶来养胃？ 首选你要搞清楚自己胃病是什么原因引起的，绝大部分人都跟饮食习惯有关系，知道自身的毛病之后先要改掉不好的习惯，再选择食用养胃的食物、或者茶饮，如果原有的不良习惯继续，然后一边又在养胃，这就好比先伤后治，永远也养不好。 喝红茶是真的能养胃，功效我就不再重复介绍，我想说的是，胃病的根源是什么找出来，然后再看是否适合选择养胃的东西，胃病的症状很多，必须先搞清楚自己的胃病，不要一听到能养胃就想用，急性胃炎、慢性胃炎、胃溃疡、等等不一样的症状该如何改善，然后再选择食物养胃喝茶养胃。 发酵茶，养胃的，但是不要喝太浓！ 养胃不养胃： 一要看胃： 每个人体质有差异：寒热温凉，虚寒温燥各有偏颇。更何况现代生活节奏快，饮食起居习惯多不规律，各种胃病高发。 二要看茶： 快销风行，为满足当下逞口鼻之欲，新工艺机械化烘青提香、做色茶有了充分的市场。殊不知高温炒制、烘青提香所致燥热之性，久饮如温水煮青蛙。 选择茶品，务必要注意： ①首要的是：改变不良的生活习惯、意识，才是养胃、 养生 之本，才有机会借助外物辅宜。 ②茶，并非医治百病的神药，有病看病，无病保健，求茶不若求己。 ③茶，无分类，养胃不必非红茶。只要是茶青所在茶源区域自然环境优越无污染；只要是茶青内含物质充足；只要是传统工艺加工，无燥热助火之性。 皆为益气滋阴之茶品，只会有益身心而百害无一，更何况胃之求养。 @紫砂泥的传人 ： 图示：若木之华千年古树红茶 您看出哪里不养胃了么？ 我们先说什么是红茶，红茶是按照制作工艺划分中国六大茶类之一的一个品种，它最大的特点就是全发酵，而且红茶发酵是物理发酵，并不是像黑茶一样的在酶促进的化学转化。 而经过发酵的红茶，茶性由寒性变得温和，所以红茶是暖性的，我们平时知道的人的胃最怕寒冷与酸，所以胃不好的人喝绿茶就会觉得不舒服，而红茶却不会出现这个问题，就是红茶有暖胃的作用。 至于红茶是否可以养胃，则是中医的范畴，我们只要记住红茶，黑茶可以暖胃就可以了。

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01 高一的夏天!绝对要交到男朋友02 和前女友的三角关系03 是喜欢的男生，还是以前的男友04 kiss,喜欢上你了05 踢飞禁断之爱内链!06 少女的大决心!爱情告白大作战!07 击沉，史上最差劲的告白!08 无法再次振作,大失恋!09 起死回生，要成为他的女朋友!10 和前女友的对决,露点大作战!11 无可奈何，和前女友复合的爱12 把爱夺回来,用本命巧克力磨炼女性魅力!13 发热!在他的房间里的初吻14 MAITY让人心跳至死15 危险的男子，MAITY的甜蜜诱惑16 MAITY的魔法,变化的爱情模样!17 爱的铁拳，收下吧,少女魂18 史上最棒的生日19 急转直下，第一次约会是厄运的开始20 宣战通告,醋意燃烧的危险美少女21 分手的预感，理沙和大谷踏上不同的道路22 来自大谷的搅局宣言!23 方向各种各样,大家情况都不尽相同24 永远在一起

　　第7集 　　大谷觉得理沙的告白只是开玩笑；而理沙则因为大谷完全不把自己当恋爱对象，感到十分愕然。之后大谷发现理沙一个人在教室落泪，便跑去安慰她，却造成反效果。理沙气起来表示，自己喜欢的人就是大谷… 　　第8集 　　理沙因为两人的关系发生改变，而感到不知所措。大谷则表示要考虑看看再答覆。毕业旅行到了北海道之后，两人在礼品店中有独处的机会。大谷说自己没办法突然将理沙视为女朋友，并向理沙道歉…　　第9集 　　理沙为了怕信子他们担心，决定和大谷回到普通朋友关系。没想到毕业旅行第二天，竟然碰到带家人来旅行的海坊主。理沙得知海坊主和妻子高中时曾经分手，但日后相逢并结了婚。理沙受到鼓舞，而向大谷表示喜欢他的心情是不会改变的… 　　第10集 　　理沙和大谷一起去参加圣诞派对，原来那是大谷的前女友神崎，邀他出席国中篮球社的同学会，可是当天神崎却突然缺席。理沙在派对上得知大谷和神崎的过去：当年两人被关在体育仓库时，大谷向神崎告白… 　　第11集 　　神崎邀请大谷去篮球大赛，因为神崎刚和男友分手，同学都想撮合神崎和大谷，而理沙则拼命阻止。大赛当天，神崎向大谷表示希望下次能两个人单独见面。理沙觉得已经没有自己的容身之地，而黯然离开体育馆… 　　第12集 　　因为大谷不经意的一句话「我想要情人节巧克力」，让理沙非常高兴，但大谷其实完全不懂理沙的心。于是中尾便出面点醒大谷，大谷也加以反省。当理沙准备将本命巧克力送给大谷时，大谷先为自己不负责任的言行道歉，并表示无法接受理沙的巧克力… 　　第13集 　　理沙要和大谷一起去演唱会，但是演唱会前一天大谷却发烧请假，于是理沙便到大谷家去探望。房间里只剩两人相对，结果大谷竟然说就算两人独处，也完全没有任何遐想。理沙立刻问难道她就这样没有魅力吗？没想到此时大谷竟然吻上理沙的唇… 　　第14集 　　大谷完全不记得自己吻了理沙，后来总算想起来，竟然说那只是因为高烧而发生的意外。恼羞成怒的理沙便强吻大谷，可是大谷却无动于衷。理沙终于确认大谷根本不把她当女生看，便宣言要放弃大谷… 　　第15集 　　理沙虽然嘴里说喜欢舞竹国海老师（Maity老师），其实心里依旧无法忘情大谷。Maity老师温柔地安慰哭泣的理沙，却被大谷给看见了。Maity老师担任篮球社的代理顾问，和大谷发生对峙。Maity老师表示要抢走理沙，大谷则断言自己对理沙根本没意思… 　　第16集 　　理沙被大谷连甩了2次。Maity老师在篮球练习结束之后，继续挑衅大谷，结果大谷吃醋回喊「理沙喜欢的人是我！」。但是另一方面，理沙希望和大谷恢复以前的朋友关系，两人的心情背道而驰… 　　第17集 　　理沙和大谷恢复成普通朋友的关系，理沙也决定将「喜欢」的心情珍藏在心中。篮球社最后的大赛即将来临，但第一战的对手竟然是去年的冠军队，可说一点胜算也没有。就在大谷丧失斗志的时候，理沙给了他当头棒喝。比赛结束后，大谷终于说出自己的心意… 　　第18集 　　大家在理沙的生日办庆祝派对，虽然大谷没有来，但理沙和朋友们玩得很热闹。理沙突然想起去年的生日，并且发现就算再开心，大谷不在就没有意义。就在此时，理沙收到大谷传来的简讯 　　第19集 　　理沙和大谷终于成为一对了！但是第一次约会却状况频频，又是迟到、又是忘记包包…感觉并不顺利。当理沙买饮料回来，竟然看到神崎和大谷在一起！理沙忍不住想逃走，但大谷却大大方方向神崎介绍：「理沙是我的女朋友」… 　　第20集 　　理沙第一次进大谷的房间，但住在隔壁的美美却突然跑来，并当场宣战，要把大谷抢过来！美美从小就喜欢大谷，在大谷面前总是装可爱。但自从理沙出现后，美美就经常破功露出本性… 　　第21集 　　理沙得知大谷想考大学而吓了一跳，信子决定要去北海道读短大。但这样就必须和中尾谈远距离恋爱，当信子知道中尾并不想分隔两地，便开始犹豫温柔的中尾见状就故意演戏想让信子下定决心去北海道… 　　第22集 　　大谷希望将来能成为小学老师开始去补习班补习，理沙因为寂寞到附近的便利商店打工，结果认识了同是海坊主歌迷的小堀。某日大谷目睹小堀亲吻理沙，理沙解释那是小堀擅自偷亲。但当小堀邀约一起去看海坊主的演唱会时理沙还是忍不住答应了… 　　第23集　　大谷亲眼看到小堀和理沙去参加演唱会决心要和理沙分手，理沙伤心之余将自己亲手做的助考礼物放在大谷家门前。彼此不说话的两人在圣诞节当天终于确认了对对方的感情。而此时，千春和铃木也出现了危机…　　第24集　　终于到了大谷考试的日子了！但是睡过头加上暴风雪电车停驶导致大谷的心情低落，在理沙的鼓励下他最终按时到了考场…大谷考试的结果会是…小泉又将如何选择自己的人生道路…恋爱情结最终章——永远在一起~~~

　　分集名称　　01 高一的夏天!绝对要交到男朋友　　02 和前女友的三角关系　　03 是喜欢的男生,还是以前的男友　　04 kiss,喜欢上你了　　05 踢飞禁断之爱!　　06 少女的大决心!爱情告白大作战!　　07 击沉,史上最差劲的告白!　　08 无法再次振作,大失恋!　　09 起死回生,要成为他的女朋友!　　10 和前女友的对决,露点大作战!　　11 无可奈何,和前女友复合的爱　　12 把爱夺回来,用本命巧克力磨炼女性魅力!　　13 发热!在他的房间里的初吻　　14 MAITY让人心跳至死　　15 危险的男子,MAITY的甜蜜诱惑　　16 MAITY的魔法,变化的爱情模样!　　17 爱的铁拳,收下吧,少女魂　　18 史上最棒的生日　　19 急转直下,第一次约会是厄运的开始　　20 宣战通告,醋意燃烧的危险美少女　　21 分手的预感,理沙和大谷踏上不同的道路　　22 来自大谷的搅局宣言!　　23 方向各种各样,大家情况都不尽相同　　24 永远在一起　　分集剧情　　第1集　　身高172cm的小泉理沙和156cm的大谷敦士，从进入每户学园之后，就互相吐槽、彼此抬槓，是大家眼中的斗嘴好搭档。理沙对隔壁班的铃木凉二一见钟情，大谷对理沙的朋友田中千春颇有好感。于是理沙和大谷便携手合作，邀约铃木和千春一起出游…　　第2集　　理沙和大谷两人都很喜欢歌手海坊主，并相约一起去看海坊主的圣诞演唱会。就在此时，大谷的前女友神崎真由出现了，希望圣诞节两人能见个面，让大谷有些慌了手脚。理沙为了不破坏大谷的好事，决定一个人去看演唱会…　　第3集　　突然抱住理沙的超级大帅哥，原来是理沙小时候的朋友深川遥。情人节又到了，理沙犹豫该不该送巧克力给大谷。结果大谷说假如是人情巧克力，他就勉强收下吧。虽然理沙多少有点意气用事，但还是很高兴。没想到深川遥却出现了，还和大谷吵了一架…　　第4集　　升上高二的春天。理沙和大谷又分到同一班，深川遥则分到隔壁班。大谷更加热中打篮球，理沙也买了护腕要送给他。可是理沙却无法坦率表达心意，两人老是斗嘴斗个不停。就在此时，出现了和理沙个性完全相反、非常可爱的寿圣子…　　第5集　　圣子主动献吻之后，大谷对他好感度大增。大谷练习篮球时手指受伤，圣子在保健室照顾他，并且投入大谷的怀抱。可是…圣子其实是名叫圣子郎的男生！而理沙受到圣子的刺激，决定坦承面对自己的感情…　　第6集　　大家都从旁协助理沙进行告白大作战，可是对爱情超迟钝的大谷，完全不知道理沙的心意。热心的大谷还表示要帮理沙告白，直问理沙喜欢的对象到底是谁？到了理沙生日当天，大谷约理沙出来…　　第7集　　大谷觉得理沙的告白只是开玩笑；而理沙则因为大谷完全不把自己当恋爱对象，感到十分愕然。之后大谷发现理沙一个人在教室落泪，便跑去安慰她，却造成反效果。理沙气起来表示，自己喜欢的人就是大谷…　　第8集　　理沙因为两人的关系发生改变，而感到不知所措。大谷则表示要考虑看看再答复。毕业旅行到了北海道之后，两人在礼品店中有独处的机会。大谷说自己没办法突然将理沙视为女朋友，并向理沙道歉…　　第9集　　理沙为了怕信子他们担心，决定和大谷回到普通朋友关系。没想到毕业旅行第二天，竟然碰到带家人来旅行的海坊主。理沙得知海坊主和妻子高中时曾经分手，但日后相逢并结了婚。理沙受到鼓舞，而向大谷表示喜欢他的心情是不会改变的…　　第10集　　理沙和大谷一起去参加圣诞派对，原来那是大谷的前女友神崎，邀他出席国中篮球社的同学会，可是当天神崎却突然缺席。理沙在派对上得知大谷和神崎的过去：当年两人被关在体育仓库时，大谷向神崎告白…　　第11集　　神崎邀请大谷去篮球大赛，因为神崎刚和男友分手，同学都想撮合神崎和大谷，而理沙则拼命阻止。大赛当天，神崎向大谷表示希望下次能两个人单独见面。理沙觉得已经没有自己的容身之地，而黯然离开体育馆…　　第12集　　因为大谷不经意的一句话「我想要情人节巧克力」，让理沙非常高兴，但大谷其实完全不懂理沙的心。于是中尾便出面点醒大谷，大谷也加以反省。当理沙准备将本命巧克力送给大谷时，大谷先为自己不负责任的言行道歉，并表示无法接受理沙的巧克力…　　第13集　　理沙要和大谷一起去演唱会，但是演唱会前一天大谷却发烧请假，于是理沙便到大谷家去探望。房间里只剩两人相对，结果大谷竟然说就算两人独处，也完全没有任何遐想。理沙立刻问难道她就这样没有魅力吗？没想到此时大谷竟然吻上理沙的唇…　　第14集　　大谷完全不记得自己吻了理沙，后来总算想起来，竟然说那只是因为高烧而发生的意外。恼羞成怒的理沙便强吻大谷，可是大谷却无动于衷。理沙终于确认大谷根本不把她当女生看，便宣言要放弃大谷…　　第15集　　理沙虽然嘴里说喜欢舞竹国海老师（Maity老师），其实心里依旧无法忘情大谷。Maity老师温柔地安慰哭泣的理沙，却被大谷给看见了。Maity老师担任篮球社的代理顾问，和大谷发生对峙。Maity老师表示要抢走理沙，大谷则断言自己对理沙根本没意思…　　第16集　　理沙被大谷连甩了2次。Maity老师在篮球练习结束之后，继续挑衅大谷，结果大谷吃醋回喊「理沙喜欢的人是我！」。但是另一方面，理沙希望和大谷恢复以前的朋友关系，两人的心情背道而驰…　　第17集　　理沙和大谷恢复成普通朋友的关系，理沙也决定将「喜欢」的心情珍藏在心中。篮球社最后的大赛即将来临，但第一战的对手竟然是去年的冠军队，可说一点胜算也没有。就在大谷丧失斗志的时候，理沙给了他当头棒喝。比赛结束后，大谷终于说出自己的心意，可理沙却睡着了。　　第18集　　大家在理沙的生日办庆祝派对，虽然大谷没有来，但理沙和朋友们玩得很热闹。理沙突然想起去年的生日，并且发现就算再开心，大谷不在就没有意义。就在此时，理沙收到大谷传来的简讯。　　第19集　　理沙和大谷终于成为一对了！但是第一次约会却状况频频，又是迟到、又是忘记包包…感觉并不顺利。当理沙买饮料回来，竟然看到神崎和大谷在一起！理沙忍不住想逃走，但大谷却大大方方向神崎介绍：「理沙是我的女朋友」…　　第20集　　理沙第一次进大谷的房间，但住在隔壁的美美却突然跑来，并当场宣战，要把大谷抢过来！美美从小就喜欢大谷，在大谷面前总是装可爱。但自从理沙出现后，美美就经常露出本性…　　第21集　　理沙得知大谷想考大学而吓了一跳，信子决定要去北海道读短大。但这样就必须和中尾谈远距离恋爱，当信子知道中尾并不想分隔两地，便开始犹豫。温柔的中尾见状就故意演戏想让信子下定决心去北海道…　　第22集　　大谷希望将来能成为小学老师开始去补习班补习，理沙因为寂寞到附近的便利商店打工，结果认识了同是海坊主歌迷的小堀。某日大谷目睹小堀亲吻理沙，理沙解释那是小堀擅自偷亲。但当小堀邀约一起去看海坊主的演唱会时理沙还是忍不住答应了…　　第23集　　大谷亲眼看到小堀和理沙去参加演唱会决心要和理沙分手，理沙伤心之余将自己亲手做的助考礼物放在大谷家门前。后来两人在圣诞节晚上不约而同的来到了圣诞树下，并终于确认了对对方的感情。而此时，千春和铃木也出现了危机…　　第24集　　终于到了大谷考试的日子了！但是睡过头加上暴风雪电车停驶导致大谷的心情低落，在理沙的鼓励下他最终按时到了考场…大谷考试的结果会是什么样的呢？小泉又将如何选择自己的未来职业？恋爱情结最终章——永远在一起~~~

肯定不是呀！他们后来分手了！哈哈哈哈哈哈哈哈哈哈哈

黎梦恬外文名：barbie别名：狐狸妹妹，闪闪maity国籍：中国民族：汉出生地：湖北十堰市出生日期：1992-06-04职业：影视演员、平面模特 毕业院校：北京电影学院主要成就：神仙道》《赤壁ol》《零纪元》体重：52KG身高：172CM血型：B星座：双子座

我也想知道她是谁！这么大。。。

好像哪里见过

1. dry tears/ TVサントラ(TV sound track) 2. リサ(丽莎)/ TVサントラ 3. delire/ TVサントラ 4. deep past/ TVサントラ 5. DUNK SHOOT/ TVサントラ 6. ほのぼの(和谐)/ TVサントラ 7. Theme of ラブ★コン(恋爱情结的主题)/ TVサントラ 8. 不安なリサ(不安的丽莎)/ TVサントラ 9. ボサなリサ(巴萨诺瓦版丽莎)/ TVサントラ [注：bossa=bossa nova] 10. 18世纪のバッハ(18世纪的巴赫)(Organ ver.)/ TVサントラ 11. 22世纪のバッハ(22世纪的巴赫)/ TVサントラ 12. つぶれたトマト(摔烂的西红柿)/ TVサントラ 13. 学园生活(アップテンポ[uptempo])/ TVサントラ 14. オーケストラなリサ(交响版丽莎)/ TVサントラ 15. 悪巧み(诡计)/ TVサントラ 16. Theme of ラブ★コン[恋爱情结的主题](スカver.)[ska版]/ TVサントラ 17. akane iro(茜色)/ TVサントラ 18. complex/ TVサントラ 19. dry tears(BAND ver.)/ TVサントラ 20. サンバなリサ(桑巴版丽莎)/ TVサントラ 21. 漫才コンビ(相声组合)/ TVサントラ 22. Theme of ラブ★コン[恋爱情结的主题](オルゴールver.)[音乐和版]/ TVサントラ 23. 駅までダッシュ、駅からダッシュ(跑到车站，从车站开始跑!)/ TVサントラ 24. ラグタイムなリサ(拉格泰姆版丽莎)/ TVサントラ 25. world"s end～地球の果て～(世界的尽头)(pf ver.)/ TVサントラ 26. マイティのテーマ(Maity的旋律)/ TVサントラ 27. せいこのテーマ(圣子的旋律)/ TVサントラ 28. analyst(分析者)/ TVサントラ 29. premier amour(最爱)/ TVサントラ 30. analyst(Strings ver.)(分析者弦乐版)/ TVサントラ 31. 歌舞伎なリサ(歌舞伎版丽莎)/ TVサントラ 32. Theme of ラブ★コン[恋爱情结的主题](orch.blues harp.ver.)[交响.布鲁斯口琴.版]/ TVサントラ 33. world"s end～地球の果て～(世界的尽头)/ TVサントラ 34. しょうがねぇぜ(没办法)/ 海坊主BAND 35. しょうがねぇぜ～instrumental～(没办法[伴奏])/ TVサントラ

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网上不是都有吗