barriers / 阅读 / 详情

用RNA反转录得到的cDNA一定要做RACE吗?目的是干什么呢?哪位高手指点指点啊!

2023-08-01 18:07:52
共1条回复
ardim

RACE的目的是为了获得全长cDNA。如果你只想得到CDS的话,做不做RACE一般无所谓。不过要研究5"UTR或3"UTR的话就最好用RACE获得全长的cDNA。

相关推荐

表达谱芯片中扫描出了很多rikn cDNA **** gene, 这类cDNA是指什么?

mRNA反转录后就是cDNA,CDS也就是orf,翻译蛋白的部分5"utr-CDS-3"utr 就是cDNA了嘛,cDNA包含有CDS
2023-08-01 12:41:281

反转录的cDNA是什么样的?

反转录酶可以将RNA模板转录成单链cDNA,这个cDNA具有以下特点:单链结构:反转录的cDNA是单链结构,与RNA相似,不像DNA双链结构那样稳定。长度可变:反转录酶的反应过程中,会合成不同长度的cDNA,因此,反转录的cDNA长度可变,取决于RNA模板的长度和反转录酶的反应条件。缺失RNA修饰:反转录酶不能保留RNA的各种修饰,如RNA上的甲基化、剪接、5"端帽子等,因此,反转录的cDNA不包含这些RNA修饰。可被PCR扩增:反转录的cDNA可以被PCR扩增,用于进一步的分子生物学研究。反转录的cDNA可以用于基因表达分析、克隆和构建基因文库等实验。需要根据实验需求选择适当的反转录酶和反转录条件,以获得理想的cDNA产物。
2023-08-01 12:41:502

什么是ctDNA,dsDNA,ssDNA,cDNA?

ctDNA(小牛胸腺DNA)是一种很常用的双链DNA,dsDNA是双链DNA的简称,ssDNA是单链DNA的简称,cDNA(complementDNA)表示互补DNA。
2023-08-01 12:42:071

什么是ctDNA,dsDNA,ssDNA,cDNA

循环肿瘤DNA(ctDNA),是指肿瘤细胞体细胞DNA经脱落或者当细胞凋亡后释放进入循环系统,随着基因测序的飞速发展,目前,已能在血液中对其进行检测并计数。ctDNA来自肿瘤细胞的体细胞突变,不同于遗传突变的是其存在于体内每个细胞。因此,ctDNA是一种特征性的肿瘤生物标记物,并且还可以被定性、定量和追踪。http://www.biodiscover.com/news/research/115466.html;dsDNA:双链DNA,double-stranded DNA;ssDNA:单链DNA,single-stranded DNA;cDNA:互补DNA,complementary DNA,是以mRNA分子为模板,合成的一条与mRNA序列互补的单链DNA。
2023-08-01 12:42:141

dna和cdna有什么区别如题

楼上说法没错 但没说出其区别。对于真核生物的基因来说,直接从染色体上来的基因片段(DNA)一般比从mRNA来的基因片段(cDNA)要长。因为mRNA在后成熟过程中 剪切掉了内含子,留下的cDNA都是有效的氨基酸决定序列(外显子)。如果你把真核生物的基因放在原核生物中表达 一定要用cDNA作基因 而不能用原始的DNA,因为原核生物不能剪切掉内含子。 简单回答 抛砖引玉 相信你会理解
2023-08-01 12:42:221

为什么基因组文库中有启动子和内含子而cDNA文库中没有呢,原因是什么,求解释

因为cDNA是由成熟mRNA逆转录而成的。成熟mRNA是由基因组DNA转录并加工而成的,DNA转录的时候是不会把启动子也转录的,转录起始位点都在启动子下游。至于没有内含子,是因为(真核)mRNA成熟的过程中剪接体(也就是一系列核内小分子核糖核蛋白snRNPs)会把前体mRNA的内含子切下来(当然也有部分前体mRNA的内含子本身是核酶,自己把自己切下来的),再把外显子拼接成成熟mRNA(当然完全成熟还差一步3"端多聚腺苷酸化,所以真核的cDNA总有一端是polyA)。
2023-08-01 12:42:321

shRNA在质粒中?和cDNA有什么区别,详细讲一下吧。我的qq378997276.非常感谢!

shRNA是指一种发卡结构的RNA, 可以被Drosha识别剪切,进一步加工后形成miRNA或siRNA进行RNAi过程,一般可以将其基因序列连接到质粒中转入细胞,多用于siRNA的过表达。cDNA是指从细胞中提取总RNA后将其反转录所得到的DNA,与原来的基因序列相比,cDNA只包含编码区的序列。
2023-08-01 12:42:541

请问什么是cDNA第一链?

CDNA就是没有启动子和终止子的有效基因表达片段,也有两条链,第一条链是哪个,你看题意就行还可以看出来
2023-08-01 12:43:052

cdna什么时候需要稀释

不需要稀释。cdna是染色体的主要化学成分,同时也是基因组成的,有时被称为“遗传微粒”,不需要稀释,先看看结果,如果没有跑出来再适当的稀释,逆转录之后的cDNA里面可能含有抑制物。
2023-08-01 12:43:121

从CDNA文库和基因组文库中钓出的目的基因有什么不同

前者的基因不含有非编码序列,后者是完整的基因。
2023-08-01 12:43:223

兄弟们,RNA测序中cDNA的作用是什么?

这始终注重是什么感觉?这个定义的重要的话,就是遗传学的一个遗传方法
2023-08-01 12:43:336

真核生物的cDNA和基因的构成有什么区别?

真核生物的cDNA是提取细胞中的mRNA逆转录出来的,不具有启动子内含子等,而真核生物的基因包括了这种生物的全套基因,具有启动子内含子等。
2023-08-01 12:43:521

什么是基因文库,名词解释定义是什么?

基因文库,基因组文库是一回事。是某生物的全部dna“标本”(把各个基因植入载体分子保存)cdna是利用逆转录信使rna得到的dna,和生物体内的dna有所不同(cdna无内含子)
2023-08-01 12:44:022

基因组文库和cdna文库有什么区别

真核生物的基因组编码区包括内含子和外显子,而在转录为rna的时候,内含子转录的rna部分会被加工处理掉,就剩下外显子转录来的rna,也就是成熟rna,此过程在细胞核中进行。而cdna是由rna逆转录来的,也就是相当于没有内含子只有外显子。这就是区别。不过对于生物来说,内含子的作用还不明确,所以你可以看作cdna就跟dna一样可以控制性状就好,在基因工程中获取目的基因可以用cdna文库,它包含控制性状的全部基因片段。
2023-08-01 12:44:241

在研究基因突变的时候,直接提取DNA和提取RNA反转录为cDNA进行分析有什么区别?

RNA有可能再转录之后再修饰,可能会去掉一部分DNA再连起来,这时候得到的cDNA就和基因组上的cDNA有区别,突变要是发生在这部分(是不是外显子我还真不知道,好像还就不是)你提取逆转录的cDNA就没用呗
2023-08-01 12:44:342

cdna条带是什么样的

CDNA条带是在聚丙烯酰胺凝胶电泳中形成的DNA分子带状图案。CDNA条带是从mRNA模板通过反转录合成的DNA序列,通常用于研究基因表达、克隆和序列分析。在RNA翻译过程中,mRNA是从DNA模板转录而来,反转录是一种从RNA模板合成DNA的逆向过程。通过反转录酶将mRNA转录成CDNA,然后使用聚合酶链反应(PCR)扩增CDNA,可以在聚丙烯酰胺凝胶电泳中观察到CDNA条带。CDNA条带的大小和数量可以提供有关基因表达水平和转录变化的信息。
2023-08-01 12:44:421

利用逆转录酶和mRNA模版合成cDNA的主要步骤是什么

1、以mRNA为模板,以四种脱氧核苷酸作原料,在逆转录酶作用下,合成DNA单链 2、以DNA单链为模板,以四种脱氧核苷酸作原料,继续合成DNA另一条链,两条DNA链形成cDNA
2023-08-01 12:44:521

基因测序可以用cDNA吗?基因测序和内含子有什么关系?

为具有与某RNA链呈互补的碱基序列的单链DNA即complementary DNA之缩写,或此DNA链与具有与之互补的碱基序列的DNA链所形成的DNA双链。与RNA链互补的单链DNA,以其RNA为模板,在适当引物的存在下,由依赖RNA的DNA聚合酶(反转录酶)的作用而合成,并且在合成单链cDNA后,在用碱处理除去与其对应的RNA以后,以单链cDNA为模板,由依赖DNA的DNA聚合酶或依赖RNA的DNA聚合酶的作用合成双链cDNA。真核生物的信使RNA或其他RNA的cDNA,在遗传工程方面广为应用。在这种情况下,mRNA的cDNA,与原来基因的DNA(基因组DNA,genomic DNA)不同而无内含子;相反地对应于在原来基因中没有的而在mRNA存在的3′末端的多A序列等的核苷序列上,与exon序列、先导序列以及后续序列等一起反映出mRNA结构。cDNA同样可以被克隆。
2023-08-01 12:45:012

提取植物总RNA,是包括了mRNA,rRNA,tRNA吗?那mRNA应该也是有很多种吧?那用olig(dT)反转录得到什么?

是的。总RNA应该包括mRNA,mRNA前体,核RNA和核糖体RNA。或者换个说法就是编码RNA和非编码RNA。你说的基本正确,但tRNA通常不包括在内。cDNA文库是通过细胞中的RNA反转录得到DNA,所以这个方法实际上是检测DNA的转录情况。也就是说,cDNA就是细胞中发生转录的DNA,是很多条长度不同的DNA。
2023-08-01 12:45:461

cdna是什么

  cdna,是一种互补脱氧核糖核酸,与mRNA链互补的单链DNA,以其mRNA为模板,在适当引物的存在下,由mRNA与DNA进行一定条件下合成的,就是cDNA。   cdna为具有与某mRNA(信使RNA)链呈互补的碱基序列的单链DNA即complementaryDNA之缩写,或此DNA链与具有与之互补的碱基序列的DNA链所形成的DNA双链。与RNA链互补的单链DNA,以其RNA为模板,在适当引物的存在下,由依赖RNA的DNA聚合酶(反转录酶)的作用而合成,并且在合成单链cDNA后,在用碱处理除去与其对应的RNA以后,以单链cDNA为模板,由依赖DNA的DNA聚合酶或依赖RNA的DNA聚合酶的作用合成双链cDNA。真核生物的信使RNA或其他RNA的cDNA,在遗传工程方面广为应用。在这种情况下,mRNA的cDNA,与原来基因的DNA(基因组DNA,genomicDNA)不同而无内含子;相反地对应于在原来基因中没有的而在mRNA存在的3′末端的多A序列等的核苷序列上,与exon序列、先导序列以及后续序列等一起反映出mRNA结构。cDNA同样可以被克隆。
2023-08-01 12:46:101

cdna是什么意思

1、cDNA是指具有与某RNA链呈互补碱基序列的DNA。2、与RNA链互补的单链DNA,以其RNA为模板,在适当引物的存在下,由依赖RNA的DNA聚合酶(反转录酶)作用而合成,并且在合成单链cDNA后,再用碱处理除去与其对应的RNA以后,以单链cDNA为模板。
2023-08-01 12:46:241

什么是cDNA?

百度上都有详细解释呢,这个呢是百度到的知识http://baike.baidu.com/view/212931.htmcDNA也是指一群含重组DNA的细菌或噬菌体克隆(概念知识元库)
2023-08-01 12:46:354

cdna是什么

Complementary DNA 为具有与某RNA链呈互补的碱基序列的单链DNA即complementary DNA之缩写,或此DNA链与具有与之互补的碱基序列的DNA链所形成的DNA双链。与RNA链互补的单链DNA,以其RNA为模板,在适当引物的存在下,由依赖RNA的DNA聚合酶(反转录酶)的作用而合成,并且在合成单链cDNA后,在用碱处理除去与其对应的RNA以后,以单链cDNA为模板,由依赖DNA的DNA聚合酶或依赖RNA的DNA聚合酶的作用合成双链cDNA。真核生物的信使RNA或其他RNA的cDNA,在遗传工程方面广为应用。
2023-08-01 12:46:531

cDNA文库与基因组文库有什么不同

cDNA文库 以mRNA为模板,经反转录酶催化,在体外反转录成cDNA,与适当的载体常用噬菌体或质粒载体连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增,这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库.基因组含有的基因在特定的组织细胞中只有一部分表达,而且处在不同环境条件、不同分化时期的细胞其基因表达的种类和强度也不尽相同,所以cDNA文库具有组织细胞特异性.cDNA文库显然比基因组DNA文库小得多,能够比较容易从中筛选克隆得到细胞特异表达的基因.但对真核细胞来说,从基因组DNA文库获得的基因与从cDNA文库获得的不同,基因组.DNA文库所含的是带有内含子和外显子的基因组基因,而从cDNA文库中获得的是已经过剪接、去除了内含子的cDNA 基因组文库 用限制性内切酶切割细胞的整个基因组DNA,可以得到大量的基因组DNA片段,然后将这些DNA片段与载体连接,再转化到细菌中去,让宿主菌长成克隆.这样,一个克隆内的每个细胞的载体上都包含有特定的基因组DNA片段,整个克隆群体就包含基因组的全部基因片段总和称为基因组文库. 将某种生物的基因组DNA切割成一定大小的片段,并与合适的载体重组后导入宿主细胞进行克隆.这些存在于所有重组体内的基因组DNA片段的集合,即基因组文库,它包含了该生物的所有基因.
2023-08-01 12:47:181

cDNA文库必须满足什么条件?其构建包括哪些步骤?

条件:1 、要使用mRNA经过反转录PCR产生cDNA。 2 、要进一步获得cDNA全长 3 、加适当接头,连接到适当的载体内。 4 、转化受体细胞,构建为cDNA文库。基本步骤包括:RNA 的提取(例如异硫氰酸胍法,盐酸胍—有机溶剂法,热酚法等等,提取方法的选择主要根据不同的样品而定),要构建一个高质量的cDNA 文库,获得高质量的mRNA 是至关重要的,所以处理mRNA 样品时必须仔细小心。由于RNA 酶存在所有的生物中,并且能抵抗诸如煮沸这样的物理环境,因此建立一个无RNA 酶的环境对于制备优质RNA很重要。在获得高质量的mRNA 后用反转录酶Oligo(dT) 引导下合成cDNA 第1链,cDNA 第2链的合成(用RNA酶H和大肠杆菌DNA 聚合酶I,同时包括使用T4噬菌体多核苷酸酶和大肠杆菌DNA连接酶进行的修复反应),合成接头的加入、将双链DNA克隆到载体中去、分析cDNA插入片断。扩增cDNA 文库、对建立的cDNA文库进行鉴定。这里强调的是对载体的选择,常规用的是λ 噬菌体,这是因为λ DNA 两端具有由12个核苷酸的粘性末端,可用来构建柯斯质粒,这种质粒能容纳大片段的外源DNA。
2023-08-01 12:47:261

基因组文库和cdna文库有什么区别

cDNA文库 以mRNA为模板,经反转录酶催化,在体外反转录成cDNA,与适当的载体常用噬菌体或质粒载体连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增,这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库.基因组含有的基因在特定的组织细胞中只有一部分表达,而且处在不同环境条件、不同分化时期的细胞其基因表达的种类和强度也不尽相同,所以cDNA文库具有组织细胞特异性.cDNA文库显然比基因组DNA文库小得多,能够比较容易从中筛选克隆得到细胞特异表达的基因.但对真核细胞来说,从基因组DNA文库获得的基因与从cDNA文库获得的不同,基因组.DNA文库所含的是带有内含子和外显子的基因组基因,而从cDNA文库中获得的是已经过剪接、去除了内含子的cDNA基因组文库 用限制性内切酶切割细胞的整个基因组DNA,可以得到大量的基因组DNA片段,然后将这些DNA片段与载体连接,再转化到细菌中去,让宿主菌长成克隆.这样,一个克隆内的每个细胞的载体上都包含有特定的基因组DNA片段,整个克隆群体就包含基因组的全部基因片段总和称为基因组文库. 将某种生物的基因组DNA切割成一定大小的片段,并与合适的载体重组后导入宿主细胞进行克隆.这些存在于所有重组体内的基因组DNA片段的集合,即基因组文库,它包含了该生物的所有基因.
2023-08-01 12:47:492

高中生物:基因内启动子是什么,为什么基因组文库有,cDNA文库没有

因为cDNA是由成熟mRNA逆转录而成的。成熟mRNA是由基因组DNA转录并加工而成的,DNA转录的时候是不会把启动子也转录的,转录起始位点都在启动子下游。至于没有内含子,是因为(真核)mRNA成熟的过程中剪接体(也就是一系列核内小分子核糖核蛋白snRNPs)会把前体mRNA的内含子切下来(当然也有部分前体mRNA的内含子本身是核酶,自己把自己切下来的),再把外显子拼接成成熟mRNA(当然完全成熟还差一步3"端多聚腺苷酸化,所以真核的cDNA总有一端是polyA.
2023-08-01 12:47:591

1st strand cDNA 的定义是什么?

第一链反转录DNA与RNA链互补的单链DNA,以其RNA为模板,在适当引物的存在下,由RNA与DNA进行一定条件下合成的,就是cDNA。
2023-08-01 12:48:071

在什么情况下需要构建cDNA?

需要表达和研究表达的mRNA时
2023-08-01 12:48:172

cDNA文库的标准化与非标准化有什么区别?

 在构建均一化的 cDNA 文库中至少有2种主要的观点:一种是基于复性动力学的原理,高丰度的 cDNA 在退火条件下复性的速度快,而低丰度的 cDNA 复性要很长时间,从而可以通过控制复性时间来降低丰度;另一种是基于基因组 DNA 在拷贝数上具有相对均一化的性质,通过 cDNA 与基因组 DNA 饱和杂交而降低在文库中高拷贝存在的 cDNA 的丰度。第一种方法的掌握对技术的要求比较高,对多数人而言需要多次摸索才能找到最适条件;而后一种方法易于掌握,但有研究者根据复性动力学的原理也提出了其不利因素,即采用基因组 DNA 饱和杂交的方法会因为低拷贝的表达基因拷贝数少而无法被杂交上。目前已报到的均一化 cDNA 文库多是根据第二种原理构建的,常用策略有基于 PCR 技术利用 cDNA 多次复性 mRNA-cDNA 杂交等。有研究报道,针对各自选择的高表达靶序列进行分析后,均一化处理后文库的高丰度表达 cDNA 是处理前的0.3%~2.5%,基本满足节约筛选的要求。   均一化 cDNA 文库具有以下4方面的优点:第一,在经济上具有广泛的应用空间,可以节约大量试验成本。第二,增加克隆低丰度 mRNA 的机会,适用于分析各种发育阶段或各种组织的基因表达及突变检测。第三,与原始丰度的 mRNA 拷贝数相对应的 cDNA 探针与均一化的 cDNA 文库作杂交,可以估计出大多数基因的表达水平及发现一些组织特异的基因。而以往的文库构建,忽略了 mRNA 丰度的影响。第四,可以用于遗传图谱的制作和进行大规模的原位杂交,作为优化的文库系统还可以用于大规模的测序或芯片制作等研究。
2023-08-01 12:48:281

用基因组DNA做模板进行PCR扩增,设计引物所选序列也用cDNA为模板有什么不同

序列不一样 引物当然不一样 你在cDNA上设计的引物可能在基因组上被内含子隔开了
2023-08-01 12:48:513

我从网上NCBI上找到某个基因的MRNA序列,利用什么软件把它反转绿成CDNA序列,进行比对呢

bioedit吧,这软件小,功能强大。sequencher也好点,不过是收费的,很难搞到。简单的比对用primer就够了也有这功能,要不就dnaman。推荐bioedit。不过你要比对什么呢?
2023-08-01 12:49:024

基因库与基因文库有什么区别

基因文库包括基因组文库和部分基因文库(如cDNA文库)。将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库。如果这个文库包含了某种生物的所有基因,那么,这种基因文库叫做基因组文库。如果这个文库只包含了某种生物的一部分基因,这种基因文库叫做部分基因文库,例如cDNA文库,首先得到mRNA,再反转录得cDNA,形成文库。cDNA文库与基因组文库的区别在于cDNA文库在mRNA拼接过程中已经除去了内含子等成分,便于DNA重组时直接使用。基因文库与基因库的概念不同。基因库是指某一生物群体中的全部等位基因的总称。基因文库与基因克隆的概念也有区别,基因克隆是只包含某些特定基因或DNA片段的克隆。基因文库中包含着为数众多的克隆,建成后可供随时选取其中任何一个基因克隆之用。基因文库的建立和使用是70年代早期重组DNA技术的一个发展。人们为了分离基因,特别是分离真核生物的基因,从1974年起相继建立了大肠杆菌、酵母菌、果蝇、鸡、兔、小鼠、人、大豆等生物以及一些生物的线粒体和叶绿体DNA的基因文库。基因文库的建立使分子遗传学和遗传工程的研究进入了一个新时期。为了有效地保存基因文库,可通过细菌的繁殖而使包含各个特定DNA片段的细菌增多。液体培养不适用于这一目的,因为各个细菌的生存和繁殖能力不同,各个克隆被保存的机会也会因此而不相等。在固体培养基上每一个细菌单独形成一个菌落,各个细菌并不相互干扰和竞争,因而有利于全部克隆的保存。形成的每一个菌落中大约包含1000万个细菌,这样一个基因文库中的所有的克隆几乎都扩增了1000万倍。把培养皿上的细菌全部洗下加以保存,便可以在需要时从中取得任何一个克隆。
2023-08-01 12:49:112

荧光定量cdna和普通pcr的cdna有什么差别

没有太大的差别。只是作为定量或者半定量的cDNA,要求质量比较高,才能使结果更可靠。非定量普通PCR的cDNA要求没那么严格,只要能正常扩增出目标片段即可。
2023-08-01 12:49:211

从CDNA文库和基因组文库中钓出的目的基因有什么不同

cDNA以mRNA为模板,基因组含有的基因在特定的组织细胞中只有一部分表达,而且处在不同环境条件、不同分化时期的细胞其基因表达的种类和强度也不尽相同,所以cDNA文库具有组织细胞特异性。cDNA文库显然比基因组DNA文库小得多,能够比较容易从中筛选克隆得到细胞特异表达的基因。但对真核细胞来说,从基因组DNA文库获得的基因与从cDNA文库获得的不同,基因组DNA文库所含的是带有内含子和外显子的基因组基因,而从cDNA文库中获得的是已经过剪接、去除了内含子的cDNA。
2023-08-01 12:49:521

我想问什么是反转录PCR?

一个可能做反转录pcr的,另一个可能做实时定量荧光pcr的。反转录pcr由一条rna单链转录为互补dna(cdna)称作“逆转录”,由依赖rna的dna聚合酶(逆转录酶)来完成。随后,dna的另一条链通过脱氧核苷酸引物和依赖dna的dna聚合酶完成,随每个循环倍增,即通常的pcr。原先的rna模板被rna酶h降解,留下互补dnart-pcr可能是实时pcr(real-timepcr),属于荧光定量pcr(q-pcr)的一种。以一定时间内dna的增幅量为基础进行dna的定量分析。
2023-08-01 12:50:002

用基因的什么序列,mRNA还是CDS,还是这

以mRNA为模板,经反转录酶催化合成DNA,则此DNA序列与mRNA互补,称为互补DNA或cDNA。提取出组织细胞的全部mRNA,在体外反转录成cDNA,与适当的载体常用噬菌体或质粒载体连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增,这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库,基因组含有的基因在特定的组织细胞中只有一部分表达,而且处在不同环境条件、不同分化时期的细胞其基因表达的种类和强度也不尽相同,所以cDNA文库具有组织细胞特异性。cDNA文库显然比基因组DNA文库小得多,能够比较容易从中筛选克隆得细胞特异表达的基因。但对真核细胞来说,从基因组DNA文库获得的基因与从cDNA文库获得的不同,基因组DNA文库所含的是带有含子和外显子的基因组基因,而从cDNA文库中获得的是已经过剪接、去除了内含子的cDNA。
2023-08-01 12:50:221

以mRNA为模板合成cDNA的酶是什么

  以mRNA为模板合成cDNA酶的是反转录酶。  反转录酶(也可写成逆转录酶)又称为依赖RNA的DNA聚合酶。1970年Temin等在致癌RNA病毒中发现了一种特殊的DNA聚合酶,该酶以RNA为模板,以dNTP为底物,tRNA(主要是色氨酸tRNA)为引物,在tRNA3"-OH末端上,根据碱基配对的原则,按5"-3"方向合成一条与RNA模板互补的DNA单链,这条DNA单链叫做互补DNA(complementaryDNA,CDNA)。  逆转录酶(M-MLV)从MoloneyMurineLeukemiaVirus分离出来,可用于合成第一链cDNA、制作cDNA探针、RNA转录、测序和RNA的逆转录反应。本酶是通过点突变使RNaseH活性缺失,所以它具有的DNA聚合酶的活性与野生型相同,同时其延伸能力也有显著提高。逆转录酶(M-MLV)一个活性单位定义为在37℃,10min条件下,使1nmol的脱氧核糖核酸掺入酸性沉淀物质所需的酶量。
2023-08-01 12:50:301

cdna用生物发育某个时期的mrna是什么时期

由于生物个体发育过程中,基因是选择性表达的,因此细胞中的mRNA是部分基因转录形成的,则通过逆转录方法合成的目的基因只包含该生物的部分基因,这个受体菌群体就叫做这种生物的cDNA文库. 故选:A.
2023-08-01 12:50:381

第1链cDNA的合成有哪些方法 各方法的原理是什么?

pCR。反转录。人工合成
2023-08-01 12:50:461

为什么基因组文库中有启动子和内含子而cDNA文库中没有呢,原因是什么,?

因为cDNA是由成熟mRNA逆转录而成的.成熟mRNA是由基因组DNA转录并加工而成的,DNA转录的时候是不会把启动子也转录的,转录起始位点都在启动子下游.至于没有内含子,是因为(真核)mRNA成熟的过程中剪接体(也就是一系列...,15,
2023-08-01 12:51:011

用什么方法从基因文库中获得目的基因

①直接筛选:有些载体带有可辨认的遗传标记,能有效地将重组分子与本底区分。例如:有些λ噬菌体携带外源基因后形成的噬菌斑就会从原来的混浊变为清亮;还有些载体分子携带外源基因后,形成的菌落或噬菌斑的颜色有明显变化,如蓝色变为无色;有些λ噬菌体能侵染甲菌而不能侵染乙菌,携带外源DNA片段后便能侵染乙菌,因此乙菌释放的噬菌体均为重组分子。②间接筛选:有引起载体分子带有一个或多个抗药性标记基因,当外源DNA插入到抗药基因区后,基因失活,抗性消失。如一质粒有A和B两个抗药性基因,当外源基因插入到B基因区后,便只抗A药而不抗B药。因此能在A药培养基上正常生长而不能在B药培养上生长的便是重组分子。③核酸杂交:广泛用于筛选含有特异DNA顺序的克隆。方法是将菌落或噬菌斑“印迹”到硝酸纤维膜等支持物上,变性后固定在原位,然后与标记的核酸探针进行杂交。阳性点的位置就是所需要的克隆。④免疫学方法:如果重组克隆能在宿主菌中表达,就可以用特异的蛋白质抗体为探针,进行原位杂交,选择特异的克隆。
2023-08-01 12:51:112

riken cdna是什么基因

胞嘧啶,学名为2-羰基-4-氨基嘧啶,CAS号是71-30-7,分子式为C4H5N3O。核酸(DNA和RNA)中的主要碱基组成成分之一。胞嘧啶可由二巯基脲嘧啶、浓氨水和氯乙酸为原料合成制得。
2023-08-01 12:51:201

麻烦大家帮帮我,PCR里面逆转录反应液中这些都代表什么都是什么意思啊

逆转录聚合酶链反应,或变形,被广泛用于聚合酶链反应(PCR),反转录PCR(逆转录聚合酶链反应RT-PCR)。在RT-PCR,RNA链是逆转录成为互补DNA,然后通过PCR作为模板进行DNA扩增。 />转录的RNA的单链互补DNA(cDNA)的称为“逆转录酶”的依赖于RNA的DNA聚合酶(逆转录酶)来完成。随后,通过另一条链的DNA的脱氧寡核苷酸引物和DNA依赖性DNA聚合酶来完成的,每个周期加倍,即通常的PCR。原RNA模板是H的RNA酶的降解,留下互补的DNA。 指数扩增的RT-PCR是一个非常敏感的技术,可以检测非常低拷贝数的RNA。 RT-PCR方法被广泛用于遗传性疾病的诊断,可用于定量监测的目标RNA含量。 (基因表达的检测,Northern印迹法) RT-PCR方法有时指的实时荧光定量PCR(实时PCR)。要区分用RT-PCR的,经常写“定量PCR(定量PCR)或RTQ-PCR(实时荧光定量PCR)。实时定量PCR(实时荧光定量PCR)是一个定量PCR(Q-插入在双链DNA特定PCR法)的DNA的量的增加,在一定时间内的时间为基础的DNA进行定量分析。实时PCR定量荧光颜料,有两种方法。荧光染料,与增加的DNA序列的特定寡核苷酸序列的另一种方式使用的荧光探针(探针)的组合。实时PCR和反向转录PCR合并的,微量的RNA,可用于内一个特定的时间,细胞,组织,特别是基因的表达。两个RT-PCR的组合被称为“定量RT-PCR(定量RT-PCR法)
2023-08-01 12:51:291

中心法则是什么?

中心法则是指遗传信息从DNA传递给RNA,再从RNA传递给蛋白质,即完成遗传信息的转录和翻译的过程。也可以从DNA传递给DNA,即完成DNA的复制过程。这是所有有细胞结构的生物所遵循的法则。在某些病毒中的RNA自我复制(如烟草花叶病毒等)和在某些病毒中能以RNA为模板逆转录成DNA的过程(某些致癌病毒)是对中心法则的补充。中心法则经常遭到误解,尤其与遗传信息“由DNA到RNA到蛋白质”的标准流程相混淆。有些与标准流程不同的信息流被误以为是中心法则的例外,其实朊病毒是中心法则现时已知的唯一例外。扩展资料:中心法则的作用:中心法则是现代生物学中最重要最基本的规律之一, 其在探索生命现象的本质及普遍规律方面起了巨大的作用,极大地推动了现代生物学的发展,是现代生物学的理论基石,并为生物学基础理论的统一指明了方向,在生物科学发展过程中占有重要地位。遗传物质可以是DNA,也可以是RNA。细胞的遗传物质都是DNA,只有一些病毒的遗传物质是RNA。这种以RNA为遗传物质的病毒称为反转录病毒(retrovirus),在这种病毒的感染周期中,单链的RNA分子在反转录酶(reverse transcriptase)的作用下,可以反转录成单链的DNA,然后再以单链的DNA为模板生成双链DNA。双链DNA可以成为宿主细胞基因组的一部分,并同宿主细胞的基因组一起传递给子细胞。在反转录酶催化下,RNA分子产生与其序列互补的DNA分子,这种DNA分子称为互补DNA(complementary DNA),简写为cDNA,这个过程即为逆转录(reverse transcription)。参考资料来源:百度百科-中心法则
2023-08-01 12:51:361

请问CDNA手机和GSM手机是什么意思,哪种好一点?

各有利弊,适合的 才是最好的
2023-08-01 12:52:045

在cDNA技术中,所形成的发卡环可用什么酶除去

可以用单链特异的 S1 核酸酶切去.但是 S1 核酸酶的处理,常常会“修剪 ” 过多的 cDNA 顺序,使 cDNA 丢失了 mRNA 5" 端的部分顺序.另一种方法是用大肠杆菌的 RNase H 进行修饰.RNase H 能识别 RNA-DNA 杂交分子并把其中的 RNA 切割成短的片段,这些 RNA 短片段仍与 cDNA 第一链结合,可被新合成的 DNA 所取代.新合成的 DNA 存在切口,用 DNA 连接酶把这些切口连接在一起形成一条完整的 DNA 链.RNase H 法优于 S1 核酸酶法,它能获得包括 mRNA 5" 端全部或绝大部分的更长顺序 cDNA 分子.
2023-08-01 12:52:181

什么是反转录

反转录PCR就是把RNA提取后反转录成cDNA,并以其为模板进行的PCR反应,通常用于检测某种RNA是否被表达,或者比较其相对表达水平 巢式PCR(nested PCR),是指利用两套PCR引物(巢式引物)对进行两轮PCR扩增反应。在第一轮扩增中,外引物用以产生扩增产物,此产物在在内引物的存在下进行第二轮扩增。由于巢式PCR反应有两次PCR扩增,从而降低了扩增多个靶位点的可能性(因为与两套引物都互补的引物很少)增加了检测的敏感性;又有两对PCR引物与检测模板的配对,增加了检测的可靠性。 所以反转录-巢式PCR就是以cDNA为模板进行的巢式PCR,它和简单的反转录PCR一样是用于检测某种RNA是否被表达,或者比较其相对表达水平,但是特异性更高,可靠性更强。
2023-08-01 12:52:281

在cDNA文库构建的过程中,为什么会有cDNA末端补平这一步?其具体是什么意思?谢谢了o(∩_∩)o.

第一链和第二链合成后,cDNA末端不是平端。而下一步是需要将“连接子”连接到cDNA上,以便于进一步形成粘性末端,装到载体中。因此在连接之前要先补平。
2023-08-01 12:52:361

mRNA所携带的遗传基因是此生物全部的遗传基因么?CDNA文库包含的到底是什么?

不是,cDNA文库是mRNA反转录产生的互补DNA
2023-08-01 12:52:462