土伏苓的医药价值

黄曲霉毒素B1(AFB1)是化学物质,AFB1属于化学类致癌因子答题不易、满意请给个好评、你的认可是我最大的动力、祝你学习愉快、>_<|||

饲料化验就是对饲料进行检测。可以分为感官检测和质量检测。感官检测是直接对饲料的色泽、气味、形状、大小等根据经验进行初步判断。质量检测则要对饲料进行规定指标的测定。一般的常规分析指标有(俗称六大粗):粗纤维(酸碱法等)、粗灰分、粗蛋白、粗脂肪、钙、磷等矿物质、维生素、水分。如果要求得到进一步的精确测定，则有更科学的实验方法进行。与肉品化验的区别，自己可以对照一下的。

（1）黄曲霉毒素AFB1是一种化学物质，属于化学类致癌因子．（2）引起癌变的基因有原癌基因和抑癌基因，抑癌基因主要是阻止细胞不正常的增殖，所以p53基因属于抑癌基因．肝癌细胞容易分散和转移的原因是细胞表面的糖蛋白等物质减少，细胞不能识别而导致的．（3）检测酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶，应采用抗原-抗体杂交方法．（4）①本实验的两个自变量，分别为AFB1的有无和AFB1解毒酶的含量．②本实验中．反映AFB1解毒酶的解毒效果的对照组是B组．③经测定，某污染饲料中AFB1含量为100μg/kg，则每千克饲料应添加5克AFB1解毒酶．解毒效果最好．同时节的了成本．（5）肿瘤组织在培养之前，必须先用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理使之分散成单个细胞，制成细胞悬液．故答案为：（1）化学   （2）抑癌     糖蛋白    （3）抗原-抗体杂交  （4）①AFB1的有无和AFB1解毒酶的含量  ②B组     ③5（5）胰蛋白酶

控制温度。温度对霉菌的繁殖和产毒均有重要影响，不同种类的霉菌最适温度是不一样的。在相对湿度为80%～90% ，大多数霉菌繁殖最适宜的温度是25～30℃ ，在0℃以下不能产毒。AF常常存在于土壤、动植物、各种坚果特别是花生和核桃中。在大豆、稻谷、玉米、通心粉、调味品、牛奶、食用油等制品中也经常发现AF。一般在热带和亚热带地区，食品中AF的检出率比较高。在中国总的分布情况为：华中、华南、华北产毒株多，产毒量也大，东北、西北地区较少。扩展资料：AF的结构：从化学结构上看，黄曲霉毒素是高度取代的香豆素。其中 AFB1类为甲氧基、二呋喃环、香豆素、环戊烯酮的结合物。AFG1类结构为甲氧基、二呋喃环、香豆素和环内酯。自然环境下，在被污染的食品中只检测出AFB1、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1和 AFM2，其中以 AFB1存在量最大也毒性最高，AFM1是AFB1的代谢产物，毒性仅次于 AFB1。

黄曲霉毒素（AFT）是黄曲霉和寄生曲霉等某些菌株产生的双呋喃环类毒素。其衍生物有约20种，分别命名为B1、B2、G1、G2、M1、M2、GM、P1、Q1、毒醇等。其中以B1的毒性最大，致癌性最强。动物食用黄曲霉毒素污染的饲料后，在肝、肾、肌肉、血、奶及蛋中可测出极微量的毒素。黄曲霉毒素及其产生菌在自然界中分布广泛，有些菌株产生不止一种类型的黄曲霉毒素，在黄曲霉中也有不产生任何类型黄曲霉毒素的菌株。黄曲霉毒素主要污染粮油及其制品，各种植物性与动物性食品也能被污染。1993年，黄曲霉毒素被世界卫生组织（WHO）癌症研究机构划定为一类天然存在的致癌物，是毒性极强的剧毒物质。其毒性是砒霜的68倍，是氰化钾的10倍，对肝脏组织的破坏性极强。它还是我们所知的最强的生物致癌剂，1毫克就是致癌剂量。长期接触浓度高的黄曲霉毒素是肝癌的主要诱发因素，国际癌症研究机构将其列为1类致癌物。摄入1毫克就可能致癌，一次性摄入20毫克就能致命！黄曲霉素（AFT）为何致癌？黄曲霉毒素具有致突变性，能使人成纤维细胞发生程序外DNA合成，动物实验可见染色体畸变，染色体断裂，某些染色体4q、13q、14p发生缺失。AFB1是一种能导致生物体遗传物质发生变化的致突变化合物，但 AFB1本身不能引起突变，而必须在机体内经过代谢活化后才具有致突变作用，称为间接致突变物。AFB1由肝微粒体酶活化为亲电子物，即AFB1-2，3-环氧化物，该环氧化物的第2个碳与DNA的鸟嘌呤酮基结合形成 AFB1-DNA加合物，此外，AFB1的代谢产物AFM1和AFP1也能转化成亲电子物而与DNA结合，AFB1-DNA加合物经去嘌呤反应形成AFB1-N7-鸟嘌呤，使DNA分子产生无嘌呤位置的缺口，因而造成DNA的损伤。目前认为无论是DNA去嘌呤造成的损伤还是由于经酸、碱水解不断蓄积开环加合物而使DNA分子发生的改变，都是突变前的一种改变，都有进一步发展为癌症的可能性。

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　　黄霉菌是微生物世界的一个大家族，黄曲霉菌是这个大家族的一员，黄曲霉素中毒的症状有哪些呢？本文是我整理的黄曲霉素中毒的症状，欢迎阅读。 　　黄曲霉素中毒的症状 　　中毒前驱表现为发烧、腹痛、呕吐、食欲减退等。 　　2～3周后很快发生中毒性肝病表现:肝脏肿大,肝区疼痛,黄疸、脾大。腹水,下肢浮肿及肝功能异常。 　　可有心脏扩大,肺水肿,甚至痉挛、昏迷等,多数患者在死前可有胃肠道大出血表现。 　　实验动物临床毒性研究表明,给动物喂食含黄曲霉毒素的饲料后,表现为渐进性食欲减退、口渴、便血、生长缓慢、体重减轻、皮肤出血、过度兴奋、黄殖、抽搐、角弓反张等。病理解剖可见肝脏弥漫性充血、出血利坏死等表现。 　　浅谈如何预防黄曲霉毒素中毒 　　黄霉菌是微生物世界的一个大家族，黄曲霉菌是这个大家族的一员。黄曲霉菌本身是无毒的，但在其繁殖代谢的过程中可分泌出有毒的物质黄曲霉毒素。黄曲毒素是一种剧毒物质，它损害动物的肝脏，引起肝细胞坏死、肝纤维化、肝硬化等病变。黄曲霉毒素是目前发现的最强的致癌物质之一。 　　1 主要可诱发肝痛，还能诱发胃癌、肾癌、直肠癌及乳腺、卵巢、小肠等部位的肿瘤 黄曲霉毒素对人体健康威胁很大。目前已确定其化学结构，黄曲霉毒素B1、B2、C1、G2等17种，其中趴毒性最大。食物中的花生、花生油、玉米、大米、棉籽等最容易污染上黄曲霉寿素，小麦，大麦也常被污染，豆类一般污染较轻，工业化生产的发酵制品如面酱。咸肉、火腿、香肠等肉类食品，亦能受到黄曲霉菌的污染。我国卫生标准规定，花生、花生油、玉米中，黄曲霉毒素含量不超过20微克/公斤;大米、食用油不得超过10微克/公斤;其它粮食、豆类、发酵食品不得超过5微克/公斤;婴儿食品中不得有黄曲毒素。 2 受黄曲霉菌污染的粮及食品不能食用 　　轻度污染的粮及其他食品，可以用一些简单的方法将毒素破坏掉或除去。日常生活中可以用以下方法去毒： 　　2.1 剔除霉变粮粒 因毒素主要集中在霉变的粮粒中，凡表面长有黄绿色霉菌，或破损皱缩、变色、变质的花生米和玉米，都有可能污染黄曲霉毒素。在食用前应仔细挑选，剔除霉变粒。 　　2.2 提高加工精度 稻谷污染黄曲霉菌后，米中的毒素主要集中在米糠层，如果在稻谷加工时，将糙米碾得精一点，尽量除去米糠层，可降低大米中毒素的含量。玉米中的黄曲霉毒素有 54~72%集中在皮层和胚中，如在加工时提取胚，可除去大部分毒素。用含黄曲霉毒素的玉米制成玉米淀粉，毒素的含量仅为原有含量的1%。 　　2.3 水洗去毒 将污染上黄曲霉菌的大米用清水反复搓洗五六次，一直洗到水清时再煮饭，可除去大部分毒素。 　　2.4 加热去毒 蒸煮、爆炒或油炸可减少一部分黄曲霉毒素。轻度污染的花生米，爆炒可使黄曲霉毒素B1、C1含量分别减少65%和62%;若用油炸，可使黄曲霉毒素Bl、 Cl含量分别减少69%和67%。大米煮成米饭，一般能破坏20%的黄曲霉毒素。用高压锅煮米饭，去毒效果比普通锅煮饭好。 　　2.5 植物油中的去毒 在含黄曲霉毒素的植物油中，加入活性白陶土或活性炭等吸附剂，搅拌后静置沉淀，取上层清油，毒素含量大为降低。如在含毒花生油中加入1.5%的白陶土，可使含毒量从每公斤100微克降至10微克以下。用含黄曲霉毒较低的植物油烹调食物时，先将油倒入锅内烧至冒微烟(约120℃时)，可除去油中90%以上的毒素。如果菜肴中加葱、姜、蒜等辛香料，对除去黄曲霉毒素效果更为理想。 　　2.6 山苍子去毒 用中药山苍子或山苍子胶丸均可，每百公斤粮食用十四五粒胶丸。用法是先把胶丸剖开，放在小瓶中，用透气纱布扎住瓶口，然后连瓶埋人米缸中，盖上缸盖，让芳香油自然挥发，熏蒸粮食，即可消除黄曲霉毒素。将山苍子野果或干果直接埋人粮食中，亦可收到良好的效果。 　　黄曲霉毒素的危害及去除方法 　　黄曲霉毒素(aflatoxin AFT)是黄曲霉(Aspergillus flavus)、寄生曲霉(A、parasiticus)在生长过程中产生、分泌的次级代谢产物。它是一类毒性极强的物质，具有强致癌性和强免疫抑制性，广泛地分布在发霉粮食及其制品中，特别是花生、花生油及其制品;乳、乳制品和饲料中也含有较多的黄曲霉毒素。因此，污染黄曲霉毒素的食品危害着人们的健康;动物性食品中(乳、肉、蛋)积累、残留的毒素，也潜在地威胁着人们的健康。 　　1 黄曲霉素的性质及种类 　　黄曲霉素是一类化学结构类似的二呋喃香豆素衍生物，微溶于水，易溶于油脂和某些有机溶剂;对温度的敏感性差，280℃高温下才裂解，故在通常的烹调条件下不易被破坏。碱性条件下，黄曲霉素极易降解;紫外线辐照也容易使黄曲霉素降解而失去毒性。但是在酸性条件下，黄曲霉素比较稳定。 　　黄曲霉毒素(AFT)结构相似，在365nm波长紫外光下产生较强的荧光，产生蓝色荧光者为B族(425nm)，发绿色荧光者为G族(450nm)。已鉴定出10多种黄曲霉毒素，即黄曲霉毒素B1(AFB1)、黄曲霉毒素B2(AFB2)、黄曲霉毒素G1(AFG1)、黄曲霉毒素G2(AFG2)等。其中以黄曲霉素B1的量最大，毒性最强，一般以黄曲霉毒素B1为代表。黄曲霉毒素B1在生物体内可以转化为七种代谢产物，黄曲霉毒素M1(AFM1)是黄曲霉素B1的一种代谢产物，能在摄入黄曲霉素B1奶牛的鲜乳中检测到。 　　AFM1和AFB1的急性中毒剂量几乎相同，但对小鼠的致癌性只有AFB1的 1/10。黄曲霉醇(Aflatoxical)是黄曲霉素B1在生物体内的还原产物，其急性毒性是AFB1的1/20(用雏鸭生物测定)，黄曲霉醇在体内可以完全氧化为黄曲霉素B1，是黄曲霉素B1在体内的存储池。黄曲霉素P1和黄曲霉素Q1是黄曲霉素B1在生物体内的另2种代谢物，他们的急生毒性均低于黄曲霉素B1。AFB2和AFG2的衍生物称作为黄曲霉素B2a、黄曲霉素G2a。 　　2 黄曲霉毒素的危害作用 　　黄曲霉毒素是一种强烈的致癌物质，能使人体或动物的免疫功能丧失，诱导畸形、癌症的发生。黄曲霉毒素是毒性极强的化合物，AFB1的急性毒性为成年人半至死量(LD50)10.0。黄曲霉毒素急性中毒症状主要表现为呕吐、厌食、发热、黄疸和腹水等肝炎症状。而黄曲霉毒素的“三致”(致突变、致癌、致畸性)危害性，更引起人们的关注。黄曲霉毒素是目前所知致癌性最强的化合物，对鱼类、禽类、家畜和灵长目类动物的实验肿瘤诱导作用极大，并且能同时诱导多种癌症。黄曲霉毒素对人的致癌性虽然缺乏直接证据，但大量的流行病学调查均证实，黄曲霉毒素的高摄入量和人类肝癌的发病率密切相关。因此，世界各国对食品中的黄曲霉毒素的含量做出了严格的规定。工业上，黄曲霉毒素的危害也很大，污染农作物饲料、奶制品;阻滞摄入污染黄曲霉毒素饲料的动物的生长;导致畜产品中黄曲霉毒素积累、残留量增加，潜在的危害人体健康。 　　3 黄曲霉素的去除方法 　　黄曲霉毒素的污染是一个全球性的难题。黄曲霉在食品的加工、生产、贮存、运输等各个环节都能生长，并且分泌黄曲霉毒素B1。动物摄入了黄曲霉毒素污染的饲料，其乳、肉、蛋中能积累、残留黄曲霉毒素。目前，常用理化法、生物法和酶解法去除黄曲霉素。 　　3.1 理化去除法 　　黄曲霉毒素主要存于发霉变色、破损的食品原料中，用挑选法除去含黄曲霉毒素的霉坏原料是非常简单的方法。但对于粉状和液体类物品中污染的黄曲霉毒素，吸附剂的吸附和化学物质的浸提法去毒较好。活性碳是有机物质热解时形成的不溶解性粉末，它能吸附多种药物及有毒物质。人们将其作为吸附剂吸附肠道中的有害物质。水貂的饲料中分别加入0、34和102μg/kgBW黄曲霉毒素B1，同时加入1.0%的活性碳，喂养77天。在 　　102μg/kgBW黄曲霉毒素B1 组，活性碳的加入使水貂的死亡率降低了50%，可预防34μg/kgBW组水貂的死亡，同时活性碳减轻了肝脏损伤的程度。皂土也称膨润土，类似于木炭，本身具有结晶体的微小结构，可以吸附其它分子，同时也可吸收大量水分而膨胀。研究认为：2%的皂土能吸附磷酸盐缓冲液中400μg的黄曲霉毒素B1，吸附率为 　　90~100%。皂土与黄曲霉毒素形成的复合物用氯仿抽取，可抽提5~23%黄曲霉毒素B1。天然沸石的水合钠钙硅铝酸盐(hydrated sodium calcium aluminosilcate HSCAS)具有结合黄曲霉毒素的特性，不但能够减轻牛的黄曲霉毒素中毒症状，且能吸附牛奶中黄曲霉毒素M1 ，去除鲜乳中的黄曲霉毒素M1 。 　　黄曲霉毒素不溶于水、己浣等，易溶于氯仿、甲醇、苯等其它有机溶剂。根据这一特点，用水处理污染毒素的花生粉之后，再用氯仿提取，则很容易去掉花生粉中的黄曲霉毒素。用56%丙酮、42%己烷、2%的水(重量比)浸提榨过油的花生饼。可以除去98~99%的黄曲霉毒素。近年来，日本研究以二甲醚作为除去花生及制品中的黄曲霉素的有效溶剂。用二甲醚浸提后，黄曲霉毒素可全部除去，而二甲醚沸点低，在处理品中的残留量仅为10ppb。但是化学浸提液去除毒素，残留量大，对食品中的营养物质破坏性强，降低其营养价值，应用上受到限制。氨、醛法处理黄曲霉毒素污染的花生、玉米去毒效果良好。在含水量为15%、压力 202.6kpa，温度93℃时;处理含有110ppb的黄曲霉素的花生粉，经15min后，去毒率为100%;在30℃下，用氨水(含氨26%)熏蒸粉碎的玉米，密封储存2~6天，去毒率达100%，这种方法对玉米品质无影响，目前，国外已将黄曲霉素的氨、醛处理法用于生产。此外，酸碱去毒法、加热去毒、紫外线处理、盐类去毒、氧化剂去毒也是较好的去除黄曲霉毒素的方法。 　　3.2 生物去除法 　　生物去除法主要是利用生物间的拮抗作用，抑制黄曲霉素生产菌的生长，进而减少了黄曲霉素的污染;或者利用生物间的粘附作用降解、去除黄曲霉毒素。微生物特别是乳酸菌的去毒效果和实用性研究的较多。 　　3.2.1 乳酸菌粘附去除黄曲霉毒素 　　许多乳酸菌分离出许多抗菌物质。研究认为，乳酸菌抑制黄曲霉素主要因为其自身粘附作用或是其代谢物的作用。发酵乳制品中乳酸菌的应用最为广泛，其粘附、降解黄曲霉毒素的作用非常明显。寄生曲霉(Aspergillus parasiticus)的孢子和乳链球菌 　　Streptococcus. lactis、乳酸乳球菌Lactococcus Lactis同步培养;或者S.Iactis接种到培养3天的A.parasiticus培养物中;或者培养3天的S.lactis与 A.parasiticus一起培养7天。两天培养后，3种方式处理黄曲霉毒素(B1+G1)的产量分别从原先的 　　108.33μg/mL、94.18μg /mL降为31.01μg/mL、58.01μg/mL。酸奶中接种S.lactis或者市售酸奶与黄曲霉素B1(50μg/ml)，在45℃、2~5h 贮存;随后5~10℃贮存。7天后，S.lactis使黄曲霉毒素从50μg/mL降到33.70μg/mL，而乳酸菌使之降到37.25μg/mL。现已证明乳酸菌中L.rhamnosus.GG、L.rhamnosusLG-705在液体介质中去毒效果最好，它们与黄曲霉素结合的稳定性明显地优于其它乳酸菌。菌体与黄曲霉毒素的粘附是一种表面联结粘附，处理方法不同时，粘附的方式也不同。实验证明，37℃、ph2~10的水介质中，L.rhamnosus GG、L.rhamnosusLG-705能去除大部分污染的黄曲霉毒素。黄曲霉毒素M1是鲜奶中有毒的污染物，对消费者的健康形成威胁，特别是青少年。而乳酸菌Lactobacillus acidopilus LA1、L.gasseti ATCC 33323，L.rhamnosus GG、L.rhamnosus LC-705、L.rhamnosus 1/3 and Lactococus lactisubsp.cremoris ARH74在液体介质中，无论是活性菌体还是加热失活菌体都能粘附、去除黄曲霉素M1;牛奶中加入乳酸菌的个别种是除去牛奶中黄曲霉毒素M1有效途径。 　　3.2.2 其它微生物的去除黄曲霉毒素作用 　　橙色黄杆菌(Flavobacterium auraantiacum)也具有较强的去除黄曲霉毒素的能力，可去除污染黄曲霉毒素食品中的全部毒素，且不会产生新的有毒物质，没有2次污染。假丝酵母菌(Candida spp)在20天内能降解80%的黄曲霉素B1，红色棒杆菌在液体中培养4天后，可以使加入的黄曲霉毒素B1降解99%。其它许多霉菌对黄曲霉毒素有降解、去除作用。 　　3.3 酶的降解作用去除黄曲霉毒素 　　酶的降解去毒主要利用酶的专一亲和性，高效地催化、降解黄曲霉毒素为无毒化合物或者小分子无毒物质。真菌E—2的提取液可使AFB1转化，或使其发光基因发生改变，而使其毒性降低。该提取液的去毒作用20~50℃有效力，60℃对活力几乎全部丧失，最佳作用温度为25℃。解毒活性在PH5.4~7.6，最佳值为PH6.0处，有效作用时间为60分。该抽提液起解毒作用的很可能是某种变构酶，亲和AFB1的能力可能较大。花生粕中往往含有7000ppb的黄曲霉毒素。黄曲霉毒素在酶的作用下，从结合的疏水性氨基酸残基上充分游离出来，经过滤使大部分黄曲霉毒素得以截留。酶降解去除黄曲霉素效果高效，实用性强，适用于各种形式受到污染的食品，是我们研究和探讨的理想去毒剂。. 　　形 成 　　黄曲霉毒素(Aflatoxins)是生长在食物及饲料上的黄曲霉和寄生曲霉的代谢产物，特曲霉也能产生黄曲霉毒素，但产量较少。目前已分离鉴定出的黄曲霉毒素有17种，主要是黄曲霉毒素B1(C17H12O6)、B2(C17H14O6)、G1(C17H12O7)、G2 (C17H14O7)以及由B1和B2在体内经过羟化而衍生成的代谢产物M1(C17H12O7)、M2(C17H14O7)等。 　　黄曲霉毒素是一组化学结构类似的化合物。黄曲霉毒素的基本结构为二呋喃环和香豆素，B1是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物，含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮(香豆素)，前者为基本毒性结构，后者与致癌性有关。B1的毒性(其毒性比氰化钾毒性高)及致癌性极强且耐热(B1的分解温度为268℃左右，一般烹调加工破坏很少)，在天然污染的食品中以B1最为多见。1988年国际肿瘤研究机构(International Agency for Research on Cancer，IARC) 将黄曲霉毒素B1列为人类致癌物;1993年黄曲霉毒素被世界卫生组织(WHO)的癌症研究机构划定为Ⅰ类致癌物，被证明对人和动物的肝脏组织有破坏作用，严重时可导致肝癌甚至死亡。 　　黄曲霉毒素主要存在于霉变的花生、谷物、果仁和大米等上;在水中的溶解范围为10～20mg/l，可大量溶解于氯仿、甲醇、二甲基亚砜等中等极性的有机溶剂中，不溶于己烷、石油醚和乙醚;易被碱或强氧化剂破坏;进入人体后主要经消化道吸收，大部分分布在肝脏、肾脏，少部分分布在血液、肌肉、脂肪组织等中，其在体内的代谢过程主要为羟基化作用、去甲基作用和环氧化作用。 　　人类接触黄曲霉毒素的主要来源是污染的食物，有两种通过膳食的摄入途径，①是由受黄曲霉毒素(主要为B1)污染的植物性食物中摄入;②是经饲料而进入奶或乳制品(包括乳酪、奶粉等)的黄曲霉毒素(主要为M1)。 　　危 害 　　黄曲霉毒素对人和动物健康的危害均与黄曲霉毒素抑制蛋白质的合成有关。1961年科学家发现被黄曲霉污染的花生饼粕能诱发大鼠肝癌，1962年发现致癌物为黄曲霉毒素。黄曲霉毒素具有致癌性、致突变性及致畸性，能使鱼类、禽类、猴等实验动物、家禽及灵长类诱发实验性肝癌，主要病变为肝脏出血、坏死、胆管增生、肝硬化等。据报道，以含有B10.1mg/kg的饲料喂鳟鱼，6个月后可出现肝癌;以含有B10.015mg/kg的饲料喂大鼠，经68～82周皆发生肝癌;国内进行的黄曲霉毒素致癌动物实验发现用含有黄曲霉毒素的饲料喂养的老鼠先后出现肝癌、前胃乳头状瘤、前胃鳞状上皮癌、纤维组织瘤、肾小管腺瘤、泪腺瘤、垂体腺瘤和甲状腺瘤等。此外，M1、G1及B2也有致癌作用。B1的半致死量(LD50)分别为大鼠(雄100g)7.2mg/kg;大鼠(雌 150g)17.9mg/kg;小鼠 　　9.0mg/kg;兔0.30～0.50mg/kg;猫0.55mg/kg;猴2.2～3.0mg/kg。黄曲霉的毒 (LD50)大小顺序为B1、M1、G1、B2、G2。黄曲霉毒素对植物、微生物、两栖动物、鸟类、甲壳动物、软体动物、昆虫等都有毒害作用，在植物的生长、收获、加工、贮藏、运输等过程中都可以发生黄曲霉毒素的污染。 　　食用受黄曲霉毒素污染的食品，会出现急性中毒。临床表现以黄疸为主，并有呕吐、厌食和发烧等症状。重症者在2～3周后将出现腹水、下肢水肿，甚至死亡，死亡前出现胃肠道出血。 　　在流行病学调查中发现，凡食物中黄曲霉毒素污染严重和人类实际摄入量较高的地区，肝癌发病率也高。 　　预 防 　　黄曲霉毒素危害性大，存在范围广，为了预防黄曲霉毒素中毒事件的发生，维护人类健康，世界上已有70多个国家和地区对食品中黄曲霉毒素的含量作了限量要求。下面是一些国家和地区对食品中的黄曲霉毒素的检验检疫要求： 　　① 美国联邦政府有关法律规定人类消费食品和奶牛饲料中的黄曲霉毒素含量(指 B1+B2+G1+G2的总量)不能超过20ug/kg，人类消费的牛奶中M1的含量不能超过0.5ug/kg，其他动物饲料中的含量不能超过300ug /kg; 　　② 欧盟于1999年1月1日开始执行的EC No. 1525/98法规，规定直接提供给人类食用的食物及组成食品的组分中的黄曲霉毒素B1的含量不能超过2ug/kg，黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的总量不得超过4ug/kg; 　　③ 日本规定食品中黄曲霉毒素B1的含量不能超过10ug/kg; 　　④ 我国食品中黄曲霉毒素B1允许量标准(GB2761-81)规定为玉米、花生仁、花生油中不得超过20μg/kg，玉米及花生仁制品(按原料折算)中不得超过20μg/kg，大米、其他食用油中不得超过10μg/kg，其它粮食、豆类、发酵食品中不得超过5μg/kg，婴儿代乳食品中不得检出，其他食品可参照以上标准执行;牛乳及其制品中黄曲霉毒素M1限量卫生标准(GB9676-88)规定为：牛乳及其制品中黄曲霉毒素M1不得超过0.5μg/kg。 　　目前，测定食品中的黄曲霉毒素的方法有薄层层析法、液相色谱法、放射免疫分析方法、酶联免疫法、免疫层析法、微柱筛选法、金标试纸法等。我国现行使用的国家标准GB/T 5009.22-1996规定了食品中黄曲霉毒素B1的测定方法、GB/T 5009.23-1996规定了食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的测定方法、GB/T 5009.24-1996规定了食品中黄曲霉毒素M1与B1的测定方法。此外，卫生部于1990年11月发布了《防止黄曲霉毒素污染食品卫生管理办法》。 　　预防黄曲霉毒素危害人类健康的主要措施是防止食品被黄曲霉毒素污染，并尽量减少人类随同食品摄入黄曲霉毒素的可能性，所以日常生活中要加强对食品的防霉去毒工作，要降低食品中的水分、降低食品存放温度和氧气浓度、保证食品存储仓库干燥、通风，使得黄曲霉菌不易生长;对于受黄曲霉毒素污染的食品可采用淘选、吸附(植物油)、烹调、碾磨(粮食)、化学法(食品和动物饲料)等方法去毒。

近20年来,碳二亚胺系列缩合剂,如N,N-"二环己基碳二亚胺(DCC)、N,N-"二异丙基碳二亚胺(DIC)、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)的研究引起广泛兴趣,并因其具有反应条件温和,产率高,选择性好,对环境友好等特点而得到普遍应用[1]。碳二亚胺作为脱水剂的反应机理如下:首先羧基1与碳二亚胺反应生成中间体O-酰基异硫脲2,引入酯基活化羧酸。2再与胺反应生成目标产物酰胺3和脲4。2可以与另一分子的羧酸反应生成酸酐5,酸酐与胺反应液得到酰胺3。同时,2会重排生成副产物N-酰基脲6。从该反应机理可以看出,碳二亚胺容易生成副产物脲,而DCC的反应产物N,N-"二环己基脲不溶于水,一般用过滤除去,但仍有少量残留于溶液中,难以除净。与DCC相比,DIC为液态,更容易使用;同时产物N,N-"二异丙基脲可溶于有机溶剂,很容易通过溶剂萃取除去,DIC常用在固态合成中,DIC用作DCC的替代品。EDC是碳二亚胺系列中活性较高的脱水剂,作为第二代水溶性缩合剂和偶联剂,无需在无水的条件下进行,试剂不需要干燥处理,具有反应时间更短,效率更高,易于操作[2]等优点。EDC主要用做生物多糖[3-4]、多肽、蛋白质、核苷酸合成[5]、高分子改性[6]和有机合成[7]的缩合剂和交联剂。EDC在有机合成中的应用受到极大关注,本文对近些年国内外EDC在有机合成,生物化学合成中的应用情况进行了综述。1

黄曲霉毒素是一类真菌（如黄曲霉和寄生曲霉）的有毒的代谢产物，它们具有很强的致癌性，主要存在于谷物、坚果、棉籽以及一些和人类血液，动物饲料相关的产品中。其中黄曲霉毒素B1（AFB1）的毒性、致癌性、污染频率均居于首位。薄层色谱一直是检测黄曲霉毒素常用的方法，但此方法制备样品及分析样品时费时又费力。而使用黄曲霉毒素B1 ELISA试剂盒则能够快速而准确的分析样品中黄曲霉毒素B1残留。本试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代真菌毒素检测产品，操作时间短 于60min，能最大限度地减少操作误差和工作强度。原理：三方圆利用竞争ELISA方法，在酶标板微孔上预包被羊抗鼠抗体。检测时，加入黄曲霉毒素Bl抗体孵育，它与包被的羊抗鼠抗体结合，洗板后加入标准品或样品溶液及黄曲霉毒素Bl酶结合物，他们竞争性地与黄曲霉毒素Bl抗体结合，形成抗原抗体复合物；用TMB底物显色；加入反应终止液后在450nm波长酶标仪下进行检测，样品中的黄曲霉毒素Bl浓度与吸光度成反比。样品检测限： 饲料------------------------------2.5μg/kg麸皮、玉米皮------------------5μg/kg回收率----------------------------85%±10%精密度-----------试剂盒的变异系数均小于10%

一、黄曲霉毒素(AFT)是一类化学结构类似的化合物，均为二氢呋喃香豆素的衍生物。黄曲霉毒素是主要由黄曲霉 (aspergillus flavus)寄生曲霉 (a.parasiticus)产生的次生代谢产物，在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率最高。它们存在于土壤、动植物、各种坚果中，特别是容易污染花生、玉米、稻米、大豆、小麦等粮油产品，是霉菌毒素中毒性最大、对人类健康危害极为突出的一类霉菌毒素。二、黄曲霉素具有耐热性，一般烹调加工温度不能将其破坏，裂解温度为280℃。此外，在碱性条件下，可使黄曲霉毒素转化成一种可溶于水的物质，故可以通过碱水洗涤去除。三、 维生素C可阻断黄曲霉毒素B1的环氧化作用从而阻止其氧化为活性形式的毒性物质。在日粮中添加一定量的维生素C，再加上适当水平的氨基酸，是克服黄曲霉毒素中毒的有效方法。

【检测原理】 试剂盒采用免疫竞争法分析原理结合胶体金标记技术进行检测。【检测范围】 牛奶、生鲜奶等液态奶。【技术指标】 测下限：0.5μg/kg；【检测步骤】样品处理：取1ml样品置于5ml离心管中，向离心管中加2ml提取剂，振摇2～3min后，用离心机以2000r/min,离心5min，取2ml上清液至另一个5ml离心管中，向其中加2ml净化剂，振摇5min，用离心机以2000r/min离心5min，吸取全部下层至点滴板的一个孔中自然挥干（或加热将其挥干），备用；样品检测:向点滴板上滴加4滴缓冲液，使其充分溶解挥干后的残留物；取出检测卡，并做好标记，用袋中吸管吸取点滴板上的全部样液，滴加到检测卡的加样孔中（逐滴滴下），5～10min内观察结果；结果判断：　阴性:测试线(T)与对照线(C)都出现，表明样品中黄曲霉毒素的浓度小于0.5μg/kg。阳性:只有对照线(C),无测试线(T)，表明样品中黄曲霉毒素的浓度大于或等于0.5μg/kg。无效:对照线(C)和测试线(T)都不出现，或者对照线（C）不出现。【试剂盒装箱单】 名称 数量 单位 名称 数量 单位 提取剂 2 瓶 5ml离心管 20 个 净化剂 2 瓶 1ml一次性吸管 20 支 缓冲液 1 瓶 点滴板 1 个 检测卡 10 个 说明书 1 张 【检测原理】　本品采用高度特异性的抗体抗原反应及免疫层析分析技术，通过单克隆抗体竞争结合 AFB1-BSA 偶联物和样品中可能含有的 AFB1 的原理。试剂含有被事先固定于膜上测试区（T）的 AFB1-BSA 偶联物和被胶体金标记的抗 AFB1单克隆抗体。【检测范围】　粮食：花生、小麦、玉米、高粱等； 饲料：以小麦麸皮、玉米面等粮食原料生产的饲料；食用油：玉米油，花生油及其他油脂；调味料（以粮食为主要原料）【技术指标】　检测下限：5.0μg/kg；【样品制备】粮食：任取 5g 以上有代表性样品并粉碎过 20 目筛，准确称取 2.0g 均匀粉碎试样于配套离心管中，再准确加入 4ml 纯净水和 4.0ml 乙酸乙酯，将瓶塞盖紧密封，充分振荡 5min，4000rpm 离心 1min 得上清液，将上清液用吸管移出 2.0ml 到蒸发皿或小玻璃杯中，用电吹风吹干上清液，再根据样品的种类按以下规定的稀释液量，用铝箔袋内配套吸管反复冲洗，彻底溶解杯底所有的固体，此溶解液为样品提取液即检测液。饲料（以黄曲霉素B1检测残留限量 50ppb 计算）：任取 5g 以上有代表性样品并粉碎过 20 目筛，准确称取 2.0g 均匀粉碎试样于配套离心管中，再准确加入 4ml 纯净水和 4.0ml 乙酸乙酯，将瓶塞盖紧密封，充分振荡 5min，4000rpm 离心 1min 得上清液，将上清液用吸管移出 0.5ml 到蒸发皿或小玻璃杯中，用电吹风吹干上清液，再以 2ml 的稀释液量用铝箔袋内配套吸管反复冲洗，彻底溶解杯底所有的固体，此溶解液为样品提取液即检测液。如果黄曲霉素B1检测残留限量是 30ppb，则用 1.2ml 的稀释液溶解；如果残留限量是 40ppb，则用 1.6ml 的稀释液溶解。食用油：称 2.0g 油样于小烧杯中，用 8ml 正乙烷分次将试样转移至分液漏斗中，准确加入 4ml 纯净水充分振荡 3min，吸去上层正乙烷层，再加入4ml 的乙酸乙酯，将瓶塞盖紧密封，充分振荡 5min，静置或 3000rpm 离心得上清液，将上清液用吸管移出 2ml 到小玻璃杯中，用电吹风吹干，再用稀释液溶解后为样品提取液。酱油、醋、发酵酒：称取 25.0g 样品于小烧杯中，用 5ml 蒸馏水将试样转移到分液漏斗中，加入 20ml 三氯甲烷，加塞轻轻振摇 3min，静置分层。放出下层三氯甲烷层，经盛有约 5g 预先用三氯甲烷湿润的无水 Na2SO4 过滤器于蒸发皿中，最后用少量三氯甲烷洗涤过滤器，洗液并于蒸发皿中，用电吹风吹干。吹干冷却后，准确加入稀释液，将蒸发皿中的凝结物充分溶解。【检测步骤】1. 在进行黄曲霉素B1检测前先完整阅读使用说明书，使用前将试纸卡和待检样本溶解恢复至室温；2. 从原包装袋中取出试纸卡，打开后平放在桌面上，请在 1 小时内尽快使用；3. 用吸管吸取待检样品溶液，滴加 3 滴于加样孔中，加样后开始计时；4. 结果应在 10min 内读取，超过 12min 的时间判读无效。 【结果判断】1. 阳性：位置 C 显示出红色线条，而位置 T 不显色时，或者位置 C 显示出红色线条，位置 T 显示颜色非常模糊时，判为阳性。阳性结果表明：AFB1 含量超过样品允许量。2. 阴性：位置 C 显示出红色线条，位置 T 同时显示出红色线条，且 T 线颜色接近 C 线或者深于 C 线时，判为阴性。阴性结果表明：AFB1 含量低于样品允许量。3. 无效：位置 C 不显示出红色线条，而位置 T 显示出红色线条，该试纸卡视为无效。建议使用新的试纸卡按本说明书要求重新测试。【注意事项】　　1. 请按照操作步骤进行黄曲霉素B1检测，操作时请勿触摸试纸显示区。2. 如购买时发现过期，破损，污染，无效的产品，请到购买处进行更换。3. 黄曲霉素B1检测试纸卡为一次性产品，请勿重复使用。4. 如遇稀释液不足，请用蒸馏水加入稀释液中混匀后使用。5. 本品为筛选试剂，任何阳性结果请用其他方法做进一步确认。6. 有条件的实验室可以用 AFB1 标准品测试后作为判断参考。【自备清单】感量 0.1g 的天平 、4000rpm 离心机、蒸发皿或烧杯、量筒、滴管、移液器具 、小型粉碎机 、乙酸乙酯、三氯甲烷、正乙烷、过滤器。 【检测原理】本试剂盒采用竞争ELISA原理，在微孔板上预包被黄曲霉毒素B1抗原（抗体），加入样本/黄曲霉毒素B1标准品溶液及辣根过氧化物酶标记的黄曲霉毒素B1抗体（抗原）。样本或标准品溶液中的黄曲霉毒素B1与黄曲霉毒素B1抗原（抗体）竞争黄曲霉毒素B1抗体（抗原）。未结合的酶标抗体在洗涤时被除去。再加入TMB显色液，读取吸光值。样本的吸光值与其所含残留物黄曲霉毒素B1的含量成负相关。对照标准曲线，即可得出相应残留物黄曲霉毒素B1的含量。【适用范围】可定性、定量检测玉米、大米、麦类、豆类、花生、饲料、食用油等样本中的黄曲霉毒素B1。（Ⅰ型及Ⅱ型试剂盒）可定性、定量检测婴儿配方食品，婴儿辅助食品等样本中的黄曲霉毒素B1。（Ⅲ型试剂盒）【试剂盒灵敏度】Ⅰ型试剂盒灵敏度：0.1ppb；Ⅱ型试剂盒灵敏度：0.5ppb；Ⅲ型试剂盒灵敏度：10ppt（0.01ppb）【交叉反应率】结构类似物 交叉反应率黄曲霉毒素B1 …………………………………………………………… 100%黄曲霉毒素B2 …………………………………………………………… 15%黄曲霉毒素G1 …………………………………………………………… 11%黄曲霉毒素G2 …………………………………………………………… 4%黄曲霉毒素M1 …………………………………………………………… 0.5%【试剂盒组成】1. 96孔板×1块2. 标准液×6瓶：（2ml/瓶）3. 酶标物1瓶 ……………………………………………6ml4. 显色液1瓶 ……………………………………………12ml5. 终止液1瓶 ……………………………………………10ml6. 浓缩洗涤液 （10×）1瓶……………………………50ml7. 浓缩样品稀释液（10×）1瓶 ………………………50ml【自备设备及试剂】设备：微孔板酶标仪450nm/630nm，振荡器，氮吹仪，粉碎机，离心机，天平：感量0.01g，微量移液器：单道 20μl～200μl、200μl～1000μl、八道移液器300μl试剂：甲醇（分析纯），石油醚，去离子水（或蒸馏水），三氯甲烷，NaCl【试剂配制】1. 样品稀释液：将浓缩样品稀释液用去离子水按1:9体积比进行稀释（1份浓缩样品稀释液+9份去离子水）。2. 洗涤工作液：将浓缩洗涤液用去离子水按1:9体积比进行稀释（1份浓缩洗涤液+9份去离子水）。3. 谷物稀释液：将0.9gNaCl用配制完成的样品稀释液溶解并定容至100ml。4. 啤酒稀释液：取甲醇，用配制完成的样品稀释液按1:4体积比进行稀释（1份甲醇+4份样品稀释液）。5. 50%甲醇：取甲醇，用去离子水按1:1体积比进行稀释（1份无水甲醇+1份去离子水）。6. 80%甲醇：取甲醇，用去离子水按4:1体积比进行稀释（4份无水甲醇+1份去离子水）。【样本前处理步骤】按样品种类不同及检出限不同，需使用不同溶剂，以不同倍数稀释（具体见操作说明书）后震荡，离心后取100μl上清液待测。【检测步骤】一、 测定前须知：1. 使用之前将所有试剂和所需板条回温（20～25℃）。2. 使用之后立即将所有试剂及剩余板条放置2～8℃，干燥环境保存有利于保持试剂稳定性。3. ELISA分析中的再现性，很大程度上取决于洗板的一致性，正确的洗板操作是ELISA操作中的要点。4. 在所有恒温孵育过程中，避免光线照射，用盖板膜封住微孔板。二、操作步骤：（以Ⅰ型试剂盒为例，Ⅱ型及Ⅲ型试剂盒略有不同）1. 将所需试剂及微孔板取出，放置室温（20～25℃）30min以上，液体试剂使用前均须摇匀。2. 取出所需数量的微孔板，将不用的微孔板与干燥剂一起重新真空密封，放置于2～8℃。不可冷冻。3. 洗涤工作液在使用前也需回温。4. 将样本和标准品对应微孔编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。5. 加标准品/样本50μl到对应的微孔中，加入酶标物50μl/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光反应15min。6. 小心揭开盖板膜，用洗涤工作液充分洗涤，300μl/孔，洗板5次，每次间隔30s，用吸水纸拍干。7. 加入显色液100μl/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光反应15min。8. 加终止液50μl/孔，轻轻振荡混匀，设酶标仪于450nm处读取每孔OD值。【结果判定】1. 百分吸光率的计算标准品或样本的百分吸光率等于标准品或样本的百分吸光度值的平均值（双孔）除以第一个标准（0标准）的吸光度值，再乘以100%，即百分吸光率（%）= B/B0×100%B—标准溶液或样本溶液的平均吸光度值B0—0(ppb)标准溶液的平均吸光度值2. 标准曲线的绘制与计算以标准品百分吸光率为纵坐标，黄曲霉毒素B1标准品浓度（ppb）的对数为横坐标，绘制标准曲线图。将样本的百分吸光率代入标准曲线中，从标准曲线上读出样本所对应的浓度，乘以其对应的稀释倍数即为样本中黄曲霉毒素B1实际含量。【注意事项】1. 室温低于20℃或试剂及样本没有恢复到室温（20～25℃）会导致所有标准的OD值偏低。2. 在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。3. 每种试剂使用前均需摇匀。4. 反应终止液为0.5M硫酸，避免接触皮肤。5. 不要使用过了有效期的试剂盒；也不要掺杂使用过了有效期的试剂盒；不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。6. 储存条件：试剂盒保存于2～8℃，不能冷冻，将不用的微孔板重新真空密封。标准物质和无色的显色剂对光敏感，因此要避光保存。7. 试剂变质的迹象：显色试剂有任何颜色表明显色剂变质，应当弃之。0标准的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5）时，表示试剂可能变质。8. 加入显色液后，一般显色时间为15～30min。若颜色较浅，可延长反应时间到35min（或更长），但不得超过40min。反之，则减短反应时间。9. 该试剂盒最佳反应温度为25℃，温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。 【检测原理】本试剂盒采用竞争ELISA原理，在微孔板上预包被黄曲霉毒素抗原，加入样本/黄曲霉毒素M1标准品溶液及辣根过氧化物酶标记的黄曲霉毒素M1抗体。样本或标准品溶液中的黄曲霉毒素M1与预包被在微孔板上的黄曲霉毒素抗原竞争结合辣根过氧化物酶标记的黄曲霉毒素M1抗体。未结合的酶标抗体在洗涤时被除去。再加入TMB显色液，读取吸光值。样本的吸光值与其所含残留物黄曲霉毒素M1的含量成负相关。对照标准曲线，即可得出相应残留物黄曲霉毒素M1的含量。【适用范围】可定性、定量检测牛奶，奶粉等样本中的黄曲霉毒素M1的含量。【试剂盒灵敏度】Ⅰ型试剂盒灵敏度：0.1ppb；Ⅱ型试剂盒灵敏度：0.02ppb；【交叉反应率】结构类似物 交叉反应率黄曲霉毒素B1 …………………………………………………………… 30%黄曲霉毒素B2 …………………………………………………………… 5%黄曲霉毒素G1 …………………………………………………………… 15%黄曲霉毒素G2 …………………………………………………………… 7%黄曲霉毒素M1 …………………………………………………………… 100%【试剂盒组成】1. 96孔板×1块2. 标准液×6瓶：（2ml/瓶）0ppb, 0.1ppb, 0.3ppb, 0.9ppb, 2.7ppb, 8.1ppb（Ⅰ型试剂盒）0ppt, 20ppt, 50ppt, 100ppt, 250ppt, 500ppt（Ⅱ型试剂盒）3. 浓缩酶标记物 1瓶 …………………………………… 1ml4. 酶标稀释液1瓶 ………………………………………… 7ml5. 显色液1瓶 …………………………………………… 12ml6. 终止液1瓶 …………………………………………… 10ml7. 浓缩样本稀释液（20×）1瓶 …………………… 50ml（仅Ⅱ型试剂盒）8. 浓缩洗涤液 （10×）1瓶 ………………………… 50ml【自备设备及试剂】设备：微孔板酶标仪450nm/630nm，振荡器，离心机，天平：感量0.01g，微量移液器：单道 20μl～200μl、200μl～1000μl、八道移液器300μl试剂：去离子水（或蒸馏水）【试剂配制】1. 洗涤工作液：将浓缩洗涤液用去离子水按1:9体积比进行稀释（1份浓缩洗涤液+9份去离子水）。2. 酶标物的配制(现用现配，避光保存)：将浓缩酶标记物与酶标稀释液按1：19体积比进行稀释（1份酶浓缩液+19份酶标稀释液）【样本前处理步骤】一、 牛奶（稀释倍数：1）1. 取待测样品，7000rpm室温下离心，5min；2. 取下层100μl（或200μl）待测。二、 奶粉（稀释倍数：5）1. 取1.0g奶粉，加入5ml去离子水，混匀；2. 7000rpm室温下离心，5min；3. 取下层100μl（或200μl）待测。【检测步骤】一、测定前须知：1. 使用之前将所有试剂和所需板条回温（20～25℃）。2. 使用之后立即将所有试剂及剩余板条放置2～8℃。3. ELISA分析中的再现性，很大程度上取决于洗板的一致性，正确的洗板操作是ELISA操作中的要点。4. 在所有恒温孵育过程中，避免光线照射，用盖板膜封住微孔板。二、操作步骤：（以Ⅰ型试剂盒为例，Ⅱ型试剂盒略有不同）1. 将所需试剂及微孔板取出，放置室温（20～25℃）30min以上，液体试剂使用前均须摇匀。2. 取出所需数量的微孔板，将不用的微孔板与干燥剂一起重新真空密封，放置于2～8℃。不可冷冻。3. 洗涤工作液在使用前也需回温。4. 将样本和标准品对应微孔编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。5. 加标准品/样本50μl到对应的微孔中，加入酶标物50μl/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光反应30min。6. 小心揭开盖板膜，用洗涤工作液充分洗涤，300μl/孔，洗板5次，每次间隔30s，用吸水纸拍干。7. 加入显色液100μl/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光反应30min。8. 加终止液50μl/孔，轻轻振荡混匀，设酶标仪于450nm处读取每孔OD值。【结果判定】1. 百分吸光率的计算标准品或样本的百分吸光率等于标准品或样本的百分吸光度值的平均值（双孔）除以第一个标准（0标准）的吸光度值，再乘以100%，即百分吸光率（%）= B/B0×100%B—标准溶液或样本溶液的平均吸光度值B0—0(ppb)标准溶液的平均吸光度值2. 标准曲线的绘制与计算以标准品百分吸光率为纵坐标，黄曲霉毒素M1标准品浓度（ppb）的对数为横坐标，绘制标准曲线图。将样本的百分吸光率代入标准曲线中，从标准曲线上读出样本所对应的浓度，乘以其对应的稀释倍数即为样本中黄曲霉毒素M1实际含量。【注意事项】1. 室温低于20℃或试剂及样本没有恢复到室温（20～25℃）会导致所有标准的OD值偏低。2. 在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。3. 每种试剂使用前均需摇匀。4. 反应终止液为0.5M硫酸，避免接触皮肤。5. 不要使用过了有效期的试剂盒；也不要掺杂使用过了有效期的试剂盒；不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。6. 储存条件：试剂盒保存于2～8℃，不能冷冻，将不用的微孔板重新真空密封。标准物质和无色的显色剂对光敏感，因此要避光保存。7. 试剂变质的迹象：显色试剂有任何颜色表明显色剂变质，应当弃之。0标准的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5）时，表示试剂可能变质。8. 加入显色液后，一般显色时间为15～30min。若颜色较浅，可延长反应时间到35min（或更长），但不得超过40min。反之，则减短反应时间。9. 该试剂盒最佳反应温度为25℃，温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。【样品最低检测限】Ⅰ型试剂盒：牛奶………………………………………………0.1ppb奶粉………………………………………………0.5ppbⅡ型试剂盒：牛奶 ………………………………………………0.02ppb奶粉 ……………………………………………… 0.1ppb【贮藏条件及保存期】贮藏条件：保存试剂盒于2～8℃。保存期：该产品有效期为12个月。 【检测原理】本试剂盒采用竞争ELISA，在微孔板上预包被黄曲霉毒素抗原，加入样本/黄曲霉毒素总量标准品溶液及辣根过氧化物酶标记的黄曲霉毒素总量抗体。样本或标准品溶液中的黄曲霉毒素与预包被在微孔板上的黄曲霉毒素抗原竞争结合辣根过氧化物酶标记的黄曲霉毒素总量抗体。未结合的酶标抗体在洗涤时被除去，再加入TMB显色液，读取吸光值。样本的吸光值与其所含残留物黄曲霉毒素总量的含量成负相关。对照标准曲线，即可得出相应残留物黄曲霉毒素总量的含量。【适用范围】可定性、定量检测玉米、大米、麦类、豆类、花生、饲料、食用油等样本中的黄曲霉毒素总量。【试剂盒灵敏度】试剂盒灵敏度：0.1ppb【交叉反应率】结构类似物 交叉反应率黄曲霉毒素B1 …………………………………………………………… 100%黄曲霉毒素B2 …………………………………………………………… 75%黄曲霉毒素G1 …………………………………………………………… 100%黄曲霉毒素G2 …………………………………………………………… 97%黄曲霉毒素M1 …………………………………………………………… 30%【试剂盒组成】1. 96孔板×1块2. 标准液×6瓶：（2ml/瓶）0ppb, 0.1ppb, 0.3ppb, 0.9ppb, 2.7ppb, 8.1ppb3. 酶标物1瓶 ………………………………………… 6ml4. 显色液1瓶 ………………………………………… 12ml5. 终止液1瓶 ………………………………………… 10ml6. 浓缩洗涤液 （10×）1瓶………………………… 50ml7. 浓缩样品稀释液（10×）1瓶 ……………………50ml8. 浓缩样品稀释液（10×）1瓶 ……………………25ml【自备设备及试剂】设备：微孔板酶标仪450nm/630nm，振荡器，氮吹仪，粉碎机，离心机，天平：感量0.01g，微量移液器：单道 20μl～200μl、200μl～1000μl、八道移液器300μl试剂：甲醇（分析纯），石油醚，去离子水（或蒸馏水），乙腈，NaCl【试剂配制】1. 样品稀释液：将浓缩样品稀释液用去离子水按1:9体积比进行稀释（1份浓缩样品稀释液+9份去离子水）。2. 洗涤工作液：将浓缩洗涤液用去离子水按1:9体积比进行稀释（1份浓缩洗涤液+9份去离子水）。3. 谷物稀释液：将0.9gNaCl用配制完成的样品稀释液溶解并定容至100ml。4. 啤酒稀释液：取无水甲醇，用配制完成的样品稀释液按1:4体积比进行稀释（1份甲醇+4份样品稀释液）。5. 50%甲醇：取无水甲醇，用去离子水按1:1体积比进行稀释（1份无水甲醇+1份去离子水）。【样本前处理步骤】按样品种类不同及检出限不同，需使用不同溶剂，以不同倍数稀释（具体见操作说明书）后震荡，离心后取100μl上清液待测。【检测步骤】一、测定前须知：1. 使用之前将所有试剂和所需板条回温（20～25℃）。2. 使用之后立即将所有试剂及剩余板条放置2～8℃，干燥环境保存有利于保持试剂稳定性。3. ELISA分析中的再现性，很大程度上取决于洗板的一致性，正确的洗板操作是ELISA操作中的要点。4. 在所有恒温孵育过程中，避免光线照射，用盖板膜封住微孔板。二、操作步骤：（以Ⅰ型试剂盒为例，Ⅱ型试剂盒略有不同）1. 将所需试剂及微孔板取出，放置室温（20～25℃）30min以上，液体试剂使用前均须摇匀。2. 取出所需数量的微孔板，将不用的微孔板与干燥剂一起重新真空密封，放置于2～8℃。不可冷冻。3. 洗涤工作液在使用前也需回温。4. 将样本和标准品对应微孔编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。5. 加标准品/样本50μl到对应的微孔中，加入酶标物50μl/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光反应15min。6. 小心揭开盖板膜，用洗涤工作液充分洗涤，300μl/孔，洗板5次，每次间隔30s，用吸水纸拍干。7. 加入显色液100μl/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光反应15min。8. 加终止液50μl/孔，轻轻振荡混匀，设酶标仪于450nm处读取每孔OD值。【结果判定】1. 百分吸光率的计算标准品或样本的百分吸光率等于标准品或样本的百分吸光度值的平均值（双孔）除以第一个标准（0标准）的吸光度值，再乘以100%，即百分吸光率（%）= B/B0×100%B—标准溶液或样本溶液的平均吸光度值B0—0(ppb)标准溶液的平均吸光度值2. 标准曲线的绘制与计算以标准品百分吸光率为纵坐标，黄曲霉毒素总量标准品浓度（ppb）的对数为横坐标，绘制标准曲线图。将样本的百分吸光率代入标准曲线中，从标准曲线上读出样本所对应的浓度，乘以其对应的稀释倍数即为样本中黄曲霉毒素总量实际量。【注意事项】1. 室温低于20℃或试剂及样本没有恢复到室温（20～25℃）会导致所有标准的OD值偏低。2. 在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。3. 每种试剂使用前均需摇匀。4. 反应终止液为0.5M硫酸，避免接触皮肤。5. 不要使用过了有效期的试剂盒；也不要掺杂使用过了有效期的试剂盒；不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。6. 储存条件：试剂盒保存于2～8℃，不能冷冻，将不用的微孔板重新真空密封。标准物质和无色的显色剂对光敏感，因此要避光保存。7. 试剂变质的迹象：显色试剂有任何颜色表明显色剂变质，应当弃之。0标准的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5）时，表示试剂可能变质。8. 加入显色液后，一般显色时间为15～30min。若颜色较浅，可延长反应时间到35min（或更长），但不得超过40min。反之，则减短反应时间。9. 该试剂盒最佳反应温度为25℃，温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。【样品最低检测限】谷物 ………………………………………………0.8ppb蛋糕 …………………………………………………1ppb花生、奶油蛋糕……………………………………1ppb食用油 ………………………………………………1ppb饲料、面粉、汤圆………………………………2.4ppb啤酒 ………………………………………………0.5ppb酱油、醋 …………………………………………0.8ppb【贮藏条件及保存期】贮藏条件：保存试剂盒于2～8℃。保存期：该产品有效期为12个月。

浑浊红球菌PD630菌株对AFB1具有优秀的讲解活性。主要是由于发酵上清夜中存在胞外蛋白质或者酶。发酵上清具有优异的热稳定性，这有益于在实际应用时承受食品加工中的苛刻条件。因此，浑浊红球菌PD630菌株可以作为食品或饲料工业中AFB1解毒的优秀替代菌株。

以香豆素为唯一碳源的选择培养基。黄曲霉属于真核生物,细菌属于原核生物,两者共同具有的组成结构和物质。

迄今尚不清楚，根据高发区流行病学调查，以下因素可能与肝癌流行有关。(一)发病原因HCC的病因和发病机制尚未确定，可能与多种因素的综合作用有关，在世界任何地区都同样发现，任何原因导致的慢性肝病都可能在肝癌发生和发展过程中起着重要的作用。流行病学和实验研究均表明病毒性肝炎与原发性肝癌的发生有着特定的关系，目前比较明确的与肝癌有关系的病毒性肝炎有乙型、丙型和丁型3种。其中以乙型肝炎与肝癌关系最为密切，近年HBsAg阴性肝癌数增加与丙型肝炎有关，而前苏联则以丁型为多。我国肝癌患者中约90%有乙型肝炎病毒(HBV)感染背景。其他危险因素包括酒精性肝硬化、肝腺瘤、长期摄入黄曲霉素、其他类型的慢性活动性肝炎、Wilson病、酪氨酸血症和糖原累积病。近年来研究着重于乙型、丙型肝炎病毒、黄曲霉毒素B1和其他化学致癌物质。1.肝硬化任何肝硬化的病因都可伴发HCC。HCC常发生于肝硬化的基础上，世界范围内，大约70%的原发性肝癌发生于肝硬化基础上。英国报告肝癌患者合并肝硬化的发生率为68%～74%，日本约占70%。死于肝硬化的患者，尸检原发性肝癌的检出率为12%至25%以上。我国1949～1979年500例尸检肝癌的肝硬化合并率为84.6%。第二军医大学报告1102例手术切除的肝癌中，合并肝硬化者占85.2%，且全部为肝细胞癌，胆管细胞癌均无肝硬化。并不是所有类型的肝硬化患者都具有同样的肝癌发生率。肝癌多发生于乙型肝炎、丙型肝炎的结节性肝硬化，而胆汁性、血吸虫性、酒精性、淤血性肝硬化较少合并肝癌。国外报道死于原发性胆汁性肝硬化的患者，尸检肝癌为3%，而死于HBsAg阳性的慢性活动性肝炎、肝硬化的患者，尸检肝癌为40%以上。国内334例结节型肝硬化尸检材料中，肝癌发现率为55.9%。早期的报道，肝癌合并肝硬化以大结节型为主，占73.6%，而第二军医大学对20世纪80年代以来手术切除的1000例肝癌标本的研究显示，肝硬化合并率为68%，并以小结节型肝硬化为主，占54.4%，混合型肝硬化占29.3%，大结节型肝硬化仅占16.3%。提示随着对肝炎诊治水平的提高，轻型肝炎较重型肝炎更为多见，前者以形成小结节肝硬化为主。化学致癌物质的动物实验研究显示，再生结节是肝细胞向癌肿转变的促进因子。酒精性肝硬化多属小结节性，在戒酒后小结节渐转变为大结节，癌变率亦随着提高，支持了以上论点。其他原因所致的肝硬化，如原发性胆汁性肝硬化、α1抗胰蛋白酶缺乏症、肝豆状核变性、血色病及Budd-Chiari综合征、自身免疫性慢性活动性肝炎，均可并发HCC。肝硬化癌变的机制目前有两种解释：第一种解释是，肝硬化本身就是一种癌前疾病，在没有其他因素情况下，从增生、间变导致癌的形成;第二种解释是，肝硬化时肝细胞快速的转换率，使得这些细胞对环境的致癌因子更加敏感，即致癌因子可引起肝细胞的损伤，在损伤修复之前，发生DNA复制，从而产生永久改变的异常细胞。资料显示约有32%的肝癌并不合并肝硬化，但即使在无肝硬化肝癌中，HBsAg阳性率也高达75.3%，提示慢性肝炎可以不经过肝硬化阶段，直接导致肝癌的发生。HBV或HCV感染所致肝细胞损害和再生结节形成，是肝硬化肝癌发生的基础。当HBV感染宿主肝细胞后，以基因整合形式存在的为主，并不造成肝细胞的坏死和增生，则可能在相对短的时间内，不发生肝硬化而直接导致肝癌。2.乙型肝炎病毒原发性肝癌患者中约有1/3曾有慢性肝炎史。流行病学调查发现HCC高发区人群HBsAg阳性率较低发区为高，而HCC患者血清HBsAg及其他乙肝病毒标志物的阳性率高达90%，显著高于健康人群。HCC发生率与HBV携带状态的流行之间存在着正相关关系，而且还存在着地理上的密切关系。(1)HBV与HCC的相关性可从以下几点来阐明：①HCC与HBsAg携带者的发生率相平行：原发性肝癌高发的地区同时也是HBsAg携带率较高的地区，而肝癌低发区的自然人群中HBsAg的携带率则较低。我国人群中HBsAg的携带率大约为10%，全国有1.2亿HBV携带者，每年尚有约100万新生儿因其母亲为携带者而感染HBV，而在肝癌低发的欧美、大洋洲，HBsAg携带率仅为1%。②肝癌患者的慢性HBV感染的发生率明显高于对照人群：第二军医大学东方肝胆外科研究所1000例肝癌患者中，HBsAg阳性率为68.6%;上海市中山医院992例住院肝癌患者中，HBsAg携带率为69.1%，抗HBc阳性率为72.1%;均显著高于我国自然人群中10%的HBsAg携带率。台湾报道，HBsAg携带率为15%，而肝癌患者中为80%，抗HBc阳性率可达95%。即使在原发性肝癌低发的地区，肝癌患者HBV感染的发生率也显著高于自然人群。如美国，肝癌患者抗HBc阳性率为24%，是对照组的6倍。英国肝癌患者HBsAg阳性率为25%，也显著高于自然人群的1%。以免疫荧光和免疫过氧化酶技术检测，约80%的肝癌标本中，癌旁组织或肝细胞胞浆中有HBsAg，20%胞核内有HBcAg;地衣红染色显示，肝癌标本中HBsAg阳性率为70.4%～90%，显著高于对照组的4.7%。HCC患者血清内常有s抗原、s抗体、c抗原、c抗体、e抗原、e抗体之一阳性，其中以s抗原、c抗体双阳性为多见。近年来发现e抗体阳性也多见。③HCC的家族聚集见于HBsAg阳性、慢性肝炎、肝硬化的家庭。说明除了可能的遗传因素外，HBV感染仍是主要的致癌因素。④s抗原阳性的肝癌，其非癌细胞胞浆内也可有s抗原。⑤人肝癌细胞株可分泌HBsAg和AFP。⑥HCC患者的癌细胞有HBV-DNA整合。分子生物学研究发现肝癌细胞的DNA中整合有HBV-DNA的碱基序列。某些人肝癌细胞株可持续分泌HBsAg和AFP。自Alexander发现人肝癌细胞株PLC/PRE/5能恒定地分泌HBsAg后，陆续又发现Hep-3B、Hah-1、Huk-4以及C2HC/8571等细胞株都产生HBsAg。⑦鸭肝癌与土拨鼠肝癌也有与人类乙型肝炎病毒相类似的肝炎病毒：动物肝癌的流行为肝炎与肝癌的关系研究提供重要线索，并成为病因研究的模型。国外发现土拨鼠肝癌的发生与肝炎有关，我国亦发现启东麻鸭的肝癌也与感染了与人类乙型肝炎病毒相类似的病毒有关。土拨鼠从急性肝炎直接引起肝癌，而启东麻鸭则有慢性肝炎→肝硬化→肝癌的过程。综上所述，HBV感染是导致肝癌发生的重要因素。尽管有大量线索提示HBV与肝癌的关系密切，但是HBV导致肝癌发生的确切机制和过程仍不十分清楚。近年肝癌分子生物学的研究为HBV的致癌机制提供了新的证据。⑧同一人群中，HCC在s抗原携带者的发病率远比非s抗原携带者为高。在一项前瞻性研究中，3500名HBsAg携带者，随访3.5年，发现肝癌49例，患肝癌的危险性较对照组高出250倍。(2)在HCC发病过程中，HBV几乎被肯定是一个始发因子，动物实验和人体研究都支持HBV的直接致癌作用。主要包括：①HBV整合造成染色体的缺失和转位。②土拨鼠肝病毒整合常激活细胞原癌基因(N，C-myc)。③HBV的整合可使人的视黄酸受体和环胞素A蛋白的基因发生改变，影响细胞的分化和细胞周期运转。④嗜肝DNA病毒基因(HBV、WHV、GSH)作为一种转录子反式激活病毒和细胞促进因子。⑤HBV的X基因蛋白在转基因小鼠中具有转化癌基因的活性。(3)HBV-DNA与肝癌癌基因：HBV-DNA的分子致病机制和HBV-DNA与肝癌癌基因的相互作用有关。HBV的基因组为两条成环状互补的DNA链。HBV-DNA的基因组包含S区、X基因、C区及P基因。S区编码HBsAg;X基因编码HBxAg，C区编码HBcAg及HbeAg。HBV-DNA整合到肝细胞的DNA后，可能通过与癌基因和(或)抑癌基因的相互作用，从而激活癌基因和(或)导致抑癌基因的失活而致癌。整合在肝细胞的HBVX基因的产物X蛋白具有反式激活的功能，可能通过激活某些细胞调控基因的转录而导致肝癌。3.丙型肝炎病毒(HCV)自1989年开始，HCV与HCC之间的关系开始得到重视。随着非HBV相关HCC病例的增多，慢性非甲非乙型肝炎(NANB)的致癌作用已被证实。据信非甲非乙型肝炎病人中90%以上为HCV感染。已有许多报道HCV感染是HCC发生的一项主要危险因素。在日本和意大利HBV感染者相对较少，而其他环境因素如黄曲霉毒素更不存在，而与HBV相关的HCC发生率下降，但总的HCC发生率变化不大甚至上升，说明其他因素的作用增加，其中包括HCV。Ksbayashi探讨日本HCC病因学中发现77%甚至高达80%的HCC患者血清中可查到HCV，同时还发现HCC组织内有HCV系列。对401例肝硬化病人随访平均4.4年，在HCV阳性组，HCC累积危险率明显高于HBV组，由HCV感染所致肝硬化有15%发展为HCC。Ikeda等在一项为期15年的观察中发现，慢性HCV性肝硬化发生HCC的危险性要大于HBV性肝硬化约3倍。国内王春杰应用免疫组化方法对102例HCC组织进行HCV及HBV抗原定位研究，发现HCVC33抗原及HBxAg在HCC中的阳性检出率分别为81.4%及74.5%。在HCC中，抗HCV阳性率最高的是欧洲南部和日本，其次是希腊、澳大利亚、瑞士、沙特和台湾，最低是美国、非洲、印度和远东的其他国家。从王春杰的研究结果看，我国HCC中HCV阳性率与日本相近。HCV由于其基因的高复制率和很低或缺乏校正能力，使得HCV逃逸宿主的免疫防卫，易转为慢性持续感染，很少有自限性。HCV所致的慢活肝能引起持续的肝细胞变性和坏死，为其致癌的机制之一，而这种致癌并非HCV直接转化肝细胞作用，而可能是在细胞生长和分化中起间接作用，如活化生长因子、激活癌基因或DNA结合蛋白的作用。抗HCV阳性的肝癌病人，其肝组织中多数能检出HCV序列，支持了HCV感染参与肝脏发生癌变机制的假说。第二军医大学检查了96例肝癌，43例慢性肝炎和40例肝硬化患者，血清中的HCV-Ab阳性率分别为11.5%、9.3%和10%。结果表明我国肝癌患HCV感染率仍然较低，且其中有一部分为双重感染，提示HCV感染尚不是我国肝癌的主要病因。但近年来，与输血和使用生物制品有关的HCV感染有增多趋势，并可能导致某些HBsAg阴性肝癌的发生，因此对HCV的预防和诊治不容忽视。4.黄曲霉毒素(aflatoxin，AFT)AFT产生于黄曲霉菌(Aspergillusflauus)，为一群毒素，根据显示不同的荧光可分为黄曲霉素B(AFB)和黄曲霉素G(AFG)，前者又分为AFBl和AFB2，后者分为AFG1和AFG2。其中以AFB1的肝毒性最强，与HCC的关系也最密切，它在狨猴、大鼠、小白鼠及鸭均可致HCC，但在人类还没有直接致癌的证据。非洲、东南亚地区均存在AFT污染越重，HCC发病越高的关系。我国启东、扶绥和崇明岛是我国三大HCC高发区，霉变的玉米、花生、麦类、棉籽、大米中的AFT含量高，是这些高发区的一种致癌因素。AFT在HCC的发病中是属原发抑或促发作用尚不清楚。在格陵兰岛，HBsAg携带率高，而AFT含量低，HCC的发生率亦低。在鸭乙肝病毒感染的基础上喂饲含AFT高的食物，其HCC的生长速度比不喂饲同类食物的为快。VanRensburg等在莫桑比克和特兰斯恺等9个地区所作的相关性研究观察到，HBsAg携带状态是致癌指标，而AFT对以后阶段或促癌起一定作用。1982年的一项调查发现，来自饮食和谷物样品的AFT接触的估计值和男性HCC最低发生率间存在正相关关系。用多元分析评价AFT和HBsAg对HCC发生率的联合作用揭示，在斯威士兰，HCC的地理变异中起最主要作用的因素是AFT。我国也有学者在广西地区研究了AFB1、HBsAg与HCC的关系，认为HBsAg可能先于AFT接触，为AFT致HCC打下一定的病理基础。AFT与HBsAg感染有交互作用，尤其在后期形成HCC中起一定作用。菲律宾比较了90例确诊为HCC患者和90例对照者，用回忆法调查其AFT接触量，结果HCC病例组平均摄入量超过对照组44%，在轻接触组和重接触组中，既有AFT摄人，又有饮酒，二者有协同作用，认为饮酒能增强AFT的致HCC作用。VanRensburg通过实验证明了AFT与HCC的发病是对数关系，线性相关。黄曲霉毒素在肝内可很快转化为具有活性的物质，并可与大分子物质结合。其AFB1代谢产物可能是一种环氧化物，可与DNA分子的鸟嘌呤残基在N7位行共价键结合，改变DNA的模板性质，干扰DNA的转录。从大量的HCC病人中已测出抑制基因P53的密码子249G至T的转变，提示P53中这一特异取代，可能是AFT引起基因改变的特征，从而间接支持这一真菌毒素的致癌作用。5.寄生虫病肝寄生虫病与HCC之间的关系迄今尚未被确认。华支睾吸虫感染被认为是胆管细胞性肝癌的病因之一。泰国报道，华支睾吸虫感染者有11%发生HCC，说明肝吸虫病与HCC有一定相关性。在广西扶绥县肝癌病人中有43.3%吃生鱼史，而肝癌中94.1%为HCC而非胆管细胞癌，且合并肝硬化者达85.2%，这可提示肝吸虫病与肝癌并无直接关系。血吸虫病与HCC之间的关系亦未确定，多数学者认为两者并无因果关系，因为肝癌和血吸虫病二者的地理分布并不一致，而且晚期血吸虫病并发HCC多数是在混合结节性和小结节性肝硬化基础上，并非血吸虫病特有的肝纤维化，同时其1/4还合并有HBsAg阳性，因此，血吸虫病作为HCC的直接病因尚缺乏依据。6.口服避孕药和雄激素1971年首次报道口服避孕药引起肝脏腺瘤。在实验研究中，给亚美尼亚仓鼠皮下植入15mg己烯雌酚小丸，几个月内发生HCC，如同时投予雌激素拮抗剂他莫昔芬(三苯氧胺)，则完全可预防HCC的发生，表明雌激素参与HCC的发生。在美国，口服避孕药其雌激素含量比我国高出8倍，它可引起良性肝腺瘤，也有发展为HCC者，中止服药，肝癌会退缩。但也有认为口服避孕药与HCC只是偶然的巧合。并且发现肝癌是雄激素依赖性肿瘤，HCC组织中雄激素受体多于雌激素受体，HCC男性多于女性。7.乙醇在西方国家，饮酒是慢性肝病病因中最主要的因素，但回顾性病理解剖研究和前瞻性的临床与流行病学研究，表明乙醇和HCC尚无直接关系，充其量只是一种共致癌质。乙醇可增强HBV、亚硝胺、AFT、诱发HCC的作用，其促癌的机制未明。一些报道认为，乙醇能影响维生素A的代谢以及影响细胞色素P450活性，从而加速致癌原的生物转化作用。8.环境因素江苏启东饮用沟塘水者HCC发病率为60/10万～101/10万，饮用井水者仅0～10/10万，饮用沟水者相对危险度增大。近年来，改善水质后已使该地区HCC发生率下降，其内在因素尚未完全明了。流行区水源中铜、锌、镆含量较高，钼含量偏低。HCC患者体内铜含量与水源中的变化一致，这些微量元素的改变在HCC病因学中可得到一些启示。近年来发现缺硒与HCC有关，缺硒是HCC的发生和发展过程中的一个条件因子。在非洲的最新资料显示，摄入过多的铁，可引起HCC。另外，中国人移居美国后，其第二代或以后几代人HCC的发病率都低于第一代，也低于迁居前出生地居民的HCC发病率，这些也说明了环境因素的重要性。江苏启东饮用沟溏水者肝癌发病率为60～101/10万，饮用井水者仅0～19/10万。饮用沟水者相对危险度为3.00。调查发现沟溏水中有一种兰绿藻产生藻类毒素可能是饮水污染与肝癌发生的有关线索。9.遗传因素在高发区HCC有时出现家族聚集现象，尤以共同生活并有血缘关系者的HCC罹患率高，有人认为这与肝炎病毒因子垂直传播有关，但尚待证实。另有研究结果提示，α1抗胰蛋白酶缺乏症患者发生HCC的危险性增加。HCC与血色素沉着症的联系，仅仅存在于那些患此病且能长期生存，以致发生肝硬化的患者。10.其他致癌物质亚硝胺喂饲狒狒及猴子后可发生单结节肝癌，HBV、亚硝胺并存可引起多灶性、多结节肝癌。奶油黄(二甲基偶氮苯)、六氯苯、苯并芘、多氯联苯、三氯甲烷、1，2-二溴乙烷等物质均已证实具有致癌性。黄曲霉毒素在肝癌高发区尤以南方以玉米为主粮地方调查提示肝癌流行可能与黄曲霉毒素对粮食的污染有关，人群尿液黄曲霉毒素B1代谢产物黄曲霉毒素M1含量很高。黄曲霉毒素B1是动物肝癌最强的致癌剂，但与人肝癌的关系迄今尚无直接证据。总之，肝癌的发生是一个多因素综合作用的结果，确切的病因和机制尚待进一步的研究。本病病情发展迅速，病死率高，严重的危害生命健康。由于目前尚难以一种因素满意解释我国和世界各地肝癌的发病原因和分布情况，故肝癌的发生可能由多种因素经多种途径引起;不同地区致癌和促癌因素可能不完全相同，什么是主要因素，各因素之间相互关系如何尚有待研究。(二)发病机制1.肝癌的大体形态及分类肝癌结节外观多数呈球状，边界不甚规则，肿瘤周围可出现“卫星结节”。肝脏周边部靠近包膜的癌结节一般凸出表面但无中心凹陷。癌结节切面多呈灰白色，部分可因脂肪变性或坏死而呈黄色，亦可因含较多胆汁而显绿色，或因出血而呈红褐色。出血坏死多见于大结节的中央部。癌结节质地与组织学类型有关，实体型癌切面呈均质、光滑且柔软;梁状型癌切面则干燥呈颗粒状;胆管细胞癌因富含胶原纤维质地致密。肝癌体积明显增大，重量可达2000～3000g，不伴肝硬化的巨块型肝癌体积更大，重量可达7000g以上。多数肝癌伴大结节性或混合性肝硬化，部分门静脉、肝静脉腔内可见癌栓形成。(1)1901年Eggel分型：将肝癌大体分为巨块型、结节型和弥漫型三种类型。①巨块型：癌组织呈大块状，可以是单发性，也可以由许多密集的小结节融合而成。一般以肝右叶多见，约占73%，类似膨胀性生长，周围可有假包膜形成，合并肝硬化较轻，手术切除率较高，预后也较好。但有报道伴有“卫星结节”的巨块型肝癌预后差。②结节型：肝癌由许多大小不等的结节组成，也可由数个结节融合成大结节，常伴有明显肝硬化，手术切除率低，预后较差。③弥漫型：最少见，主要由许多癌结节弥散分布于全肝，伴肝硬化，预后极差。这一传统分型已沿用至今，主要适用于已有临床表现的肝脏较大和较晚期肝癌。肉眼观察原发性肝癌既有上述不同类型，其发生之方式因此也有不同解释。有的学者认为肝癌的发生是多中心的，即癌肿是同时或相继地自不同的中心生出;也有人认为癌肿的发生是单中心的，即癌肿初起时仅有一个中心，而肝内的其他结节均为扩散转移的结果。就临床的观点看来，不论肝癌是以何种方式发生，显然结节型及弥散型的肝癌更为严重，因为这种肝癌的恶性程度很高，且病变已经累及肝脏的两叶，故预后最劣。(2)奥田邦雄(日本)结合肝癌的生长方式将肝癌分为：①膨胀型：癌肿边界清晰并有包膜形成，有单结节或多结节，常伴有肝硬化。②浸润型：癌肿边界不清，多数不伴肝硬化。③混合型：在膨胀型癌灶外伴有浸润型肝癌存在，同样分为单结节型和多结节型。④弥漫型：肝脏弥散性的小结节癌灶，结节直径多在1cm以下，分布于整个肝脏。⑤特殊型：如带蒂外生型、肝内门静脉癌栓而无实质癌块等。不同地区肝癌的病理表现不同，如日本以膨胀型为多，北美以浸润型为多，南非的肝癌常不伴有肝硬化。(3)我国目前应用的肝癌大体分类标准：全国肝癌病理协作组在Eggel分类基础上又提出以下分型即弥漫型、块状型(包括单块状、融合块状、多块状)、结节型(包括单结节、融合结节和多结节)、小癌型。①弥漫型：癌结节小，呈弥散性分布。此型易与肝硬化混淆。②块状型：癌肿直径>5cm，其中>10cm者为巨块型。可在分为3个亚型。A.单块型：单个癌块，边界较清楚或不规则，常有包膜。B.融合型：相邻癌肿融合成块，周围肝组织中有散在分布的卫星癌结节。C.多块型：由多个单块或融合块癌肿形成。③结节型：癌结节直径>5cm，可再分为3个亚型：A.单结节型：单个癌结节，边界清楚有包膜，周边常见小的卫星结节。B.融合结节型：边界不规则，周围散在卫星结节。C.多结节型：分散于肝脏各处，边界清楚或不规则。④小癌型：单个癌结节直径≤3cm，或相邻两个癌结节直径之和≤3cm。边界清楚，常有明显包膜。2.组织学分型根据肝癌的组织学来源，将其分为3型：(1)肝细胞癌：最多见，多数伴有肝硬化。一般相信系由实质细胞产生，占肝癌病例之90%～95%(我国占91.5%)，主要见于男性。癌细胞呈多角形，核大而且核仁明显，胞浆呈颗粒状，为嗜酸性，排列成索状或巢状，尤以后者为多见，有时在分化较好的癌细胞中可见到胆汁小滴。癌巢间有丰富的血窦，癌细胞有向血窦内生长的趋势(图1)。肝细胞癌分为索状/梁状型、索状腺样型、实体型和硬化型四种类型。同一病例中有时可见结节性增生、腺瘤和肝癌等不同病变同时存在，且常伴有肝硬化。(2)胆管细胞癌：女性多见，约占女性肝癌的30.8%。根据其来源可分为两种，一种来自小胆管，癌细胞较小，胞浆较清晰，形成大小不一的腺腔，间质多而血窦少，这一类在临床相对多见。另一种来自大胆管上皮，癌细胞较大，常为柱状，往往形成较大的腺腔，这一类较少见。胆管细胞癌不分泌胆汁而是分泌黏液(图2)。胆管细胞癌根据形态一般分为管状腺癌、鳞腺癌、乳头状腺癌三种亚型。与肝细胞癌相比，胆管细胞癌往往无肝病背景，极少伴有肝硬化，癌块质硬而无包膜，结缔组织较多，以淋巴道转移为主，临床表现为早期出现黄疸、发热，门脉高压症状少见，仅约20%患者AFP轻度增高。(3)混合型：较少见，其特点是部分组织形态似肝癌细胞，部分似胆管癌细胞，两种细胞成分有的彼此分隔，有的混杂，界线不清。混合型肝癌可分为分离型、过渡型、混杂型三种亚型。(4)超微结构：肝癌细胞超微结构特点有：①细胞大，形态不规则。血管壁有基底膜，Disse间隙充以胶质纤维，血窦内皮细胞可能缺如，癌细胞直接与血液接触。毛细胆管少，结构不清，管侧细胞间隙不规则增宽，相对的细胞膜有大小不一的微绒毛。上述增宽的间隙可与Disse间隙或血窦相连;②细胞器数量和类型与肝癌分化有关，高分化的癌细胞保留线粒体，有较多扩张的粗面内质网，核糖体较多，有时光面内质网呈螺纹状，称“指印”或“髓鞘”。分化低的癌细胞细胞器减少，线粒体大而异形，稀少，有时有包涵体，整个细胞显得单调。③细胞核大，不规则，可内陷，黏膜粗糙，核周间隙扩张，甚至形成囊泡。核仁多、大且不规则。相对特征的亚微变化：①假包涵体;胞核不规则内陷，形成囊袋或分叶状，其中包罗含细胞器的胞浆;②髓样小体：由次级溶酶体中残留的线粒体或内质网形成的同心圆结构。此外，在肝癌细胞中能发现一些特殊物质：①糖原颗粒;②脂滴;③AFP在粗面内质网集中处;④HBsAg位于光面内质网，HBcAg位于细胞核，HCV样颗粒位于核内。3.肝细胞癌的分级国内外对原发性肝癌曾有过各种不同的临床分型方法，如Berman将其分为显著癌肿型、急腹症型、发热型、隐匿型和转移型，以显著癌肿型占多数。国内钟学礼等将其归纳为10型，即肝肿大型、肝脓肿型、肝硬化型、阻塞性黄疸型、腹腔出血型、血糖过低型、胆囊炎与胆石症型、慢性肝炎型、腹内囊肿型及弥漫性癌肿型;林兆耆等又增加了类白血病型及截瘫型，共12型。上述这些分型方法都是根据中、晚期肝癌患者的临床表现加以区分的，而对无临床症状的早期患者均不适用。因此，由于原发性肝癌临床表现的多样化，临床上对这些患者均应加以详细询问病史及体格检查，特别对患过肝病的患者尤须提高警惕。根据癌细胞的分化程度，将肝细胞癌分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四级，其中Ⅰ级为高分化型，Ⅱ、Ⅲ级为中分化型，Ⅳ级为低分化型。以中分化型肝细胞癌最多见。Ⅰ级：癌细胞形态与正常肝细胞相似。一般呈索条状排列，胞浆呈嗜酸性，核圆，大小较规则，核分裂少见。Ⅱ级：癌细胞形态轻度变形，呈索条状或巢状排列，核浆比例明显增大，胞浆轻度嗜碱性，常可见到胆汁小滴，核分裂增多。Ⅲ级：癌细胞明显变形，呈巢状排列，核浆比例增大，胞浆染色呈嗜酸性，胆汁小滴少见，核的大小、染色不规则，核分裂多见，有时见癌巨细胞。Ⅳ级：癌细胞呈明显异形，可见到梭形细胞和多核巨细胞，胞浆少而核深染，核分裂多，细胞排列紊乱，常无胆汁小滴。4.肝细胞癌的TNM分期UICC1987年关于原发性肝癌的TNM分类如下：Tx原发肿瘤不明，T0无原发癌证据。T1：单个结节≤2cm，无血管侵犯。T2：单个结节≤2cm，侵犯血管，或多个局限一叶，≤2cm，未侵犯血管;或单个，>2cm，未侵犯血管。T3：单个结节，>2cm，侵犯血管;或多个，局限于一叶，≤2cm，侵犯血管;或多个，一叶内，>2cm，伴或不伴血管侵犯。T4：多个结节，超出一叶;或侵犯门静脉主支或肝静脉。N0：局部淋巴结无转移。N1：有局部淋巴结转移。M0：无远处转移。Ml：有远处转移。日本在TNM分类基础上将肝癌分为4期，Ⅰ期为T1N1M0;Ⅱ期为T2N0M0;Ⅲ期为T3N0M0或T1～3N1M0;Ⅳa期为T4N0～1M0，Ⅳb期为T1～4N0Ml(表1)。研究表明，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳa、Ⅳb期手术切除率分别为100%、82.7%、76.3%、51.4%和50.0%;根治性切除率为88.9%、60.2%、32.6%、7.6%和6.3%;治疗后三年生存率分别为Ⅰ期88.2%，Ⅱ期60.0%，Ⅲ期28.0%，Ⅳa期12.1%。5.特殊类型的肝癌(1)纤维板层型肝癌：纤维板层型肝癌(fibrolamemellarcarcinomaofliver)是近年发现和认识的一种特殊类型的肝细胞癌，具有许多不同于HCC的特点：①多见于青年;②少有HBY感染背景;③少伴有肝硬化;④AFP常呈阴性;⑤瘤灶常为单发;⑥肿瘤生长缓慢;⑦手术切除率高;⑧不论切除与否预后均较好。中位生存期HCC为6个月，而纤维板层型肝癌可达32～68个月;获手术切除的HCC中位生存期22个月，纤维板层型肝癌达50个月。纤维板层型肝癌的病理诊断标准为：①强嗜酸性颗粒状的癌细胞浆;②在癌细胞巢间有大量平行排列的板层状纤维基质。此型肝癌在西方国家肝癌中所占比例较高，而我国、日本、非洲等地则少见。新近发现其胶原基质主要含胶原Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ，癌细胞常表达转化生长因子β1(TGF-β1)，而基质细胞则表达白细胞介素6(IL-6)，这些细胞因子的过量表达可能与胶原基因表达的改变有关。(2)小肝癌：单个癌结节直径或相邻两个癌结节直径之和小于3cm的肝癌称为小肝癌。与大肝癌比较，小肝癌在病理上具有的特点：①常为单个结节，有报道小肝癌中仅3%伴有卫星结节，卫星结节的发生率常与肿瘤大小呈正相关。②常形成包膜，尤其以膨胀性生长为主，如

水溶物含量和常规营养成分及10个DDGS(A,C,D,E,F,G,H,L,O和Q)的AFB1和三聚氰胺含量。DDGS在24小时内可以测定的指标有:水溶物含量和常规营养成分及10个DDGS(A,C,D,E,F,G,H,L,O和Q)的AFB1和三聚氰胺含量.结果表明:A～Q的L*,a*和b*值范围分别为33.32～44.34,6.08～10.43和7.45～15.42,容重范围为345～545g/L,水溶物平均含量为26.17%,总能,粗蛋白,粗脂肪,NDF,ADF,钙,总磷和非植酸磷平均含量分别为19.07MJ/kg,27.85%,9.06%,42.20%,12.81%,0.07%,0.64%和0.56%.同一厂家不同批次的DDGS(A和B,C和D,H和I)的L*值,b*值,容重,水溶物含量,总能,干物质,粗蛋白,粗脂肪,NDF,ADF,钙,总磷,非植酸磷含量的变异系数都低于17个不同来源的DDGS(A～Q).湿法生产DDGS(A,B,C,D和F)和非玉米DDGS(P和Q)的粗脂肪含量低于6%.DDGS的水溶物含量与总磷和非植酸磷含量呈中等程度相关.DDGS的AFB1含量范围为2.33～22.45μg/kg,三聚氰胺未检出.本研究表明,不同原料和加工工艺的DDGS物理性状和营养成分变异性大,本试验检测的10个DDGS应用于动物生产中是安全的.

检测黄曲霉M1的方法一般就是免疫亲和层析净化高效液相色谱法和酶联免疫吸附法（试剂盒）这两种方法。前一种方法主要使用到高效液相，后一种使用的是酶标仪。由于高效液相色谱法费用高试用繁琐，所以现在市场上检测黄曲霉M1主要还是酶联免疫法。CSY-E96H黄曲霉毒素快速检测仪 （黄曲霉素快速检测仪|黄曲霉素检测仪|黄曲霉毒素测试仪）采用固相酶联免疫吸附ELISA的原理,即酶联免疫法；可定量检测粮食、食品、饲料、油脂、乳制品、药物、饮料、牛奶、酒等产品中的黄曲霉毒素(B1，B2，G1，G2 M1 M2 AFM1、AFP1、AFQ1、AFB1-2，3-环氧化物）含量。并且可以连接食品安全监控系统，黄曲霉毒素快速检测仪、药物残留检测仪广泛应用于产品质量监督检验、卫生防疫、环境保护、工商管理、水产品批发市场、面制品生产基地、养殖场、粮库、超市、商场、各大食品安全监测系统等部门。

黄曲霉毒素（AF）的毒性及危害黄曲霉毒素的致突变性黄曲霉毒素具有致突变性，能使人成纤维细胞发生程序外DNA合成，动物实验可见染色体畸变，染色体断裂，某些染色体4q、13q、14p发生缺失。AFB1是一种能导致生物体遗传物质发生变化的致突变化合物，但 AFB1本身不能引起突变，而必须在机体内经过代谢活化后才具有致突变作用，称为间接致突变物。AFB1由肝微粒体酶活化为亲电子物，即AFB1-2，3-环氧化物，该环氧化物的第2个碳与DNA的鸟嘌呤酮基结合形成 AFB1-DNA加合物，此外，AFB1的代谢产物AFM1和AFP1也能转化成亲电子物而与DNA结合，AFB1-DNA加合物经去嘌呤反应形成AFB1-N7-鸟嘌呤，使DNA分子产生无嘌呤位置的缺口，因而造成DNA的损伤。 目前认为无论是DNA去嘌呤造成的损伤还是由于经酸、碱水解不断蓄积开环加合物而使DNA分子发生的改变，都是突变前的一种改变，都有进一步发展为癌症的可能性。 对肝脏的危害黄曲霉毒素是一种剧毒的致肝癌物质，其中黄曲霉毒素B1可引起细胞错误地修复DNA，导致严重的DNA诱变，还可抑制DNA和RNA的合成，从而抑制蛋白质的合成。从我国肝癌流行病学调查研究中发现，某些地区人群膳食中黄曲霉毒素的污染水平与原发性肝癌的发生率呈正相关。专家对其他肝癌发病率高的地区进行调查，也得出相同结论。乙型肝炎病毒和黄曲霉毒素B1是我国诱发肝癌的两大主要危险因素，有关肿瘤研究专家通过建立乙肝病毒和黄曲霉毒素B1致肝癌机理的实验模型，利用这些模型发现单独存在的乙肝病毒基因并不能诱发小鼠肝癌，但乙肝病毒基因可增强黄曲霉毒素B1的致癌效应，两者均可使肝细胞处于较活跃的增殖状态，在致肝癌过程中具有明显的协同作用。 癌症的发生是基因变化积累的结果，科学家已证实p53基因是癌症的抑制基因，p53基因的变异是多种肿瘤发生的物质基础，而不少人可能在生命的早期（5岁左右）就受到乙肝病毒和黄曲霉毒素的攻击，加之人体内某些基因的缺失或变异引起p53基因突变，协同其他因素最终导致癌变。毒性自1962 年分离出黄曲霉毒素以来，人们对其毒性进行了较深入的研究，发现其毒性属于极毒，其剧烈的毒性比人们熟知的剧毒药氰化钾要强10倍，比眼镜蛇、金环蛇的毒汁还要毒，比剧毒农药1605、1059的毒性强28～33倍，一粒严重发霉含有黄曲霉毒素40μg的玉米，可令两只小鸭中毒死亡。北京医科大学曾用含20μg/kg 黄曲霉毒素的饲料喂大鼠一年后即发肝癌。国外有报道说，AF为1μg/kg时即可诱发癌变。黄曲霉毒素有很强的急性毒性，也有显著的慢性毒性。人摄入大剂量的黄曲霉毒素后可出现肝实质细胞坏死、胆管上皮细胞增生、肝脂肪浸润及肝出血等急性病变，前期症状为发烧、呕吐、厌食、黄疸，继而出现腹水，下肢浮肿并很快死亡。由黄曲霉毒素引起的中毒事件，国内外都有过报道，其中以1974 年印度发生的中毒事件最为严重：印度西部两个邦中200多个村庄皆以玉米为主食，由于当年雨水过多，造成玉米严重霉变，村民食用霉变玉米后导致397人中毒，106人死亡，尸检及病理实验证明，这次中毒事件的原因是黄曲霉毒素B1中毒。而慢性毒性表现为生长障碍，肝脏出现亚急性或慢性损伤，体重减轻，诱发肝癌等。

如果是样品初筛，可以使用黄典霉菌毒素快速检测仪、检测卡，这在网上可以找到。如果需要精确检测，则：黄曲霉毒素的检测方法 黄曲霉毒素的分析方法从最初以薄层层析法为主，发展到高效液相色谱法、微柱法、酶联免疫吸附法等多种普遍应用，其进展与新的化学检测手段和新仪器的出现密不可分。这些新方法、新手段的快速应用，为黄曲霉毒素的检测分析提供了更广泛的选择余地，适应了不同的检测目的和要求。 2.1薄层色谱法(TLC) TLC法是测定黄曲霉毒素的经典方法,是我国测定食品及饲料中AFTB1的标准方法之一(GB/T5009.23—1996)[9]。其原理是样品经过提取、柱层析、洗脱、浓缩、薄层板展开分离后,在365nm紫外灯下,AFB1、AFB2、AFG1和AFG2分别显示紫色、蓝紫色、绿色和绿色荧光。并根据其在薄层上显示的最低检出量来确定其含量。TLC有单向展开法和双向展开法,其中双向展开法能进一步除去样品中的杂质,提高灵敏度。TLC法由于设备简单,易于普及,所以国内外仍在使用,但由于该法样品前处理繁琐,且提取和净化效果不够理想,提取液中杂质较多,因而在展开时影响斑点的荧光强度,双向展开法虽避免了杂质干扰,但增加了操作步骤和时间。TLC法较适合于对黄曲霉毒素的定性检测,是研究黄曲霉毒素初期所使用的主要方法。 该检测方法所用设备简单、费用低廉、容易掌握,适用大量样品的分离、筛选,一般的实验室均可开展,属于定性和半定量检测。 TLC有单向展开和双向展开法,其中双向展开法能进一步除去样品中的杂质,提高灵敏度,省略了柱层析等净操作步骤。TLC法由于设备简单,一般实验室都能满足,利于普及,仍是现在检测AFT的主要方法之一。Stroka[10]开发出的光度检测器在检测AFT时,最低限可以检测到1ng。Otta等在TLC上结合光度计,不仅能把样品提纯,而且也能同时1次对多个样品进行检测[11]。江湖等利用HPTLC检测农产品中的AFT,AFB1、AFB2、AFG1、AFG2的检出限达0.8、0.4、0.7、0.4μg/kg[12]。王宏亮对国际(3B/T5009·22-1996)所规定的方法进行了部分改进，在利用CCl4抽提前，加人质量分数25%的醋酸铅溶液和质量分数4%的NaCl溶液，再用CCl4振动抽提，于薄层板点样后展开时，先用CCl4丙酮的混合液正向展开，然后用无水乙醚进行反向展开，回收率为76.9%，最低检出限量为5×l0-9，改进后的方法进一步排除了蛋白质杂质，使提取与净化效果增强，在薄层双向展开时组分分离也更安全，AFTB1形成的斑点易观察，操作简便，但增加了操作步骤[13]。 2.2高效液相色谱法(HPLC) HPLC是近几年发展起来的检测AFTB1方法,主要是用荧光检测器检测,在适宜的流动相条件下,采用反相C18柱,使多种黄曲霉毒素同时分离。高效液相色谱法灵敏、分辨率高,可作定性、定量分析,同时可检测多个黄曲霉毒素种类,适于大批量样品的分析。 宋欢采用佛罗里硅土净化柱净化，三氟乙酸柱前衍生检测饲料中AFTB1，回收率为83%，相关系数r=0.9998[14]。李佐卿等则将免疫学技术和HPLC法相结合,采用免疫亲和柱对样品进行净化,AFTB1回收率达到97.3%,相关系数r=0.9994,最低检出限为6.25 pg,该法将提取、净化、浓缩一次完成,大大简化了前处理过程,提高了工作效率及方法的灵敏度,但增加了成本[15]。文镜采用国产硅镁吸附柱层析分离纯化玉米中AFTB1,用HPLC法检测,方法简便,纯化效果好,最低检出量为0.08 ng,回收率为92.87%,该法制柱方便,而且降低了成本[16]。 高效液相色谱法仪器设备昂贵,技术水平要求高,每次实验所使用的化学药剂和处理途径对试验结果影响程度差别很大,对实验结果的精度造成影响；样品还需进行繁琐的纯化处理,不适合快速检测。 2.3微柱法 微柱筛选法是将样品提取液通过由氧化铝与硅镁吸附剂组成的微柱层析管,杂质被氧化铝吸附,黄曲霉毒素被硅镁吸附剂吸附,在365 nm紫外线下呈蓝紫色荧光,其荧光强度在一定范围内与黄曲霉毒素的含量成正比,由于微柱不能分离黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2,故检测结果为黄曲霉毒素的总量。 微柱筛选法测定黄曲霉毒素,主要是用来检验黄曲霉毒素的存在与否以及快速筛选出超标样品。要对黄曲霉毒素种类进行区分定量检验,则需要对不同黄曲霉毒素组分进行分离,再利用其它方法检测。因此,微柱筛选法并不能完成整个黄曲霉毒素的检测过程,仅适用于定性检验。 陈达民通过微柱法测定黄曲霉毒素,样品经前处理后，即在365nm紫外光下观察结果，有微黄色荧光出现，则样品不含黄曲霉毒素，若蓝紫色荧光出现，则为阳性检出，再根据其荧光强度与事先已知含量的黄曲霉毒素标准管相比较确定其含量[17]。 2.4免疫化学法 免疫化学法是根据免疫学抗原抗体高特异性结合,设计并发展起来的免疫学检测技术[18]。具有重现性好、灵敏度高、选择性强、特异性强、时间短、检测限低等特点,同时又能减少有害试剂的使用,对检测人员健康起一定保护作用,在AFT检测方面取得了很大的应用。具有代表性的主要有免疫层析法(IICA)、放射免疫分析方法(RIA)和酶联免疫法(ELISA)等,它们均可以进行定量测定。 2.4.1免疫亲和柱荧光光度法(IAC) IAC是美国公职化学家协会(AOAC)检测AFT的标准方法。其原理是利用单克隆免疫亲和柱为分离手段,将单克隆抗体与载体蛋白成功偶联,偶联物填柱形成IAC,并与AFT半抗原产生对应的特异性吸附关系。当样品通过柱子时,因抗原只能吸附相应的抗体,所以IAC也就只能吸附AFT,别的杂质因不被吸附而流出柱子。IAC的优点是在检测过程中,检测人员不用直接接触AFT,并接触很少试剂就完成整个检测。操作简单、耗时短、灵敏度高且能直接读数,所以应用范围很广。局限性是不能单独测AFB1、AFB2、AFG1和AFG2,只能测AFT总量,同时对试剂要求也较高,如检测过程中所有用到的水必须是双蒸水,而所用的容器也必须用双蒸水洗涤[19]。 2.4.2免疫亲和柱净化荧光光度法(SFB) SFB是新发展起来的一种检测AFT的方法,其设备轻便、自动化高、操作简单、检测灵敏、时间短,广泛应用于检测日常饲料中的AFT是否超标。国外Vicam公司开发出的V2系列型荧光光度计,可以直接读取AFT的总量。但用SFB法检测中药材中AFT的含量时,结果中出现很多假阳性,造成结果不准确。王晶等用SFB法快速检测日常食用酱油和醋样品中AFT含量,其检出限分别是2·5μg/kg和1μg/kg,添加回收率在85%以上。 2.4.3酶联吸附法(ELISA) ELISA是利用免疫、酶和生化技术来检测AFT。ELISA是上世纪70年代出现的新的免疫技术[21],最初由荷兰学者an Weeman和瑞典学者Engvall与Perlman几乎同时提出,主要用于病毒的检测,70年代中后期开始用于真菌毒素的检测。ELISA以其简便、快速、灵敏、成本低、检测谱广等特点在检测方面越来越受到人们的青睐,是一种定性或半定量的方法。 ELISA的基本原理是首先将抗原或抗体固化。吸附在固相载体表面的抗原或抗体,仍然保持着其免疫学活性。其次是酶标记,被固定的抗原或抗体以共价键与酶连接形成酶结合物,而此物仍保持着免疫学和酶学活性。三是显色反应,酶标记物与相应的抗原或抗体反应,再加入底物显色液,来判定反应是否进行,颜色的深浅和免疫反应成比例的关系。所以通过显色可以判断反应是否进行,而通过后面的测定,又可以进行半定量检测。ELISA主要分为直接法测定抗原、间接法测定抗体[23,24]、双抗体夹心法测定抗原、竞争法测定抗原。 2.5 金标免疫层析检测技术(GICA) GICA利用纳米金作为标记物,在很短的时间内就能测出待测物的含量,并可以直接读取结果。不需要分离纯化样品,也无需对检测溶剂做任何的处理,真正做到一步检测,方便、高效[25]。 Zhang等通过此方法分析一个样品,用时不到10min,非常高效[26]。在金标免疫试纸法的应用过程中,孙秀兰等研究了样品基质对试纸条信号灵敏度的影响,并为消除这些影响提供了经验。在检测样品中对粗提取液用氯仿法萃取后,使其挥干再溶解,可将盐离子和重金属离子对测定的影响控制在允许范围之内;用石油醚脱脂,可将油脂对测定结果的影响降到最低[27]。邓省亮等用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记抗AFB1单克隆抗体并喷于玻璃纤维上,AFB1偶联抗原和二抗分别结合于硝酸纤维膜上,依次将样本垫、胶金垫、硝酸纤维膜和吸水纸组装切割成胶体金试纸条并装入检测卡中。测试结果表明, AFB1快速检测试纸条的灵敏度为5ng/mL,检测时间为10min,批内和批间重复性100%,假阳性率和假阴性率均为0[28]。

啥意思。。。

羊吃霉玉米坏处有：x0dx0a1、有中毒可能；x0dx0a2、肠道被破坏；x0dx0a3、长得慢，时间长了会死亡。x0dx0ax0dx0a霉玉米中毒是动物饲料中毒中最常见及最易发生的一类。霉玉米是指霉变的玉米，多由镰刀菌属与黄曲霉菌导致，且在霉变的玉米当中含有这两类细菌所释放的毒素，动物不慎食用过后会引起中毒症状。x0dx0ax0dx0a1、黄曲霉毒素x0dx0a概念：黄曲霉毒素（AFT）是一类化学结构类似的化合物，均为二氢呋喃香豆素的衍生物。黄曲霉毒素是主要由黄曲霉（aspergillusflavus)）寄生曲霉（a.parasiticus)）产生的次生代谢产物，在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率最高。x0dx0a理化特性：在紫外线下黄曲霉毒素B1,B2发蓝色荧光黄曲霉毒素G1,G2发绿色荧光.黄曲霉毒素的相对分子量为312-346.难溶于水易溶于油，甲醇丙酮和氯仿等有机溶剂，但不溶于石油醚己烷和乙醚中.一般烹调加工温度不能将其破坏，裂解温度为280℃。一般在中性溶液中较稳定，但在强酸性溶液中稍有分解在pH9-10的强碱溶液中分解迅速.其纯品为无色结晶，耐高温黄曲霉毒素B1的分解温度为268℃紫外线对低浓度黄曲霉毒素有一定的破坏性.毒性极强远远高于氰化物、砷化物和有机农药的毒性，其中以B1毒性最大。当人摄入量大时，可发生急性中毒，出现急性肝炎、出血性坏死、肝细胞脂肪变性和胆管增生。当微量持续摄入，可造成慢性中毒，生长障碍，引起纤维性病变，致使纤维组织增生。AFT的致癌力也居首位，是目前已知最强致癌物之一。x0dx0a临床症状：食品中所污染的主要是黄曲霉毒素B1，其毒性目前一般认为有三种临床特征；急性中毒、慢性中毒和致癌性：x0dx0a（1）急性中毒：x0dx0a它是一种剧毒物质，毒性比砒霜大68倍，仅次肉毒霉素，是目前已知霉菌中毒性最强的。它的毒害作用，无论对任何动物，主要变化是肝脏，呈急性肝炎、出血性坏死、肝细胞脂肪变性和胆管增生。脾脏和胰脏也有轻度的病变。x0dx0a（2）慢性中毒：x0dx0a长期摄入小剂量的黄曲霉毒素则造成慢性中毒。其主要变化特征为肝脏出现慢性损伤，如肝实质细胞变性、肝硬化等。出现动物生长发育迟缓，体重减轻，母畜不孕或产仔少等系列症状。x0dx0a（3）致癌性：x0dx0aAFT是目前所知致癌性最强的化学物质。其致癌特点是：A致癌范围广，能诱发鱼类、禽类，各种实验动物、家畜及灵长类等多种动物的实验肿瘤；B致癌强度大，其致癌能力比六六六大1万倍；C可诱发多种癌，AFT主要诱发肝癌，还可诱发胃癌、肾癌、泪腺癌、直肠癌、乳腺癌，卵巢及小肠等部位的肿瘤，还可出现畸胎。x0dx0a在体内的分布与排泄：黄曲霉毒素进入机体后，在肝脏中的量较其他组织器官为高，说明肝脏可能受黄曲霉毒素的影响最大。肾脏、脾脏和肾上腺也可检出，肌肉中一般不能检出。黄曲霉毒素如不连续摄入，一般不在体内积蓄。一次摄入后约1周即经呼吸、尿、粪等将大部分排出。AFB1在动物体内经细胞内质网微粒体混合功能氧化酶系代谢，在微粒体混合功能氧化酶系的作用下AFB1发生脱甲基、羟化及环氧化反应主要代谢产物为AFM1．AFP1．AFQ1和AFB1-2，3-环氧化物。对动物机体造成的危害：黄曲霉毒素主要对动物肝脏的伤害，受伤害的个体因动物种类年龄，性别和营养状态而异.研究结果表明黄曲霉毒素可导致肝功能下降，降低牛奶产量和产蛋率.并使动物的免疫力降低易受有害微生物的感染.此外，长期食用含低浓度黄曲霉毒素的饲料也可导致胚胎内中毒.通常年幼的动物对黄曲霉毒素更敏感.黄曲霉毒素的临床表现为消化系统功能紊乱降低生育能力.降低饲料利用率，贫血等.黄曲霉毒素不仅能够使奶牛的产奶量下降而且还使牛奶中含有转型的黄曲霉毒素M1和M2.据美国农业经济学家统计，由于食用黄曲霉毒素污染的饲料每年至少要使美国畜牧业遭受10%的经济损失.在中国，由此而带来的畜牧业损失可能会更大.黄曲霉毒素能导致家禽法氏囊和胸腺萎缩，皮下出血，反应差，抵抗力下降，疫苗失效，度疫病感受性提高，蛋变小，蛋黄重量变低，受精率、孵化率降低，胚胎死亡增加及不健康，。对家畜引起生长缓慢，饲料率下降，黄疸，皮毛粗糙，低蛋白血症，肝癌和免疫抑制有相关研究实验表明，黄曲霉毒素能与DNA、RNA结合，并抑制其合成，引起胸腺发育不良和萎缩，淋巴细胞生成减少。同时还会导致巨噬细胞的吞噬能力下降。与人类的健康：人类健康受黄曲霉毒素的危害主要是由于人们食用被黄曲霉毒素污染的食物.相关研究表明食用被黄曲霉毒素污染的食物与癌症的发病率呈正相关性.长时间食用含低浓度黄曲霉毒素的食物被认为是导致肝癌胃癌，肠癌等疾病的主要原因.黄曲霉毒素Bl的半数致死量为0.36毫克/公斤体重，属特剧毒的毒物范围（动物半数致死量<10毫克/公斤=它的毒性比氰化钾大10倍比砒霜大68倍）.它引起人的中毒主要是损害肝脏，发生肝炎肝硬化，肝坏死等.临床表现有胃部不适食欲减退，恶心呕吐，腹胀及肝区触痛等;严重者出现水肿昏迷，以至抽搐而死.黄曲霉毒素是目前发现的最强的致癌物质.它主要诱使动物发生肝癌但也能诱发胃，肾，直肠及乳腺，卵巢小肠等部位的癌症。除此以外黄曲霉毒素与其它致病因素（如肝炎病毒）等对人类疾病的诱发具有叠加效应.x0dx0a2、玉米赤霉烯酮x0dx0a概念：玉米赤霉烯酮又称F-2毒素，它首先从有赤霉病的玉米中分离得到。玉米赤霉烯酮产毒菌主要是镰刀菌属的菌侏，如禾谷镰刀菌和三线镰刀菌。其主要污染玉米、小麦、大米、大麦、小米和燕麦等谷物。x0dx0a理化性质：玉米赤霉烯酮是一种酚的二羟基苯酸的内酯结构，分子式为C18H22O50它不溶于水、二硫化碳和四氧化碳，溶于碱性水溶液、乙醚、苯、氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯和酸类，微溶于石油醚。由于玉米赤霉烯酮是一种内酯的结构，因此在碱性环境的条件下可以将酯键打开，当碱的浓度下降时可将键恢复。玉米赤霉烯酮的耐热性较强，110℃下处理1h才被完全破坏。x0dx0a动物中毒表现：玉米赤霉烯酮中毒分为急性中毒和慢性中毒。x0dx0a（1）急性中毒：动物表现为兴奋不安，走路蹒跚，全身肌肉振颤，突然倒地死亡。同时还可发现粘膜发绀，体温无明显变化。动物呆立，粪便稀如水样，恶臭，呈灰褐色，并混有肠粘液。频频排尿，呈淡黄色。同时还表现为外生殖器肿胀，精神萎顿，食欲减退，腹痛腹泻的特征。在剖检时还能发现淋巴结水肿，胃肠粘膜充血、水肿，肝轻度肿胀，质地较硬，色淡黄。x0dx0a（2）慢性中毒：主要对母畜的毒害较大。它会导致母畜外生殖器肿大。充血，死胎和延期流产的现象大面积产生，并且伴有木乃伊胎的现象。50%的母畜患卵巢囊肿，频发情和假发情的情况增多，育成母畜乳房肿大，自行泌乳，并诱发乳房炎，受胎率下降。同时对公畜也会造成包皮积液、食欲不振、掉膘严重和生长不良的情况。

不能已确定黄曲霉毒素结构的有AFB1、AFB2、AFM1等18种，它们的基本结构中都含有二呋喃环和氧杂萘邻酮（又名香豆素），前者为其毒性结构，后者可能与其致癌性有关。黄曲霉毒素的化学结构如图7-2所示。根据在紫外线照射下发出的荧光颜色的差异，将黄曲霉毒素分为两类：一类是发出蓝色荧光的B类，包括B1、B2、B2a；另一类为发出绿色荧光的G类，包括G1、G2、G2a等。构象关系研究发现，黄曲霉毒素中二呋喃环末端有双键者毒性较强，并具有致癌性。比如黄曲霉毒素B类的毒性和致癌性最强，在天然污染的食品中也最常见，所以在食品检测中通常以黄曲霉毒素B1作为污染指标。黄曲霉毒素B1的分子结构中二呋喃环上具有双键，在此种双键部位形成的8，9-环氧黄曲霉毒素，对黄曲霉毒素B1的致癌作用极为重要，是黄曲霉毒素中致癌性最强的毒素。其致癌机理是：由于其末端呋喃环上有一个双键，经肝或其他器官的微粒体酶作用，双键发生环氧化，并导致产生锚离子，形成亲电子的终致癌物，并在核酸碱基鸟嘌呤的N-7位上反应，使DNA损伤，导致基因的结构和功能发生改变，由此可导致癌基因活化而致癌。在各种黄曲霉毒素中二呋喃环上具有双键的黄曲霉毒素B1、M1和G1，也容易发生环氧化反应，形成黄曲霉毒素8，9-环氧衍生物，其致癌作用较强；而不具有二呋喃环上双键的黄曲霉毒素B2、G2，其致癌作用较弱，一般毒性也较低  。

控制温度。温度对霉菌的繁殖和产毒均有重要影响，不同种类的霉菌最适温度是不一样的。在相对湿度为80%～90% ，大多数霉菌繁殖最适宜的温度是25～30℃ ，在0℃以下不能产毒。AF常常存在于土壤、动植物、各种坚果特别是花生和核桃中。在大豆、稻谷、玉米、通心粉、调味品、牛奶、食用油等制品中也经常发现AF。一般在热带和亚热带地区，食品中AF的检出率比较高。在中国总的分布情况为：华中、华南、华北产毒株多，产毒量也大，东北、西北地区较少。扩展资料：AF的结构：从化学结构上看，黄曲霉毒素是高度取代的香豆素。其中 AFB1类为甲氧基、二呋喃环、香豆素、环戊烯酮的结合物。AFG1类结构为甲氧基、二呋喃环、香豆素和环内酯。自然环境下，在被污染的食品中只检测出AFB1、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1和 AFM2，其中以 AFB1存在量最大也毒性最高，AFM1是AFB1的代谢产物，毒性仅次于 AFB1。

控制温度。温度对霉菌的繁殖和产毒均有重要影响，不同种类的霉菌最适温度是不一样的。在相对湿度为80%～90% ，大多数霉菌繁殖最适宜的温度是25～30℃ ，在0℃以下不能产毒。AF常常存在于土壤、动植物、各种坚果特别是花生和核桃中。在大豆、稻谷、玉米、通心粉、调味品、牛奶、食用油等制品中也经常发现AF。一般在热带和亚热带地区，食品中AF的检出率比较高。在中国总的分布情况为：华中、华南、华北产毒株多，产毒量也大，东北、西北地区较少。扩展资料：AF的结构：从化学结构上看，黄曲霉毒素是高度取代的香豆素。其中 AFB1类为甲氧基、二呋喃环、香豆素、环戊烯酮的结合物。AFG1类结构为甲氧基、二呋喃环、香豆素和环内酯。自然环境下，在被污染的食品中只检测出AFB1、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1和 AFM2，其中以 AFB1存在量最大也毒性最高，AFM1是AFB1的代谢产物，毒性仅次于 AFB1。

控制温度。温度对霉菌的繁殖和产毒均有重要影响，不同种类的霉菌最适温度是不一样的。在相对湿度为80%～90% ，大多数霉菌繁殖最适宜的温度是25～30℃ ，在0℃以下不能产毒。AF常常存在于土壤、动植物、各种坚果特别是花生和核桃中。在大豆、稻谷、玉米、通心粉、调味品、牛奶、食用油等制品中也经常发现AF。一般在热带和亚热带地区，食品中AF的检出率比较高。在中国总的分布情况为：华中、华南、华北产毒株多，产毒量也大，东北、西北地区较少。扩展资料：AF的结构：从化学结构上看，黄曲霉毒素是高度取代的香豆素。其中 AFB1类为甲氧基、二呋喃环、香豆素、环戊烯酮的结合物。AFG1类结构为甲氧基、二呋喃环、香豆素和环内酯。自然环境下，在被污染的食品中只检测出AFB1、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1和 AFM2，其中以 AFB1存在量最大也毒性最高，AFM1是AFB1的代谢产物，毒性仅次于 AFB1。

控制温度。温度对霉菌的繁殖和产毒均有重要影响，不同种类的霉菌最适温度是不一样的。在相对湿度为80%～90% ，大多数霉菌繁殖最适宜的温度是25～30℃ ，在0℃以下不能产毒。AF常常存在于土壤、动植物、各种坚果特别是花生和核桃中。在大豆、稻谷、玉米、通心粉、调味品、牛奶、食用油等制品中也经常发现AF。一般在热带和亚热带地区，食品中AF的检出率比较高。在中国总的分布情况为：华中、华南、华北产毒株多，产毒量也大，东北、西北地区较少。扩展资料：AF的结构：从化学结构上看，黄曲霉毒素是高度取代的香豆素。其中 AFB1类为甲氧基、二呋喃环、香豆素、环戊烯酮的结合物。AFG1类结构为甲氧基、二呋喃环、香豆素和环内酯。自然环境下，在被污染的食品中只检测出AFB1、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1和 AFM2，其中以 AFB1存在量最大也毒性最高，AFM1是AFB1的代谢产物，毒性仅次于 AFB1。

不含。酿造大酱只要原材料不是变质的就不会含黄曲霉毒素。农村大酱做酱块子长有很多各种微生物就很难说了。时有发现黄曲霉毒素的案例发生。大酱块子发酵过程中有很多种微生物生长。表面主要长霉菌，里面长枯草杆菌。霉菌中有曲霉、毛霉、根霉等。曲霉中的黄曲霉开始菌丝是白色的后产生孢子是黄色以及黄绿色。黄曲霉有很多种。黄曲霉不都是分泌黄曲霉毒素的。农村做大酱块子有的检出黄曲霉毒素，但也有未检出的。做大酱块子时湿度和通风很重要。酱块子表面干一些为好。做酱块子撒一些米曲霉种菌有利于增强酱块子的蛋白酶活力。从化学结构上看，黄曲霉毒素是高度取代的香豆素。其中AFB1类为甲氧基、二呋喃环、香豆素、环戊烯酮的结合物。AFG1类结构为甲氧基、二呋喃环、香豆素和环内酯。自然环境下，在被污染的食品中只检测出AFB1、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1和AFM2，其中以AFB1存在量最大也毒性最高，AFM1是AFB1的代谢产物，毒性仅次于AFB1。

控制温度。温度对霉菌的繁殖和产毒均有重要影响，不同种类的霉菌最适温度是不一样的。在相对湿度为80%～90% ，大多数霉菌繁殖最适宜的温度是25～30℃ ，在0℃以下不能产毒。AF常常存在于土壤、动植物、各种坚果特别是花生和核桃中。在大豆、稻谷、玉米、通心粉、调味品、牛奶、食用油等制品中也经常发现AF。一般在热带和亚热带地区，食品中AF的检出率比较高。在中国总的分布情况为：华中、华南、华北产毒株多，产毒量也大，东北、西北地区较少。扩展资料：AF的结构：从化学结构上看，黄曲霉毒素是高度取代的香豆素。其中 AFB1类为甲氧基、二呋喃环、香豆素、环戊烯酮的结合物。AFG1类结构为甲氧基、二呋喃环、香豆素和环内酯。自然环境下，在被污染的食品中只检测出AFB1、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1和 AFM2，其中以 AFB1存在量最大也毒性最高，AFM1是AFB1的代谢产物，毒性仅次于 AFB1。

　　大约未1个月到半年　　这个要看什么样的人或者什么样的体制而言　　下面是一些质料希望有用　　黄曲霉毒素的危害及预防措施　　黄曲霉毒素（Aflatoxin，简写AF）主要是黄曲霉菌和寄生曲霉菌的代谢产物。在温暖潮湿气候地区的粮食和饲料，凡被黄曲霉菌和寄生曲霉菌污染都可能存在黄曲霉毒素。黄曲霉毒素最易污染花生、玉米、棉籽、禽蛋、肉、奶及奶制品，其次是小麦、高粱和甘薯，大豆粕被黄曲霉毒素污染的程度轻些。我国粮食和饲料被黄曲毒素污染率很高，给饲料企业和养殖业主带来了很大损失，人们食用含有黄曲霉毒素的食物危害到人体健康。　　1 黄曲霉毒素的理化特性　　目前已确定黄曲霉毒素结构的有AFB1、AFB2、AFM1等18种，它们的基本结构中都含有二呋喃环和氧杂萘邻酮（又名香豆素），前者为其毒性结构，后者可能与其致癌有关。黄曲霉毒素难溶于水、己烷、乙醚和石油醚，易溶于甲醇、乙醇、氯仿和二甲基甲酰胺等有机溶剂。分子量为312-346，熔点为200-300℃，黄曲霉毒素耐高温，通常加热处理对其破坏很小，只有在熔点温度下才发生分解。黄曲霉毒素遇碱能迅速分解，但此反应可逆，即在酸性条件下又复原。一般来说，温度30℃、相对湿度80%、谷物水份在14%以上（花生的水份在9%以上）最适合黄曲霉繁殖和生长。在24-34℃之间，黄曲霉菌产毒量最高。几乎所有谷物、饲草和各种食品（包括畜产品）都可作为黄曲霉基质。　　2 黄曲霉毒素的危害　　2.1黄曲霉毒素对动物的危害　　　　黄曲霉毒素的毒性很大，是目前已发现霉菌中毒性最大的一种。目前发现的18种黄曲霉菌毒素中， AFB1毒性最强，AFM1、AFG1次之，AFB2、AFG2、AFM2毒性较弱。AFB1的毒性是砒霜的68倍，诱发肝癌的能力比二甲基亚硝胺大75倍。其毒性因动物的种类、年龄、性别和体况以及营养状况的不同有差异，年幼动物、雄性动物较敏感。　　表1各种动物的黄曲霉毒素B1的LD50（一次，经口，mg/KG）　　动物 　　　 LD50 　　　　　　　 动物 LD50　　鸭雏 　　　 0.335　　　　　　　　 猴 2.2　　猪 　　　 　 0.62 　　　　　　　　 山羊 2.0　　兔 　　　 0.3-0.5 　　　 　　 大白鼠 7.2（雄）-17.9（雌）　　狗 　　　 0.5-1.0 小白鼠 9.0　　猫 　　　 0.55 　　　 　　　 地鼠 10.2　　鸡 　　　 6.3 　　　 　　　 　 鳟鱼 0.81（腹腔注射）　　火鸡 　 1.86-2.0 　　　 绵羊 2.0　　动物对黄曲霉毒素的敏感顺序为：鸭雏>火鸡雏>鸡雏>日本鹌鹑 仔猪>犊牛>肥育猪>成年牛>绵羊 鳟鱼>犬>豚鼠>水鼠>大鼠>猴。　　　　黄曲霉毒素具有诱导突变、抑制免疫和致癌的作用。黄曲霉毒素作用的靶器官主要是肝脏，动物中毒以全身性出血、消化机能障碍和神经系统紊乱为特征。急性中毒表现为食欲废绝，运动失调，排泄停止，肝炎，黄疸，肝脏充血、出血、肿大、变性和坏死，并伴有严重的血管和中枢神经损伤，动物中毒后几小时至数天内死亡。慢性中毒者早期症状表现为食欲不佳，体重减轻，生产性能降低，胴体和蛋壳品质下降，后期出现黄疸，脂肪肝、肝损伤及抑制动物免疫机能和致癌作用。　　猪　　　　 猪对霉菌毒素敏感，特别是哺乳或哺乳仔猪。一般来讲，当水平相对较低时，霉菌毒素降低饲料采食量、生产性能和免疫功能。20-200ppb的黄曲霉毒素B1可引起饲料采食量和生产性能下降，但可通过提高特殊日粮养分如赖氨酸或蛋氨酸水平来抵消；严重黄曲霉毒素中毒（1000-5000ppb），可发生急性影响，包括对呼吸的影响。据报道，饲料中黄曲霉毒素含量为2.0mg/kg时，可使猪体重由对照组的33.7kg减少到29.7kg。黄曲霉毒素通过胎盘屏障转移到胎儿，引起胎儿畸形，导致产仔数减少、产弱仔、死胎和木乃伊。急性中毒的个别母畜会发生流产。公猪黄曲霉毒素中毒则表现性欲下降。　　家禽　　　　黄曲霉毒素对所有的家禽品种都有影响，高水平摄入时可导致死亡，低水平有害。雏禽，特别是雏鸭和火鸡，非常敏感。一般来讲，生长家禽日粮中黄曲霉毒素不能超过20ppb。但饲喂低于20ppb的日粮时仍可降低家禽对疾病的抵抗力以及抗应激能力。产蛋鸡能忍受较高水平的黄曲霉毒素，但不能超过50ppb。AFB1主要作用于免疫系统，降低蛋鸡的抗应激能力，蛋重减轻，蛋壳不坚硬，产蛋量降低。给肉鸡饲喂2.0mg/kg黄曲霉毒素可使肉仔鸡死亡率增加22.5%。黄曲霉毒素可破坏公鸡的性功能，使睾丸萎缩，曲细精管发育不良，妨碍精液产生。现已发现人食用的鸡蛋蛋黄中有黄曲霉毒素的代谢产物。　　奶牛　　　　饲喂黄曲霉毒素污染的饲料不仅降低奶牛的生产性能和体质，而且牛奶中的代谢产物黄曲霉毒素M1，直接危害人体健康。　　肉牛　　　　虽然肉牛对黄曲霉毒素的耐受力较猪和家禽高，但黄曲霉毒素对其影响还是较大。肉牛采食黄曲霉毒素污染严重的饲料可导致生长速度下降，料肉比增高。高水平的黄曲霉毒素除引起成年牛肝脏受损外，还抑制免疫功能。犊牛在某些情况下可引起严重的直肠痉挛，脱肛。黄牛急性中毒可导致死亡。　　　　黄曲霉毒素不可避免，表2和表3是关于其在饲料和动物养殖中允许水平的具体规定，供参考。　　表2原料和饲料中黄曲霉毒素B1允许量（ppb）　　(GB/T 17480或GB/T 8381)　　玉米 ≤50 肉用仔鸡后期、生长鸡、产蛋鸡配合饲料及浓缩饲料 ≤20　　花生饼（粕）、棉籽饼（粕）、菜籽饼（粕） ≤50 肉用仔鸭前期、雏鸭配合饲料及浓缩饲料 ≤10　　豆粕 ≤30 肉用仔鸭后期、生长鸭、产蛋鸭配合饲料及浓缩饲料 ≤15　　奶牛精料补充料 ≤10 鹌鹑配合饲料及浓缩饲料 ≤20　　肉牛精料补充料 ≤50 仔猪配合饲料及浓缩饲料 ≤10　　肉用仔鸡前期、雏鸡配合饲料及浓缩饲料 ≤10 生长肥育猪、种猪配合饲料及浓缩饲料 ≤20　　表3黄曲霉毒素　　日粮黄曲霉毒素水平ppb1 可忍受水平的家畜种类2 美国FDA兽医中心规定饲料谷物中黄曲霉毒素对畜禽的最高标准　　0-20 所有动物　　20-100 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 水平（PPb） 适合动物种类　　100-200 3, 4, 7, 8, 9 20 奶牛、未成年动物、幼禽　　200-400 7, 8, 9 100 种牛、 种猪、 种禽　　400-500 8, 9 200 肥育猪　　500或者以上 没有 300 育肥牛　　1 PPb（肉牛按干物质基础） 2 家畜种类:1. 仔猪到50磅或者到10-12周 2. 乳猪 3.生长猪50磅到上市 4..非哺乳期成年母猪和成年公猪 5.青年牛 6. 哺乳期奶牛 7. 干奶牛和成年期公牛 8.饲育场的肉牛 9.成年马　　2.2黄曲霉毒素对人类健康的危害　　　　黄曲霉毒素被公认为致肝癌物质，其中AFB1致癌性最强。长期食用含有低水平黄曲霉毒素食物的人，其肝脏将受到损害。最近在第三世界国家报道了人黄曲霉毒素急性中毒的证据，综合病症的特征为呕吐、腹痛、肺水肿、惊厥痉挛、昏迷、大脑水肿而死亡和肝脏、肾形矿脉和心脏脂肪过多。1988年 国际癌症研究总局（IARC）把黄曲霉毒素B1列为人的致癌物之一，这被许多亚洲和非洲流行病研究者已经证明在日粮黄曲霉毒素和肝细胞癌（LCC）有正效应得到证实。另外人的黄曲霉毒素致癌可能与年龄、性别、营养状况以及肝炎或者寄生虫感染有关。Shank等（1972）在泰国调查市售食品和家庭熟食（膳食），计算每人每日平均摄入黄曲霉毒素量，发现黄曲霉毒素量与肝癌发病率的地区分布相一致。菲律宾的玉米和自制花生酱黄曲霉毒素污染严重，其中一个以玉米为主食的地区和另外一个常食自制花生酱的地区，肝癌的发病率比其他地区高7倍以上，在食花生酱的居民中，曾测定吃花生酱后人尿的黄曲霉毒素代谢产M1，在7个每天由花生酱摄入黄曲霉毒素B111.2-15.0毫克的儿童的尿中，有三个样品测出M1。　　2.3 残留　　　　动物摄入黄曲霉毒素后，在肝脏中分布最多，含量可为其他器官组织的5-15倍。肾、脾和肾上腺中亦可检出。血液中有极微量，肌肉中一般检不出。黄曲霉毒素如不连续摄入，一般不在体内蓄积。黄曲霉毒素及其代谢产物在动物体内残留及随乳汁、尿、粪和呼吸等排出。　　实验证明，动物摄入黄曲霉毒素B1后，在肝、肾、肌肉、血、乳汁以及鸡蛋中可查处黄曲霉毒素B1及其代谢产物，因而造成动物性食品的污染。通常，哺乳动物食入的黄曲霉毒素B1中，约有1%以M1的形式排到乳汁和尿中。在牛乳中检查发现，乳牛摄入AFB11小时后，即可在乳中发现M1，12-60小时浓度最高，5日后降至微量。广西卫生防疫站给12头乳牛饲喂不同含量的AFB1的混合饲料36天研究AFB1在牛体内的转化关系，结果表明奶牛AFM1的残留量一般占摄入AFB1总量的3.45%-11.39%，均值为5.75%。Agacdelen(1993)报道，给产蛋鸡饲喂含AFB1500μg/d，第七天AFB1在鸡蛋中为0. 117PPb，停喂4天，蛋中未检出AFB1。　　关于毒素残留在供人食用的动物产品中的可利用信息很少，一些数据概括在表4。在不同的国家，强制最大水平的报道黄曲霉毒素M1在0.05-1PPb，黄曲霉毒素B15PPb ，在大多数国家被检测的毒素水平低于此水平能被接受。我国食品中黄曲霉毒素的标准正在进行制定。　　表4被毒素自然污染的动产品中黄曲霉毒素残留值的报道　　毒素 对人潜在的影响 样品来源 报道最大水平ppb 参考文章数　　黄曲霉毒素B1 肝癌 鸡蛋 0.4 (2)　　猪肝 0.5 (3)　　猪肉 1.04 (4)　　猪肾 1.02 (4)　　黄曲霉毒素M1 1 牛奶 0.33 (5)　　1黄曲霉毒素M1.尽管对啮齿动物是很强的致癌物，但对人致癌没有充足的证据　　3 预防措施　　3.1防霉 防霉是预防原料及产品被霉菌及其毒素污染，预防产毒霉菌污染是防除AF产生的关键。防霉主要措施有以下几方面：　　3.1.1控制水分 即控制谷物等原料和饲料的水分和储存的环境相对湿度。⑴ 严格控制谷物等原料的水分 对谷物等原料的防霉必须从谷物在田间收获时开始做起。关键在于收获后使其迅速干燥，使谷物含水量在短时间内降到安全水分范围内。一般谷物含水量在13%以下，玉米在12.5%以下，花生仁在8%以下，霉菌不易繁殖。植物饼粕、鱼粉、肉骨粉等的水分不应超过12%。⑵严格控制饲料的水分 当饲料的水分超过15%时，可致霉菌大量生长繁殖，当达到17-18%时，是真菌产毒的最佳条件。我国规定猪、鸡的配合饲料的水分含量在北方不超过14%，在南方不超过12%；而猪、鸡浓缩料的水分含量在北方应低于12%，在南方应低于10%。一般来讲，颗粒料的水分含量应控制在12.5%，粉料的含水量应低于12%。⑶严格控制生产过程中的水分 控制好饲料加工过程中添加的水蒸气的质量、输送管道的长度、调节器温度和压力、冷却器结构及冷却温度，以达到控制好饲料的水分。⑷严格控制原料和成品贮藏仓库的相对湿度 谷物贮藏前仓库要清洁干燥，散装库应有通风设备，密闭仓要使外界湿度不影响库内的谷物。　　3.1.2低温贮藏 理想的贮存条件是将粮谷贮存于干燥低温状态。温度在12℃以下，能有效地控制霉菌繁殖和产毒。水分较高的原料和成品应贮藏在较低的温度下，如大米的水分在12%以时，可在35℃下贮藏，而水分达14%时在，应贮藏在20℃以内才安全。　　3.1.3减少损伤，剔除破损籽粒 受损原料易被霉菌从伤口处污染，因此在收获和储存时，尽量减少籽粒的损伤，避免虫害、鼠啃和磨压，防止谷物，花生等表面受损；剔除破损籽粒。　　3.1.4二氧化碳气体保存法 大多数霉菌是需氧的，无氧便不能生长繁殖。因此谷物在充有二氧化碳气体的密闭容器内，可保持数月不发生霉变。同时此法还有防虫作用。青贮料主要通过消除氧而防止腐败变质。　　3.1.5适时应用防霉剂 在潮湿和高温季节加工的饲料原料与配合饲料极易发霉，应用防霉剂，可延长其保质期。常用防霉剂主要是有丙酸或其盐，山梨醇及其盐类，双乙酸钠，延胡索酸等。其中又以丙酸及其盐类（丙酸钠、丙酸钙）应用最广。另外有些防霉剂（如双乙酸钠）还可以提高饲料利用率，改善饲料的适口性,青贮添加剂（如液氨、丙酸、微生物培养物、或酶法青贮）有利于预防霉菌毒素的产生。　　3.1.6尽量缩短保存期 饲料原料和饲料应采用先进先出的原则，在越短的时间用完越好；养殖场自配饲料最好不要超过三天，以免长时间被霉菌污染和繁殖。　　3.1.7保持设备的清洁 空气和粉尘中含有霉菌孢子，因此，应尽可能保持仓库和各个生产以及运输环节的清洁。　　3.1.8选育抗侵染或抗产毒的作物品种 农作物的抗霉能力与遗传因素有关，培育和选用抗侵染或抗产毒的作物品种，可以利用其自身的抗性来控制黄曲霉毒素的污染提供一条简洁、有效的途径。　　3.1.9辐射防霉 利用辐射不仅可以防霉，同时还可提高饲料和粮食的新鲜度。美国农业部原子能研究所利用1×106Radγ-射线对粮食和饲料进行辐射后，在30℃，相对湿度80%以上的恶劣环境下存放45天也不发霉。　　3.2 去毒 饲料被霉菌和霉菌毒素污染后，应设法将其破坏和去除。其方法为：　　3.2.1剔除霉烂法 黄曲霉毒素污染的谷物分布很不均匀，大部分是在被损，虫蛀，变色的颗粒上，如果剔除这些，将减低其毒素水平。通过视觉和嗅觉观察饲料和谷物，判断污染与否，污染严重者将其剔除。反刍动物的青贮料饲喂时应仔细检查，发现有霉变，应剔除。　　3.2.2 辐射法 紫外线或γ-射线可有效地杀死霉菌和破坏黄曲霉毒素的化学结构，以达到去毒的目的。用高压汞灯紫外线大剂量的照射，去毒率可达97-99%。冯定远（1995）报道自然日光照晒30小时花生饼后，黄曲霉毒素B1下降42.31%，G1和G2几乎完全去除。　　3.2.3水洗法 黄曲霉毒素不溶于水并且对热稳定， 黄曲霉毒素在玉米等农作物中分布很不均匀，在表皮胚部存在的黄曲霉毒素总量可达80%以上，水洗法就是利用玉米等胚部和乳胚部在水中比重差异，将碾粹后浮在水面上的胚部或表皮除去而达到去除大部分毒素的目的。实验室和应用效果表明该法平均去毒率可达80%以上。受AF污染的花生籽仁多数比重较轻，在水中漂浮的籽仁多是AF污染仁，该法可除去88%的污染籽仁。　　3.2.4 黏结剂法 目前使用黏结剂在体外的黏结黄曲霉毒素B1功效已经得到肯定，主要的黏结剂有水合硅铝酸钠钙（HSCAS），黏土，沸石、膨润土、活性碳、蒙脱土等黏结剂。但HSCAS在体内的黏结效果同体外一样。黏结剂对黄曲霉毒素的黏结要达到好的效果，对黏结剂的最起码要求是具有多孔性，且其孔径在0.015-0.090毫米（150埃-900埃）范围内。Lindemann et al.(1993)报道，在含AFB1 800μg/kg的断奶仔猪日粮中，添加0.25%或0.5%的膨润土钠，可使仔猪的平均日增重和平均日采食量提高。　　3.2.5化学药物去毒法 一些化学制剂如次氯酸、次氯酸钠、过氧化氢、氨、氢氧化钠处理等对去除AF都有一定效果。冯定远等（1997年）报道分别用0.25%，0.50%，1.0%的次氯酸钠处理花生饼，处理时间为24、48和72小时，各组脱毒差异不显著，黄曲霉毒素总量减少都在93%以上，而对黄曲霉毒素的效果不一样，其中黄曲霉毒素B1的降低程度最大。氨处理是用氨气或氨水处理被黄曲霉毒素污染的玉米、豆粕、花生粕等，在氨的作用下能使毒素内酯环裂解，达到去毒的目的。　　3.2.6生物脱毒法 该法筛选某些微生物，利用其生物转化作用，使霉菌毒素破坏或转变为低毒物质。已经报道的微生物有无根根酶、米根酶、黑曲霉、枯草杆菌等对去除黄曲霉毒素有较好的效果。　　3.2.7加含硫氨基酸 向饲料中添加蛋氨酸和半胱氨酸两种含硫氨基酸，畜禽机体内在酶的作用下，可利用其硫原子促进谷胱甘肽（GSH）的合成，GSH能够抵抗体外毒性物质。胡兰等（2001年）报道，在肉仔鸡口服AF2mg.kg-1基础上分别补加蛋氨酸0.2 g.kg-1和半胱氨酸0.4g.kg-1，可维持红细胞数和白细胞数与对照组基本相同的水平，谷丙转氨酶（GPT）有所提高，但比例非常小，说明有助于减弱AF对肉仔鸡引起肝脏的损伤。　　3.2.8混合稀释法 原料和饲料如果被霉菌污染超过了规定值，可以用没有被污染的原料和饲料进行稀释，使其霉菌毒素在安全范围内，但稀释应均匀，稀释后防止霉菌继续生长和再被污染，尽量现配现喂。此法适用于养殖场。　　3.2.9添加维生素C 维生素C可阻断黄曲霉毒素B1的环氧化作用从而阻止其氧化为活性形式的毒性物质。在日粮中添加一定量的维生素C，再加上适当水平的氨基酸，是克服黄曲霉毒素中毒的有效方法。胡少昶（2001，译）黄曲霉毒素B1组同黄曲霉毒素B1+维生素C组肉鸡实验中，前者导致传染性法氏囊病免疫失败。

黄曲霉毒素是一类真菌（如黄曲霉和寄生曲霉）的有毒的代谢产物，它们具有很强的致癌性，主要存在于谷物、坚果、棉籽以及一些和人类血液，动物饲料相关的产品中。其中黄曲霉毒素B1（AFB1）的毒性、致癌性、污染频率均居于首位。薄层色谱一直是检测黄曲霉毒素常用的方法，但此方法制备样品及分析样品时费时又费力。而使用黄曲霉毒素B1 ELISA试剂盒则能够快速而准确的分析样品中黄曲霉毒素B1残留。三方圆试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代真菌毒素检测产品，操作时间短 于60min，能最大限度地减少操作误差和工作强度。检测样本：玉米皮、饲 料、食用油。

黄曲霉毒素最怕“干烧”，即“火烧”。

建立测定食品中的4种黄曲霉毒素含量的HPLC方法。方法:采用高效液相色谱仪(附荧光检测器),Zor-bax Zebax-C18色谱柱(250 mm*4.6 mm,5μm),流动相为水和乙腈,流速1.0 ml/min,激发波长:360 nm,发射波长:440 nm作为分析条件,以正己烷和三氟乙酸为衍生剂来测定食品中的4种黄曲霉毒素含量。结果:黄曲霉毒素AFB1、AFG1在0～100μg/kg范围内线性关系良好,AFB2、AFG2在0～25μg/kg范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999;4种黄曲霉毒素回收率均在75%～104%之间;按取样量20 g计算,则AFB1、AFB2、AFG1、AFG2在样品中的检出限分别为0.20、0.05、0.20、0.05μg/kgkanghbu@hotmail.com

牛奶中的黄曲霉毒素M1是B1的代谢产品，牛奶中的黄曲霉毒素是M1在牛奶中的限量为0.5，黄曲霉素B1的限量在20ppb，关于体现这方面，没有细致的研究以及科研机构发不过先关信息，这个和年夜量以及动物各方面有很大关系，CSY-E96H黄曲霉毒素快速检测仪 采用固相酶联免疫吸附ELISA的原理,即酶联免疫法；可定量检测粮食、食品、饲料、油脂、乳制品、药物、饮料、牛奶、酒等产品中的黄曲霉毒素(B1，B2，G1，G2 M1 M2 AFM1、AFP1、AFQ1、AFB1-2，3-环氧化物）含量。并且可以连接食品安全监控系统，黄曲霉毒素快速检测仪、药物残留检测仪广泛应用于产品质量监督检验、卫生防疫、环境保护、工商管理、水产品批发市场、面制品生产基地、养殖场、粮库、超市、商场、各大食品安全监测系统等部门。

问题一：土茯苓的作用和禁忌 药用价值 本种粗厚的根状茎入药，称土茯苓，性甘平，利湿热解毒，健脾胃，且富含淀粉，可 用来制糕点或酿酒。 抗肿瘤作用 点击查看图片 土茯苓 1、对大鼠膀胱化学致癌的影响 实验动物雌Wistar大鼠，体重70-110g，致癌剂N-J基一N（4-羟丁基）亚硝胺（BBN），实验时以20%乙醇将BBN原液配成36%的溶液。正常对照组：在乙醚浅麻醉下，单纯以溶剂（20%乙醇）0.25ml经导管ig，每周2次，共12wk。病理对照组：36%BBN溶液0.25ml（90mg）ig，每周2次，共12wk、每只鼠BBN总剂量2.16g。土茯苓组：BBN处理同病理对照组，以每lkg含120g土茯苓干粉的饮食饲养。至wk30实验结束，处死动物，取膀胱、输尿管、肾盂，肾、肝和脾作组织学检查。结果表明，土茯苓组对BBN膀胱肿瘤的发生无明显抑制作用，而且发生了较多的鳞状细胞型肿瘤，因此在使用该品防治膀胱肿瘤时，应持慎重态度。 2．对黄曲霉毒素B1致大鼠肝癌作用的影响 取性Wistar大鼠，8wk龄，ipAFB1（280ug/kg，6次/wkx2）作肝癌启动动剂。2wk后，施以促癌程序：给含0.015%2-乙酰氨基芴（2AAF）饲料2wk，在wkl末，切除大鼠肝中叶和左外侧叶。10d后，断颈处列大鼠，肝脏取材作r-谷氨酰转肽酶（r一GT）染色。大鼠从注射AFB1前10d起，至停注AFB1后3d止，进食含受试物饲料。结果，大鼠肝癌前病变r一GT染色阳性肝细胞灶，土茯苓组（饲料中含377.7g/kg）的病灶也稍少，且显著小于对照组。提示土茯苓对预防肝癌有一定的实用价值。 解毒作用 采用土茯苓水煎剂（剂量：每鼠每日相当生药 点击查看图片 1g和0.5g两种），土茯苓稀醇制剂（剂量：相当生药1g和2g），土茯苓粗黄酮（剂量：50mg和100mg），土茯苓多糖（剂量：0.5ml和1.0ml），硫酸亚铁（剂量8mg），每组用药3d后分别igl次纯棉酚650mg/kg、850mg/kg和100mg/kg，观察解毒作用。结果，土茯苓水煎剂、稀醇制剂和粗黄酮均具有拮抗急性和亚急性棉酚中毒（P 问题二：土茯苓变黄有毒吗 没 问题三：可以吃土茯苓吗 可以用! 功效:解毒，除湿，通利关节。 1、治血热头痛，咽喉肿痛，经血淋漓等妇女血症：土茯苓与金银花、诃子、栀子、川楝子、黄连、瞿麦配伍。（《中国医学百科全书・蒙医学》七味土茯苓汤） 2、治梅毒，淋病：土茯苓与金银花、紫草茸、茜草、枇杷叶、草乌（制）、诃子、栀子、白云香、苘麻子、红花、瞿麦、黑云香配伍。（《中国医学百科全书・蒙医学》十四味土茯苓汤） 你看下效果怎么样1 问题四：土茯苓的功效和作用,土茯苓和哪些食物相克呢功效与作用是什么呢 土茯苓的功效和作用!土茯苓味甘、淡，性平。有毒。归肝、胃、肾脾经罚开散降泄。用本品治梅毒，可配合金银花、白藓皮、威灵仙、甘草等同用。现临床上主要用于湿热疮毒，常与白藓皮、地肤子、苦参等配伍同用。此外，本品近年来在临床上用治钩端螺旋体病，有一定疗效。　　土茯苓的别名　　仙遗粮、土苓、红土苓、山猪粪、毛尾薯、山遗粮、山奇良、刺猪苓、过山龙、山地栗、过冈龙　　土茯苓的功效与作用　　味甘、淡，性平。有毒。归肝、胃、肾脾经。开散降泄。用本品治梅毒，可配合金银花、白藓皮、威灵仙、甘草等同用。现临床上主要用于湿热疮毒，常与白藓皮、地肤子、苦参等配伍同用。此外，本品近年来在临床上用治钩端螺旋体病，有一定疗效。　　土茯苓适合人群　　肝肾阴虚者慎服。　　土茯苓食物相克　　服时忌茶。　　土茯苓做法指导　　凡治梅毒，可单用本品大剂量煎汤频服，或与生苡仁、金银花、防风、木通等配伍。凡湿热淋浊，小便赤涩者，可与木通、蒲公英、扁蓄等配伍，以利尿解毒泄浊。 问题五：鲜土茯苓切片后放久了煲汤会中毒么? 氧化后建议不要是食用了，氧化后性味方面发生改变，会影响效果的，建议在平时在服用期间尽量好好的保存，健康的生活方式和饮食习惯是健康身体的基础，保持良好的作息，祝你生活愉快 问题六：请问白茯苓有毒吗？ 白茯苓，中药名。为药材茯苓块切去赤茯苓后的白色部分，通常为中药饮片。古人称茯苓为“四时神药”，因为它功效非常广泛，不分四季，将它与各种药物配伍，不管寒、温、风、湿诸疾，都能发挥其独特功效。茯苓味甘、淡、性平，入药具有利水渗湿、益脾和胃、宁心安神之功用。现代医学研究：茯苓能增强机体免疫功能，茯苓多糖有明显的抗肿瘤及保肝脏作用。但虚寒精滑或气虚下陷者忌服。 ========是药三分毒・・不能乱吃・・ 问题七：新鲜土茯苓苗能吃吗? 可以一起吃。和鸭蛋相克的食物 鸭蛋+桑椹：一起吃会引起胃痛 鸭蛋+李子：一起吃会引起中毒，可以用地浆水治疗 问题八：土茯苓的作用和禁忌 药用价值 本种粗厚的根状茎入药，称土茯苓，性甘平，利湿热解毒，健脾胃，且富含淀粉，可 用来制糕点或酿酒。 抗肿瘤作用 点击查看图片 土茯苓 1、对大鼠膀胱化学致癌的影响 实验动物雌Wistar大鼠，体重70-110g，致癌剂N-J基一N（4-羟丁基）亚硝胺（BBN），实验时以20%乙醇将BBN原液配成36%的溶液。正常对照组：在乙醚浅麻醉下，单纯以溶剂（20%乙醇）0.25ml经导管ig，每周2次，共12wk。病理对照组：36%BBN溶液0.25ml（90mg）ig，每周2次，共12wk、每只鼠BBN总剂量2.16g。土茯苓组：BBN处理同病理对照组，以每lkg含120g土茯苓干粉的饮食饲养。至wk30实验结束，处死动物，取膀胱、输尿管、肾盂，肾、肝和脾作组织学检查。结果表明，土茯苓组对BBN膀胱肿瘤的发生无明显抑制作用，而且发生了较多的鳞状细胞型肿瘤，因此在使用该品防治膀胱肿瘤时，应持慎重态度。 2．对黄曲霉毒素B1致大鼠肝癌作用的影响 取性Wistar大鼠，8wk龄，ipAFB1（280ug/kg，6次/wkx2）作肝癌启动动剂。2wk后，施以促癌程序：给含0.015%2-乙酰氨基芴（2AAF）饲料2wk，在wkl末，切除大鼠肝中叶和左外侧叶。10d后，断颈处列大鼠，肝脏取材作r-谷氨酰转肽酶（r一GT）染色。大鼠从注射AFB1前10d起，至停注AFB1后3d止，进食含受试物饲料。结果，大鼠肝癌前病变r一GT染色阳性肝细胞灶，土茯苓组（饲料中含377.7g/kg）的病灶也稍少，且显著小于对照组。提示土茯苓对预防肝癌有一定的实用价值。 解毒作用 采用土茯苓水煎剂（剂量：每鼠每日相当生药 点击查看图片 1g和0.5g两种），土茯苓稀醇制剂（剂量：相当生药1g和2g），土茯苓粗黄酮（剂量：50mg和100mg），土茯苓多糖（剂量：0.5ml和1.0ml），硫酸亚铁（剂量8mg），每组用药3d后分别igl次纯棉酚650mg/kg、850mg/kg和100mg/kg，观察解毒作用。结果，土茯苓水煎剂、稀醇制剂和粗黄酮均具有拮抗急性和亚急性棉酚中毒（P 问题九：土茯苓变黄有毒吗 没 问题十：可以吃土茯苓吗 可以用! 功效:解毒，除湿，通利关节。 1、治血热头痛，咽喉肿痛，经血淋漓等妇女血症：土茯苓与金银花、诃子、栀子、川楝子、黄连、瞿麦配伍。（《中国医学百科全书・蒙医学》七味土茯苓汤） 2、治梅毒，淋病：土茯苓与金银花、紫草茸、茜草、枇杷叶、草乌（制）、诃子、栀子、白云香、苘麻子、红花、瞿麦、黑云香配伍。（《中国医学百科全书・蒙医学》十四味土茯苓汤） 你看下效果怎么样1

1.抗肿瘤作用1.1对大鼠膀胱化学致癌的影响 实验动物雌Wistar大鼠，体重70-110g，致癌剂N-J基一N（4-羟丁基）亚硝胺（BBN），实验时以20%乙醇将BBN原液配成36%的溶液。正常对照组：在乙醚浅麻醉下，单纯以溶剂（20%乙醇）0.25ml经导管ig，每周2次，共12wk。病理对照组：36%BBN溶液0.25ml（90mg）ig，每周2次，共12wk、每只鼠BBN总剂量2.16g。土茯苓组：BBN处理同病理对照组，以每lkg含120g土茯苓干粉的饮食饲养。至wk30实验结束，处死动物，取膀胱、输尿管、肾盂，肾、肝和脾作组织学检查。结果表明，土茯苓组对BBN膀胱肿瘤的发生无明显抑制作用，而且发生了较多的鳞状细胞型肿瘤，因此在使用本品防治膀胱肿瘤时，应持慎重态度。 1.2对黄曲霉毒素B1致大鼠肝癌作用的影响 取性Wistar大鼠，8wk龄，ipAFB1（280ug/kg，6次/wkx2）作肝癌启动动剂。2wk后，施以促癌程序：给含0.015%2-乙酰氨基芴（2AAF）饲料2wk，在wkl末，切除大鼠肝中叶和左外侧叶。10d后，断颈处列大鼠，肝脏取材作r-谷氨酰转肽酶（r一GT）染色。大鼠从注射AFB1前10d起，至停注AFB1后3d止，进食含受试物饲料。结果，大鼠肝癌前病变r一GT染色阳性肝细胞灶，土茯苓组（饲料中含377.7g/kg）的病灶也稍少，且显著小于对照组。提示土茯苓对预防肝癌有一定的实用价值。2.对棉酚的解毒作用 采用土茯苓水煎剂（剂量：每鼠每日相当生药1g和0.5g两种），土茯苓稀醇制剂（剂量：相当生药1g和2g），土茯苓粗黄酮（剂量：50mg和100mg），土茯苓多糖（剂量：0.5ml和1.0ml），硫酸亚铁（剂量8mg），每组用药3d后分别igl次纯棉酚650mg/kg、850mg/kg和100mg/kg，观察解毒作用。结果，土茯苓水煎剂、稀醇制剂和粗黄酮均具有拮抗急性和亚急性棉酚中毒（P<0.05，P<0.001和P<0.001）。一般棉酚中毒时可用硫酸亚铁拮抗，但能影响抑精作用。土茯苓稀醇提取物在拮抗棉酚毒性的同时不影响棉酚对雄性大鼠的抑精作用。

你说北京现代的车架号码 lbemcaca4ax189406应该是2010年生产的现代同意轿车，但是这个车型已经停产很多年了，没有新车。

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300度

曲霉毒素（是一类化学结构类似的化合物，均为二氢呋喃香豆素的衍生物。黄曲霉毒素是主要由黄曲霉寄生曲霉产生的次生代谢产物，在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率最高。你好！黄曲霉素具有耐热性：一般烹调加工温度不能将其破坏，裂解温度为280℃。在水中溶解度较低，溶于油及一些有机溶剂，如氯仿和甲醇中，但不溶于乙醚、石油醚及乙烷。黄曲霉素没有杀死只说，只能尽量防止其产生，黄曲霉素是由黄曲霉菌所产生的毒素的总称。它的毒性大，致癌力强，对人体危害极大。黄曲霉素可以污染花生、玉米、甘薯等各类植物性食品。气温在摄氏30度左右，相对湿度为85%的环境中，黄曲霉素产毒量最高。为了防止食品霉变，一定要将食品干燥或低温下收藏。CSY-E96H黄曲霉毒素快速检测仪（黄曲霉素快速检测仪|黄曲霉素检测仪|黄曲霉毒素测试仪）采用固相酶联免疫吸附ELISA的原理,即酶联免疫法；可定量检测粮食、食品、饲料、油脂、乳制品、药物、饮料、牛奶、酒等产品中的黄曲霉毒素(B1，B2，G1，G2M1M2AFM1、AFP1、AFQ1、AFB1-2，3-环氧化物）含量。并且可以连接食品安全监控系统，黄曲霉毒素快速检测仪、药物残留检测仪广泛应用于产品质量监督检验、卫生防疫、环境保护、工商管理、水产品批发市场、面制品生产基地、养殖场、粮库、超市、商场、各大食品安全监测系统等部门。

黄曲霉毒素（AFT）是一类化学结构类似的化合物，均为二氢呋喃香豆素的衍生物。黄曲霉毒素是主要由黄曲霉 （aspergillus flavus）寄生曲霉 （a.parasiticus）产生的次生代谢产物，在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率最高。它们存在于土壤、动植物、各种坚果中，特别是容易污染花生、玉米、稻米、大豆、小麦等粮油产品，是霉菌毒素中毒性最大、对人类健康危害极为突出的一类霉菌毒素黄曲霉毒素被世界卫生组织划定为1类致癌物，毒性比砒霜大68倍，仅次于肉毒霉素，是目前已知霉菌中毒性最强的。据悉，黄曲霉毒素的危害性在于对人及动物 肝脏组织有破坏作用，严重时可导致肝癌甚至死亡，在天然污染的食品中以黄曲霉毒素B1最为多见，其毒性和致癌性也最强。“B1是最危险的致癌物，经常在玉米，花生，棉花种子，一些干果中常能检测到，其中以花生和玉米污染最严重。家庭自制发酵食品也能检出黄曲霉毒素，尤其是高温高湿地区的粮油及制品种检出率更高。”一名相关人员介绍说。CSY-E96H黄曲霉毒素快速检测仪 采用固相酶联免疫吸附ELISA的原理,即酶联免疫法；可定量检测粮食、食品、饲料、油脂、乳制品、药物、饮料、牛奶、酒等产品中的黄曲霉毒素(B1，B2，G1，G2 M1 M2 AFM1、AFP1、AFQ1、AFB1-2，3-环氧化物）含量。并且可以连接食品安全监控系统，黄曲霉毒素快速检测仪、药物残留检测仪广泛应用于产品质量监督检验、卫生防疫、环境保护、工商管理、水产品批发市场、面制品生产基地、养殖场、粮库、超市、商场、各大食品安全监测系统等部门。

可以的　　【美容功效】解毒除湿，祛斑。　　【美容方法】　　1.用于湿疹、疥癣、疮肿本品甘淡，有解毒利湿之功。治湿疹、疥癣，可单用本品研末，好醋调敷;或配白鲜皮、地肤子、苦参等清热燥湿之品。治疮疡肿毒，可与金银花、连翘等清热解毒药物同用。此外，还能治皮炎、漆过敏、寻常疣等。　　2.用于面斑、白疤本品利湿解毒。治黄褐斑，可单用土茯苓100g，水煎分2次服用，2al剂。治白疙(银屑病进行期)属血热者，则与槐花、生地、白茅根、紫草等清热凉血活血之品同用;或单用土茯苓60g，研粗末包煎，日1剂，2次分服，15剂为一疗程。若治白疙属湿热型，常配生地、赤芍、地肤子、白鲜皮、茵陈等同用。　　【用法用量】煎服，15～60g。外用适量，研末调敷。　　【使用注意】服药后忌饮茶。肝肾阴亏者慎服。　　【按语】本品功擅解毒利湿，又能通利关节，解汞毒，故对梅毒或因梅毒服汞剂中毒而致肢体拘挛者，功效尤佳，为治梅毒的要药，常用于梅毒疮，肢体拘挛，淋浊，带下，湿热疮毒等证。近年常用本品防治钩端螺旋体病，有较好效果。　　本品解毒利湿，善治湿疹、疥癣、疮肿等损容性疾病。其单味或与其他药物配伍同用，内服或外用皆可。同时，还能祛斑护肤，治面斑或白疙等证。此外，土茯苓常与其他中药配合应用于按摩霜、按摩乳液及脚气露等配方中。　　【配方】　　(1)疮肿方：土茯苓，为细末，好醋调敷，治大毒疮红肿。　　(2)土茯苓酒：土茯苓250g，石臼捣为末，糯米20kg，蒸熟，酿酒，酒与糟皆可食用。治风毒疮癣。　　【本草文献】　　(1)《本草纲目》：“健脾胃，强筋骨，去风湿，利关节，止泄泻，治拘挛骨痛，恶疮痈肿，解汞粉银朱毒。”　　(2)《本草备要》：“治杨梅疮毒，瘰疬疮肿。”　　【现代研究】本品含苷类、生物碱、挥发油、有机酸类、己糖、鞣酸、植物甾醇、油酸、亚油酸、鞣质、树脂及淀粉等。能减轻汞中毒所致面部色素沉着。本品提取物可抑制黑色素的生物合成，阻止黑色素的沉积，美白与淡化面部色素。

#include<stdio.h>#include<string.h>int main(){ unsigned i,len; int n=0; char str[99]="123342abcdAFB1H",str1[99],str2[99]="  "; sscanf(str,"%[0-9^a-f^A-F]",str1); len=strlen(str1); while(strlen(str1)>1) { sscanf(str1,"%2s",str2); if(strlen(str1)!=len)printf(","); printf("0x%s",str2); n++; for(i=0;i<strlen(str1)-2;i++) { str1[i]=str1[i+2]; } str1[strlen(str1)-2]=""; } printf(" n=%d ",n); return 0;}

小米发黑还能吃吗?不管是大米还是小米，发黑就绝对不能吃了，这种发黑的小米就是变质发霉的表现。

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可以啊 土茯苓 可以1.抗肿瘤作用1.1对大鼠膀胱化学致癌的影响 实验动物雌Wistar大鼠，体重70-110g，致癌剂N-J基一N（4-羟丁基）亚硝胺（BBN），实验时以20%乙醇将BBN原液配成36%的溶液。正常对照组：在乙醚浅麻醉下，单纯以溶剂（20%乙醇）0.25ml经导管ig，每周2次，共12wk。病理对照组：36%BBN溶液0.25ml（90mg）ig，每周2次，共12wk、每只鼠BBN总剂量2.16g。土茯苓组：BBN处理同病理对照组，以每lkg含120g土茯苓干粉的饮食饲养。至wk30实验结束，处死动物，取膀胱、输尿管、肾盂，肾、肝和脾作组织学检查。结果表明，土茯苓组对BBN膀胱肿瘤的发生无明显抑制作用，而且发生了较多的鳞状细胞型肿瘤，因此在使用本品防治膀胱肿瘤时，应持慎重态度。[3] 1.2对黄曲霉毒素B1致大鼠肝癌作用的影响 取性Wistar大鼠，8wk龄，ipAFB1（280ug/kg，6次/wkx2）作肝癌启动动剂。2wk后，施以促癌程序：给含0.015%2-乙酰氨基芴（2AAF）饲料2wk，在wkl末，切除大鼠肝中叶和左外侧叶。10d后，断颈处列大鼠，肝脏取材作r-谷氨酰转肽酶（r一GT）染色。大鼠从注射AFB1前10d起，至停注AFB1后3d止，进食含受试物饲料。结果，大鼠肝癌前病变r一GT染色阳性肝细胞灶，土茯苓组（饲料中含377.7g/kg）的病灶也稍少，且显着小于对照组。提示土茯苓对预防肝癌有一定的实用价值。2.对棉酚的解毒作用 采用土茯苓水煎剂（剂量：每鼠每日相当生药1g和0.5g两种），土茯苓稀醇制剂（剂量：相当生药1g和2g），土茯苓粗黄酮（剂量：50mg和100mg），土茯苓多糖（剂量：0.5ml和1.0ml），硫酸亚铁（剂量8mg），每组用药3d后分别igl次纯棉酚650mg/kg、850mg/kg和100mg/kg，观察解毒作用。结果，土茯苓水煎剂、稀醇制剂和粗黄酮均具有拮抗急性和亚急性棉酚中毒（P<0.05，P<0.001和P<0.001）。一般棉酚中毒时可用硫酸亚铁拮抗，但能影响抑精作用。土茯苓稀醇提取物在拮抗棉酚毒性的同时不影响棉酚对雄性大鼠的抑精作用。[2] 理化鉴别土伏苓图册3 (20张)（1）取本品粉末1g，加水10ml，在60度水浴上加热10min，滤过，滤液作以下试验。①取滤液2ml，置带寒试管中，用力振摇1min，产生多数蜂窝状泡沫，放置10min，泡沫不明显减少。（检查皂甙）②取滤液2ml置试管中蒸干，加醋酐0.5ml，再沿试管壁加浓硫酸，两液面交界呈紫红色环。（检查皂甙） （2）薄层色谱 取本品粉末5g，加乙醇50ml，于水浴中回流1h，放冷，滤过。滤液回收乙醇，残渣加稀硫酸20ml，回流水解3h，放冷，用氯仿提取2次，每次20ml。合并氯仿液，用少量水洗去残存的酸，脱水后，蒸去氯仿。残渣加少量已烷溶解，作供试液。以薯蓣皂甙元、替告皂甙元作对照品。分别点样于同一硅胶G-7.5%硝酸银薄板上，以氯仿-乙酸乙酯（9：1）展开。用饱和磷钼酸的乙醇溶液喷雾后，于110度烘5min显色，供试品色谱在与对照品色谱的相应位置上显相同的蓝色斑点。[2]

应该是，题目不会出错的。出错也当对的解

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链接: https://pan.baidu.com/s/11AFB1ohan-C7KSGkG-I1Uw 提取码: b257      该小说讲述了那一年冬天，父亲受一桩冤案牵连被打压，不堪凌辱投湖自尽，神秘人焚毁父亲十年呕心沥血创作的一部著作，母亲受刺激抑郁寡欢最终疯掉，放火烧了我们的家，烧死了她自己，我侥幸从火海里逃了出来，在母亲的头七日被一名老裁缝收留，发现那裁缝师父不但给活人做衣裳，还给死人做寿衣，而且每天清晨第一件事都是给一匹被供奉在裁缝铺神龛上的大红绸磕头上香。

老兄我知道一点点 我是学这个的但是了 我学的不好所以了我劝你换个地方问问这算法是2进制的上面的A带表10 B代表11…重新排列后在转换为N进制(N我不知道哦)就会得出结果这些是域网IP

链接：https://pan.baidu.com/s/1OYjz_THlVbMafb1uiuxBVQ 提取码：25k5    该影片讲述了大虎是个聪明、调皮的孩子，陈娟老师耐心细致的教育下，大虎改变了。

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