请告诉我分光光度计的一些知识

分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射下，产生了对光吸收的效应，物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，因此当某单色光通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合比色原理——比耳定律

分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下，产生了对光吸收的效应，物质对光的吸收是具有选择性的，各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，因此当某单色光通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合于比色原理---比耳定律。 T=I/I LogI0/I=KCL A=KCL 其中： T 透射比 I0 入射光强度 I 透射光强度 A 吸光度 K 吸收系数 L 溶液的光径长度 C 溶液的浓度 从以上的公式可以看出，当入射光、吸收系数和溶液的光径长度不变时，透过光是根据溶液的浓度而变化的，分光光度计的基本原理是根据上述之物理光学现象而设计的

1、原理：利用一定频率的紫外—可见光照射分析物，它将有选择的被吸收。吸收光谱可以反映出特征。 2、、结构组成：光源、单色器、样品池、检测器。单光束分光光度计的，双光束分光光度计组成。 2、光源：提供连续的辐射。单色器是分光光度计的心脏部分，是把来自光源的混合光分解成单色光，并能随意改变波长。

分光光度计的原理是：基于物质对光（对光的波长）的吸收具有选择性，不同的物质都有各自的吸收光带。分光光度计，又称光谱仪，是将成分复杂的光，分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780 nm的可见光区和波长范围为200～380 nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱，因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。钨灯的发射光谱：钨灯光源所发出的380～780nm波长的光谱光通过三棱镜折射后，可得到由红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫组成的连续色谱；该色谱可作为可见光分光光度计的光源。分光光度计的概念发送到样品的光束由光子束构成。当光子遇到样品中的分子时，分子可以吸收其中的一些分子，减少光束中的光子数量并降低检测信号的强度。透射率是穿过样品的光的一部分。它被定义为在入射光强度下穿过样品的光强度。吸光度与透射率相反，对应于分光光度计测量的量。根据吸光度，溶液样品中的浓度可以从比尔朗伯定律确定，其表明吸光度和样品浓度之间存在线性关系。根据Beer-Lambert定律，吸光度是吸收系数的乘积，吸收系数是给定波长下溶质吸收的光量的量度，是光通过的距离。样品，或行进距离，以及溶质的浓度。通常，测量吸光度的目标是测量样品的浓度。以上内容参考百度百科-分光光度计

分光光度法原理如下：分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析的方法。它具有灵敏度高、操作简便、快速等优点，是生物化学实验中最常用的实验方法。许多物质的测定都采用分光光度法。在分光光度计中，将不同波长的光连续地照射到一定浓度的样品溶液时，便可得到与不同波长相对应的吸收强度。在分光光度计中，将不同波长的光连续地照射到一定浓度的样品溶液时，便可得到与不同波长相对应的吸收强度。如以波长（λ）为横坐标，吸收强度（A）为纵坐标，就可绘出该物质的吸收光谱曲线。分光光度法的选择吸收原理：物质与光作用，具有选择吸收的特性。有色物质的颜色是该物质与光作用产生的。即有色溶液所呈现的颜色是由于溶液中的物质对光的选择性吸收所致。由于不同的物质其分子结构不同，对不同波长光的吸收能力也不同，因此具有特征结构的结构集团，存在选择吸收特性的最大实收波长，形成最大吸收峰，而产生特有的吸收光谱。即使是相同的物质由于其含量不同，对光的吸收程度也不同。利用物质所特有的吸收光谱来鉴别物质的存在（定性分析），或利用物质对一定波长光的吸收程度来测定物质含量（定量分析）的方法，称为分光光度法。

紫外可见分光光度计原理是：物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。紫外分光光度计的组成：各种型号的紫外－可见分光光度计，就其基本结构来说，都是由五个基本部分组成，即光源、单色器、吸收池、检测器及信号指示系统。1、光源在紫外可见分光光度计中，常用的光源有两类：热辐射光源和气体放电光源。热辐射光源用于可见光区，如钨灯和卤钨灯；气体放电光源用于紫外光区，如氢灯和氘灯。2、单色器单色器的主要组成：入射狭缝、出射狭缝、色散元件和准直镜等部分。单色器质量的优劣，主要决定于色散元件的质量。色散元件常用棱镜和光栅。3、吸收池吸收池又称比色皿或比色杯，按材料可分为玻璃吸收池和石英吸收池，前者不能用于紫外区。吸收池的种类很多，其光径可在0.1~10cm之间，其中以1cm光径吸收池最为常用。4、检测器检测器的作用是检测光信号，并将光信号转变为电信号。现今使用的分光光度计大多采用光电管或光电倍增管作为检测器。

分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光线透过测试的样品后，部分光线被吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。单色光辐射穿过被测物质溶液时，被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度（光路长度）成正比，其关系如下式：A=-lg(I/I。)=-lgT=kLc式中 :A 为吸光度；I。为入射的单色光强度；I 为透射的单色光强度；T 为物质的透射率；k 为摩尔吸收系数；L 为被分析物质的光程，即比色皿的边长；c 为物质的浓度；物质对光的选择性吸收波长，以及相应的吸收系数是该物质的物理常数。当已知某纯物质在一定条件下的吸收系数后可用同样条件将该供试品配成溶液，测定其吸收度,即可由上式计算出供试品中该物质的含量。在可见光区，除某些物质对光有吸收外，很多物质本身并没有吸收但可在一定条件下加入显色试剂或经过处理使其显色后再测定,故又称比色分析。由于显色时影响呈色深浅的因素较多，且常使用单色光纯度较差的仪器，故测定时应用标准品或对照品同时操作。

当一束强度为I0的单色光垂直照射某物质的溶液后,由于一部分光被体系吸收,因此透射光的强度降至I,则溶液的透光率T为:　　根据朗伯(Lambert)-比尔(Beer)定律:　　A=abc　　式中A为吸光度，b为溶液层厚度（cm），c为溶液的浓度（g/dm^3)，a为吸光系数。其中吸光系数与溶液的本性、温度以及波长等因素有关。溶液中其他组分（如溶剂等）对光的吸收可用空白液扣除。　　由上式可知，当固定溶液层厚度l和吸光系数时，吸光度A与溶液的浓度成线性关系。在定量分析时，首先需要测定溶液对不同波长光的吸收情况（吸收光谱），从中确定最大吸收波长，然后以此波长的光为光源，测定一系列已知浓度c溶液的吸光度A，作出A~c工作曲线。在分析未知溶液时，根据测量的吸光度A，查工作曲线即可确定出相应的浓度。这便是分光光度法测量浓度的基本原理。

　　【导读】自从1918年紫外可见分光光度计由美国研发出来之后，经过长期的不断发展和进步，像自动记录、打印等相关辅助性仪器已经诞生了。紫外可见分光光度计法诞生后，给我们的生活与工作带来了不小的冲击，它的功能能够更好的为我们服务。那么它的原理还有一些具体的应用是怎样的呢?下面就让小编来为大家介绍一下。　　紫外可见分光光度计的原理其实相对比较简单，我们都知道就是物质在吸收光谱之后，其本身的含义就是物质里面的分子以及原子有了一定波长光能量。在这些能量的基础上出现分子振动的能级跃迁以及电子能级跃迁这样的效果。每一个物质的分子是不一样的，它们的组成也是相差很大。这样一来物质所吸收的光能量也就有很大的差距，于是就会有了不一样的波长，从而分析出物质的特点以及相互的关系。　　　　相对于紫外可见分光光度计的应用来说，主要有以下几个方面。　　首先这类设备在物质检定方面的贡献是不小的，我们依据光谱图所展示的相关特点进行分门别类的吸收，尤其是最大的吸收波长。这种设备具有的功能在药物的常规分析方面的应用是很重要的。通过了解我们知道国内外药典里面，早就已经把相当一批药物的紫外吸收光谱参数都记录在里面了。这样的记录为药品的分析提供了很好的帮助。　　　　其次它还可以跟标准物与标准图谱进行对比。当我们把样品与标准样品进行一定浓度的配置，并组成溶液。然后在同一环境和条件下利用紫外可见分光光度计对它们进行紫外可见吸收光谱的对比，一旦光谱图完全一致，证明它们是同一物质，如果不一致的话，那么它们就不属于同一个物质。由于它们的环境比较复杂，所以需要的仪器精度要高。　　　　　　再次我们还可以用它们进行氢键强度测定试验，经过我们的分析了解到对于极性溶剂来讲，由于类型不同，因此产生氢键强度也会出现很大的偏差。我们可以利用紫外可见分光光度计来进行测定化合物溶剂氢键强度的情况，从而确定溶剂的选择。　　最后对于紫外可见分光光度计在有机分析方面的应用也是相对比较大的。相对于有机分析来说，它是针对有机化合物进行分离与鉴别等研究的，可以有效的测定结构以及相关信息。它是有机化学以及分析化学方面进行结合发展的产物。　　　　除了上面的一些具体的应用之外我们还了解到它在纯度检验、反应动力学研究方面的贡献也是不小的。　　就目前而言，紫外可见分光光度计的应用越来越广泛，它的作用越来越受到我们的重视。因此对于该类型的设备的研发也在不断的提升。因此我们有必要通过这篇文章认识和掌握一定的有关于这样的设备的知识。土巴兔在线免费为大家提供“各家装修报价、1-4家本地装修公司、3套装修设计方案”，还有装修避坑攻略！点击此链接：【https://www.to8to.com/yezhu/zxbj-cszy.php?to8to_from=seo_zhidao_m_jiare&wb】，就能免费领取哦~

1、仪器的主要用途：在近紫外和可见光谱区域内对样品物质作定性和定量的分析，是理化实验室常用分析仪器之一。 2、仪器的工作环境： 2.1该仪器应安放在干燥的房间内，使用温度为5°C~35°C。 2.2使用时放置在坚固平稳的工作台上，而且避免强烈震动或持续震动。 2.3室内照明不宜太强，且避免日光直射。 2.4电风扇不宜直接吹向仪器，以免影响仪器的正常使用。 2.5尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备。 2.6供给仪器的电源为220伏±10%，49.5--50Hz，并须装有良好的接地线。宜使用100W以上的稳压器，以加强仪器的抗干扰性能。 2.7避免在有硫化氢、亚硫酸氟等腐蚀性气体的场所使用。 3、主要技术性能及规格： 3.1光学系统：单光束、衍射光栅。 3.2波长范围：330nm~800nm.。 3.3光源：钨卤素灯12V30W。 3.4接收元件：端窗式G1030光电管。 3.5波长精度：±2nm。 3.6波长重现性：0.5 nm。 3.7光谱带宽：6 nm。 3.8杂散光：1%（T） （在360 nm处）。 3.9透过率测量范围：0-100%（T）。 3.10吸光度测量范围：0-1.999（A）。 3.11浓度直读范围：0-2000。 3.12光度精度 ： 3.12.1透过率线性精度±0.5%（T）。 3.12.2吸光度精度±0.004A(在0.5A处)。 3.13透过率重现性：0.5%（T）。 3.14噪声：0.5%（T）（在550 nm处）。 3.15电源：220伏±10% 49.5-50Hz。 3.16外形尺寸：552mm× 400mm ×230mm。 3.17净重：22.5公斤。 4、仪器的工作原理 4.1分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下，产生了对光吸收的效应，物质对光的吸收是具有选择性的，各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，因此当某单色光通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合于比色原理---比耳定律。 T=I/I LogI0/I=KCL A=KCL 其中： T 透射比 I0 入射光强度 I 透射光强度 A 吸光度 K 吸收系数 L 溶液的光径长度 C 溶液的浓度 从以上的公式可以看出，当入射光、吸收系数和溶液的光径长度不变时，透过光是根据溶液的浓度而变化的，分光光度计的基本原理是根据上述之物理光学现象而设计的。 5、仪器的光学系统：722型光栅分光光度计采用光栅自准式色散系统和单光束结构光路。 钨灯发出的连续幅射经滤色片选择聚光镜聚光后投向单色器进狭缝,此狭缝正好处于聚光镜及单色器内准直镜的焦平面上，因此进入单色器的复合光通过平面反射镜反射及准直镜准直变成平行光射向色散元件光栅，光栅将入射的复合光通过衍射作用形成按照一定顺序均匀排列的连续单色光谱，此单色光谱重新回到准直镜上，由于仪器出射狭缝设置在准直镜的焦平面上，这样，从光栅色散出来的光谱经准直镜后利用聚光原理成象在出射狭缝上，出射狭缝选出指定带宽的单色光通过聚光镜落在试样室被测样品中心，样品吸收后透射的光经光门射向光电管阴极面。 6、仪器的结构：722型光栅分光光度计由光源室、单色器、试样室、光电管暗盒、电子系统及数字显示器等部件组成。 6.1光源室部件：氢灯灯架，钨灯灯架，聚光镜架，截止滤光片组架及氢灯接线架等各通过两个螺丝固定在灯室部件底座上。氢灯及钨灯灯架上装有氢灯与钨灯，分别作为紫外和可见区域的能量幅射源。氢灯、钨灯的装卸更换请参阅光源灯的更换章节。聚光镜安装在聚光镜架上通过镜架边缘两个定位螺丝及后背部的拉紧弹簧，角度校正顶针使其定值。当需要改变聚焦光斑在单色器入射狭缝上下位置，可通过角度校正顶针进行调整。聚光镜下有一定位梢，旋转镜架可改变光斑在单色器入射狭缝左、右位置。为了消除光栅光谱中存在着级次之间的光谱重叠问题及当在紫外区域使紫外幅射能量进入单色器，在灯室内安置了截止滤光片组。截止滤光片组通过柱头螺丝固定在一联动轴上，改变滤光片组的前后位置可改变紫外能量幅射传输在聚光镜上的方位。轴的另一端装有一齿轮，用以齿合单色器部件波长传动机构大滑轮上的齿轮，使截止滤光片组的选择与波长值同步。 6.2单色器部件：单色器是仪器的心脏部分，布置在光源与试样室之间，用三个螺丝固定在灯室部件上。单色器部板内装有狭缝部件，反光镜组件、准直镜部件，光栅部件波长线性传动机构等。 6.2.1狭缝部件：仪器入射、出射狭缝均采用宽度为0.9mm的等宽度双刀片狭缝,通过狭缝固定螺丝固定在狭缝部件架上，狭缝部件是用两个螺丝安装在单色器架上。安装狭缝时注意狭缝双刀片斜面必须向着光线传播方向，否则会增加仪器的杂散光。反光镜组件安装在入射狭缝部件架上，反光镜采用一块方形小反光镜，通过组件架上的调节螺钉可改变入射光的反射角度，使光斑打在准直镜上。 6.2.2准直镜部件：准直镜是一块凹形玻璃球面镜，装在镜座上，后部装有三套精密的细牙调节螺钉。用来调整出射光聚焦于出射狭缝，以及出射于狭缝时光的波长与波长盘上所指示波长相对应。 6.2.3光栅部件与波长传动机构：光栅在单色器中主要起色散作用，由于光栅的色散是线性的，因此光栅可采用线性的传动机构。722仪器采用扇形齿轮与波长转动轴上的齿轮相吻合，达到波长刻度盘带动光栅转动，改变仪器出射狭缝的波长值。另外在单色器由转盘大、小滑轮及尼龙绳组成了一套波长联动机构，大滑轮上的齿轮与截止滤光片转轴上的齿轮齿合，使波长值与截止滤光片组同步。光栅安装在光栅底座上，通过光栅架后的三个螺钉可改变光栅的色散角度。 6.3试样室部件：试样室部件由比色皿座架部件及光门部件组成。 6.3.1比色皿座架部件：整个比色皿座连滑动座架通过底部三个定位螺丝全部装在试样室内，滑动座架下装有弹性定位装置，拉动拉杆能正确地使滑动座架带动四档比色皿正确处于光路中心位置。 6.3.2光门部件：在试样室的右侧通过三个定位螺丝装有一套光门部件，其顶杆露出盒右小孔，光门挡板依靠其本身重量及弹簧作用向下垂落至定位螺母，遮住透光孔，光束被阻挡不能进入光电管阴极面，光路遮断，仪器可以进行零位调节。当关上试样室盖时，顶杆便向下压紧，此时顶住光门挡板下端。在杠杆作用下，使光门挡板上抬，打开光门，可调整100%进行测量工作。 6.4光电管暗盒部件：整个光电管暗盒部件通过四个螺钉固定在仪器底座上。部件内装有光电管、干燥剂筒及微电流放大器电路板。光电管采用插入式G1030型端窗式光电管，其管脚共有14个，其中4、8两脚为光电阴极，1、6、10、12四脚为阳极。 7、仪器的安装使用与维护 7.1使用仪器前，使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理，以及各个操作旋钮之功能。在未接通电源前，应该对于仪器的安全性进行检查，电源线接线应牢固。接地要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再接通电源开关。 仪器在使用前先检查一下，放大器暗盒的矽胶干燥筒（在仪器的左侧），如受潮变色，应更换干燥的蓝色矽胶式或者倒出原矽胶，烘干后再用。 仪器经过运输和搬运等原因，会影响波长精度，吸光度精度，请根据仪器调校步骤进行调整，然后投入使用。 7.2将灵敏度旋钮调置“1”档（放大倍率最小）。 7.3开启电源，指示灯亮，选择开关置于“T”，波长调置测试用波长，仪器预热20分钟。 7.4打开试样室盖（光门自动关闭），调节“0”旋钮，使数字显示为“00.0”盖上试样室盖,将比色皿架处于蒸馏水校正位置,使光电管受光，调节透过率“100%”旋钮，使数字显示为“100.0” 7.5如果显示不到“100.0”，则可适当增加微电流放大器的倍率档数，但尽可能倍率置低档使用，这样仪器将有更高的稳定性，但改变倍率后必须按（4）重新校正“0”和“100%”。 7.6预热后，按（4）连续几次调整“0”和“100%”，仪器即可进行测定工作。 7.7吸光度A的测量按（4）调整仪器“00．0”和“100%”，将选择开关置于“A”，调节吸光度调节器调零旋钮，使得使得数字显示为“．000”，然后将被测样品移入光路，显示值即为被测样品的吸光度的值。 7.8浓度C的测量：选择开关由“A”旋置“C”，将已标定浓度的样品放入光路，调节浓度旋钮，使得数字显示为标定值，将被测样品放入光路，即可读出被测样品的浓度值。 7.9如果大幅度改变测试波长时，在调整“0”和“100%”后稍等片刻，（因光能量变化急剧，光电管受光后响应缓慢，需一段光响应平衡时间），当稳定后，重新调整“0”和100%即可工作。 7.10每台仪器所配套的变色皿，不能与其它仪器上的比色皿单个调换。 7.11本仪器数字表后盖，有信号输出0-1000MV，插座1脚为正，2脚为负接地线。 7.12仪器的维护： 7.12.1为确保仪器稳定工作在电压波动较小的地方，220V电源预先稳压，宜备220V稳压器一只（磁饱和式或电子稳压式）。 7.12.2当仪器工作不正常时，如数字表无亮光，光源灯不亮，开关指示灯无信号，应检查仪器后盖保险丝是否损坏，然后查电源线是否接通，再查电路。 7.12.3仪器要接地良好。 7.12.4仪器左侧下角有一只干燥筒，应保持其干燥性，发现变色立即更新或加以烘干再用。 7.12.5另外有二包硅胶放在样品室内，当仪器停止使用后，也应该定期更新烘干。 7.12.6当仪器停止工作时，切断电源，电源开关同时切断。 7.12.7为了避免仪器积灰和沾污，在停止工作时间内，用塑料套子罩住整个仪器，在套子内应放数袋防潮硅胶，以免灯室受潮、反射镜镜面发霉点或沾污，影响仪器能量。 7.12.8仪器工作数月或搬动后，要检查波长精度和吸光度A精度等方面，以确保仪器的正常使用和测定精度。 8、仪器的调校和故障修理 仪器使用较长时间后，与同类型的其它仪器一样，可能发生一些故障，或者仪器的性能指标有所变化，需要进行调校或修理，现分别简单介绍如下，以供使用维护者参考。 8.1仪器的调整 8.1.1钨灯的更换和调整： 光源灯是易损件，当损件更换或由于仪器搬运后均可能偏离正常位置，为了使仪器有足够的灵敏度，如何正确地调整光源灯的位置则显得更为重要，用户在更换光源灯时应带上手套，以防沾污灯壳而影响发光能量。 722仪器的光源灯采用12V30W插入式钨卤素灯，更换钨灯时应先切断电源，然后用附件中的扳手旋松钨灯架上的二个紧固螺丝，取出损坏的钨灯，换上钨灯后，将波长选择在550mm左右，开启主机电源开关，移动钨灯上、下、左、右位置，直到成象在入射狭缝上。选择适当的灵敏度开关，观察数字表读数，经过调整至数字表读数为最高即可。最后将二紧固螺丝旋紧。注意：二紧固螺丝为钨灯稳压电源的输出电压，当钨灯点亮时，千万不能短路，否则会损坏钨灯稳压电源电路元件。 8.1.2波长精度检验与校正：采用镨钕滤色片529纳米及808纳米二个特征吸收峰，通过逐点测试法来进行波长检定与校正。本仪器的分光系统采用光栅作为色散元件，其色散是线性的，因此波长分度的刻度也是线性的。当通过逐点测试法记录下的刻度波长与镨钕滤色片特征吸收. 波长值超出误差，则可卸下波长手轮，旋松波长刻度盘上的三个定位螺丝，将刻度指示置特征吸收波长值，误差范围（≤±2nm），旋紧三个定位螺丝即可。 8.1.3吸光度精度的调整：选择开关置于“T”，调节透过率“00．0”和“100．0”后，再将选择开关置于“A”， 旋动“吸光度调零”旋钮，使得显示值为“．000”。将0．5A左右的滤光片（仪器附）置于光路，测的其吸光度值。选择开关置于“T”， 测的其透过率值，根据A=lg1/T计算出其吸光度值。如果实测值与计算值有误差，则可调节“吸光度斜率电位器”，将实测值调整至计算值，两者允许误差为±0．004A。 8.2故障分析： 8.2.1初步检查：当仪器一旦出现故障，首先关主机电源开关然后按下列步骤逐步检查。 8.2.1.1当开启仪器电源，钨灯是否亮。 8.2.1.2波长盘读数指示是否在仪器允许波长范围内。 8.2.1.3仪器灵敏度开关是否选择适当。 8.2.1.4T、A、C开关是否选择在相应的状态。 8.2.1.5试样室盖是否关紧。 8.2.1.6仪器调零及调100%时是否选择在相应的旋钮调节。 8.2.2初步判断：仪器的机械系统、光学系统及电子系统为一整体，工作过程中互有牵制，为了缩小范围及早发现故障所在，按下列试验可以原则上区分故障性质。 8.2.2.1光学系统试验：①灯电源开关按下，点亮钨灯。②仪器波长刻度选择在580nm，打开试样室盖以白纸插入光路聚焦位置，应见到一较亮、完整的长方形光斑。③手调波长向长波，白纸上应见到光斑由紫逐渐变红；手调波长向短波，白纸上应见到光斑由红逐渐变紫。④波长在330nm—800nm范围，改变相应的灵敏度档调节100%钮，观察数字表读数显示能达到100．0值。上述试验通过，光学系统原则上正常。 8.2.2.2机械系统试验：①手调波长钮330nm—800nm往返手感平滑无明显卡住。②检查各按钮、旋钮、开关及比色皿选择拉杆手感是否灵活。上述试验通过，机械系统原则上正常。 8.2.2.3电子系统试验：①灯电源按钮按下，应点亮钨灯；②打开试样室盖，调节调零旋钮观察数字显示读数应为00．0左右可调。③选择波长580，灵敏度开关选择T档，关上试样室盖，此时调节100%旋钮观察数字显示读数应为100．0左右可调。④T、A、C转换开关选择T档，试样室空白，当完成仪器调零及调100%后选择A档，调节消光零旋钮观察数字显示读数应．000左右可调。上述试验通过，电子系统原则上正常。 参考资料：科学仪器在线

分光光度法分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸光度或发光强度，对该物质进行定性和定量分析的方法。在分光光度计中，将不同波长的光连续地照射到一定浓度的样品溶液时，便可得到与众不同波长相对应的吸收强度。如以波长（λ）为横坐标，吸收强度（A）为纵坐标，就可绘出该物质的吸收光谱曲线。利用该曲线进行物质定性、定量的分析方法，称为分光光度法，也称为吸收光谱法。用紫外光源测定无色物质的方法，称为紫外分光光度法；用可见光光源测定有色物质的方法，称为可见光光度法。它们与比色法一样，都以Beer-Lambert定律为基础。上述的紫外光区与可见光区是常用的。但分光光度法的应用光区包括紫外光区，可见光区，红外光区。波长范围(1)200～400nm的紫外光区，(2)400～760nm的可见光区，(3)2.5～25μm(按波数计为4000cm<-1>～400cm<-1>)的红外光区。仪器紫外分光光度计，可见分光光度计（或比色计）、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度，所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定，定期进行校正检定。编辑本段基本原理当一束强度为I0的单色光垂直照射某物质的溶液后,由于一部分光被体系吸收,因此透射光的强度降至I,则溶液的透光率T为:根据朗伯(Lambert)-比尔(Beer)定律:A=abc式中A为吸光度，b为溶液层厚度（cm），c为溶液的浓度（g/dm^3)，a为吸光系数。其中吸光系数与溶液的本性、温度以及波长等因素有关。溶液中其他组分（如溶剂等）对光的吸收可用空白液扣除。由上式可知，当固定溶液层厚度l和吸光系数a时，吸光度A与溶液的浓度成线性关系。在定量分析时，首先需要测定溶液对不同波长光的吸收情况（吸收光谱），从中确定最大吸收波长，然后以此波长的光为光源，测定一系列已知浓度c溶液的吸光度A，作出A~c工作曲线。在分析未知溶液时，根据测量的吸光度A，查工作曲线即可确定出相应的浓度。这便是分光光度法测量浓度的基本原理。(参考百度百科)

分光光度计的基本构成是用一个分光器件（棱镜、镜子）把一个光源的光分成两路（确保两个光的波长一致）分别照射在相同的透光容器中的样品（被测）和基准（标准，已知浓度、成分）溶液，然后对比穿过后的光线（对比样品和基准的颜色），即可对样品和基准的一致性做出定性判断（如：是否达标）。通过样品与多个基准的对比可以对样品做出定量分析。 选择可见和紫外可见的分光光度计所关注的关键的指标有三点：一是波长范围，二是波长准确度，三是杂散光参数。波长范围的选择是由用户实验需要所定，波长范围越宽的价格越贵;波长准确度及杂散光参数的数值越低，表示性能越好。 应用领域：冶金、地质环保、食品、医疗、化工、农林等行业的材料分析及质量控制部门进行常量、微量金属（半金属）元素分析的有力工具，是生产、教育、科研单位分析实验室的比备常规仪器之一。

荧光分光光度计工作原理：由光源氙弧灯发出的光通过切光器使其变成断续之光以及激发光单色器变成单色光后，此光即为荧光物质的激发光，被测的荧光物质在激发光照射下所发出的荧光，经过单色器变成单色荧光后照射于测样品用的光电倍增管上，由其所发生的光电流经过放大器放大输至记录仪，激发光单色器和荧光单色器的光栅均由电动机带动的凸轮所控制，当测绘荧光发射光谱时，将激发光单色器的光栅，固定在最适当的激发光波长处，而让荧光单色器凸轮转动，将各波长的荧光强度讯号输出至记录仪上，所记录的光谱即发射光谱（emissionspectrum），简称荧光光谱。当测绘荧光激发光谱时，将荧光单色器的光栅固定在最适当的荧光波长处，只让激发光单色口的凸轮转动，将各波长的激发光的强度讯号输出至记录仪，所记录的光谱即激发光谱（emissionspectrum）。当进行样品溶液的定量分析时，将激发光单色器固定在所选择的激发光波长处，将荧光单色器调节至所选择的荧光波长处，由记录仪得出的信号是样品溶液的荧光强度。

所以发射光经过分光以后形成的单色光如果被吸收1，则溶液中含有特定的原子或者离子。因为不同原子或者离子的不同的电子跃迁要吸收特定波长的光。一般只用来定性分析.紫外分光光度计的原理利用分子轨道上电子的能级跃迁。，定量分析效果不好.利用的是分子轨道上电子的振动和转动能级的跃迁。因而将入射光分光以后检测吸光的波长和吸光强度就可以用来定性和定量分析含有什么分子。2。吸收的强度可以用来标定溶液的浓度。。分子轨道上的电子能级跃迁也要吸收一定波长的光。原理就是说分子轨道上电子的振动和转动能级的跃迁要吸收特定波长的光。3，从而发生能级跃迁的原理.原子吸收是利用原子或者离子外层电子对特定波长的光可以吸收

原子吸收分光光度计基本原理：仪器从光源辐射出具有待测元素特征谱线的光，通过试样蒸气时被蒸气中待测元素基态原子所吸收，由辐射特征谱线光被减弱的程度来测定试样中待测元素的含量。二、原子吸收分光光度计用途： 　　原子吸收分光光度计可测定多种元素，火焰原子吸收光谱法可测到10-9g/mL数量级，石墨炉原子吸收法可测到10-13g/mL数量级。其氢化物发生器可对8种挥发性元素汞、砷、铅、硒、锡、碲、锑、锗等进行微痕量测定。 　　原子吸收分光光度计的灵敏、准确、简便等特点，现已广泛用于冶金、地质、采矿、石油、轻工、农业、医药、卫生、食品及环境监测等方面的常量及微痕量元素分析。

由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中，激发样品中的荧光物质发出荧光，荧光经过滤过和反射后，被光电倍增管所接受，然后以图或数字的形式显示出来。物质荧光的产生是由在通常状况下处于基态的物质分子吸收激发光后变为激发态, 这些处于激发态的分子是不稳定的,在返回基态的过程中将一部分的能量又以光的形式放出，从而产生荧光．不同物质由于分子结构的不同,其激发态能级的分布具有各自不同的特征，这种特征反映在荧光上表现为各种物质都有其特征荧光激发和发射光谱；，因此可以用荧光激发和发射光谱的不同来定性地进行物质的鉴定。在溶液中，当荧光物质的浓度较低时,其荧光强度与该物质的浓度通常有良好的正比关系,即IF=KC,利用这种关系可以进行荧光物质的定量分析,与紫外-可见分光光度法类似，荧光分析通常也采用标准曲线法进行。

分光光度计原理大致是采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光线透过测试的样品后，部分光线被吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。根据朗伯比尔定律单色光辐射穿过被测物质溶液时，被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度（光路长度）成正比，其关系如下式：A=-lg(I/I。)=-lgT=kLc

分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光源透过测试的样品后，部分光源被吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。

分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。该仪器是食品厂、饮用水厂办理QS、HACCP认证的必备检验设备。 QS认证专用指定分光光度计 而分光光度法则是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析。 常用的波长范围为：(1)200～400nm的紫外光区,(2)400～760nm的可见光区,(3)2.5～25μm（按波数计为4000cm<-1>～400cm<-1>）的红外光区。所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计（或比色计）、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度，所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定，定期进行校正检定。 单色光辐射穿过被测物质溶液时，被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度（光路长度）成正比，其关系如下式： A=-log(I/I。)=-lgT=kLc 式中:A 为吸收度； I。为入射的单色光强度； I 为透射的单色光强度； T 为物质的透射比； k 为吸收系数； L 为被分析物质的光程 c 为物质的浓度 物质对光的选择性吸收波长，以及相应的吸收系数是该物质的物理常数。当已知某纯物质在一定条件下的吸收系数后,可用同样条件将该供试品配成溶液，测定其吸收度,即可由上式计算出供试品中该物质的含量。在可见光区，除某些物质对光有吸收外，很多物质本身并没有吸收,但可在一定条件下加入显色试剂或经过处理使其显色后再测定,故又称比色分析。由于显色时影响呈色深浅的因素较多，且常使用单色光纯度较差的仪器，故测定时应用标准品或对照品同时操作。 分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸，蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。仪器主要由光源、单色器、样品室、检测器、信号处理器和显示与存储系统组成。 分光光度计的简单原理 分光光度计计采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光源透过测试的样品后，部分光源被吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。

紫外-可见分光光度法在190～800nm波长范围内测定物质的吸光度，用于鉴别、杂质检查和定量测定。当光穿过被测物质溶液时，物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此，通过测定物质在不同波长处的吸光度，并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。从吸收光谱中，可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmin。物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。因此，可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较，或通过确定最大吸收波长，或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。用于定量时，在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度，并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。扩展资料：紫外可见分光光度计应用范围包括：1、定量分析，广泛用于各种物料中微量、超微量和常量的无机和有机物质的测定。2、定性和结构分析，紫外吸收光谱还可用于推断空间阻碍效应、氢键的强度、互变异构、几何异构现象等。3、反应动力学研究，即研究反应物浓度随时间而变化的函数关系，测定反应速度和反应级数，探讨反应机理。4、研究溶液平衡，如测定络合物的组成，稳定常数、酸碱离解常数等。

分光光度计要测量的样品必须是均一的溶液,不能有沉淀,如果有沉淀的话就要摇匀.之于为什么这样做和可以做哪些测量、如何测量,下面详述: 分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器. 而分光光度法则是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析.常用的波长范围为：(1)200～400nm的紫外光区,(2)400～760nm的可见光区,(3)2.25μm（按波数计为4000cm～400cm）的红外光区.所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计（或比色计）、红外分光光度计或原子吸收分光光度计.为保证测量的精密度和准确度,所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定,定期进行校正检定.单色光辐射穿过被测物质溶液时,被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度（光路长度）成正比,其关系如下式：1 A=log — =ECL T 式中 A 为吸收度； T 为透光率； E 为吸收系数,采用的表示方法是(E1％ 1cm),即吸收度换算成溶液浓度为1％(g/ml),液层厚度为1cm的数值； C 为100ml溶液中所含被测物质的重量,g(按干燥品或无水物计算）； L 为液层厚度 ,cm.物质对光的选择性吸收波长,以及相应的吸收系数是该物质的物理常数.当已知某纯物质在一定条件下的吸收系数后,可用同样条件将该供试品配成溶液,测定其吸收度,即可由上式计算出供试品中该物质的含量.在可见光区,除某些物质对光有吸收外,很多物质本身并没有吸收,但可在一定条件下加入显色试剂或经过处理使其显色后再测定,故又称比色分析.由于显色时影响呈色深浅的因素较多,且常使用单色光纯度较差的仪器,故测定时应用标准品或对照品同时操作. 分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器.常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量. 分光光度计的简单原理 分光光度计计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光源透过测试的样品后,部分光源被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度.样品的吸光值与样品的浓度成正比.

基本工作原理：和红外光谱仪相似，利用一定频率的紫外--可见光照射被分析的有机物质，引起分子中价电子的跃迁，它将有选择地被吸收。一组吸收随波长而变化的光谱，反映了试样的特征。在紫外可见光的范围内，对于一个特定的波长，吸收的程度正比于试样中该成分的浓度，因此测量光谱可以进行定性分析，而且根据吸收与已知浓度的标样的比较，还能进行定量分析。特点和主要用途：紫外-可见光谱仪涉及的波长范围是0.2--0.8微米（对应波数50000-12500厘米-1），它在有机化学研究中得到广泛的应用。通常用作物质鉴定、纯度检查，有机分子结构的研究。在定量方面，可测定结构比较复杂的化合物和混合物中各组分的含量，也可以测定物质的离解常数，络合物的稳定常数，物质分子量鉴别和微量滴定中指示终点以及在高效液相色谱中作检测器等。

我觉得主要的两点区别是： 1)荧光分光光度计有两个单色器，而紫外只有一个单色器2）荧光分光光度计的光源和检测器是成直角分布的，而紫外是成一条直线的。除了以上两点之外还有两点区别：3)荧光分光光度计是以氘灯做为光源，而紫外是以氢灯或氘灯作为紫外区光源，钨灯或卤钨灯作为可见光区的光源4）荧光分光光度计的比色皿是四壁均为光学面，而紫外仅为两面为光学面。（其实上面四点可以自己整合为两点的）

光是一种电磁波,具有一定的波长和频率。可见光的波长范围在400~760nm，紫外光为200~400nm，红外光为760~500000nm。可见光因波长不同呈现不同颜色，这些波长在一定范围内呈现不同颜色的光称单色光。太阳或钨丝等发出的白光是复合光，是各种单色光的混合光。利用棱镜可将白光分成按波长顺序排列的各种单色光，即红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等，这就是光谱。有色物质溶液可选择性地吸收一部分可见光的能量而呈现不同颜色，而某些无色物质能特征性地选择紫外光或红外光的能量。物质吸收由光源发出的某些波长的光可形成吸收光谱，由于物质的分子结构不同，对光的吸收能力不同，因此每种物质都有特定的吸收光谱，而且在一定条件下其吸收程度与该物质的浓度成正比，分光光度法就是利用物质的这种吸收特征对不同物质进行定性或定量分析的方法。

比色皿、检测器、记录仪这些基本一样，主要是光源不同。紫外-可见分光光度计在紫外区使用氢灯或氘灯,在可见光区使用氘灯或溴钨灯。它们发出的都是连续光谱，通过三棱镜（中档）、光栅（高档）、滤光片（低级）等分光，这样两种灯组合基本涵盖了紫外-可见光的波长范围。荧光分光光度计由氙弧灯发出的光通过切光器使其变成断续之光以及激发光单色器变成单色光后，此光即为荧光物质的激发光，被测的荧光物质在激发光照射下所发出的荧光，经过单色器变成单色荧光后照射于测样品用的光电倍增管上。紫外-可见分光光度计可用于大部分有色物质的定量监测，通常需要使用各种各样的显色剂；荧光分光光度计可用于测试发光材料的发射光谱＼激发光谱＼时间扫描，不需要显色剂，灵敏度比紫外-可见分光光度计高2－3个数量级。

①72型分光光度计a.构造原理及结构72型分光光度计是可见光分光光度计，波长范围为420nm～700nm，它由三大部分组成:磁饱和稳压器、光源、单色光器和测光机构、微电计。其光学系统如图5-11所示。72型分光光度计的基本依据是朗伯—比耳定律，它是根据相对测量原理工作的，即先选定某一溶剂作为标准溶液，设定其透光率为100%，被测试样的透光率是相对于标准溶液而言的，即让单色光分别通过被测试样和标准溶液，二者能量的比值就是在一定波长下对于被测试样的透光率。如图所示，白色光源经入射狭缝、反射镜和透光镜后，变成平行光进入棱镜，色散后的单色光经镀铝的反射镜反射后，再经过透镜并聚光于出射狭缝上，狭缝宽度为0.32nm。反射镜和棱镜组装在一可旋转的转盘上并由波长调节器的凸轮所带动，转动波长调节器便可以在出光狭缝后面选择到任一波长的单色光。单色光透过样品吸收池后由一光量调节器调节为适度的光通量，最后被光电电池吸收，转换成电流后由微电计指示，从刻度标尺上直接读出透光率的值。

http://www.18show.cn/knowledge/d422514.html

原子吸收光谱法是依椐处于气态的被测元素基态原子对该元素的原子共振辐射有强烈的吸收作用而建立的。该法具有检出限低（火熖法可达ng?cm–3级）准确度高（火熖法相对误差小于1%），选择性好（即干扰少）分析速度快等优点。 在温度吸收光程，进样方式等实验条件固定时，样品产生的待测元素相基态原子对作为锐线光源的该元素的空心阴极灯所辐射的单色光产生吸收，其吸光度（A）与样品中该元素的浓度（C）成正比。即 A=KC 式中，K为常数。据此，通过测量标准溶液及未知溶液的吸光度，又巳知标准溶液浓度，可作标准曲线，求得未知液中待测元素浓度。

紫外可见分光光度法原理如下：紫外可见分光光度计基本工作原理和红外光谱仪相似,利用一定频率的紫外可见光照射被分析的有机物质,引起分子中价电子的跃迁,它将有选择地被吸收。一组吸收随波长而变化的光谱,反映了试样的特征。关于紫外-可见分光光度法的介绍如下：紫外-可见分光光度法是在190～800nm波长范围内测定物质的吸光度，用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。当光穿过被测物质溶液时，物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此，通过测定物质在不同波长处的吸光度，并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。从吸收光谱中，可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmin。物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。因此，可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较，或通过确定最大吸收波长，或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。用于定量时，在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度，并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。

可见-紫外分光光度计的工作原理基于朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律，即物质在一定浓度 的吸光度与它的吸收介质的厚度呈正比，其应用波长范围为200～400nm的紫外光区、400～850nm的可见光区。 主要由辐射源（光源）、色散系统、检测系统、吸收池、数据处理机、自动记录器及显示器等部件组成。 将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中，在同一条件下分别测定紫外可见吸收光谱。若两者是同一物质，则两者的光谱图应完全一致。如果没有标样，也可以和现成的标 准谱图对照进行比较。这种方法要求仪器准确，精密度高，且测定条件要相同。 实验证明，不同的极性溶剂产生氢键的强度也不同，这可以利用紫外光谱来判断化合物在不 同溶剂中氢键强度，以确定选择哪一种溶剂 。

分光光度计的原理就是利用光栅的分光来确定波长，低端仪器是靠电机驱动的转动光栅改变波长，中高端仪器都是用丝杆来调整波长，丝杆的精度是比较高的可以精确到0.1nm

紫外分光光度计对于大多数人来说还是相当陌生的，我们在先了解其工作原理的基础上再来知晓其主要用途。 紫外分光光度计基本工作原理： 紫外分光光度计基本工作原理和红外光谱仪相似，利用一定频率的紫外－－可见光照射被分析的有机物质，引起分子中价电子的跃迁，它将有选择地被吸收。一组吸收随波长而变化的光谱，反映了试样的特征。在紫外可见光的范围内，对于一个特定的波长，吸收的程度正比于试样中该成分的浓度，因此测量光谱可以进行定性分析，而且根据吸收与已知浓度的标样的比较，还能进行定量分析www.botianshengda.net/btsd-Article-40936 紫外分光光度计特点和主要用途： 紫外-可见光谱仪涉及的波长范围是0.2－－0.8微米（对应波数50000-12500厘米-1），它在有机化学研究中得到广泛的应用。通常用作物质鉴定、纯度检查，有机分子结构的研究。在定量方面，可测定结构比较复杂的化合物和混合物中各组分的含量，也可以测定物质的离解常数，络合物的稳定常数，物质分子量鉴别和微量滴定中指示终点以及在高效液相色谱中作检测器等。

基于朗伯比耳定律。18世纪初，琅伯在前人的基础上，进一步研究了物质对光的吸收与物质厚度的关系，并于1760年指出：如果溶液的浓度一定，则光对物质的吸收程度与通过的溶液厚度成正比，这就是朗伯定律。朗伯比耳定律认为：当一束光平行的单色光通过某一均匀的有色溶液时，溶液的吸光度与溶液的浓度和光程的乘积成正比。

旋光仪是测定物质旋光度的仪器。通过对样品旋光度的测量，可以分析确定物质的浓度、含量及纯度等。广泛应用于制药、药检、制糖、食品、香料、味精以及化工、石油等工业生产，科研、教学部门，用于化验分析或过程质量控制。分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸、蛋白。 联系：旋光仪和分光光度计都是用于有机化合物的分析。 旋光仪与分光光度计的原理差别： 旋光仪测对映体的旋光度，必须是手性化合物；分光光度计测吸光度，大部分有机化合物皆可。

阿司匹林肠溶片是一种解热镇痛、抗炎、抗风湿药物，应用临床已有多年的历史，疗效确切。但在检查其游离水杨酸一项时，《中国药典》一直沿用对照品化学反应目视比色法判断标准，特别当对照品与供试品溶液颜色相近时易造成判定误差。该法也只能半定量，且整个操作过程繁琐。本文对建立紫外分光光度法测定阿司匹林肠溶片中游离水杨酸含量进行分析。

使用前仪器要调零、调百校准，参比溶液又称空白溶液。测量时用作比较的、不含被测物质但其基体尽可能与试样溶液相似的溶液。通常，用参比溶液扫描的曲线应是一条平坦的直线。有时，基体中虽不含被测物质，但含有别的物质，这时必须保证其不影响测试。经常碰到的是试剂空白中含有被测物质，此时必须经过纯化将其除去。否则将影响测定结果。在色谱分析中，有时基体中可能存在一个以上的和被测组分相距较远的色谱峰，计算机在数据处理中不会计入它们，不影响测定。以所含铁离子是多少为例：参比溶液与测量溶液就相差铁离子含量，在测量之前要用不含铁离子的参比溶液扫描，调整仪器后（调100的过程），然后再测量含铁离子溶液的比色皿，这样测量溶液中的铁离子会形成自己特定的峰值，次峰值与数据库里基准峰值对比就可以得出溶液所含量了。如果数据库中没有铁离子的曲线，你还要自己先用不同铁离子浓度的溶液做工作曲线，然后进行测量。

分光光度计原理是采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光线透过测试的样品后，部分光线被吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。物质对光的选择性吸收波长，以及相应的吸收系数是该物质的物理常数。当已知某纯物质在一定条件下的吸收系数后可用同样条件将该供试品配成溶液，测定其吸收度,即可由上式计算出供试品中该物质的含量。在可见光区，除某些物质对光有吸收外，很多物质本身并没有吸收但可在一定条件下加入显色试剂或经过处理使其显色后再测定,故又称比色分析。由于显色时影响呈色深浅的因素较多，且常使用单色光纯度较差的仪器，故测定时应用标准品或对照品同时操作。扩展资料注意事项：1、该仪器应放在干燥的房间内，使用时放置在坚固平稳的工作台上，室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风，防止灯泡灯丝发亮不稳定。2、使用本仪器前，使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理，以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前，应该对仪器的安全性能进行检查，电源接线应牢固，通电也要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再按通电源开关。3、在仪器尚未接通电源时，电表指针必须于“0”刻线上，若不是这种情况，则可以用电表上的校正螺丝进行调节。

紫外可见分光光度计原理是：物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。紫外分光光度计的组成各种型号的紫外－可见分光光度计，就其基本结构来说，都是由五个基本部分组成，即光源、单色器、吸收池、检测器及信号指示系统。1、光源在紫外可见分光光度计中，常用的光源有两类：热辐射光源和气体放电光源。热辐射光源用于可见光区，如钨灯和卤钨灯；气体放电光源用于紫外光区，如氢灯和氘灯。2、单色器单色器的主要组成：入射狭缝、出射狭缝、色散元件和准直镜等部分。单色器质量的优劣，主要决定于色散元件的质量。色散元件常用棱镜和光栅。3、吸收池吸收池又称比色皿或比色杯，按材料可分为玻璃吸收池和石英吸收池，前者不能用于紫外区。吸收池的种类很多，其光径可在0.1~10cm之间，其中以1cm光径吸收池最为常用。4、检测器检测器的作用是检测光信号，并将光信号转变为电信号。现今使用的分光光度计大多采用光电管或光电倍增管作为检测器。5、信号显示系统常用的信号显示装置有直读检流计，电位调节指零装置，以及自动记录和数字显示装置等。

物质与光作用，具有选择吸收的特性。有色物质的颜色是该物质与光作用产生的。即有色溶液所呈现的颜色是由于溶液中的物质对光的选择性吸收所致。由于不同的物质其分子结构不同，对不同波长光的吸收能力也不同，因此具有特征结构的结构集团，存在选择吸收特性的最大实收波长，形成最大吸收峰，而产生特有的吸收光谱。即使是相同的物质由于其含量不同，对光的吸收程度也不同。利用物质所特有的吸收光谱来鉴别物质的存在（定性分析），或利用物质对一定波长光的吸收程度来测定物质含量（定量分析）的方法，称为分光光度法。检测仪器仪器分类依据光谱区，分光光度计可分为：紫外分光光度计，可见分光光度计（或比色计）、红外分光光度计。如果吸光质点是原子，其仪器称为原子吸收分光光度计。仪器组成各种分光光度计的基本组成是：光源系统、分光系统、吸收系统和检测系统。

　 　 光度的基本定律（朗伯比尔定律）：液层厚度相等时，颜色的强度与呈色溶液的浓度成比例。举个简单的例子就是液体中加的颜料越多，液体颜色越深。　 　 　 实际上不光是颜料有颜色，也不是所有颜色都是肉眼可见的，但溶液表现出不同颜色是因为溶液（不同溶液、不同浓度）对光线吸收程度的不同，同时不同波长的光线照射下溶液吸收光线的程度也有所不同。使用特定光谱（可见光、红外光、紫外光）的单一波长的光线照射样品，穿过样品后的光色（波长）变化实际就是前面定理中的颜色变化。　 　 　 分光光度计的基本构成是用一个分光器件（棱镜、镜子）把一个光源的光分成两路（确保两个光的波长一致）分别照射在相同的透光容器中的样品（被测）和基准（标准，已知浓度、成分）溶液，然后对比穿过后的光线（对比样品和基准的颜色），即可对样品和基准的一致性做出定性判断（如：是否达标）。通过样品与多个基准的对比可以对样品做出定量分析。　 　 　这种仪器简单的可以是使用特制的白炽灯做光源，肉眼比色；复杂的可以使用激光光源，电脑光谱分析。结构差别可以很大，但原理不变。

光的本质是一种电磁波，具有不同的波长。可见光的波长范围在400～700nm。紫外光的波长范围在200～400nm范围。有色物质可以选择性地吸收一部分可见光区光地能量而呈现不同颜色，某些物质却能选择性地吸收紫外光的能路。物质吸收由光源发出地某些波长可形成特定的吸收光谱。由于物质的吸收光谱与物质的分子结构有关，而且在一定条件下其吸收程度与该物质的浓度成正比，所以可以利用物质的特定吸收光谱对其进行定性和定量分析。分光光度法是利用各种物质所具有的这种吸收特性所建立的分析方法。

分光光度法测量的理论依据是伯郎—比耳定律：当容液中的物质在光的照射和激发下，产生了对光吸收的效应。但物质对光的吸收是有选择性的，各种不同的物质都有其各自的吸收光谱。所以根据定律当一束单色光通过一定浓度范围的稀有色溶液时，溶液对光的吸收程度A与溶液的浓度c（g/l）或液层厚度b(cm)成正比。

　　【导读】自从1918年紫外可见分光光度计由美国研发出来之后，经过长期的不断发展和进步，像自动记录、打印等相关辅助性仪器已经诞生了。紫外可见分光光度计法诞生后，给我们的生活与工作带来了不小的冲击，它的功能能够更好的为我们服务。那么它的原理还有一些具体的应用是怎样的呢?下面就让小编来为大家介绍一下。　　紫外可见分光光度计的原理其实相对比较简单，我们都知道就是物质在吸收光谱之后，其本身的含义就是物质里面的分子以及原子有了一定波长光能量。在这些能量的基础上出现分子振动的能级跃迁以及电子能级跃迁这样的效果。每一个物质的分子是不一样的，它们的组成也是相差很大。这样一来物质所吸收的光能量也就有很大的差距，于是就会有了不一样的波长，从而分析出物质的特点以及相互的关系。　　　　相对于紫外可见分光光度计的应用来说，主要有以下几个方面。　　首先这类设备在物质检定方面的贡献是不小的，我们依据光谱图所展示的相关特点进行分门别类的吸收，尤其是最大的吸收波长。这种设备具有的功能在药物的常规分析方面的应用是很重要的。通过了解我们知道国内外药典里面，早就已经把相当一批药物的紫外吸收光谱参数都记录在里面了。这样的记录为药品的分析提供了很好的帮助。　　　　其次它还可以跟标准物与标准图谱进行对比。当我们把样品与标准样品进行一定浓度的配置，并组成溶液。然后在同一环境和条件下利用紫外可见分光光度计对它们进行紫外可见吸收光谱的对比，一旦光谱图完全一致，证明它们是同一物质，如果不一致的话，那么它们就不属于同一个物质。由于它们的环境比较复杂，所以需要的仪器精度要高。　　　　　　再次我们还可以用它们进行氢键强度测定试验，经过我们的分析了解到对于极性溶剂来讲，由于类型不同，因此产生氢键强度也会出现很大的偏差。我们可以利用紫外可见分光光度计来进行测定化合物溶剂氢键强度的情况，从而确定溶剂的选择。　　最后对于紫外可见分光光度计在有机分析方面的应用也是相对比较大的。相对于有机分析来说，它是针对有机化合物进行分离与鉴别等研究的，可以有效的测定结构以及相关信息。它是有机化学以及分析化学方面进行结合发展的产物。　　　　除了上面的一些具体的应用之外我们还了解到它在纯度检验、反应动力学研究方面的贡献也是不小的。　　就目前而言，紫外可见分光光度计的应用越来越广泛，它的作用越来越受到我们的重视。因此对于该类型的设备的研发也在不断的提升。因此我们有必要通过这篇文章认识和掌握一定的有关于这样的设备的知识。

分光光度计的基本工作原理是基于物质对光（对光的波长）的吸收具有选择性，不同的物质都有各自的吸收光带，所以，当光色散后的光谱通过某一溶液时，其中某些波长的光线就会被溶液吸收。在一定的波长下，溶液中物质的浓度与光能量减弱的程度有一定的比例关系，即符合比尔定律。　　T=I/Iolg（Io/I）=εcb　　式中，T为透过率，Io为入射光强度，I为透射光强度，A为消光值（吸光度），ε为吸收系数，b为溶液的光径长度，c为溶液的浓度。从以上公式可以看出，当入射光、吸收系数和溶液厚度一定时，透光率是根据溶液的浓度而变化的。　　分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸，蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。

1.原子吸收是利用原子或者离子外层电子对特定波长的光可以吸收，从而发生能级跃迁的原理。因为不同原子或者离子的不同的电子跃迁要吸收特定波长的光，所以发射光经过分光以后形成的单色光如果被吸收，则溶液中含有特定的原子或者离子。吸收的强度可以用来标定溶液的浓度。2.紫外分光光度计的原理利用分子轨道上电子的能级跃迁。分子轨道上的电子能级跃迁也要吸收一定波长的光。因而将入射光分光以后检测吸光的波长和吸光强度就可以用来定性和定量分析含有什么分子。3.利用的是分子轨道上电子的振动和转动能级的跃迁。一般只用来定性分析，定量分析效果不好。原理就是说分子轨道上电子的振动和转动能级的跃迁要吸收特定波长的光。。。

紫外分光光度计原理是利用一定频率的紫外可见光照射被分析的有机物质。引起分子中价电子的跃迁，它将有选择地被吸收。物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。紫外分光光度计特点由于各种物质具有各自不同的分子原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此每种物质就有其特有的固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分，结构和物质间相互作用的有效手段，又因为许多物质在紫外可见光区有特征吸收峰，所以可用紫外分光光度法对这些物质分别进行测定定量分析和定性分析，紫外分光光度法使用基于朗伯比耳定律。

　　为了能够满足紫外区和可见区需要使用氘灯和钨灯两种光源。钨灯波长1100-360nm左右，氘灯190-400左右。分光部分一般使用平场光栅，然后单色器最经典的是平行C-t系统。之后就是外光路了，根据不同的仪器使用不同的外光路。　　分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射下，产生了对光吸收的效应，物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，因此当某单色光通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合比色原理——比耳定律

分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下，产生了对光吸收的效应，物质对光的吸收是具有选择性的，各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，因此当某单色光通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合于比色原理---比耳定律。

　　【导读】自从1918年紫外可见分光光度计由美国研发出来之后，经过长期的不断发展和进步，像自动记录、打印等相关辅助性仪器已经诞生了。紫外可见分光光度计法诞生后，给我们的生活与工作带来了不小的冲击，它的功能能够更好的为我们服务。那么它的原理还有一些具体的应用是怎样的呢?下面就让小编来为大家介绍一下。　　紫外可见分光光度计的原理其实相对比较简单，我们都知道就是物质在吸收光谱之后，其本身的含义就是物质里面的分子以及原子有了一定波长光能量。在这些能量的基础上出现分子振动的能级跃迁以及电子能级跃迁这样的效果。每一个物质的分子是不一样的，它们的组成也是相差很大。这样一来物质所吸收的光能量也就有很大的差距，于是就会有了不一样的波长，从而分析出物质的特点以及相互的关系。　　　　相对于紫外可见分光光度计的应用来说，主要有以下几个方面。　　首先这类设备在物质检定方面的贡献是不小的，我们依据光谱图所展示的相关特点进行分门别类的吸收，尤其是最大的吸收波长。这种设备具有的功能在药物的常规分析方面的应用是很重要的。通过了解我们知道国内外药典里面，早就已经把相当一批药物的紫外吸收光谱参数都记录在里面了。这样的记录为药品的分析提供了很好的帮助。　　　　其次它还可以跟标准物与标准图谱进行对比。当我们把样品与标准样品进行一定浓度的配置，并组成溶液。然后在同一环境和条件下利用紫外可见分光光度计对它们进行紫外可见吸收光谱的对比，一旦光谱图完全一致，证明它们是同一物质，如果不一致的话，那么它们就不属于同一个物质。由于它们的环境比较复杂，所以需要的仪器精度要高。　　　　　　再次我们还可以用它们进行氢键强度测定试验，经过我们的分析了解到对于极性溶剂来讲，由于类型不同，因此产生氢键强度也会出现很大的偏差。我们可以利用紫外可见分光光度计来进行测定化合物溶剂氢键强度的情况，从而确定溶剂的选择。　　最后对于紫外可见分光光度计在有机分析方面的应用也是相对比较大的。相对于有机分析来说，它是针对有机化合物进行分离与鉴别等研究的，可以有效的测定结构以及相关信息。它是有机化学以及分析化学方面进行结合发展的产物。　　　　除了上面的一些具体的应用之外我们还了解到它在纯度检验、反应动力学研究方面的贡献也是不小的。　　就目前而言，紫外可见分光光度计的应用越来越广泛，它的作用越来越受到我们的重视。因此对于该类型的设备的研发也在不断的提升。因此我们有必要通过这篇文章认识和掌握一定的有关于这样的设备的知识。土巴兔在线免费为大家提供“各家装修报价、1-4家本地装修公司、3套装修设计方案”，还有装修避坑攻略！点击此链接：【https://www.to8to.com/yezhu/zxbj-cszy.php?to8to_from=seo_zhidao_m_jiare&wb】，就能免费领取哦~

紫外-可见分光光度法在190～800nm波长范围内测定物质的吸光度，用于鉴别、杂质检查和定量测定。当光穿过被测物质溶液时，物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此，通过测定物质在不同波长处的吸光度，并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。从吸收光谱中，可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmin。物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。因此，可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较，或通过确定最大吸收波长，或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。用于定量时，在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度，并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。扩展资料：紫外可见分光光度计应用范围包括：1、定量分析，广泛用于各种物料中微量、超微量和常量的无机和有机物质的测定。2、定性和结构分析，紫外吸收光谱还可用于推断空间阻碍效应、氢键的强度、互变异构、几何异构现象等。3、反应动力学研究，即研究反应物浓度随时间而变化的函数关系，测定反应速度和反应级数，探讨反应机理。4、研究溶液平衡，如测定络合物的组成，稳定常数、酸碱离解常数等。