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cDNA文库必须满足什么条件?其构建包括哪些步骤?

2023-05-19 19:49:05
TAG: 条件 cd cdn cdna
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条件:1

、要使用mRNA经过反转录PCR产生cDNA。

2

、要进一步获得cDNA全长

3

、加适当接头,连接到适当的载体内。

4

、转化受体细胞,构建为cDNA文库。

基本步骤包括:RNA

的提取(例如异硫氰酸胍法,盐酸胍—有机溶剂法,热酚法等等,提取方法的选择主要根据不同的样品而定),要构建一个高质量的cDNA

文库,获得高质量的mRNA

是至关重要的,所以处理mRNA

样品时必须仔细小心。由于RNA

酶存在所有的生物中,并且能抵抗诸如煮沸这样的物理环境,因此建立一个无RNA

酶的环境对于制备优质RNA很重要。在获得高质量的mRNA

后用反转录酶Oligo(dT)

引导下合成cDNA

第1链,cDNA

第2链的合成(用RNA酶H和大肠杆菌DNA

聚合酶I,同时包括使用T4噬菌体多核苷酸酶和大肠杆菌DNA连接酶进行的修复反应),合成接头的加入、将双链DNA克隆到载体中去、分析cDNA插入片断。扩增cDNA

文库、对建立的cDNA文库进行鉴定。这里强调的是对载体的选择,常规用的是λ

噬菌体,这是因为λ

DNA

两端具有由12个核苷酸的粘性末端,可用来构建柯斯质粒,这种质粒能容纳大片段的外源DNA。

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cDNA:与某RNA链呈互补碱基序列的DNA
2023-01-09 03:29:112

cDNA 和DNA有何区别?

cDNA:与某RNA链呈互补碱基序列的DNA
2023-01-09 03:29:342

什么是cDNA,BDNA,CDNA

B-DNAB-DNA又称B型DNA,为DNA双螺旋的一种形式.cDNA又称互补脱氧核糖核酸,为具有与某mRNA(信使RNA)链呈互补的碱基序列的单链DNA即complementary DNA之缩写,或此DNA链与具有与之互补的碱基序列的DNA链所形成的DNA双链....
2023-01-09 03:29:421

cDNA是什么?

互补DNA
2023-01-09 03:29:598

生物化学 cDNA 中文解释

cDNA就是complementary DNA,即互补DNA,是一种利用逆转录酶,以RNA(通常是mRNA)为模板作成的复制品,经常用来将真核生物的基因(以mRNA形式)复制到原核生物细胞中.
2023-01-09 03:30:491

现代分子生物学中cDNA中文名是什么?

叫做部分基因文库有mRNA逆转录形成的DNA即称为cDNA无启动子
2023-01-09 03:30:541

cDNA和gDNA区别

<p>gDNA(genomic DNA,基因组DNA):是指有机体在单倍体状态下的DNA全部含量。广义的基因组也指某一体系(如核或细胞器)中的DNA,它包括编码或细胞中固有的核糖体DNA(rDNA)、线粒体DNA(mtDNA)、tRNA基因及其它RNA编码。</p><p>cDNA:与RNA链互补的单链DNA,以其RNA为模板,在适当引物的存在下,由RNA与DNA进行一定条件下合成的,就是cDNA。</p><p>两者从定义就可以看出区别,从某种意义上来说,前者包括后者.</p><p></p>
2023-01-09 03:31:042

什么是cDNA文库??

cDNA文库只是基因组文库的一种 。 是mRNA的全部信息。
2023-01-09 03:31:152

什么是cDNA文库?它和基因文库的差别有哪些

cDNA文库是部分基因文库 已去掉内含子部分 基因组文库是此种生物全部基因都包括在内 比cDNA全...
2023-01-09 03:31:242

如何检测cDNA我做RT

如何检测cDNA我做RTcDNA一般是不检测的,并且也不好检测,因为你的cDNA都是mRNA,电泳出来会是一条弥散的带.并且上样量需要较大才能看间.需要检测的是提取的RNA,看是否28s和18s rRNA是否清晰、明显(二者位置分别在5kb和2kb处).最大rRNA亮度应为次大rRNA亮度的1.5-2.0倍,否则表示RNA样品的降解.出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解.
2023-01-09 03:31:341

cDNA感染性克隆的概念和原理

cDNA克隆是以mRNA为原材料,经体外反转录合成互补的DNA(cDNA),再与载体DNA分子连接引入寄主细胞。每一cDNA反映一种mRNA的结构,cDNA克隆的分布也反映了mRNA的分布。特点是: ①有些生物,如RNA病毒没有DNA,只能用cDNA克隆; ②cDNA克隆易筛选,因为cDNA库中不包含非结构基因的克隆,而且每一cDNA克隆只含一个mRNA的信息; ③cDNA能在细菌中表达。cDNA仅代表某一发育阶段表达出来的遗传信息,只有基因文库才包含一个生物的完整遗传信息。 1.方法: (1)DNA片段的制备:常用以下方法获得DNA片段:①用限制性核酸内切酶将高分子量DNA切成一定大小的DNA片段;②用物理方法(如超声波)取得DNA随机片段;③在已知蛋白质的氨基酸顺序情况下,用人工方法合成对应的基因片段;④从mRNA反转录产生cDNA。 (2)载体DNA的选择: ①质粒:质粒是细菌染色体外遗传因子,DNA呈环状,大小为1-200千碱基对(kb)。在细胞中以游离超螺旋状存在,很容易制备。质粒DNA可通过转化引入寄主菌。在细胞中有两种状态,一是“紧密型”;二是“松驰型”。此外还应具有分子量小,易转化,有一至多个选择标记的特点。质粒型载体一般只能携带10kb以下的DNA片段,适用于构建原核生物基因文库,cDNA库和次级克隆。 ②噬菌体DNA:常用的λ噬菌体的DNA是双链,长约49kb,约含50个基因,其中50%的基因对噬菌体的生长和裂解寄主菌是必需的,分布在噬菌体DNA两端。中间是非必需区,进行改造后组建一系列具有不同特点的载体分子。λ载体系统最适用于构建真核生物基因文库和cDNA库。 M13噬菌体是一种独特的载体系统,它只能侵袭具有F基因的大肠杆菌,但不裂解寄主菌。M13DNA(RF)在寄主菌内是双链环状分子,象质粒一样自主制复,制备方法同质粒。寄主菌可分泌含单链DNA的M13噬菌体,又能方便地制备单链DNA,用于DNA顺序分析、定点突变和核酸杂交。 ③拷斯(Cos)质粒:是一类带有噬菌体DNA粘性末端顺序的质粒DNA分子。是噬菌体-质粒混合物。此类载体分子容量大,可携带45kb的外源DNA片段。也能象一般质粒一样携带小片段DNA,直接转化寄主菌。这类载体常被用来构建高等生物基因文库。 (3)DNA片段与载体连接:DNA分子与载体分子连接是克隆过程中的重要环节之一,方法有:①粘性末端连接,DNA片段两端的互补碱基顺序称之为粘性末端,用同一种限制性内切酶消化DNA可产生相同的粘性末端。在连接酶的作用下可恢复原样,有些限制性内切酶虽然识别不同顺序,却能产生相同末端。②平头末端连接,用物理方法制备的DNA往往是平头末端,有些酶也可产生平头末端。平头DNA片段可在某些DNA连接酶作用下连接起来,但连接效率不如粘性末端高;③同聚寡核苷酸末端连接。④人工接头分子连接,在平头DNA片段末端加上一段人工合成的、具有某一限制性内切酶识别位点的寡核苷酸片段,经限制性内切酶作用后就会产生粘性末端。 连接反应需注意载体DNA与DNA片段的比率。以λ或Cos质粒为载体时,形成线性多连体DNA分子,载体与DNA片段的比率高些为佳。以质粒为载体时,形成环状分子,比率常为1∶1。 (4)引入寄主细胞:常用两种方法:①转化或转染,方法是将重组质粒DNA或噬菌体DNA(M13)与氯化钙处理过的宿主细胞混合置于冰上,待DNA被吸收后铺在平板培养基上,再根据实验设计使用选择性培养基筛选重组子,通常重组分子的转化效率比非重组DNA低,原因是连接效率不高,有许多DNA分子无转化能力,而且重组后的DNA分子比原载体DNA分子大,转化困难。②转导,病毒类侵染宿主菌的过程称为转导,一般转导的效率比转化高。
2023-01-09 03:31:391

什么是cDNA,有什么作用

中文名称:互补DNA 英文名称:cDNA,complementary DNA 学科分类:遗传学 注 释:信使RNA(mRNA)分子的双链DNA拷贝.构成基因的双链DNA分子用一条单链作为模板,转录产生与其序列互补的信使RNA分子,然后在反转录酶的作用...
2023-01-09 03:31:451

cDNA文库构建的方法与过程分别是什么?

cDNA 文库是指某生物某发育时期所转录的全部 mRNA 经反转录形成的 cDNA 片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。经典 cDNA 文库构建的基本原理是用 Oligo(dT) 作逆转录引物,或者用随机引物,给所合成的 cDNA 加上适当的连接接头,连接到适当的载体中获得文库。其基本步骤包括:RNA 的提取(例如异硫氰酸胍法,盐酸胍—有机溶剂法,热酚法等等,提取方法的选择主要根据不同的样品而定),要构建一个高质量的 cDNA 文库,获得高质量的 mRNA 是至关重要的,所以处理 mRNA 样品时必须仔细小心。由于 RNA 酶存在所有的生物中,并且能抵抗诸如煮沸这样的物理环境,因此建立一个无 RNA 酶的环境对于制备优质 RNA 很重要。在获得高质量的 mRNA 后,用反转录酶 Oligo(dT) 引导下合成 cDNA 第1链, cDNA 第2链的合成(用 RNA 酶 H 和大肠杆菌 DNA 聚合酶 I,同时包括使用 T4 噬菌体多核苷酸酶和大肠杆菌 DNA 连接酶进行的修复反应),合成接头的加入、将双链 DNA 克隆到载体中去、分析 cDNA 插入片断,扩增 cDNA 文库、对建立的 cDNA 文库进行鉴定。这里强调的是对载体的选择,常规用的是 λ 噬菌体,这是因为 λ DNA 两端具有由12个核苷酸的粘性末端,可用来构建柯斯质粒,这种质粒能容纳大片段的外源 DNA。
2023-01-09 03:31:511

mRNA反转录形成cDNA的过程是怎样的

  有反转录酶,可以以RNA为模版合成DNA。  这过程需要引物,根据mRNA有3‘polyA尾巴的特点,可以用oligo-dT作为引物,合成cDNA,这样可以自然去除非mRNA的RNA的转录。  也可以用随机引物去合成大量不同的cDNA。  如果要反转录特定的mRNA,就根据它设计特异性引物反转录,这样理论上只有目的cDNA产生。
2023-01-09 03:31:571

cDNA是什么了,由它获取的目的基因既无启动子又无终止子吗,为什么,谢谢答复哈

以mRNA为模板,经反转录酶催化,在体外反转录成cDNA。与适当的载体连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cDNA,能繁殖扩增,称为该组织细胞的cDNA文库正确,因为从cDNA文库中获得的是已经剪接、去除了内含子的cDNA
2023-01-09 03:32:033

【求助】cDNA 该如何保存?

最好不要长久用cDNA做模版。 可以用PCR产物稀释100倍左右作为模版。 是RT后的cDNA。 不是PCR后得双链CDNA。 PCR后得产物是稳定的。 不知道你是用的哪个我说是的RT后的cDNA可以分装成小份儿的,经常用的放4度,其他的放-20度保存分装
2023-01-09 03:32:151

什么是ctDNA,dsDNA,ssDNA,cDNA?

dNTPs A260 = 1.60 ssDNA A260 = 1.37 dsDNA A260 = 1.0 有谁能给那三种物质都是什么啊?它们两个如何联系到一起的啊急 呵呵 第一个是
2023-01-09 03:32:242

什么是cDNA,有什么作用

学科分类: 遗传学注释: 信使RNA(mRNA)分子的双链DNA拷贝。构成基因的双链DNA分子用一条单链作为模板,转录产生与其序列互补的信使RNA分子,然后在反转录酶的作用下,以mRNA分子为模板,合成一条与mRNA序列互补的单链DNA,最后再以单链DNA为模板合成另一条与其互补的单链DNA,两条互补的单链DNA分子组成一个双链cDNA分子.因此,双链cDNA分子的序列同转录产生的mRNA分子的基因是相同的.所以一个cDNA分子就代表一个基因.但是cDNA仍不同于基因,因为基因在转录产生mRNA时,一些不编码的序列即内含子被删除了,保留的只是编码序列,即外显子.所以cDNA序列都比基因序列要短得多,因为cDNA中不包括基因的非编码序列---内含子.
2023-01-09 03:32:321

cdna是什么

经过mRNA反转录得到的单链DNA。
2023-01-09 03:32:381

cDNA是双链么

你知道realtimePCR用cDNA和用DNA的目的区别在哪儿吗?用DNA的一般是检测基因组中目的片段的数量的用cDNA的一般是检测目的基因表达量的,这当然就需要检测mRNA的量,但是RNA太容易被分解,难以检测,故而用反转录而成的cDNA。一般反转录而成的cDNA是单链的,要形成双链,还需要其他步骤,比如两步法中的pcr步骤。
2023-01-09 03:32:451

RNA是如何反转录成cDNA的?过程和原理怎样?请教

操作步骤是先加RNA、OligodT、随即引物、水65C反应10min,冰上放置5min后:这一步是让RNA变性,把RNA的二级结构打开;再加dNTP,RNaseA,BUFFER,MTV逆转录酶,反应25℃10min:这一步是让反转录引物(oligodT,随机引物)和模板RNA退火结合37℃60min:这一步是反转录酶的工作温度70℃10min:这一步是变性,把合成的cDNA和RNA变性开,就拿到单链的cDNA
2023-01-09 03:32:512

pcr,cDNA引物的问题

"所以做PCR,用反转录得到的cDNA做引物"你这个理解是不对的,cDNA就是是作PCR模板用的;mRNA反转录的时候,是会有片段断裂或者不完整,但是,mRNA的拷贝数有几十万甚至几千万个,不会每个mRNA拷贝在你扩增的目的基因处都断裂或者降解掉的。另外,提取RMA的时候,一般情况不会有DNA污染的,就算有,我们也可以通过引物的设计来避免扩增出基因组DNA。设计引物的时候,使其在两个外显子的连接处,这样就可以避免扩增出基因组DNA了
2023-01-09 03:33:004

由cDNA全长怎么得到DNA全长

现代分子生物学第四版,朱玉贤,P189-P190,介绍类RACE技术,可以从cDNA序列获得DNA序列。
2023-01-09 03:33:162

cDNA文库和基因DNA有什么区别?

cDNA文库不同于基因组文库,被克隆DNA是从mRNA反转录来源的DNA。cDNA组成特点是其中不含有内含子和其他调控序列。cDNA文库以mRNA为模板,经反转录酶催化,在体外反转录成cDNA,与适当的载体常用噬菌体或质粒载体连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增,这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。基因组含有的基因在特定的组织细胞中只有一部分表达,而且处在不同环境条件、不同分化时期的细胞其基因表达的种类和强度也不尽相同,所以cDNA文库具有组织细胞特异性。cDNA文库显然比基因组DNA文库小得多,能够比较容易从中筛选克隆得到细胞特异表达的基因。但对真核细胞来说,从基因组DNA文库获得的基因与从cDNA文库获得的不同,基因组。DNA文库所含的是带有内含子和外显子的基因组基因,而从cDNA文库中获得的是已经过剪接、去除了内含子的cDNA基因组文库用限制性内切酶切割细胞的整个基因组DNA,可以得到大量的基因组DNA片段,然后将这些DNA片段与载体连接,再转化到细菌中去,让宿主菌长成克隆。这样,一个克隆内的每个细胞的载体上都包含有特定的基因组DNA片段,整个克隆群体就包含基因组的全部基因片段总和称为基因组文库。将某种生物的基因组DNA切割成一定大小的片段,并与合适的载体重组后导入宿主细胞进行克隆。这些存在于所有重组体内的基因组DNA片段的集合,即基因组文库,它包含了该生物的所有基因。
2023-01-09 03:33:351

cDNA是干什么用的

cDNA 互补脱氧核糖核酸为具有与某mRNA(信使RNA)链呈互补的碱基序列的单链DNA即complementary DNA之缩写,或此DNA链与具有与之互补的碱基序列的DNA链所形成的DNA双链.与RNA链互补的单链DNA,以其RNA为模板,在适当引物的...
2023-01-09 03:33:401

cDNA是双链么

你知道realtimePCR用cDNA和用DNA的目的区别在哪儿吗?用DNA的一般是检测基因组中目的片段的数量的用cDNA的一般是检测目的基因表达量的,这当然就需要检测mRNA的量,但是RNA太容易被分解,难以检测,故而用反转录而成的cDNA。一般反转录而成的cDNA是单链的,要形成双链,还需要其他步骤,比如两步法中的pcr步骤。
2023-01-09 03:33:491

ORF cDNA 和CDS的区别

CDS是Coding sequence的缩写,是编码一段蛋白产物的序列,是结构基因组学术语ORF开放阅读框是基因序列的一部分,包含一段可以编码蛋白的碱基序列,不能被终止子打断.当一个新基因被识别,其DNA序列被解读,人们仍旧无法搞清相应的蛋白序列是什么CDS与开放读码框ORF的区别(1)开放读码框是从一个起始密码子开始到一个终止密码子结束的一段序列;不是所有读码框都能被表达出蛋白产物,或者能表达出占有优势或者能产生生物学功能的蛋白.(2) CDS,是编码一段蛋白产物的序列.(3) cds必定是一个orf.但也可能包括很多orf.(4)反之,每个orf不一定都是cds.(5)Open reading frame (ORF) - a reading frame that does not contain a nucleotide triplet which stops translation before formation of a complete polypeptide.Coding sequence (CDS) - The portion of DNA that codes for transcription of messenger RNAORF-----translation,CDS----transcriptiontranslation 是理论上的,而transcription则显然是事实存在的.cDNA为具有与某RNA链呈互补的碱基序列的单链DNA即complementary DNA之缩写,或此DNA链与具有与之互补的碱基序列的DNA链所形成的DNA双链EST (Expressed Sequence Tag)表达序列标签—是从一个随机选择的cDNA 克隆,进行5"端和3"端单一次测序挑选出来获得的短的cDNA 部分序列,代表一个完整基因的一小部分,在数据库中其长度一般从20 到7000bp 不等,平均长度为360 ±120bp .由于cDNA文库的复杂性和测序的随机性,有时多个EST代表同一基因或基因组,将其归类形成EST簇(EST clusteF)mRNA携带遗传信息,在蛋白质合成时充当模板的RNA.
2023-01-09 03:33:551

生物化学 cDNA 中文解释

cDNA就是complementaryDNA,即互补DNA,是一种利用逆转录酶,以RNA(通常是mRNA)为模板作成的复制品,经常用来将真核生物的基因(以mRNA形式)复制到原核生物细胞中。
2023-01-09 03:34:001

怎样得到一种基因的cDNA,求具体步骤

1.首先,你要知道那种细胞有该基因的高表达。2.培养该细胞。3.提取总的mRNA。4.下面的步骤取决于你对该基因序列的知道情况。如果全序列已知,那就设计一对针对首尾的PCR引物,直接做RT-PCR,就可以得到全长cDNA了。如果只知道其中一段,那就先把mRNA用随机引物反转录为cDNA,建立cDNA文库。然后用已知的序列设计探针,在文库中寻找
2023-01-09 03:34:061

mrna逆转录为什么得到cdna

是的,得到的是全体mRNA的cDNA的库.然后通过PCR手段获得需要的目的片段.但是实际操作过程中,由于mRNA的降解,因此一次实验不可能得到全部的cDNA,因此要重复1~2次,才能保证全部mRNA被反转录为cDNA.
2023-01-09 03:34:261

转录比较组学为是么测cdna的序列

[之发爱分享]8 单细胞转录组测序样本要求常见问题
2023-01-09 03:34:322

如何用已有的cDNA,做出相应的蛋白质

1.dna经过转录合成rna,再经过翻译形成肽链,经过内质网和高尔基体加工后成为有一定空间结构的蛋白质。2.mrna经过逆转录形成cdna(complementarydna),这一般是rna病毒才能进行的过程。
2023-01-09 03:34:431

cDNA文库是什么?

就是与RNA互补的DNA 文库,也即是 只有显性基因的DNA片段
2023-01-09 03:34:492

cDNA文库是所有mRNA逆转录的么?还是部分mRNA转录的?

部分,
2023-01-09 03:34:586

“cDNA”的名词解释是什么?

cDNA(全称complementary DNA),是一种互补脱氧核糖核酸。与mRNA链互补的单链DNA,以其mRNA为模板,在适当引物的存在下,由mRNA与DNA进行一定条件下合成的,就是cDNA。【cDNA定义】为具有与某mRNA(信使RNA)链呈互补的碱基序列的单链DNA即complementary DNA之缩写,或此DNA链与具有与之互补的碱基序列的DNA链所形成的DNA双链。与RNA链互补的单链DNA,以其RNA为模板,在适当引物的存在下,由依赖RNA的DNA聚合酶(反转录酶)的作用而合成,并且在合成单链cDNA后,在用碱处理除去与其对应的RNA以后,以单链cDNA为模板,由依赖DNA的DNA聚合酶或依赖RNA的DNA聚合酶的作用合成双链cDNA。真核生物的信使RNA或其他RNA的cDNA,在遗传工程方面广为应用。在这种情况下,mRNA的cDNA,与原来基因的DNA(基因组DNA,genomic DNA)不同而无内含子;相反地对应于在原来基因中没有的而在mRNA存在的3′末端的多A序列等的核苷序列上,与exon序列、先导序列以及后续序列等一起反映出mRNA结构。cDNA同样可以被克隆。【DNA与cDNA的区别】DNA指的是生物体的主要遗传物质,单体脱氧核糖核酸聚合而成的聚合体,内部有内含子等结构.cDNA是由与RNA链互补的单链DNA,以其RNA为模板,在适当引物的存在下,由RNA与DNA经过反转录过程而成反转录的DNA,其内部无内含子等结构,基因克隆中利于在原核生物中表达.
2023-01-09 03:35:241

什么是cDNA?

cDNA(全称complementary DNA),是一种互补脱氧核糖核酸。与mRNA链互补的单链DNA,以其mRNA为模板,在适当引物的存在下,由mRNA与DNA进行一定条件下合成的,就是cDNA。【cDNA定义】为具有与某mRNA(信使RNA)链呈互补的碱基序列的单链DNA即complementary DNA之缩写,或此DNA链与具有与之互补的碱基序列的DNA链所形成的DNA双链。与RNA链互补的单链DNA,以其RNA为模板,在适当引物的存在下,由依赖RNA的DNA聚合酶(反转录酶)的作用而合成,并且在合成单链cDNA后,在用碱处理除去与其对应的RNA以后,以单链cDNA为模板,由依赖DNA的DNA聚合酶或依赖RNA的DNA聚合酶的作用合成双链cDNA。真核生物的信使RNA或其他RNA的cDNA,在遗传工程方面广为应用。在这种情况下,mRNA的cDNA,与原来基因的DNA(基因组DNA,genomic DNA)不同而无内含子;相反地对应于在原来基因中没有的而在mRNA存在的3′末端的多A序列等的核苷序列上,与exon序列、先导序列以及后续序列等一起反映出mRNA结构。cDNA同样可以被克隆。【DNA与cDNA的区别】DNA指的是生物体的主要遗传物质,单体脱氧核糖核酸聚合而成的聚合体,内部有内含子等结构.cDNA是由与RNA链互补的单链DNA,以其RNA为模板,在适当引物的存在下,由RNA与DNA经过反转录过程而成反转录的DNA,其内部无内含子等结构,基因克隆中利于在原核生物中表达.
2023-01-09 03:35:291

什么是cDNA

cDNA文库吧??
2023-01-09 03:35:343

什么是cDNA?

cDNA(全称complementary DNA),是一种互补脱氧核糖核酸。与mRNA链互补的单链DNA,以其mRNA为模板,在适当引物的存在下,由mRNA与DNA进行一定条件下合成的,就是cDNA。【cDNA定义】为具有与某mRNA(信使RNA)链呈互补的碱基序列的单链DNA即complementary DNA之缩写,或此DNA链与具有与之互补的碱基序列的DNA链所形成的DNA双链。与RNA链互补的单链DNA,以其RNA为模板,在适当引物的存在下,由依赖RNA的DNA聚合酶(反转录酶)的作用而合成,并且在合成单链cDNA后,在用碱处理除去与其对应的RNA以后,以单链cDNA为模板,由依赖DNA的DNA聚合酶或依赖RNA的DNA聚合酶的作用合成双链cDNA。真核生物的信使RNA或其他RNA的cDNA,在遗传工程方面广为应用。在这种情况下,mRNA的cDNA,与原来基因的DNA(基因组DNA,genomic DNA)不同而无内含子;相反地对应于在原来基因中没有的而在mRNA存在的3′末端的多A序列等的核苷序列上,与exon序列、先导序列以及后续序列等一起反映出mRNA结构。cDNA同样可以被克隆。【DNA与cDNA的区别】DNA指的是生物体的主要遗传物质,单体脱氧核糖核酸聚合而成的聚合体,内部有内含子等结构.cDNA是由与RNA链互补的单链DNA,以其RNA为模板,在适当引物的存在下,由RNA与DNA经过反转录过程而成反转录的DNA,其内部无内含子等结构,基因克隆中利于在原核生物中表达.
2023-01-09 03:35:461

cDNA是指具有与某RNA链呈互补碱基序列的DNA对吗 cdna是什么意思

1、cDNA是指具有与某RNA链呈互补碱基序列的DNA。2、与RNA链互补的单链DNA,以其RNA为模板,在适当引物的存在下,由依赖RNA的DNA聚合酶(反转录酶)作用而合成,并且在合成单链cDNA后,再用碱处理除去与其对应的RNA以后,以单链cDNA为模板。
2023-01-09 03:35:511

什么是cDNA?

cDNA 是指互补(有时称拷贝)DNA。特指在体外经过逆转录后与RNA互补的DNA链。与平常我们所称谓的基因组DNA不同,cDNA没有内含子而只有外显子的序列 。真核生物的mRNA或其他RNA的cDNA,在遗传工程方面广为应用。cDNA是指具有与某RNA链呈互补碱基序列的DNA。与RNA链互补的单链DNA,以其RNA为模板,在适当引物的存在下,由依赖RNA的DNA聚合酶(反转录酶)作用而合成,并且在合成单链cDNA后,再用碱处理除去与其对应的RNA以后,以单链cDNA为模板,由依赖DNA的DNA聚合酶或依赖RNA的DNA聚合酶作用合成双链cDNA。在这种情况下,mRNA的cDNA,与原来的基因组DNA相同而且无内含子;相反地,对应于在原来基因中没有的而在mRNA存在的3"末端的poly A序列等的核苷序列上,与外显子序列、先导序列以及后续序列等一起反映出mRNA结构。
2023-01-09 03:35:561

什么是cDNA?

cDNA(全称complementary DNA),是一种互补脱氧核糖核酸。与mRNA链互补的单链DNA,以其mRNA为模板,在适当引物的存在下,由mRNA与DNA进行一定条件下合成的,就是cDNA。【cDNA定义】为具有与某mRNA(信使RNA)链呈互补的碱基序列的单链DNA即complementary DNA之缩写,或此DNA链与具有与之互补的碱基序列的DNA链所形成的DNA双链。与RNA链互补的单链DNA,以其RNA为模板,在适当引物的存在下,由依赖RNA的DNA聚合酶(反转录酶)的作用而合成,并且在合成单链cDNA后,在用碱处理除去与其对应的RNA以后,以单链cDNA为模板,由依赖DNA的DNA聚合酶或依赖RNA的DNA聚合酶的作用合成双链cDNA。真核生物的信使RNA或其他RNA的cDNA,在遗传工程方面广为应用。在这种情况下,mRNA的cDNA,与原来基因的DNA(基因组DNA,genomic DNA)不同而无内含子;相反地对应于在原来基因中没有的而在mRNA存在的3′末端的多A序列等的核苷序列上,与exon序列、先导序列以及后续序列等一起反映出mRNA结构。cDNA同样可以被克隆。【DNA与cDNA的区别】DNA指的是生物体的主要遗传物质,单体脱氧核糖核酸聚合而成的聚合体,内部有内含子等结构.cDNA是由与RNA链互补的单链DNA,以其RNA为模板,在适当引物的存在下,由RNA与DNA经过反转录过程而成反转录的DNA,其内部无内含子等结构,基因克隆中利于在原核生物中表达.
2023-01-09 03:36:011

cDNA是什么意思?

cDNA(全称complementary DNA),是一种互补脱氧核糖核酸。与mRNA链互补的单链DNA,以其mRNA为模板,在适当引物的存在下,由mRNA与DNA进行一定条件下合成的,就是cDNA。【cDNA定义】为具有与某mRNA(信使RNA)链呈互补的碱基序列的单链DNA即complementary DNA之缩写,或此DNA链与具有与之互补的碱基序列的DNA链所形成的DNA双链。与RNA链互补的单链DNA,以其RNA为模板,在适当引物的存在下,由依赖RNA的DNA聚合酶(反转录酶)的作用而合成,并且在合成单链cDNA后,在用碱处理除去与其对应的RNA以后,以单链cDNA为模板,由依赖DNA的DNA聚合酶或依赖RNA的DNA聚合酶的作用合成双链cDNA。真核生物的信使RNA或其他RNA的cDNA,在遗传工程方面广为应用。在这种情况下,mRNA的cDNA,与原来基因的DNA(基因组DNA,genomic DNA)不同而无内含子;相反地对应于在原来基因中没有的而在mRNA存在的3′末端的多A序列等的核苷序列上,与exon序列、先导序列以及后续序列等一起反映出mRNA结构。cDNA同样可以被克隆。【DNA与cDNA的区别】DNA指的是生物体的主要遗传物质,单体脱氧核糖核酸聚合而成的聚合体,内部有内含子等结构.cDNA是由与RNA链互补的单链DNA,以其RNA为模板,在适当引物的存在下,由RNA与DNA经过反转录过程而成反转录的DNA,其内部无内含子等结构,基因克隆中利于在原核生物中表达.
2023-01-09 03:36:071

cDNA是什么意思?

cDNA 是指互补(有时称拷贝)DNA。特指在体外经过逆转录后与RNA互补的DNA链。与平常我们所称谓的基因组DNA不同,cDNA没有内含子而只有外显子的序列 。真核生物的mRNA或其他RNA的cDNA,在遗传工程方面广为应用。cDNA是指具有与某RNA链呈互补碱基序列的DNA。与RNA链互补的单链DNA,以其RNA为模板,在适当引物的存在下,由依赖RNA的DNA聚合酶(反转录酶)作用而合成,并且在合成单链cDNA后,再用碱处理除去与其对应的RNA以后,以单链cDNA为模板,由依赖DNA的DNA聚合酶或依赖RNA的DNA聚合酶作用合成双链cDNA。在这种情况下,mRNA的cDNA,与原来的基因组DNA相同而且无内含子;相反地,对应于在原来基因中没有的而在mRNA存在的3"末端的poly A序列等的核苷序列上,与外显子序列、先导序列以及后续序列等一起反映出mRNA结构。
2023-01-09 03:36:121

cDNA什么意思?

cDNA 是指互补(有时称拷贝)DNA。特指在体外经过逆转录后与RNA互补的DNA链。与平常我们所称谓的基因组DNA不同,cDNA没有内含子而只有外显子的序列 。真核生物的mRNA或其他RNA的cDNA,在遗传工程方面广为应用。cDNA是指具有与某RNA链呈互补碱基序列的DNA。与RNA链互补的单链DNA,以其RNA为模板,在适当引物的存在下,由依赖RNA的DNA聚合酶(反转录酶)作用而合成,并且在合成单链cDNA后,再用碱处理除去与其对应的RNA以后,以单链cDNA为模板,由依赖DNA的DNA聚合酶或依赖RNA的DNA聚合酶作用合成双链cDNA。在这种情况下,mRNA的cDNA,与原来的基因组DNA相同而且无内含子;相反地,对应于在原来基因中没有的而在mRNA存在的3"末端的poly A序列等的核苷序列上,与外显子序列、先导序列以及后续序列等一起反映出mRNA结构。
2023-01-09 03:36:381

生物化学 cDNA 中文解释

cDNA就是complementary DNA,即互补DNA,是一种利用逆转录酶,以RNA(通常是mRNA)为模板作成的复制品,经常用来将真核生物的基因(以mRNA形式)复制到原核生物细胞中。
2023-01-09 03:36:442

简述cDNA文库与基因组文库的主要区别

cDNA文库 以mRNA为模板,经反转录酶催化,在体外反转录成cDNA,与适当的载体常用噬菌体或质粒载体连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增,这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。基因组含有的基因在特定的组织细胞中只有一部分表达,而且处在不同环境条件、不同分化时期的细胞其基因表达的种类和强度也不尽相同,所以cDNA文库具有组织细胞特异性。cDNA文库显然比基因组DNA文库小得多,能够比较容易从中筛选克隆得到细胞特异表达的基因。但对真核细胞来说,从基因组DNA文库获得的基因与从cDNA文库获得的不同,基因组。DNA文库所含的是带有内含子和外显子的基因组基因,而从cDNA文库中获得的是已经过剪接、去除了内含子的cDNA基因组文库用限制性内切酶切割细胞的整个基因组DNA,可以得到大量的基因组DNA片段,然后将这些DNA片段与载体连接,再转化到细菌中去,让宿主菌长成克隆。这样,一个克隆内的每个细胞的载体上都包含有特定的基因组DNA片段,整个克隆群体就包含基因组的全部基因片段总和称为基因组文库。 将某种生物的基因组DNA切割成一定大小的片段,并与合适的载体重组后导入宿主细胞进行克隆。这些存在于所有重组体内的基因组DNA片段的集合,即基因组文库,它包含了该生物的所有基因。
2023-01-09 03:37:061

生物化学 cDNA 中文解释

cDNA就是complementary DNA,即互补DNA,是一种利用逆转录酶,以RNA(通常是mRNA)为模板作成的复制品,经常用来将真核生物的基因(以mRNA形式)复制到原核生物细胞中.
2023-01-09 03:37:121

【求助】cDNA 该如何保存?

可以用PCR产物稀释100倍左右作为模版. 是RT后的cDNA. 不是PCR后得双链CDNA. PCR后得产物是稳定的. 不知道你是用的哪个我说是的RT后的cDNA可以分装成小份儿的,经常用的放4度,其他的放-20度保存分装
2023-01-09 03:37:281

cDNA文库构建的方法与过程分别是什么?

2023-01-09 03:37:472

cDNA是什么?

以RNA为模板,在逆转录酶作用下逆转录生成的DNA,就是cDNA。
2023-01-09 03:37:591