51单片机汇编 警告 WARNING L5: CODE SPACE MEMORY OVERLAP 求解答

意思是重叠

n. 重叠；重复vi. 部分重叠；部分的同时发生vt. 与…重叠；与…同时发生

sequence ( 序列结构) 是指 核酸 序列 (DNA,RNA),或氨基酸 序列 (蛋白质). sequence overlap (序列重叠) 是指 两个 DNA (RNA) 的 核酸 序列 有重叠,或两个 蛋白质 的氨基酸 序列 有重叠.

隠せないほど眩い光 静寂破りこの世に苏るはげしく揺らぐ渇いた大地 命をかけて火花ぶつけ合うKakusenai hodo mabayui hikari Seijaku yaburi kono yo ni yomigaeruHageshiku yuragu kawaita daichi Inochi o kakete hibana butsukeau无法隐藏的眩光在世上划破静寂苏醒强烈的震动与干渴的大地赌上性命擦出火花もう一度だけでいい 奇迹 起きてよ过去になくした记忆のページを取り戻すpower（ちから）をMou ichido dake de ii Kiseki Okite yoKako ni nakushita kioku no peeji o torimodosu chikara o...请唤醒奇迹 一次就够为了重新获得记忆之页的力量暗を贯く信じる心 魂 眠る场所探して 瞬きできない 锐い眼光を燃やす光と影の2つの心 クリスタルに映る未来へ今 动き出す 红く涨（みなぎ）るeyes Yami o tsuranuku shinjiru kokoro Tamashii Nemuru basho sagashite Mabataki dekinai Surudoi gankou o moyasu Hikari to kage no 2tsu no kokoro Kurisutaru utsuru mirai e Ima Ugokidasu Akaku minagiru eyes自信的心穿越黑暗寻找灵魂沉眠的地方使已经无光的眼睛燃烧光与暗的两颗心奔向水晶上映照的未来现在就行动吧 涨红的眼睛互いの伤を舐めあう日々に 终わりを告げて静かに立ち上がる小さな灯（あか）りともした夜の 君と交わした约束 守り抜くTagai no kizu o nameau hibi ni Owari o tsugete shizuka ni tachiagaruChiisa na akari tomoshita yoru no Kimi to kawashita yakusoku Mamorinuku宣布一天结束时 互相舔着伤口 静静地站起来我会永远守住那微灯映照之夜和你交换的承诺直到最后霞む蜃気楼が 君を见せるよ进んだ先に何が起きても负けはしない覚悟でKasumu shinkirou ga Kimi o miseru yo Susunda saki ni nani ga okite mo make wa shinai kakugo de雾中的幻象映出了你即使我的前路上映出了什么 我一定不会输奇迹は起こる信じる心 迎えにきた胜利の女神が すべてを倒す どんな强者（かべ）にも怯（ひる）まない迷い続ける2つの心 色褪せることない世界へ 今 辉くよ 重なり合ったeyes Kiseki wa okoru shinjiru kokoro Mukae ni kita shouri no megami ga Subete o taosu Donna **kyousha ni mo hirumanaiMayoi tsuzukeru 2tsu no kokoro Iroaseru koto nai sekai eIma Kagayaku yo Kasanari atta eyes 胜利女神将迎接这颗奇迹创造的心可以战胜一切，不害怕一切敌人两颗心一起奔向不会黯淡的世界现在已经发出光芒 重合的眼睛沈む太阳に 月が溶けるよ过去になくした记忆のページを取り戻すpower（ちから）をShizumu taiyou ni Tsuki ga tokeru yoKako ni nakushita kioku no peeji o torimodosu *power o...月亮融入落日之中为了重新获得记忆之页的力量暗を贯く信じる心 魂 眠る场所探して 瞬きできない 锐い眼光を燃やす光と影の2つの心 クリスタルに映る未来へ今 动き出す 红く涨（みなぎ）るeyes重なり合うeyes Yami o tsuranuku shinjiru kokoro Tamashii Nemuru basho sagashite Mabataki dekinai Surudoi gankou o moyasu Hikari to kage no 2tsu no kokoro Kurisutaru utsuru mirai e Ima Ugokidasu Akaku minagiru eyesKasanariau eyes自信的心穿越黑暗寻找灵魂沉眠的地方使已经无光的眼睛燃烧光与暗的两颗心奔向水晶上映照的未来现在就行动吧 涨红的眼睛重叠的眼睛

overlap就是叠置的意思。可以指部分也可指完全重叠。如果一定要区分的话，那么cover指完全重叠。可以参考以下资料。http://wenku.baidu.com/view/f117ea3a0912a21614792972.htmlgis词汇库http://ishare.iask.sina.com.cn/f/21672706.html

歌名：Overlap作词：涉谷郁夫作曲：藤田宜久歌手：kimeru歌词：隐せないほど眩い光 静寂破りこの世に苏る无法隐藏的眩光在世上划破静寂苏醒はげしく揺らぐ渴いた大地 命をかけて火花ぶすけ合う强烈的震动与干涸的大地赌上性命擦出火花来もう一度だけでいい 奇迹起きてよ唤醒奇迹吧 再一次就好过去になくした记忆のペ—ジを取り戻すpower(ちから)を为了重新获得以往失去的记忆书页的力量闇を贯ぬく信じる心 魂眠る场所探して自信的心穿越黑暗寻找灵魂沉眠的地方瞬きできない 锐い眼光を燃やす燃烧无法眨眼的锐利光芒光と影の2つの心 クリスタルに映る未来へ光与暗的两颗心向着水晶映照的未来前进吧今动き出す 红く涨る EYES现在就行动吧 那涨红的双眼互いの伤をなめあう日々に终わりを告て 静かに立ち上がる宣布一天结束时 互相舔着伤口 静静地站起来小さな明かり点したよるの 君と交わした约束守りぬく我会永远守住那微灯映照之夜和你交换的承诺直到最后霞む蜃气楼が君を见せるよ雾中的幻象映出了你进んだ先に何が起きても负けはしない覚悟で即使我的前路上映出了什么 我一定不会输奇迹は起こる信じる心 迎えに来た胜利の女神が胜利女神将迎接这颗奇迹创造的心全てを倒すどんな壁にも昼间ない可以战胜一切，不害怕一切敌人迷いつずける2つの心 色褪せることない世界へ两颗心一起奔向不会黯淡的世界今辉くよ… 重なりあったEYES那重合的双眼现在已经发出光芒沈む太阳に月がとけるよ月亮融入落日之中过去になくした记忆のぺ—ジを取り戾どす power（ちから）を…为了重新获得以往失去的记忆书页的力量闇を贯ぬく信じる心 魂眠る场所探して自信的心穿越黑暗寻找灵魂沉眠的地方瞬きできない 锐い眼光を燃やす燃烧无法眨眼的锐利光芒光と影の2つの心 クリスタルに映る未来へ光与暗的两颗心向着水晶映照的未来前进吧今动き出す 红く涨る EYES现在就行动吧 那涨红的双眼重なり合う EYES那重合的双眼罗马音：kaku senaihodo mabushii hikariseija kuri kono sei ni yomigaeruhageshiku yuragu kawai ta daichiinochi o kakete hibana hutsuke a umou ichidou dake deiikisekiokiteyokako ninakushita kioku PAGE otori modosu chikara woYami wo tsuranuku shinjiru kokoro tamashii nemuru basho sagashiteMabataki dekinai surudoi gankou wo moyasuHikari to kage no futatsu no kokoro CRYSTAL ni utsuru mirai eIma ugoki dasu. akaku minagiru EYESTagai no kizu wo nameau hibi ni owari wo tsugeteShizuka ni tachiagaruChiisana akari tomoshita yoru noKimi to kawashita yakusoku mamorinukuKasumu shinkirou ga kimi wo miseru yoSusunda saki ni naniga okitemo makewa shinai kakugo deKiseki wa okoru shinjiru kokoroMukae ni kita shouri no megami gaSubete wo taosu donna kabe ni mo hirumanaiMayoi tsuzukeru futatsu no kokoroIroaseru koto nai sekai eIma kagayaku yo...Kasanari atta EYESShizumu taiyou ni tsuki ga tokeru yoKako ni nakushita kioku no PAGE wo torimodosu chikara wo...Yami wo tsuranuku shinjiru kokoroTamashii nemuru basho sagashiteMabataki dekinai surudoi gankou wo moyasuHikari to kage no futatsu no kokoroCRYSTAL ni utsuru mirai eIma ugoki dasu...Akaku minagiru EYESKasanari au EYES

歌曲名:OVERLAP歌手:Kimeru专辑:OVERLAPOVERLAP作词：Kimeru作曲：渋谷郁央编曲：藤田宜久歌：Kimeruby: mrggx隠せないほど眩い光　静寂破りこの世に苏るはげしく揺らぐ渇いた大地　命をかけて火花ぶつけ合うもう一度だけでいい　奇迹　起きてよ过去になくした记忆のページを取り戻すpower（ちから）を闇を贯く信じる心　魂　眠る场所探して瞬きできない　锐い眼光を燃やす光と影の２つの心　クリスタルに映る未来へ今　动き出す　红く涨（みなぎ）るeyes互いの伤を舐めあう日々に　终わりを告げて静かに立ち上がる小さな灯（あか）りともした夜の　君と交わした约束　守り抜く霞む蜃気楼が　君を见せるよ进んだ先に何が起きても负けはしない覚悟で奇迹は起こる信じる心　迎えにきた胜利の女神がすべてを倒す　どんな强者（かべ）にも怯（ひる）まない迷い続ける２つの心　色褪せることない世界へ今　辉くよ　重なり合ったeyes沈む太阳に　月が溶けるよ过去になくした记忆のページを取り戻すpower（ちから）を闇を贯く信じる心　魂　眠る场所探して瞬きできない　锐い眼光を燃やす光と影の２つの心　クリスタルに映る未来へ今　动き出す　红く涨（みなぎ）るeyes重なり合うeyeshttp://music.baidu.com/song/56206289

几点考虑：你的A2和B1和原来模板的互补区太短了。或者说你加上的序列和互补区的比例太大了，影响PCR的反应先试一下，看看你的A1和B2在一起P，能不能有结果

SetCommMask 设置要监控的事件,WaitCommEvent 等待串口通信事件的发生.　SetCommMask 用途：设置串口通信事件　　原型：BOOL SetCommMask(HANDLE hFile, //标识通信端口的句柄　　DWORD dwEvtMask //能够使能的通信事件　　);　　参数说明：-hFile：串口句柄　　-dwEvtMask：准备监视的串口事件掩码　　串口上可能发生的事件如下表所示：　　值 事件描述 EV_BREAK A break was detected on input. EV_CTS The CTS (clear-to-send) signal changed state. EV_DSR The DSR(data-set-ready) signal changed state. EV_ERR A line-status error occurred. Line-status errors are CE_FRAME, CE_OVERRUN, and CE_RXPARITY. EV_RING A ring indicator was detected. EV_RLSD The RLSD (receive-line-signal-detect) signal changed state. EV_RXCHAR A character was received and placed in the input buffer. EV_RXFLAG The event character was received and placed in the input buffer. The event character is specified in the device"s DCB structure, which is applied to a serial port by using the SetCommState function. EV_TXEMPTY The last character in the output buffer was sent. 参数含义：　　EV_BREAK：收到BREAK信号。　　EV_CTS：CTS(clear to send)线路发生变化。　　EV_DSR：DST(Data Set Ready)线路发生变化。　　EV_ERR：线路状态错误，包括了CE_FRAME / CE_OVERRUN / CE_RXPARITY 3种错误。　　EV_RING：检测到振铃信号。　　EV_RLSD：CD(Carrier Detect)线路信号发生变化。　　EV_RXCHAR：输入缓冲区中已收到数据，即接收到一个字节并放入输入缓冲区。　　EV_RXFLAG：使用SetCommState()函数设置的DCB结构中的等待字符已被传入输入缓冲区中。　　EV_TXEMPTY：输出缓冲区中的数据已被完全送出。操作举例：SetCommMask(hComm,EV_RXCHAR|EV_TXEMPTY);上面函数执行完毕后将监视串口中有无数据和发送缓冲区中的数据是否全部发送完毕。WaitCommEvent()用途：用来判断用SetCommMask()函数设置的串口通信事件是否已发生。原型：BOOL WaitCommEvent(HANDLE hFile,LPDWORD lpEvtMask,LPOVERLAPPED lpOverlapped);参数说明：-hFile：串口句柄-lpEvtMask:函数执行完后如果检测到串口通信事件的话就将其写入该参数中。-lpOverlapped：异步结构，用来保存异步操作结果。操作举例：OVERLAPPED os;DWORD dwMask,dwTrans,dwError=0,err;memset(&os,0,sizeof(OVERLAPPED));os.hEvent=CreateEvent(NULL,TRUE,FALSE,NULL);if(!WaitCommEvent(hComm,&dwMask,&os)){//如果异步操作不能立即完成的话,函数返回FALSE,并且调用GetLastError()函//数分析错误原因后返回ERROR_IO_PENDING,指示异步操作正在后台进行.这种情//况下,在函数返回之前系统设置OVERLAPPED结构中的事件为无信号状态,该函数//等待用SetCommMask()函数设置的串口事件发生，共有9种事件可被监视：//EV_BREAK，EV_CTS，EV_DSR，EV_ERR，EV_RING，EV_RLSD，EV_RXCHAR，//EV_RXFLAG，EV_TXEMPTY；当其中一个事件发生或错误发生时，函数将//OVERLAPPED结构中的事件置为有信号状态，并将事件掩码填充到dwMask参数中if(GetLastError()==ERROR_IO_PENDING){/**************************************************************//*在此等待异步操作结果,直到异步操作结束时才返回.实际上此时 *//*WaitCommEvent()函数一直在等待串口监控的事件之一发生,当事件发*//*生时该函数将OVERLAPPED结构中的事件句柄置为有信号状态,此时 *//*GetOverlappedResult()函数发现此事件有信号后马上返回,然后下面*//*的程序马上分析WaitCommEvent()函数等到的事件是被监视的串口事 *//*件中的哪一个,然后执行相应的动作并发出相应消息. *//**************************************************************/GetOverlappedResult(hComm,&os,&dwTrans,true);switch(dwMask){case EV_RXCHAR:PostMessage(Parent,WM_COMM_RXCHAR,0,0);break;case EV_TXEMPTY:PostMessage(Parent,WM_COMM_TXEMPTY,0,0);break;case EV_ERR:switch(dwError){case CE_FRAME:err=0;break;case CE_OVERRUN:err=1;break;case CE_RXPARITY:err=2;break;default:break;}PostMessage(Parent,WM_COMM_ERR,(WPARAM)0,(LPARAM)err);break;case EV_BREAK:PostMessage(Parent,WM_COMM_BREAK,0,0);break;case ...://其他用SetCommMask()函数设置的被监视的串口通信事件。... ...break;default:break;}}-以上简要介绍了大部分的串口通信api函数，笔者所写的串口通信软件用的是事件通知方式，该方式是windows2000下效率较高的一种方式。而且只熟悉这些api函数也还是不够的，该机制下还要牵涉到多线程和消息机制，其中读写串口的动作是由主线程来完成的，比如说操作者按下发送数据的按钮之后，相应函数马上将某特定区域里面的数据发送出去，所以说用api函数写串口发送数据的功能是相对较简单的。收数据的时候就要麻烦一点，在打开串口后首先主线程要设置要监视的串口通信事件，然后将监视线程打开，用来监视主线程设置的这些串口通信事件是否已发生，当其中的某个事件发生后，监视线程马上将该消息发送给主线程，其中监视线程在发送消息之前要确保主线程在收到消息后肯定的知道串口究竟发生了什么样的事件，然后根据不同的事件类型进行处理。大致的主线程和监视线程的大致工作流程：主线程打开(其实就是主窗体打开之后)||V打开串口(设置波特率、校验方式、数据位数、停止位数)||V设置监视线程需要监视的串口通信事件||V打开监视线程||V等待各种事件的发生(比如发送数据单击事件，更改通信参数事件，监视线程发来的消息等)--------------------------------------------------------------------------------监视线程被打开||V串口事件发生否(WaitCommEvent())(无论发生否均进入下面的代码)||V异步操作是否正在后台进行？(if(GetLastError()==ERROR_IO_PENDING))||V在此等待异步操作结果(GetOverlappedResult(hComm,&os,&dwTrans,true))||V处理通信事件，根据事件类型的不同给主窗体发送不同的消息总结起来说SetCommMask()和WaitCommEvent()是要成对使用的。在串口打开的时候SetCommMask，然后在读数据的线程中WaitCommEvent。不过要注意的是，一般不会在WaitCommEvent之后做关于该串口数据的处理（尤其是在数据比较多，处理缓慢的时候——容易丢失数据吧~~），一般会把数据简单的保存下来，再发送消息给一个专门的处理函数进行处理。

重叠延伸pcr

隠せないほど眩い光 静寂破りこの世に苏るはげしく揺らぐ渇いた大地 命をかけて火花ぶつけ合うKakusenai hodo mabayui hikari Seijaku yaburi kono yo ni yomigaeruHageshiku yuragu kawaita daichi Inochi o kakete hibana butsukeau无法隐藏的眩光在世上划破静寂苏醒强烈的震动与干渴的大地赌上性命擦出火花もう一度だけでいい 奇迹 起きてよ过去になくした记忆のページを取り戻すpower（ちから）をMou ichido dake de ii Kiseki Okite yoKako ni nakushita kioku no peeji o torimodosu chikara o...请唤醒奇迹 一次就够为了重新获得记忆之页的力量暗を贯く信じる心 魂 眠る场所探して 瞬きできない 锐い眼光を燃やす光と影の2つの心 クリスタルに映る未来へ今 动き出す 红く涨（みなぎ）るeyes Yami o tsuranuku shinjiru kokoro Tamashii Nemuru basho sagashite Mabataki dekinai Surudoi gankou o moyasu Hikari to kage no 2tsu no kokoro Kurisutaru utsuru mirai e Ima Ugokidasu Akaku minagiru eyes自信的心穿越黑暗寻找灵魂沉眠的地方使已经无光的眼睛燃烧光与暗的两颗心奔向水晶上映照的未来现在就行动吧 涨红的眼睛互いの伤を舐めあう日々に 终わりを告げて静かに立ち上がる小さな灯（あか）りともした夜の 君と交わした约束 守り抜くTagai no kizu o nameau hibi ni Owari o tsugete shizuka ni tachiagaruChiisa na akari tomoshita yoru no Kimi to kawashita yakusoku Mamorinuku宣布一天结束时 互相舔着伤口 静静地站起来我会永远守住那微灯映照之夜和你交换的承诺直到最后霞む蜃気楼が 君を见せるよ进んだ先に何が起きても负けはしない覚悟でKasumu shinkirou ga Kimi o miseru yo Susunda saki ni nani ga okite mo make wa shinai kakugo de雾中的幻象映出了你即使我的前路上映出了什么 我一定不会输奇迹は起こる信じる心 迎えにきた胜利の女神が すべてを倒す どんな强者（かべ）にも怯（ひる）まない迷い続ける2つの心 色褪せることない世界へ 今 辉くよ 重なり合ったeyes Kiseki wa okoru shinjiru kokoro Mukae ni kita shouri no megami ga Subete o taosu Donna **kyousha ni mo hirumanaiMayoi tsuzukeru 2tsu no kokoro Iroaseru koto nai sekai eIma Kagayaku yo Kasanari atta eyes 胜利女神将迎接这颗奇迹创造的心可以战胜一切，不害怕一切敌人两颗心一起奔向不会黯淡的世界现在已经发出光芒 重合的眼睛沈む太阳に 月が溶けるよ过去になくした记忆のページを取り戻すpower（ちから）をShizumu taiyou ni Tsuki ga tokeru yoKako ni nakushita kioku no peeji o torimodosu *power o...月亮融入落日之中为了重新获得记忆之页的力量暗を贯く信じる心 魂 眠る场所探して 瞬きできない 锐い眼光を燃やす光と影の2つの心 クリスタルに映る未来へ今 动き出す 红く涨（みなぎ）るeyes重なり合うeyes Yami o tsuranuku shinjiru kokoro Tamashii Nemuru basho sagashite Mabataki dekinai Surudoi gankou o moyasu Hikari to kage no 2tsu no kokoro Kurisutaru utsuru mirai e Ima Ugokidasu Akaku minagiru eyesKasanariau eyes自信的心穿越黑暗寻找灵魂沉眠的地方使已经无光的眼睛燃烧光与暗的两颗心奔向水晶上映照的未来现在就行动吧 涨红的眼睛重叠的眼睛

楼主说的是vlookup吧

中文音译的要不

指覆盖涂层或者重叠部分。

overlap要求参与运算的图元的公共区域与原始图元有相同的维数 而partition没有这个要求，不过图元没有公共区域时只是相当于公共区域为0维罢了

无法隐藏的眩目光芒 打破寂静的复活了 激烈摇动的干涸大地 赌上性命撞出火花来 再一次就好 唤醒奇迹吧 拿回以往失去的记忆书页的力量 贯穿黑暗坚定不移的心 寻找灵魂的沉睡之地 燃烧无法眨眼的锐利光芒 光与影的两颗心 往水晶映照的未来前进吧 那涨红的双眼 如今即将动身了 互舔伤口的每天 以沉静振作而告终 在微弱灯光的夜 与你的约定 始终遵守着 连烟云间的海市蜃楼 也要呈现给你哟 用无论前方如何也坚决不输的觉悟 心中坚信奇迹会发生 能迎接胜利女神 面对什么强者也不胆怯 统统击退 迷茫中相连的两颗心 向永不褪色的世界去吧 正在发光哟 那双叠加的眼睛 月亮消融在沉没的太阳中 取回过于湮没的记忆之页 的力量 坚定的信念贯穿黑暗 探索沉睡的土地中的灵魂 无法瞬间完成 燃烧起眼中的光芒 光与影交替的两颗心 向水晶映射出的未来去吧 现在就开始行动 热烈的双眼 重叠的双眼

FlowJo中常用的调整参数轴的方法： 1. 对数轴和线性轴之间的转换： 2. 调整参数轴的范围： 3. 直方图中对纵轴的调整： 3.1 图形窗口中对纵轴的调整： 3.2布局编辑器（Layout）中对Y轴的调整： 4. 在布局编辑器（Layout）中对参数轴名称等属性的。

生物实验就是这样 我都急了两个月我的实验了。。。。

个人经验是16个以上，为了保险最好超过20个重叠。同时注意重叠的部分最好不要有dimer或者hairpin。

你好，问一下解决了吗，我也出现这样的情况了，好难

楼上说得很有道理。温度很低啊。建议你先不要加引物，做10个循环（模板本身就是引物）。然后再加入引物1a和2b.还有退火温度比TM低5度，40度那步不要。可以换成49度5个循环。

因为不清楚你所扩增的全长片断、以及Overlap过程中要搭在一起的两个片断各是多长，所以无法提供非常具体的意见。谈一点我的经验，供参考。overlap能成功，要点是overlap的部分能保证有效的退火（形象地说，能牢固地“粘”在一块）。所以overlap的部分要有一定长度（你的试验中25bp的重叠区应该够长），并且注意这部分的GC含量，以便使这部分（重叠的25bp）有一个合适的Tm值（例如65度），而且你使用的PCR循环所用的退火温度应该低于此温度——否则overlap的部分可能“粘”不到一起。另外一点是要意识到overlap的前后两段核酸单链有可能形成一定的空间结构！尤其是PCR退火温度较低、降温速度较快时更增加这种情况的几率。前后两段越长越容易形成某种空间结构。而这种空间结构可能会对overlap区的退火造成影响。 当然，overlap区本身也有形成某种空间结构的可能（例如发夹结构），但这可以通过软件设计（如引物设计软件）来避免。得不到全长片断，我认为首先要考虑overlap区没有成功退火。所以建议你使用TouchDown PCR试试。TouchDownPCR方法在分子克隆上有介绍。这种PCR使用一个较高的退火温度，循环几周（如三周）后降一度，然后在此温度上再循环几周，以此类推。通常最高和最低退火温度间可相差十度。Touch Down PCR有利于解决空间结构影响overlap区退火的问题，增加扩增成功的机会。其他的可尝试的地方，也可以试试加用一些变型剂，如甲酰胺、DMSO等。也可同Touch Down PCR配合使用。但建议先单纯试试TouchDown PCR。

几点考虑： 你的A2和B1和原来模板的互补区太短了.或者说你加上的序列和互补区的比例太大了,影响PCR的反应 先试一下,看看你的A1和B2在一起P,能不能有结果

nff 是FFT变换的系数长度，比如1024,window是X的分帧长度，要小于或者等于nff，一般等于nff,overlap是帧重叠的长度，要<= 1/2 * nff, 取1/4 * nff 就可以了。

下一个KuGou音乐盒就什么都有了吧，3部游戏王主题曲，插曲应有尽有 ，用电影播放器播放就有歌词，至于罗马拼音就不知你为何想要同时也无能为力 ；渴いだ叫び应该是干涸的呼喊，OVERLAP的英文可以解为重叠的部分

没有明确规定，但我们通常使用十五六个重叠，效果还不错。

无法隐藏的炫目光芒打破寂静复活了激烈动摇的干涸大地赌上性命撞出火花来再一次就好唤醒奇迹吧拿回以往失去的记忆书页的力量贯穿黑暗坚定不移的心请找灵魂的沉睡之地燃烧无法眨眼的锐利眼光光与影的两个心往水晶照应的未来前进吧那涨红的双眼如今即将动身了

OVERLAP作词：Kimeru作曲：渋谷郁央编曲：藤田宜久歌：Kimeru隠（かく）せないほど眩（まばゆ）い光（ひかり）　静寂（せいじゃく）破（やぶ）りこの世（よ）に苏（よみがえ）るはげしく揺（ゆ）らぐ渇（かわ）いた大地（だいち）　命（いのち）をかけて火花（ひばな）ぶつけ合（あ）うもう一度（いちど）だけでいい　奇迹（きせき）　起（お）きてよ过去（かこ）になくした记忆（きおく）のページを取（と）り戻（もど）すpower（ちから）を闇（やみ）を贯（つらぬ）く信（しん）じる心（こころ）　魂（たましい）　眠（ねむ）る场所（ばしょ）探（さが）して瞬（まばた）きできない　锐（するど）い眼光（がんこう）を燃（も）やす光（ひかり）と影（かげ）の2（ふた）つの心（こころ）　クリスタルに映（うつ）る未来（みらい）へ今（いま）　动（うご）き出（だ）す　红（あか）く涨（みなぎ）るeyes互（たが）いの伤（きず）を舐（な）めあう日々（ひび）に　终（お）わりを告（つ）げて静（しず）かに立（た）ち上（あ）がる小（ちい）さな灯（あか）りともした夜（よる）の　君（きみ）と交（か）わした约束（やくそく）　守（まも）り抜（ぬ）く霞（かす）む蜃気楼（しんきろう）が　君（きみ）を见（み）せるよ进（すす）んだ先（さき）に何（なに）が起（お）きても负（ま）けはしない覚悟（かくご）で奇迹（きせき）は起（お）こる信（しん）じる心（こころ）　迎（むか）えにきた胜利（しょうり）の女神（めがみ）がすべてを倒（たお）す　どんな强者（かべ）にも怯（ひる）まない迷（まよ）い続（つづ）ける2（ふた）つの心（こころ）　色褪（いろあ）せることない世界（せかい）へ今（いま）　辉（かが）くよ　重（かさ）なり合（あ）ったeyes沈（しず）む太阳（たいよう）に　月（つき）が溶（と）けるよ过去（かこ）になくした记忆（きおく）のページを取（と）り戻（もど）すpower（ちから）を闇（やみ）を贯（つらぬ）く信（しん）じる心（こころ）　魂（たましい）　眠（ねむ）る场所（ばしょ）探（さが）して瞬（まばた）きできない　锐（するど）い眼光（がんこう）を燃（も）やす光（ひかり）と影（かげ）の2（ふた）つの心（こころ）　クリスタルに映（うつ）る未来（みらい）へ今（いま）　动（うご）き出（だ）す　红（あか）く涨（みなぎ）るeyes重（かさ）なり合（あ）ったeyes

你从田间走来

出题有水平！！！！！！！！！

《OVERLAP》作词：Kimeru／作曲：渋谷郁央／编曲：藤田宜久／歌：Kimeru隠せないほど眩い光　静寂破りこの世に甦るはげしく揺らぐ渇いた大地　命をかけて火花ぶつけ合うKakusenai hodo mabayui hikari Seijaku yaburi kono yo ni yomigaeruHageshiku yuragu kawaita daichi Inochi o kakete hibana butsukeau无法隐藏的眩光在世上划破静寂苏醒强烈的震动与干渴的大地赌上性命擦出火花もう一度だけでいい　奇迹　起きてよ过去になくした记忆のページを取り戻すpower（ちから）をMou ichido dake de ii Kiseki Okite yoKako ni nakushita kioku no peeji o torimodosu chikara o...请唤醒奇迹 一次就够为了重新获得记忆之页的力量闇を贯く信じる心　魂　眠る场所探して　瞬きできない　锐い眼光を燃やす光と影の2つの心　クリスタルに映る未来へ今　动き出す　红く涨（みなぎ）るeyes　Yami o tsuranuku shinjiru kokoro Tamashii Nemuru basho sagashite Mabataki dekinai Surudoi gankou o moyasu Hikari to kage no 2tsu no kokoro Kurisutaru utsuru mirai e Ima Ugokidasu Akaku minagiru eyes自信的心穿越黑暗寻找灵魂沉眠的地方使已经无光的眼睛燃烧光与暗的两颗心奔向水晶上映照的未来现在就行动吧 涨红的眼睛互いの伤を舐めあう日々に　终わりを告げて静かに立ち上がる小さな灯（あか）りともした夜の　君と交わした约束　守り抜くTagai no kizu o nameau hibi ni Owari o tsugete shizuka ni tachiagaruChiisa na akari tomoshita yoru no Kimi to kawashita yakusoku Mamorinuku宣布一天结束时 互相舔着伤口 静静地站起来我会永远守住那微灯映照之夜和你交换的承诺直到最后霞む蜃気楼が　君を见せるよ进んだ先に何が起きても负けはしない覚悟でKasumu shinkirou ga Kimi o miseru yo Susunda saki ni nani ga okite mo make wa shinai kakugo de雾中的幻象映出了你即使我的前路上映出了什么 我一定不会输奇迹は起こる信じる心　迎えにきた胜利の女神が　すべてを倒す　どんな强者（かべ）にも怯（ひる）まない迷い続ける2つの心　色褪せることない世界へ　今　辉くよ　重なり合ったeyes　Kiseki wa okoru shinjiru kokoro Mukae ni kita shouri no megami ga Subete o taosu Donna **kyousha ni mo hirumanaiMayoi tsuzukeru 2tsu no kokoro Iroaseru koto nai sekai eIma Kagayaku yo Kasanari atta eyes 胜利女神将迎接这颗奇迹创造的心可以战胜一切，不害怕一切敌人两颗心一起奔向不会黯淡的世界现在已经发出光芒 重合的眼睛沈む太阳に　月が溶けるよ过去になくした记忆のページを取り戻すpower（ちから）をShizumu taiyou ni Tsuki ga tokeru yoKako ni nakushita kioku no peeji o torimodosu *power o...月亮融入落日之中为了重新获得记忆之页的力量闇を贯く信じる心　魂　眠る场所探して　瞬きできない　锐い眼光を燃やす光と影の2つの心　クリスタルに映る未来へ今　动き出す　红く涨（みなぎ）るeyes重なり合うeyes Yami o tsuranuku shinjiru kokoro Tamashii Nemuru basho sagashite Mabataki dekinai Surudoi gankou o moyasu Hikari to kage no 2tsu no kokoro Kurisutaru utsuru mirai e Ima Ugokidasu Akaku minagiru eyesKasanariau eyes自信的心穿越黑暗寻找灵魂沉眠的地方使已经无光的眼睛燃烧光与暗的两颗心奔向水晶上映照的未来现在就行动吧 涨红的眼睛重叠的眼睛

重叠PCR,拼全了是重叠延伸PCR或splicing by overlap extension,SOE.,9,聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)，简称PCR overlap PCR------PCR 重组,0,

OVERLAP》作词：Kimeru／作曲：渋谷郁央／编曲：藤田宜久／歌：Kimeru隠せないほど眩い光 静寂破りこの世に苏るはげしく揺らぐ渇いた大地 命をかけて火花ぶつけ合うKakusenai hodo mabayui hikari Seijaku yaburi kono yo ni yomigaeruHageshiku yuragu kawaita daichi Inochi o kakete hibana butsukeau无法隐藏的眩光在世上划破静寂苏醒强烈的震动与干渴的大地赌上性命擦出火花もう一度だけでいい 奇迹 起きてよ过去になくした记忆のページを取り戻すpower（ちから）をMou ichido dake de ii Kiseki Okite yoKako ni nakushita kioku no peeji o torimodosu chikara o...请唤醒奇迹 一次就够为了重新获得记忆之页的力量暗を贯く信じる心 魂 眠る场所探して 瞬きできない 锐い眼光を燃やす光と影の2つの心 クリスタルに映る未来へ今 动き出す 红く涨（みなぎ）るeyes Yami o tsuranuku shinjiru kokoro Tamashii Nemuru basho sagashite Mabataki dekinai Surudoi gankou o moyasu Hikari to kage no 2tsu no kokoro Kurisutaru utsuru mirai e Ima Ugokidasu Akaku minagiru eyes自信的心穿越黑暗寻找灵魂沉眠的地方使已经无光的眼睛燃烧光与暗的两颗心奔向水晶上映照的未来现在就行动吧 涨红的眼睛互いの伤を舐めあう日々に 终わりを告げて静かに立ち上がる小さな灯（あか）りともした夜の 君と交わした约束 守り抜くTagai no kizu o nameau hibi ni Owari o tsugete shizuka ni tachiagaruChiisa na akari tomoshita yoru no Kimi to kawashita yakusoku Mamorinuku宣布一天结束时 互相舔着伤口 静静地站起来我会永远守住那微灯映照之夜和你交换的承诺直到最后霞む蜃気楼が 君を见せるよ进んだ先に何が起きても负けはしない覚悟でKasumu shinkirou ga Kimi o miseru yo Susunda saki ni nani ga okite mo make wa shinai kakugo de雾中的幻象映出了你即使我的前路上映出了什么 我一定不会输奇迹は起こる信じる心 迎えにきた胜利の女神が すべてを倒す どんな强者（かべ）にも怯（ひる）まない迷い続ける2つの心 色褪せることない世界へ 今 辉くよ 重なり合ったeyes Kiseki wa okoru shinjiru kokoro Mukae ni kita shouri no megami ga Subete o taosu Donna **kyousha ni mo hirumanaiMayoi tsuzukeru 2tsu no kokoro Iroaseru koto nai sekai eIma Kagayaku yo Kasanari atta eyes 胜利女神将迎接这颗奇迹创造的心可以战胜一切，不害怕一切敌人两颗心一起奔向不会黯淡的世界现在已经发出光芒 重合的眼睛沈む太阳に 月が溶けるよ过去になくした记忆のページを取り戻すpower（ちから）をShizumu taiyou ni Tsuki ga tokeru yoKako ni nakushita kioku no peeji o torimodosu *power o...月亮融入落日之中为了重新获得记忆之页的力量暗を贯く信じる心 魂 眠る场所探して 瞬きできない 锐い眼光を燃やす光と影の2つの心 クリスタルに映る未来へ今 动き出す 红く涨（みなぎ）るeyes重なり合うeyes Yami o tsuranuku shinjiru kokoro Tamashii Nemuru basho sagashite Mabataki dekinai Surudoi gankou o moyasu Hikari to kage no 2tsu no kokoro Kurisutaru utsuru mirai e Ima Ugokidasu Akaku minagiru eyesKasanariau eyes自信的心穿越黑暗寻找灵魂沉眠的地方使已经无光的眼睛燃烧光与暗的两颗心奔向水晶上映照的未来现在就行动吧 涨红的眼睛重叠的眼睛

overlap extension pcr网络重叠延伸pcr1Reconstruct Chicken Major Histocompatibility Complex ⅰ in vitro Using Splicing Overlap Extension PCR Method重叠延伸PCR法体外重建鸡主要组织相容性复合体Ⅰ2And scFv gene was amplified by the overlap extension PCR method using cDNA as template.以cDNA为模板，用重叠延伸PCR方法扩增得到scFv基因。

aptn（vptn，lptn)貌似可以，或者用vsbv什么的也能做到，但为什么要代替呢，叠分操作是很好使的一种操作吧，我一般都习惯vovlap,allvglue,allnumcmp,all/pnum,volu,1/replot

这是搭接运算，单元间要有相交的地方并且是同一级别

罗马拼音:kaku senaihodo mabushii hikariseija kuri kono sei ni yomigaeruhageshiku yuragu kawai ta daichiinochi o kakete hibana hutsuke a umou ichidou dake deiikisekiokiteyokako ninakushita kioku page otori modosu chikara woyami wo tsuranuku shinjiru kokoro tamashii nemuru basho sagashitemabataki dekinai surudoi gankou wo moyasuhikari to kage no futatsu no kokoro crystal ni utsuru mirai eima ugoki dasu. akaku minagiru eyestagai no kizu wo nameau hibi ni owari wo tsugeteshizuka ni tachiagaruchiisana akari tomoshita yoru nokimi to kawashita yakusoku mamorinukukasumu shinkirou ga kimi wo miseru yosusunda saki ni naniga okitemo makewa shinai kakugo dekiseki wa okoru shinjiru kokoromukae ni kita shouri no megami gasubete wo taosu donna kabe ni mo hirumanaimayoi tsuzukeru futatsu no kokoroiroaseru koto nai sekai eima kagayaku yo...kasanari atta eyesshizumu taiyou ni tsuki ga tokeru yokako ni nakushita kioku no page wo torimodosu chikara wo...yami wo tsuranuku shinjiru kokorotamashii nemuru basho sagashitemabataki dekinai surudoi gankou wo moyasuhikari to kage no futatsu no kokorocrystal ni utsuru mirai eima ugoki dasu...akaku minagiru eyeskasanari au eyes

一英寸的缝缝~ overlap指的是搭接的地方,也有可能指得是门襟哦!个人理解门襟要合理一点

蛋白质重叠

没做过重叠pcr，楼主做完后分享一下效果

基本粒子分为两种，一种叫“费米子”（fermion），以美国物理学家恩利克·费米的名字命名，另一种叫“玻色子”（boson），以印度物理学家萨特延德拉·纳特·玻色的名字命名。这两个术语在被提及时经常相互对比，它们的主要区别是自旋特性不同。自旋为半整数的基本粒子（如1/2、3/2、5/2）低能态时遵守费米子守恒定律，即数量不变（一正一反不计数量 例如一个电子和一个正电子不计数）其性质由费米预言所以称费米子 与其相对的是自旋为整数的玻色子（如光子）

热稳定DNA聚合酶、原料等。

overlaps是主打无性别路线的服装品牌。无性别主义设计师品牌OVERLAPS创立于2020年，创始人团队由一群有趣的多元文化年轻人组成。OVERLAPS认为服装和时尚不应该被性别限制，希望通过风格化的设计和剪裁，探索同时适合男女穿着的时尚概念。比起一个时装品牌，OVERLAPS更希望成为一个“创意与文化的Label”，凭借无限的创意，独立的思考和有灵魂的作品，去为当代年轻人发声。无性风格特点1、无性别风的色彩调性无性别风穿搭里最常用的色系也是基础色、淡漠色，比如说：柔白、浅米、深咖、天蓝、碳灰、黑色、深蓝等颜色，和那些清浅、甜腻且自带女性特质的色系区别开来。2、无性别风的廓形特点无性别风的服饰廓形绝大部分都是直线型的，且有着宽松、利落、洒脱的特点，适合直线型人当中的戏剧、自然穿着，一些利落的款式也适合少年、时尚型人穿着，曲线型人请慎重，跟风不会让我们变时尚，穿对才是。

常见原因如下：（1）引物没设计好，重叠的部分长度不够好；（2）过长片段的叠加通常都比较困难；（3）PCR体系不够好，导致扩增不好。

试试把退火时间延长一些，看能不能把两条链连上。一般就是照着引物的Tm值做就可以的。

试试vptn,all,all(如果是面则用aptn)，如果还是不行，调下容差（btol,1e-3）

OVERLAP(kimeru)-游戏王主题曲Lyricist:kimeruComposer:涉谷郁夫Music Arranger:藤田宜久隠せないほど眩い光 静寂破りこの世に苏るはげしく濡らぐ渴いた大地 命をかけて火花ぶすけ合うもう一度だけでいい 奇迹起きてよ过去になくした记忆のペ—ジを取り戻どす power(ちから)を暗を贯ぬく信じる心 魂眠る场所探がして瞬きできない 锐い眼光を燃やす光と影の2つの心 クリスタルに映る未来へ今动き出す 红く涨る EYES互いの伤をなめあう日&63394;に终わりを告て 静かに立ち上がる小さな明かり萸したよるの 君と交した约束守りぬく霞む蜃気睑が君を见せるよ进んだ先に何が掟も负けわしない觉悟で奇迹は起こる信じる心 迎えに来た胜利の女神が全てを倒すどんな壁にも絅间ない迷いつずける2つの心 色褪せることない世界へ今辉くよ… 重りあった EYES静か太阳に月がとけるよ过去になくした记忆のぺ—ジを取り戻どす power(ちから)を…暗を贯く信じる心 魂眠る场所探がして拼音Kakusenai hodo mabayui hikariSeijyaku yaburi kono yoni yomigaeruHageshiku yuragu kawaita daichiInochi wo kakete hibana butsukeauMouichido dake de iiKiseki okiteyoKakoni nakushita kioku no PAGE woTorimodosu chikara woYami wo tsuranuku shinjiru kokoroTamashii nemuru basho sagashiteMabataki dekinai surudoi gankou wo moyasuHikari to kage no futatsu no kokoroCRYSTAL ni utsuru mirai eIma ugoki dasu...Akaku minagiru EYESTagai no kizu wo nameau hibi ni owari wo tsugeteShizuka ni tachiagaruChiisana akari tomoshita yoru noKimi to kawashita yakusoku mamorinukuKasumu shinkirou ga kimi wo miseru yoSusunda saki ni naniga okitemo makewa shinai kakugo deKiseki wa okoru shinjiru kokoroMukae ni kita shouri no megami gaSubete wo taosu donna kabe ni mo hirumanaiMayoi tsuzukeru futatsu no kokoroIroaseru koto nai sekai eIma kagayaku yo...Kasanari atta EYESShizumu taiyou ni tsuki ga tokeru yoKako ni nakushita kioku no PAGE wo torimodosu chikara wo...Yami wo tsuranuku shinjiru kokoroTamashii nemuru basho sagashiteMabataki dekinai surudoi gankou wo moyasuHikari to kage no futatsu no kokoroCRYSTAL ni utsuru mirai eIma ugoki dasu...Akaku minagiru EYESKasanari au EYES.《Wake.Up.Your.Heart》很强地回响找寻还看不见的 自己的住处走统踢的胸的跳动高mari不能隐藏的也未时相信在 现在活样子垂下头之类不需要过去yori来 翼打开 翔上Wake up!!心 什么时候的日也是 Always 表面上升的你的热的感情相信Stand up!! 如果开始跑 Non Stop!! 不停的梦Miru世界为目标 力量的交货期限ri 跑去如果与结束没有的 这个道的先等待的 大的不安 Searchingyour future梦希望紧握突破 不可怕向前关系间相信 一起旅行立问的新的世界为目标 现在从这里 开始跑能起飞 Jump up !! 跑着穿过 Go way !! 前进sa那天的感情胸持续刻Shake up !! 不死心 Do it !! 相信样子把取rouze 不知不觉实现的应该sa Wake up your heartWake up!!心 什么时候的日也是 Always 表面上升的你的热的感情相信Stand up!! 如果开始跑 Non Stop!! 不停的梦Miru世界为目标 力量的交货期限ri 跑去GX的于2010年8月20日12:17新译戏王音译求题曲粮食主产低头,微笑着面颊撕裂Tsutau于GX的OP3安理会戏王蒂尔德罗普歌手:碗歌词:丸山和弘成分:丸山和弘作者:勇敢面对你的背]叹微笑多云隐藏像玻璃碎片散落皮尔斯我您应该揭露胸痛在任何时候微笑我救了基达我现在只是哭泣离这里不远失去了视力追逐黎明不好意思打开没什么说留在我的身边忘记它那么无法用语言来表达良好区,但只有在你的不懈小时在任何时候微笑我救了基达我现在只是哭泣离这里不远但我来这里是因为笑到你的头上正视完孙瑜GX的ED3戏王歌手:咬龙歌词:恩都稔作曲:恩都稔登上船没有罗盘我的信心頼Ritakatta快点比别人他们没有任何人打破平衡风醉酒落入海风暴痛苦!...我看到了一个微弱的太阳我狂热地追逐无限的权力,以配合由挤压假装自己的生命呼吸孙(他),照亮了我面前进男士你不知道一个严重轨道Ikiataribattari删除先进孙(他)在世界上,我现在住光得到了指南针相信信心将成为]昨天他自己的竞争力一个不会输给任何人火焰烧伤的弱点恐惧大多数浏览器会告诉你胆小从你的眼睛避免强光我担心投诉Guchiru无限的权力,以配合由挤压假装自己的生命呼吸在我去给你,太轻你不知道一个Ikiataribattari枯燥的,但Futekusarenai孙(他)在全世界所有活着的光永远千古对于每个人日光浴要告诉给你因为我没有告诉实现误区偏见诽谤这是小事情笑Itobase明白!决策?黎明...这是即将面对初升的太阳旭无限的权力,以配合由挤压假装自己的生命呼吸孙(他),照亮了我面前进男士你不知道一个严重轨道Ikiataribattari删除先进孙(他)在世界上,我现在住光无限的权力,以配合由挤压假装自己的生命呼吸在我去给你,太轻你不知道一个Ikiataribattari枯燥的,但Futekusarenai孙(他)在全世界所有活着的光完抓住最强卡!在无边的决斗古腔梦想于GX的ED4无尽的梦戏王演出者:规则博歌词:规则博作曲:一平勇气唤醒了一个奇迹剧了最后我不交换- 成为一个机会来改变捏你可以这样做过了彩虹桥手放在你的未来他们一起战斗除了门常设黑块阴影血色火焰燃烧成真!抓住最强卡!在无边的决斗古腔梦想尽管没有夜间一个微笑的同志认为控股- 成为一个盟友提出运命旅程继续不能停滞不前抱Kishimero一个动态的鼓共同有一个梦想调查结果提高了天空远东和永远有闪闪发光的未来为寻求真理的战役!关键连接头脑和心脏现在,我们正在成为一雕刻乳房祈祷胜利!过了彩虹桥手放在你的未来他们一起战斗除了门常设黑块阴影血色火焰燃烧成真!辿日穿的宏伟目标!如果不发热的激情去电力运行犹豫无穷!签名承诺到天堂

你的目的条带出来了吗？根据我的经验，只要目的条带出来就可以回收拿去测序了。。纠结那个100bp的条带会拖慢你的实验进度，你觉得呢？不如继续下面的步骤的同时回头再考虑这个问题。。

如图： 各版本差不多，下面是Surfer13，命令在MAP菜单下。只有选择两个对象以后，此命令才可以使用，多用于在等值线图上增加散点图等。

　OP 　　1． 『voice』 （第1话 - 第48话） 　　作词&作曲：悠希 歌：CLOUD 　　2． 『Shuffle』 （第49话 - 第80话） 　　作词：奥井雅美 作曲：矢吹俊郎歌：奥井雅美 　　3． 『WILD DRIVE』 （第81话 - 第131话） 　　作词&作曲&歌：永井真人 　　4． 『WARRIORS』 （第132话 - 第189话） 　　作词：生沢佑一、IPPEI 作曲：山下雄大 歌：生沢佑一 　　5． 『OVERLAP』 （第190话 - 第224话） 　　作词：Kimeru 作曲：渋谷郁央 歌：Kimeru 　　ED 　　1． 『元気のシャワー』（第1话 - 第48话） 　　作词：松本隆 作曲：植野庆子 歌：前田亜季 　　2． 『あの日の午后』（第49话 - 第80话） 　　作词：奥井雅美 作曲：矢吹俊郎 歌：奥井雅美 　　3． 『楽园』（第81话 - 第131话） 　　作词：RUMIKO 作曲：SHOJI 歌：CAVE 　　4． 『あふれる感情がとまらない』（第132话 - 第189话） 　　作词&作曲：生沢佑一 歌：生沢佑一 　　5． 『EYE"S』（第190话 - 第224话） 　　作词：マイクスギヤマ 作曲&歌：生沢佑一