高效液相色谱图分析

色谱分析法分为柱色谱法、薄层色谱法、液相色谱法、气相色谱法、超临界流体色谱法。色谱法（chromatography）又称色谱分析、色谱分析法、层析法，是一种分离和分析方法，在分析化学、有机化学、生物化学等领域有着非常广泛的应用。常见的色谱法主要有：柱色谱法、薄层色谱法、液相色谱法、气相色谱法、超临界流体色谱法。1、柱色谱法原始的色谱方法，该方法将固定相注入下端塞有棉花或滤纸的玻璃管中，将被样品饱和的固定相粉末摊铺在玻璃管顶端，以流动相洗脱。常见的洗脱方式有两种：一种是自上而下依靠溶剂本身的重力洗脱，另一种：自下而上依靠毛细作用洗脱。收集分离后的纯净组分也有两种不同的方法：一种方法是在柱尾直接接受流出的溶液，另一种方法是烘干固定相后用机械方法分开各个色带，以合适的溶剂浸泡固定相提取组分分子。柱色谱法被广泛应用于混合物的分离，包括：对有机合成产物、天然提取物以及生物大分子的分离。2、薄层色谱法应用非常广泛的色谱方法，这种色谱方法将固定相涂布在金属或玻璃薄板上形成薄层，用毛细管、钢笔或者其他工具将样品点于薄板一端，之后将点样端浸入流动相中，依靠毛细作用令流动相溶剂沿薄板上行展开样品。薄层色谱法成本低廉、操作简单，被用于对样品的粗测、对有机合成反应进程的检测等用途。3、液相色谱法（HPLC）目前，应用多的色谱分析方法，液相色谱系统由流动相储液瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成，其整体组成类似于气相色谱，但是，针对其流动相为液体的特点作出很多调整。HPLC输液泵要求输液量稳定平衡；进样系统要求进样便利、切换严密；由于液体流动相黏度远远小于气体，为了减低柱压，液相色谱的色谱柱一般比较粗，长度也远小于气相色谱柱。HPLC应用非常广泛，几乎遍及定量定性分析的各个领域。4、气相色谱法气相色谱法是将氦或氩等气体作为载气(称移动相)，将混合物样品注入装有填充剂(称固定相)的色谱柱里，进行分离的一种方法。分离后的各组分经检测器变为电信号并用记录仪记录下来。5、超临界流体色谱法超临界流体色谱(supercritical fluid chromatography；SFC)以超临界流体做流动相是依靠流动相的溶剂化能力来进行分离、分析的色谱过程，是20世纪80年代发展和完善起来的一种新技术。超临界流体色谱兼有气相色谱和液相色谱的特点。它既可分析气相色谱不适应的高沸点、低挥发性样品，又比液相色谱有更快的分析速度和条件。操作温度主要决定于所选用的流体，常用的有二氧化碳及氧化亚氮。超临界流体容易控制和调节，在进入检测器前可以转化为气体、液体或保持其超临界流体状态，因此可与现有任何液相或气相的检测器相连接，能与多种类型检测器相匹配，扩大了它的应用范围和分类能力，在定性、定量方面有较大的选择范围。

主要分为三类：柱色谱、纸色谱以及薄层色谱。分类：1、柱色谱为向玻璃管中填入固定相，以流动相溶剂浸润后在上方倒入待分离的溶液，再滴加流动相，因为待分离物质对固定相的吸附力不同，吸附力大的固着不动或移动缓慢，吸附力小的被流动相溶剂洗下来随流动相向下流动，从而实现分离。2、纸色谱以滤纸条为固定相，在纸条上点上待分离的混合溶液的样点，将纸条下端浸入流动相溶剂中悬挂，溶剂因为毛细作用沿滤纸条上升，样点中的溶质从而被分离。3、薄层色谱是在玻璃板上涂以固定相涂层，然后点样，下端浸入溶剂，同样自下而上分离。常用于探索柱色谱实验条件，溶剂和固定相的选择等。色谱又称色层法或层析法，是一种物理化学分析方法，它利用不同溶质（样品）与固定相和流动相之间的作用力（分配、吸附、离子交换等）的差别，当两相做相对移动时，各溶质在两相间进行多次平衡，使各溶质达到相互分离。其他分类方法色谱法的分类方法很多，最初的分类是根据流动相的状态将色谱法分成四大类。色谱法按流动相种类的分类：

色谱分析原理如下：一、基本原理：色谱分析有两个要素——流动相和固定相。在流动相从固定相的一端流到另一端的过程中，加在固定相起始端的溶质随流动相流动，并在流动相和固定相之间来回转移。不同的溶质与这两相的亲和力大小不同，溶质的移动速度也不同，因而得到分离。固定相一般是固体，也可以是固体上附着液体；流动相是液体或气体。二、色谱分析优缺点：1、优点：分离效果好，设备简单，操作方便，条件较温和，方法多样，能适应不同的需要。2、缺点：处理量小，周期长，不能连续操作；有的层析介质价格昂贵，有时找不到合适的介质。三、改善层析分离效果的方法：改变流动相的组成或pH，改变固定相，改变温度等。在液相层析中以改变流动相的组成最重要。色谱分析的分析仪器：1、气相色谱仪气相色谱仪的种类和型号很多，但都包括气路系统、进样系统、分离系统、检测系统和记录与数据处理系统。2、气路系统气路系统为色谱分析提供纯净、连续的气流，仪器的气路由载气、氢气和空气三个气路组成，后两个气路仅在氢焰检测器中使用，常用的载气有N2，H2，He和Ar等。3、进样系统进样系统主要包括进样器和气化室。液体样品常用微量注射器进样。样品由针刺穿进样口中的硅橡胶密封垫注人气化室，液体样品瞬间完全气化，并被载气带入色谱柱。4、检测系统检测系统把从色谱柱流出的各个组分的浓度(或质量)信号转换成电信号的装置，也是色谱仪的主要部件之一，应用最广泛的是热导池检测器(TCD)和氢火焰离子化检测器(FID)。

色谱分析可以分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、凝胶色谱、亲和色谱等分析类别，通过各种色谱技术的综合运用，可实现各种材料的组分分离、定量、定性分析，检测范围包括：石油、煤炭、能源、化工、食品、医药、化学及农业等各个行业。色谱分析是材料不同组分分子在固定相和流动相之间分配平衡的过程中，不同组分在固定相上相互分离，已达到对材料定性分析、定量的目的。

色谱分析是指按物质在固定相与流动相间分配系数的差别而进行分离、分析的方法。其按流动相的分子聚集状态可分为液相色谱、气相色谱及超临界流体色谱法等。按分离原理可分为吸附、分配、空间排斥、离子交换、亲合及手性色谱法等诸多类别。按操作原理可分为柱色谱法及平板色谱法等。色谱法已成为应用最广、药典收载最多的一类分析方法。色谱分析有两个要素——流动相和固定相。在流动相从固定相的一端流到另一端的过程中，加在固定相起始端的溶质随流动相流动，并在流动相和固定相之间来回转移。不同的溶质与这两相的亲和力大小不同，溶质的移动速度也不同，因而得到分离。固定相一般是固体，也可以是固体上附着液体；流动相是液体或气体。色谱分析具有很多优点：分离效果好，设备简单，操作方便，条件较温和，方法多样，能适应不同的需要。其缺点主要是：处理量小，周期长，不能连续操作；有的层析介质价格昂贵，有时找不到合适的介质。色谱分析（层析）有各种类型。按照固定相使用的形式，可分为柱层析、纸层析、薄层层析。按照溶质的展开方式，可分为前沿层析、置换层析、洗脱层析。按照流动相的物理状态，可分为气相层析与液相层析，以及超临界流体层析等。按照分离机理，可分为分配层析、吸附层析、离子交换层析、排阻层析、疏水层析、离子对层析、亲和层析、键合相层析。按照固定相和流动相的相对极性，可分为正相层析与反相层析。在层操作时，单组分洗脱剂对多组分样品的洗脱效果常常不够满意。不是先洗出的组分混杂在一起，就是后洗出的组分出峰时间长，峰宽增加。为了改善分辨率、改变峰形或缩短层析时间，有时需要在层析过程中改变流动相的组成(pH、离子强度)。分阶段改变流动相的组成，流动相的组成呈阶梯状变化，称为阶段洗脱。逐渐改变流动相的组成，流动相的组成呈曲线或直线状变化，称为梯度洗脱。流动相形成梯度可用梯度洗脱仪。高效液相层析仪中常用几个泵分别输送不同的溶剂，控制各个泵的流量，就能控制洗脱剂的组成。改善层析分离效果的方法有：改变流动相的组成或pH，改变固定相，改变温度等。在液相层析中以改变流动相的组成最重要。其余要注意的条件有：柱要细而长；分离介质填充要紧密、均匀，颗粒细密、大小分布均匀；操作温度保持恒定；样品用量少；流速慢而恒定。[

【答案】：色谱定量分析方法的基本原理及适用范围：(1)外标法：是色谱定量分析中较简易的方法，该法是将预测组分的纯物质配制成不同浓度的标准溶液。使浓度与待测组分接近。然后取固定量的上述溶液进行色谱分析，得到标准样品的对应色谱图，以峰高或峰面积对浓度作图，这些数据应是一条通过原点的直线。分析样品时，在上述完全相同的色谱条件下，取制作标准曲线时同样量的试样分析，测得该试样的响应讯号后，由标准曲线即可查出其百分含量。适用范围：此法的操作简单，适用于工厂控制分析和自动分析，但结果的准确度取决于进样量的重现性和操作条件的稳定性。(2)内标法：当只需测定试样中的某几个组分，或试样所有组分不可能全部出峰时，可采用内标法。准确称取样品，加入一定量某种纯物质作为内标物，然后进行色谱分析。根据被测物和内标物在色谱图上相应的峰面积和相对校正因子，求出某组分的含量。适用范围：当只需测定试样中的某几个组分，或试样所有组分不可能全部出峰时，可采用内标法。(3)归一化法：是把试样中所有组分的含量之和按100%计算，以它们相应的色谱峰面积或峰高为定量参数。适用范围：常用于常量分析，尤其适合于进样量很少而其体积不宜准确测量的液体样品。

色谱定性分析的方法：包括纯物质对照法、利用保留值经验规律定性、利用其它方法定性这三种。色谱分析法的分类比较复杂。根据流动相和固定相的不同，色谱法分为气相色谱法和液相色谱法。按色谱操作终止的方法可分为展开色谱和洗脱色谱。按进样方法可分为区带色谱、迎头色谱和顶替色谱。色谱法分离效率高、分离速度快、灵敏度高、可进行大规模的纯物质制备。色谱定性的依据，是在同一特定的色谱条件下，不同的物质在固定相上保留的能力不一样，因此它们的保留时间不同，也就是说他们的出峰时间不同，可以通过保留时间来进行定性，目前各种色谱定性方法都是基于保留值的。但是不同物质在同一色谱条件下，可能具有相似或相同的保留值。在精度高的色谱上，保留时间可以精确到零点几秒。从色谱图中可以得到定性的信息有：被测样品中有几种物质，它们大概的比例，从出峰的出峰顺度可以粗略的判断化合物的极性。

气相色谱的定量方法主要有：归一化法、外标法、内标法、内标校正曲线、内标对比法和内加法等。1、归一法：优点是简便，定量结果与进样量无关、操作条作变化时对结果影响较小，缺点时必须所有组分在一个分析周期内都能流出色谱柱，而且检测器对它们都产生信号。该法不能用于微量杂质的合量测定。2、外标法：分为校正曲线法和外标一点法。外标法不必加内标物，常用于控制分析，分析结果的准确度主要取决于进样的准确性和操作条件的稳定程度。3、内标法：由于操作条件变化面引起的误差都将同时反映在内标物及欲测组分上而得到抵清，所以该法分析结果准确度高，对进样量准确度的要求相对较低，可测定微量组分。但实际工作中，内标物的选择需花费大量时间，样品的配制也比较繁琐。4、内标校正曲线法：该法消除了某些操作条件的影响，也不需严格要求进样体积准确。5、标准加入法：在难以找到合适内标物或色谱图上难以插入内标时可采用该法。关于气相色谱的介绍：气相色谱（gas chromatography 简称GC）是二十世纪五十年代出现的一项重大科学技术成就。这是一种新的分离、分析技术，它在工业、农业、国防、建设、科学研究中都得到了广泛应用。气相色谱可分为气固色谱和气液色谱。

　　一、概述　　电力变压器的故障可能是由于运行中油或轻气保护动作色谱分析异常，也可能是预防性试验结果超标。变压器最容易出现的故障（缺陷）有：冷却器等附件漏电或损坏、变压器本体受潮、过热及放电故障等。　　二、冷却器漏电及损坏　　(1)水冷却器漏水，水渗入油系统，对变压器危害极大。空冷器是油泵进口侧的负压区，容易吸入空气。虽然不存在漏水的严重危害，但对超高压（220kV及以上）变压器仍有较大的破坏作用。空气冷却和吸入空气会导致轻气体保护不断发送信号。油的色谱分析虽然没有明显的症状，但煤气中的氢含量明显增加，说明空气在变压器的高电场区已经分解。在每几十分钟到几小时一次的轻气保护连续动作的情况下，　　(2)强制油循环、风冷或水冷的油泵也会因连续运转而失效。例如油泵轴承磨损、电机烧毁等，都会干扰变压器油的色谱分析，应仔细区分。　　三、变压器本体受潮　　变压器本体可能因水冷却器漏水、油枕结露或防爆筒的呼吸、套管帽漏水等原因而受潮。如果在检查引擎盖时怀疑受潮，可以对可疑部位的引线进行局部 tgδ 测量。特别是在难以确定套管电缆引线根部受潮情况时，可将被测引线覆盖10cm宽的铝箔，在铝箔上施加2~3kV的电压，引线可以连接到QS1。电桥的 Cx 由 tgδ 测量。正常tgδ应为1%～2%，绝缘受潮时可达10%以上。　　四、过热故障（缺陷）　　目前，用油的色谱分析方法来判断过热故障是比较成熟的。变压器过热故障可能发生在以下三个地方。　　1、导电线路过热　　分接开关动、静触头接触不良，静触头与引线熔接；大电流端头焊接或接触不良；多股引线与铜（铝）板焊接不良，少量散股焊接。这些故障也可以通过测量绕组的直流电阻来发现。直流电阻不太大的突变（例如，小于 1%）会导致油中的色谱分析异常和可见痕量。　　2、铁芯多点接地　　变压器铁芯在运行过程中，硅钢片之间的电压就是主磁通引起的感应电势。铁芯两侧（高压侧和低压侧）有几十到几百伏的电压。通常铁芯在低压侧接地。如果有金属异物（如铜铁丝、焊渣和铁锈等），则在铁芯高压侧形成接地，即多点接地。硅钢片之间的感应电位通过“多点接地”，产生大电流，容易烧坏铁芯硅钢片，使油层析出现过热故障现象. 有时，铁芯通过螺丝绝缘不良，或者接地钢座套过长，碰到硅钢片，也会造成“多点接地”故障。在铁芯外的接地线上串联一个电阻，使接地电流控制在0.1A以下，可以大大降低对铁芯的烧毁作用，有时会使不稳定的接地消失。　　3、局部过热　　大变压器负载电流的漏磁通可能导致油箱或其他内部铁部件局部过热。一些变压器使用铝板来形成罐壁的磁屏蔽。铝板与油箱壁接触不良，多次出现局部过热缺陷。如果变压器油色谱分析显示有过热缺陷，且绕组直流电阻与铁芯绝缘良好，则应考虑存在这种局部过热缺陷，油排入油箱时常可发现痕迹并检查。　　五、放电故障（缺陷）　　1、绝缘损坏放电　　这种放电严重破坏了变压器的固体绝缘（纸），对变压器的安全运行影响很大。油色谱分析显示有一定量的乙炔（几到几十ppm），总烃含量、氢气和一氧化碳气体略有增加。通过局部放电测试可以发现有较大的放电（1000pc以上）。　　围屏树枝状放电是目前220kV三相变压器常见的绝缘损坏故障。相间外壳中部和220kV线路末端有树枝状放电痕迹。支架周围的长焊盘上有烧伤痕迹，外壳纸板表面或夹层有树枝状放电痕迹。这种放电的外因是水分或进入气泡，内因是相距太小，在高场强下有长焊盘接触外壳（油隙短路）等。制造商已采取相应的改进措施。对于已经投入运行的变压器，应更换具有有效放电痕迹的外壳和焊盘，相同的长焊盘（绕组中间）应剪短，并采取防止进气和防潮的措施。.　　目前，500kV变压器事故均与油流带电有关。冷却油泵使变压器油流过快，会在纸绝缘上形成负电荷，再加上交流电场的作用，很容易产生油放电，在绝缘纸上会出现树枝状放电痕迹。纸板，属于装备制造的问题。运营部门不应盲目增加投入运行的冷却器数量，以防止油流量过高，造成排油问题。此外，高压引线绝缘根部受力折断，电缆引线在进入套管均压球处扭结或折断，　　变压器内的金属异物（如铜铁屑、铁锈、焊渣等）残留在绕组和绝缘层上，会造成铁芯对地绝缘不良，造成树枝状放电和绝缘击穿，这是必须注意的。　　2、暂停排放　　变压器中的所有金属部件必须接地，否则会发生潜在的浮动放电。悬浮放电一般不涉及油介质，所以油色谱分析中的CO气体不会明显增加，主要是在几ppm到几十ppm之间的乙炔气，有时会引起轻气信号。常见的悬浮放电部件有：套管均压球（松动）、有载分接开关拉出件、油箱壁硅钢片磁屏蔽，以及其他不接地的金属部件（如支撑有载分接的不接地螺栓） -转换器和电气屏蔽等）；　　3、其他放电　　充油管不排气，使套管导杆和瓷套内壁无油排出。有的变压器绕组绝缘强度低，在外部过电压（包括中性点放电间隙动作时的过电压）作用下，匝间存在击穿放电。这些击穿放电过压跳闸很快，故障点不易发现。. 如果继电保护跳闸，油层色谱分析异常，应坚持检查故障点，发现缺陷。单个变压器内部的裸引线与接地部分的距离太小，在外部过电压作用下会发生电弧放电。

色谱分析系统是基于色谱分析法上的分析仪器。色谱分析法，又称层析法。根据其分离原理，有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等方法。 ---即是一种分析方法色谱分析系统，是基于色谱分析法的一种分析仪器，如：液相色谱、气相色谱、离子色谱、凝胶色谱等。

色谱分析如何进行定性和定量分析方法如下：定性(确证)方法基本原则：目前，色质联用仪数据库中，一般贮存有近30万个化合物标准质谱图。因此，GC-MS最主要的定性方式是库检索。由总离子色谱图可以得到任一组分的质谱图，由质谱图可以利用计算机在数据库中检索。检索结果，可以给出几种最可能的化合物。包括：化合物名称、分子式、分子量、基峰及可靠程度。下表是由计算机给出的某未知物谱图检索结果。定量方法：外标法将待测物质A的标准品(特点是纯度非常高，有时也可称之为该物质的纯品)用某种有机溶剂S稀释成不同的浓度的标准溶液，分别取等量(一般是等体积)的这些不同浓度的标准溶液进行质谱分析。由此可以得到一组样品量和信号值一一对应的数据，以其绘制成的曲线称为标准曲线。现在就有了一把还不错的尺子，然后就可以去拿要检测的实际样品R进行质谱分析了。根据标准曲线就可以由得到的信号值去反推物质A在该实际样品R中的含量了。内标法：外标法主要有以下两方面的局限：标样和待测样是独立进行实验的，实验间的偶然误差无法消除；标样和待测样的基质(即除待分析物外的其它成分)不同，基质有可能会带来不同的影响，也会产生误差。那么，如果我们把已知量的标准样品B直接加入待测样品A，就可以把标准样品和未知样品的测定在同一次实验和同样基质中完成，也就消除了两次实验和基质不同造成的误差，这就是内标法。

如果你问的是色谱仪的操作，那么大致需要以下几步：1.安装色谱柱。如果是新柱子要先老化。2.检漏。3.设置升温程序、载气流速等参数。4.进空白样。谱图除溶剂峰外为一直线就可以做样了。5.进样分析。

色谱分析常用的定量方法：归一化法、内标法和内加（增量）内标法、外标法。　　1、面积归一化法优点是简便、准确，当操作条件变化时对结果影响较小，宜于分析多组分试样中各组分的含量。但是试样中所有组分必须全部出峰，因此，此法在使用中受到一定限制。　　2、外标法是用纯物质配成一系列不同浓度的标准溶液（或直接购买不同浓度标准溶液）分别取一定体积，注入色谱仪，根据峰面积和浓度做标准曲线。在分析未知样时按与标准曲线相同的操作条件和方法，由标准曲线查出所需组分的浓度（现在在工作站上直接就能求出浓度）。此法要求进样准确，操作条件稳定，分析样品和标准曲线条件必须一致。　　3、内标法是试样中所有组分不能全部出峰或只要求测定试样中某个或某几个组分时，可采用此法。内标法是在准确称取一定量的试样中，加入一定的标准物质（内标物），根据内标物和试样的质量以及色谱图上的相应峰面积，计算待测组分的含量。内标法的关键是选择合适的内标物，内标物应是试样中不存在的纯物质，物质与被测物质相近，能溶于样品中，但不能于样品发生反应。此法比较费事，一般不使用于快速分析。

气相分析操作条件的确定在气相色谱分析中,我们要快速有效的分离一个复杂的样品，并获得满意的结果，除了要选择一根最佳色谱柱以外，还要对分离操作条件进行仔细的选择。色谱柱的好坏关系到分离的效果，而分离条件的设置又影响着色谱柱的分离。色谱柱和分离操作条件之间是是相辅相成的关系。本文将主要介绍气相分析操作条件的确定。初始操作条件的确定确定初始操作条件;色谱柱形式的选择;分离条件优化;程序升温。1 、确定初始操作条件进样量要根据样品浓度、色谱柱容量和检测器灵敏度来确定。样品浓度不超过mg/ml时填充柱的进样量通常为1~5μL，而对于毛细管柱，若分流比为50：1时，进样量一般不超过2μL。如果这样的进样量不能满足检测灵敏度的要求，可考虑加大进样量，但以不超载为限。进样口温度主要由样品的沸点范围决定，还要考虑色谱柱的使用温度。即首先要保证待测样品全部气化，其次要保证气化的样品组分能够全部流出色谱柱，而不会在柱中冷凝。原则上讲，进样口温度高一些有利，一般要接近样品中沸点最高的组分的沸点，但要低于易分解组分的分解温度，常用的条件是250~350℃。实际操作中，进样口温度可在一定范围内设定，只要保证样品完全汽化即可，而不必进行很精确的优化。注意，当样品中某些组分会在高温下分解时，就应适当降低汽化温度。必要时可采用冷柱上进样或程序升温汽化(PTV)进样技术。色谱柱温度的确定主要由样品的复杂程度和汽化温度决定。原则是既要保证待测物的完全分离，又要保证所有组分能流出色谱柱，且分析时间越短越好。组成简单的样品最好用恒温分析，这样分析周期会短一些。特别是用填充柱时，恒温分析时色谱图的基线要经程序升温时稳定得多。对于组成复杂的样品，常需要用程序升温分离，因为在恒温条件下，如果柱温较低，则低沸点组分分离得好，而高沸点组分的流出时间会太长，造成峰展宽，甚至滞留在色谱柱中造成柱污染;反之，当柱温太高时，低沸点组分又难以分离。毛细管柱的一个最大优点就是可在较宽的温度范围内操作，这样既保证了待测组分的良好分离，又能实现尽可能短的分析时间。一般来讲，色谱柱的初始温度应接近样品中最轻组分的沸点，而最终温度则取决于最重组分的沸点。升温速率则要依样品的复杂程度而定。建议毛细管柱的尝试温度条件设置为：OV-1(SE-30)或SE-54柱：从50℃到280℃，升温速率10℃/min;OV-17(OV-1701)柱：从60℃到260℃，升温速率8℃/min;PEG-20M柱：从60℃到200℃，升温速率8℃/min。检测器的温度是指检测器加热块温度，检测器温度的设置原则是保证流出色谱柱的组分不会冷凝同时满足检测器灵敏度的要求。大部分检测器的灵敏度受温度影响不大，故检测器温度可参照色谱柱的最高温度设定，而不必精确优化。载气流速的确定相对容易一些，开始可按照比最佳流速(氮气约为20cm/s，氦气约为25cm/s，氢气约为30cm/s)高10%来设定。然后再根据分离情况进行调节。原则是既保证待测物的完全分离，又要保证尽可能短的分析时间。用填充柱时，载气流速一般设为30ml/min。空气，300~400ml/min;氢气30~40ml/min;氮气(尾吹气)30~40ml/min。

色谱过程的本质是待分离物质分子在固定相和流动相之间分配平衡的过程，不同的物质在两相之间的分配会不同，这使其随流动相运动速度各不相同，随着流动相的运动，混合物中的不同组分在固定相上相互分离。根据物质的分离机制，又可以分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、凝胶色谱、亲和色谱等类别。色谱法的应用可以根据目的分为制备性色谱和分析性色谱两大类。制备性色谱的目的是分离混合物，获得一定数量的纯净组分，这包括对有机合成产物的纯化、天然产物的分离纯化以及去离子水的制备等。相对于色谱法出现之前的纯化分离技术如重结晶，色谱法能够在一步操作之内完成对混合物的分离，但是色谱法分离纯化的产量有限，只适合于实验室应用。分析性色谱的目的是定量或者定性测定混合物中各组分的性质和含量。定性的分析性色谱有薄层色谱、纸色谱等，定量的分析性色谱有气相色谱、高效液相色谱等。色谱法应用于分析领域使得分离和测定的过程合二为一，降低了混合物分析的难度缩短了分析的周期，是比较主流的分析方法。在中华人民共和国药典中，共有超过约600种化学合成药和超过约400种中药的质量控制应用了高效液相色谱的方法。

气相色谱的定量方法主要有：归一化法、外标法、内标法、内标校正曲线、内标对比法和内加法等。（1）归一法：优点是简便，定量结果与进样量无关、操作条作变化时对结果影响较小，缺点是必须所有组分在一个分析周期内都能流出色谱柱，而且检测器对它们都产生信号。该法不能用于微量杂质的合量测定。（2）外标法：分为校正曲线法和外标一点法。外标法不必加内标物，常用于控制分析，分析结果的准确度主要取决于进样的准确性和操作条件的稳定程度。（3）内标法：由于操作条件变化面引起的误差都将同时反映在内标物及欲测组分上而得到抵清，所以该法分析结果准确度高，对进样量准确度的要求相对较低，可测定微量组分。但实际工作中，内标物的选择需花费大量时间，样品的配置也比较繁琐。（4）内标校正曲线法：该法消除了某些操作条件的影响，也不需严格要求进样体积准确（5）标准加入法：在难以找到合适内标物或色谱图上难以插入内标时可采用该法。

　　色谱分析常用的定量方法：归一化法、内标法和内加（增量）内标法、外标法。 　　1、面积归一化法优点是简便、准确，当操作条件变化时对结果影响较小，宜于分析多组分试样中各组分的含量。但是试样中所有组分必须全部出峰，因此，此法在使用中受到一定限制。 　　2、外标法是用纯物质配成一系列不同浓度的标准溶液（或直接购买不同浓度标准溶液）分别取一定体积，注入色谱仪，根据峰面积和浓度做标准曲线。在分析未知样时按与标准曲线相同的操作条件和方法，由标准曲线查出所需组分的浓度（现在在工作站上直接就能求出浓度）。此法要求进样准确，操作条件稳定，分析样品和标准曲线条件必须一致。 　　3、内标法是试样中所有组分不能全部出峰或只要求测定试样中某个或某几个组分时，可采用此法。内标法是在准确称取一定量的试样中，加入一定的标准物质（内标物），根据内标物和试样的质量以及色谱图上的相应峰面积，计算待测组分的含量。内标法的关键是选择合适的内标物，内标物应是试样中不存在的纯物质，物质与被测物质相近，能溶于样品中，但不能于样品发生反应。此法比较费事，一般不使用于快速分析。

分析纯、色谱纯,是指试剂的纯度级别。分析纯是指做分析测定用的试剂，杂质更少，不妨碍分析测定。色谱纯是指进行色谱分析时使用的标准试剂，在色谱条件下只出现指定化合物的峰，不出现杂质峰。色谱纯的试剂杂质比分析纯的更少。

方法提要采用有机溶剂萃取，萃取液经净化 (或浓缩) 后，进行色谱分析。对于某些一硝基苯类，因其能随水蒸气蒸发，可采用先蒸馏再萃取，然后将萃取液注入具电子捕获检测器的气相色谱仪测定。方法适用于地表水、地下水和工业废水的测定。对 13 种在水中残留的硝基苯类化合物可同时分离测定，检出限如表82.51 所示。表82.51 种硝基苯类化合物的检出限在硝基苯的模拟水样中，存在甲苯、二甲苯、氯代苯、邻、间、对二氯苯、1，2，3 -三氯苯、三氯甲烷、四氯化碳和有机氯农药六六六的异构体，在柱温 160℃时，对本法无明显干扰。仪器气相色谱仪具电子捕获检测器(ECD，采用63Ni放射源)。500mL全玻璃蒸馏器。吸附富集管长12cm，内径0.6～0.7cm，下端带活塞的玻璃柱，内填装0.5～1gGDX-502大孔树脂，柱两端用硅烷化玻璃棉固定，在本法所用色谱分析条件下，用无干扰峰的苯洗脱。试剂纯水蒸馏水用苯洗涤，电炉煮沸3～5min，冷却后装瓶备用。无水硫酸钠400℃烘4h，放入干燥器中冷却，装瓶备用。苯用全玻璃蒸馏器重蒸馏，在色谱分析条件下应无干扰峰。固定液PEGA、DEGA、FFAP、OV-225。硝基苯类多种标准化合物硝基苯，邻、间、对硝基甲苯，二硝基甲苯各种异构体等，均为色谱纯试剂。硝基苯类标准储备溶液(约1000mg/L)称量硝基苯约100.0mg，放入100mL容量瓶中，加入少许乙醚溶解，加苯至刻度。用同样方法配制其他硝基苯类化合物的标准溶液。再根据需要配成不同浓度的标准混合溶液。GDX-502大孔树脂天津第二试剂厂产品，在脂肪抽提器中，依次经乙腈、乙醚、和苯各抽提6h，浸放于甲醇中备用。分析步骤1)样品制备。取样后，用盐酸调至pH为4左右，最好当天分析。进行色谱分析前，视水样的不同情况，分别进行处理。a.直接萃取法。适用于含硝基苯类化合物浓度较高(1.0μg/L以上)，而所含干扰杂质的成分不复杂的工业废水分析。摇匀水样，精确移取10.0～250mL，放入500mL分液漏斗中，加25.0mL苯，摇动，放出气体，再振摇萃取3～5min。静置分层5～10min，弃去水相，将苯萃取液通过无水硫酸钠柱干燥后，分取2～3mL苯萃取液，放入事先盛有少许无水硫酸钠的具塞离心管中，备色谱分析用。b.蒸馏-苯萃取法。适用于含杂质较复杂的工业废水和地表水中一硝基化合物或2，6-DNT、2，5-DNT的分析。用250mL量筒量取250mL水样，置入500mL蒸馏瓶中，加纯水至约300mL及数粒玻璃珠，装上蛇形冷凝管，在电炉上加热蒸馏，收集最初馏出液160mL于250mL容量瓶中，加入苯5.0mL，振摇3～5min，静置5min。从瓶口加入纯水至液面距瓶口1～1.5cm处，静置分层，然后从瓶口缓缓加入无水硫酸钠1～2g，待其通过苯层沉入水层后，移出苯萃取液(1～2)mL，置入事先盛有少许无水硫酸钠的具塞离心管中，供色谱分析用。c.“吸附富集柱”法。适用于含痕量硝基苯类化合物(μg/L)的地表水的监测分析。取水样500～1000mL以20～30mL/min流速通过GDX-502富集柱。然后通过N2吹出水液，加入3.0mL苯浸泡树脂5min，吸出苯液放入10mL具塞离心管中，再重复用2mL苯，连续浸泡、洗脱两次，合并苯液，用无水硫酸钠脱水(或转入K.D浓缩器中浓缩并定容)后，供色谱分析用。2)气相色谱分析。色谱柱，玻璃柱长2m，内径2～3mm。载体，ChromosorbWHP60～80目。固定相。(柱1)3%PEGA/ChromosorbWHP60～80目。(柱2)3%DEGA/ChromosorbWHP60～80目。载气，高纯氮，流速50mL/min。温度，柱老化按120℃(4h)→180℃(6h)→210℃(8h)3阶段进行。柱温，160℃(一硝基苯类)，200℃(二硝基苯类)。汽化室温度240℃，检测器240℃。进样量，5μL。3)标准色谱图。7种一硝基苯类化合物气相色谱图见图82.16，6种二硝基苯类化合物气相色谱见图82.17。图82.16 7种一硝基苯类化合物气相色谱图图82.17 6种二硝基苯类化合物气相色谱定性及定量分析根据试样溶液的色谱峰高，选择接近该浓度的标准溶液注入色谱仪，以外标法定量。水样中目标化合物(硝基苯类)的浓度计算如下:岩石矿物分析第四分册资源与环境调查分析技术式中:ρx为水样中目标化合物的浓度，μg/L;ρS为标准溶液中目标化合物浓度，μg/L;hS为标准峰高，mm;hx为试液峰高，mm;V1为标准溶液进样量，μL;V2为水样苯溶液进样量，μL;K为浓缩系数。

　　液相色谱中影响色谱峰扩展的因素有：样品池体积、连接管体积、时间常数（包括放大器及记录仪的时间常数）等。样品池体积大，使样品被流动相稀释，不仅会降低检测灵敏度，还使峰展宽。池的结构特点（几何形状）和池内的流动特性（从连接管到样品池由于直径变化引起的）都会影响峰展宽。　连接管对色谱峰扩展的影响，是由于流动相在空管中的流动速度分布的纵断面呈抛物线状，管中心的样品分子比管壁部分的样品分子先到达样品池，而样品分子在液体中的径向扩散很慢，因此引起了峰扩展。检测器的时间常数包括检测器传感器和电子元件的响应时间，传感器的响应较快，而检测器放大器和记录仪的时间常数有可能过大，使色谱峰变形失真，导致柱效下降，也影响色谱分析的可靠性和准确性。　设备的情况也会影响色谱峰扩展，如：　一、液相色谱放置平稳牢固。　　二、液相色谱有可靠的接地。　　三、高压气瓶要放置在阴凉、通风处，通过减压阀和机器连接。　　四、使用氢火焰时，应先开助燃气，后开氢气，关闭时应先关氢气，后关助燃气。注意氢瓶、减压 阀、连接管线是否泄漏。　　五、温控设备，压力表应按规定进行检定。　　色谱法也叫层析法，它是一种高效能的物理分离技术，将它用于分析化学并配合适当的检测手段，就成为色谱分析法。色谱法的最早应用是用于分离植物色素，其方法是这样的:在一玻璃管中放入碳酸钙，将含有植物色素(植物叶的提取液)的石油醚倒入管中。此时，玻璃管的上端立即出现几种颜色的混合谱带。然后用纯石油醚冲洗，随着石油醚的加入，谱带不断地向下移动，并逐渐分开成几个不同颜色的谱带，继续冲洗就可分别接得各种颜色的色素，并可分别进行鉴定。色谱法也由此而得名。但其分离的原理仍然是一样的。仍然叫它色谱分析。　　由以上方法可知，在色谱法中存在两相，一相是固定不动的，把它叫做固定相;另一相则不断流过固定相，把它叫做流动相。　　色谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的。　　使用外力使含有样品的流动相(气体、液体)通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。当流动相中携带的混合物流经固定相时，混合物中的各组分与固定相发生相互作用。　　由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中先后流出。与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。　　色谱分析法有很多种类，从不同的角度出发可以有不同的分类方法。　　从两相的状态分类:　　色谱法中，流动相可以是气体，也可以是液体，由此可分为气相色谱法(GC)和液相色谱法(LC)。固定相既可以是固体，也可以是涂在固体上的液体，由此又可将气相色谱法和液相色谱法分为气-液色谱、气-固色谱、液-固色谱、液-液色谱。　　另外，还有一种超临界流体色谱法(supercritical fluid chromatography SFC)，超临界流体色谱是值用超临界流体做流通相，以固体吸附剂(如硅胶)或键合到载体(或毛细管壁)上的高聚物为固定相的色谱法。超临界流体是在高于临界压力和临界温度时的一种物质状态，它既不是气体也不是液体，但兼有气体和液体的某些性质。　　高效液相色谱法(HPLC)是继气相色谱之后，70年代初期发展起来的一种以液体做流动相的新色谱技术。高效液相色谱是在气相色谱和经典色谱的基础上发展起来的。现代液相色谱和经典液相色谱没有本质的区别。不同点仅仅是现代液相色谱比经典液相色谱有较高的效率和实现了自动化 操作。经典的液相色谱法，流动相在常压下输送，所用的固定相柱效低，分析周期长。而现代液相色谱法引用了气相色谱的理论，流动相改为高压输送;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万);同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。因此，高效液相色谱具有分析速度快、分离效能高、自动化等特点。所以称它为高压、高速、高效或现代液相色谱法。

色谱图，其实简单地讲，是一个横坐标是时间，纵坐标是电信号的二维图谱。高效液相色谱法，你可以简单地想象，固定相是一个多空海绵状的柱形结构，样品在孔洞中进进出出。因为各个物质的吸附能力不同，所以才会在色谱图中拉开距离。和实验相关的参数：1、保留时间-也就是可以定性的数据参数如果使用同样的色谱柱，同样的流动相，分析同样的样品，那么这个样品的保留时间，应该是固定的。不同保留时间的色谱峰，应该表现出的是不同的物质。如果你跑的是反相色谱，那么色谱峰越靠后，它对应物质的极性也就越小。2、峰面积-也就是可以定量的数据参数这是你在色谱图中可以读出来的参数，在同一个色谱条件下，同一个物质的浓度和峰面积是成正比的。也就是说，如果你配制1.0mg/ml的X物质，进样后峰面积是10000，那么，你配制0.5mg/ml的X物质，进样后峰面积差不多就是50003、波长-这个是可以顺利进行试验的前提条件同一样品，同一方法，同一色谱柱，在不同波长的峰面积是不同的。一个物质指在某些特殊波长下有吸收。比如一个物质在210nm和254nm处有吸收。那么波长在280nm处可能无法检出该物质。所以一个实验方法开始时要进行波长扫描。

色谱定量分析是根据组分检测响应讯号的大小，定量确定试样中各个组分的相对含量。其依据是：每个组分的量(重量或体积)与色谱检测器产生的检测响应值(峰高或峰面积)成正比。具体到特定方法，主要有下列方法：1.归一化法当样品中所有组分能全部流出色谱柱，并在检测器上都能产生相应信号（得到色谱峰）时，常采用归一化法。Ci = mi/m×100％ = fiu2022Ai /Σ fiu2022Ai ×100％* 优点：简单方便， 不受进样量及操作条件波动的影响* 缺点：所有组分都必须出峰， 每个组分都必须有校正因子2.外标法（又称标准曲线法）配制已知浓度的标准样品进行色谱分析，测量各组分的峰面积或峰高，作峰面积(或峰高)和浓度的标准曲线，然后在与标准样品分析相同操作条件下，进入相同量(一般为体积)的未知样品，测得被分析组分的峰面积（或峰高），在标准曲线上即可查得相应的浓度。在工厂的日常控制分析中大多数采用这种方法，分析结果的准确性主要取决于进样量的重复性和操作条件的稳定性。Ci = mi/m×100％ = fiAi/m×100％* 校正：标准曲线、两点法、单点法 * 优点：简便、无需所有组分都出峰（校正因子），经常用于几个组分的分析* 缺点：操作条件波动的影响较大,进样量影响大3.内标法由于吸附或化学反应等原因，色谱柱不能使所有的组分都流出来，或者各组分都能流出，但检测器不能对所有组分都给出相应的色谱峰，或者有的样品含量过大（得不到完整的峰），或者过小，或者只要求定量分析复杂样品中几个组分，均可采用内标法。过程：在总量为m样品中如入质量为mS的内标物S，然后根据被测物和内标物的重量和在色谱图上相应的峰面积比求出某组分i,的含量mi/ms = fiAi / fsAsCi = mi/m ×100％= fiAi ms / fsAs m×100％* 优点：不需所有组分都出峰（校正因子），操作条件和进样量基本无影响* 缺点：内标物难找－－稳定无反应、结构性能，相似、保留时间内插并完全分离* 注意：内标法比较适用于低含量组分的分析， 一般选作内标物的物质，最好在样品中不存在，其保留值在所有组分保留值的中间，加入内标物的含量和待测组分含量不应相差很大。4.叠加法（内加法）内加法适用于较特殊的情况：图谱上没有适当位置可插入内标峰，或因各种条件限制无合适的内标物时。此时可先以样品出一张图，再在样品中加入一定量被测组分后再进样，看峰面积增加了多少，由此比例来求出原始含量。

计算含量的方法很多： 面积归一化法,外标法,内标法 常用的： 面积归一化法那很简单,配制一个供试品,进样分析.一个色谱峰代表一个物质,最大的那个通常是你的主峰,其余的基本都是杂质. 杂质（%）=杂质的峰面积/主峰峰面积*100%（这个数值在你的分析报告中应该可以看到） 如果是外标法或者内标法,你需要有对照品. 计算方法比较复杂,我就说个外标法,不需要校正因子的计算方法： 将对照品和样品配制相同浓度,分别进样分析. 含量（%）=样品峰面积/对照品峰面积*对照品浓度/样品浓度*100% 计算时你就记住,样品的峰面积和浓度呈正比.写完公式上下单位一致就完了.

主要分为三类：柱色谱、纸色谱以及薄层色谱。分类：1、柱色谱为向玻璃管中填入固定相，以流动相溶剂浸润后在上方倒入待分离的溶液，再滴加流动相，因为待分离物质对固定相的吸附力不同，吸附力大的固着不动或移动缓慢，吸附力小的被流动相溶剂洗下来随流动相向下流动，从而实现分离。2、纸色谱以滤纸条为固定相，在纸条上点上待分离的混合溶液的样点，将纸条下端浸入流动相溶剂中悬挂，溶剂因为毛细作用沿滤纸条上升，样点中的溶质从而被分离。3、薄层色谱是在玻璃板上涂以固定相涂层，然后点样，下端浸入溶剂，同样自下而上分离。常用于探索柱色谱实验条件，溶剂和固定相的选择等。色谱又称色层法或层析法，是一种物理化学分析方法，它利用不同溶质（样品）与固定相和流动相之间的作用力（分配、吸附、离子交换等）的差别，当两相做相对移动时，各溶质在两相间进行多次平衡，使各溶质达到相互分离。其他分类方法色谱法的分类方法很多，最初的分类是根据流动相的状态将色谱法分成四大类。色谱法按流动相种类的分类：

色谱定性的依据：由于各种物质在一定的色谱条件下均有确定的保留值，因此保留值可作为一种定性指标。目前各种色谱定性方法都是基于保留值的。但是不同物质在同一色谱条件下，可能具有相似或相同的保留值，即保留值并非专属的。因此仅根据保留值对一个完全未知的样品定性是困难的。如果在了解样品的来源、性质、分析目的的基础上，对样品组成作初步的判断，再结合下列的方法则可确定色谱峰所代表的化合物。按操作原理可分为柱色谱法及平板色谱法等。色谱法已成为应用最广、药典收载最多的一类分析方法。扩展资料在农业中，可以用气相色谱法测定农药残留、氨基酸、维生素、激素、碳水化合物、脂类、核酸等，也可以分析一些金属离子和大气中的二氧化碳、二氧化硫、硫化氢、甲烷等。高效液相色谱法可以分析维生素、生物碱、激素、氨基酸、农药、核酸、香豆素、脂类等有机物。它还可以测定一些无机离子和金属元素。离子色谱是一种分析无机和有机离子的液相色谱技术。它能测定数百种阴离子、阳离子和化合物。它最适用于多组分多元素的同时分析。该方法选择性好，样品用量少，灵敏度高，易于自动化。它是分析水中阴离子的最佳方法，主要应用于环境水样的测定。参考资料来源：百度百科--色谱的定性分析

色谱过程的本质是待分离物质分子在固定相和流动相之间分配平衡的过程，不同的物质在两相之间的分配会不同，这使其随流动相运动速度各不相同，随着流动相的运动，混合物中的不同组分在固定相上相互分离。根据物质的分离机制，又可以分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、凝胶色谱、亲和色谱等类别。 吸附色谱利用固定相吸附中心对物质分子吸附能力的差异实现对混合物的分离，吸附色谱的色谱过程是流动相分子与物质分子竞争固定相吸附中心的过程吸附色谱的分配系数表达式如下：K_a =frac{[X_a]}{[X_m]}其中[Xa]表示被吸附于固定相活性中心的组分分子含量，[Xm]表示游离于流动相中的组分分子含量。分配系数对于计算待分离物质组分的保留时间有很重要的意义。 分配色谱利用固定相与流动相之间对待分离组分溶解度的差异来实现分离。分配色谱的固定相一般为液相的溶剂，依靠图布、键合、吸附等手段分布于色谱柱或者担体表面。分配色谱过程本质上是组分分子在固定相和流动相之间不断达到溶解平衡的过程。分配色谱的狭义分配系数表达式如下：K=frac=frac{X_s/V_s}{X_m/V_m}式中Cs代表组分分子在固定相液体中的溶解度，Cm代表组分分子在流动相中的溶解度。离子交换色谱　离子色谱分析法出现在20世纪70年代，80年代迅速发展起来，以无机、特别是无机阴离子混合物为主要分析对象。离子交换色谱利用被分离组分与固定相之间发生离子交换的能力差异来实现分离。离子交换色谱的固定相一般为离子交换树脂，树脂分子结构中存在许多可以电离的活性中心，待分离组分中的离子会与这些活性中心发生离子交换，形成离子交换平衡，从而在流动相与固定相之间形成分配。固定相的固有离子与待分离组分中的离子之间相互争夺固定相中的离子交换中心，并随着流动相的运动而运动，最终实现分离。离子交换色谱的分配系数又叫做选择系数，其表达式为：K_s=frac{[RX^+]}{[X^+]}其中[RX + ]表示与离子交换树脂活性中心结合的离子浓度，[X + ]表示游离于流动相中的离子浓度。 1．物理吸附又称表面吸附，是因构成溶液的分子（含溶质及溶剂）与吸附剂表面分子的分子间力的相互作用所引起的。a) 基本规律：“相似者易于吸附”，固液吸附时，吸附剂、溶质、溶剂三者统称为吸附过程的三要素。b) 基本特点：无选择性、可逆吸附、快速。c) 基本原理：吸附与解吸附的往复循环。d) 三要素：吸附剂、溶质(被分离物)、溶剂。色谱柱物理吸附过程：吸附——解吸附——再吸附——再解析——直至分离2．化学吸附a) 基本特点：有选择性、不可逆吸附。b) 基本原理：产生化学反应。酸性物质与Al2O3发生化学反应；碱性物质与硅胶发生化学反应；Al2O3容易发生结构的异构化，应尽量避免。3．半化学吸附1）基本特点：介于物理吸附和化学吸附之间。2）基本原理：以氢键的形式产生吸附。如聚酰胺对黄酮类、醌类等化合物之间的氢键吸附，力量较弱，介于前两者之间，也有一定的应用。 吸附剂的一般要求：较大的表面积与一定的吸附能力。不与展开剂起化学变化，不与待分离的物质产生反应或催化、分解或缔合，颗粒均匀。1．极性吸附剂硅胶，氧化铝均为极性吸附剂，特点为：a) 对极性物质具有较强的亲和能力，极性强的溶质将被优先吸附。b) 溶剂极性较弱，则吸附剂对溶质将表现出较强的吸附能力。溶剂极性增强，则吸附剂对溶质的吸附能力随之减弱。c) 溶质即使被硅胶、氧化铝吸附，但一旦加入极性较强的溶剂时，又可被后者置换洗脱下来。极性强弱的判断 (与功能基的种类、数目多少和排列方式有关) ：亲水性基团与极性成正比，亲脂性基团与极性成反比；游离型化合物极性弱、具亲脂性，解离型化合物极性强、具亲水性；溶剂的极性—依据介电常数来决定。色谱试剂2．聚酰胺聚酰胺吸附剂可分包括锦纶6（聚己内酰胺）和锦纶66（聚己二酰己二胺），为氢键吸附，半化学吸附。聚酰胺分子中有许多酰胺基，聚酰胺上的C=O与酚基，黄酮类、酸类中的-OH或-COOH形成氢键。酰胺基中的氨基与醌类或硝基类化合物中的醌基或硝基形成氢键。由于被分离物质的结构不同，或同一类结构化合物中的活性基团的数目及位置的不同而是之于聚酰胺形成氢键的能力不同而得到分离。3．活性炭活性炭为非极性吸附剂，故与硅胶、氧化铝相反，对非极性物质具有较强的亲和能力，在水中对溶质表现出强的吸附能力。溶剂极性降低，则活性炭对溶质的吸附能力也随之降低。吸附剂的吸附力一定时，溶质极性越强，洗脱剂的极性越弱。 吸附薄层色谱法是指根据各成分对同一吸附剂吸附能力不同，使在移动相（溶剂）流过固定相（吸附剂）的过程中，连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附，从而达到各成分的互相分离的目的。

GC（气相色谱）主要是利用物质的沸点、极性及吸附性质的差异来实现混合物的分离。待分析样品在汽化室汽化后被惰性气体（即载气，也叫流动相）带入色谱柱，柱内含有液体或固体固定相，由于样品中各组分的沸点、极性或吸附性能不同，每种组分都倾向于在流动相和固定相之间形成分配或吸附平衡。但由于载气是流动的，这种平衡实际上很难建立起来。也正是由于载气的流动，使样品组分在运动中进行反复多次的分配或吸附/解吸附，结果是在载气中浓度大的组分先流出色谱柱，而在固定相中分配浓度大的组分后流出。当组分流出色谱柱后，立即进入检测器。检测器能够将样品组分转变为电信号，而电信号的大小与被测组分的量或浓度成正比。当将这些信号放大并记录下来时，就是气相色谱图了。气相色谱分析应用气相色谱分析是重要的仪器分析手段之一，它具有分离效能高、分析速度快、灵敏度高、对复杂的多组分混合物定性与定量分析结果准确，容易自动化、高选择性等特点。日益广泛地应用于石油、精细化工、医药、生化、电力、白酒、矿山、环境科学等各个领域，成为工农业生产、科研、教学等部门不可缺少的重要分离、分析工具。

色谱分析常用的定量方法：归一化法、内标法和内加（增量）内标法、外标法。　　1、面积归一化法优点是简便、准确，当操作条件变化时对结果影响较小，宜于分析多组分试样中各组分的含量。但是试样中所有组分必须全部出峰，因此，此法在使用中受到一定限制。　　2、外标法是用纯物质配成一系列不同浓度的标准溶液（或直接购买不同浓度标准溶液）分别取一定体积，注入色谱仪，根据峰面积和浓度做标准曲线。在分析未知样时按与标准曲线相同的操作条件和方法，由标准曲线查出所需组分的浓度（现在在工作站上直接就能求出浓度）。此法要求进样准确，操作条件稳定，分析样品和标准曲线条件必须一致。　　3、内标法是试样中所有组分不能全部出峰或只要求测定试样中某个或某几个组分时，可采用此法。内标法是在准确称取一定量的试样中，加入一定的标准物质（内标物），根据内标物和试样的质量以及色谱图上的相应峰面积，计算待测组分的含量。内标法的关键是选择合适的内标物，内标物应是试样中不存在的纯物质，物质与被测物质相近，能溶于样品中，但不能于样品发生反应。此法比较费事，一般不使用于快速分析。

如果你问的是色谱仪的操作,那么大致需要以下几步： 1.安装色谱柱.如果是新柱子要先老化. 2.检漏. 3.设置升温程序、载气流速等参数. 4.进空白样.谱图除溶剂峰外为一直线就可以做样了. 5.进样分析.

20～50mg试样用NH4I使锡挥发，重量法测定锡。试样再用HF溶解，经纸色谱分离后分别测定Nb2O5、Ta2O5、MnO、TFe2O3等12个组分，其分析流程见图70.6。图70.6 铌(钽)铁(锰)矿纸色谱分离-半微量分析流程图试剂色层纸新华层析滤纸中速1号，30cm×20cm，其2/3涂以50g/LNH4NO3溶液，晾干。展开剂甲基异丁基酮-氢氟酸-硝酸(88+8+4)。氧化剂混合溶液将200mLH2SO4倒入100mL(1+2)H3PO4中，加8gKI，溶解后混匀。二苯酰基甲烷溶液称取2g二苯酰基甲烷、13gEDTA，置于1000mL烧杯中，加入510mL无色吡啶，再加35mL氨水、470mL水，混匀。用时现配。六次甲基四胺-盐酸缓冲溶液(pH5.5)300g/L六次甲基四胺与!(HCl)=0.8%等体积混合。分析步骤(1)二氧化锡的测定称取20～50mg(精确至0.01mg)试样，置于铂坩埚中，在950℃灼烧至恒量。加入0.5gNH4I，搅匀，表面再覆盖一层，置于高温炉中，在425～475℃灼烧至棕色气体完全消失(灼烧温度达500℃时会引起铁的损失)。取出，冷却，加1mLHNO3，低温蒸干，再放入高温炉中，逐渐升温至950℃灼烧至恒量。失去的量为二氧化锡量。(2)铌和钽的测定于测定锡后的铂坩埚中，加入1mLHNO3、5mLHF，加盖，加热至试样完全分解。蒸发至接近干后，加5mLHF，再蒸发至近干。取下，加2mLHF并蒸发至0.5～1mL。冷却后，涂在距色层纸下端4～5cm处，用少许HF洗坩埚2次，亦涂在色层纸上，再用甲基异丁基酮洗3次，涂于色层纸上。晾干后，放入盛有展开剂的色谱箱中，层析至有机溶剂扩散到17～18cm处，取出。晾干后，放入氨气箱中，10min后取出。待色层纸干后，喷上20g/L单宁溶液，此时显出黄色的钽带、橙色的铌带，其他元素留在原点。铌、钽的Rf值分别为0.65、0.97，其他元素为0。待色层纸干后，剪下钽、铌带，分别放入已恒量的铂坩埚中，低温灰化后，在800～850℃灼烧至恒量。同时作空白测定，按色层纸的面积扣除空白值。必要时色层纸可先经氢氟酸-盐酸浸洗后再用，以降低空白值。(3)系统分析溶液的制备将剪去铌、钽带后剩余的杂质色带剪下，置于瓷坩埚中灰化，在750～800℃灼烧15min。取出，冷却后，加入0.5gK2S2O7熔融，冷后，再加5滴H2SO4反复处理两次，将坩埚放入100mL烧杯中，用50mL(5+95)H2SO4加热浸取。冷后，移入100mL容量瓶中，用(5+95)H2SO4稀释至刻度，摇匀。所得溶液供测定锰、铁、钛、钙、镁、钨、铝、锆(铪)、铀和稀土总量之用。(4)氧化锰的测定移取5.0mL试液，置于100mL烧杯中，加35mL水及7.5mL氧化剂混合溶液，混匀。加热煮沸10min，取下，冷后移入50mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。用2cm比色皿，于波长520nm处测量吸光度。校准曲线0～400μgMnO。(5)全铁的测定移取5.0mL试液，置于50mL容量瓶中，用水稀释至10mL，用磺基水杨酸光度法测定。校准曲线0～140μgFe2O3。(6)二氧化钛的测定移取10.0mL试液，置于50mL容量瓶中，用二安替比林甲烷光度法测定。校准曲线0～100μgTiO2。(7)氧化钙、氧化镁的测定移取20.0mL试液，置于25mL容量瓶中，加入镧盐溶液，用原子吸光光谱法测定。(8)三氧化钨的测定移取5.0～10.0mL试液，置于50mL比色管中，用(5+95)H2SO4稀释至10mL。加2mL250g/LKSCN溶液，摇匀，加13mLHCl，冷却。加1mL新配制的10g/L次亚磷酸钠溶液、4滴200g/LSnCl2，摇匀后，滴加TiCl3溶液至紫色。放置20min后，加10.0mL(3+7)乙酸乙酯-苯萃取1min。待分层后吸取有机相放入1cm比色皿中，于波长410nm处测量吸光度。校准曲线0～12μgWO3。(9)三氧化二铝的测定移取5.0mL试液，置于5mL烧杯中，加热至三氧化硫冒尽。取下，冷却，用2滴盐酸及少量水温热溶解，移入25mL容量瓶中。用铬天青S光度法测定。(10)氧化锆(铪)的测定移取10.0mL试液，置于25mL烧杯中，蒸至近干后，取下。加12.5mL2mol/LHCl，用水稀释至40mL。加数滴10g/L抗坏血酸溶液、2mL2g/L苦胺酸R溶液，置于水浴上，在50～60℃加热15min。冷却后，移入50mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。用2cm比色皿，于波长560nm处测量吸光度。校准曲线0～60μgZrO2。(11)八氧化三铀的测定移取5.0mL试液，置于50mL具塞比色管中，加1mL500g/L酒石酸溶液、18mL二苯酰基甲烷显色剂溶液(此时溶液pH应≥7)及5.0mL乙酸异戊酯，轻轻摇动10次，放置1h，用1cm比色皿，于波长410nm处测量吸光度。校准曲线0～35μgU3O8。(12)稀土总量的测定移取5.0～10.0mL试液，置于小烧杯中，蒸干，加3mL!(HCl)=0.8%，温热浸取，冷却，移入分液漏斗中。加1mL250g/L磺基水杨酸溶液、少许抗坏血酸、1滴2g/L溴甲酚绿指示剂，用300g/L六次甲基四胺溶液中和至黄绿色，加3mL六次甲基四胺-盐酸缓冲溶液、10mL0.04mol/LPMBP-苯溶液，萃取1min。分层后，弃去水相，有机相用pH>5的水洗涤一次，弃去水相。立即加入10mL!(CHOOH)=0.3%反萃取1min，分层后，将水相放入10mL干燥具塞比色管中，用!(CHOOH)=0.3%稀释至刻度。加1mL10g/L抗坏血酸溶液、2mL0.5g/L偶氮胂Ⅲ溶液，混匀。用2cm比色皿，于波长650nm处测量吸光度。校准曲线0～10μgRE2O3。(13)氧化亚铁的测定称取2～5mg(精确至0.01mg)试样，放入干燥的40mL聚乙烯瓶中，加50mg二氧化硅粉末。在另一塑料瓶中小心混合等体积的氢氟酸和硫酸，发热几秒钟后，趁热用塑料吸管吸2mL混合酸，加入盛试样的塑料瓶中，待大量气体冒出后，立即用塑料塞塞紧，将瓶子浸在沸水中加热10～15min(1h内无影响)。取下，快速冷却，加10mL500g/L硫酸铍溶液，迅速转入预先盛有25mL500g/L乙酸铵溶液、10mL100g/L柠檬酸钠溶液和5mL1g/L1，10-邻二氮菲溶液的100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。10min后，用1cm比色皿，于波长510nm处测量吸光度。同时绘制校准曲线。最好用已知氧化亚铁含量的标准物质按同样方法处理作为标准。

　　液相色谱影响色谱峰扩展的因素　　在高效液相色谱法中，除了追求通用性和高灵敏外，由于色谱柱体积小，且溶质在液相中扩散系数很低，柱外效应对色谱峰扩展是个不可忽略的因素。柱外效应直接影响了色谱系统的最小检测量，而且间接限制了容量因子的最大值，应尽可能减小。随着快速柱和微径柱的发展，检测系统造成的峰展宽问题就显得更为重要了。检测系统造成峰展宽的主要来源是：柱外死体积，包括样品池体积和连接管体积；时间常数，包括放大器及记录仪的时间常数等。　　样品池体积是检测器的重要参数。池体积大，使样品被流动相稀释，不仅会降低检测灵敏度，还使峰展宽。除了池体积大小的影响外，池的结构特点（几何形状）和池内的流动特性（从连接管到样品池由于直径变化引起的）都会影响峰展宽，极端情况就是在池内发生完全的湍流混合。此时检测池内产生的色谱峰扩展等于检测池体积，这是检测池内色谱峰扩展的上限，实际上不存在完全的紊乱混合。有关研究表明，只要检测池体积Vd小于色谱峰体积Vp（决定于容量因子k"）的十分之一（即Vd<0.1Vp）时，检测池造成的峰扩展就不严重。目前使用的检测池体积大多数都小于等于8μL，对于常规分析一般没有多大影响。另外，当使用小体积高效柱时，检测池引起的峰扩展，与使用常规液相色谱柱相比，对出峰早的化合物（k;<2）尤为重要。故希望检测池体积小于5μL，微量色谱柱的体积应减少到1μL，甚至更小。　　连接管对色谱峰扩展的影响，是由于流动相在空管中的流动速度分布的纵断面呈抛物线状，管中心的样品分子比管壁部分的样品分子先到达样品池，而样品分子在液体中的径向扩散很慢，因此引起了峰扩展。样品池和连接管对峰扩展的贡献有可能使在色谱柱上已经分离了的组分在样品池中又重叠混合。检测池与色谱柱出口的连接，或者几个检测器之间的连接，应采用细内径连接管并控制最短的距离，以使峰扩展最小。但应注意，连接管内径减小时，管内压力降会有所增加。　　检测器的时间常数也叫响应时间，定义为从样品进入检测池到真实信号输出,63.2%的时间，用"表示，是样品进入检测器产生响应信号时间的度量，反映了检测器跟踪组分浓度变化的快慢。　　检测器的时间常数包括检测器传感器和电子元件的响应时间，它间接对色谱系统的最小检测量和最低检测浓度产生影响。一般说来，传感器的响应较快。而检测器放大器和记录仪的时间常数有可能过大，使色谱峰变形失真，导致柱效下降，也影响色谱分析的可靠性和准确性。对保留值小的组分及进行快速分析时，问题就显得更为突出，尤其需要使用时间常数小的检测器和记录仪。目前使用的检测器和记录仪的时间常数一般在0.5s-1.0s 就是合适的。需要特别注意的是，当进行高灵敏度检测时，自动加上去的滤波电路的时间常数可达1.5s。另　　外，检测器的时间常数也决定于检测器的死体积。对浓度型检测器，死体积越小，浓度变化越快，则时间常数越小。有研究表明，为了测定色谱柱的“真实柱效”，应使用时间常数很小的检测器（τ<0.1s），或使用容量因子k"大于或等于6的溶质进行。

1.基本原理生物标志物是指发现于地质体中的化学性质稳定、碳骨架结构具有明显生物起源特征的有机化合物。如甾类和萜类化合物烷。这类生物标志化合物一般用色谱-质谱（GC-MS）或色谱-质谱-质谱（GC-MS-MS）连用仪分析鉴定，这种连用仪的特点是充分发挥GC的高分离效能和MS的高鉴别能力之特长，这样即使有些化合物分不开，靠质量碎片也能把其鉴别出来。样品注入GC气化室，气化后随载气进入毛细柱，分离成的单一组分，依次进入MS离子源。当化合物进入离子源时，用能量为70eV或低于70eV的电子束轰击，化合物就会失去一个电子变成等质量的分子离子，不同质量的分子离子或碎片离子（A+、B+、C+等）可在多个轨道中运行，经离子光学系统将其聚焦成具有一定速度的离子束，射入连续改变磁场强度的质量分析器，使具有不同质量的离子按从小到大的顺序进行方向、能量聚焦，并通过收集狭缝射到电子倍增器上，放大后被计算机采集下来，经数据系统处理，即可得到定性用的质谱图或质量碎片图。2.样品要求测定甾烷、萜烷的饱和烃组分，应按有机质族组分柱层析分析方法获取；当正构烷烃含量高时，会影响检测效果，应采用尿素络合或分子筛除去。色谱进样方式为样品直接或用溶剂稀释后分流或无分流进样。质谱离化方式为电子轰击；分辨率大于500 或全质量范围为一个质量单位，扫描方式为全扫描或多离子检测（MID）。3.地质应用色谱-质谐分析鉴定所提供的萜烷、甾烷有机地化指标，是目前公认的可靠和有效的有机地化参数，主要用于生油岩评价（类型、成熟度）、油源对比、原油运移、生物降解、原油类型的划分、沉积环境的研究等方面，都取得了明显效果，有效地指导了油气勘探工作。

色谱又称色层法或层析法，是一种物理化学分析方法，它利用不同溶质（样品）与固定相和流动相之间的作用力（分配、吸附、离子交换等）的差别，当两相做相对移动时，各溶质在两相间进行多次平衡，使各溶质达到相互分离。分类柱色谱为向玻璃管中填入固定相，以流动相溶剂浸润后在上方倒入待分离的溶液，再滴加流动相，因为待分离物质对固定相的吸附力不同，吸附力大的固着不动或移动缓慢，吸附力小的被流动相溶剂洗下来随流动相向下流动，从而实现分离。纸色谱以滤纸条为固定相，在纸条上点上待分离的混合溶液的样点，将纸条下端浸入流动相溶剂中悬挂，溶剂因为毛细作用沿滤纸条上升，样点中的溶质从而被分离。薄层色谱是在玻璃板上涂以固定相涂层，然后点样，下端浸入溶剂，同样自下而上分离。常用于探索柱色谱实验条件，溶剂和固定相的选择等。常用固定相有石膏、氧化铝、蔗糖、淀粉等，常用流动相为水、苯等各种有机溶剂。色谱法的应用可以根据目的分为制备性色谱和分析性色谱两大类。制备性色谱的目的是分离混合物，获得一定数量的纯净组分，这包括对有机合成产物的纯化、天然产物的分离纯化以及去离子水的制备等。相对于色谱法出现之前的纯化分离技术如重结晶，色谱法能够在一步操作之内完成对混合物的分离，但是色谱法分离纯化的产量有限，只适合于实验室应用。分析性色谱的目的是定量或者定性测定混合物中各组分的性质和含量。定性的分析性色谱有薄层色谱、纸色谱等，定量的分析性色谱有气相色谱、高效液相色谱等。色谱法应用于分析领域使得分离和测定的过程合二为一，降低了混合物分析的难度缩短了分析的周期，是比较主流的分析方法。在中华人民共和国药典中，共有超过约600种化学合成药和超过约400种中药的质量控制应用了高效液相色谱的方法。

色谱纯分为以下几种，英文缩写分别为：一级 优级纯 ，缩写为GR二级 分析纯，缩写为 AR三级 化学纯，缩写为 CP生化试剂 生化试剂，缩写为 BR拓展资料：色谱纯一般是指色谱专用溶剂或者试剂，按照国家标准，根据试剂中所含杂质的多少，划分以下为四个等级：“优级纯、分析纯、色谱纯、色谱试剂”比较：色谱纯：色谱纯试剂是在最高灵敏度下以10-10克下无杂质峰来表示的。是指进行色谱分析时使用的标准试剂，在色谱条件下只出现指定化合物的峰，不出现杂质峰。优级纯（GR）：绿色标签，用于精密分析试验，可作为基准物质。分析纯（AR）：红色标签，指做分析测定用的试剂，杂质更少，不妨碍分析测定。化学纯（CP）：蓝色标签，指一般化学试验用的，有较少的杂质，不妨碍实验要求。生化试剂（BR）：是指有关生命科学研究的生物材料或有机化合物，以及临床诊断、医学研究用的试剂。优级纯PK色谱纯优级纯与色谱纯纯度都很高。试剂纯度级别：农残级>色谱级>优级纯>分析纯。色谱纯是指色谱专用溶剂或者试剂，在低波长处的透光率比较好；也特指进行色谱分析时使用的标准试剂，在色谱条件下只出现指定化合物的峰，不出现杂质峰，避免了一些不良影响。色谱纯主要是指对吸光物质的限量作为指标考察。优级纯的试剂里含有微量（甚至痕量）的具有紫外吸收的物质，对于化学反应来说，这些物质可能并不影响，但是做液相实验干扰就大了。常用于精密分析试验，可作为基准物质。一般情况下都用色谱纯，在气质时用农残级。色谱试剂PK色谱纯试剂色谱纯是指试剂的纯度。色谱试剂：是指试剂应用的对象，是指用于色谱分析、色谱分离、色谱制备的化学试剂。对试剂没有强制的纯度或一定数据数值规定。色谱纯试剂：纯度很高，除要求含量高以外，还对微尘、水分都有很高的要求，属于高纯试剂的范畴。结论：纯度要求上，色谱纯试剂>色谱试剂

三国演义图册V百科往期回顾

有色谱级的试剂，没有什么农残级的，可能是样品吧

气相分析操作条件的确定在气相色谱分析中,我们要快速有效的分离一个复杂的样品，并获得满意的结果，除了要选择一根最佳色谱柱以外，还要对分离操作条件进行仔细的选择。色谱柱的好坏关系到分离的效果，而分离条件的设置又影响着色谱柱的分离。色谱柱和分离操作条件之间是是相辅相成的关系。本文将主要介绍气相分析操作条件的确定。初始操作条件的确定确定初始操作条件;色谱柱形式的选择;分离条件优化;程序升温。1、确定初始操作条件进样量要根据样品浓度、色谱柱容量和检测器灵敏度来确定。样品浓度不超过mg/ml时填充柱的进样量通常为1~5μL，而对于毛细管柱，若分流比为50：1时，进样量一般不超过2μL。如果这样的进样量不能满足检测灵敏度的要求，可考虑加大进样量，但以不超载为限。进样口温度主要由样品的沸点范围决定，还要考虑色谱柱的使用温度。即首先要保证待测样品全部气化，其次要保证气化的样品组分能够全部流出色谱柱，而不会在柱中冷凝。原则上讲，进样口温度高一些有利，一般要接近样品中沸点最高的组分的沸点，但要低于易分解组分的分解温度，常用的条件是250~350℃。实际操作中，进样口温度可在一定范围内设定，只要保证样品完全汽化即可，而不必进行很精确的优化。注意，当样品中某些组分会在高温下分解时，就应适当降低汽化温度。必要时可采用冷柱上进样或程序升温汽化(PTV)进样技术。色谱柱温度的确定主要由样品的复杂程度和汽化温度决定。原则是既要保证待测物的完全分离，又要保证所有组分能流出色谱柱，且分析时间越短越好。组成简单的样品最好用恒温分析，这样分析周期会短一些。特别是用填充柱时，恒温分析时色谱图的基线要经程序升温时稳定得多。对于组成复杂的样品，常需要用程序升温分离，因为在恒温条件下，如果柱温较低，则低沸点组分分离得好，而高沸点组分的流出时间会太长，造成峰展宽，甚至滞留在色谱柱中造成柱污染;反之，当柱温太高时，低沸点组分又难以分离。毛细管柱的一个最大优点就是可在较宽的温度范围内操作，这样既保证了待测组分的良好分离，又能实现尽可能短的分析时间。一般来讲，色谱柱的初始温度应接近样品中最轻组分的沸点，而最终温度则取决于最重组分的沸点。升温速率则要依样品的复杂程度而定。建议毛细管柱的尝试温度条件设置为：OV-1(SE-30)或SE-54柱：从50℃到280℃，升温速率10℃/min;OV-17(OV-1701)柱：从60℃到260℃，升温速率8℃/min;PEG-20M柱：从60℃到200℃，升温速率8℃/min。检测器的温度是指检测器加热块温度，检测器温度的设置原则是保证流出色谱柱的组分不会冷凝同时满足检测器灵敏度的要求。大部分检测器的灵敏度受温度影响不大，故检测器温度可参照色谱柱的最高温度设定，而不必精确优化。载气流速的确定相对容易一些，开始可按照比最佳流速(氮气约为20cm/s，氦气约为25cm/s，氢气约为30cm/s)高10%来设定。然后再根据分离情况进行调节。原则是既保证待测物的完全分离，又要保证尽可能短的分析时间。用填充柱时，载气流速一般设为30ml/min。空气，300~400ml/min;氢气30~40ml/min;氮气(尾吹气)30~40ml/min。

是用来定量的，有标样的话，可以定性

归一化法外标校正内标校正标准加入法；　　外标法，内标法，面积归一法，标准加入法。面积归一法适用于较纯的试剂，可进一定量，根据面积算出含量。标准加入法：仲裁法，比较准确，除去溶剂基质对定量的影响。内标法使用于样品前处理较复杂的样品，如萃取，衍生等等，只要内标与标准品保持统一的浓度就可以准确定量了。分析测试百科网，分析行业的百度知道，有问题可找我，百度上搜下就有。

气相色谱分析，通常需要借助标准物质的流出顺序，来判断样品中是哪个物质。

用分析柱子在同等色谱条件下(同样的固定相和流动相)测定保留时间后，按照单一组分的线流速(不是体积流速)一定，通过计算可以知道组分的大致保留时间区域。分析谱图的峰形状，对确定保留时间也有很大的参考价值。手工馏分收集费时费力，自动馏分收集器有很大的方便。许多实验室和工厂都采用了馏分收集器。载、边缘切割、中心切割、放大技术与非线性效用，在制备色谱中，因为没有必要达到分析色谱那样的分离度，可以在一定范围内大大加大进样的浓度和体积。在做分离的时候，也有一些分析色谱的时候，不能用到的技巧。

物质的分析

http://wenku.baidu.com/view/900e221ea76e58fafab003f3.html

试剂规格基本上按纯度(杂质含量的多少)划分，共有高纯试剂、光谱纯试剂、基准试剂、分光纯试剂、优级纯试剂、分析试剂和化学纯试剂等7种。试剂纯：是指一般化学试验用的，有较少的杂质，不妨碍实验要求。分析纯：是指做分析测定用的试剂，杂质更少，不妨碍分析测定。色谱纯：色谱纯试剂是在最高灵敏度下以10-10克下无杂质峰来表示的。是指进行色谱分析时使用的标准试剂，在色谱条件下只出现指定化合物的峰，不出现杂质峰。

……吐血

色谱法是一种利用各组分在两相中性能上的差异，使混合物中各组分分离的技术。它是分离、纯化有机物或无机物的一种重要方法，对于复杂混合物、相似化合物的异构体或同系物等的分离非常有效。将色谱法与适当的监测器结合，就构成了色谱分析法。其一般原理是当混合物随流动相流经色谱柱时，会与柱中固定相发生作用（溶解、吸附等），由于混合物中各组分物理化学性质和结构上的差异，与固定相发生作用的大小、强弱不同，在同一推动力作用下，各组分在固定相中的滞留时间不同，从而使混合物中各组分按一定顺序从柱中流出。色谱分析法分类按两相状态：气相色谱（GC）流动相是气体的色谱法，常用流动相有氮气、氢气、氦气等。液相色谱（LC）流动相是液体的色谱法，常用流动相有水、甲醇。超临界流体色谱（SFC）使用超临界流体作为色谱流动相的，常用的超临界流体有二氧化碳、氨气、乙醇、甲醇。它是集气相色谱法和液相色谱法的优势而发展起来的一种新型的色谱分离分析技术，不仅能够分析气相色谱不宜分析的高沸点、低挥发性的试样组分，而且具有比液相色谱更快的分析速率和更高的柱效率。按操作形式：柱色谱（CC）固定相装在柱管内的色谱法。可分为两类：一类是固定相填充于玻璃或金属管内的叫填充柱色谱；另一类是固定相附着或键合在管内壁上，中心是空的，叫空心毛细管柱色谱或毛细管柱色谱纸色谱（PC）固定相为滤纸的色谱法。它是采用适当溶剂使样品在滤纸上展开而进行分离的。薄层色谱（TLC）固定相压成或涂成薄层的色谱法。制作方法同纸色谱。按分离原理：吸附色谱 利用固体吸附剂（固定相）表面对各组分吸附能力强弱的不同进行分离分配色谱 利用固定液对各组分的溶解能力（分配系数）不同进行分离离子交换色谱 利用离子交换剂（固定相）对各组分的亲和力不同进行分离凝胶色谱 也叫空间排阻色谱。利用某些凝胶（固定相）对分子大小、形状不同的组分所产生的阻滞作用不同而进行分离

因为物质的出峰时间与它跟固定相和流动相的亲和力有关，与固定相的作用力越强，在色谱柱中停留的时间就越长，出峰时间或者说保留时间就越长，反之，越短。当测定条件确定后，色谱柱、流动相以及仪器其它条件一定后，出峰时间就依赖于被测物质的性质了，不同的物质，保留时间有区别，即测定条件确定后，物质的保留时间也就不变了，所以，通过与标准品对照，就可以进行定性了。

横坐标是保留时间，纵坐标是UV的吸收峰，物质浓度和对应峰面积成正比。色谱图简介：色谱图，又称色谱流出曲线，是指被分离组分的检测信号随时间分布的图象。色谱图形状随色谱方法和检测记录的方式不同而不同，迎头色谱和顶替色谱的色谱图为一系列台阶；在洗脱法色谱中，若采用微分型检测器时，分离组分的检测信号随时间变化的图形为近似于高斯分布的一组色谱峰群，色谱图的纵坐标为检测器的响应信号，横坐标为时间、体积或距离。

和液相一样。横轴是保留时间，纵轴是峰面积。 保留时间保留时间是特征参数，就是说一个色谱峰对应一个物质。气相和液相不同，其中会有一个很大的溶剂峰。峰面积这个是从色谱图中可以读出来的参数。在同一个实验条件下，同一个物质的浓度和峰面积是成正比的。也就是说，如果你配制10000ppm的乙醇，进样后峰面积是10000，那么，你配制5000ppm的乙醇，进样后峰面积差不多就是5000一般检查气相是按照标准定位，依靠保留时间确定物质的特征参数，然后由峰面积计算样品中的溶剂浓度。

甲烷浓度分析是由中国科学院大气物理所大气边界层物理和大气化学国家重点实验室的HP5890气相色谱仪测定的，该气相色谱仪的进样系统、分析气路和阀驱动系统都进行了改装，可以检测空气样品的CH4、CO2和N2O。 该仪器改造后的灵敏度、分辨率和精密度均很高，线性范围符合要求，如下所述：1. 气相色谱法分析系统的原理、构造和分析流程其基本原理是通过自编微机程序发出指令控制电路、气路系统和信号接收，电磁阀通过开关量改变管线中气流流量和方向以达到对色谱自动进样、分析和清洗的目的。 气路（见图5.3）共由3部分组成，即气源部分（Ⅰ）、自动进样部分（Ⅱ）和分析检测部分（Ⅲ）。第Ⅰ部分由高压钢瓶、气体发生器和过滤器组成。 高压钢瓶提供高纯（99.999％） 氮气和高纯（99.99％）氢气，干燥纯净空气则由空气发生器供应。 高纯氮气经分子筛过滤，除掉微量水分和烃类杂质后（C0）分为两路，其中一路再分成三路：作为自动进样分析部分CH4（C1）、CO2（C2） 的分析载气和N2O进样分析系统前置柱（Col3）的反吹气（C3）；另一路则通过脱氧过滤器使其微量氧气下降到1μmol/mol以下，再分成两路：作为ECD的清洗气（C4） 和N2O进样分析系统的载气（C5）。 空气发生器产生的压缩空气经硅胶和活性炭除水、净化后（A0）供应给FID作助燃气（A1）和进样阀汽缸作驱动气（A2）。 高纯氢气经活性炭过滤后（Hy）分成两路：一路（Hy）供应给镍触媒转化器，作为将CO2转化成CH4的还原剂；另一路（Hy）作为补充燃烧气直接供应给FID。 所有气源供应的气体初始压力均为0.14MPa（约为4个大气压）。由进样阀、电磁阀（图中未画出）和定量管组成第Ⅱ部分，色谱柱、切换阀、转化器和检测器组成第Ⅲ部分。分析CO2、CH4和N2O采用的是相互独立的进样与分离气路，其中CO2和CH4采用的是单阀单柱进样分离气路，共用同一个检测器FID；N2O采用的是双阀双柱自动进样、反吹、分离和切换气路，单独使用ECD检测器。图5.3 气体样品色谱分析检测系统示意图甲烷分析流程：首先使六通阀1（V1）处于装填样品位置，此时V1的阀孔2→3、4→5、6→1两两相通。用注射器将样气从进样口（Ⅰ1）推入V1 ，样气经V1阀孔1→6充满定量管L1，经V1阀孔 3→2，最终经浮子流量计（FL）放空。转动V1使其切换到注射位置，此时V1的阀孔1→2、3→4、5→6两两相通。载气C1从V1的5→6通过L1再经3→4将样品扫入色谱柱1（Col1）。气体样品中的CH4在Col1中与其他成分分离后进入FID检测。2. 色谱分析条件及技术指标采用美国惠普公司生产的HP5890 Ⅱ plus型气相色谱仪，装配有使用进口配件自己设计的进样系统，仪器配置及使用条件见表5.3。表5.3 色谱配置和分析条件在表5.3的条件下，气体样品中的甲烷可以完全与空气中其他成分分离，灵敏度与再现性均很高，4小时之内15次浓度为1.92×10-6体积比甲烷标气分析结果的STDS值为4.2×10-9体积比，CV值为0.21％；从以上实测数值评价可以看出，无论是仪器系统的灵敏度和再现性，均可完全满足大气样品中甲烷分析。用于甲烷测定的定量管体积为1mL，Air-CH4标气为中国国家标准物质中心提供的甲烷浓度为5.34 ppmv一级标气。 甲烷测试选用30mL塑料注射器作为进样器，每次进样20mL。 进样时先将进样阀旋至开位，将进样器端口插入进样口，进样后将进样阀旋至闭位。每次进样量、进样时间应基本保持一致，以保证色谱分离效率、分析结果的准确性及重现性。一次进样后观察HP-Chemistation显示的色谱峰出峰完全后再进下一样品。 两次进样间隔应尽量保持一致。3.数据处理计算公式如下：含油气盆地甲烷微渗漏及其环境意义——以新疆塔里木盆地雅克拉凝析气田为例CS——所测样品浓度；C0——标气浓度；AS——所测样品峰面积；A0——标气峰面积。通量计算含油气盆地甲烷微渗漏及其环境意义——以新疆塔里木盆地雅克拉凝析气田为例ρ——气体在实验室温度条件下的密度；v——箱子的体积；A——箱子的面积；Δc/Δt——单位时间内采气箱内待测气体浓度的变化率