抽提

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生产酵母抽提物,使用木瓜蛋白酶的一些最适温度、PH值、添加量等、具体情况是怎样的?

木瓜蛋白酶(Papain)简称木瓜酶,又称为木瓜酵素。是利用未成熟的番木瓜(Carica papaya)果实中的乳汁,采用现代生物工程技术提炼而成的纯天然生物酶制品。它是一种含疏基(-SH)肽链内切酶,具有蛋白酶和酯酶的活性,有较广泛的特异性,对动植物蛋白、多肽、酯、酰胺等有较强的水解能力,同时,还具有合成功能,能把蛋白水解物合成为类蛋白质。溶于水和甘油,水溶液无色或淡黄色,有时呈乳白色;几乎不溶于乙醇、氯仿和乙醚等有机溶剂。最适合PH值5.7(一般3~9.5皆可),在中性或偏酸性时亦有作用,等电点18.75;最适合温度55~60℃(一般10~85℃皆可),耐热性强,在90℃时也不会完全失活;受氧化剂抑制,还原性物质激活. 百度上有,如果要详细的得去中国知网上找,不过得付费。

芳烃抽提项目须办哪些手续

办理芳烃抽提项目涉及的手续和程序有以下几个:1、项目可行性研究报告:需要编制一份详细的项目可行性研究报告,包括项目的技术方案、经济效益、环境影响评估等内容。2、土地使用手续:若项目需要占用土地,需要办理土地使用证或土地租赁手续,确保项目合法使用土地。3、建设工程规划许可:根据当地规定,需要获得建设工程规划许可。需要提交建设项目的详细规划图纸和相关文件。4、环境影响评价报告:针对项目对环境造成的影响,需要进行环境影响评价,并提交相应的报告。5、工程施工许可:在项目实施前,需要获得工程施工许可证。6、安全生产许可:项目涉及安全生产的,需要获得安全生产许可证。7、环保手续:根据项目的环保要求,需要办理废水、废气、固体废物的排放许可或处理手续。8、技术评审和验收:项目完成后,需要进行技术评审和相关部门的验收,确保项目符合相关技术标准和要求。芳烃是一类化学物质,属于芳香烃类物质。它们的分子结构中含有苯环或苯环的衍生物。芳烃通常具有较强的香味,并且许多芳烃物质广泛应用于工业和日常生活中。

使用丙酮抽提具体该如何操作?需要哪些设备,实验室条件越简单越好。

你用的是索氏抽提吧。我做的是有机物方面的研究,利用索氏抽提要的注意事项如下:(1)索氏抽提蛇形冷凝管,样品室,原地烧瓶需要经过硫酸-重铬酸钾洗液去清洗,洗完后用自来水和蒸馏水洗。然后蛇形冷凝管和样品室放在烘箱里面烘,圆底烧瓶要放在马弗炉里在450度下烘4个小时。(2)烘好后抽提器可以用了。你的样品,需要用滤纸包好,放在样品室里面。避免样品漏出来。(3)将丙酮装入圆底烧瓶里。注意,安装抽提器的时候,接口直接要接牢,否则丙酮可能会很快挥发。(4)蛇形冷凝管的最上端,最好用锡箔纸包住,防止空气中的物质从蛇形冷凝管中进来。(5)确定样品是否易光降解,如果容易,那么要用不透光纸板盖住样品室。但是要注意,这个操作很可能会导致水浴锅里的水在蛇形冷凝管外部冷凝,进入样品室,这样对后续试验很不利,所以,建议一开始在蛇形冷凝管中包一层纱布。(6)由于你用的溶剂是丙酮,那么抽提温度一般是60度左右,因为丙酮的沸点是58度左右。(7)索氏抽提一般需要抽提48小时,那么你应该隔一段时间关注一下,你的丙酮液体是否有回流,是否有蒸干现象。如果发现溶剂变得很少,回流不下去,那么可以直接往里面加一些丙酮。这个影响不大。祝你成功!!!

抽提DNA去除蛋白质时,怎样使用酚与氯仿较好?

>>> 酚与氯仿是非极性分子,水是极性分子,当蛋白水溶液与酚或氯仿混合时,蛋白质分子之间的水分子就被酚或氯仿挤去使蛋白失去水合状态而变性.经过离心,变性 蛋白质的密度比水的密度为大,因而与水相分离,沉淀在水相下面,从而与溶解在水相中的DNA分开.而酚与氯仿有机溶剂比重更大,保留在最下层.作 为表面变性的酚与氯仿,在去除蛋白质的作用中,各有利弊,酚的变性作用大,但酚与水想有一定程度的互溶,大约10%~15%的水溶解在酚相中,因而损失了 这部分水相中的DNA,而氯仿的变性作用不如酚效果好,但氯仿与水不相混溶,不会带走DNA.所以在抽提过程中,混合使用酚与氯仿效果最好.经酚第一次抽 提后的水相中有残留的酚,由于酚与氯仿是互溶的,可用氯仿第二次变性蛋白质,此时一起将酚带走.也可以在第二次抽提时,将酚与氯仿混合(1:1)使用.

酵母抽提物的作用是什么

酵母抽提物与厨师制作配方时使用的香草和香料一样,属于一种天然的简单调味配料。它和化学谷氨酸钠不同,不属于添加剂:含有酵母抽提物的产品包装完全可以声称其“不含添加剂”。 它可以带来植物芳香风味,以及不同强度的肉类、烧烤、烹煮、盐腌、黄油等口味。 法国思宾格酵母抽提物(YE)根据最终的预期用途,开发了不同种类的芳香特性。

沥青抽提仪的试验方法

1、将滤纸铺在盛料篮的底部和四周。2、将已称量(约100g)的沥青混合料或路面试样仔细放入盛料篮的滤纸内。3、把苯注入抽提筒中,约1000ML。4、将盛有试料的盛料篮放入抽提筒内的铜柱上,然后将上盖盖好,并将紧固螺栓旋紧。5、接好进水管,打开自来水阀门,使冷水进入冷凝器,并在充满冷凝器后流出,(此冷却水在实验时必须保持连续流入流出,不得中断)。6、接通电路,抽提筒内的苯溶液受加热器加热沸腾,其蒸汽预遇冷凝器冷却后滴入盛料篮,溶剂混合料中的沥青,溶剂的苯溶液通过滤纸再流至抽提筒内。如此反复溶洗。直至混合料中的沥青完全被洗净为止(大约需连续抽提12--24小时)。7、沥青抽提干净后,开启阀门开关,让苯溶液由漏斗通过阀门,经橡皮管流入另一个密封的容器中,直至大部分溶剂收回,(此时,加热器,冷切器需连续工作)。8、切断电源,打开仪器盖,将盛料篮取出,置于透风橱内晾干后再将矿料置于100-110°的烘箱内烘干。9、同一试样至少重复两次,取其平均值作为试验结果。10、如对抽提出的沥青必须惊醒标号鉴定或其他试验时,可将抽筒中的沥青溶液倒入已称重的蒸馏烧瓶中,抽提筒在用苯冲洗2--3次,洗液一并倒入烧饼内。烧瓶接妥冷凝器后,置于砂浴上蒸馏出苯溶剂,然后置于100--110°C的烘箱内,以备其他试验使用。11、倾倒沥青溶液时,可将外筒至底座部分旋开,提起外筒与抽提筒一起操作。

抽提过程中什么是水洗比

反洗比。反洗液量与抽提进料之比称为反洗比,有的地方也用反洗液量与抽提物量之比来表示。反洗液量是通过汽提塔塔顶蒸出物数量来控制的。

风味型酵母抽提物与酵母抽提物区别

风味型酵母抽提物和酵母抽提物在食品行业中有着一定的应用,二者的区别如下:1. 成分和形态:风味型酵母抽提物是酵母细胞的水解产物,具有丰富的氨基酸、核苷酸、多肽、呈味物质和微量元素等,它通常是液状或膏状的。而酵母抽提物则是由酵母细胞经过深加工得到的,包括酵母浸出物、酵母蛋白胨等,它们具有丰富的蛋白质、多糖、维生素和矿物质等,通常是颗粒状的。2. 作用效果:风味型酵母抽提物在食品工业中主要用于提高食品的口感、风味和营养价值。它可以增强食品的鲜味,掩盖不良气味,增加香气,改善口感,是一种高效的食品配料。而酵母抽提物则主要用于提供丰富的营养物质,促进食品的消化吸收,增强免疫力等方面。总的来说,风味型酵母抽提物和酵母抽提物在成分、形态和作用效果等方面都有所不同。在选择使用时,可以根据具体的需求和产品要求来选择合适的产品。

页岩油抽提的提取技术分类

行业内创造了用于提取页岩油页岩油技术的诸多分类。通过工艺原理分类:对原料油页岩热和方法主要有热解,加氢,溶剂或热溶解分类处理的基础上按地点分为:一种经常使用的区别处理是考虑是否高于或低于地面上完成,并分类为易地(流离失所者)或原位(就地)广泛的技术。在异地加工,也高于地面干馏众所周知,无论是开采油页岩地下或在表面,然后运送到加工厂。与此相反,就地加工转换成干酪根,而它仍然是在一个油页岩矿床形成后,它然后通过油水井,它以同样的方式上升为常规原油中提取。与易地加工,它并不涉及采矿或略去花油页岩油页岩地下处置地上停留。按照加热法分为:燃烧的产品转移到油页岩热的方式可分为直接或间接的。虽然方法,使燃烧产物的联系反驳内的油页岩是直接分类,方法,材料燃烧反驳外部的另一种物质的接触热的油页岩称为间接[14] 按照按热载体不同分为:对用于提供热能,油页岩的材料的基础上,处理技术已被分为气体热载体,固体热载体,墙体传导,反应液,体积加热方法热载体方法可细分为直接或间接的分类。

凝胶抽提法回收纯化dna片段的原理是什么

利用凝胶电泳将DNA片段分离出来,然后使用凝胶抽取试剂将DNA片段从凝胶中抽提出来。凝胶抽提法是一种DNA片段回收和纯化技术,测定聚电解质凝胶的适用性。

索氏抽提法提取粗脂肪适用于什么样品,有何特点

呵呵呵。。。。。你最近也做这个实验了么?百度上说,此法适用于脂类含量较高,结合态的脂类含量较少,能烘干磨细,不易吸湿结块的样品的测定。

DNA分离中为什么要在苯酚抽提后用氯仿再抽提一次

氯仿是分子量比较大的有机溶剂,在提取RNA时,氯仿可以有效的使有机相和无机相迅速分离.DNA提取过程 有机相中主要是酚和蛋白结合,从而使得蛋白和DNA脱离,DNA进入水相.但是在RNA的提取过程就要避免蛋白和DNA脱离,否则DNA会释放到水相.不管有酚也好,没有酚也好,氯仿本身也对蛋白有变性作用,剧烈的震荡,很容易使得DNA的亲水基团,与水相接触.所以不要剧烈震荡.异丙醇的作用是通过-OH的疏水作用使得RNA 或者DNA链中的亲水基团受到保护,等同于沉淀,但是这是个反应时发生在水相中,与前面的氯仿不矛盾.氯仿的作用有多个方面,一是作为有机溶剂变性蛋白,使其沉淀并通过离心除去,同时也通过变性作用抑制RNase活性;二是RNA提取试剂中通常含有苯酚(Trizol主要成分就是苯酚,很多自己配试剂提的方法也用苯酚,抽提蛋白时也会用到苯酚),苯酚微溶于水,抽提烷之后水相里有痕量的酚,如果不除去会损伤核酸,需要通过氯仿把水相里参与的苯酚抽提掉;三是作为溶剂抽提样品中的一些脂溶性杂质(比如油脂、脂溶性色素等),起到一定除杂作用通常氯仿里面会加少量异戊醇(1/25),减少蛋白质在变性过程中由于震荡产生的泡沫,影响后续操作,不过个人经验感觉加不加没什么太大区别,也许是我的样品里蛋白不多吧异丙醇是沉淀核酸用的,作用和乙醇一样.只不过用量少一点,0.6V~1V就够了,不像乙醇沉淀需要至少2V,一般需要2.5倍体积.在水相很多,离心管容积有限,加不下太多乙醇的时候一般会用异丙醇沉淀.不过感觉效果不如乙醇,偶尔会有沉淀不出来东西的时候

求几种植物总DNA抽提方法和优缺点

1、植物DNA的CTAB提取法:经典方法。效果较好,污染少。多用于核基因组提取。2、SDS提取法:较为简易,提取的为全基因组,但有蛋白污染可能。3、简易“一管法”提取方法:4、PCR研究的快速提取法:以上两者方法简单,快速,但污染多,不适合做酶切等操作。5、酚类、多糖类物质较多的植物DNA提取法:多酚多糖去除效果好,但操作步骤较多。

土壤污染气相抽提技术的优点有哪些?

土壤污染气相抽提技术是一种常见的土壤污染分析方法,其优点如下:1.高灵敏度:气相抽提技术可以将土壤样品中的挥发性有机物(VOCs)有效地转移到气相中进行分析。这能够在非常低的浓度下检测到VOCs,提高了污染物检测的灵敏度,并使得极微量的物质也能够被检测到。2.高选择性:气相抽提技术可以针对特定的VOCs进行选择性提取,采用不同的抽提制备条件和列柱操作可进行多项分离分析。这一技术可以通过不同的分离机制区分同系列的化合物或异构体,达到高度的分离效果,能够减少干扰物的影响。3.非破坏性:气相抽提技术无需破坏土壤结构,不会改变土壤中污染物的物理和化学特性,维持样品原貌,使分析更加准确和真实可靠。4.样品处理简单:气相抽提技术采用的是气相色谱技术(GC)进行检测分析,与传统的土壤样品处理相比,它不需要大量耗时的预处理程序,样品准备时间相对简单,极大地节省了样品处理时间和工作量。5.节约成本:由于气相抽提技术的处理过程相对简便,可以大大缩短分析时间,降低分析成本,缩短分析周期。综上所述,气相抽提技术具有高灵敏度、高选择性、非破坏性、样品处理简单和节约成本等多种优点,使得其成为了分析土壤污染的重要手段,适用于土壤污染的监测、评价和污染源的溯源。

抽提DNA去除蛋白质时,怎样使用酚与氯仿较好?

>>>酚与氯仿是非极性分子,水是极性分子,当蛋白水溶液与酚或氯仿混合时,蛋白质分子之间的水分子就被酚或氯仿挤去使蛋白失去水合状态而变性.经过离心,变性蛋白质的密度比水的密度为大,因而与水相分离,沉淀在水相下面,从而与溶解在水相中的DNA分开.而酚与氯仿有机溶剂比重更大,保留在最下层.作为表面变性的酚与氯仿,在去除蛋白质的作用中,各有利弊,酚的变性作用大,但酚与水想有一定程度的互溶,大约10%~15%的水溶解在酚相中,因而损失了这部分水相中的DNA,而氯仿的变性作用不如酚效果好,但氯仿与水不相混溶,不会带走DNA.所以在抽提过程中,混合使用酚与氯仿效果最好.经酚第一次抽提后的水相中有残留的酚,由于酚与氯仿是互溶的,可用氯仿第二次变性蛋白质,此时一起将酚带走.也可以在第二次抽提时,将酚与氯仿混合(1:1)使用.

什么叫抽提物

YE--酵母抽提物(GB/T23530-2009):是以食用酵母为主要原料,在酵母自身的酶系或外加食品级酶的作用下,酶解自溶后得到的产品,并富含氨基酸、肽、多肽等酵母细胞中的可溶性成分。根据需要可添加适当辅料进行调配,也可在生产后期增加美拉德反应工艺,属于食品配料。

为什么酶的抽提要避开酶的等电点?

因为有相关性但却是不同概念。等电点是一个分子表面不带电荷时的pH值,对于酶而言,两性离子所带电荷因溶液的pH值不同而改变,当两性离子正负电荷数值相等时,溶液的pH值即其等电点。酶的等电点是溶液正负离子电荷相等时的pH值,与酶的最适pH值是不同的概念,但有相关性,两者数值通常接近或相等。每一种酶都有它合适的pH值,当其它条件不变,酶催化反应速率再大时的pH值为最适pH值。为了维持酶催化的反应体系的pH值,将酶的作用发挥到最大,体系中需要添加合适的生物缓冲剂。酶的催化活性也需要合适的温度,否则酶的活性会大打折扣,而且温度过高甚至可能导致酶的蛋白质结构改变,酶变性可造成永久性失活。

酵母抽提物是什么?

酵母抽提物(YE)是以食品用新鲜酵母为主要原料,以酵母自身的酶或外加食品用酶的共同作用下,酶解自溶(可再经分离提取)后得到的产品,并富含氨基酸、肽、多肽等酵母细胞中的可溶性成分。法国思宾格酵母抽提物(YE)可通过提升鲜味带来饱满丰富的口感,起到协助减盐30%而不失去味道。也可以让低脂食品恢复持久回味和圆润口感。

酵母抽提物

酵母抽提物是什么?你好,酵母抽提物是以食品用酵母为主要原料,以酵母自身的酶或外加食品级酶的共同作用下,酶解自溶后得到的产品,并富含氨基酸、肽、多肽等酵母细胞中的可溶性成分。根据需要可添加适量辅料进行调配,也可在生产后期增加美拉德反应工艺,属于食品配料。酵母抽提物是什么东西酵母提取物就是在食物酵母中提取的成分,可以增加食物的美味,属于食物的配料。以食物酵母为原料,然后用酵母自身的酶或者外加工食品的酶共同作用,然后再经过分离提取之后得到的。酵母提取物一般都含有可溶性成分,可以根据需要进行调配。通常情况下,酵母提取物一般都存在于四种食物里面,其中就含有:海带、蘑菇、鲣鱼、鸡汤。酵母可以增加食物的鲜味、降低我们对盐度的添加、平衡食物中的异味、增加食物的耐受性等。酵母提取物一般都会添加在:味精、鸡精、食用香精、肉制品、酱卤制品、餐饮火锅、焙烤食品、膨化食品、酱油等产品中。酵母提取物是什么YE是根据中华药典之规定采用以蛋白质含量丰富的食用酵母为原料,采用自溶、酶解、分离、浓缩等现代生物高新技术,将酵母细胞内的蛋白质、核酸等进行降解后精制而成,的一种棕黄色可溶性膏状或浅黄色粉状纯天然制品。主要成分为多肽、氨基酸、呈味核苷酸、B族维生素及微量元素。是一种优良的天然调味料,在食品行业中具有广泛的用途。也是最为理想的生物培养基原料和发酵工业中的主要原料,其功效与8倍的酵母相当,可以大大提高菌种的生产速率及发酵产品得率。2生产工艺流程图编辑◆干食用酵母干食用酵母的生产工艺比较简单,直接将洗净的酵母乳质壁分离后进行滚筒干燥,得到的产品即为干食用酵母。该产品有30%的可溶物质,含有丰富的VB,蛋白质和膳食纤维,微量元素等。可应用于健康食品,粉末调味品等产品。◆干自溶酵母干自溶酵母是酵母质壁分离后先经过部分自溶,然后进行滚筒干燥后得到的产品。该产品有50%的可溶物质,含有丰富全面的营养和风味。可用于薄脆饼干,肉制品等提高产品的口感和风味。◆酵母抽提物酵母抽提物是酵母通过质壁分离后利用自身水解酶系完全自溶后,去除细胞壁和不溶性分子后的产品。生产过程中严格控制酵母自身蛋白质的水解程度来满足不同的应用需要;最后将酵母抽提物浓缩为半膏状、膏状产品,油包埋、微胶囊和微颗粒的粉末化产品以适合不同的应用需要。◆风味化酵母抽提物利用美拉德反应生产具有各种风味浓郁的香料,如鸡肉风味、牛肉风味、蔬菜风味、海鲜风味等等,大大丰富了酵母抽提物的应用范围3食品添加剂编辑食品添加剂使用卫生标准的封面和末页,其中末页明确指出,酵母抽提物作为酵母类制品属于食品类别可以直接食用,且没有添加限制,在食品工业的添加中具有天然、安全的优势。4酵母抽提物国标编辑酵母抽提物的行业标准已于2003年10月1日正式实施,目前最新版本为《GBT23530-2009酵母抽提物》,起草单位为安琪酵母股份有限公司,中国食品发酵工业研究院等。5国内外的发展情况编辑全球产能情况最新数据表明,近年来,中国的酵母提取物年均需求增长率高于10%,而在美国和欧洲市场的增长速度大约在5%。目前全球酵母提取物的年生产规模在16万吨左右。下图为目前全球主要供应商对比。如图可知目前YE全球产能前十名企业主要被国外生产厂商所占据,国内酵母行业龙头安琪酵母股份有限公司目前以年产2.6万吨酵母抽提物的能力排在亚洲第一,世界第三的位置,但从数据看国内其他酵母抽提物生产企业还未进入前十名,由此可见国内厂家还有很长一段路要走。国外发展国外的酵母抽提物应用非常广泛,市场也比较成熟,年产销量超过10万吨。欧洲和日本的抽提物产品有一定的差别。欧洲的产品除了普通的纯酵母抽提物以外,还有一些特殊的风味型产品,是采用酵母抽提物加上合适的香精制成,往往具有肉类、烟熏味等特有的风味特征。在应用上,欧洲通常将酵母抽提物作为酸水解植物蛋白和MSG的替代品。日本的产品一般颜色较浅、溶解性很好,并且在营养上作了强化。日本国内的酵母抽提物主要应用在方便面调料、家用调味料等方面。国内发展国内最早生产酵母抽提物的是上海酵母厂,当时的酵母抽提物叫做“酵母浸膏”,色泽棕黑,溶解后溶液深褐,有浓厚的酵母气味,主要是供微生物检验和作抗菌素厂的发酵培养基;由于产品质量的限制,一般不适合在食品工业中使用。上世纪80年代以后,随着国内酵母生产企业的建成和发展,陆续出现了多家酵母抽提物的生产企业。国内目前最大的酵母抽提物生产企业为安琪酵母股份有限公司,目前酵母抽提物年产能在2.6万吨,据调查,目前安琪公司正在新建另一个2万吨酵母抽提物生产线,建成后安琪将达到4.6万吨年产能。从数据上看将跃居成为世界第一酵母抽提物供应商。目前应用酵母抽提物最多的是食品加工业和生物培养基,在方便面料包、鸡精粉、酱油、肉制品、食用香精等产品中,酵母抽提物已经得到了较好的应用推广,在酱类、膨化食品、饼干糕点、营养保健食品等产品中的应用也在进一步拓展中。随着国内酵母抽提物市场的不断扩大,有关部门对酵母抽提物产品的生产、品质等方面也在进行着规范和引导。酵母抽提物的行业标准已于2003年10月1日正式实施。相信随着标准的颁布和实施,酵母抽提物行业将得到更规范和持续的发展,酵母抽提物的市场也会进一步扩大。什么是酵母提取物酵母的提取物一般是称为TE,这种物质里面其实是含有许多丰富的营养,比如多肽、氨基酸、呈味核苷酸、维生素b等等。酵母提取物主要运用在各种食物的添加剂和化妆品上面,食物中放入酵母提取物的话味道会更加的鲜,所以在鸡精、卤水、方便面里都会有酵母提取物的存在。YE是根据中华药典之规定采用以蛋白质含量丰富的食用酵母为原料,采用自溶、酶解、分离、浓缩等现代生物高新技术,将酵母细胞内的蛋白质、核酸等进行降解后精制而成的一种棕黄色可溶性膏状或浅黄色粉状纯天然制品。主要成分为多肽、氨基酸、呈味核苷酸、B族维生素及微量元素。是一种优良的天然调味料,在食品行业中具有广泛的用途。也是最为理想的生物培养基原料和发酵工业中的主要原料,其功效与8倍的酵母相当,可以大大提高菌种的生产速率及发酵产品得率。酵母抽提物是一种优良的天然调味料,在食品行业中具有广泛的用途。对国内和国外酵母抽提物的发展状况做了分析,综述了酵母抽提物应用新进展。酵母抽提物是以蛋白质含量丰富的食用酵母为原料,采用生物技术,将酵母细胞内的蛋白质、核酸等进行降解后精制而成的天然调味料,主要成分为多肽、氨基酸、呈味核苷酸、B族维生素微量元素。酵母抽提物具有纯天然、营养丰富、味道鲜美醇厚等优点,在食品工业中应用广泛。国内酵母抽提物的应用领域-由于酵母抽提物营养丰富、加工性能良好,在一些食品加工中往往能起到有效增强产品鲜美味、醇厚感,同时缓和产品咸味、酸味,掩盖异味等作用,酵母抽提物在很多食品工业都得到了较好的应用。作用:酵母提取物多糖、核酸、酵母细胞壁等。主要应用领域方便面,鸡精,食用鸡精,肉制品,酱卤制品,餐饮火锅,烘烤食品,膨化食品,酱油,调味酱类。特点:由于酵母提取物营养丰富、加工性能良好,在一些食品加工中往往能起到有效增强产品鲜美味、醇厚感,同时缓和产品咸味、酸味,掩盖异味等作用,所以目前在很多食品工业领域中都得到了较好的应用。

抽提所需溶剂的量如何确定

抽提所需溶剂的量确定:重结晶溶剂的用量一般在重结晶溶质的5倍到10倍左右。实验中在加热情况下,缓缓加入溶剂,直到加入的溶质全部溶解便停止加入溶剂,通过观察倒入溶剂的量得到用量的大小。用于测定标准曲线的标准溶液浓度的确定首先要考虑方法的检出限,每个点的浓度必须在标准曲线上。其次要考虑未知样品的含量。被测样品的浓度一定要跟标准曲线相匹配。标准曲线要符合朗伯比尔定律。实现润滑油的精制过程需具备两个条件:其一,溶剂应具有适当的选择性;其二,溶剂应具有一定的溶解能力。如果溶剂的选择性好,而溶解能力很差,虽然理想组分几乎不溶于溶剂,但在单位溶剂中能溶解的非理想组分的量也不多,为了把原料中大部分理想组分分出,就不得不使用大量溶剂,这对工业装置的操作和能耗是非常不利的。

苯酚、氯仿、异戊醇抽提DNA的原理,以及这三者的作用是什么?

苯酚、氯仿、异戊醇抽提DNA的原理是通过有机溶剂抽提,去除蛋白,多糖,酚类等杂质,再加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来. 使用苯酚抽提细胞 DNA 时,苯酚的作用是使蛋白质变性,同时抑制了 DNase 的降解作用.用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与 DNA 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶.蛋白分子溶于酚相,而 DNA 溶于水相. 氯仿的作用是克服酚的缺点;加速有机相与液相分层.最后用氯仿抽提:去除核酸溶液中的迹量酚.(酚易溶于氯仿中) 用酚-氯仿抽提细胞基因组 DNA 时,通常要在酚-氯仿中加少许异戊醇,为什么?因为异戊醇可以减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡.异戊醇可以降低表面张力,从而减少气泡 产生.另外,异戊醇有助于分相,使离心后的上层含 DNA 的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定.

基因工程实验Ⅱ大肠杆菌质粒DNA的抽提及检测『Protocol』

质粒的抽提与纯化实质上是将质粒DNA与细菌的基因组染色体DNA、RNA、蛋白质、细胞膜等细 胞器及其他大分子物质分离的过程,因此质粒的抽提大致可分为:细菌的培养、收集与裂解;质粒DNA 的分离与纯化;浓度、纯度的鉴定三个过程。 ①染色体DNA的去除 :在富集培养目标菌种后,首先应裂解细菌细胞,采用含有SDS的NaOH溶液裂解菌体释放质粒,同时氢氧化钠的强碱性,可使DNA氢键断裂,双螺旋结构破坏而变性,再加入中和缓冲液,可使部分变性的质粒DNA复性,而染色体DNA不复性,因此使质粒DNA与染色体 DNA分离开。 ②细菌中的RNA可以通过RNaseA去除 ③蛋白质的去除 :细菌中的蛋白质可以通过酚/氯仿/异戊醇抽提,酚可以使蛋白质变性,氯仿将微溶 于水的酚抽提到有机相中,使其与水相中的DNA分离。分离后的质粒DNA可以通过乙醇回收,乙醇可以消除核酸水化层,暴露其带负电的磷酸基团,因 此在阳离子充足的环境中可以发生”核酸–乙醇沉淀 ④蛋白质、染色体DNA、细胞碎片、以及在分离过程中与试剂形成的不溶复合物都可以通过离心去除。 ⑤试剂盒法DNA的回收 :除碱裂解法以外,还可以通过试剂盒抽提质粒DNA,在碱裂解进行变性和复性后的纯化回收通过纯化柱进行。纯化柱中的硅胶膜能在高盐、低PH条件下吸附体系中的 DNA,将其与其他杂志分离,而在低盐、高PH条件下DNA又可以被洗脱下来。 ⑥纯化后的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳或紫外分光光度计鉴定 电泳法 :带负电荷的DNA分子在外加电场的作用下向正极泳动,不同分子量大小与构型的DNA分子泳动速率不同,因此可以在琼脂糖凝胶上呈现不同的条带。在凝胶中加入核酸染料可以方便我们观察,因为核酸染料可以嵌入到DNA碱基之间,避免被凝胶中的氢离子淬灭,因而亮度更高。 紫外分光光度法 :DNA的吸收峰在260nm处,蛋白的吸收峰在280nm处,因此可以用OD260/OD280判断DNA纯度,一般认为比值在1.8~2.0之间时,纯度较高 材料: 含有pSK II质粒的大肠杆菌菌株的菌液、含有MP3质粒的大肠杆菌菌株的菌液 试剂: ①细菌的培养:LB培养基、氨苄青霉素 ②细菌的裂解与收集:溶液I(Tris-HCl、EDTA、Glucose)、溶液II(NaOH、SDS)、溶液 III(KOAc、CH3COOH)、RNAseA③质粒DNA的分离与纯化:酚/氯仿/异戊醇、无水乙醇、70%乙醇、1XTE溶液(Tris-HCl、 EDTA)、东盛生物小提质粒盒④电泳:琼脂糖、0.5XTBE电泳缓冲液、StarGreen DNA Dye、loading buffer、1XTE buffer①细菌的培养: 将含有pSK II和MP3质粒的大肠杆菌菌液分别于LB培养基上划线 → 37℃过夜培养 → 挑取培养基上的单菌落于液体LB培养基中,震荡培养过夜②细菌的收集与裂解 - 碱裂解法 吸取1.5ml菌液12000rpm离心1min (沉淀菌体)↓弃上清培养液 (完成细菌的收集)↓加入150ul溶液I和3ul RNaseA,震荡混匀,静置2min (悬浮菌体、去除RNA)↓加入250ul溶液II,轻柔颠倒混匀,放置至清亮(不超过5min。裂解菌体、释放质粒,此步骤动作轻柔,防止基因组DNA断裂,且时间不宜过长)↓加入180ul溶液III,颠倒混匀,冰浴10min (中和反应,防止基因组DNA污染)↓12000rpm离心5min,吸取上清80ul,重复此操作 (此时已完成了染色体DNA、RNA、细胞碎片、部分 蛋白质的分离)③质粒DNA的分离 加入53ul的酚/氯仿/异戊醇上下颠倒抽提10min,静置分层 (DNA在水相中),12000rpm 离心10min↓通风橱中吸取上清,加入20体积的无水乙醇 (发生核酸-乙醇沉淀)↓12000rpm离心5min,倒掉乙醇,短暂离心10s,用移液枪吸取乙醇↓加入500ul 70%乙醇洗涤DNA沉淀,离心5min,倒掉乙醇,离心10s,用移液枪吸取乙醇,将其放置在通风橱中促进乙醇挥发↓加入300ul 1XTE溶解,65℃热板温育10min④纯化质粒DNA 加入1XTE使溶液为300ul,加入300ul酚/氯仿,充分震荡抽提5min(去除蛋白)↓12000rpm离心5min,吸取上清↓加入1/10体积3M NaAc和2倍体积的预冷无水乙醇,混匀↓置于-70℃冰箱15min沉淀DNA↓4℃12000rpm离心15min,倒掉乙醇,离心10s,用移液枪吸去乙醇↓0.5ml 70%乙醇洗DNA沉淀一次,离心2min,倒掉乙醇 (去除DNA中的盐离子)↓离心10s,移液枪吸去乙醇,在50-60℃热板上烘干1min↓加入20ul 1XTE溶解DNA沉淀,并在65℃热板上温育10min (使DNase失活) -试剂盒抽提法 加入溶液III离心后的上清液置于DNA纯化柱中,静置2min↓12000rpm离心1min,弃滤液 (DNA被吸附到硅胶膜上)↓加入500ul溶液PB,12000rpm离心1min,弃滤液 (洗脱蛋白、盐等杂质)↓加入500ul溶液W,12000rpm离心1min,弃滤液 (重复此步骤一次,洗掉多余盐离子及乙醇)↓12000rpm离心3min (彻底去除纯化柱中残留的液体)↓将DNA纯化柱置于新的离心管中,向纯化柱中央处悬空滴加80ul溶液Eluent,室温静置2min (将硅胶吸附柱上的质粒DNA洗脱下来)↓12000rpm离心1min (管底即为质粒DNA)⑤琼脂糖凝胶电泳观察 制胶: 称取1.2g琼脂糖加入盛100ml 0.5XTBE电泳缓冲液的250ml 三角瓶中,摇匀↓微波炉加热至琼脂糖溶解(沸腾)↓放在冷水中冷却,加入10ul的StarGreen DNA Dye,摇匀↓琼脂糖倒入模具中,插上梳子 。凝固后向上垂直拔出梳子,将凝胶转移到电泳槽中,加入0.5XTBE电泳缓冲液至液面覆盖凝胶1mm点样: 按照碱裂解法纯化前的MP3、pSK II样品各3ul、5ul Marker(10ug/ul、20ug/ul、60ug/ul)、碱裂解法纯化后的MP3、pSK II样品各6ul,试剂盒提取的MP3、pSK II样品各2ul的顺序依次加入点样板小孔中,再分别加入10Xloading buffer,配置10ul点样体系,吹吸混匀电泳: 打开电源开关,调节电压3-5V/cm观察: 将电泳好的凝胶置于凝胶成像仪中观察

甘油三酯的测定实验中抽提剂正庚烷、异丙醇所起的作用是什么

如果你用icc的话,答案就在闯关测试里作用是沉淀血清中的蛋白质和提取甘油三酯

酵母抽提物是什么?

酵母抽提物来自新鲜酵母,是一种天然来源的成分。法国思宾格酵母抽提物(YE)曾获得了清真和犹太洁食的认证。

不同型号的安琪酵母抽提物区别

白色是低糖酵母,金色是耐高糖,通俗点就是:不怎么加糖用白色包装,加糖加油就要金色包装百两茶白袋和黄袋的区别,白带的价格高,质量好。有三种颜色 蓝 、黄 、红 。分前期发酵酵母;中期发酵酵母;后期发酵酵母不是白色的,安琪甜酒曲是灰黄色粉状,酒曲成分有因为有酵母,糖化酶,黑曲霉,红曲霉,根酶等组成,所以酒曲不会是白色粉末。制作原料:糯米/大米、甜酒曲(超市可以买到,小袋包装,用量有表明)制作工序:1.用饭锅煮糯米(普通米饭也可以),下的水比平时少一点。 要把饭烧熟但是饭粒比较硬。2.待凉透后把糯米饭放入筲箕,在水龙头下冲,洗去饭粒上粘粘的东西。(若选用大米此步骤可省略)3.把糯米饭放入容器。每铺一层饭,撒一些酒药。最上面撒酒药和少量温水。(或混合酒曲与温水,浇盖在米饭上后混合均匀)4.用手把糯米饭压实,在饭中间钻一个孔让糯米酒可以冒出来。5.容器上面盖盖子 放入烤箱,打开烤箱的灯,几小时后就可以闻到酒香。24小时后,看到糯米饭好像浮在酒里就可以了。(如果不是很着急吃可以不用烤箱,冬天放在暖气旁边,3-4天左右就差不多.夏天室温就足够了)要点:1.制做酒酿的器具一定要干净,特别是不能有油迹,并用热水烫一遍,再拿纸巾抹干净。2.拌酒曲一定要在糯米凉透以后。否则,热糯米就把灰霉菌杀死了。结果要么是酸的臭的, 要么就没动静。3.最好不要用手直接碰糯米饭,建议戴塑料手套或者隔一层保鲜膜。4.酒酿长白毛说明温度太高,但是还可以吃;如果长有色毛就是材料不干净,建议不要吃了。5.如果发现饭粒粘上空气中很小黑粒,如果确定还不是长毛,建议及早把饭粒捡出扔掉。带黑点的饭粒很容易长黑毛。6.在拌酒曲之前,糯米饭的温度不能高于30度,太低也最好不要,否则做出的酒酿会发酸。

大肠杆菌离心后在常温下放了一天,还能用来抽提质粒trail吗,要用来做动

大肠杆菌常温放置会导致质粒降解,但短时间比如1-3天问题不大,而且一天只会导致大肠杆菌因为缺乏营养而停止生长,可以用来抽提质粒。超过三天会开始降解,一周后明显降解。质粒在4度可放置数个月,-20保存数年。菌液一般放在-80度能保存1年。提出来的质粒最好以沉淀的形式保存,用的时候再溶解、抽提,沉淀、再使用。质粒是用TE溶解,效果会好些,-20度放置时间长了是会发生一定的分解,比如质粒不再像新提的时候 那样是3条带,可能会变成一条带居多。可以转化一次后重新提一些新的继续保存,最好不要划线挑单克隆,而是转化复苏后直接加到含抗生素(antibiotic)的液体培养基中培养,因为单克隆中的质粒(特别是含有外源基因的重组质粒),可能存在基因突变的情况(虽然几率很小但是我在校正点突变的实验中就遇到过,基因原来测序正确的质粒经过一次重新转化划线挑单菌落提质粒后,再测序发现出现了一个新的碱基的突变)。所以最好是同时保存一份含有质粒的菌。虽然再次复苏的时候长得会比较慢,但活化后,还是跟新的没有什么差别的。保存大肠杆菌(Escherichia coli)菌种,-20度对于不含质粒的菌种一般是用15%的甘油保存,对于含有质粒的菌种一般用10%的甘油保存,(PET操作手册上有说明),甘油浓度高了质粒的稳定性不好。

酵母抽提物是什么东西

酵母抽提物是什么东西如下:酵母的提取物一般是称为TE,这种物质里面其实是含有许多丰富的营养,比如多肽、氨基酸、呈味核苷酸、维生素b等等。酵母提取物主要运用在各种食物的添加剂和化妆品上面,食物中放入酵母提取物的话味道会更加的鲜,所以在鸡精、卤水、方便面里都会有酵母提取物的存在。YE( 酵母提取物)是根据中华药典之规定采用以蛋白质含量丰富的食用酵母为原料,采用自溶、酶解、分离、浓缩等现代生物高新技术,将酵母细胞内的蛋白质、核酸等进行降解后精制而成的一种棕黄色可溶性膏状或浅黄色粉状纯天然制品。主要成分为多肽、氨基酸、呈味核苷酸、B族维生素及微量元素。是一种优良的天然调味料,在食品行业中具有广泛的用途。也是最为理想的生物培养基原料和发酵工业中的主要原料,其功效与8倍的酵母相当,可以大大提高菌种的生产速率及发酵产品得率。酵母抽提物是一种优良的天然调味料,在食品行业中具有广泛的用途。对国内和国外酵母抽提物的发展状况做了分析,综述了酵母抽提物应用新进展。酵母抽提物(又称酵母味素,英文名称为Yeast extract)是以蛋白质含量丰富的食用酵母为原料,采用生物技术,将酵母细胞内的蛋白质、核酸等进行降解后精制而成的天然调味料,主要成分为多肽、氨基酸、呈味核苷酸、B族维生素微量元素。酵母抽提物具有纯天然、营养丰富、味道鲜美醇厚等优点,在食品工业中应用广泛。国内酵母抽提物的应用领域-由于酵母抽提物营养丰富、加工性能良好,在一些食品加工中往往能起到有效增强产品鲜美味、醇厚感,同时缓和产品咸味、酸味,掩盖异味等作用,酵母抽提物在很多食品工业都得到了较好的应用。

什么是反抽提

抽提是把酶从生物组织或细胞中以溶解状态释放出来的过程工业上从一种固体或一种液体混合物中将所要的物质根据其特性用溶剂提取分离出来的方法叫抽提。反抽提就是把不需要的提取出来,目的是为了分离

低盐酱油里面的酵母抽提物是起什么作用?

酱油里的酵母提取物,是用来促使发酵,酱油是以黄豆为原料,通过发酵制成,放酵母就是为了促使黄豆发酵。

酵母抽提物是从酵母中提取的吗?源头是什么?动物?还是植物?

是的, 酵母抽提物是从酵母菌中提取的。其源头就是酵母菌。酵母菌既不是动物,也不是植物,是真菌类微生物。酵母抽提物是一种食品添加剂,也可以用作生物培养基的原料。酵母抽提物是以食品用酵母为主要原料,以酵母自身的酶或外加食品级酶的共同作用下,酶解自溶,再经分离、浓缩、提取后得到的产品。其中富含氨基酸、肽、多肽等酵母细胞中的可溶性成分,营养丰富,可用于食品营养添加剂和调味剂,也可用于生物培养基的成分。

视频号开店平台抽提多少

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苯酚、氯仿、异戊醇抽提DNA的原理,以及这三者的作用是什么?

苯酚、氯仿、异戊醇抽提DNA的原理是通过有机溶剂抽提,去除蛋白,多糖,酚类等杂质,再加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。使用苯酚抽提细胞 DNA 时,苯酚的作用是使蛋白质变性,同时抑制了 DNase 的降解作用。用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与 DNA 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相,而 DNA 溶于水相。 氯仿的作用是克服酚的缺点;加速有机相与液相分层。 最后用氯仿抽提:去除核酸溶液中的迹量酚。 (酚易溶于氯仿中) 用酚-氯仿抽提细胞基因组 DNA 时,通常要在酚-氯仿中加少许异戊醇,为什么?因为异戊醇可以减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡。异戊醇可以降低表面张力,从而减少气泡 产生。另外,异戊醇有助于分相,使离心后的上层含 DNA 的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定。

酚-氯仿-异丙醇抽提DNA

用酚抽提细胞DNA时,有什么作用? 使蛋白质变性,同时抑制了DNase的降解作用。用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相,而DNA溶于水相。 使用酚的优点:1. 有效变性蛋白质;2. 抑制了DNase的降解作用。 缺点:1. 能溶解10-15%的水,从而溶解一部分poly(A)RNA。2. 不能完全抑制RNase的活性。 氯仿的作用? 氯仿:克服酚的缺点;加速有机相与液相分层。 最后用氯仿抽提:去除核酸溶液中的迹量酚。(酚易溶于氯仿中) 用酚-氯仿抽提细胞基因组DNA时,通常要在酚-氯仿中加少许异戊醇,为什么? 异戊醇:减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡。异戊醇可以降低表面张力,从而减少气泡产生。另外,异戊醇有助于分相,使离心后的上层含DNA的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定。 用乙醇沉淀DNA时,为什么加入单价的阳离子? 用乙醇沉淀DNA时,通常要在溶液中加入单价的阳离子,如NaCl 或 NaAc,Na+中和DNA分子上的负电荷,减少DNA分子之间的同性电荷相斥力,而易于聚集沉淀。 原理:动物和植物组织的脱氧核糖核蛋白(DNP)可溶于水或浓盐溶液(如1mol/L氯化钠),但在0.14mol/L氯化钠盐溶液中溶解度最低,而核酸核蛋白(RNP)则在0.14mol/L氯化钠中溶解度最大,利用这一性质可将其分开。 将沉淀物溶解于生理盐水,加入去污剂十二烷基硫酸钠(SDS)溶液,使DNA与蛋白质分离开。加入固体氯化钠使其浓度达到1mol/L,使DNA溶解。加氯仿-异戊醇去除蛋白质,也可重复该步操作得较纯DNA。最后用95%乙醇沉淀DNA。 溶解:将离心后除去RNA的沉淀,用30ml生理盐水溶解,充分搅拌后,匀浆一次。加4毫升10%SDS溶液,使溶液的SDS浓度达到1%左右,边加边搅拌,放置60 ℃水浴保温10分钟(不停搅拌),冷却。加固体氯化钠,使溶液氯化钠浓度达到1mol/L,充分搅拌10分钟; 除杂质:加等体积氯仿-异戊醇混合液,充分震荡10分钟, 8000 r/min离心7分钟,取上层液量好体积,倒入烧杯中(离心管),加同体积的氯仿-异戊醇混合液,重复上次操作。直至界面不出现蛋白凝胶为止; 沉淀:准确量取上清液体积,加2倍体积95%冷乙醇,搅拌后,置冰箱静止冷却,待有白色丝状物出现,约10-15分钟,离心8000 r/min离心7分钟,得白色沉淀; 溶解:将沉淀物用0.1mol/L NaOH约10毫升溶解,得DNA溶液。 溶液I—溶菌液: 溶菌酶:它是糖苷水解酶,能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键,因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时,溶菌酶作用受到抑制。 葡萄糖:增加溶液的粘度,维持渗透压,防止DNA受机械剪切力作用而降解。 EDTA:(1)螯合Mg2+、Ca2+等金属离子,抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用(DNase作用时需要一定的金属离子作辅基);(2)EDTA的存在,有利于溶菌酶的作用,因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。 溶液II-NaOH-SDS液:NaOH:核酸在pH大于5,小于9的溶液中,是稳定的。但当pH>12或pH<3时,就会引起双链之间氢键的解离而变性。在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1/L,加抽提液时,该系统的pH就高达12.6,因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。 SDS:SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有:(1)溶解细胞膜上的脂质与蛋白,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。(2)解聚细胞中的核蛋白。(3)SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R+-蛋白质的复合物,使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用,所以在以后的提取过程中,必须把它去除干净,防止在下一步操作中(用RNase去除RNA时)受到干扰。 溶液III--3mol/L NaAc(pH4.8)溶液:NaAc的水溶液呈碱性,为了调节pH至4.8,必须加入大量的冰醋酸。所以该溶液实际上是NaAc-HAc的缓冲液。用pH4.8的NaAc溶液是为了把pH12.6的抽提液,调回pH至中性,使变性的质粒DNA能够复性,并能稳定存在。而高盐的3mol/L NaAc有利于变性的大分子染色体DNA、RNA以及SDS-蛋白复合物凝聚而沉淀之。前者是因为中和核酸上的电荷,减少相斥力而互相聚合,后者是因为钠盐与SDS-蛋白复合物作用后,能形成较小的钠盐形式复合物,使沉淀更完全。 为什么用无水乙醇沉淀DNA? 用无水乙醇沉淀DNA,这是实验中最常用的沉淀DNA的方法。乙醇的优点是可以任意比和水相混溶,乙醇与核酸不会起任何化学反应,对DNA很安全,因此是理想的沉淀剂。 DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺去DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合。一般实验中,是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混合,其乙醇的最终含量占67%左右。因而也可改用95%乙醇来替代无水乙醇(因为无水乙醇的价格远远比95%乙醇昂贵)。但是加95%的乙醇使总体积增大,而DNA在溶液中有一定程度的溶解,因而DNA损失也增大,尤其用多次乙醇沉淀时,就会影响收得率。折中的做法是初次沉淀DNA时可用95%乙醇代替无水乙酵,最后的沉淀步骤要使用无水乙醇。也可以用0.6倍体积的异丙醇选择性沉淀DNA。一般在室温下放置15-30分钟即可。 在用乙醇沉淀DNA时,为什么一定要加NaAc或NaCl至最终浓度达0.1~0.25mol/L? 在pH为8左右的溶液中,DNA分子是带负电荷的,加一定浓度的NaAc或NaCl,使Na+中和DNA分子上的负电荷,减少DNA分子之间的同性电荷相斥力,易于互相聚合而形成DNA钠盐沉淀,当加入的盐溶液浓度太低时,只有部分DNA形成DNA钠盐而聚合,这样就造成DNA沉淀不完全,当加入的盐溶液浓度太高时,其效果也不好。在沉淀的DNA中,由于过多的盐杂质存在,影响DNA的酶切等反应,必须要进行洗涤或重沉淀。 加核糖核酸酶降解核糖核酸后,为什么再要用SDS与KAc来处理? 加进去的RNase本身是一种蛋白质,为了纯化DNA,又必须去除之,加SDS可使它们成为SDS-蛋白复合物沉淀,再加KAc使这些复合物转变为溶解度更小的钾盐形式的SDS-蛋白质复合物,使沉淀更加完全。也可用饱和酚、氯仿抽提再沉淀,去除RNase。在溶液中,有人以KAc代替NaAc,也可以收到较好效果。 7.为什么在保存或抽提DNA过程中,一般采用TE缓冲液? 在基因操作实验中,选择缓冲液的主要原则是考虑DNA的稳定性及缓冲液成分不产生干扰作用。磷酸盐缓冲系统(pKa=7.2)和硼酸系统(pKa=9.24)等虽然也都符合细胞内环境的生理范围(pH),可作DNA的保存液,但在转化实验时,磷酸根离子的种类及数量将与Ca2+产生Ca3(PO4)2沉淀;在DNA反应时,不同的酶对辅助因子的种类及数量要求不同,有的要求高离子浓度,有的则要求低盐浓度,采用Tris-HCl(pKa=8.0)的缓冲系统,由于缓冲液是TrisH+/Tris,不存在金属离子的干扰作用,故在提取或保存DNA时,大都采用Tris-HCl系统,而TE缓冲液中的EDTA更能稳 苯酚、氯仿、异戊醇在DNA提取时的作用 抽提DNA去除蛋白质时,怎样使用酚与氯仿较好? 酚与氯仿是非极性分子,水是极性分子,当蛋白水溶液与酚或氯仿混合时,蛋白质分子之间的水分子就被酚或氯仿挤去,使蛋白失去水合状态而变性。经过离心,变性蛋白质的密度比水的密度为大,因而与水相分离,沉淀在水相下面,从而与溶解在水相中的DNA分开。而酚与氯仿有机溶剂比重更大,保留在最下层。作为表面变性的酚与氯仿,在去除蛋白质的作用中,各有利弊,酚的变性作用大,但酚与水相有一定程度的互溶,大约10%~15%的水溶解在酚相中,因而损失了这部分水相中的DNA,而氯仿的变性作用不如酚效果好,但氯仿与水不相混溶,不会带走DNA。所以在抽提过程中,混合使用酚与氯仿效果最好。经酚第一次抽提后的水相中有残留的酚,由于酚与氯仿是互溶的,可用氯仿第二次变性蛋白质,此时一起将酚带走。也可以在第二次抽提时,将酚与氯仿混合(1:1)使用。 为什么用酚与氯仿抽提DNA时,还要加少量的异戊酵? 在抽提DNA时,为了混合均匀,必须剧烈振荡容器数次,这时在混合液内易产生气泡,气泡会阻止相互间的充分作用。加入异戊醇能降低分子表面张力,所以能减少抽提过程中的泡沫产生。一般采用氯仿与异戊酵为24:1之比。也可采用酚、氯仿与异戊醇之比为25:24:1(不必先配制,可在临用前把一份酚加一份24:1的氯仿与异戊醇即成),同时异戊醇有助于分相,使离心后的上层水相,中层变性蛋白相以及下层有机溶剂相维持稳定。 苯酚:氯仿:异戊醇为什么要25:24:1? 抽提DNA去除蛋白质时,怎样使用酚与氯仿较好?酚与氯仿是非极性分子,水是极性分子,当蛋白水溶液与酚或氯仿混合时,蛋白质分子之间的水分子就被酚或氯仿挤去,使蛋白失去水合状态而变性。经过离心,变性蛋白质的密度比水的密度为大,因而与水相分离,沉淀在水相下面,从而与溶解在水相中的DNA分开。而酚与氯仿有机溶剂比重更大,保留在最下层。作为表面变性的酚与氯仿,在去除蛋白质的作用中,各有利弊,酚的变性作用大,但酚与水相有一定程度的互溶,大约10%~15%的水溶解在酚相中,因而损失了这部分水相中的DNA,而氯仿的变性作用不如酚效果好,但氯仿与水不相混溶,不会带走DNA。所以在抽提过程中,混合使用酚与氯仿效果最好。经酚第一次抽提后的水相中有残留的酚,由于酚与氯仿是互溶的,可用氯仿第二次变性蛋白质,此时一起将酚带走。也可以在第二次抽提时,将酚与氯仿混合(1:1)使用。 为什么用酚与氯仿抽提DNA时,还要加少量的异戊酵?在抽提DNA时,为了混合均匀,必须剧烈振荡容器数次,这时在混合液内易产生气泡,气泡会阻止相互间的充分作用。加入异戊醇能降低分子表面张力,所以能减少抽提过程中的泡沫产生。一般采用氯仿与异戊酵为24:1之比。也可采用酚、氯仿与异戊醇之比为25:24:1(不必先配制,可在临用前把一份酚加一份24:1的氯仿与异戊醇即成),同时异戊醇有助于分相,使离心后的上层水相,中层变性蛋白相以及下层有机溶剂相维持稳定。

低盐发酵酱油的生产中可以添加酵母抽提物吗?

酵母抽提物作为天然来源的食品原料,在酱油中添加不仅能减少盐的用量,还能有效提升酱油的品质及风味掩盖酱油酿造过程中产生的各种不良气味,突出产品的自然发酵酱香改善上色效果,能增加酱油产品的氨基酸态氮含量提升品质。法国思宾格酵母抽提物能达到30%的减盐效果。

苯酚、氯仿、异戊醇抽提DNA的原理,以及这三者的作用是什么?

苯酚、氯仿、异戊醇抽提DNA的原理是通过有机溶剂抽提,去除蛋白,多糖,酚类等杂质,再加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。使用苯酚抽提细胞DNA时,苯酚的作用是使蛋白质变性,同时抑制了DNase的降解作用。用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相,而DNA溶于水相。氯仿的作用是克服酚的缺点;加速有机相与液相分层。最后用氯仿抽提:去除核酸溶液中的迹量酚。(酚易溶于氯仿中)用酚-氯仿抽提细胞基因组DNA时,通常要在酚-氯仿中加少许异戊醇,为什么?因为异戊醇可以减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡。异戊醇可以降低表面张力,从而减少气泡产生。另外,异戊醇有助于分相,使离心后的上层含DNA的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定。

苯酚氯仿抽提dna原理

苯酚/氯仿提取DNA是利用酚是蛋白质的变性剂,反复抽提,使蛋白质变性,SDS(十二烷基磺酸钠)将细胞膜裂解,在蛋白酶K、EDTA的存在下消化蛋白质或多肽或小肽分子,核蛋白变性降解,使DNA从核蛋白中游离出来。苯酚/氯仿提取DNA是利用酚是蛋白质的变性剂,反复抽提,使蛋白质变性,SDS(十二烷基磺酸钠)将细胞膜裂解,在蛋白酶K、EDTA 的存在下消化蛋白质或多肽或小肽分子,核蛋白变性降解,使DNA从核蛋白中游离出来。DNA易溶于水,不溶于有机溶剂。蛋白质分子表面带有亲水基团,也容易进行水合作用,并在表面形成一层水化层,使蛋白质分子能顺利地进入到水溶液中形成稳定的胶体溶液。当有机溶液存在时,蛋白质的这种胶体稳定性遭到破坏,变性沉淀。离心后有机溶剂在试管底层(有机相),DNA存在于上层水相中,蛋白质则沉淀于两相之间。酚–氯仿抽提的作用是除去未消化的蛋白质。氯仿的作用是有助于水相与有机相分离和除去DNA溶液中的酚。抽提后的DNA溶液用2倍体积的无水乙醇在NaCl存在下沉淀DNA,回收DNA用70%乙醇洗去DNA沉淀中的盐,真空干燥,用TE缓冲液溶解DNA备用。

苯酚/氯仿,氯仿抽提的技术原理

苯酚/氯仿,氯仿抽提的技术原理如下:苯酚/氯仿提取DNA是利用酚是蛋白质的变性剂,反复抽提,使蛋白质变性,SDS(十二烷基磺酸钠)将细胞膜裂解,在蛋白酶K、EDTA 的存在下消化蛋白质或多肽或小肽分子,核蛋白变性降解,使DNA从核蛋白中游离出来。DNA易溶于水,不溶于有机溶剂。蛋白质分子表面带有亲水基团,也容易进行水合作用,并在表面形成一层水化层,使蛋白质分子能顺利地进入到水溶液中形成稳定的胶体溶液。当有机溶液存在时,蛋白质的这种胶体稳定性就会遭到破坏,变性沉淀。离心后有机溶剂在试管底层(有机相),DNA存在于上层水相中,蛋白质则沉淀于两相之间。酚–氯仿抽提的作用是除去未消化的蛋白质。氯仿的作用是有助于水相与有机相分离和除去DNA溶液中的酚。抽提后的DNA溶液用2倍体积的无水乙醇在NaCl存在下沉淀DNA,回收DNA用70%乙醇洗去DNA沉淀中的盐,真空干燥,用TE缓冲液溶解DNA备用。

DNA抽提方法与步骤

  高中:原理:1.析出溶解在NaC1溶液中的DNA。2.用冷酒精提取出含杂质较少的DNA。3.DNA在沸水浴时被二苯胺染成蓝色。方法步骤:1.提取细胞核物质:顺时针方向搅拌,稍快,稍重。 5 min2.溶解DNA:3.析出含DNA的黏稠物:蒸馏水300mL,逆时针方向搅拌,缓慢4.过滤:取黏稠物5.再溶解:顺时针方向搅拌,较慢。3 min6.过滤:取滤液。7.提取出含杂质较少的DNA,逆时针方向搅拌,稍慢。5 min8.DNA的鉴定:沸水浴5min大学DNA提取分为三个基本步骤,每个步骤的具体方法可根据样品种类、影响提取的物质以及后续步骤的不同而有区别。利用研磨或者超声破碎细胞,并通过加入去污剂以除掉膜脂。加入蛋白酶,醋酸盐沉淀,或者酚/氯仿抽提,以除掉细胞内的蛋白,如与DNA结合的组蛋白。将DNA在冷乙醇或异丙醇中沉淀,因为DNA在醇中不可溶而黏在一起,这一步也能除掉盐分。另外,目前也有利用吸附过柱的方法提取DNA的商业化试剂盒。2.细胞的破碎细菌有坚硬的细胞壁,首先要破碎经胞。方法有三种;①机械方法:超声波处理法、研磨法、匀浆法;②化学试剂法:用SDS处理细胞;③酶解法:加入溶菌酶或蜗牛酶,都可使细胞壁破碎。3.DNA提取的几种方法(1).浓盐法A. 利用RNA和DNA在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1M 氯 纳提取化钠抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的 氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间,而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA 钠盐沉淀出来.B. 也可用0.15 MNaCL液反复洗涤细胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脱氧核糖蛋白,再按氯仿---异醇法除去蛋白.两种方法比较,后种方法使核酸降解可能少一些.C.以稀盐酸溶液提取DNA 时,加入适量去污剂,如SDS可有助于蛋白质与DNA 的分离。在提取过程中为抑制组织中的DNase对DNA 的降解作用,在氯化钠溶液中加入柠檬酸钠作为金属离子的烙合剂.通常用.15MNaCL,0.015M柠檬钠,并称SSC溶液,提取DNA. (2).阴离子去污剂法; 用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取DNA .由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,因为阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取DNA(3).苯酚抽提法:苯酚作为蛋白变性剂,同时抑制了DNase的降解作用.用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相,而DNA溶于水相。离心分层后取出水层,多次重复操作,再合并含DNA 的水相,利用核酸不溶于醇的性质,用乙醇沉淀DNA 。此时DNA是十分粘稠的物质,可用玻璃漫漫绕成一团,取出。此法的特点是使提取的DNA保持天然状态(4).水抽提法:利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA,然后将沉淀溶于水中,使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M.加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66% ,80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得DNA样品.此法提取的DNA中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取过程中加入SDS.

DNA抽提方法与步骤

  高中:原理:1.析出溶解在NaC1溶液中的DNA。2.用冷酒精提取出含杂质较少的DNA。3.DNA在沸水浴时被二苯胺染成蓝色。方法步骤:1.提取细胞核物质:顺时针方向搅拌,稍快,稍重。 5 min2.溶解DNA:3.析出含DNA的黏稠物:蒸馏水300mL,逆时针方向搅拌,缓慢4.过滤:取黏稠物5.再溶解:顺时针方向搅拌,较慢。3 min6.过滤:取滤液。7.提取出含杂质较少的DNA,逆时针方向搅拌,稍慢。5 min8.DNA的鉴定:沸水浴5min大学DNA提取分为三个基本步骤,每个步骤的具体方法可根据样品种类、影响提取的物质以及后续步骤的不同而有区别。利用研磨或者超声破碎细胞,并通过加入去污剂以除掉膜脂。加入蛋白酶,醋酸盐沉淀,或者酚/氯仿抽提,以除掉细胞内的蛋白,如与DNA结合的组蛋白。将DNA在冷乙醇或异丙醇中沉淀,因为DNA在醇中不可溶而黏在一起,这一步也能除掉盐分。另外,目前也有利用吸附过柱的方法提取DNA的商业化试剂盒。2.细胞的破碎细菌有坚硬的细胞壁,首先要破碎经胞。方法有三种;①机械方法:超声波处理法、研磨法、匀浆法;②化学试剂法:用SDS处理细胞;③酶解法:加入溶菌酶或蜗牛酶,都可使细胞壁破碎。3.DNA提取的几种方法(1).浓盐法A. 利用RNA和DNA在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1M 氯 纳提取化钠抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的 氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间,而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA 钠盐沉淀出来.B. 也可用0.15 MNaCL液反复洗涤细胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脱氧核糖蛋白,再按氯仿---异醇法除去蛋白.两种方法比较,后种方法使核酸降解可能少一些.C.以稀盐酸溶液提取DNA 时,加入适量去污剂,如SDS可有助于蛋白质与DNA 的分离。在提取过程中为抑制组织中的DNase对DNA 的降解作用,在氯化钠溶液中加入柠檬酸钠作为金属离子的烙合剂.通常用.15MNaCL,0.015M柠檬钠,并称SSC溶液,提取DNA. (2).阴离子去污剂法; 用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取DNA .由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,因为阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取DNA(3).苯酚抽提法:苯酚作为蛋白变性剂,同时抑制了DNase的降解作用.用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相,而DNA溶于水相。离心分层后取出水层,多次重复操作,再合并含DNA 的水相,利用核酸不溶于醇的性质,用乙醇沉淀DNA 。此时DNA是十分粘稠的物质,可用玻璃漫漫绕成一团,取出。此法的特点是使提取的DNA保持天然状态(4).水抽提法:利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA,然后将沉淀溶于水中,使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M.加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66% ,80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得DNA样品.此法提取的DNA中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取过程中加入SDS.

DNA抽提方法与步骤

高中:原理:1.析出溶解在NaC1溶液中的DNA。2.用冷酒精提取出含杂质较少的DNA。3.DNA在沸水浴时被二苯胺染成蓝色。方法步骤:1.提取细胞核物质:顺时针方向搅拌,稍快,稍重。5min2.溶解DNA:3.析出含DNA的黏稠物:蒸馏水300mL,逆时针方向搅拌,缓慢4.过滤:取黏稠物5.再溶解:顺时针方向搅拌,较慢。3min6.过滤:取滤液。7.提取出含杂质较少的DNA,逆时针方向搅拌,稍慢。5min8.DNA的鉴定:沸水浴5min大学DNA提取分为三个基本步骤,每个步骤的具体方法可根据样品种类、影响提取的物质以及后续步骤的不同而有区别。利用研磨或者超声破碎细胞,并通过加入去污剂以除掉膜脂。加入蛋白酶,醋酸盐沉淀,或者酚/氯仿抽提,以除掉细胞内的蛋白,如与DNA结合的组蛋白。将DNA在冷乙醇或异丙醇中沉淀,因为DNA在醇中不可溶而黏在一起,这一步也能除掉盐分。另外,目前也有利用吸附过柱的方法提取DNA的商业化试剂盒。2.细胞的破碎细菌有坚硬的细胞壁,首先要破碎经胞。方法有三种;①机械方法:超声波处理法、研磨法、匀浆法;②化学试剂法:用SDS处理细胞;③酶解法:加入溶菌酶或蜗牛酶,都可使细胞壁破碎。3.DNA提取的几种方法(1).浓盐法A.利用RNA和DNA在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1M氯纳提取化钠抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间,而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA钠盐沉淀出来.B.也可用0.15MNaCL液反复洗涤细胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脱氧核糖蛋白,再按氯仿---异醇法除去蛋白.两种方法比较,后种方法使核酸降解可能少一些.C.以稀盐酸溶液提取DNA时,加入适量去污剂,如SDS可有助于蛋白质与DNA的分离。在提取过程中为抑制组织中的DNase对DNA的降解作用,在氯化钠溶液中加入柠檬酸钠作为金属离子的烙合剂.通常用.15MNaCL,0.015M柠檬钠,并称SSC溶液,提取DNA.(2).阴离子去污剂法;用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取DNA.由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,因为阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取DNA(3).苯酚抽提法:苯酚作为蛋白变性剂,同时抑制了DNase的降解作用.用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相,而DNA溶于水相。离心分层后取出水层,多次重复操作,再合并含DNA的水相,利用核酸不溶于醇的性质,用乙醇沉淀DNA。此时DNA是十分粘稠的物质,可用玻璃漫漫绕成一团,取出。此法的特点是使提取的DNA保持天然状态(4).水抽提法:利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA,然后将沉淀溶于水中,使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M.加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66%,80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得DNA样品.此法提取的DNA中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取过程中加入SDS.

DNA抽提方法与步骤

高中:原理:1.析出溶解在NaC1溶液中的DNA。2.用冷酒精提取出含杂质较少的DNA。3.DNA在沸水浴时被二苯胺染成蓝色。方法步骤:1.提取细胞核物质:顺时针方向搅拌,稍快,稍重。5min2.溶解DNA:3.析出含DNA的黏稠物:蒸馏水300mL,逆时针方向搅拌,缓慢4.过滤:取黏稠物5.再溶解:顺时针方向搅拌,较慢。3min6.过滤:取滤液。7.提取出含杂质较少的DNA,逆时针方向搅拌,稍慢。5min8.DNA的鉴定:沸水浴5min大学DNA提取分为三个基本步骤,每个步骤的具体方法可根据样品种类、影响提取的物质以及后续步骤的不同而有区别。利用研磨或者超声破碎细胞,并通过加入去污剂以除掉膜脂。加入蛋白酶,醋酸盐沉淀,或者酚/氯仿抽提,以除掉细胞内的蛋白,如与DNA结合的组蛋白。将DNA在冷乙醇或异丙醇中沉淀,因为DNA在醇中不可溶而黏在一起,这一步也能除掉盐分。另外,目前也有利用吸附过柱的方法提取DNA的商业化试剂盒。2.细胞的破碎细菌有坚硬的细胞壁,首先要破碎经胞。方法有三种;①机械方法:超声波处理法、研磨法、匀浆法;②化学试剂法:用SDS处理细胞;③酶解法:加入溶菌酶或蜗牛酶,都可使细胞壁破碎。3.DNA提取的几种方法(1).浓盐法A.利用RNA和DNA在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1M氯纳提取化钠抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间,而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA钠盐沉淀出来.B.也可用0.15MNaCL液反复洗涤细胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脱氧核糖蛋白,再按氯仿---异醇法除去蛋白.两种方法比较,后种方法使核酸降解可能少一些.C.以稀盐酸溶液提取DNA时,加入适量去污剂,如SDS可有助于蛋白质与DNA的分离。在提取过程中为抑制组织中的DNase对DNA的降解作用,在氯化钠溶液中加入柠檬酸钠作为金属离子的烙合剂.通常用.15MNaCL,0.015M柠檬钠,并称SSC溶液,提取DNA.(2).阴离子去污剂法;用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取DNA.由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,因为阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取DNA(3).苯酚抽提法:苯酚作为蛋白变性剂,同时抑制了DNase的降解作用.用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相,而DNA溶于水相。离心分层后取出水层,多次重复操作,再合并含DNA的水相,利用核酸不溶于醇的性质,用乙醇沉淀DNA。此时DNA是十分粘稠的物质,可用玻璃漫漫绕成一团,取出。此法的特点是使提取的DNA保持天然状态(4).水抽提法:利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA,然后将沉淀溶于水中,使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M.加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66%,80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得DNA样品.此法提取的DNA中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取过程中加入SDS.

使用丙酮抽提具体该如何操作?需要哪些设备,实验室条件越简单越好。

用索氏提取器。从固体物质中萃取化合物的一种方法是,用溶剂将固体长期浸润而将所需要的物质浸出来,即长期浸出法。此法花费时间长.溶剂用量大、效率不高。在实验室多采用脂肪提取器来提取、脂肪提取器就是利用溶剂回流及虹吸原理,使固体物质连续不断地被纯溶剂萃取,既节约溶利萃取效率又高。萃取前先将固体物质研碎,以增加固液接触的面积。然后将固体物质放在滤纸套内,置于提取器中,提取器的下端勺盛有溶剂的圆底烧瓶相连,上面接回流冷凝管。加热园底烧瓶,使溶剂沸腾,蒸气通过提取器的支管上升,被冷凝后滴入提取器中,溶剂和固体接触进行萃取,当溶剂面超过虹吸管的最高处时,含有萃取物的溶剂虹吸回烧瓶,因而萃取出一部分物质,如此重复,使固体物质不断为纯的溶剂所苹取、将萃取出的物质富集在烧瓶中。

酱油里面酵母抽提物是什么?

酵母抽提物不是添加剂,酵母抽提物(YE)具有天然来源,加工程度极低,是食品制造商和消费者的一种优质食品配料。它被许多食品行业专业人士作为一种芳香配料,思宾格酵母抽提物(YE)广泛添加到产品中,比如:酱油、醋、辣椒酱等调味品、还有方便食品调味包、卤制品、汤汁料包等等。知名品牌的调味品都会包含酵母抽提物的。百度这方面的资料很多。

国外的酵母抽提物的品牌有什么推荐?

因为对工艺的要求比较高,目前酵母抽提物(YE)的品牌不是很多,全球份额比较高的是法国思宾格Biospringer公司,拥有八大工厂,一支遍布欧洲、中东、非洲、美洲、亚洲和大洋州的商务团队,一个覆盖全球的食品应用中心网络,一支技术和研发团队。再不明白自己去百度下。

粮食中索氏抽提法粗脂肪含量测定的注意事项有哪些

1、千万注意通风,防止乙醚中毒。2、滤筒要紧密,防止漏出,漏出要重做3、滤筒高度要高于回流管3、多糖或糊精含量高的要先用冷水侵泡,干燥后再做。否则容易糊4、温度保持在45度左右,每小时8到12个回流5、一定是无水乙醚6、

梦见抽提里有很多鸡蛋的预兆

1、梦见抽提里有很多鸡蛋的预兆境遇坚固安泰,有下属之助力,地位、财产均安全,以木解消水火之相克,致成功,但若人地格有凶数,于成功后,难以伸展,且有突发之灾祸、遭难等之虑,更容易发生因爱情上而产生之不测灾难、凶变等。【中吉】吉凶指数:92(内容仅供参考,不代表本站立场)2、梦见抽提里有很多鸡蛋的宜忌「宜」宜穿格子衬衫,宜加班,宜健身。 「忌」忌会旧友,忌坐台阶上晒太阳,忌去公园。3、梦见抽提里有很多鸡蛋是什么意思梦见鸡,财运滚滚而来,你会有正、横财,未婚的会找到伴已婚的会有子女。梦见抽提里有很多鸡蛋,个人私生活面上的运气是不错,_五夜晚的玩乐运让人兴奋期待。但是相对的似乎就没什么心在工作上了,集中力较易被其他事物所吸引。如果上午时段还是能维持工作读书上的基本专心,傍晚玩乐起来会更愉快轻松喔。另外这两天需留意电话连络上的疏忽,有听错话、会错意等的可能。 出行的人梦见抽提里有很多鸡蛋,建议顺利如愿平安。梦见抽提里有很多鸡蛋,按周易五行分析,吉祥色彩是白色,幸运数字是2,桃花位在正东方向,财位在正南方向,开运食物是海带。梦见鸡,财源会滚滚而来,未婚的会找到伴侣,已婚的会有子女。本命年的人梦见抽提里有很多鸡蛋,意味着大致平顺,处事勿过刚,慎防财物损失。怀孕的人梦见抽提里有很多鸡蛋,预示生女,忌动土。母体多保养。梦见鸡蛋,将来生女儿的几率很高。上学的人梦见抽提里有很多鸡蛋,意味着文科成绩较差,可望录取。恋爱中的人梦见抽提里有很多鸡蛋,说明起伏不定、冷热难测,好好把握。梦见鸡蛋,最近会走霉运,由于自己的粗心大意,会出些小错误,引起上级的不满,要细心啊。做生意的人梦见抽提里有很多鸡蛋,代表先得后失,宜守不宜再投资或扩大。恋爱中的人梦见冰箱里有鸡蛋,说明心甘情愿,有诚信相处婚姻可成。恋爱中的人梦见鸡蛋里有小鸡,说明亲人有意见,不可灰心,终有希望成婚。梦见鸡,财运滚滚而来,你会有正、横财,未婚的会找到伴已婚的会有子女。出行的人梦见鸡蛋里有仔,建议如期出行,顺利。孕妇梦见冰箱里有鸡蛋,工作与人际关系上都因跟你搭档的人能言善道你也间接受惠喔。这两天颇有沾_人光的好运呢,跟那些口才溜的人搭配颇有互补作用哩。像是与朋友长时间的电话聊天也是很好的气氛转换方式,偶尔来一次也不错呢。而午后运气将呈曲线上_,重要决策宜选择安排在下午。 梦见鸡蛋,最近会走霉运,由于自己的粗心大意,会出些小错误,引起上级的不满,要细心啊。梦见汤,预示好消息,及其带来的安慰。梦见鸡蛋,将来生女儿的几率很高。

酵母抽提物在植物基产品中的作用有哪些?

思宾格酵母抽提物富含蛋白质,且不含任何转基因成分,并获得了清真和洁食组织认证,可以广泛使用在各类素食产品内。使用酵母抽提物可以显著地提升食品的整体风味,改善素食的质构,掩盖令人不愉悦的异味,令其口味更加均衡。我的回答不知你是否满意?

油砂抽提物的化学组成

从选取的10个样品中分析可知,油层饱和烃含量在67.43%~74.85%之间,平均值70.43%;芳香烃含量在6.18%~14.29%之间,平均值10.75%;非烃含量在5.92%~10.28%之间,平均值8.33%;沥青质含量在3.01%~16.16%之间,平均值10.48%。水层饱和烃含量在 41.50%~77.45%之间,平均值 61.23%;芳香烃含量在 1.94%~20.80%之间,平均值8.79%;非烃含量在2.21%~12.97%之间,平均值7.20%;沥青质含量在12.25%~40.90%之间,平均值22.79%。干层饱和烃含量在38.52%~75.96%之间,平均值56.60%;芳香烃含量在2.63%~14.34%之间,平均值8.14%;非烃含量在2.32%~22.43%之间,平均值12.12%。沥青质含量在7.53%~39.14%之间,平均值23.14%。油层、水层、干层等不同类型的储层抽提物的族组成有一定的差别,油层-水层-干层油层抽提物中饱和烃、芳香烃含量依次降低,沥青质含量依次增加(图3.7)。图3.7 不同类型储层抽提物平均族组成分布

索氏抽提法的实验总结

采用索氏抽提法中的残余法,即用低沸点有机溶剂(乙醚或石油醚)回流抽提,除去样品中的粗脂肪,以样品与残渣重量之差,计算粗脂肪含量。由于有机溶剂的抽提物中除脂肪外,还或多或少含有游离脂肪酸、甾醇、磷脂、蜡及色素等类脂物质,因而抽提法测定的结果只能是粗脂肪。实验准备 (1)索氏脂肪抽提器(图1)或YG-Ⅱ型油分测定器(2)干燥器(直径15~18cm,盛变色硅胶)(3)不锈钢镊子(长20cm)(4)培养皿(5)分析天平(感量0.001g)(6)称量瓶(7)恒温水浴(8)烘箱(9)样品筛(60目) 切片将滤纸切成8cm×8cm,叠成一边不封口的纸包,用硬铅笔编写顺序号,按顺序排列在培养皿中。将盛有滤纸包的培养皿移入105±2℃烘箱中干燥2h,取出放入干燥器中,冷却至室温。按顺序将各滤纸包放人同一称量瓶中称重(记作a)、称量时室内相对湿度必须低于70%。包装干燥在上述已称重的滤纸包中装入3g左右研细的样品,封好包口,放入105±2℃的烘箱中干燥3h,移至干燥器中冷却至室温。按顺序号依次放入称量瓶中称重(记作b)。抽提将装有样品的滤纸包用长镊子放入抽提筒中,注入一次虹吸量的1.67倍的无水乙醚,使样品包完全浸没在乙醚中。连接好抽提器各部分,接通冷凝水水流,在恒温水浴中进行抽提,调节水温在70~80℃之间,使冷凝下滴的乙醚成连珠状(120~150滴/min或回流7次/h以上),抽提至抽取筒内的乙醚用滤纸点滴检查无油迹为止(约需6~12h)。抽提完毕后,用长镊子取出滤纸包,在通风处使乙醚挥发(抽提室温以12~25℃为宜)。提取瓶中的乙醚另行回收。称重待乙醚挥发之后,将滤纸包置于105±2℃烘箱中干燥2h,放入干燥器冷却至恒重为止(记作c)。

酱油中为什么添加酵母抽提物?

酵母抽提物作为天然来源的食品原料,在酱油中添加不仅能减少盐的用量,还能有效提升酱油的品质及风味掩盖酱油酿造过程中产生的各种不良气味,突出产品的自然发酵酱香改善上色效果,能增加酱油产品的氨基酸态氮含量提升品质。法国思宾格酵母抽提物能达到30%的减盐效果。

苯酚、氯仿、异戊醇抽提DNA的原理,以及这三者的作用是什么?

苯酚、氯仿、异戊醇抽提DNA的原理是通过有机溶剂抽提,去除蛋白,多糖,酚类等杂质,再加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。使用苯酚抽提细胞DNA时,苯酚的作用是使蛋白质变性,同时抑制了DNase的降解作用。用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相,而DNA溶于水相。氯仿的作用是克服酚的缺点;加速有机相与液相分层。最后用氯仿抽提:去除核酸溶液中的迹量酚。(酚易溶于氯仿中)用酚-氯仿抽提细胞基因组DNA时,通常要在酚-氯仿中加少许异戊醇,为什么?因为异戊醇可以减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡。异戊醇可以降低表面张力,从而减少气泡产生。另外,异戊醇有助于分相,使离心后的上层含DNA的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定。

请问萃取与抽提的区别

萃取是利用化合物在两种互不相溶(或微溶)的溶剂中溶解度或分配系数的不同,使化合物从一种溶剂内转移到另外一种溶剂中而提取出来的冶金过程。抽提是从一种固体或一种液体混合物中将所要的物质根据其特性用溶剂提取分离出来的方法。基本无区别 可以替代

酚氯仿抽提dna原理

苯酚/氯仿提取DNA是利用酚是蛋白质的变性剂,反复抽提,使蛋白质变性,SDS(十二烷基磺酸钠)将细胞膜裂解,在蛋白酶K、EDTA 的存在下消化蛋白质或多肽或小肽分子,核蛋白变性降解,使DNA从核蛋白中游离出来。DNA易溶于水,不溶于有机溶剂。蛋白质分子表面带有亲水基团,也容易进行水合作用,并在表面形成一层水化层,使蛋白质分子能顺利地进入到水溶液中形成稳定的胶体溶液。当有机溶液存在时,蛋白质的这种胶体稳定性遭到破坏,变性沉淀。离心后有机溶剂在试管底层(有机相),DNA存在于上层水相中,蛋白质则沉淀于两相之间。酚–氯仿抽提的作用是除去未消化的蛋白质。氯仿的作用是有助于水相与有机相分离和除去DNA溶液中的酚。抽提后的DNA溶液用2倍体积的无水乙醇在NaCl存在下沉淀DNA,回收DNA用70%乙醇洗去DNA沉淀中的盐,真空干燥,用TE缓冲液溶解DNA备用。

索氏提取法食品脂肪质量时如何判断抽提是否完全?

复制器去死,发视频赤峰资料是如何?

沥青混合料抽提试验的目的是什么?

验证沥青用量跟合成通过率

化学中所说的抽提是指什么?

从甘草中提取的先用稀碱液提取甘草中的甘草酸,在把提取的稀碱液用浓硫酸酸化,的甘草酸粉。以甘草酸粉为原料,用冰醋酸和乙醇的混合液提取结晶而成。甘草次酸实际就是甘草酸分解后出去两个葡萄糖的部分。给追加些分啊!

氯仿甘油三酯有机抽提的原理是什么

氯仿甘油三酯有机抽提的原理是是通过加有机溶剂,过滤多糖,蛋白等其它物质,然后加入乙醇将核酸分离提取出来。经酚第一次抽提后的水相中有残留的酚,由于酚与氯仿是互溶的,可用氯仿第2次变性蛋白质,现在一同将酚带走。加入异戊醇能减小分子表面张力,因而能减少抽提流程中的泡沫发生。通常选用氯仿与异戊酵为24:1的比例,这是因为异戊醇可以帮助分相,使离心后的上层水相,下层有机溶剂相,中层变性蛋白相保持稳定的层次。

索氏抽提何时结束

12小时。索氏抽提又名连续提取法、索氏抽提法,是从固体物质中萃取化合物的一种方法。索氏提取法,用于粗脂肪含量的测定,在取样提取后的12小时结束,此时得到最佳测量数据。

什么是co2的抽提作用

您好抽提是在压力较低的环境下使流体中的易挥发组分或者不凝气或者溶解的气体等不想要的东西抽出来,达到去除某种物质的效果。利用SDS固相沉淀测试系统,针对胜利大芦湖油田樊124断块地层原油特性,研究了CO2混相驱条件下,CO2的多次抽提对地层油组分和析蜡温度的影响。研究表明:CO2对地层油中的轻烃具有很强的抽提作用,经CO2多次抽提后,地层油的析蜡温度大幅度升高,甚至超过地层温度,说明在CO2混相驱后期,会在樊124地层油中产生石蜡沉淀,因此,在矿场实施时需采取有效预防措施。希望我的答案能让你满意

血液中抽提DNA的方法步骤

高中生物里边用的方法原理:1.DNA在NaCl溶液中的溶解度,是随着NaCl的浓度的变化而改变的。当NaCl的物质的量浓度为0.14mol/L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。2.DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA。3.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。准备工作:制备鸡血细胞液,方法是:将质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液100mL,置于500mL烧怀中,注入新鲜的鸡血(约180mL),用玻璃棒搅拌,使其充分混合,以免凝血。静置于冰箱内一天,使血细胞自行沉淀。(也可以用离心机离心2min(转速1000转/分)。用吸管吸去上清液。方法步骤:1.提取细胞核物质:顺时针方向搅拌,稍快,稍重。5min2.溶解DNA:3.析出含DNA的黏稠物:蒸馏水300mL,逆时针方向搅拌,缓慢4.过滤:取黏稠物5.再溶解:顺时针方向搅拌,较慢。3min6.过滤:取滤液。7.提取出含杂质较少的DNA,逆时针方向搅拌,稍慢。5min8.DNA的鉴定:沸水浴5min要是其他用途你就在看看七他人的回答好了。

芳烃抽提工艺包括哪些过程及如何抽提

过程:(1)抽提塔,溶剂与原料接触的场所,将芳烃和非芳烃分离开(2)汽提塔:目的是用抽提蒸馏的方法除去富溶剂中的轻质非芳烃。(3) n回收塔:回收塔的目的是将芳烃和环丁砜溶剂分开,塔底的环丁砜打回抽提塔循环使用。塔顶的混合芳烃送至苯塔处理。采用真空操作避免高温下环丁砜分解。(4) n非芳水洗塔:目的是用水洗的办法回收非芳烃中的环丁砜,即利用水与溶剂互溶的性能,将非芳烃中的环丁砜溶解下来。(5) n水汽提塔:从非芳烃水洗塔底部出来的贫溶剂水和汽提塔顶回流罐底来的含有微量非芳烃的水一起送至水汽提塔处理,目的是除去水中的轻质非芳烃,以防非芳烃在系统中聚集影响芳烃质量,以及回收被非芳烃携带而被水溶下的溶剂。溶剂抽提法:其步骤是宽馏分重整汽油进入脱戊烷塔,脱戊烷塔顶流出戊烷成分,塔底物流进入脱重组分塔,塔顶分出抽提进料进入芳烃抽提部分,塔底重汽油送出装置。抽提进料得到芳烃物质和混合芳烃物质,非芳烃送出装置,混合芳烃经过白土精制,芳烃精馏后,得到苯,甲苯,二甲苯和邻二甲苯产品,重芳烃送出装置。u200b

萃取和抽提的区别

萃取又称溶剂萃取或液液萃取(以区别于固液萃取,即浸取),亦称抽提(通用于石油炼制工业),是一种用液态的萃取剂处理与之不互溶的双组分或多组分溶液,实现组分分离的传质分离过程,是一种广泛应用的单元操作。 利用相似相溶原理,萃取有两种方式: 液-液萃取,用选定的溶剂分离液体混合物中某种组分,溶剂必须与被萃取的混合物液体不相溶,具有选择性的溶解能力,而且必须有好的热稳定性和化学稳定性,并有小的毒性和腐蚀性。如用苯分离煤焦油中的酚;用有机溶剂分离石油馏分中的烯烃; 用CCl4萃取水中的Br2. 固-液萃取,也叫浸取,用溶剂分离固体混合物中的组分,如用水浸取甜菜中的糖类;用酒精浸取黄豆中的豆油以提高油产量;用水从中药中浸取有效成分以制取流浸膏叫“渗沥”或“浸沥”。 物质的提纯是把混合物中的杂质除去,以得到纯物质的过程。在提纯中如果杂质发生化学变化,不必恢复为原来的物质。

什么叫抽提?

生物中一种酶提取的方法.Extraction是把酶从生物组织或细胞中以溶解状态释放出来的过程,以供进一步从中分离纯化出来所需要的酶. 蒸馏指利用液体混合物中各组分挥发性的差异而将组分分离的传质过程。将液体沸腾产生的蒸气导入冷凝管,使之冷却凝结成液体的一种蒸发、冷凝的过程。蒸馏是分离混合物的一种重要的操作技术,尤其是对于液体混合物的分离有重要的实用意义。

抽提是什么意思?

  抽提或萃取包括从液态样品(如,地层水、钻井泥浆或泥浆滤液)中萃取有机成分。  在地质实验分析流程中,岩样的抽提或萃取既是一个样品的预处理环节,为进一步的精细实验分析制备样品,又是一项独立的分析项目,可对所萃取的成分提供定量分析数据。  常用的抽提方法有:  ①热抽提法。将经过净化处理的岩样粉末置于抽提器,如索氏萃取(Soxhlet extraction)中,加热恒温循环萃取。  ②超声萃取法。室温下加试剂浸泡超声波萃取。  ③试剂浸泡法。室温下直接浸泡萃取。  在石油地质一地球化学实验分析中,一般以氯仿作试剂,采用热抽提法,直接从岩样中抽提出的可溶有机成分,习惯上称作“可溶有机质”或“氯仿沥青”。  参考资料:http://baike.baidu.com/view/7941316.htm

什么是抽提,它的主要作用是什么

  抽提是生物中一种酶提取的方法,它的主要作用就是把酶从生物组织或细胞中以溶解状态释放出来的过程,以供进一步从中分离纯化出来所需要的酶。  相关知识拓展:酶    酶(英文:Enzyme,源于希腊语:ενζυμον,“在酵里面”),指具有生物催化功能的高分子物质, 在酶的催化反应体系中,反应物分子被称为底物,底物通过酶的催化转化为另一种分子。几乎所有的细胞活动进程都需要酶的参与,以提高效率。与其他非生物催化剂相似,酶通过降低化学反应的活化能(用Ea或ΔG表示)来加快反应速率,大多数的酶可以将其催化的反应之速率提高上百万倍;事实上,酶是提供另一条活化能需求较低的途径,使更多反应粒子能拥有不少于活化能的动能,从而加快反应速率。酶作为催化剂,本身在反应过程中不被消耗,也不影响反应的化学平衡。酶有正催化作用也有负催化作用,不只是加快反应速率,也有减低反应速率。与其他非生物催化剂不同的是,酶具有高度的专一性,只催化特定的反应或产生特定的构型。  虽然酶大多是蛋白质,但少数具有生物催化功能的分子并非为蛋白质,有一些被称为核酶的RNA分子也具有催化功能。此外,通过人工合成所谓人工酶也具有与酶类似的催化活性,包括人工合成的DNA。 有人认为酶应定义为具有催化功能的生物大分子,即生物催化剂。  酶的催化活性会受其他分子影响:抑制剂是可以降低酶活性的分子;激活剂则是可以增加酶活性的分子。有许多药物和毒药就是酶的抑制剂。酶的活性还可以被温度、化学环境(如pH值)、底物浓度以及电磁波(如微波)等许多因素所影响。

RNApure 高纯总RNA快速抽提试剂盒(离心柱型)提取原理是怎样的

胍盐/β-巯基乙醇法胍盐使细胞充分裂解,β-巯基乙醇做为蛋白的变性剂在实验中可抑制RNase的活性,保护RNA不被降解。通过高盐溶液上柱,低盐溶液洗脱,配合吸附柱使用。

如何分别从细胞浆和细胞核中抽提RNA

如何分别从细胞浆和细胞核中抽提RNA操作步骤:样品处理:a. 植物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织在液氮中研磨,把粉末加入到1ml裂解液中混匀。b. 动物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1ml裂解液,用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理。c. 贴壁细胞:直接在培养板中加入裂解液裂解细胞,每106细胞加1ml 裂解液。用取样器吹打混匀。d. 细胞悬液:离心收集细胞。每106动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加1ml裂解液混匀。e. 血液处理:取0.2-1ml新鲜血液加3倍体积红细胞裂解液,混匀后室温放置10分钟,10000rpm离心1分钟。弃上清,若沉淀含有红细胞,可加入2倍体积红细胞裂解液重复裂解步骤。离心后沉淀加入1 ml裂解液混匀。 将处理后的样品在室温放置5分钟,使得核酸蛋白复合物完全分离。向匀浆样品中加0.2ml氯仿,盖好管盖,剧烈振荡15秒,室温放置3-5分钟。2-8℃ 12000 rpm离心10分钟。RNA主要在上层无色的水相中,把水相转移到新管中,不要吸到沉淀。

从RNA抽提到制成cDNA的全过程

可以用试剂盒,总RNA提取的试剂盒和RT-PCR试剂盒,或者如果只需要单链cDNA也可以买相应的,看你的需要了,宝生物就有卖。至于过程,简单的说,先要弄清你所需的蛋白在什么阶段才有表达,就选这一时期的细胞或组织来提总RNA,反转录的时候是利用mRNA的polyA来设计引物合成单链cDNA,然后再根据你的基因设计特异引物来得到双链的cDNA.提RNA的过程中要防止RNA酶污染,这个可以在网站或试剂盒说明书上查到该如何操作。