革兰染色的原理

革兰氏染色（GramStaining）是用于辨别病菌的一种方式：这类染色法运用细菌细胞壁上的微生物物理性质不一样，可将病菌分为两大类，即革兰氏阳性（GramPositive）与革兰氏阳性菌呈阴性（GramNegative）。这一上色方式由荷兰医师汉斯·布拉德·革兰于1884年所创造发明，最开始是用于辨别肺炎链球菌与克雷白氏肺炎菌中间的关联，后营销推广为辨别细菌种类的关键特点之一，对由病菌感染造成的病症的疾病诊断及医治拥有普遍主要用途。革兰氏染色结果是如何的呢？一、基本原理根据结晶紫初染和碘液媒染后，在植物细胞内产生了不溶解水的结晶紫与碘的一氧化氮合酶，革兰氏阳性菌因为其植物细胞偏厚、肽聚糖网层级较多且化学交联高密度，故遇酒精或甲苯褪色解决时，因缺水反倒使网眼变小，再再加它没有脂质，故酒精解决不容易出现间隙，因而可以把结晶紫与碘一氧化氮合酶紧紧留到壁内，使其仍呈蓝紫色；而革兰氏阳性菌阴性菌因其植物细胞薄、外膜层脂质成分高、肽聚糖层薄且化学交联度差，在遇脱色剂后，以脂质主导的外膜快速融解，薄而疏松的肽聚糖网不可以阻拦结晶紫与碘一氧化氮合酶的总混，因而根据酒精褪色后仍呈没有颜色，再经过沙黄等鲜红色染剂复染，就使革兰氏阳性菌阴性菌呈鲜红色[1]。上色的差别主要是阴性与阳性细菌细胞壁的差别所造成的。血压革兰氏阳性病菌的植物细胞G细菌细胞壁具备偏厚（20-80nm）而高密度的肽聚糖层，高达50层，占细胞壁成分的40%～95%，它同细胞质的表层紧密相连（图2-9）。有的G细菌细胞壁中带有磷壁酸（teichoic-acid），也称胞壁质（murein），它是凡士林和核糖醇的高聚物，磷壁酸一般以糖或碳水化合物的酯而存有。因为磷壁酸带负电，它在体细胞表面调整正离子浓度值。磷壁酸与细胞生长相关，细胞生长中有自溶素（autolysins）酶类起功效，磷壁酸对自溶有着调整作用，阻拦胞壁过多溶解和壁溶。假如植物细胞的肽聚糖层被消溶，G体细胞变成原生质体（protoplasts），植物细胞荡然无存，而只留存细胞质。除链球菌感染外，大部分G细菌细胞壁中含非常少蛋白。血液革兰氏阳性菌呈阴性病菌的植物细胞G—细菌细胞壁比G细菌细胞壁薄（15～20nm）而构造较繁杂，格外膜（outermembrane）和肽聚糖层（2～3nm）（图2-10）。在植物细胞和细胞质膜中间有一个显著的室内空间，称之为壁膜空隙（periplasmicspace）。外膜G—细菌细胞壁外膜的基本成份是脂多糖（lipopolysaccharide,LPS），它同细胞质膜相似之处也是两层脂质，但除不饱和脂肪酸外还带有含糖量和蛋白。LPS的含糖量一部分包含关键含糖量和O-特异含糖量。O-特异含糖量由反复支系的碳水化合物化合物分子结构构成，带有已糖（葡萄糖、半乳糖和鼠李糖）和二脱氨已糖。因为糖的种类不一样，使各种各样G—体细胞具备不一样特点的LPS。关键含糖量（corepolysaccharide）的关键成分是酮脱氨心酸（ketodeoxyoctonate,KDO）。外膜中还带有几类蛋白质，如蛋白、透亮蛋白质。一些蛋白质具备埋孔功效（porin），管控外部分子结构进到体细胞；有的蛋白质分子结构能够做为噬菌体的蛋白激酶；很多G—病菌对高微生物有高致病是由LPS的成份决策的，它的毒副作用成分常称之为毒素累积（endotoxins）。

革兰阳性菌细胞壁较厚乙醇脱色时，肽聚糖层通透性降低与细胞结合的结晶紫与碘的复合物在细胞壁仍保留初染时的颜色。革兰阴性菌壁薄乙醇脱色增加了细胞壁的通透性，初染的结晶紫碘复合物渗出经复染又染上复染的颜色

通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。

革兰氏染色原理是细菌对于革兰氏染色的不同反应，是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。革兰氏阳性细菌的细胞壁主要是由肤聚糖形成的网状结构组成的，在染色过程中，当用乙醇处理时，由于脱水而引起网状结构中的孔径变小，通透性降低，使结晶紫一碘复合物被保留在细胞内而不易脱色，因此，呈现蓝紫色。革兰氏阴性细菌的细胞壁中肤聚糖含量低，而脂类物质含量高，当用乙醇处理时，脂类物质溶解，细胞壁的通透性增加，使结晶紫一碘复合物易被乙醇抽出而脱色，然后又被染上了复染液（番红）的颜色，因此呈现红色。革兰氏染色的步骤细菌经过碱性燃料结晶紫染色，后经过碘液进行媒染，然后用酒精脱色，在一定的条件下，有的细菌媒染后，颜色不被脱去，有的会被脱去，因此会把细菌分成两类，不被脱去的被称为革兰氏阳性菌，脱去的则被称之为革兰氏阴性菌。脱色后可以在用红色染料进行复染，阳性菌是紫色，阴性菌则被重新染上了红色。很多有芽孢的杆菌和大部分的球菌，还有放射菌以及真菌杜辉呈现革兰氏正反应，而弧菌、螺旋体以及大多数的致病性无芽孢杆菌则呈现出副反应。

革兰氏染色法的原理是细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性屏障当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔隙缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上，呈紫色。肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高，乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，番红染液复染后呈红色。革兰氏染色法的意义就在于鉴别细菌，把众多的细菌分为两大类，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。在治疗上，大多数革兰氏阳性菌都对青霉素敏感（结核杆菌对青霉素不敏感）：大多数化脓性球菌都属于革兰氏阳性菌，它们能产生外毒素使人致病，可以选择青霉素族，头孢曲松钠等。革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师、细菌学家汉斯·克里斯蒂安·约阿希姆·革兰氏（HansChristianJoachimGram1853-1938）创立。革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。常见的革兰氏阳性菌有：葡萄球菌（Staphylococcus）、链球菌(Streptococcus)、肺炎双球菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、破伤风杆菌等。常见的革兰氏阴性菌有痢疾杆菌、伤寒杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌、百日咳杆菌及霍乱弧菌等。革兰氏染色法，是指细菌学中广泛使用的一种重要的鉴别染色法，属于复染法。这种染色法是由丹麦医生革兰于1884年所发明，最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷伯肺炎菌。革兰染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。未经染色的细菌，由于其与周围环境折光率差别甚小，故在显微镜下极难区别。经染色后，阳性菌呈紫色，阴性菌呈红色，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，从而用以分类鉴定。染色原理：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细菌细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，再用95%乙醇脱色。革兰氏染色关键步骤是脱色。因为在染色时，乙醇脱色是革兰氏染色操作的关键环节，脱色不足，阴性菌被误染成阳性菌，脱色过度，阳性菌被误染成阴性菌，脱色时20~30s。革兰氏染色（GramStaining）是用来鉴别细菌的一种方法：这种染色法利用细菌细胞壁上的生物化学性质不同，可将细菌分成两类，即革兰氏阳性（GramPositive）与革兰氏（GramNegative）。这一染色方法由丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰于1884年所发明，最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷白氏肺炎菌之间的关系，后推广为鉴别细菌种类的重要特性之一，对由细菌感染引起的疾病的临床诊断及治疗有着广泛用途。

革兰染色的原理如下：1. 通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物。2. 革兰阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色。3. 革兰阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄，网孔数目较多，经乙醇或丙酮脱色处理后，细胞壁脱水引起网孔扩大，未被固定的结晶紫与碘复合物通过孔径进入细胞壁内，经丙酮处理后，复合物便溶于其中，使细胞脱色。4. 革兰阴性菌因失去结晶紫与碘复合物而出现红色。希望以上信息对回答您的问题有帮助。