微生物学

全书分为上、下两篇，共74个实验。上篇为基本技能部分，编写了39个典型的微生物基本操作技能实验，内容包括光学显微镜和显微技术、细菌染色技术、培养基制备技术、灭菌除菌技术、接种与分离培养技术、生长繁殖测定技术、微生物形态特征观察和描述、噬菌体检测技术、菌种保藏技术和分类鉴定技术；下篇为专业技能部分，根据微生物学和微生物学实验技术在工业、医药、环保和食品等领域中的应用，编写了工业微生物、制药微生物、环境微生物和食品微生物方向共35个应用微生物学实验，以满足不同专业方向学生选择专业实验的需要。与目前其他同类教材相比而言，《微生物学实验》具有实验内容安排组织系统、科学，选编的实验更加实用、可操作性强、指导性更强的特点。另外为了增加直观性，改变了以往教材的手绘图片，书中基本上采用拍摄的真实图片，以增加直观教学效果。《微生物学实验》适合于作为各类院校生物工程、生物技术、制药工程、药物制剂、环境科学、食品科学与工程、发酵等专业的微生物学实验教材，也可用作综合性大学、师范院校等微生物学实验教学主要参考书以及从事与微生物学相关研究的科技人员或研究生的参考书。

1、细菌正常形态与各种特殊结构的观察；2、细菌动力学检查法；3、细菌染色检查法；4、细菌的培养法；5、细菌的生化实验——代谢产物的检查；6、抗链球菌溶血素“o”测定（ASO试验）；7、肥达氏反应；8、肠道感染的细菌学检查；9、生物因素对细菌的影响；10、细菌的耐药性变异机制——R因子传递试验；11、真菌学；12、病毒的形态学；13、病毒的培养法；14、病毒的血清学实验。这是我们学校的，你们的我就不清楚了，参考下吧！

一)实验目的 (1)了解空气中微生物的分布状况。 (2)比较普通实验室和无菌室空气中存在的微生物的数量和种类。 (3)验证无菌操作法在微生物学实验中的重要性。（二）实验原理 在我们周围的环境中存在着种类繁多、数量庞大的微生物。空气中也不例外。虽然空气不是微生物栖息的良好环境。但由于气流、灰尘和水沫的流动，人和动物的活动等原因，仍有相当数量的微生物存在。当空气中个体微小的微生物落到适合于它们生长繁殖的固体培养基的表面时，在适温下培养一段时间后，每一个分散的菌体或孢子就会形成一个个肉眼可见的细胞群体即菌落。观察大小、形态各异的菌落，就可大致鉴别空气个存在的微生物的种类。本实验通过检测普通实验室和消毒后的无菌室空气中存在的微生物，从而判断无菌室的消毒效果，了解空气中常见的微生物类群。（三)实验器材 (1)培养基： 1)牛肉膏蛋白胨培养基。 2)马铃薯蔗糖培养基。 (2)器材：无菌平皿若干套，酒精灯，培养箱等。 (四〕实验方法 (1)倒平板：按常法配置上述培养基，分装于三角瓶中，高压灭菌备用。临用前将培养基熔化，冷却至50℃左右，倒平板若干个备用。 (2)检测：先将无菌室的紫外灯打开，照射15min后关闭。打开上述冷凝了的无菌平板的皿盖，让其在无菌室空间和无人走动的普通实验室空间分别暴露Ih后，盖上皿盖。要求每种培养基的平板在每个空间设3个重复。 (3)培养：将细菌培养基平板和真菌培养基平板分别置37℃和28℃的培养箱中倒置培养，1—2d后开始连续观察，注意不同类别的菌落出现的顺序及菌落的大小、形状、颜色、干湿等的变化。

　　列文虎克发现微生物200年后，通过许多科学家的努力，特别是法国伟大的科学家巴斯德的一系列创造性的研究工作，人们才开始认识微生物与人类有着十分密切的关系。今天，我们把研究微生物的科学称作微生物学，巴斯德和科赫是公认的微生物学奠基人。他的工作为今天的微生物学奠定了科学原理和基本的方法。　　科赫原则的主要内容：　　（一）为了明某一种细菌是某一疾病的病因，必须在这种疾病的所有病例中都发现有这种细菌；　　（二）然后，必须将这种细菌从病体中完全分离出来，在体外培养成纯菌种；　　（三）这种纯菌种，经过接种后，必须能将疾病传给健康的动物；　　（四）按上面规定的方法接种过的动物身上，必须取得同样的细菌，然后，在动物体外，再次培养出这种纯菌种。

（一）形态、染色、培养特性和抵抗力 　　1.形态和染色结核分枝杆菌（简称结核菌）细长略弯曲，聚集呈分枝状排列增殖。因其细胞壁含有大量脂质，不易着色，经齐一尼二氏抗酸染色呈红色，无菌毛和鞭毛，不形成芽孢（胞），现证明有荚膜。 　　2.培养特性结核菌为专性需氧菌，营养要求高，生长缓慢，常用罗氏培养基（内含蛋黄、甘油、马铃薯和孔雀绿等）进行培养，需3～4周后才形成颗粒状或菜花形的乳酪色的粗糙型菌落。 　　3.对外界抵抗力结核菌对酸、碱、自然环境和干燥有抵抗力，但对湿热、酒精和紫外线敏感，对抗结核药物易产生耐药性。 　　（二）结核分枝杆菌感染的免疫学特点 　　1.抗结核免疫属于带菌免疫（或称传染性免疫）体内的结核菌一旦被清除，免疫力即随之消失。 　　2.抗结核免疫主要是细胞免疫激活的致敏T细胞可释放白细胞介素一2、肿瘤坏死因子和干扰素等多种淋巴因子，使巨噬细胞聚集于炎症部位，并增强巨噬细胞对结核分枝杆菌的杀伤作用，而机体产生的特异性抗体无保护作用。 　　3.抗结核免疫与机体迟发型超敏反应同时并存测定机体对结核菌有无超敏反应一结核菌素试验，即可判定其有无免疫力。 　　（三）结核菌素试验的原理、结果判断和应用 　　结核菌素（0T）试验原理是测定机体对结核菌的迟发型超敏反应，以此判断机体有无抗结核免疫力。取0T（旧结核菌素）或PPD（结核菌纯蛋白衍生物）5单位（0.1ml），于前臂皮内注射，48～72小时后观察结果，局部出现红肿和硬结，且大于5mm者，为阳性，表示机体细胞免疫功能正常，曾感染过结核分枝杆菌。分别用l、5和100单位皮试均为阴性者，若机体细胞免疫功能正常，表示未感染过结核分枝杆菌。该试验可应用于四个方面：①选择卡介苗的接种对象，并作为接种卡介苗后免疫效果评价的指标；②婴幼儿结核病诊断的参考指标；③评价肿瘤患者非特异性细胞免疫功能的指标；④人群中结核菌感染的流行率调查。 　　（四）微生物学检查和防治原则 　　根据感染部位，采取可疑的标本，直接涂片或集菌后涂片，抗酸染色后镜检。同时接种于罗氏培养基中进行分离培养。亦可直接感染动物后观察发病情况。 　　卡介苗（结核减毒活菌苗）的接种已列为中国国家计划免疫，对结核菌感染者，使用抗生素治疗剂量要足够大，疗程足够长，以防复发再燃。目前国内外结核病疫情回升，尤其耐药菌株不断出现，中国正在加强防治工作。

产率计算公式分母项是参加反应的某种原料量，而收率计算公式分母项是通入（或投入）的原料量，根据无循环物料和有循环物料又分为单程收率和总收率。简单点可以说是按反应物进行量计算，生成目的产物的百分数。用质量百分数或体积百分数表示。即收率=（目的产物生物量/反应物进料量）×100%。收率与转化率及选择性的关系为：收率=转化率×选择性。反应物料一次通过催化剂床层转化为目的产物的百分数称为单程收率。常用来衡量催化剂活性。

生物技术强调的是技术，生物科学强调的科学，其中微生物学属于生物科学