包涵体蛋白、可溶性蛋白、分泌蛋白是怎样定义的,各有哪些性质,有什么区别和联系

篮球之恋2022-10-04 11:39:541条回答

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剩余百万共回答了16个问题 | 采纳率87.5%: 原核表达涉及的概念吧,原核表达的时候,有能分泌到周质空间的蛋白,也就是带有一定信号肽,可溶性的呢,顾名思义啦,它的好处就是不容易被菌体内的蛋白酶水解掉,一般表达时候都加个大点的标签,GST了之类的.包含体呢,是最比较郁闷的,就是表达的蛋白被揉啊揉的,弄成小团.反正构像是绝对改变的了,也就是不可能有活性了,这个有它的好处,形成包含体之后就不容易被水解掉了,可以通过变性复性来使蛋白重新有活性,比较烦琐.
这是从表达的角度给你解释.有个PET系统的手册,有汉语的10版,看下更有好处.; 1年前

在包涵体细胞的变性与复性中实验中,最有可能用到哪个技术?为什么是透析 baobei1881年前1: fh9200 共回答了17个问题 | 采纳率82.4%

过滤、透析和离心.
过滤除去裂解细胞时产生的杂质,透析除去复性时加入的盐,离心则是得到纯包涵体的方法.

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sds page蛋白电泳如何检测包涵体 lxz19691年前1: 山映斜阳996 共回答了13个问题 | 采纳率84.6%

① 包涵体加入SDS-PAGE 上样品缓冲液后,和缓冲液里的SDS及DTT一起加热会溶解.
② 如果是为了检测表达产物是可溶还是包涵体,在细胞破碎后离心,将上清及沉淀分别进行电泳,如果目的条带在上清中,则为可溶表达；如果在沉淀中,则是包涵体.不过很多时候上清及沉淀中都会有目的条带,那就是部分可溶表达,部分包涵体表达...看你后续试验要求,是包涵体方便还是可溶的方便...
百度教育团队【海纳百川团】为您解答.

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镍柱纯化包涵体蛋白采用不同pH洗脱的原理是什么啊?有什么注意事项吗 角落里的猫11年前1: sffsddf 共回答了17个问题 | 采纳率94.1%

　　His-tag和镍的结合依赖电荷作用,其亲和力与pH值有关.降低pH值机会降低His-tag与镍的结合,从而把His-tag蛋白洗脱下来.
　　注意事项镍柱的说明书写得很清楚.

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包涵体蛋白超声裂解后,通过离心能将细胞碎片去除吗,怎样的方法能得到比较纯的包涵体可以进行称量计算 v20071年前1: zhangqi1933 共回答了21个问题 | 采纳率90.5%

梯度离心或者差速离心去除细胞碎片,一般1000r/min左右就差不多可以达到效果.包涵体是表达过快的蛋白来不及折叠而形成的蛋白团,所以一般蛋白纯度能够达到95%以上,用6M盐酸胍就基本把包涵体分开,再超滤一下加上缓冲液就基本上很纯了

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如何证明溶源性细菌?溶源性细菌里面有没有包涵体啊? 又日881年前1: hanbingzhi 共回答了23个问题 | 采纳率91.3%

用相同的噬菌体感染,如细菌不发生裂解则为溶源菌

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36．在包涵体蛋白的变性与复性实验中,最有可能用到以下哪种实验技术? 36．在包涵体蛋白的变性与复性实验中,最有可能用到以下哪种实验技术? A．透析 B．离心 C．盐析 D．电泳 单选 虽然我查到了各名词的定义,但还是不明白为什么选这个选项.. 迷你火狐狸1年前1: angielin2004 共回答了10个问题 | 采纳率100%

你说的是“最有可能用到以下哪种实验技术”,我认为是A .
因为透析复性可通过逐渐降低外透液浓度来控制变性剂去除速度
离心,是分离包涵体时使大多数包涵体沉淀,与可溶性蛋白分离.
电泳,在复性后效果的检测用到

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包涵体复性液中的还原性谷胱甘肽,氧化型谷胱甘肽,盐酸胍是什么作用?然后再用透析,其原理是什么? lengfeng19831年前2: 蓝色的藤共回答了13个问题 | 采纳率92.3%

还原型谷胱甘肽与氧化型谷胱甘肽组成二硫键,使蛋白质被盐酸胍变性打开的二硫键重新自由链接.透析就是为了降低复性液中的变性剂盐酸胍等.使变性目的蛋白在此过程复性,恢复其自然特性.

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表达细菌自身的蛋白会形成包涵体吗 谗嘴的丫头1年前1: 依溪共回答了17个问题 | 采纳率88.2%

只有表达细菌的外源蛋白表达量非常高的时候,才会形成包涵体.而细菌内本身的蛋白因为在长期的进化中,都有调控,能够适量表达,所以一般不会形成包涵体.但是你将细菌自身的蛋白置于表达载体中或者换启动子什么的,使其大量表达,也会形成包涵体.

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包涵体怎样产生的,怎样提高大肠杆菌中外源蛋白可溶性表达 异型71年前1: 飞梦幽魂共回答了14个问题 | 采纳率100%

按基因工程定义：在某些生长条件下,大肠杆菌能积累某种特殊的生物大分子包涵体,它们致密地集聚在细胞内,或被膜包裹或形成无膜裸露结构,这种水不溶性的结构称为包涵体.
简单的说,就是外源基因在大肠杆菌胞内表达的过程中,因为某些错误的折叠,形成的不溶的无活性的固体颗粒.形成的原因很复杂,比如表达量过高,无法糖基化,组成中含有较多的半胱氨酸之类的氨基酸,离子键疏水键共价键共同的化学作用等.
提高可溶表达的方法也很多
1,降低诱导温度,比如16度诱导.绝大多数蛋白质在降低诱导温度后可以明显提高可溶表达.
2,降低诱导剂的用量,比如0.1mM IPTG诱导.甚至更极端的可以不加诱导剂,形成泄漏表达.这种情况下表达出来的蛋白一定是可溶表达.
3,更换不同的表达载体,表达菌株.比如个人感觉pET28比pET21,Rosetta的菌株比BL21(DE3)更容易可溶表达.
4,更换表达系统增加信号肽,外源基因导入酵母系统或者哺乳动物细胞,只要是能分泌表达一定可溶性表达.

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包涵体的概念蛋白质中包涵体到底是个什么东西? rhgth1年前1: 艾霖共回答了29个问题 | 采纳率82.8%

病毒在增殖的过程中,常使寄主细胞内形成一种蛋白质性质的病变结构,在光学显微镜下可见.多为圆形、卵圆形或不定形.一般是由完整的病毒颗粒或尚未装配的病毒亚基聚集而成；少数则是宿主细胞对病毒感染的反应产物,不含...

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