将目的基因导入大肠杆菌需要先在体外构建基因表达载体?

yefeng882022-10-04 11:39:541条回答

将目的基因导入大肠杆菌需要先在体外构建基因表达载体?
用Ca2+处理转化的方法和这个方法是并列关系?

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wjm935 共回答了19个问题 | 采纳率94.7%
在体外构建基因表达载体主要是指将目的基因与载体(一般以质粒居多)连接,形成的重组DNA才能导入大肠杆菌,它能在大肠杆菌细胞内复制和表达.
用Ca2+处理,我学的是用Ca2+处理大肠杆菌的细胞壁,增大细胞壁的通透性,便于重组DNA分子导入大肠杆菌细胞.
所以这两个应该是同一个方法的两个步骤.
1年前

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点评:
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对纤维素分解菌进行选择培养时用液体培养基,其中的纤维素是唯一的碳源,只有纤维素分解菌可以很好地生存,其他微生物不能生存,同时振荡培养可以保证充分供氧,利于纤维素分解菌的生长,所以可以起到对纤维素分解菌的富集作用,获得大量的菌体.
故选:A.

点评:
本题考点: 土壤中能分解纤维素的微生物及其应用价值;微生物的分离和培养.

考点点评: 本题主要考查选择培养基的作用,意在强化学生对相关知识的理解与运用.

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传统医学认为,绿豆可清热解毒、祛暑止渴、利水消肿、明目退翳、养肤养颜,常食可起到养生保健、预防疾病之目的.
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这个问的太大了.看你的目标产物是什么了.有些菌天生不能产生一些代谢产物,但是通过导入其他基因,就可以产生这些产物了.最常见的就是把带有特殊基因的质粒导入大肠杆菌了.另一方面,削减不必要的代谢途径可以增加产量,比如你的目标产物和一些副产物争夺能量和碳源,这时候通过基因敲除,去掉产生这些副产品的代谢途径,可以增产.
细菌是不会主动和人类合作的,你得折腾它才行.有兴趣做这方面的研究生,可以看看山东大学的祁庆生教授.
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1、浓硫酸与溴化钠共热制取溴化氢
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含大量Al3+的溶液中:硝酸根、钠离子、氯离子、次酸根离子为什么不能大量共存?
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这几个问题,希望能一个个细的解答,很细很细~
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泰兰德 共回答了21个问题 | 采纳率90.5%
1、浓硫酸与溴化钠共热制取溴化氢
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如果是稀硫酸,这个反应可以看作是一个可逆反应,根据 勒夏特列原理,生成物中溴化氢因为遇热而溢出,反应向正向移动.
2、饱和碳酸钠溶液除去二氧化碳中氯化氢
二氧化碳能与碳酸钠反应生成碳酸氢钠.
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B苯和溴水发生萃取,分层,上层为红棕色苯层,苯酚和浓溴水反应生成白色不溶于水的三溴苯酚沉淀,己烯和溴水反应,分层后退色(加成)
C Cu(OH)2
甲酸,Cu(OH)2溶解,得到蓝色甲酸铜溶液,加热煮沸后,还能产生红色沉淀Cu2O,即甲酸中存在醛基,可以被Cu(OH)2氧化.
乙酸,Cu(OH)2溶解,得到蓝色的乙酸铜溶液,但是加热煮沸,没有其它变化
乙醛,Cu(OH)2不能溶解,但是加热煮沸后,出现红色沉淀Cu2O
宋代赵普曾说:“半部论语治天下”这句话的意思是?有什么目的
木木e1年前1
kenow 共回答了18个问题 | 采纳率88.9%
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◎元·高文秀《遇上皇》第三折
英语翻译1 目录2 前言3 活动介绍4 活动明细5 活动目的及意义6 宣传方案7 前期准备8 活动流程9 物资筹备10
英语翻译
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今晚就急要!要很正式的书面表达!请翻译的漂亮一点~翻译机器不要来!
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**之最 共回答了20个问题 | 采纳率90%
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三个圆相切由于本人是个程序员,我的目的是简单,所以直接用二元二次方程组复杂了
三个圆相切

由于本人是个程序员,我的目的是简单,所以直接用二元二次方程组复杂了
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Keywords: ability test, calibration laboratory.
在验证二氧化碳化学性质的实验中,将二氧化碳通入H2SO4中的目的是什么?有无必要连接此装置?为什么?
xclzk23hjsahjshd1年前4
hongyuzhong 共回答了19个问题 | 采纳率89.5%
利用浓硫酸的吸水性,去掉二氧化碳中的水,这样才能在没有杂质的影响下,验证二氧化碳的性质.必须连接此装置.
★粗盐提纯★实验报告★名称 目的(?) 器材 现象(真奇怪 这个有吗) 结论(?)问题与讨论(问题为“提纯后的粗盐就是纯
★粗盐提纯★实验报告★
名称 目的(?) 器材 现象(真奇怪 这个有吗) 结论(?)问题与讨论(问题为“提纯后的粗盐就是纯净的NaCl吗 还有什么成分 如何除杂质”)
关键是 目的 现象 结论
jason99581年前2
早z在wi 共回答了22个问题 | 采纳率95.5%
一、实验目的
1.掌握溶解、过滤、蒸发等实验的操作技能.
2.理解过滤法分离混合物的化学原理.
3.体会过滤的原理在生活生产等社会实际中的应用.

二、实验仪器和药品
药品:粗盐,水
器材:托盘天平,量筒,烧杯,玻璃棒,药匙,漏斗,铁架台(带铁圈),蒸发皿,酒精灯,坩埚钳,胶头滴管,
滤纸,剪刀,火柴,纸片
三、实验原理
粗盐中含有泥沙等不溶性杂质,以及可溶性杂质如: 等.不溶性杂质可以用溶解、过滤的方法
除去,然后蒸发水分得到较纯净的精盐.
四、实验操作
1.溶解
用托盘天平称取5克粗盐(精确到0.1克).用量筒量取10毫升水倒入烧杯里.用药匙取一匙粗盐加入水中,观察发生的现象.用玻璃棒搅拌,并观察发生的现象(玻璃棒的搅拌对粗盐的溶解起什么作用?).接着再加入粗盐,边加边用玻璃棒搅拌,一直加到粗盐不再溶解时为止.观察溶液是否浑浊.
在天平上称量剩下的粗盐,计算在10毫升水中大约溶解了多少克粗盐.
2.过滤

按照化学实验基本操作6所述方法进行过滤.仔细观察滤纸上的剩余物及滤液的颜色.滤液仍浑浊时,应该再过滤一次.
如果经两次过滤滤液仍浑浊,则应检查实验装置并分析原因,例如,滤纸破损,过滤时漏斗里的液面高于滤纸边缘,仪器不
干净等.找出原因后,要重新操作.
3.蒸发
把得到的澄清滤液倒入蒸发皿.把蒸发皿放在铁架台的铁圈上,用酒精灯加热(图20).同时用玻璃棒不断搅拌滤液.
等到蒸发皿中出现较多量固体时,停止加热.利用蒸发皿的余热使滤液蒸干.
4.用玻璃棒把固体转移到纸上,称量后,回收到教师指定的容器.比较提纯前后食盐的状态并计算精盐的产率.


五、实验总结
过滤操作中的问题探析
过滤是最常用的分离液体和固体的实验操作.现行的初中化学教材中仅粗浅地介绍了过滤的操作要点,而实际操作过程中,往往会遇到许多细节性的问题.笔者结合教学实际,就过滤操作中经常遇到的问题谈一下自已的解决办法,仅供参考.
(一)、怎样选择漏斗和滤纸?
漏斗的大小主要取决于要过滤的沉淀的量或析出固体的量,而不是看液体的体积.沉淀量或固体量较多,则所选用的漏斗就大,反之亦然.漏斗的圆锥角应为60°.管径粗细适宜,太粗难以保持水柱,太细则水流速度慢,过滤需要的时间过长.管径末端应稍微倾斜.滤纸的选择依据所做的实验来定.滤纸分定性滤纸和定量滤纸.定性滤纸在过滤操作中主要用于研究物质的物理性质和化学性质;定量滤纸主要用于物质的定量分析.在中学实验中,过滤操作常用于定性实验,所以大多用定性滤纸.选好的滤纸放入漏斗后,纸的边缘要比漏斗边缘低5毫米左右为宜.
(二)、怎样组装过滤器?
首先,将选好的滤纸对折两次,第二次对折要与第一次对折的折缝不完全重合.当这样的滤纸放入漏斗(顶角60°)中,其尖角与漏斗壁间有一定的间隙,但其上部却能完好贴在漏斗壁上.这样装成的过滤器比所有表面都贴在漏斗上的过滤器的过滤速度更快.对折时,不要把滤纸顶角的折缝压得过扁,以免削弱尖端的强度.然后剪去三层纸那边的两层的小角,以便在湿润后,滤纸的上部能紧密地贴在漏斗壁上.
其次,将叠好的滤纸放入合适的漏斗中,用洗瓶的水湿润滤纸,用手指把滤纸上部1/3处轻轻压紧在漏斗壁上.把水注入漏斗时,漏斗颈应充满水,或用手指堵住漏斗颈末端,使其充水至漏斗顶角稍上部为止.漏斗颈保持有连续的水柱,会产生向下的引力,加速了过滤过程.
(三)、怎样正确地进行过滤?
在过滤时,玻璃棒与盛有过滤液的烧杯嘴部相对着;玻璃棒末端和漏斗中滤纸的三层部分相接近,但不能触及滤纸;要保持垂直(笔者认为玻璃棒斜立易导致过滤液外溢);漏斗的颈部尖端紧靠接收滤液烧杯嘴部的内壁.每次转移的液体不可超过滤纸高度的三分之二,防止滤液不通过滤纸而由壁间流出.对于残留在烧杯里的液体和固体物质应该用溶剂或蒸馏水按少量多次的原则进行润冲,将洗液全部转移到漏斗中进行过滤.
(四)、怎样正确洗涤沉淀物?
如果需要洗涤沉淀物,则应立即进行洗涤,否则沉淀物在滤纸上放置过久会开裂或结块,不易润洗.可用原溶剂、蒸馏水或其它适当的洗涤剂进行润洗.换一个洁净的空烧杯以代替原来接受滤液的烧杯,这样可以避免因沉淀穿透滤纸而要重新过滤大体积的液体.每次洗液用量以能浸没所收集的沉淀物为宜.洗涤时,用少量洗液小心沿四周从上而下冲洗,将沉淀冲到漏斗底部,不可使液体流速过猛,否则会使沉淀冲出过滤器.也不可用玻璃棒搅拌漏斗内的物质,以免划破滤纸,前功尽弃.一般洗2到3次左右,可基本洗净
(五)、怎样检验沉淀物是否洗净?
可根据沉淀物上可能检出的杂质类别,在最后一次洗出液中加入适宜的试剂,来检验洗涤程度.如过滤Na2SO4、BaCl2两溶液恰好完全反应后的混合物时,要检验沉淀物是否洗净,应选择AgNO3溶液.若在最后一次洗出液中加入AgNO3溶液无沉淀(AgCl)生成,则说明沉淀已洗净.
(六)、过滤时,滤液过多而超出滤纸边缘或滤纸被划破怎么办?
可用少量原溶剂冲洗漏斗和滤纸2到3次,原滤液连同洗液重新进行过滤.
(七)、分离沉淀和液体是否必需用过滤操作?
否.当分离的沉淀量很少时,可盛物于离心试管内,用离心机进行常温下沉淀分离.用吸管吸取沉淀上清液.根据需要可进行洗涤后再离心分离.只有当沉淀量较多时,才适宜用过滤法分离
(八)、过滤操作是否还有其他方式?
有.要使过滤速度快,且方便洗涤,可用布氏漏斗进行减压抽滤,这使得过滤和洗涤费时少,而且便于洗涤;当过滤需要在一定温度下进行时应选用保温漏斗进行过滤.
远距离输电要-----电压,目的是减小------,从而可以减小-----
轩辕豆豆1年前1
whazgz 共回答了15个问题 | 采纳率86.7%
增加 电流 线路损耗
用浸泡过高猛酸甲溶液的硅藻土吸收水果释放的乙烯 可达到水果保鲜的目的 对么
不止说1年前2
zpshasha 共回答了21个问题 | 采纳率81%
好像是的,乙烯具有催熟作用,吸收掉它可以保鲜.
打点计时器在做测定匀变速直线运动的加速度的实验时,为了达到实验目的,除了有打点计时器、纸带、复写纸、钩码、细绳、一段附有
打点计时器
在做测定匀变速直线运动的加速度的实验时,为了达到实验目的,除了有打点计时器、纸带、复写纸、钩码、细绳、一段附有定滑轮的长木板、小车外,还需要( )和( )
lishang13141年前1
YANMOO 共回答了26个问题 | 采纳率84.6%
学生电源内和刻度尺
关于物理的平行四边形定则实验①每次实验都必须保证结点的位置保持不变,这是什么目的?这体现了怎样的物理思想方法?②若两次橡
关于物理的平行四边形定则实验
①每次实验都必须保证结点的位置保持不变,这是什么目的?这体现了怎样的物理思想方法?
②若两次橡皮条的伸长长度相同,能否验证平行四边形定则?
yaozhiyan_sz1年前1
德州扒鸡 共回答了12个问题 | 采纳率75%
1、使力的作用效果相同 2、体现了等效替代的方法
3、不能.应有多次实验才能验证平等四边形定则,这体现了实验的严谨性
下面的场合,如果班长既想达到批评的目的,又想把话说的委婉些,表达恰当的是:c,那理由是什么
诸葛更亮1年前1
丁儿abc 共回答了25个问题 | 采纳率88%
我也是班长.所以也很纠结.你也可以开玩笑似的,
商山早行 中,纯用名词组成诗句.是 早行 情景依然在目的一句诗是什么?
耗子5211年前1
taiziran 共回答了13个问题 | 采纳率84.6%
商山早行
唐 温庭筠
晨起动征铎,
客行悲故乡.
鸡声茅店月,
人迹板桥霜.
槲叶落山路,
枳花明驿墙.
因思杜陵梦,
凫雁满回塘.
灯泡的灯柱上常涂上一些暗红色物质,目的是除去灯泡中O2,延长寿命.这种物质是?铁丝,木炭,红磷,硫磺
跳上南瓜车1年前1
菲常想念 共回答了24个问题 | 采纳率95.8%
红磷
不识庐山真面目的古诗要全文
迷失的夏天1年前1
tproz5002 共回答了19个问题 | 采纳率89.5%
不识庐山真面目,只缘身在此山中”,是即景说理,它启迪人们认识为人处事的一个哲理——由于人们所处的地位不同,看问题的出发点不同,对客观事物的认识难免有一定的片面性;要认识事物的真相与全貌,必须超越狭小的范围,摆脱主观成见.当局者迷,旁观者清.
题西林壁
宋 苏轼
横看成岭侧成峰,
远近高低各不同.
不识庐山真面目,
只缘生在此山中.
近期在质粒构建是PCR和酶切后都有目的条带,但是就是连接转化后没有点,或者有点但是是阴性的,
近期在质粒构建是PCR和酶切后都有目的条带,但是就是连接转化后没有点,或者有点但是是阴性的,
感受态不行?
目的片段没有酶切成功?
没有连接上?
载体不行?
逍遥狂草1年前1
暴雨caozhun 共回答了27个问题 | 采纳率88.9%
都有可能
你可以多做几个对照,如空载体转化、空细胞涂板等等,帮助缩问题小范围
你可以询问实验室其他人员,看看酶是否有问题,感受态是否有问题,抗生素是否有问题,等等
按你给的线索,菌落很少,很有可能是切开的线性质粒没有连上片段,转不进细胞,少量没有切开的空载体转进细胞,形成阴性菌落.问题可能在片段酶切上,建议连T载体再切,或双酶切换成两步单酶切,或换酶切位点,或重新设计保护碱基

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