用固定化酶技术处理污染物是很有前途的，如将从大肠杆菌中得到的磷酸三酯酶固定到尼龙膜上，制成制剂，可用于降解残留在土壤中的

A

将酶或细胞固定于载体上,便于与反应物分离,并能可重复使用.提高生成物的质量.
固定化酶一般采用化学结合法,固定化细胞多采用包埋法、物理吸附法（像用海藻酸钠进行包埋）

解题思路：固定化酶的缺点：不利于催化一系列的酶促反应；优点：①既能与反应物接触，又能与产物分离；②可以反复利用．
固定化细胞的缺点：反应物不宜与酶接近，尤其是大分子物质，反应效率下降；优点：成本低，操作容易．

A、固定化细胞技术固定的是一系列酶，所以在多步连续催化反应方面优势明显；故A正确．
B、固定化酶的应用中，要控制好PH、温度，但与溶解氧无关，因为温度和PH影响酶的活性；故B错误．
C、利用固定化酶降解水体中的有机磷农药是酶促反应，没有生物参与，所以不需提供营养条件；故C错误．
D、利用固定化酵母细胞进行发酵时，糖类除了作为反应底物外，还为酵母菌提供碳；故D错误．
故选A．

点评：
本题考点： 制备和应用固相化酶．

考点点评： 本题考查固定化酶和固定化细胞的相关知识，意在考查学生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构．

固定化酶在实际应用中的显著特点：
（1）同一批固定化酶能在工艺流程中重复多次地使用；
（2）固定化后,和反应物分开,有利于控制生产过程,同时也省去了热处理使酶失活的步骤；
（3）稳定性显著提高；
（4）可长期使用,并可预测衰变的速度；
（5）提供了研究酶动力学的良好模型.
固定化细胞在实际应用中的显著特点：
1.使用固定化细胞省去了酶的分离过程,显著降低了成本；
2.固定化细胞为多酶系统,不需要辅助因子；
3.增加了细胞对不利环境的耐逆性,可重复使用；
4.增加了酶的稳定性.

解题思路：温度和酸碱度对酶的催化作用的影响是直接的，另外由于酶催化的是生物细胞内外的各种生化反应，而生化反应的底物的浓度对酶的催化作用也有影响，底物的浓度跟水有关，故前3个选项都与酶的催化作用相关；从另一个角度讲，微生物是有生命的，最基本的特征就是新陈代谢，营养是微生物不可或缺的条件，酶有活性，但不是生物，酶降解与用微生物降解相比不需要的是营养．

AB、酶作用的发挥需要适宜的温度、pH，AB错误；
C、底物的浓度影响酶促反应的速率，而底物的浓度与水分多少有关，C错误；
D、营养是微生物不可或缺的条件，酶有活性，但不是生物，酶降解与用微生物降解相比不需要的是营养，D正确．
故选：D．

点评：
本题考点： 制备和应用固相化酶

考点点评： 本题主要考查制备和应用固相化酶的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能运用所学知识，对生物学问题作出准确的判断．

1.可回收,能重复使用,可降低成本.比如用磁性氧化铁作载体,可以从含有胶体物质或不溶性物质的反应溶液中很容易地回收酶.
2.产物纯净,无酶污染.
3.酶的稳定性提高,可长期使用.
4.反应过程可管道化、连续化、自动化.
5.固定化时有活力损失.
6.增加酶的成本.
7.酶的专一性有时发生改变,不适合固态底物.

微生物是活的生物,需要提供营养才能存活.而固定化酶只是一种具有催化作用的生物大分子(蛋白质),当然就不存在活与死的问题,也就不需要什么营养物质.

单个酶活性没有提高.提高的是群体效应.
也就是酶特定法固定后,将酶活性位点展示到同一个方向,那么这些酶（总和）的效率大大会提高.
如果没处于游离状态,活性位点处于不同的方向,去和底物反应的效率就降低.
可以用酶促反应的碰撞模型来考虑.

吸附交联是指酶被固定化物质所物理吸附而联合在一起,酶制剂本身不改变化学性质.而载体交联是指与固定化物质发生化学反应,但是反应不涉及酶效应的官能团,也基本不会影响到这些官能团.

将酶从微生物细胞中提取出,将其与底物作用制造产品,也可以将提取出的酶用固体支持物(称为载体)固定,使其成为不溶于水或不易散失和可多次使用的生物催化剂,利用它与底物作用制造产品.未固定的酶或细胞用于工业生产,可以称为游离酶或细胞,固定的酶称为固定化酶 (immobilized enzyme).
游离酶(细胞)与底物作用是一次性的,而固定化酶和固定化细胞与反应物作用可多次使用,有的可达几十、几百次,甚至连续使用几年.

D

酶：
催化效率高,低能耗,低污染,
大规模地应用于食品,化工等各个领域.
固定化酶：
既能与反应物接触,又容易与产物分离,
同时在载体上的酶还可以反复利用.
固定化细胞：
成本低,操作更容易.

这是教材上的
简单点就是,固定化酶就是把酶固定在某些载体上可以反复使用
固定化细胞就是把细胞固定在某些载体上反复使用,优点是减低成本,没有污染

解题思路：固定化酶的缺点：不利于催化一系列的酶促反应；优点：①既能与反应物接触，又能与产物分离②可以反复利用．
固定化细胞的缺点：反应物不宜与酶接近，尤其是大分子物质，反应效率下降；优点：成本低，操作容易．

A、固定化细胞技术固定的是一系列酶，所以在多步连续催化反应方面优势明显；故A正确．
B、固定化酶的应用中，要控制好PH、温度，但与溶解氧无关，因为温度和PH影响酶的活性；故B错误．
C、利用固定化酶降解水体中的有机磷农药，是酶促反应，没有生物参与，所以不需提供营养条件；故C错误．
D、利用固定化酵母细胞进行发酵时，糖类等有机物都能作为反应底物外；故D错误．
故选A．

点评：
本题考点： 制备和应用固相化酶．

考点点评： 本题考查固定化酶和固定化细胞的相关知识，意在考查学生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构．

所谓固定化酶,是指在一定空间内呈闭锁状态的酶,能连续地进行反应,反应后的酶可以回收重复使用.
将纤维素葡萄糖等含有醛基的载体经过碘酸氧化或用二甲基砜氧化裂解葡萄糖环,产生二醛高聚物,每个葡萄糖分子含有两个醛基,再与酶分子中的氨基、巯基、咪唑基等集团反应制成固定化酶

C

(1)固定化酶或固定化细胞 固定化酶在溶液中进行，固定化细胞需将葡萄糖吸收进入细胞再分解，所以反应场所是在细胞内
(2)固定化酶 固定化细胞 蛋白质无法进入固定化细胞中，无法被分解
(3)固定化细胞 有细胞膜保护细胞内部的酶，减少外界环境条件对细胞内的酶的影响

酶是蛋白大分子.固定化酶是指在发酵过程中,将某种酶固定在某种介质中,有化学结合法,物理吸附法,包埋法三种方法.固定化细胞则是等于固定了一系列酶,进行发酵,常见的有固定酵母细胞

解题思路：使用酶、固定化酶、固定化细胞的比较：

	直接使用酶	固定化酶	固定化细胞
酶的种类	一种或几种	一种	一系列酶
制作方法		物理吸附法、化学结合法、包埋法	物理吸附法、包埋法
是否需要营养物质	否	否	是
缺点	①对环境条件非常敏感，易失活②难回收，成本高，影响产品质量	不利于催化一系列的酶促反应	反应物不宜与酶接近，尤其是大分子物质，反应效率下降
优点	催化效率高，耗能低、低污染	①既能与反应物接触，又能与产物分离②可以反复利用	成本低，操作容易

A、TaqDNA聚合酶是从一种水生栖热菌株中分离提取的，具有耐高温的特性，在95℃仍具有酶活性，故A错误；
B、固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括包埋法、化学结合法和物理吸附法，故B正确；
C、某些反应产物可能与酶结合，致使酶的结构产生变化，从而改变酶的催化活性，故C正确；
D、固定化细胞在多步酶促反应中发挥连续催化作用，但如果反应底物是大分子物质，则难以自由通过细胞膜，从而限制固定化细胞的催化反应，故D正确．
故选：A．

点评：
本题考点： 制备和应用固相化酶．

考点点评： 此题考查固定化酶和固定化细胞，考查了学生对基础知识掌握和应用能力，解题的关键是理解固定化技术的相关知识．

使用固定化酶技术，将这种酶固定在一种颗粒状的载体上，再将这些酶颗粒装到一个反应柱内，柱子底端装上分布着许多小孔的筛板。酶颗粒无法通过筛板的小孔，而反应溶液却可以自由出入。生产过程中，将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入，使葡萄糖溶液流过反应柱，与固定化葡萄糖异构酶接触，转化成果糖，从反应柱的下端流出。反应柱能连续使用半年，大大降低了生产成本，提高了果糖的产量和质量。...

B

各自的缺点如下：
直接使用酶：对环境条件非常敏感,容易失活；溶液中的酶很难被回收,不能被再次被利用,提高了生产成本；反应后酶会混在产物中,可能影响产品品质.
使用固定化酶：一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实践中,很多产物的形成都是通过一系列的酶促反应才能得到的.
使用固定化细胞：固定后的细胞与反应物不容易接近,可能导致反应效果下降.由于大分子物质难以自由通过细胞膜,因此固定化细胞的技术也受到限制.

脂质体（liposome）是由磷脂和相似的两性脂形成稳定的微囊,脂质体的脂双层在结构上与细胞膜相似,能促进极性分子穿透细胞膜,脂质体与DNA形成复合物通过内吞作用进入细胞,根据脂质体包裹DNA的方式不同,有阳离子脂质体、阴离子脂质体等.
磷脂是一类含有磷酸的脂类,机体中主要含有两大类磷脂,由甘油构成的磷脂称为甘油磷脂(phosphoglyceride)；由神经鞘氨醇构成的磷脂,称为鞘磷脂(sphingolipid).其结构特点是：具有由磷酸相连的取代基团(含氨碱或醇类)构成的亲水头(hydrophilic head)和由脂肪酸链构成的疏水尾(hydrophobic tail).在生物膜中磷脂的亲水头位于膜表面,而疏水尾位于膜内侧.
磷脂是重要的两亲物质,它们是生物膜的重要组分、乳化剂和表面活性剂(表面活性剂是能降低液体,通常是水的,表面张力,沿水表面扩散的物质)
应用方面不太了解~

酶回收率 Enzyme recovery :
酶纯化倍速 Enzyme purification drive :
酶的变性 The degenerative enzyme :
酶的失活 The missing enzyme live :
酶的诱导合成 The lure of synthetic enzymes :
酶合成阻遏作用 Enzyme synthetic deterrent :
分解代谢物阻遏 Decomposition metabolites deter :
酶分子修饰 Enzyme elements add :
固定化酶 Fixed acids :
非水相催化 Water is non-catalytic :

固定化酶
固定化酶和固定化细胞都是以酶的应用为目的,其制备方法也基本相同.固定化活细胞的制备条件比固定化酶更要温和,对酶的活性影响更小.

解题思路：固定化酶、固定化细胞的比较：

	固定化酶	固定化细胞
酶的种类	一种	一系列酶
制作方法	吸附法、交联法、包埋法	吸附法、包埋法
是否需要营养物质	否	是
缺点	不利于催化一系列的酶促反应	反应物不宜与酶接近，尤其是大分子物质，反应效率下降
优点	①既能与反应物接触，又能与产物分离②可以反复利用	成本低，操

A、固定化细胞技术固定的是一系列酶，所以在多步连续催化反应方面优势明显，A正确；
B、固定化酶的应用中，酶不需要营养物质，要控制pH、温度，但与溶解氧无关，B错误；
C、利用固定化酶降解水体中的有机磷农药，是酶促反应，没有生物参与，所以不需提供营养条件，C错误；
D、利用固定化酵母细胞进行发酵时，糖类除了作为反应底物外，还为酵母菌提供碳源，D错误．
故选：A．

点评：
本题考点： 制备和应用固相化酶．

考点点评： 本题考查固定化酶技术和细胞固定化技术的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题和解决问题的能力．

1固定化酶的传统制备方法
1.1吸附法
吸附法是利用物理吸附法,将酶固定在纤维素、琼脂糖等多糖类或多孔玻璃、离子交换树脂等载体上的固定方式.
显著特点是：
工艺简便及条件温和,包括无机、有机高分子材料,
吸附过程可同时达到纯化和固定化；
酶失活后可重新活化,
载体也可再生.
但要求载体的比表面积要求较大,有活泼的表面
1.2包埋法
包埋固定化法是把酶固定聚合物材料的格子结构或微囊结构等多空载体中,而底物仍能渗入格子或微囊内与酶相接触.这个方法比较简便,酶分子仅仅是被包埋起来,生物活性被破坏的程度低,但此法对大分子底物不适用.
(1)网格型
将酶或包埋在凝胶细微网格中,制成一定形状的固定化酶,称为网格型包埋法.也称为凝胶包埋法.
(2)微囊型
把酶包埋在由高分子聚合物制成的小球内,制成固定化酶.由于形成的酶小球直径一般只有几微米至几百微米,所以也称为微囊化法.
1.3结合法
酶蛋白分子上与不溶性固相支持物表面上通过离子键结合而使酶固定的方法,叫离子键结合法.其间形成化学共价键结合的固定化方法叫共价键结合法.共价键结合法结合力牢固,使用过程中不易发生酶的脱落,稳定性能好.
该法的缺点是载体的活化或固定化操作比较复杂,反应条件也比较强烈,所以往往需要严格控制条件才能获得活力较高的固定化酶.
1.4交联法
交联法是用多功能试剂进行酶蛋白之间的交联,使酶分子和多功能试剂之间形成共价键,得到三向的交联网架结构,除了酶分子之间发生交联外,还存在着一定的分子内交联.多功能试剂制备固定化酶方法可分为：
(1) 单独与酶作用；
( 2) 酶吸附在载体表面上再经受交联；
( 3) 多功能团试剂与载体反应得到有功能团的载体,再连接酶.交联剂的种类很多,最常用的是戊二醛,其他的还有异氰酸衍生物、双偶氮二联苯胺、N,N-乙烯马来酰亚胺等.
交联法的优点是酶与载体结合牢固,稳定性较高；缺点是有的方法固定化操作较复杂,进行化学修饰时易造成酶失活
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竞争性抑制剂与被抑制的酶的底物通常有结构上的相似性,能与底物竞相争夺酶分子上的结合位点,从而产生酶活性的可逆的抑制作用.与酶的活性中心相结合.与酶的结合是可逆的.
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增大底物浓度可以减弱竞争性抑制剂的影响.