酿酒酵母液体培养后的现象：是否有菌膜 菌岛 菌环 液体颜色 是否有沉淀 是否浑浊

（1）将自然界中采集到的葡萄糖带回实验室，用无菌水将葡萄皮上的野生酵母菌冲洗到无菌的三角瓶中．常用的微生物分离方法有平板划线法和稀释涂布平板法．平板划线法是用接种环在培养基表面连续划线过程中将聚集的菌体逐步分散到培养基的表面．最终分离到由一个细胞繁殖而来的菌落；稀释涂布平板法是先将菌液进行一系列梯度稀释，再涂布培养．稀释度足够高的培养液涂布的结果可形成单个菌落．
（2）以木糖为唯一碳源的培养基是选择培养基，可以筛选出能利用木糖的酵母菌，不能在该培养基上生存的酵母菌缺乏木糖发酵途径．
（3）转入质粒的大肠杆菌对氨苄青霉素有抗性，故可以培养在含有氨苄青霉素的培养基上进行筛选．以缺乏尿嘧啶合成酶的酵母菌作为受体细胞，可以利用缺乏尿嘧啶的培养基筛选出导入质粒的酵母菌菌株．酵母菌是真核生物，大肠杆菌是原核生物，真核生物与原核生物相比，真核细胞有被核膜包被的成形细胞核．
（4）图示实验结果表明，将转基因酿酒酵母接种在葡萄糖和木糖为碳源的培养基中进行发酵能力测试，最初培养基中的葡萄糖被快速消耗，随着发酵继续进行，转基因酿酒酵母能够利用木糖产生酒精，并且酒精浓度升高对木糖发酵无明显影响，说明所需菌株培育成功．
故答案：（1）无菌水涂布
（2）不能利用木糖发酵（或缺乏木糖发酵途径）
（3）氨苄青霉素尿嘧啶合成有核膜包围的细胞核
（4）葡萄糖和木糖葡萄利用木糖产生酒精，并且酒精浓度升高对木糖发酵无明显影响

点评：
本题考点： 基因工程的应用；酒酵母制酒及乙酸菌由酒制醋．

考点点评： 本题考查基因工程、微生物的实验室培养的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力；能分析曲线图提取信息的能力．

（1）葡萄皮上含有野生型酵母菌，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，能防止杂菌污染．
（2）以木糖为唯一碳源的培养基，有些酵母菌不能利用木糖发酵，进而筛选出能利用木糖的酵母菌，从中获取目的基因，即木糖发酵有关的酶的基因．
（3）据题意“质粒既含有大肠杆菌的复制起点pMB1ori，也含有酵母菌复制起点ARS”，说明质粒可以在大肠杆菌细胞中复制，也可以在酿酒酵母细胞中复制．
（4）转入质粒的大肠杆菌对氨苄青霉素有抗性，故可以培养在含有氨苄青霉素的培养基上进行筛选．以缺乏尿嘧啶合成酶的酵母菌作为受体细胞，可以利用缺乏尿嘧啶的培养基筛选出导入质粒的酵母菌菌株．
（5）图示实验结果表明，在葡萄糖大量消耗后，酵母菌仍能利用木糖快速产生酒精，说明转基因酵母菌培养成功．
故答案为：（1）无菌水
（2）不能利用木糖发酵（或缺乏木糖发酵途径） 木糖发酵有关的酶
（3）既可以在大肠杆菌细胞中复制，也可以在酿酒酵母细胞中复制
（4）氨苄青霉素 尿嘧啶合成
（5）葡萄糖和木糖 利用木糖产生酒精，并且酒精浓度升高对木糖发酵无明显影响

点评：
本题考点： 酒酵母制酒及乙酸菌由酒制醋．

考点点评： 本题考查微生物培养、基因工程等相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力和提取信息的能力．