磷酸缓冲液配制问题1、磷酸缓冲液和磷酸盐缓冲液有区别吗?2、67mmol/L磷酸缓冲液(pH7．0)和60mmol/L钠

PH=PKa2-lg[H2PO4-]/[HPO42-]
6.8=7.2-lg[H2PO4-]/[HPO42-]
lg[H2PO4-]/[HPO42-]=0.4
[H2PO4-]/[HPO42-]=2.5/1
需要无水磷酸二氢钠的质量是120×0.006=0.72克
需要氢氧化钠的质量是40×0.006×1/3.5=0.07克
即取无水磷酸二氢钠0.72克,氢氧化钠0.07克,加水配制成一升溶液即可.

因为是对照实验,所以要遵循平行对照,单一变量原则,其他均保持不变.活力测定是需要加0.1ml血清,所以标准曲线加0.1ml磷酸缓冲液,相当于其他实验水的作用.

十二水合磷酸氢二钠：1.1098g
二水合磷酸二氢钠：0.2964g
溶于50ml水即可

没记错的话 反应需要在弱碱性条件下 缓冲液稳定PH

维持一定的pH值,防止蛋白质发生凝聚或变性

含0.05%吐温-20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS-T)配制方法为:
称取磷酸二氢钾(KH2PO4)0.2g,磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H20)2.9g,氯化钠(NaCl)
8.0g,氯化钾(KCl)0.2g,吐温-200.5mL,加水至1000mL.

吉姆萨染液由天青,伊红组成.
pH对细胞染色有影响.细胞各种成分均不蛋白质,由于蛋白质系两性电解质,所带电荷随溶液PH而定,在偏酸性环境中下在电荷增多,易与伊红结合,染色偏红；在偏碱性环境中负电荷增多,易与美蓝或天青结合,染色 偏蓝.
所以要用pH6.4-6.8磷酸缓冲液控制pH

1,容易配制,经济方便；
2,受温度影响小,缓冲能力强；
3,对大部分蛋白和酶的结构及活性没影响,便于后续实验.
需要指出的是,不是所有的酶都适用于磷酸缓冲液,如某些以磷酸根为底物的酶.

98 mM的磷酸氢二钠和2 mM的磷酸二氢钾可以配成PH8.4的缓冲液.
你可以在此基础上稍做调整,应该可以配出你想要的溶液.

先要知道你的磷酸氢二钠和二氢钠的PH值是多少吖,
一般磷酸氢二钠的 PH在9左右,二氢钠在4..4左右,
主要还是看你的产品,产品不一样,PH值也有浮动.

PH=PKa^2-lg[H2PO4^-]/[HPO4^2-]
7.8=7.2-lg[H2PO4^-]/[HPO4^2-]
lg[H2PO4^-]/[HPO4^2-]=0.6
[H2PO4^-]/[HPO4^2-]=4/1
[H2PO4^-]=0.1×4/5=0.08mol/L
[HPO4^2-]=0.1×1/5=0.02mol'L
假设配制这样溶液1升.那么需要无水Na2HPO4 120×0.1=12克
根据:
Na2HPO4+NaOH=Na2HPO4+H2O
需要火碱 40×0.02=0.8克
即称取无水Na2HPO4 12克 和火碱0.8克,加水溶解,再稀释到1升即可.

假设配一升100mmol/L （即0.1mol／L）pH6.0的磷酸缓冲液：
pH = pKa2 + Log([HPO42-]/[H2PO4-])
6.0 = 7.2 + Log([HPO42-]/[H2PO4-])= 7.2 + Log(HPO42-摩尔/H2PO4-摩尔)
(HPO42-摩尔/H2PO4-摩尔)=10^(-1.2)= 0.0631
HPO42-摩尔 + H2PO4-摩尔 = 0.1
HPO42-摩尔=0.006 摩尔===〉0.1mol/LNa2HPO4 =(0.006/0.1)= 0.06L ＝60mL
H2PO4-摩尔=0.094 摩尔===〉0.1mol/L NaH2PO4= (0.094/0.1)=0.94L
＝940mL
答案：量取60mL0.1mol/L的磷酸氢二钠和940mL0.1mol/L的磷酸二氢钠,就可配制成1L pH6.0的100mmol/L磷酸缓冲液.

磷酸盐缓冲液 取磷酸二氢钠38.0g,与磷酸氢二钠5.04g,加水使成1000ml,即得.
磷酸盐缓冲液(pH2.0) 甲液:取磷酸16.6ml,加水至1000ml,摇匀.乙液：取磷酸氢二钠71.63g,加水使溶解成1000ml.取上述甲液72.5ml与乙液27.5ml混合,摇匀,即得.
磷酸盐缓冲液(pH2.5) 取磷酸二氢钾100g,加水800ml,用盐酸调节pH至2.5,用水稀释至1000ml.
磷酸盐缓冲液(pH5.0) 取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节pH值至5.0,即得.
磷酸盐缓冲液(pH5.8) 取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000ml,即得.
磷酸盐缓冲液(pH6.5) 取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml,用水稀释至100ml,即得.
磷酸盐缓冲液(pH6.6) 取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g,加水使溶解成400ml,即得.
磷酸盐缓冲液(含胰酶)(pH6.8) 取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解,用0.1mol/L
氢氧化钠溶液调节pH值至6.8；另取胰酶10g,加水适量使溶解,将两液混合后,加水稀释至1000ml,即得.
磷酸盐缓冲液(pH6.8) 取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml,加0.2mol/L氢氧化钠溶液118ml,用水稀释至1000ml,摇匀,即得.
磷酸盐缓冲液(pH7.0) 取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液29.1ml,用水稀释至100ml,即得.
磷酸盐缓冲液(pH7.2) 取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液50ml与0.2mol/L氢氧化钠溶液35ml,加新沸过的冷水稀释至200ml,摇匀,即得.
磷酸盐缓冲液(pH7.3) 取磷酸氢二钠1.9734g与磷酸二氢钾0.2245g,加水使溶解成1000ml,调节pH值至7.3,即得.
磷酸盐缓冲液(pH7.4) 取磷酸二氢钾1.36g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液79ml,用水稀释至200ml,即得.
磷酸盐缓冲液(pH7.6) 取磷酸二氢钾27.22g,加水使溶解成1000ml,取50ml,加0.2mol/L氢氧化钠溶液42.4ml,再加水稀释至200ml,即得.
磷酸盐缓冲液(pH7.8) 甲液：取磷酸氢二钠35.9g,加水溶解,并稀释至500ml.
乙液：取磷酸二氢钠2.76g,加水溶解,并稀释至100ml.取上述甲液91.5ml与乙液8.5ml混合,摇匀,即得.

首先,有很多细菌是可以在寡营养条件下生长的,培养基只是培养细菌的最优营养条件,所以营养不丰富也是可能染菌的.其次,PBS里面有很丰富的磷源,离子强度和pH也很适合细菌生长,如果使用时不注意,混进了碳源和氮源,那就很容易染菌了.

首先查得磷酸的k1,k2,k3
然后套用公式
cH=k3磷酸氢二钠+k2磷酸二氢钠

缓冲液都有一定的缓冲性能,但稀释后肯定会有一定影响,关键看你的稀释程度和要求的精度了
稀释后要再调回7.00,可以再加7.00缓冲液的粉剂,再用高精度的PH计进行监测

.不会计算,中国药典是这么规定的：磷酸盐缓冲液（pH7.8~8.0）取磷酸氢二钾5.59克与磷酸二氢钾0.41克,加水使溶解成1000ml,即得.

能配制PH=3.0的吗?我的书上说只能配到PH最低5.7试剂：A: 0.2 mol/l磷酸二氢钠（NaH2PO4·H2O27.8g配制成1000ml）B: 0.2mol/l磷酸氢二钠（Na2HPO4·7H2O 53.65g或Na2HPO4·12H2O71.7g配制1000ml方法：x ml A+y ml B,...

直接买标准的磷酸二氢钠来配制就可以了,这样配出来的就是6.85
常见的用来校正酸度计的溶液

pH=PKa2 +lg n(HPO42-)/n(H2PO4-)
8.0=7.2 +lg n(HPO42-)/n(H2PO4-)
n(HPO42-)/n(H2PO4-)=6.30------------(1)
若配制1L 0.1mol/L pH=8.0的磷酸缓冲液
n(HPO42-)+n(H2PO4-)=0.1mol----------------(2)
联立解得:n(NaH2PO4)= 0.014mol m(NaH2PO4)= 0.014mol * 120g/mol=1.68g
n(Na2HPO4)=0.086mol m(Na2HPO4)= 0.086mol * 142g/mol=12.21g
配制:分别称量,然后配成1L溶液

PH=PKa2+lgc（Na2HPO4）/c（ NaH2PO4 ）
7.8=7.2+lgc（Na2HPO4）/c（ NaH2PO4 ）
lgc（Na2HPO4）/c（ NaH2PO4 ）=0.6
c（Na2HPO4）/c（ NaH2PO4 ）=3.98如果配制一升溶液
需要Na2HPO4的质量是142×0.2×3.98/4.98=22.70克
需要NaH2PO4 的质量是120×0.2×1/4.98=4.82克
将Na2HPO4 ：22.70克和NaH2PO4 ：4.82克 加水配制成1升溶液即可

分别先配制0.2M Na2HPO4(甲）和0.2M NaH2PO4（乙）
甲液取40ml,乙液取60毫升,混合后就是PH6.64的溶液

橘红色

1,是为了使没发挥更好的活性,2,不可以用蒸馏水,因为蒸馏水的PH不等于7.会令酶降低活性!

查生物化学实验指导,最后都有.

H3PO4：共轭酸；H2PO4-：共轭碱

我没有计算,要是对缓冲溶液pH准确度要求不高的话,配些磷酸二氢钠和磷酸氢二钠标准溶液,往二氢钠溶液里面滴加氢二钠溶液,pH计即时测定,滴加的时候小心一点很容易配到你要的pH,缓冲体系本身具有一定的缓冲容量,加入PVP以及稀释到你要的浓度pH变化应该不大的.

这个问题没写的太明白啊.
我理解的是你的蛋白质是以悬浮状态保存在30%硫铵氯化钠溶液中的,加入磷酸缓冲液后沉淀溶解了是吗?
如果是这样的话,那么第一、加入磷酸缓冲液后,硫铵浓度被稀释了；第二纯硫铵的pH是5左右,磷酸缓冲液pH常用的是7吧,pH的变化可能偏离了蛋白质的pI,溶解性变大.

PH=PKa^2-lgc(H2A^-)/c(HA^2-)
把PH=7和Ka^2=7.2带入上式,得
(H2A^-)/c(HA^2-)=8/5
假设配制的溶液为1000毫升,那么
需要磷酸二氢钾的质量是0.1×8/13×136=8.4克
需要磷酸氢二钾的质量是0.1×5/13×174=6.7克
即称取无水磷酸氢二钾6.7克,.磷酸二氢钾8.4克加水溶解,充分搅拌定容至1000毫升即可.

(1)H2PO4- HPO42- + H+
(2) Ka2== [H+][HPO42-]/[H2PO4-]
(3)[HPO42-]/[H2PO4-] ==0.04 == 1/25
(4)磷酸氢二钠与磷酸氢钠按1：25 比例混和溶于水!
(5)使二者总浓度达到0.1mol/L!

先分别配制0.05mol/L的磷酸二氢钠和磷酸氢二钠溶液,取200毫升磷酸二氢钠溶液,用pH计测pH值,逐量加入磷酸氢二钠溶液并随时测pH值,直到符合要求.

0.067mol/L大概为1/15 M.一般为磷酸氢二钠和磷酸二氢钠的混合物.
你可以先各配两种1/15M的溶液,再混合.
NaH2PO4与Na2HPO4的比为39:61体积比混合,就可以得到ph=7.0的磷酸缓冲液.
是否高压灭菌就看你的实验要求了.

百度搜索《植物生理学实验指导》这本书,附录后面有磷酸缓冲液的配置.