找双酶切位点有哪些原则?我的目的片段连载PMD18-T载体上,现在想做双酶切,再和绿色荧光蛋白的载体连接起来做表达,已经

（1）根据神经节以及突触结构，可判断A为效应器，图中虚线所围成的部分属于反射弧中的神经中枢，接受传入神经传来的信号后，产生神经冲动并传给传出神经．
（2）给予X点一个强刺激，通道打开，Na⁺内流，其膜电位变为外负内正．由于兴奋在神经元之间的传递是单向的，所以电流计指针没有发生偏转．
（3）由于将药物放在X，刺激Y，肌肉收缩；将药物放在Z，刺激Y，肌肉不收缩．根据该对照实验，证明这种药物在神经系统中仅对兴奋在神经元之间的传递有阻断作用．
（4）由于患者肌肉萎缩，说话和吞咽困难，最后因呼吸障碍而死亡的原因是自身体内产生一种抗体，这种抗体可与神经递质的受体结合并使其失活而导致的，所以这种疾病属于自身免疫疾病．
故答案为：
（1）效应器神经中枢
（2）由负变正0
（3）神经元之间的传递
（4）自身免疫疾病

点评：
本题考点： 反射弧各部分组成及功能；细胞膜内外在各种状态下的电位情况；神经冲动的产生和传导．

考点点评： 本题考查反射弧结构、神经细胞膜电位变化及神经兴奋传递的相关知识，意在考查学生的识图能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力．

A、解旋酶和DNA聚合酶参DNA复制过程中，A正确；
B、DNA分子复制过程中分别以两条链为模板，所以其复制为半保留复制，B正确；
C、图示DNA为环状DNA，且生物大部分基因位于该DNA上，所以此DNA分子来自原核生物，C错误；
D、根据题意和图示分析可知：此DNA分子一个复制起点，双向复制，D正确．
故选：C．

点评：
本题考点： DNA分子的复制．

考点点评： 本题考查DNA复制的相关知识，意在考查学生的识图能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题和解决问题的能力．

由4个子代DNA分子的碱基对可知该DNA分子经过诱变处理后，其中1条链上的碱基发生了突变，另一条链是正常的，所以得到的4个子代DNA分子中正常的DNA分子和异常的DNA分子各占[1/2]．由于正常碱基P变成了I后，能与C配对，因此含有G与C、C与G的2个DNA分子是发生了突变的．而含有T-A、A-T的2个DNA分子是未发生突变的．又这两个正常的DNA分子和亲代DNA分子的碱基组成是一致的，即亲代DNA分子中的碱基组成是T-A或A-T，因此P可能是胸腺嘧啶或腺嘌呤．
故选：C．

点评：
本题考点： DNA分子的复制．

考点点评： 本题考查DNA分子的复制，要求考生识记DNA分子的复制过程，掌握DNA分子的半保留复制方式，能根据题干中子代DNA分子的碱基组成，准确判断“P”处的碱基，选出正确的答案，属于考纲理解层次的考查．

由4个子代DNA分子的碱基对可知该DNA分子经过诱变处理后，其中1条链上的碱基发生了突变，另一条链是正常的，所以得到的4个子代DNA分子中正常的DNA分子和异常的DNA分子各占[1/2]．由于正常碱基P变成了I后，能与C配对，因此含有G与C、C与G的2个DNA分子是发生了突变的．而含有T-A、A-T的2个DNA分子是未发生突变的．又这两个正常的DNA分子和亲代DNA分子的碱基组成是一致的，即亲代DNA分子中的碱基组成是T-A或A-T，因此P可能是胸腺嘧啶或腺嘌呤．
故选：C．

点评：
本题考点： DNA分子的复制．

考点点评： 本题考查DNA分子的复制，要求考生识记DNA分子的复制过程，掌握DNA分子的半保留复制方式，能根据题干中子代DNA分子的碱基组成，准确判断“P”处的碱基，选出正确的答案，属于考纲理解层次的考查．

A、①内质网膜与多种分泌蛋白的加工有关，A正确；
B、植物形成层的②高尔基体受损，可能导致双核细胞形成，B正确；
C、③是类囊体薄膜，进行了光反应，C错误；
D、④是线粒体内膜，进行了有氧呼吸的第三阶段，释放了大量能量，D正确．
故选：C．

点评：
本题考点： 细胞的生物膜系统；线粒体、叶绿体的结构和功能．

考点点评： 本题考查生物膜的功能，意在考查考生运用所学知识与观点，对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论的能力．

由4个子代DNA分子的碱基对可知该DNA分子经过诱变处理后，其中1条链上的碱基发生了突变，另一条链是正常的，所以得到的4个子代DNA分子中正常的DNA分子和异常的DNA分子各占[1/2]．由于正常碱基P变成了I后，能与C配对，因此含有G与C、C与G的2个DNA分子是发生了突变的．而含有T-A、A-T的2个DNA分子是未发生突变的．又这两个正常的DNA分子和亲代DNA分子的碱基组成是一致的，即亲代DNA分子中的碱基组成是T-A或A-T，因此P可能是胸腺嘧啶或腺嘌呤．
故选：C．

点评：
本题考点： DNA分子的复制．

考点点评： 本题考查DNA分子的复制，要求考生识记DNA分子的复制过程，掌握DNA分子的半保留复制方式，能根据题干中子代DNA分子的碱基组成，准确判断“P”处的碱基，选出正确的答案，属于考纲理解层次的考查．

根据题中图示，可将4kb的DNA示意图画出，再在此DNA上将两种限制酶及二者的混合物分别降解结果的示意图画出，进行比较，即可推出HindⅢ的切点为1个，将DNA切成2.8kb和1.2kb两段，同理BamHⅠ有2个，分别在距DNA一端的0.9kb处和另一端的1.8kb处．
故选：A．

点评：
本题考点： 基因工程的原理及技术．

考点点评： 本题考查了限制性核酸内切酶的相关内容，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能用数学方式准确地描述生物学方面的内容、以及数据处理能力．

A、限制酶的识别位点一般由4、5、6或8个核苷酸序列组成，故A错误；
B、据图分析，SmaⅠ限制酶切割后产生的是平末端，故B错误；
C、用DNA连接酶连接平末端的效率比黏性末端低，故C错误；
D、细菌细胞内限制酶可以切割外源DNA，防止外源DNA入侵，是一套完善的防御机制，故D正确．
故选：D．

点评：
本题考点： 基因工程的原理及技术．

考点点评： 本题考查限制酶的特点、功能的相关知识，意在考查学生提取信息、分析推理能力，平时应该加强训练．

根据DNA半保留复制的特点，DNA分子经过两次复制后，以突变链为模板复制形成的两个DNA分子相应位点上的碱基对为U-A，A-T，而另一条正常，以正常链为模板复制形成的两个DNA分子相应位点上的碱基对为G-C、C-G，因此被替换的可能是G或C．
故选：D．

点评：
本题考点： DNA分子的复制；DNA分子结构的主要特点．

考点点评： 本题考查DNA分子的复制，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力；能从题干获取有效信息，并能运用这些信息，结合所学知识解决相关的生物学问题．

A、限制性核酸内切酶1和3切出的黏性末端相同，都是-CTAG-，A正确；
B、在使用限制性核酸内切酶时，不需要解旋酶，B错误；
C、限制性核酸内切酶1、2识别的序列都是由4个脱氧核苷酸组成，限制性核酸内切酶3、4识别的序列是由6个脱氧核苷酸组成，C错误；
D、限制性核酸内切酶1和2切割形成的DNA片段的黏性末端不同，不可通过DNA连接酶拼接，D错误．
故选：D．

点评：
本题考点： 基因工程的原理及技术．

考点点评： 本题考查基因工程的工具，特别是限制酶和DNA连接酶，要求考生理解和掌握限制酶的特点，能根据题中所给的限制酶的识别序列判断其切割产生的末端的碱基序列，同时能根据DNA酶的作用特点，判断哪些限制酶切割产生的末端可以通过DNA连接酶连接起来．

（1）基因是生物遗传的功能单位和结构单位，其本质是有遗传效应的DNA片段．A、a₁、a₂、a₃的根本来源是基因突变，说明基因突变是不定向的．
（2）将两种纯合子a₁a₁、a₂a₂进行杂交得到F₁，再将F₁自交得到F₂，其基因型有a₁a₁、a₁a₂、a₂a₂．如果F₂表现型有2种，则表明这两个基因之间有明显的显隐性关系；②若F₂表现型有3种，则表明这两个基因之间无明显的显隐性关系．
（3）如果植物的抗逆性和细胞内的水杨酸、多胺、脱落酸等非蛋白质类物质有关，说明基因通过控制酶的合成来控制代谢过程，进而控制生物体的性状．
（4）①根据分析，甲病的遗传方式是伴X隐性遗传．由于Ⅱ₃是患乙病的女性，而其父母都正常，所以父母都是Bb，因此Ⅱ₂的基因型是BBX^aY或BbX^aY．
②由于Ⅱ₆患乙病，而其父母都正常，所以父母都是Bb，因此Ⅱ₄的基因型为BBX^AY或BbX^AY，所以Ⅱ₃和Ⅱ₄婚配，生一个同时患两种病的女孩的几率是0．由于Ⅱ₃是患乙病的女性，而Ⅱ₂患甲病，所以Ⅱ₃的基因型为bbX^AX^A或bbX^AX^a．因此，生一个只患一种病的孩子的几率是[2/3×
1
2]+[1/2×
1
4]-[2/3×
1
2×
1
2×
1
4×2=
9
24]=[3/8]．
故答案为：
（1）有遗传效应的DNA片段基因突变
（2）①若F₂表现型有2种，则表明这两个基因之间有明显的显隐性关系②若F₂表现型有3种，则表明这两个基因之间无明显的显隐性关系
（3）基因通过控制酶的合成来控制代谢过程，进而控制生物体的性状
（4）①伴X隐性遗传BBX^aY或BbX^aY②0[3/8]

点评：
本题考点： 伴性遗传；基因的分离规律的实质及应用．

考点点评： 本题综合考查基因的本质、基因突变、基因与性状关系及伴性遗传的相关知识，意在考查学生的识图能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力．

（1）从图甲可知，底物只能与相应酶的部位结合，体现酶的专一性．
（2）青霉素的化学结构与细菌合成细胞壁的底物相似，青霉素能与这些酶的活性位点结合（或酶活性位点被封闭），使细菌合成细胞壁的底物与酶活性位点结合的机会下降．
（3）随着底物浓度升高，抑制效力变得越来越小的是竞争性抑制剂，原因是底物浓度越高，底物与酶活性位点结合的机会越大，竞争性抑制剂与酶活性位点结合的机会越小．
（4）最适温度酶的活性最高，低于或高于最适值时，酶活性降低．
故答案为：
（1）专一性
（2）青霉素能与这些酶的活性位点结合（或：酶活性位点被封闭），使细菌合成细胞壁的底物与酶活性位点结合机会下降
（3）竞争性底物浓度越高，底物与酶活性位点结合机会越大，竞争性抑制剂与酶活性位点结合机会越小．
（4）见右图

点评：
本题考点： 酶促反应的原理；探究影响酶活性的因素．

考点点评： 本题考查影响酶活性因素的相关知识，意在考查学生的识图和分析能力，解题的关键是理解竞争性抑制和非竞争性抑制影响酶活性的机理．