5×loading buffer和6×loading buffer 都可以用检测dna吗?

不能,Loading Buffer里有溴酚蓝,可终止有关酶促反应,特别是限制酶切反应,只能在点样是加入Loading Buffer,观察电泳的进度.

loading buffer的功能主要有两个.第一,里边的指示剂溴酚蓝和二甲苯酚起到指示的作用,显示电泳的进程,以便我们适时终止电泳；第二,里边的成分甘油可以加大样品密度,使样品密度大于TAE,从而沉降到点样孔中,防止样品飘出点样孔.
没听说过什么loading marker,marker是用来标示大小的,相当于在旁边放了个刻度尺,告诉你在多大的位置表示多大的DNA

loading buffer的主要成分是SDS,甘油,溴酚蓝,TRIS,其中甘油的作用是使样品沉到点样孔中而不漂浮起来,SDS是结合蛋白质,使所有蛋白质所带电荷性质一样,但不同分子量的蛋白结合的SDS数量是不一样的.溴酚蓝是指示剂,可以用来观察大概的电泳过程,因为它在不同浓度的胶中泳动的速率不一样,从而也可以看做是一个蛋白样品,这样就可以直观的大概了解蛋白泳动到了哪个位置,但是只能看一个大概

作用：使DNA粘度增大,不要再点样中被漂离凝胶; 加入的指示剂 可指示前沿.
1*的浓度 是个经验.浓度太大,可能产生 DNA和buffer中物质难以分开,拖带；指示剂前沿太宽等 适当增加浓度 没问题,但没必要.

既不是浓缩,也不是稀释,而是用5倍的“上面所用的缓冲液”进行淋洗.

sucrose和glycerol都是帮助DNA沉入well得化学药剂,因为比重比水中,也可以用ficoll.
Note:Sucrose (40%),Ficoll (15%),or glycerol (30%) can be used in place of each other in DNA loading buffer.
Xylene Cyanol FF是tracking dyes,因为跑胶时候,你不可能看到DNA跑到哪里,所以也不知道是否分离成功.只有用肉眼可以看见的染料才能帮你.
Xylene Cyanol FF就是这其中的一种,因为它可以和~4kb的DNA一起随电泳移动.
其它常用的有bromophenol blue,orange G.

1、指示剂,方便观察电泳进行的程度；2、密度大,携带你的样本沉到孔的底部；3、保持蛋白线性及携带过量负电荷的状态.
除此之外,里面最重要的是还有巯基乙醇还原剂来让蛋白质充分变性,同时保护-SH基团.

loading buffer中加有前沿指示剂溴芬蓝,酸性,黄色.

跑什么RNA 琼脂糖的还是PAGE的 变性的还是非变性的. 一般就是甲酰胺加一点溴酚蓝染料.

一般用1乘的终浓度,那么：
1如果你最终样品溶液希望是100ul,那就是：样品+20(ul)5乘原液+80(ul)ddH2O
2如果你的样品已经有100ul,那就看你拿多大的管子来煮了.如果用2ml管子煮,最好配1ml终液,那就是：样品液(100ul)+200(ul)5乘原液+700(ul)ddH2O
总之,记住5乘原液的话是1:4的关系,即1份5乘原液+4份其他.

看你的2XPFU是什么形式,如果是mix的形式,一般已经有染料在里面了,可以看到mix的溶液就是蓝色,这样的话,样品可以直接上样的.
但是如果你加的溶液都是透明的,完成后还是需要加loading buffer.普通自己配的loading都是5X的,就按照样品：loading=4:1的比例混合就可以了.

一、可能是玻璃板没有加紧
二、浓缩胶没有凝固好,灌胶的问题
三、电压是否大了?我们常用浓缩胶80v,30min.
灌胶的问题可能性比较大,祝实验顺利

这玩意,说白了就是溴酚蓝做一个参照,你不加都一样的能够跑出条带来,我从来都是1:10加的,没问题.所谓6X就是稀释6倍使用,你如果严格的话按1：5加.