酶标仪可以用来测生物体内的酶活性吗?跪求南京建成研究所提供的动植物SOD,CAT,POD,MDA试剂盒说明书

(l)盛装待测比色液的容器不再使用比色皿,而是使用塑料微孔板.微孔板常用透明的
聚乙烯材料制成,对抗原抗体有较强的吸附作用,故用它作为固相载体.
(2)由于盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能垂直穿过,因此酶标仪的光来都
是垂直通过待测溶液和微孔板的,光束既可是从上到下,也可以是从下到上穿过比色液.
(3)酶标仪通常不仅用A,有时也使用光密度OD来表示吸光度.
酶标仪可分为单通道和多通道2种类型,单通道又有自动和手动2种之分.自动型的仪器
有X,Y方向的机械驱动机构,可将微孔板L的小孔一个个依次送入光束下面测试,手动型则
靠手工移动微孔板来进行测量.
在单通道酶标仪的基础上又发展了多通道酶标仪,此类酶标仪一般都是自动化型的.它没
有多个光束和多个光电检测器,如 12个通道的仪器设有 12条光束或 12个光源,12个检测
器和12个放大器,在X方向的机械驱动装置的作用下,样品12个为一排被检测.多通道酶标
仪的检测速度快,但其结构较复杂价格也较高.

酶标洗板机洗涤的目的是将固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他多余的游离反应物质分开.即洗涤除去未结合的抗原及杂质,经洗涤后,固相载体上只留下特异性抗体.其他免疫球蛋白及血清中的杂质由于不能与固相抗原结合,在洗涤过程中被洗去.因此,酶标洗板机的功能只是洗涤作用,无检测功能.而酶标仪实际上是一台比色检测计.酶标仪一般有内置洗板机式的,既可洗涤又可检测,体积较大.体积小的只是一台酶标比色检测计,使用时还需要配置一台洗板机才行.

酶标仪实际上就是一台变相的专用光电比色计或分光光度计.酶标仪是采用手工移动微孔板进行检测,因此省去了X,Y方向的机械驱动机构和控制电路,从而使仪器更小巧,结构也更简单.微孔板是一种经事先包理专用于放置待测样本的透明塑料板,板上有多排大小均匀一致的小孔,孔内都包埋着相应的抗原或抗体,微孔板上每个小孔可盛放零点几毫升的溶液.其常见规格有24孔板,48孔板,96孔板等多种,不同的仪器选用不同规格的孔板,对其可进行一孔一孔地检测或一排一排地检测.这就是酶标仪的构成.

酶标仪:enzyme-labeled instrument
酶标记:enzyme labelling
酶标法:enzyme linked immunosorbent assay
酶标记化合物:enzyme labeled compound
酶标免疫测定:enzyme-labeled immunoassay
游标仪器:nonius instrument
座标仪:coordinatograph
坐标仪:
1.coordinatograph
2.coelosphere

我在公司测一般用490nm的光线,当光线穿过溶液中的物质时,一部分被吸收,所以通过96孔板后光线亮度就减小了,经过酶标仪内部将光信号转化成电信号,测得值就是吸光度了

首先通过样品吸光值和对照组吸光值的对比,把吸光值转化为浓度.然后通过不同时间处理的样的蛋白浓度不同来测定浓度差,然后换算成物质的量浓度,再比上时间和酶用量就是蛋白酶的活力了.

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用标准牛血清蛋白先做标准曲线
然后嘛就是配制一定比例的样品使之在标准曲线范围内 多做几个平行 直接机器读数就可以了

胰蛋白酶的水溶液在pH3时最稳定,故用盐酸液（0.001mol/L）配制,在pH7.6-8.8时酶活性最高,故酶解时以磷酸盐缓冲液（pH7.6）进行控制.至于为什么空白和实验组在253nm处都显示over,那就不清楚了.胰蛋白酶专一性地作用于赖氨酸、精氨酸等碱性氨基酸的羧基组成的肽键、酰胺键及酯键,其水解速率：酯键＞酰胺键＞肽键.采用专属性较高的合成底物：N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯（BAEE）,在胰蛋白酶的作用下,底物被水解成苯酰酯-L-精氨酸,在253nm处的吸收度随酶促反应时间递增.

我们实验室检测LacZ,BCA测蛋白浓度的吸光值时用的酶标板就是康宁的96孔细胞培养板（可以培养贴壁细胞,应该是处理过的吧）,你做得少的话直接换个新的96孔板就ok了,不需要特别的处理,用完后用dH2O洗洗还可以重复用,挺方便的.当然如果实验比较精细的话你可能得考虑买个专业点的了

分光光度计和酶标仪都是实验室常用的两种仪器,它们的测定原理是相同的,都是使用朗伯-比耳定律,测定的都是样本的吸光度.
酶标仪按照功能的不同划分,可以分为（1）光吸收酶标仪（可见酶标仪,紫外/可见酶标仪）（2）荧光酶标仪（3）化学发光酶标仪.
分光光度计按照波长及应用领域的不同可以分为：（1）可见光分光光度计（2）紫外分光光度计（3）红外分光光度计（4）荧光分光光度计（5）原子吸收分光光度计.
分光光度计和酶标板存在一些不同之处,具体差别体现在以下三个方面：
（1）盛装待测溶液的容器：
分光光度计用的是比色皿,酶标仪使用的是塑料微孔板(酶标板).比色皿只能起到盛装溶液的作用,每个比色皿一次只能盛装一种溶液.酶标板常用透明的聚乙烯材料制成,对抗原抗体有较强的吸附作用,因此用它作为固相载体,酶标板通常为48孔或96孔,每个微孔可以盛装不同的溶液.
（2）光路的方向：
分光光度计是水平光路,而酶标仪则是垂直光路.由于酶标板盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能垂直穿过,因此酶标仪的光束都是垂直通过待测溶液和微孔板的,光束既可是从上到下,也可以是从下到上穿过比色液.垂直光的特点是标本吸光度受液体浓缩或稀释的影响小,不足之处是受被测样本液面是否水平、酶标板透光性、孔底是否平整等的影响较大.
（3）光路的长度：
由于光密度（OD值）与吸光系数,待测组分的浓度以及光路长度成正比关系.
分光光度计采用的比色杯的宽度通常是1cm,所以光路长度固定为1cm.因此不同仪器,不同批次测量的数据具有同样的可比性.
而酶标仪采用的是垂直光路,所以光路的长度应该是液体液面的高度.所以测得的值受到样品的体积的影响.

结果能不能行 要看你实际的用途
文献490nm假如指其最大吸收波长,则在这个波长吸收最强；492稍偏离一点但是也有很强吸收,结果读数差不多可能稍低.正如490是一座山的最高点,你往旁边站一点依然很高.
个人认为数据用于研究可用,用于发文章需考虑其他方面问题.

要做的合乎标准的话,应该是用空白调零的,那个数值应该是很接近零的,所以可以不管的,不用减去.

荧光素酶检测时,反应是一个很弱的自发光反应,无需外来光源,需要使用发光检测仪来检测.普通酶标仪检测的是吸光度,检测原理与荧光素酶完全不同,无法检测荧光素酶.
参考：http://www.***.com/A_Info.asp?id=29

由于灵敏度和检出限等原因,不同仪器测得的值本身就不具备可比性.要用同一仪器,测定标准溶液和样品溶液才具备可比性.