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sorry(英文) 3971210731(韩文) извините (俄文) désolé (法文) pesaroso (葡萄牙文) apesadumbrado(西班牙文) droevig 荷兰语 mothasefam波斯 Es tut mir Leid (ess toot meer lite)德国 Slihah (transliterated)希伯来语 Mi dispiace (me dispyachay) 意大利 Gomen nasai (transliterated) 日本（残念） Af ederim (ahf ay-dare-im) 土耳其 Ignoscas - 拉丁 (forgive me) Maaf kijiye 印度 scuzma 罗马尼亚 maaf印度尼西亚 171815121219阿拉伯 捷克： prosím 丹麦语： undskyld 爱沙尼亚语： kuidas palun 芬兰语： anteeksi kuinka 希腊语： π0409 ε07πατε; 匈牙利语： Tessék 冰岛语： afsaki08! fyrirgef08u! 拉脱维亚语： kā， lūdzu 立陶宛语： (atsi) pra08au 挪威语： sa du hva 波兰语： S00ucham 斯洛伐克： prosím 斯洛文尼亚语： oprostite 瑞典语： hursa

他来源于意大利统一之前的罗马教皇国。 在基督教的早期，教会处于非法状态，直至罗马皇帝君士坦丁大帝在位时期方给予基督教合法地位。也是在此之后，由于罗马皇帝和贵族的捐赠，基督教会的财产得以飞速增长。君士坦丁大帝将拉特兰宫赠给教会，这成为教会最早收到的一笔重大捐赠。除了房产之外，在意大利本土及罗马帝国各行省，捐赠给教会的地产和财富也不断增加。不过，教会是作为私人领主占有这些土地的，并不拥有这些赠土的主权。 公元5世纪时，西罗马帝国遭到蛮族的不断入侵，导致476年被东哥特人灭亡。西罗马灭亡后，其原有领土陷入无主状态，在这种情况下，意大利的基督教会组织起来，在罗马主教的治理下，逐渐成为意大利中部地区事实上的世俗统治者。 公元6世纪后，教皇国的雏形开始出现，但是查士丁尼大帝治下的拜占庭帝国对意大利展开了一系列征服活动，破坏了教皇国的政治和经济基础。伦巴底人将拜占庭势力逐出意大利。虽然此时的罗马主教（教皇）在名义上还要臣服于拜占庭皇帝，但是罗马教会的相对独立使得罗马主教有资本与君士坦丁堡主教和拜占庭皇帝相抗衡，罗马主教格历高里二世甚至开除了拜占庭皇帝利奥三世的教籍。 至公元7世纪，随着拜占庭帝国的衰落，罗马教会作为意大利最大的土地所有者，再度对拜占庭势力所不及的罗马城周围地区展开统治，并利用军事、外交手段（甚至包括贿赂）来抵抗伦巴底人的进攻。在罗马教会的努力下，伦巴底人停止南下，转而集中攻打亚平宁半岛北部以拉文纳城为核心的拜占庭总督辖区。728年，伦巴底国王路易特普兰德将拉丁地区的一些乡村和城镇捐献给罗马主教，这些土地（被称为“Patrimonium Petri”，即“圣彼得的遗产”）成为教皇国的立国基石。 751年，拜占庭在意大利的领土最终全部沦丧于伦巴底人之手。罗马地区（此时已经发展为罗马公国）彻底切断了和拜占庭帝国的联系。教皇司提反二世通过向法兰克人领袖“矮子”丕平大献殷勤，从而解除了伦巴底人的威胁。司提反采取了一系列向丕平示好的行动，包括批准后者废黜墨洛温王朝末代国王希尔德里克三世而自立为王。司提反还封丕平为罗马贵族。作为回报，丕平率军在754年进入意大利。在此后的两年中，他平定了意大利中部和北部的许多地方，然后将其作为对教会的奉献赠送给罗马教皇。在781年，丕平的儿子查理曼大帝宣布教皇为这些地区的最高统治者。 丕平奉献的土地包括拉文纳的原拜占庭总督辖区，贝内文托公国的一部分，托斯卡纳，科西嘉，伦巴底，中意大利五城（Pentapolis）地区——里米尼（Rimini）、佩萨罗（Pesaro）、法诺（Fano）、西尼加利亚（Senigallia）和安科纳（Ancona），以及其他一些城市。 丕平的献土扩大了教皇的统治区域，然而也带来一个法理上的问题：既然教皇所统治的领土是由法兰克帝国所赠，那么教皇在世俗政治中是否相应地成为法兰克皇帝的封建附庸呢？ 为了提高教皇国的威望，以及打消丕平的继承人日后利用这一献土行为来控制教廷的可能，罗马教廷在750年至850年之间大胆伪造了一份被称为“君士坦丁献土”的文献（拉丁语：Constitutum Donatio Constantini；Constitutum domini Constantini imperatoris），试图宣布教皇国所拥有的土地是在公元4世纪时由罗马皇帝君士坦丁一世奉献给罗马主教西尔维斯特二世的。该文献说，君士坦丁大帝在西尔维斯特二世通过祈祷为其治好麻风病后接受了洗礼，并在受洗后的第四天就决定将帝国都城罗马捐赠给基督教会，并在博斯普鲁斯海峡旁的拜占庭营建新都。该文献还断言，君士坦丁大帝不仅向罗马主教捐赠了意大利中部地区，而且还捐献了整个罗马帝国的西半部领土，并授予教皇及其后任者对其进行世俗统治的权力。 法兰克帝国的分裂从另一方面解决了教皇国法律地位的难题。查理曼大帝死后，帝国在9世纪分裂为三部分。虽然在此后的几个世纪中，以法兰克国王直系继承人自居的历代法国国王往往宣布自己为教廷的世俗保护者，甚至将教廷和教皇由罗马搬迁至阿维尼翁，但是在欧洲却不再有哪位皇帝或国王可以以法兰克帝国唯一继承者的身份对教皇国提出宗主权要求。 罗马教会和法兰克人的合作在800年达到了顶峰。在此之前，像东方的君士坦丁堡教会一样，罗马教皇和罗马教会的地位（至少在名义上）是从属于罗马帝国的唯一继承人，即东罗马皇帝的。教皇和君士坦丁堡大主教被认为是上帝在人间的宗教事务代表，而罗马（东罗马）皇帝是上帝在人间的世俗事务代表。基督教会和人民都认为，世界上只有一个皇帝，即罗马皇帝。797年君士坦丁六世被废，以及其母亲伊琳娜皇太后自立为罗马女皇（797年-802年在位），使得罗马教会有理由拒绝承认君士坦丁堡统治者的最高权威。罗马教会宣称，罗马皇帝的名义在希腊人（即拜占庭人）中已经不存在了，因此罗马教皇、所有的主教、法兰克元老元和罗马城的所有长老经过商议，决定把法兰克国王加冕为皇帝，使罗马帝国永远传承下去。 800年，教皇利奥三世将查理曼大帝加冕为“受上帝委托统治罗马帝国的伟大皇帝奥古斯都陛下”（Karolus Augustus a Deo coronatus magnus Imperator Romanum），神圣罗马帝国诞生（此时尚无“神圣罗马帝国”的国名，至康拉德二世时始称“罗马帝国”，至腓特烈一世时，为了与“神圣罗马教会”的名称相抗衡，方始称“神圣罗马帝国”）。 罗马教会认为，将查理曼加冕为奥古斯都和罗马皇帝，并不是宣告西方基督教世界从此与东罗马帝国分庭抗礼。在他们看来，476年西罗马末帝被废黜，并不标志着西罗马帝国的灭亡，而是标志着罗马帝国的归一，东罗马帝国重新成为单一的、没有分裂的罗马帝国。查理曼加冕为奥古斯都和罗马皇帝，意味着罗马帝国的正统皇统从“新罗马”——君士坦丁堡重新返回罗马城。 但是，因为东罗马帝国的皇统并未就此中断，所以此后基督教世界出现了两个并立的最高统治者，一个在君士坦丁堡，一个在罗马。他们并不像过去的东西罗马帝国皇帝那样和平并立，而是彼此指责对方是僭越者，宣布自己是唯一真正而合法的基督教会和人民的领袖。从这一点来说，利奥三世通过为查理曼大帝加冕，使罗马教会（及其领地）摆脱了臣服于东罗马皇帝的从属地位。从此之后，罗马教皇成为西方基督教世界的最高宗教领袖。

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歌曲名:爱と微笑みと花歌手:Leyona专辑:PATCHWORK「爱と微笑みと花」作词∶冈本定义作曲∶冈本定义歌∶Leyonaなぜ私は泣いているのだろうおとなげもなくそう始めから知っていたのにこうなることも神様はイジワルねこんなにもこわれやすくもろいものを本当に美しく造られたの心に咲く花の种をまきましょうもう一度谁かを上手く爱せるようにほら雨上がりの澄んだ空へ虹が架かるよでも涙が乾いてゆくあいだに消えてしまうの永远に変わらないものなどない约束をやぶることはこわいけど见えない键を外すわ囚われた小鸟を逃がしてあげましょうもう二度と自由を爱で缚らないように神様の悪フザケねこんなにも変わりやすくうつろうものを何よりも美しく造られたなんて心に咲く花の种をまきましょうもう一度谁かを上手に爱せるようにけなげに咲く花に水をあげましょういつの日か私もやさしく微笑えるように【 おわり 】http://music.baidu.com/song/26940279

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既然你也知道对方喜欢打击你，所以可以采用下面几种方式回击：01、直接无视对方；02、直接告诉对方你的衣品无需她评价。01、直接无视对方既然你也知道对方很喜欢打击你，那么就代表着对方可能不管你衣服好看不好看，都会直接说不好看，这才能符合她特喜欢打击你的性格。毕竟对方为了打击你，那肯定很多话都会说出来的。所以这种情况下，你就可以直接无视对方。就是无论她说什么，你都完全不在意的样子，这样时间久了，对方自然也就觉得无趣，也就不再说什么了。02、直接告诉对方你的衣品无需她评价还有一种说法就是当她再次说你衣服不好看的时候，你可以直接告诉对方说：”我的衣品不需要你来评价，谢谢。“当对方听到这句话的时候，也会明白其实你对她总是评价你衣服不好看这个事情，内心是不开心的。如果对方没有存在想要找你茬的情况的话，相信以后也不会再去之前那样了。但是如果对方就是故意天天找你事的话，那么以后肯定[scchuanyun.cn][jyzf-tea.cn][h6694.cn][gangken.cn][gzzthb.cn][lyjinqiao.cn][zhenkongfumoji.net.cn][cxm6602.cn][cnaxr.cn][gd-zdf.c o m.cn]

可以电泳法，是指带电荷的供试品（蛋白质、核苷酸等）在惰性支持介质（如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等）中，于电场的作用下，向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动，使组分分离成狭窄的区带，用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其百分含量的方法。电泳技术的基本原理和分类在电场中，推动带电质点运动的力（F）等于质点所带净电荷量（Q）与电场强度（E）的乘积。F＝QE质点的前移同样要受到阻力（F）的影响，对于一个球形质点，服从Stoke定律，即：F′＝6πrην式中r为质点半径，η为介质粘度，ν为质点移动速度，当质点在电场中作稳定运动时：F＝F′即QE＝6πrην可见，球形质点的迁移率，首先取决于自身状态，即与所带电量成正比，与其半径及介质粘度成反比。除了自身状态的因素外，电泳体系中其它因素也影响质点的电泳迁移率。电泳法可分为自由电泳（无支持体）及区带电泳（有支持体）两大类。前者包括Tise-leas式微量电泳、显微电泳、等电聚焦电泳、等速电泳及密度梯度电泳。区带电泳则包括滤纸电泳（常压及高压）、薄层电泳（薄膜及薄板）、凝胶电泳（琼脂、琼脂糖、淀粉胶、聚丙烯酰胺凝胶）等。自由电泳法的发展并不迅速，因为其电泳仪构造复杂、体积庞大，操作要求严格，价格昂贵等。而区带电泳可用各种类型的物质作支持体，其应用比较广泛。本节仅对常用的几种区带电泳分别加以叙述。影响电泳迁移率的因素⒈电场强度 电场强度是指单位长度（cm）的电位降，也称电势梯度。如以滤纸作支持物，其两端浸入到电极液中，电极液与滤纸交界面的纸长为20cm，测得的电位降为200V，那么电场强度为200V/20cm＝10V/cm。当电压在500V以下，电场强度在2-10v/cm时为常压电泳。电压在500V以上，电场强度在20-200V/cm时为高压电泳。电场强度大，带电质点的迁移率加速，因此省时，但因产生大量热量，应配备冷却装置以维持恒温。⒉溶液的pH值 溶液的pH决定被分离物质的解离程度和质点的带电性质及所带净电荷量。例如蛋白质分子，它是既有酸性基团（-COOH），又有碱性基团（-NH2）的两性电解质，在某一溶液中所带正负电荷相等，即分子的净电荷等于零，此时，蛋白质在电场中不再移动，溶液的这一pH值为该蛋白质的等电点（isoelctric point，pI）。若溶液pH处于等电点酸侧，即pH＜pl，则蛋白质带正电荷，在电场中向负极移动。若溶液pH处于等电点碱侧，即pH＞pl，则蛋白质带负电荷，向正极移动。溶液的pH离pl越远，质点所带净电荷越多，电泳迁移率越大。因此在电泳时，应根据样品性质，选择合适的pH值缓冲液。⒊溶液的离子强度 电泳液中的离子浓度增加时会引起质点迁移率的降低。其原因是带电质点吸引相反符合的离子聚集其周围，形成一个与运动质点符合相反的离子氛（ionic atmosphere），离子氛不仅降低质点的带电量，同时增加质点前移的阻力，甚至使其不能泳动。然而离子浓度过低，会降低缓冲液的总浓度及缓冲容量，不易维持溶液的pH值，影响质点的带电量，改变泳动速度。离子的这种障碍效应与其浓度和价数相关。可用离子强度I表示。⒋电渗 在电场作用下液体对于固体支持物的相对移动称为电渗（electro-osmosis）。其产生的原因是固体支持物多孔，且带有可解离的化学基团，因此常吸附溶液中的正离子或负离子，使溶液相对带负电或正电。如以滤纸作支持物时，纸上纤维素吸附OH-带负电荷，与纸接触的水溶液因产生H3O+，带正电荷移向负极，若质点原来在电场中移向负极，结果质点的表现速度比其固有速度要快，若质点原来移向正极，表现速度比其固有速度要慢，可见应尽可能选择低电渗作用的支持物以减少电渗的影响。电泳分析常用方法（一）醋酸纤维素薄膜电泳醋酸纤维素是提纤维素的羟基乙酰化形成的纤维素醋酸酯。由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜。这种薄膜对蛋白质样品吸附性小，几乎能完全消除纸电泳中出现的“拖尾”现象，又因为膜的亲水性比较小，它所容纳的缓冲液也少，电泳时电流的大部分由样品传导，所以分离速度快，电泳时间短，样品用量少，5μg的蛋白质可得到满意的分离效果。因此特别适合于病理情况下微量异常蛋白的检测。醋酸纤维素膜经过冰醋酸乙醇溶液或其它透明液处理后可使膜透明化有利于对电泳图谱的光吸收扫描测定和膜的长期保存。⒈材料与试剂 醋酸纤维素膜一般使用市售商品，常用的电泳缓冲液为pH8.6的巴比妥缓冲液，浓度在0.05-0.09mol/L。⒉操作要点⑴膜的预处理：必须于电泳前将膜片浸泡于缓冲液，浸透后，取出膜片并用滤纸吸去多余的缓冲液，不可吸得过干。⑵加样：样品用量依样品浓度、本身性质、染色方法及检测方法等因素决定。对血清蛋白质的常规电泳分析，每cm加样线不超过1μl，相当于60-80μg的蛋白质。⑶电泳：可在室温下进行。电压为25V/cm，电流为0.4-0.6mA/cm宽。⑷染色：一般蛋白质染色常使用氨基黑和丽春红，糖蛋白用甲苯胺蓝或过碘酸-Schiff试剂，脂蛋白则用苏丹黑或品红亚硫酸染色。⑸脱色与透明：对水溶性染料最普遍应用的脱色剂是5％醋酸水溶液。为了长期保存或进行光吸收扫描测定，可浸入冰醋酸：无水乙醇＝30:70（V/V）的透明液中。（二）凝胶电泳以淀粉胶、琼脂或琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等作为支持介质的区带电泳法称为凝胶电泳。其中聚丙烯酰胺凝胶电泳（polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE）普遍用于分离蛋白质及较小分子的核酸。琼脂糖凝胶孔径较大，对一般蛋白质不起分子筛作用，但适用于分离同工酶及其亚型，大分子核酸等应用较广，介绍如下：⒈琼脂糖凝胶电泳的原理概述 琼脂糖是由琼脂分离制备的链状多糖。其结构单元是D-半乳糖和3.6-脱水-L-半乳糖。许多琼脂糖链依氢键及其它力的作用使其互相盘绕形成绳状琼脂糖束，构成大网孔型凝胶。因此该凝胶适合于免疫复合物、核酸与核蛋白的分离、鉴定及纯化。在临床生化检验中常用于LDH、CK等同工酶的检测。⒉琼脂糖凝胶电泳分离核酸的基本技术 在一定浓度的琼脂糖凝胶介质中，DNA分子的电泳迁移率与其分子量的常用对数成反比；分子构型也对迁移率有影响，如共价闭环DNA＞直线DNA＞开环双链DNA。当凝胶浓度太高时，凝胶孔径变小，环状DNA（球形）不能进入胶中，相对迁移率为0，而同等大小的直线DNA（刚性棒状）可以按长轴方向前移，相对迁移率大于0。⑴设备与试剂：琼脂糖凝胶电泳分为垂直及水平型两种。其中水平型可制备低浓度琼脂糖凝胶，而且制胶与加样都比较方便，故应用比较广泛。核酸分离一般用连续缓冲体系，常用的有TBE（0.08mol/L Tris·HCl，pH8.5，0.08mol/L硼酸，0.0024mol/L EDTA）和THE（0.04mol/L Tris·HCl。pH7.8，0.2mol/L醋酸钠，0.0018mol/L EDTA）。⑵凝胶制备：用上述缓冲液配制0.5％-0.8％琼脂糖凝胶溶液，沸水浴或微波炉加热使之融化，冷至55℃时加入溴化乙锭（EB）至终浓度为0.5μg/ml，然后将其注入玻璃板或有机玻璃板组装好的模子中，厚度依样品浓度而定。注胶时，梳齿下端距玻璃板0.5-1.0mm，待脱凝固后，取出梳子，加入适量电极缓冲液使板胶浸没在缓冲液下1mm处。⑶样品制备与加样：溶解于TBE或THE内的样品应含指示染料（0.025％溴酚蓝或桔黄橙）、蔗糖（10％-15％）或甘油（5％-10％），也可使用2.5％Fico Ⅱ增加比重，使样品集中，每齿孔可加样5-10μg。⑷电泳：一般电压为5-15V/cm。对大分子的分离可用电压5V/cm。电泳过程最好在低温条件下进行。⑸样品回收：电泳结束后在紫外灯下观察样品的分离情况，对需要的DNA分子或特殊片段可从电泳后的凝胶中以不同的方法进行回收，如电泳洗脱法：在紫外灯下切取含核酸区带的凝胶，将其装入透析袋（内含适量新鲜电泳缓冲液），扎紧透析袋后，平放在水平型电泳槽两电极之间的浅层缓冲液中，100V电泳2-3小时，然后正负电极交换，反向电泳2分钟，使透析袋上的DNA释放出来。吸出含DNA的溶液，进行酚抽提、乙醇沉淀等步骤即可完成样品的回收。其它还有低融点琼脂糖法、醋酸铵溶液浸出法、冷冻挤压法等，但各种方法都仅仅有利于小分子量DNA片段（＜1kb）的回收，随着DNA分子量的增大，回收量显著下降。（三）等电聚焦电泳技术等电聚焦（isoelectric focusing，IEF）是60年代中期问世的一种利用有pH梯度的介质分离等电点不同的蛋白质的电泳技术。由于其分辨率可达0.01pH单位，因此特别适合于分离分子量相近而等电点不同的蛋白质组分。⒈IEF的基本原理 在IEF的电泳中，具有pH梯度的介质其分布是从阳极到阴极，pH值逐渐增大。如前所述，蛋白质分子具有两性解离及等电点的特征，这样在碱性区域蛋白质分子带负电荷向阳极移动，直至某一pH位点时失去电荷而停止移动，此处介质的pH恰好等于聚焦蛋白质分子的等电点（pl）。同理，位于酸性区域的蛋白质分子带正电荷向阴极移动，直到它们的等电点上聚焦为止。可见在该方法中，等电点是蛋白质组分的特性量度，将等电点不同的蛋白质混合物加入有pH梯度的凝胶介质中，在电场内经过一定时间后，各组分将分别聚焦在各自等电点相应的pH位置上，形成分离的蛋白质区带。⒉pH梯度的组成 pH梯度的组成方式有二种，一种是人工pH梯度，由于其不稳定，重复性差，现已不再使用。另一种是天然pH梯度。天然pH梯度的建立是在水平板或电泳管正负极间引入等电点彼此接近的一系列两性电解质的混合物，在正极端吸入酸液，如硫酸、磷酸或醋酸等，在负极端引入碱液，如氢氧化钠、氨水等。电泳开始前两性电解质的混合物pH为一均值，即各段介质中的pH相等，用pH0表示。电泳开始后，混合物中pH最低的分子，带负电荷最多，pI1为其等电点，向正极移动速度最快，当移动到正极附近的酸液界面时，pH突然下降，甚至接近或稍低于PI1，这一分子不再向前移动而停留在此区域内。由于两性电解质具有一定的缓冲能力，使其周围一定的区域内介质的pH保持在它的等电点范围。pH稍高的第二种两性电解质，其等电点为pI2，也移向正极，由于pI2＞pI1，因此定位于第一种两性电解质之后，这样，经过一定时间后，具有不同等电点的两性电解质按各自的等电点依次排列，形成了从正极到负极等电点递增，由低到高的线性pH梯度，如图16-3所示。⒊两性电解质载体与支持介质 理想的两性电解质载体应在pI处有足够的缓冲能力及电导，前者保证pH梯度的稳定，后者允许一定的电流通过。不同pI的两性电解质应有相似的电导系数从而使整个体系的电导均匀。两性电解质的分子量要小，易于应用分子筛或透析方法将其与被分离的高分子物质分开，而且不应与被分离物质发生反应或使之变性。常用的pH梯度支持介质有聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶、葡聚糖凝胶等，其中聚丙烯酰胺凝胶为最常应用。电泳后，不可用染色剂直接染色，因为常用的蛋白质染色剂也能和两性电解质结合，因此应先将凝胶浸泡在5％的三氯醋酸中去除两性电解质，然后再以适当的方法染色。（四）其他电泳技术⒈IEF/SDS-PAGE双向电泳法 1975年O′Farrall等人根据不同组份之间的等电点差异和分子量差异建立了IEF/SD S-PAGE双向电泳。其中IEF电泳（管柱状）为第一向，SDS-PAGE为第二向（平板）。在进行第一向IEF电泳时，电泳体系中应加入高浓度尿素、适量非离子型去污剂NP-40。蛋白质样品中除含有这两种物质外还应有二硫苏糖醇以促使蛋白质变性和肽链舒展。IEF电泳结束后，将圆柱形凝胶在SDS-PAGE所应用的样品处理液（内含SDS、β-巯基乙醇）中振荡平衡，然后包埋在SDS-PAGE的凝胶板上端，即可进行第二向电泳。IEF/ SDS-PAGE双向电泳对蛋白质（包括核糖体蛋白、组蛋白等）的分离是极为精细的，因此特别适合于分离细菌或细胞中复杂的蛋白质组分。⒉毛细管电泳 Neuhoff等人于1973年建立了毛细管均一浓度和梯度浓度凝胶用来分析微量蛋白质的方法，即微柱胶电泳，均一浓度的凝胶是将毛细管浸入凝胶混合液中，使凝胶充满总体积的2/3左右，然后将其揿入约厚2mm的代用粘土垫上，封闭管底，用一支直径比盛凝胶的毛细管更细的硬质玻璃毛细管吸水铺在凝胶上。聚合后，除去水层并用毛细管加蛋白质溶液（0.1-1.0μl，浓度为1-3mg/ml）于凝胶上，毛细管的空隙用电极缓冲液注满，切除插入粘土部分，即可电泳。目前毛细管电泳分析仪的诞生，特别是美国生物系统公司的高效电泳色谱仪为DNA片段、蛋白质及多肽等生物大分子的分离、回收提供了快速、有效的途径。高效电泳色谱法是将凝胶电泳解析度和快速液相色谱技术溶为一体，在从凝胶中洗脱样品时，连续的洗脱液流载着分离好的成分，通过一个连机检测器，将结果显示并打印记录。高效电泳色谱法既具有凝胶电泳固有的高分辨率，生物相容性的优点，又可方便地连续洗脱样品。各电泳法，除另有规定外，照下述方法操作。一、纸电泳法 1.仪器装置 包括电泳室及直流电源两部分。 常用的水平式电泳室装置如图，包括两个电泳槽A和一个可以密封的玻璃(或相应材料)盖B；两侧的电泳槽均用有机玻璃（或相应材料）板C分成两部分；外格装有铂电极(直径0.5～0.8cm)D；里格为可放滤纸E的有机玻璃电泳槽架F，此架可从槽中取出；两侧电泳槽A内的铂电极D经隔离导线穿过槽壁与外接电泳仪电源相连。 电源为具有稳压器的直流电源，常压电泳一般在100～500V，高压电泳一般在500～10 000V。2. 操作法 (1) 电泳缓冲液 枸橼酸盐缓冲液(pH3.0) 取枸橼酸 (C6H8O7·H2O)39.04g与枸橼酸钠(C6H5Na3O7·2H2O)4.12g，加水4000ml，使溶解。 (2) 滤纸 取色谱滤纸置1mol/L甲酸溶液中浸泡过夜，次日取出，用水漂洗至洗液的pH值不低于4,置60℃烘箱烘干，备用。可按需要裁成长27cm、宽18cm的滤纸，或根据电泳室的大小裁剪，并在距长度方向一端5～8cm处划一起始线，每隔2.5～3cm处做一记号备点样用。 (3) 点样 有湿点法和干点法。湿点法是将裁好的滤纸全部浸入枸橼酸盐缓冲液(pH3.0)中，湿润后，取出，用滤纸吸干多余的缓冲液，置电泳槽架上，使起始线靠近阴极端，将滤纸两端浸入缓冲液中，然后用微量注射器精密点加供试品溶液，每点10μl,共3点，并留2个空白位置。 干点法是将供试品溶液点于滤纸上，吹干、再点，反复数次，直至点完规定量的供试品溶液，然后用喷雾器将滤纸喷湿，点样处最后喷湿，本法适用于稀的供试品溶液。 (4) 电泳 于电泳槽中加入适量电泳缓冲液,浸没铂电极，接通电泳仪稳压电源挡,调整电压梯度为18～20V/cm，电泳约1小时45分钟，取出,立即吹干,置紫外光灯(254nm)下检视，用铅笔划出紫色斑点的位置。 (5) 含量测定 剪下供试品斑点和与斑点位置面积相近的空白滤纸，剪成细条，分别置试管中，各精密加入0.01mol/L盐酸溶液5ml，摇匀，放置1小时，用3号垂熔玻璃漏斗滤过，也可用自然沉降或离心法倾取上清液，按各药品项下的规定测定吸收度，并按吸收系数计算含量。二、醋酸纤维素薄膜电泳法 1.仪器装置 电泳室及直流电源同纸电泳。2.试剂 (1) 巴比妥缓冲液(pH8.6)取巴比妥2.76g，巴比妥钠15.45g，加水溶解使成1000ml。 (2) 氨基黑染色液 取0.5g的氨基黑10B,溶于甲醇50ml、冰醋酸10ml及水40ml的混合液中。 (3) 漂洗液 取乙醇45ml、冰醋酸5ml及水50ml，混匀。 (4) 透明液 取冰醋酸25ml，加无水乙醇75ml，混匀。 3.操作法 (1) 醋酸纤维素薄膜 取醋酸纤维素薄膜，裁成2cm×8cm的膜条，将无光泽面向下，浸入巴比妥缓冲液(pH8.6)中,待完全浸透，取出夹于滤纸中，轻轻吸去多余的缓冲液后,将膜条无光泽面向上,置电泳槽架上,经滤纸桥浸入巴比妥缓冲液(pH8.6)中。 (2) 点样与电泳 于膜条上距负极端2cm处，条状滴加蛋白含量约5％的供试品溶液2～3μl,在10～12V/cm电位梯度下电泳。电泳区带距离以4～5cm为宜。 (3) 染色 电泳完毕，将膜条取下浸于氨基黑染色液中，2～3分钟后，用漂洗液浸洗数次，直至脱去底色为止。 (4) 透明 将洗净并完全干后的膜条浸于透明液中10～15分钟，取出平铺于洁净的玻板上，干后即成透明薄膜，可于分光光度计上测定和作标本长期保存。 (5) 含量测定 未经透明处理的醋酸纤维素薄膜电泳图可按各药品项下规定的方法测定，一般采用洗脱法或扫描法，测定各蛋白质组分的相对百分含量。 洗脱法 将洗净的膜条用滤纸吸干，剪下供试品溶液各电泳图谱的电泳区带，分别浸于1.6％的氢氧化钠溶液中，振摇数次，至洗脱完全， 于一定波长下测定吸收度。同时剪取与供试品膜条相应的无蛋白部位，同法操作作对照。先计算吸收值总和，再计算各蛋白组分所占百分率。 扫描法 将干燥的醋酸纤维素薄膜用色谱扫描仪通过反射 （未透明薄膜） 或透射（已透明薄膜）方式在记录器上自动绘出各蛋白组分曲线图，横坐标为膜条的长度，纵坐标为吸收度，计算各蛋白组分的百分含量。亦可用微机处理积分计算。三、琼脂糖凝胶电泳法 1.仪器装置 电泳室及直流电源同纸电泳。2.试剂 (1) 醋酸－锂盐缓冲液(pH3.0) 取冰醋酸50ml，加水800ml混合后，用氢氧化锂调节pH至3.0，再加水至1000ml。 (2) 甲苯胺蓝溶液 取甲苯胺蓝0.1g，加水100ml使溶解。 3.操作法 (1)制胶 取琼脂糖约0.2g，加水10ml，置水浴中加热使溶胀完全,加温热的醋酸－锂盐缓冲液(pH3.0)10ml，混匀，趁热将胶液涂布于大小适宜(2.5cm×7.5cm或4cm×9cm)的玻璃板上，厚度约3mm，静置，待凝胶结成无气泡的均匀薄层，即得。 (2) 标准品溶液及供试品溶液的制备 照各药品项下规定配制。 (3) 点样与电泳 在电泳槽内加入醋酸－锂盐缓冲液(pH3.0),将凝胶板置于电泳槽架上，经滤纸桥浸入缓冲液。于凝胶板负极端分别点样1μl，立即接通电源，在电压梯度约30V/cm，电流强度1～2mA/cm的条件下，电泳约20分钟，关闭电源。 (4) 染色与脱色 取下凝胶板，用甲苯胺蓝溶液染色，用水洗去多余的染色液至背景无色为止。四、聚丙烯酰胺凝胶电泳法 1.仪器装置 通常由稳流电泳仪和圆盘或平板电泳槽组成。其电泳室有上、下两槽,每个槽中都有固定的铂电极，铂电极经隔离电线接于电泳仪稳流挡上。2.试剂 (1)溶液A 取三羟甲基氨基甲烷36.6g，四甲基乙二胺0.23ml,加0.1mol/L盐酸溶液48ml，再加水溶解并稀释至100ml,置棕色瓶内，在冰箱中保存。 (2)溶液B 取丙烯酰胺30.0g、次甲基双丙烯酰胺0.74g，加水溶解并稀释至100ml,滤过，置棕色瓶内，在冰箱中保存。 (3)电极缓冲液(pH8.3) 取三羟甲基氨基甲烷6g、甘氨酸28.8g,加水溶解并稀释至1000ml，置冰箱中保存，用前稀释10倍。 (4)溴酚蓝指示液 取溴酚蓝0.1g,加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.0ml与90％乙醇5ml,微热使溶解，加20％乙醇制成250ml。 (5)染色液 取0.25％(W/V)考马斯亮蓝G<[250]>溶液2.5ml，加12.5％(W/V)三氯醋酸溶液至10ml。 (6)稀染色液 取上述染色液2ml，加12.5％(W/V)三氯醋酸溶液至10ml。 (7)脱色液 7％醋酸溶液。3.操作法 (1)制胶 取溶液A2ml，溶液B5.4ml，加尿素2.9g使溶解，再加水4ml，混匀，抽气赶去溶液中气泡， 加0.56％过硫酸铵溶液2ml，混匀制成胶液，立即用装有长针头的注射器或细滴管将胶液沿管壁加至底端有橡皮塞的小玻璃管(10×0.5cm)中,使胶层高度达6～7cm, 然后徐徐滴加水少量，使覆盖胶面，管底气泡必须赶走，静置约30分钟，待出现明显界面时即聚合完毕，吸去水层。 (2)标准品溶液及供试品溶液的制备 照各药品项下的规定。 (3)电泳 将已制好的凝胶玻璃管装入圆盘电泳槽内，每管加供试品或标准品溶液50～100μl，为防止扩散可加甘油或40％蔗糖溶液1～2滴及0.04％溴酚蓝指示液1滴,也可直接在上槽缓冲液中加0.04％溴酚蓝指示液数滴，玻璃管的上部用电极缓冲液充满，上端接负极、下端接正极。调节起始电流使每管为1mA，数分钟后，加大电流使每管为2～3mA，当溴酚蓝指示液移至距玻璃管底部1cm处，关闭电源。 (4)染色和脱色 电泳完毕，用装有长针头并吸满水的注射器,自胶管底部沿胶管壁将水压入，胶条即从管内滑出，将胶条浸入稀染色液过夜或用染色液浸泡10～30分钟，以水漂洗干净，再用脱色液脱色至无蛋白区带凝胶的底色透明为止。 (5)结果判断 将胶条置灯下观察，根据供试品与标准品的色带位置和色泽深浅程度进行判断。 相对迁移率 供试品和标准品的电泳区带有时可用相对迁移率(R"<[m]>)进行比较。其计算式如下： 进胶端到供试品或标准品区带的距离 相对迁移率(R"<[m]>)＝——进胶端到溴酚蓝区带的距离 扫描 将清晰的胶条置双波长薄层扫描仪或凝胶电泳扫描仪中扫描并积分，由各组分的峰面积计算百分含量。五、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白分子量,是根据大多数蛋白都能与阳离子表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)按重量比结合成复合物,使蛋白分子所带的负电荷远远超过天然蛋白分子的负电荷，消除了不同蛋白分子的电荷效应,使蛋白分子相对迁移率(R"<[m]>)的大小完全取决于分子量的高低，因此可从已知分子量的标准蛋白的对数和相对迁移率所作的标准曲线中求出供试品的分子量。1.仪器装置 除另有规定外，同聚丙烯酰胺凝胶电泳。2.试剂 (1)丙烯酰胺液溶 称取丙烯酰胺22.2g与双丙烯酰胺0.6g， 溶于100ml水中，贮于褐色瓶中低温保存。 (2) 凝胶缓冲液 称取磷酸二氢钠(NaH2PO4·2H2O)8.82g 、磷酸氢二钠(Na2HPO4 ·12H2O)51.55g与十二烷基硫酸钠2.0g，加水至1000ml(若有沉淀析出,可加温至37℃溶解)。 (3)电泳缓冲液 将凝胶缓冲液稀释1倍。 (4)染色液 称取25mg考马斯亮蓝R<[250]>,溶于57％乙醇与9.2％醋酸混合液100ml中。 (5)脱色液 取无水乙醇75ml，加冰醋酸50ml，用水稀释至1000ml。3.操作法 除下列规定外，其他均同聚丙烯酰胺凝胶电泳。 (1)制胶 用丙烯酰胺溶液－凝胶缓冲液－水－1.6％过硫酸铵溶液-四甲基乙二胺(需冷却)(10.1∶15.0∶3.4∶1.5∶0.045) 配制而成。 (2)标准蛋白溶液及供试品溶液的制备 取标准蛋白，加水制成每1ml中含2～5mg的溶液，与水解液(取尿素21.6g和十二烷基硫酸钠0.04g，溶于40ml水中)1∶3混合，置冰箱中过夜。供试品照上述方法配制。 (3)电泳 调节电流使每管为8mA。4.相对迁移率和分子量计算 将电泳脱色后的区带用卡尺或用扫描定位法测量染料移动的距离、染色前胶条长度、蛋白移动距离和脱色后的胶条长度。按下式计算相对迁移率： 蛋白移动的距离 染色前的胶条长度 相对迁移率(R"<[m]>)＝———×——— 脱色后的胶条长度 染料移动的前沿距离 以R"<[m]>为横坐标,已知分子量标准蛋白的对数为纵坐标,在半对数坐标纸上绘图,由标准曲线中查出供试品分子量。

歌曲名:Get Down歌手:E-Max - Mr Noba专辑:Compilation Jumpers United (Mix Digital 1)「GET DOWN」作词∶新美香作曲∶マツキタイジロウ歌∶LeyonaI miss you so muchCan"t get you out of my mindA wonderful nightI wonder where are you nowEvery time I hear the melodyAlways makes me think about youOh, baby Won"t you darling...Let me be with you tonight to hold you tightTake me back to the sweet days of dreamingGet down with me...　Baby!Baby!Baby!Take me back to the crazy days with youGet down to the funky boogie music...one more timeOh...　babyI miss you so muchSo crazy about you nowI love you so muchDon"t know why but I love youEvery night I dream about your sweet eyesAlways makes me miss about youOh, baby Won"t you darling...Let me dance with you tonight...　all through the nightTake me back to the sweet days of dreamingGet down with me...　Baby!Baby!Baby!Take me back to the crazy days with youGet down to the funky boogie musicI know that you"re the one for meIt took me long realizeBut now I know, I won"t let you go away from meTake me back to the sweet day of dreamingTake me back to the crazy days with youTake me back to the sweet days of dreamingGet down with me...　Baby!Baby!Baby!Take me back to the crazy days with youGet down to the funky boogie musicGet down to the funky boogie musicGet down to the funky boogie music...one more time...just one more time【 おわり 】http://music.baidu.com/song/2661060

すみません（sumimasen）拼音是 si mi ma sen，意义以上两位已经解释得很清楚了 2，すいません（suimasen）拼音是 si i ma sen，用法和すみません差不多。 3，ご免（gomen）是ご免なさい的省略说法，不如ご免なさい正式，用于朋友之间 4，ご免なさい（gomennasai），用法略，参考楼上 5，失礼ですが（shitsureidesuga），拼音是siciledesiga，也相当于EXCUSE ME 6，失礼します（sitsureishimasu），拼音是sicilesimasi，相当于“再见”，对长辈用。 7，お邪魔します（ojiamashimasu），相当于“打扰您了” 8，悪いですが（waruidesuga），相当于“实在不好意思，但是...”，用于求人办事等等。

您好，请问您这款是什么型号的呢？建议拔掉电源重新通电使用看下，如无法排除，需要售后检查处理哈。

偷个懒用google翻译。 中文:对不起,我爱你 英文:Sorry,I love you 德语:Es tut mir leid, ich liebe dich 哀思 土特 米和 类特，依稀 里拨 底细 法语:Je suis désolé, Je t"aime 如 素 缔造来，如 呆木 日语:私はごめん、爱してる 挖大喜挖 高迈恩，阿姨西带路 韩语:ubbf8uc548ud558ub2e4, uc0acub791ud55cub2e4 米暗含大，撒浪函大 葡萄牙语:Pesaroso, eu te amo 白撒ro扫，爱物 带 啊毛 意大利语:Mi dispiace, ti amo 米 第四比啊才，地 啊毛 西班牙语:Lo siento, Te quiero 老 四眼多，带 亏爱ro 阿拉伯语:u0648u0627u0646u0627 u0622u0633u0641 u060c u0623u062du0628u0643（不会） 希腊语:∧υπu03acμαι, σε αγαπu03ce 路把脉，塞 啊噶拨 俄语:Я извиняюсь, я люблю тебя 呀 椅子vi你呀幽思，呀 留步六 击毙呀

driven disc 驱动盘

歌词：作词：Nishino Kanau30fbGIORGIO 13 作曲：GIORGIO CANCEMI会いたくて 会いたくて 震える君 想うほど远く感じてもう一度闻かせて嘘でもあの日のように“好きだよ”って…今日は记念日 本当だったら二人过 ごしていたかなきっと君は全部忘れてあの子と笑いあってるの?ずっと私だけにくれてた言叶も优しさも大好きだっ た笑颜も全部あの子にも见せてるの?Baby I know君はもう私のものじゃないことくらいでもどうしても 君じゃなきゃダメだからYou are the one会いたくて 会いたくて 震える君想うほど远く感じても う一度二人戻れたら…届かない想い my heart and feelings会いたいって愿っても会えない强く想うほど辛く なってもう一度闻かせて嘘でもあの日のように“好きだよ”って…I love you 本当はI"m in love with you babyI love youBut still I can"t tell my words of love「幸せになってね」と君の前じゃ大人ぶってそんなこと心の中じゃ绝対に思わないBaby I know谁より君の全てを知ってるのにでもどうしてもあの子じゃなきゃダメなの?So tell me why会 いたくて 会いたくて 震える君想うほど远く感じてもう一度二人戻れたら…届かない想い my heart and feelings会いたいって愿っても会えない强く想うほど辛くなってもう一度闻かせて嘘でもあの日のように“好きだ よ”って…何度も爱してると言ってたのにどうして抱きしめてやさしい声で名前を呼んで もう一度会 いたくて 会いたくて 震える君想うほど远く感じてもう一度二人戻れたら…届かない想い my heart and feelings会いたいって愿っても会えない强く想うほど辛くなってもう一度闻かせて嘘でもあの日のように“好きだ よ”って…中文翻译：转载http://leyon.pixnet.net/blog/post/30979046想见你 想见你 身体颤抖著越是想念你 感觉距离越远能让我再一次听到谎言也好就像是那天的"我喜欢你"...今天是纪念日 如果是真的我们现在是两个人一起过著吧你一定会全部忘掉你和她正在欢笑著吧？以前只对我讲过的话和温柔我曾经喜欢过的笑容全部都给她了吗？Baby I know或许你已经不是我爱过得那个人了但是不管如何非你就不爱You are the one想见你 想见你 身体颤抖著越是想念你 感觉距离越远若是两人能再复合的话...无法传达给你的想念 my heart and feelings许愿想见你但却见不到你强烈的思念非常痛苦能让我再一次听到谎言也好就像是那天的"我喜欢你"...I love you 是真的I"m in love with you babyI love youBut still I can"t tell my words of love「你们要更幸福喔」在你面前装的像大人一样说出这句话但是在自己的心中绝对不是这样想的Baby I know或许你已经不是我爱过得那个人了但是为何非她不爱呢So tell me why想见你 想见你 身体颤抖著越是想念你 感觉距离越远若是两人能再复合的话...无法传达给你的想念 my heart and feelings许愿想见你但却见不到你强烈的思念非常痛苦能让我再一次听到谎言也好就像是那天的"我喜欢你"...好几次的爱上你好想问为什麼曾经拥抱过和温柔的声音好想再一次叫你的名字想见你 想见你 身体颤抖著越是想念你 感觉距离越远若是两人能再复合的话...无法传达给你的想念 my heart and feelings许愿想见你但却见不到你强烈的思念非常痛苦能让我再一次听到谎言也好就像是那天的"我喜欢你"...

感染了爱情后门病毒病毒，EXE文件的后缀都改成ZMX了。 病毒信息： 病毒名称: Worm.Supnot.u 中文名称: 恶邮差变种U 威胁级别: 3A 病毒别名: 爱情后门变种V [瑞星] 密码杀手 [江民] 病毒类型: 蠕虫、后门 受影响系统:Win9x/Win2000/Winnt/ WinXP/Windows Server 2003 技术特点： · 病毒破坏： 1、发送大量病毒邮件阻塞网络和邮件服务器； 2、释放后门病毒 病毒将在系统中殖入远程后门代码，该代码， 将响应远程恶意用户tcp请求建方一个远程 shell进程。（win9x为 command.com ，NT, WIN2K,WINXP为cmd.exe）， 可以对本地机器进行完 全控制。 3、释放通过QQ传播的病毒：“Win32.Troj. QQmsgSupnot” 该病毒通过发送诱惑信息导致用户上当，从而中毒， 详情请参考该病毒报告。 4、病毒变向感染可执行文件 病毒可能会将EXE文件改名为ZMX文件，并设置属性为“隐藏” 和“系统”，如：病毒搜索到 一个名为“Winword.exe”的文件，会将其改名“ Winword.zmx”并设置属性“隐藏”和“系 统”，然后释放一个名为“Winword.exe”的病毒复本。 这个功能的条件是：病毒运行后，每隔一小时会检查系统中是否有“ 网络映射驱动器”和 “可移动驱器”，如果有，侧会进行上述变相的文件感染。 · 发作现象：共享目录会塞满此蠕虫的文件，一般容易辨认 · 系统修改：（点击查看详情） A、自我复制到 %SYSDIR%IEXPLORE.EXE %SYSDIR%kernel66.dll %SYSDIR%RAVMOND.exe %SYSDIR%SysBoot.EXE %SYSDIR%WinDriver.exe %SYSDIR%winexe.exe %SYSDIR%WinGate.exe %SYSDIR%WinHelp.exe %DRIVER%SysBoot.exe B、病毒将释放一个DLL文件， 此文件将在系统中殖入远程后门代码 %SYSDIR% eg678.dll %SYSDIR%Task688.dll 病毒将释放一个利用QQ发送消息传播的病毒:"Win32. Troj.QQmsgSupnot"，相关文件名目录为： %SYSDIR%internet.exe %SYSDIR%svch0st.exe C、添加以下键值 HKEY_CLASSES_ROOTexefile shellopencommand (默认) : %SYSDIR%WINEXE.EXE "%1" %* HKEY_LOCAL_MACHINESoftware MicrosoftWindows CurrentversionRun "WinGate initialize" = "%SYSDIR%WINGATE.EXE -REMOTESHELL" HKEY_LOCAL_MACHINESoftware MicrosoftWindows CurrentversionRun "WinHelp" = "%SYSDIR%WINHELP.EXE" HKEY_LOCAL_MACHINESoftware MicrosoftWindows CurrentversionRun "Remote Procedure Call Locator" = "RUNDLL32.EXE REG678.DLL ONDLL_REG" HKEY_LOCAL_MACHINESoftware MicrosoftWindows CurrentversionRun "Program In Windows" = "%SYSDIR%IEXPLORE.EXE" HKEY_LOCAL_MACHINESoftware MicrosoftWindows CurrentversionRunServices "SystemTra" = "%WINDIR%SYSTRA.EXE /SYSTRA:KERNEL32.DLL" 在win9x下还修改系统文件： WIN.INI [WINDOWS] "RUN" = "RAVMOND.EXE" 在win2k、NT、XP下注册服务： HKEY_LOCAL_MACHINESYSTEM CurrentControlSetServicesll_ reg Display Name = "ll_reg " IMAGEPATH ＝ "RUNDLL32.EXE TASK688.DLL ONDLL_SERVER" HKEY_LOCAL_MACHINESYSTEM CurrentControlSetServices Windows Management Instrumentation Driver Extension Display Name = "Windows Management Instrumentation Driver Extension" IMAGEPATH = "%SYSTEM%WINDRIVER.EXE -START_SERVER" 病毒也将在每一个硬盘和可移动盘的根目录下建立一个文件： AUTORUN.INF的文件，内容为： [AUTORUN] Open="%DRIVER%:SysBoot.EXE" /StartExplorer 其中%DRIVER%为相应的驱动器。 这样在用户打开该驱动器后将运行病毒 D、Windows弱口令密码试探攻击、放出后门程序、盗取密码 E、病毒利用mapi及搜出的email地址， 对收信箱里的邮件进行回复（传播）。 邮件标题随机从病毒体内选出 F、当病毒被运行后每隔一定时间发送一次通知邮件给位于 163. com的一个信箱,邮件内容为中毒系统的ip地址， 以便利用病毒的后门进行控制 使用专杀工具： 用户也可以到 http://www.duba.net/ download/3/28.shtml免费下载恶邮差专杀工具 ，并进行该 病毒的清除，推荐到安全模式查杀。 · 手动清除： 该病毒手工清除比较困难，建议使用杀毒软件或专杀工具， 推荐到安全模式查杀。 注意：如果您的机器上有“可移动磁盘”和“网络映射驱动器”时， 请注意搜索所有的 “*.zmx”文件，找到后请将其后缀改名为exe。 推荐使用专杀工具来清除，可以自动恢复被病 毒改名的正常文件。 cmd中通过下面这条命令改回属性：attrib -s -h *.zmx /s（在发现zmx文件的磁盘跟目录下运行，如：F:> attrib -s -h *.zmx /s) 如果你嫌一个一个改文件后缀名很烦，可以新建一个txt文件。 输入如下内容: @dir /b /s *.zmx>zmx_file.txt @for /f "delims==" %%a in (zmx_file.txt) do ren "%%a" *.exe @del zmx_file.txt 然后保存成lovegate_rename_files. bat。把此文件copy到发现zmx文件的磁盘跟目录下， 双击。

烧炭党叛乱（1820年—1821年）1814年烧炭党（马志尼，后组‘青年意大利党"）开始在那不勒斯组织革命活动；至1820年组织已强大得足以凭自己的军队侵略那不勒斯，迫使国王答应实行烧炭党草议的新宪法。但翌年革命被奥地利人以“神圣同盟”在奥地利、普鲁士和俄罗斯之间的中介人身分镇压。两西西里王国叛乱1820年，西班牙人成功推翻宪法，促进了意大利相似的活动。从西班牙人的经验得到启发，两西西里王国的军队中由古格雷莫·佩佩指挥的一个团——一个烧炭党——造反，征服两西西里王国的半岛部分。国王斐迪南德一世同意颁布新宪法。但革命人士无法赢得公众的支持，更成为神圣同盟的奥牙利军队。斐迪南德一世废除宪法，并开始有系统地迫害革命者。西西里很多革命支持者，包括米谢勒·阿玛尼，在其后数十年被迫流亡海外。皮埃蒙特叛乱皮埃蒙特的革命运动领袖是Santorre di Santarosa，他希望能赶走奥地利人，并将意大利统一到萨伏依王朝下。皮埃蒙特的革命在Alessandria开始，军队在当地采用了奇萨尔皮尼共和国的绿、白、红三色旗。在国王离开国家时代为处理事务的摄政王通过新宪法以安抚革命者，但国王回国后却推翻了宪法，并向神圣同盟寻求援助。Di Santarosa的军队战败。1830年左右，支持一个统一的意大利的革命意识高涨；一连串叛乱为在意大利半岛建立一个国家奠定基础。The Duke of Modena, Francis IV野心很大，希望藉著扩大势力范围而成为意大利北部的国王。1826年，Francis明言他不会阻止破坏意大利统一的反对势力。受到声明的鼓励，当地的革命人士开始组织起来。1831年，法国七月革命期间，革命人士迫使国王退位，并在法国新国王路易·菲利浦的鼓励下开始七月王朝。路易·菲利浦答应包括Ciro Menotti在内的革命人士，如果奥地利尝试干扰军队，他会作出干预。不过，因为害怕会失去王位，路易·菲利浦在Menotti计划的起义中没有作出干预。但事实并非如此——在1831年，Papal police得悉Menotti计划的叛乱，将他和其他谋反者拘捕。同时，亦有其他叛乱在波隆那、Forlì、拉文纳、Imola、费拉拉、Pesaro和Urbino的Papal Legations发生。这些以三色旗取代教皇旗的成功的革命迅速布满整个Papal Legations，他们新成立的当地政府宣称建立了一个统一个意大利国家。在Modena及Papal Legations的革命掀起了Duchy of Parma的类似活动，大公国亦采用了三色旗；Marie Louise公爵离开了城市。发生叛乱的省计划统一为Province Italiane unite（统一的意大利省），当时的教宗国瑞十六世向奥地利求助以对抗造反者。梅特涅警告路易·菲利浦奥地利没有意图让意大利的问题自由发展，而且不会忍受法国的干预。路易·菲利浦拒绝提供任何军事援助，更逮捕了在法国居住的意大利爱国人士。1831年春天，奥地利军队开始进军意大利半岛，慢慢镇压每个发生了革命的省中的抵抗，结束了很多成熟的革命运动，并捕获了其领袖，包括Menotti。 1848年1月，革命骚乱开始在西西里岛发生。不久，革命扩展至整个欧洲。1848年2月，法国国王路易·菲利浦被迫逃亡，法兰西第二共和国宣告成立。骚乱无可避免扩展至意大利，事实上革命者亦强迫大部分意大利统治者实行君主立宪，而在米兰和威尼斯的起义亦暂时驱逐了奥地利人。不久，萨丁尼亚王国国王卡洛·阿尔贝托认定统一意大利的时刻已经来临。宣称“意大利会自己建立自己”，他向奥地利宣战。在Battle of Custoza中，他于1848年7月24日迅速被奥地利元帅约瑟夫·拉德斯基打败。双方很快便达成停战协定，拉德斯基重新控制整个伦巴底-威尼斯大区，但威尼斯得以幸免，一个共和国在达尼埃尔·曼宁领导下于威尼斯宣告成立。当拉德斯基巩固他在伦巴底-威尼斯大区的势力，以及阿尔贝托的伤势渐愈时，事情在意大利其他部份变得更严重。三月时勉强答应宪法的君主开始与他们的宪政大臣发生冲突，经常导致正面冲突。最初，共和国取得优势，迫使君主逃离他们的首都。这包括当时的教宗庇护九世。庇护九世最初被视为改革者，但与革命人士的冲突令他对君主立宪政府的理念感到酸溜溜。至1849年初他逃离罗马。激进的意大利民族主义者，包括马志尼及加里波底，宣告成立罗马共和国。列强有机会对罗马共和国的成立作出回应前，在阿尔贝托的军队接受逃亡海外的波兰元帅Albert Chrzanowski训练的同时，阿尔贝托决定再次与奥地利决战。1849年3月23日，但是很快他在Novara中被拉德斯基再次击败。这次战败是最后一次。阿尔贝托退位，由他的儿子维托里奥·伊曼纽尔二世接任，皮埃蒙特人统一意大利或征服伦巴底的野心亦已经——至少暂时——结束。战争于8月9日签署条约后正式结束。战后剩下罗马及威尼斯共和国。四月，Nicolas Oudinot下的一支法国军队被派遣到罗马。表面上，法国人希望协助教宗及其国民和解，但不久法国人被迫倾向某一方，并决定恢复教宗的地位。经过两个月的围城，罗马于1849年6月29日投降，教宗复位。加里波底和马志尼再次流亡海外——1850年，加里波底流亡美国纽约市。同时，奥地利人包围威尼斯，威尼斯被迫于8月24日投降。奥地利人亦发起恢复意大利中部的秩序，恢复被逼走的太子的地位，并建立他们对教皇国的控制。革命因而完全瓦解。1848年革命，也被称作第一次意大利独立战争. 尽管卡洛·阿尔贝托已经被奥地利人彻底击败，但是皮埃蒙特人并没有完全放弃希望。加富尔在1852年成为首相，同样也有着扩张的雄心。但是他已经察觉到仅凭撒丁王国自己的力量是无法完成的，因此，他希望借助英法的力量赶走奥地利人。为此，撒丁王国在1855年加入了克里米亚战争并支持英国和法国。但是这一做法没有取得预期的效果——意大利人的利益在战后的巴黎和会上被忽视了。尽管如此，这场战争还是取得了一个有益的结果，奥地利被孤立了，因为它试图在战争中对战争双方搞平衡，以至于战争双方对其都没有好感。在1858年1月14日，一个意大利民族主义者Felice Orsini试图行刺法国皇帝拿破仑三世。失败后被捕入狱，他在狱中写信给拿破仑三世，呼吁他给予意大利民族主义者以帮助。拿破仑三世在年轻的时候曾加入过烧炭党，他还认为自己是一个进步的思想家，在经历了这件事情之后，开始坚信自己应该为意大利的命运做些什么。1858年夏，加富尔与拿破仑会面，双方同意对奥地利联合作战。按照协议撒丁王国在战后接收奥地利在意大利的领地（伦巴第和威尼斯）以及帕尔马和摩德纳，与此同时，法国将获得撒丁王国在阿尔卑斯山麓的领地萨伏依和尼斯。意大利中部和南部将保持原样，尽管据传皇帝的侄子将取代哈布斯堡家族而成为托斯卡纳的主人。为了使法国的干涉不被视为侵略行径，加富尔将煽动伦巴第的革命活动，从而引诱奥地利的入侵。然而，事情的进展并不如计划的那样顺利。奥地利人在处理皮埃蒙特人引发的叛乱时表现得出奇地有耐心。皮埃蒙特人在1859年三月的总动员在一定程度上宣告失败，从而使得引诱奥地利入侵的计划破产。没有奥地利的入侵，法国就无法名正言顺地“干涉”。失去了法国的支持，加富尔就无法承担战争的风险了。正在这个时候，奥地利发出了解除动员的最后通牒，皮埃蒙特当然加以拒绝，使得奥地利看起来是入侵者，使得法国能够顺利“干涉”。这场战争很快结束。即使奥地利推进至皮埃蒙特，亦无力对抗。在由拿破仑三世带领的法国军队抵达前，奥地利已无法保住阿尔卑斯山的路线。6月4日的马真塔战争中，法国和萨丁尼亚战胜Gyulai伯爵的奥地利军队，奥地利由伦巴底的大部分地区撤军，拿破仑和维托里奥·伊曼纽尔二世以胜利者的姿态进入米兰。6月24日，两军之间的第二场战争于苏法利诺爆发。奥地利国王弗朗茨·约瑟夫亦有亲自指挥其军队，双方皆展示了一些作战技巧，但法国亦再次战胜。奥地利撤军至威尼斯边境的要塞。 在1866年的普奥战争中，奥地利帝国与普鲁士王国竞争在德意志诸国的领导地位。意大利王国抓住这个机会，企图夺回奥地利帝国手中的威尼西亚，而与普鲁士结成盟友。奥地利试图去说服意大利王国政府，接受威尼西亚为代价而不插手战事。然而，于4月8日意大利王国与普鲁士签订协议，意大利王国将取得威尼西亚。6月20日，意大利王国向奥地利帝国宣战。在意大利一统中，普奥战争被称为“第三次独立战争”，在第一次(1848年)及第二次(1859年)的独立战争之后。意大利国王维托里奥·埃马努埃莱二世催促引导军队渡过明乔河去入侵威尼西亚，同时加里波底率领他那支名为阿尔卑斯山猎人的志愿军去入侵蒂罗尔。意大利正规军的冒险以惨败告终。意大利王国陆军在6月24日与奥军于库斯托扎开战，意军遭受失败。7月20日，意大利海军于利萨海战中大败，海军损失惨重。意大利命运并未全部如此凄凉，7月21日加里波底的志愿军于贝泽卡战胜奥军，并朝特伦托进军。7月3日，萨多瓦会战，奥军被普军完全击败，普军进逼维也纳。同时，普鲁士首相奥托·冯·俾斯麦见其目标已经达成，于7月27日与奥地利签订停战协定。意大利王国正式于8月12日与奥地利停战。加里波底于胜利的行军中被召回，并且发出一份简短的辞职电报，上面只有“服从”（Obbedisco）一字。尽管意大利表现差劲，但普鲁士在北线的胜利，确保奥地利割让威尼西亚。10月12日在维也纳签订的条约中，奥皇同意将威尼西亚割予拿破仑三世，然后拿破仑三世在10月19日将威尼西亚让予意大利。条约中，表示威尼西亚的合并，经过公投才能变成有效。公投于10月21、22日举行。历史学家认为此公投，是在军队的监控下进行，因为仅仅只有0.01%的投票者投下反对票。许多支持独立的威尼斯人认为，这是一个阻止威尼西亚独立的骗局。奥地利军队对于意大利人的进入，作出了一些反对，但成效不大。伊曼纽尔二世进入威尼斯，并表现了他对圣马可广场的尊重。

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Viprati是Luigi Viprati烟斗的意大利商标。Luigi Viprati于1953年出生，他制作第一个烟斗时仅是兴趣使然，1972年他在罗马服兵役，他最开始的顾客是他的父亲和他祖父。10年后，他把自己制作的烟斗，以第三方形式直接卖出或生产，然后他开始在烟斗上印标记。 Viprati这个品牌创立于1984年，品牌创建起初，产品的性价比就很高。Viprati的外型设计主要是结合了Varese本地烟斗的传统外型和Pesaro大胆设计风格。 Luigi曾经徒手用牛角和竹子制作了精美的烟斗附件，其精美程度不亚于Vip这个品牌。最具艺术感的经典烟斗系列莫过于“珍奇收藏”系列烟斗, 在斗钵壁和斗柄上运用了大量的银饰。其烟斗选材为Calabrian石南，他每年可以制作出2000支烟斗，然后这些烟斗在其主要市场——意大利、瑞士、德国、英国和美国进行销售。 我们时常可以在他的烟斗上看到这样的标志： 1）光面斗，一般印有一叶、两叶、四叶或者五叶的三叶草标志，如“Fiammata”系列和“Collection”系列(这些系列中，有些比较特别，印有“Naif”的标志) 2）喷沙斗（有些上面有三叶草标志） 3）乡土斗（没有三叶草标志）。 一般标志：椭圆里印有“La Pipa”的标志+ “L. Viprati”标志。 识别记号：固定字体的“LV”(银色字母组合、或者个性化字体的金色标志)。 Luigi Viprati的直纹烟斗很闻名。除了归因其高超的技艺外，选料也是非常重要的。这方面他很有一手，Luigi充分利用与石楠木厂非常融洽的个人关系，定期到场挑选珍贵的extra－extra plateaux 根瘤。和Castello及其他著名品牌一样，Viprati 选用最优质的利古利亚石楠木。viprati做烟斗的木料都要经过沸水不断蒸煮，流出的水都呈酱油色，数天后，木料中的杂质和树脂都被煮出，这样的木料做出烟斗后就不再发酸或者有其他异味。当然还要经过数年的干燥。所以Viprati手工制作烟斗口感非常清凉、爽滑。从上面的资料能看出来，这只是人名而已希望能帮到你，要是答案还满意的话，记得采纳哦，O(∩_∩)O谢谢~！

吸尘器排行榜：1、冰尊吸尘器；2、飞利浦PHILIPS；3、戴森Dyson；4、松下Panasonic；5、三星Samsung；6、莱克LEXY；7、小狗Puppy；8、伊莱克斯Electrolux；9、泰怡凯TEK；10、美的Midea。1、冰尊吸尘器冰尊的家用无线吸尘器产品以大吸力闻名，在数码无刷电机的加持下，冰尊吸尘器秒吸一切杂物，为消费者打造洁净而舒适的家庭空间，是最好用的家用吸尘器。2、飞利浦PHILIPS荷兰飞利浦PHILIPS。在照明、医疗、家用电器等领域较为出彩的飞利浦PHILIPS，依托自身强悍的研发优势，打造了大吸力和高科技的无线吸尘器，消费者反响不错。3、戴森Dyson英国戴森Dyson品牌也是吸尘器领域的佼佼者，它推出了世界首款无尘袋吸尘器，这一创新科技也奠定了戴森Dyson在世界家居清洁领域的地位。4、松下Panasonic作为著名的国际性大企业，松下Panasonic在家电领域地位颇高。松下Panasonic吸尘器表现出众，小巧、轻便的同时，能够持久保持大吸力。5、三星Samsung韩国三星Samsung远近闻名，同样的它的吸尘器产品销量也非常好。三星Samsung吸尘器在功能和吸力上表现都十分出色，快速除尘更高效。6、莱克LEXY虽然莱克LEXY创立于1994年，但是它的实力不容小觑。莱克LEXY自主研发的吸尘器产品具备大吸力的同时，也获得了很多的专利，表现不俗。7、小狗Puppy无论是有线吸尘器还是无线吸尘器，小狗Puppy都以大吸力为最有竞争力的卖点。加上其本身极高的性价比，小狗Puppy无线吸尘器销量很高。8、伊莱克斯Electrolux一百余年历史的伊莱克斯Electrolux品牌，在吸尘器的研发上造诣颇高。大吸力下超静音，广受好评。9、泰怡凯TEK论起性价比，泰怡凯TEK可以无线吸尘器市场数一数二的品牌。操作简单、吸力大，泰怡凯TEK性能出众。10、美的Midea美的Midea本身品牌效应就非常强，大家对这个老家电品牌十分信赖。美的Midea吸尘器产品一机多用，能够将复杂的家居环境彻底清扫干净，不留死角。

步骤如下：1、先将电风扇的插头拔掉，确保电源已关闭，以避免触电的危险。2、将所有的螺丝钉松开。3、轻轻拆下电风扇的外壳，此时主板应该已经露出，但连接线还固定在主板上。4、注意观察连接线的接口，并小心地将其从主板上拆掉。5、确保已经撤除了所有连接主板的电缆线，并保留起来以便未来维护或更换即可。

单片机加操作系统对，就是这样。

日语的对不起ごめん ごめんなさい すみません すみませんてしたもしわけありません

这个可以？

分类: 社会民生 >> 军事 解析: 电泳是指带粒子在电场中向与自身带相反电荷的电极移动的现象。不同的带电颗粒在同一电场中泳动的速度不同。常用泳动度（或迁移率）来表 示。泳动度是指带电颗粒在单位电场强度下电泳的速度。电泳技术以支持物分纸电泳，醋酸纤维素薄膜电泳，淀粉凝胶电泳，琼 脂（糖）凝胶电泳及聚丙烯酰胺凝胶电泳等。经凝胶形状分有水平平板电泳，园盘柱 状电泳及垂直平板电泳。 用支持体的电泳技术： 1.纸上电泳 2.醋酸纤维薄膜电泳3.薄层电泳 4.非凝胶性支持体区带电泳 （支持体有：淀粉，纤维素粉，玻璃粉，硅胶等) 5.凝胶支持体区带电泳 ①淀粉液 ②聚丙烯酰胺凝胶 ③琼脂（糖）凝胶 不用支持体的电泳技术： 1.Tiselius或微量电泳 2.显微电泳 3.等电点聚焦电泳技术 4.等速电泳技术 5.密度梯度电泳 电泳技术的应用 在直流电场中，带电粒子向带符号相反的电极移动的现象称为电泳（electropho-resis）。1809年俄国物理学家Peнce首先发现了电泳现象，但直到1937年瑞典的Tiselius建立了分离蛋白质的界面电泳（boundary electrophoresis）之后，电泳技术才开始应用。本世纪60-70年代，当滤纸、聚丙烯酰胺凝胶等介质相继引入电泳以来，电泳技术得以迅速发展。丰富多彩的电泳形式使其应用十分广泛。电泳技术除了用于小分子物质的分离分析外，最主要用于蛋白质、核酸、酶，甚至病毒与细胞的研究。由于某些电泳法设备简单，操作方便，具有高分辨率及选择性特点，已成为医学检验中常用的技术。 一、电泳技术的基本原理和分类 在电场中，推动带电质点运动的力（F）等于质点所带净电荷量（Q）与电场强度（E）的乘积。 F＝QE 质点的前移同样要受到阻力（F）的影响，对于一个球形质点，服从Stoke定律，即： F′＝6πrην 式中r为质点半径，η为介质粘度，ν为质点移动速度，当质点在电场中作稳定运动时： F＝F′即QE＝6πrην 上式交换后可写成 ν/E的含意为单位电场强度下的移动速度，里可用迁移率μ表示，即 从上式可见，球形质点的迁移率，首先取决于自身状态，即与所带电量成正比，与其半径及介质粘度成反比。除了自身状态的因素外，电泳体系中其它因素也影响质点的电泳迁移率。 电泳法可分为自由电泳（无支持体）及区带电泳（有支持体）两大类。前者包括Tise-leas式微量电泳、显微电泳、等电聚焦电泳、等速电泳及密度梯度电泳。区带电泳则包括滤纸电泳（常压及高压）、薄层电泳（薄膜及薄板）、凝胶电泳（琼脂、琼脂糖、淀粉胶、聚丙烯酰胺凝胶）等。 自由电泳法的发展并不迅速，因为其电泳仪构造复杂、体积庞大，操作要求严格，价格昂贵等。而区带电泳可用各种类型的物质作支持体，其应用比较广泛。本节仅对常用的几种区带电泳分别加以叙述。 二、影响电泳迁移率的因素 ⒈电场强度 电场强度是指单位长度（cm）的电位降，也称电势梯度。如以滤纸作支持物，其两端浸入到电极液中，电极液与滤纸交界面的纸长为20cm，测得的电位降为200V，那么电场强度为200V/20cm＝10V/cm。当电压在500V以下，电场强度在2-10v/cm时为常压电泳。电压在500V以上，电场强度在20-200V/cm时为高压电泳。电场强度大，带电质点的迁移率加速，因此省时，但因产生大量热量，应配备冷却装置以维持恒温。 ⒉溶液的pH值溶液的pH决定被分离物质的解离程度和质点的带电性质及所带净电荷量。例如蛋白质分子，它是既有酸性基团（-COOH），又有碱性基团（-NH2）的两性电解质，在某一溶液中所带正负电荷相等，即分子的净电荷等于零，此时，蛋白质在电场中不再移动，溶液的这一pH值为该蛋白质的等电点（isoelctric point，pI）。若溶液pH处于等电点酸侧，即pH＜pl，则蛋白质带正电荷，在电场中向负极移动。若溶液pH处于等电点碱侧，即pH＞pl，则蛋白质带负电荷，向正极移动。溶液的pH离pl越远，质点所带净电荷越多，电泳迁移率越大。因此在电泳时，应根据样品性质，选择合适的pH值缓冲液。 ⒊溶液的离子强度电泳液中的离子浓度增加时会引起质点迁移率的降低。其原因是带电质点吸引相反符合的离子聚集其周围，形成一个与运动质点符合相反的离子氛（ionic atmosphere），离子氛不仅降低质点的带电量，同时增加质点前移的阻力，甚至使其不能泳动。然而离子浓度过低，会降低缓冲液的总浓度及缓冲容量，不易维持溶液的pH值，影响质点的带电量，改变泳动速度。离子的这种障碍效应与其浓度和价数相关。可用离子强度I表示。 式中S表示溶液中离子种类，Ci和Zi分别表示每种离子的摩尔浓度与化合价。最常用I值在0.02-0.2之间。 ⒋电渗在电场作用下液体对于固体支持物的相对移动称为电渗（electro-o *** osis）。其产生的原因是固体支持物多孔，且带有可解离的化学基团，因此常吸附溶液中的正离子或负离子，使溶液相对带负电或正电。如以滤纸作支持物时，纸上纤维素吸附OH-带负电荷，与纸接触的水溶液因产生H3O+，带正电荷移向负极，若质点原来在电场中移向负极，结果质点的表现速度比其固有速度要快，若质点原来移向正极，表现速度比其固有速度要慢，可见应尽可能选择低电渗作用的支持物以减少电渗的影响。 三、电泳分析常用方法 （一）醋酸纤维素薄膜电泳 醋酸纤维素是提纤维素的羟基乙酰化形成的纤维素醋酸酯。由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜。这种薄膜对蛋白质样品吸附性小，几乎能完全消除纸电泳中出现的“拖尾”现象，又因为膜的亲水性比较小，它所容纳的缓冲液也少，电泳时电流的大部分由样品传导，所以分离速度快，电泳时间短，样品用量少，5μg的蛋白质可得到满意的分离效果。因此特别适合于病理情况下微量异常蛋白的检测。 醋酸纤维素膜经过冰醋酸乙醇溶液或其它透明液处理后可使膜透明化有利于对电泳图谱的光吸收扫描测定和膜的长期保存。 ⒈材料与试剂醋酸纤维素膜一般使用市售商品，常用的电泳缓冲液为pH8.6的巴比妥缓冲液，浓度在0.05-0.09mol/L。 ⒉操作要点 ⑴膜的预处理：必须于电泳前将膜片浸泡于缓冲液，浸透后，取出膜片并用滤纸吸去多余的缓冲液，不可吸得过干。 ⑵加样：样品用量依样品浓度、本身性质、染色方法及检测方法等因素决定。对血清蛋白质的常规电泳分析，每cm加样线不超过1μl，相当于60-80μg的蛋白质。 ⑶电泳：可在室温下进行。电压为25V/cm，电流为0.4-0.6mA/cm宽。 ⑷染色：一般蛋白质染色常使用氨基黑和丽春红，糖蛋白用甲苯胺蓝或过碘酸-Schiff试剂，脂蛋白则用苏丹黑或品红亚硫酸染色。 ⑸脱色与透明：对水溶性染料最普遍应用的脱色剂是5％醋酸水溶液。为了长期保存或进行光吸收扫描测定，可浸入冰醋酸：无水乙醇＝30:70（V/V）的透明液中。 （二）凝胶电泳 以淀粉胶、琼脂或琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等作为支持介质的区带电泳法称为凝胶电泳。其中聚丙烯酰胺凝胶电泳（polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE）普遍用于分离蛋白质及较小分子的核酸。琼脂糖凝胶孔径较大，对一般蛋白质不起分子筛作用，但适用于分离同工酶及其亚型，大分子核酸等应用较广，介绍如下： ⒈琼脂糖凝胶电泳的原理概述琼脂糖是由琼脂分离制备的链状多糖。其结构单元是D-半乳糖和3.6-脱水-L-半乳糖。许多琼脂糖链依氢键及其它力的作用使其互相盘绕形成绳状琼脂糖束，构成大网孔型凝胶。因此该凝胶适合于免疫复合物、核酸与 *** 白的分离、鉴定及纯化。在临床生化检验中常用于LDH、CK等同工酶的检测。 ⒉琼脂糖凝胶电泳分离核酸的基本技术在一定浓度的琼脂糖凝胶介质中，DNA分子的电泳迁移率与其分子量的常用对数成反比；分子构型也对迁移率有影响，如共价闭环DNA＞直线DNA＞开环双链DNA。当凝胶浓度太高时，凝胶孔径变小，环状DNA（球形）不能进入胶中，相对迁移率为0，而同等大小的直线DNA（刚性棒状）可以按长轴方向前移，相对迁移率大于0。 ⑴设备与试剂：琼脂糖凝胶电泳分为垂直及水平型两种。其中水平型可制备低浓度琼脂糖凝胶，而且制胶与加样都比较方便，故应用比较广泛。核酸分离一般用连续缓冲体系，常用的有TBE（0.08mol/l Tris·HCl，pH8.5，0.08mol/L硼酸，0.0024mol/l EDTA）和THE（0.04mol/l Tris·HCl。pH7.8，0.2mol/L醋酸钠，0.0018mol/l EDTA）。 ⑵凝胶制备：用上述缓冲液配制0.5％-0.8％琼脂糖凝胶溶液，沸水浴或微波炉加热使之融化，冷至55℃时加入溴化乙锭（EB）至终浓度为0.5μg/ml，然后将其注入玻璃板或有机玻璃板组装好的模子中，厚度依样品浓度而定。注胶时，梳齿下端距玻璃板0.5-1.0mm，待脱凝固后，取出梳子，加入适量电极缓冲液使板胶浸没在缓冲液下1mm处。 ⑶样品制备与加样：溶解于TBE或THE内的样品应含指示染料（0.025％溴酚蓝或桔黄橙）、蔗糖（10％-15％）或甘油（5％-10％），也可使用2.5％Fico Ⅱ增加比重，使样品集中，每齿孔可加样5-10μg。 ⑷电泳：一般电压为5-15V/cm。对大分子的分离可用电压5V/cm。电泳过程最好在低温条件下进行。 ⑸样品回收：电泳结束后在紫外灯下观察样品的分离情况，对需要的DNA分子或特殊片段可从电泳后的凝胶中以不同的方法进行回收，如电泳洗脱法：在紫外灯下切取含核酸区带的凝胶，将其装入透析袋（内含适量新鲜电泳缓冲液），扎紧透析袋后，平放在水平型电泳槽两电极之间的浅层缓冲液中，100V电泳2-3小时，然后正负电极交换，反向电泳2分钟，使透析袋上的DNA释放出来。吸出含DNA的溶液，进行酚抽提、乙醇沉淀等步骤即可完成样品的回收。 其它还有低融点琼脂糖法、醋酸铵溶液浸出法、冷冻挤压法等，但各种方法都仅仅有利于小分子量DNA片段（＜1kb）的回收，随着DNA分子量的增大，回收量显著下降。 （三）等电聚焦电泳技术 等电聚焦（isoelectric focusing，IEF）是60年代中期问世的利用有pH梯度的介质分离等电点不同的蛋白质的电泳技术。由于其分辨率可达0.01pH单位，因此特别适合于分离分子量相近而等电点不同的蛋白质组分。 ⒈IEF的基本原理在IEF的电泳中，具有pH梯度的介质其分布是从阳极到阴极，pH值逐渐增大。如前所述，蛋白质分子具有两性解离及等电点的特征，这样在碱性区域蛋白质分子带负电荷向阳极移动，直至某一pH位点时失去电荷而停止移动，此处介质的pH恰好等于聚焦蛋白质分子的等电点（pl）。同理，位于酸性区域的蛋白质分子带正电荷向阴极移动，直到它们的等电点上聚焦为止。可见在该方法中，等电点是蛋白质组分的特性量度，将等电点不同的蛋白质混合物加入有pH梯度的凝胶介质中，在电场内经过一定时间后，各组分将分别聚焦在各自等电点相应的pH位置上，形成分离的蛋白质区带。 ⒉pH梯度的组成pH梯度的组成方式有二种，一种是人工pH梯度，由于其不稳定，重复性差，现已不再使用。另一种是天然pH梯度。天然pH梯度的建立是在水平板或电泳管正负极间引入等电点彼此接近的一系列两性电解质的混合物，在正极端吸入酸液，如硫酸、磷酸或醋酸等，在负极端引入碱液，如氢氧化钠、氨水等。电泳开始前两性电解质的混合物pH为一均值，即各段介质中的pH相等，用pH0表示。电泳开始后，混合物中pH最低的分子，带负电荷最多，pI1为其等电点，向正极移动速度最快，当移动到正极附近的酸液界面时，pH突然下降，甚至接近或稍低于PI1，这一分子不再向前移动而停留在此区域内。由于两性电解质具有一定的缓冲能力，使其周围一定的区域内介质的pH保持在它的等电点范围。pH稍高的第二种两性电解质，其等电点为pI2，也移向正极，由于pI2＞pI1，因此定位于第一种两性电解质之后，这样，经过一定时间后，具有不同等电点的两性电解质按各自的等电点依次排列，形成了从正极到负极等电点递增，由低到高的线性pH梯度，如图16-3所示。 ⒊两性电解质载体与支持介质理想的两性电解质载体应在pI处有足够的缓冲能力及电导，前者保证pH梯度的稳定，后者允许一定的电流通过。不同pI的两性电解质应有相似的电导系数从而使整个体系的电导均匀。两性电解质的分子量要小，易于应用分子筛或透析方法将其与被分离的高分子物质分开，而且不应与被分离物质发生反应或使之变性。 图16－3 pH梯度形成示意图 常用的pH梯度支持介质有聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶、葡聚糖凝胶等，其中聚丙烯酰胺凝胶为最常应用。 电泳后，不可用染色剂直接染色，因为常用的蛋白质染色剂也能和两性电解质结合，因此应先将凝胶浸泡在5％的三氯醋酸中去除两性电解质，然后再以适当的方法染色。 （四）其他电泳技术 ⒈IEF/SDS-PAGE双向电泳法1975年O′Farrall等人根据不同组份之间的等电点差异和分子量差异建立了IEF/Sd S-PAGE双向电泳。其中IEF电泳（管柱状）为第一向，SDS-PAGE为第二向（平板）。在进行第一向IEF电泳时，电泳体系中应加入高浓度尿素、适量非离子型去污剂NP-40。蛋白质样品中除含有这两种物质外还应有二硫苏糖醇以促使蛋白质变性和肽链舒展。 IEF电泳结束后，将圆柱形凝胶在SDS-PAGE所应用的样品处理液（内含SDS、β-巯基乙醇）中振荡平衡，然后包埋在SDS-PAGE的凝胶板上端，即可进行第二向电泳。 IEF/ SDS-PAGE双向电泳对蛋白质（包括核糖体蛋白、组蛋白等）的分离是极为精细的，因此特别适合于分离细菌或细胞中复杂的蛋白质组分。 ⒉毛细管电泳 Neuhoff等人于1973年建立了毛细管均一浓度和梯度浓度凝胶用来分析微量蛋白质的方法，即微柱胶电泳，均一浓度的凝胶是将毛细管浸入凝胶混合液中，使凝胶充满总体积的2/3左右，然后将其揿入约厚2mm的代用粘土垫上，封闭管底，用一支直径比盛凝胶的毛细管更细的硬质玻璃毛细管吸水铺在凝胶上。聚合后，除去水层并用毛细管加蛋白质溶液（0.1-1.0μl，浓度为1-3mg/ml）于凝胶上，毛细管的空隙用电极缓冲液注满，切除插入粘土部分，即可电泳。 毛细管电泳分析仪的诞生，特别是美国生物系统公司的高效电泳色谱仪为DNA片段、蛋白质及多肽等生物大分子的分离、回收提供了快速、有效的途径。高效电泳色谱法是将凝胶电泳解析度和快速液相色谱技术溶为一体，在从凝胶中洗脱样品时，连续的洗脱液流载着分离好的成分，通过一个连机检测器，将结果显示并打印记录。高效电泳色谱法既具有凝胶电泳固有的高分辨率，生物相容性的优点，又可方便地连续洗脱样品。

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中文：对不起意大利语：scusa，spiacente(比较少用的）英语：sorry拉丁语：venia德语：Traurig，Zuunfairsein荷兰语：droevig，Zijndoneerlijkaan法语：Désolé希腊语：θλιβερ，νταδικο巴西葡萄牙语：pesaroso，Sendounfaira俄语：огорченно，Былшестякинок瑞典语：ledset阿拉伯语：，日语：不公平がにある，ごめんなさい韩语：对不起100种实在是太难了我只会前面的5种而已其他还是字典上查的（有些有2种说法的哦我用，号把它们分开了2种都可以用的）

作用原理 聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构，具有分子筛效应，它有两种形式，一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶，蛋白质在电泳中保持完整的状态，蛋白在其中依三种因素分开：蛋白大小，形状和电荷。 而SDS-PAGE仅根据蛋白分子量亚基的不同而分离蛋白。

对不起英语：sorry 德语:Entschuldigung dutch：Droevig 法语：Désolé greek：Θλιβερ0209 意大利语：Spiacente 日语：后悔 韩语：03276739 俄语：Огорченно 西班牙语：Apesadumbrado我爱你韩语17966739汉语woaini 英语Iloveyou 德语Ichliebedich 日语anatanokoutousiki 法语Jet"aime 俄语Yatibialoublou 丹麦语Jegelskerdig 葡萄牙语Eotugochta 波斯语Dousttetdaran 犹太语Aniohevotakh 泰语Tchanlakteu 意大利语Tiamo 荷兰语Ikhouvanjou 挪威语Jegelskerdeg 波兰语Kochamchen 阿拉伯语Anabehabik 西班牙语Tequiero 瑞典语Jagskardig 塞尔维亚语Vichtelepa 亚美尼亚语Jeskessiroumem 吉普塞语Camavtu 拉丁语Amote 芬兰语Minaragastansinoa 斯里兰卡语Mameobeteaderey 土耳其语Seniseviyorum

我们在生活中谈论水的健康与安全时，总是少不了净水器这个不可忽视的话题。在当前的环境下，水源受到日益严重的污染和水质问题的困扰，所以有越来越多的人开始关注和购买净水器来保障饮用水质的安全。目前市场上有不少净水器品牌可供选择，但在众多的品牌中，有哪些是真正可靠和高效的呢？在寻找适合自己的净水器时，选择一个信誉良好、性能卓越的品牌是至关重要的。以下是一些口碑不错的净水器品牌：贝尔水宝（BRITA）康宁(Corning)3M渥泰（Wattech）【物联网净水器】美的(Midea)海尔(Haier)安吉尔(Angel)兰氏(LANSHI)双立人(Swisspro)格力(Gree)--------------------------------这些品牌都在净水器领域具有一定的知名度和市场份额，提供各种类型的净水设备，包括家用台式净水器、壁挂式净水器、商用净水设备等，以满足不同消费者的需求。特别值得一提的是，渥泰物联网净水器区别于其他，他的优势在于：高效净水：采用反渗透技术，能够有效去除水中的悬浮固体、重金属、有机物、细菌等多种污染物，提供清澈透明的净水。智能控制：通过物联网技术，实现净水器的智能化管理。用户可以通过手机APP远程监控水质状况、控制设备运行，方便实用。请注意，市场上还有其他品牌和产品可供选择，建议根据自身需求和实际情况进行选择。这些品牌在净水器市场上拥有不错的知名度和用户口碑。然而，不同的品牌和型号适用于不同的需求和预算。在选择净水器时，建议你考虑下水质情况、净水需求、产品性能和售后服务等因素，以选择适合你家庭需求的品牌和型号。

三维B超IEF左室内见一强回声光点,跟什么有关? 病情分析：你好这个胎儿发育过程中的心室内的“强光点”可能会随着胎儿的发育而消失, 指导意见：但如果同时存在心脏畸形,就要除外是否有染色体异常,建议遵医嘱定期孕检,严密观察胎儿的发育. 如果你对这个答案有什么疑问,请追问, 另外如果你觉得我的回答对你有所帮助,请千万别忘记采纳哟!

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