惠普officeief4110打印机怎么用？

IEF(International E-sports/entertainment Festival)国际数字娱乐嘉年华是全球首个由多个国家政府共同发起的、跨国界的数字娱乐盛会，是全球唯一的数字娱乐与数字体育综合赛事品牌。IEF的前身是2005年中韩电子竞技大赛（简称CKCG2005），这是中韩两国政府为落实《青少年交流协议》的具体措施之一。　　IEF国际数字娱乐嘉年华以电子竞技聚集人气，同时将网络歌曲大赛、街舞大赛、机器人比赛、网络动漫比赛、数字擂台挑战赛、电竞国际论坛完美融合的国际数字娱乐盛会。　　青少年是数字网络时代最具活力、最具推动力的参与者，通过异彩纷呈、契合青少年喜好的数字竞技娱乐赛事，潜移默化地向他们倡导绿色健康的数字化生活方式，正是IEF的主旨所在。　　IEF国际数字娱乐嘉年华致力于为各国青少年搭建一个展示风采、交流文化、碰撞思想的数字化平台，更对参与国家与地区之间加深了解、增进友谊，辐射、带动区域经济和文化创意产业发展起到不可估量的作用。

服装品牌。IEF爱依服创立于2004年，是一家年轻时尚、充满朝气与个性的服饰连锁品牌，以经营18-38岁“欧日韩”等潮流服饰为主营，并兼营各类时尚鞋帽、时装包、皮带、各类服装配饰等。该服装品牌都抖音上有自己的官方账户来卖货。

国际能源论坛，简称IEF，2000年前被称为“国际能源会议”，是在全球范围内能源生产国与消费国定期举办的一个重要的能源对话会，为各国在非正式场合讨论能源问题提供平台，以便在各主要能源生产国和消费国间建立信任、信息交流和加深对潜在的、具有世界性影响的能源问题的理解。近年来，IEF越来越多地探讨石油天然气发展中全球共同面对的问题。根据会议制定的程序，IEF每年召开一次，每次持续2～3天，会议地点设在同意主办论坛的国家，东道国应在上一次会议上表达主办的愿望，并为来自世界不同地区的能源工业领袖们提供就预先选择的三个现实问题发表意见的机会。

爱依服既有加盟店还有直营店。IEF爱依服是一家年轻、时尚、充满朝气与个性的服饰品牌，主要经营18-38岁“欧日韩”等潮流服饰兼营各类时尚鞋帽、时装包、皮带以及各类服装配饰等。丰富的产品、自由的配搭、时尚的色彩，让女性朋友在不同的场合，可以充分享受时尚活力、轻松自信的穿衣乐趣。目前IEF爱依服已经形成三种经营模式：直营模式、加盟模式、电商模式。三类模式相互促进，协调发展。自创立以来，IEF爱依服始终专注于新潮时尚服装行业，以更前卫、更时尚、更休闲的手法，诠释个性、时尚文化，用截然不同的语言呈现品牌的独特魅力！爱依服加盟所具备的优势：一、直接利用连锁总部所拥有的连锁系统、商标、管理、产品、技术，比自己去独创事业在时间上、资金上与精神上都减轻不少负担。对于完全没有生意经验的人来说，可以在较短的时间内入行直至成为行家。二、为了提高整个连锁企业的商誉，爱依服连锁总部都会随时开发或引进或采购独创性、高附加价值的商品，以产品差异化来竞争对手，连锁加盟店直接享受这种好处。三、由于连锁总部统筹出台广告宣传、节日促销、门店让利等活动，使加盟店在营销上能略胜一筹。四、连锁系统良好的商誉，等于给顾客吃下了定心丸，客户对于新开张的店或是不熟悉的店都会有亲切感。五、开张前的职前训练等装备工作，都可由爱依服连锁总部获得协助;开张后还会定期有人来做各项指导。六、自己独创生意，如果出现竞争对手，只有孤军奋战来应对，加盟店则有连锁总部为后盾，可为支援。七、自行创业则必须自己决定开店场所，而自己对该地点的好坏，往往没有信心;爱依服加盟店则可以有连锁总部咨询，帮助选到较好的店址。

该找个媒体曝光一下爱依服，上班老是加班不说老是想着法扣钱，辞职也要扣钱，五百一千都是随主管、店长瞎扣，公司没有一点规章制度

IEF测量蛋白质等电点操作时应注意如下：蛋白质的双向电泳的向为等电聚焦（Isoelectrofocusing，IEF），根据蛋白质的等电点不同进行分离，第二向为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE），按亚基分子量大小进行分离。经过电荷和分子量两次分离后，可以得到蛋白质分子的等电点和分子量信息。需要注意：1、一向聚焦与二向电泳之间需要平衡，时间视蛋白质的性质而定，一般为10min，多不超过15min。2、过量的上样量会引起双向图形畸形，特别在一向聚焦时，当样品浓度超过5mg时，则蛋白质凝聚和沉淀，使二向时产生水平和垂直条纹。3、含尿素的试剂均应避免过高的温度处理，一般不要超过30℃，否则尿素分解产生异硫氰酸盐会引起羧基甲酰化而导致电荷不均一性。4、向中过量的去污剂会严重影响双向电泳图谱，因此聚焦完毕进行平衡前，用双蒸馏水冲洗胶条，以除去残留的去污剂。5、双向电泳中双向凝胶间的界面紧密接触非常重要，如果接触不好或者两者之间留有气泡，则导致转移时分子扩散。等电聚焦的优点：等电点聚焦就是在电泳槽中放入载体两性电解质，当通以直流电时，两性电解质即形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度，当蛋白质放进此体系时，不同的蛋白质即移动到或聚焦于与其等电点相当的pH位置上。电聚焦的优点：有很高的分辨率，可将等电点相差0.01-0.02pH单位的蛋白质分开；一般电泳由于受扩散作用的影响，随着时间和所走的距离加长，区带越走越宽，而电聚焦能抵消扩散作用，使区带越走越窄。由于这种电聚焦作用，不管样品加在什么部位，都可聚焦到其电点，很稀的样品也可进行分离；可直接测出蛋白质的等电点，其精确度可达0.01pH 单位。

IE联邦快递优先服务，时效比较快些，相对来说价格也比普通的高一些。 IEF指的是联邦快递经济服务，时效与IE相比较要慢些，但相对而言价格要便宜。其实，说到底就是时效和价格的区别一个时效快价格高；一个时效慢价格低。

很不错的，IEF是一家年轻时尚，充满朝气与个性的服饰连锁机构

爱依服是中档档次。爱依服商贸有限公司创始于2004年，是一家多元化生态发展的集生产、销售于一体的时装品牌公司。公司旗下拥有IEF爱依服，IEF爱依服童装，古缇莉三大品牌，各品牌针对差异化的细分市场，来满足消费群体的多元需求。爱依服属于中档档次的品牌。是一家年轻时尚，充满朝气与个性的服饰连锁机构。爱依服的衣服特点爱依服品牌主营欧日韩潮流服饰，定位于18岁到38岁的年轻女性消费者。在这里，消费者们可以选购各种各样的时尚鞋帽、服装、皮带、配饰和包包，用多变的色彩彰显出自己的活力、自信。爱依服属于中档档次的品牌。爱依服成立于2004年，品牌隶属广东爱依服商贸有限公司，是一家年轻时尚，充满朝气与个性的服饰连锁机构。同时也是一家集生产、销售、售后服务等于一体的时装公司。公司旗下拥有IEF爱依服，IEF爱依服童装，古缇莉三大品牌。

电话投诉等等。向有关部门投诉，EF爱依服为厦门农和服饰有限公司（以下简称：“我司”）旗下著名服装品牌，近日我司发现市场上出现未经我司授权或许可擅自使用“IEF”、“爱依服”商标或使用包括“爱依服”在内的名称进行工商登记注册等侵权行为，为了维护公平正当的市场环境，保护我司及广大消费者、加盟合作伙伴的合法权益，现我司在此郑重声明如下：一、广东爱依服商贸有限公司为“IEF”、“爱依服”商标的独占使用许可权人，其他各方未经许可不得使用“IEF”、“爱依服”商标；二、目前IEF爱依服品牌已形成三类经营模式：直营模式、加盟模式、电商模式，广大消费者和加盟合作伙伴可通过官方网站确认经我司合法授权品牌店铺的具体信息，或联系我司进行咨询，请勿轻信非我司官方平台发放的任何消息；三、我司现严正声明：广州爱依服服装有限公司、爱依服装贸易（广州）有限公司、广州爱依服饰有限公司、广州市爱依服装有限公司、深圳市爱依服饰有限公司、安徽爱依服装有限公司、天津爱依服饰有限公司均与我司无任何合作关系或从属关系；任何第三方未经我司许可在公司名称或商业行为中使用“爱依服”名称、商标或品牌标识等行为，我司将通过法律途径展开维权行动。有效方法，打电话12345，北京市政府热线，比12315有用（我先在12315平台上投诉的，但是短信说要6天处理时长，所以又打了市政府热线），12345打进去的电话都会登记再让相关部门处理，后面还有回访，比12315效率高。打市政府热线后没几天，京东工商部就打电话来说愿意退款，等待处理。结果一等又是半个多月，客服专员31477真的LJ，就是不处理问题不跟进，不管你这边多急，他那边就是等，永远的等（因为太不负责，以至于我到现在都记得他的工号）。之前一直打的京东客服95618，我打了绝对不下2次电话，我敢说9%的客服并不会给你处理问题，他们永远就是我帮你留言或者转达，但是挂了电话啥也没干。后来又打京东消费者维权电话（4667733）把专员投诉了，专员才给回电了一下，然后就没有然后了。没办法，我又一边等一边想办法，最后又打了京东消费者维权电话，打了好多次，终于有一个客服帮我解决了问题。

handkerchief n.手帕； kerchief n. 头巾,围巾,手帕； lief ad. 欣喜,自愿； mischief n. 损害,伤害,淘气,恶作剧,灾祸； neckerchief n. 围巾，颈巾； relief n.宽慰；欣慰； thief n.窃贼，偷窃犯； unbelief n. 不信,疑惑,不信仰 扩展资料 　　其他单词： 　　belief n.相信；信念；信仰 　　brief a.简短的；短暂的 　　chief n.首长，头子 　　debrief v. 向...询问情况，汇报情况 　　disbelief n. 不信仰,不信,怀疑 　　fief n. 封地，活动范围 　　grief n.悲哀，悲痛，悲伤

可以。只要合同中没有对离职有相关规定就可以，进行正常的招聘就行。IEF以经营18-38岁“欧、日、韩”等潮流服饰为主营。并兼营各类时尚鞋帽，时装包，皮带，各类服装配饰等。IEF服装分为两大风格类别：欧美自由风，日韩淑女风。爱衣服品牌优势：时尚格调、风尚潮流、魅力经典、IEF致力给消费者完美精致，时尚典雅的穿衣体验。流线型剪裁、精致车工、以传承的精巧技艺对每个细节和步骤都讲究完美，保障对品质的追求。18-38岁对时尚有着比较高的追求，有一定的生活品味，对生活内涵有着独特见解的时尚女性

三维B超IEF左室内见一强回声光点,跟什么有关? 病情分析：你好这个胎儿发育过程中的心室内的“强光点”可能会随着胎儿的发育而消失, 指导意见：但如果同时存在心脏畸形,就要除外是否有染色体异常,建议遵医嘱定期孕检,严密观察胎儿的发育. 如果你对这个答案有什么疑问,请追问, 另外如果你觉得我的回答对你有所帮助,请千万别忘记采纳哟!

作用原理 聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构，具有分子筛效应，它有两种形式，一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶，蛋白质在电泳中保持完整的状态，蛋白在其中依三种因素分开：蛋白大小，形状和电荷。 而SDS-PAGE仅根据蛋白分子量亚基的不同而分离蛋白。

艾哲是广州天琦服装有限公司旗下的女装品牌，价格不贵，普遍是100到300

不知道楼主问的是哪个项目啊，以下是部分项目冠军韩国的ESTRO战队夺得2008IEFCS比赛总冠军大连职业技术学院的DCT街舞团体获得IEF2008国际数字娱乐嘉年华——街舞全国总决赛冠军2008IEFCOSPLAY冠军罪恶工具GGXX魔兽争霸最终排名：冠军：MYM]Moon亚军：WE.Pepsi.Sky季军：Gravitas.ToD星际争霸最终排名：冠军：Bisu亚军：Stork季军：SaviOr

分类: 社会民生 >> 军事 解析: 电泳是指带粒子在电场中向与自身带相反电荷的电极移动的现象。不同的带电颗粒在同一电场中泳动的速度不同。常用泳动度（或迁移率）来表 示。泳动度是指带电颗粒在单位电场强度下电泳的速度。电泳技术以支持物分纸电泳，醋酸纤维素薄膜电泳，淀粉凝胶电泳，琼 脂（糖）凝胶电泳及聚丙烯酰胺凝胶电泳等。经凝胶形状分有水平平板电泳，园盘柱 状电泳及垂直平板电泳。 用支持体的电泳技术： 1.纸上电泳 2.醋酸纤维薄膜电泳3.薄层电泳 4.非凝胶性支持体区带电泳 （支持体有：淀粉，纤维素粉，玻璃粉，硅胶等) 5.凝胶支持体区带电泳 ①淀粉液 ②聚丙烯酰胺凝胶 ③琼脂（糖）凝胶 不用支持体的电泳技术： 1.Tiselius或微量电泳 2.显微电泳 3.等电点聚焦电泳技术 4.等速电泳技术 5.密度梯度电泳 电泳技术的应用 在直流电场中，带电粒子向带符号相反的电极移动的现象称为电泳（electropho-resis）。1809年俄国物理学家Peнce首先发现了电泳现象，但直到1937年瑞典的Tiselius建立了分离蛋白质的界面电泳（boundary electrophoresis）之后，电泳技术才开始应用。本世纪60-70年代，当滤纸、聚丙烯酰胺凝胶等介质相继引入电泳以来，电泳技术得以迅速发展。丰富多彩的电泳形式使其应用十分广泛。电泳技术除了用于小分子物质的分离分析外，最主要用于蛋白质、核酸、酶，甚至病毒与细胞的研究。由于某些电泳法设备简单，操作方便，具有高分辨率及选择性特点，已成为医学检验中常用的技术。 一、电泳技术的基本原理和分类 在电场中，推动带电质点运动的力（F）等于质点所带净电荷量（Q）与电场强度（E）的乘积。 F＝QE 质点的前移同样要受到阻力（F）的影响，对于一个球形质点，服从Stoke定律，即： F′＝6πrην 式中r为质点半径，η为介质粘度，ν为质点移动速度，当质点在电场中作稳定运动时： F＝F′即QE＝6πrην 上式交换后可写成 ν/E的含意为单位电场强度下的移动速度，里可用迁移率μ表示，即 从上式可见，球形质点的迁移率，首先取决于自身状态，即与所带电量成正比，与其半径及介质粘度成反比。除了自身状态的因素外，电泳体系中其它因素也影响质点的电泳迁移率。 电泳法可分为自由电泳（无支持体）及区带电泳（有支持体）两大类。前者包括Tise-leas式微量电泳、显微电泳、等电聚焦电泳、等速电泳及密度梯度电泳。区带电泳则包括滤纸电泳（常压及高压）、薄层电泳（薄膜及薄板）、凝胶电泳（琼脂、琼脂糖、淀粉胶、聚丙烯酰胺凝胶）等。 自由电泳法的发展并不迅速，因为其电泳仪构造复杂、体积庞大，操作要求严格，价格昂贵等。而区带电泳可用各种类型的物质作支持体，其应用比较广泛。本节仅对常用的几种区带电泳分别加以叙述。 二、影响电泳迁移率的因素 ⒈电场强度 电场强度是指单位长度（cm）的电位降，也称电势梯度。如以滤纸作支持物，其两端浸入到电极液中，电极液与滤纸交界面的纸长为20cm，测得的电位降为200V，那么电场强度为200V/20cm＝10V/cm。当电压在500V以下，电场强度在2-10v/cm时为常压电泳。电压在500V以上，电场强度在20-200V/cm时为高压电泳。电场强度大，带电质点的迁移率加速，因此省时，但因产生大量热量，应配备冷却装置以维持恒温。 ⒉溶液的pH值溶液的pH决定被分离物质的解离程度和质点的带电性质及所带净电荷量。例如蛋白质分子，它是既有酸性基团（-COOH），又有碱性基团（-NH2）的两性电解质，在某一溶液中所带正负电荷相等，即分子的净电荷等于零，此时，蛋白质在电场中不再移动，溶液的这一pH值为该蛋白质的等电点（isoelctric point，pI）。若溶液pH处于等电点酸侧，即pH＜pl，则蛋白质带正电荷，在电场中向负极移动。若溶液pH处于等电点碱侧，即pH＞pl，则蛋白质带负电荷，向正极移动。溶液的pH离pl越远，质点所带净电荷越多，电泳迁移率越大。因此在电泳时，应根据样品性质，选择合适的pH值缓冲液。 ⒊溶液的离子强度电泳液中的离子浓度增加时会引起质点迁移率的降低。其原因是带电质点吸引相反符合的离子聚集其周围，形成一个与运动质点符合相反的离子氛（ionic atmosphere），离子氛不仅降低质点的带电量，同时增加质点前移的阻力，甚至使其不能泳动。然而离子浓度过低，会降低缓冲液的总浓度及缓冲容量，不易维持溶液的pH值，影响质点的带电量，改变泳动速度。离子的这种障碍效应与其浓度和价数相关。可用离子强度I表示。 式中S表示溶液中离子种类，Ci和Zi分别表示每种离子的摩尔浓度与化合价。最常用I值在0.02-0.2之间。 ⒋电渗在电场作用下液体对于固体支持物的相对移动称为电渗（electro-o *** osis）。其产生的原因是固体支持物多孔，且带有可解离的化学基团，因此常吸附溶液中的正离子或负离子，使溶液相对带负电或正电。如以滤纸作支持物时，纸上纤维素吸附OH-带负电荷，与纸接触的水溶液因产生H3O+，带正电荷移向负极，若质点原来在电场中移向负极，结果质点的表现速度比其固有速度要快，若质点原来移向正极，表现速度比其固有速度要慢，可见应尽可能选择低电渗作用的支持物以减少电渗的影响。 三、电泳分析常用方法 （一）醋酸纤维素薄膜电泳 醋酸纤维素是提纤维素的羟基乙酰化形成的纤维素醋酸酯。由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜。这种薄膜对蛋白质样品吸附性小，几乎能完全消除纸电泳中出现的“拖尾”现象，又因为膜的亲水性比较小，它所容纳的缓冲液也少，电泳时电流的大部分由样品传导，所以分离速度快，电泳时间短，样品用量少，5μg的蛋白质可得到满意的分离效果。因此特别适合于病理情况下微量异常蛋白的检测。 醋酸纤维素膜经过冰醋酸乙醇溶液或其它透明液处理后可使膜透明化有利于对电泳图谱的光吸收扫描测定和膜的长期保存。 ⒈材料与试剂醋酸纤维素膜一般使用市售商品，常用的电泳缓冲液为pH8.6的巴比妥缓冲液，浓度在0.05-0.09mol/L。 ⒉操作要点 ⑴膜的预处理：必须于电泳前将膜片浸泡于缓冲液，浸透后，取出膜片并用滤纸吸去多余的缓冲液，不可吸得过干。 ⑵加样：样品用量依样品浓度、本身性质、染色方法及检测方法等因素决定。对血清蛋白质的常规电泳分析，每cm加样线不超过1μl，相当于60-80μg的蛋白质。 ⑶电泳：可在室温下进行。电压为25V/cm，电流为0.4-0.6mA/cm宽。 ⑷染色：一般蛋白质染色常使用氨基黑和丽春红，糖蛋白用甲苯胺蓝或过碘酸-Schiff试剂，脂蛋白则用苏丹黑或品红亚硫酸染色。 ⑸脱色与透明：对水溶性染料最普遍应用的脱色剂是5％醋酸水溶液。为了长期保存或进行光吸收扫描测定，可浸入冰醋酸：无水乙醇＝30:70（V/V）的透明液中。 （二）凝胶电泳 以淀粉胶、琼脂或琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等作为支持介质的区带电泳法称为凝胶电泳。其中聚丙烯酰胺凝胶电泳（polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE）普遍用于分离蛋白质及较小分子的核酸。琼脂糖凝胶孔径较大，对一般蛋白质不起分子筛作用，但适用于分离同工酶及其亚型，大分子核酸等应用较广，介绍如下： ⒈琼脂糖凝胶电泳的原理概述琼脂糖是由琼脂分离制备的链状多糖。其结构单元是D-半乳糖和3.6-脱水-L-半乳糖。许多琼脂糖链依氢键及其它力的作用使其互相盘绕形成绳状琼脂糖束，构成大网孔型凝胶。因此该凝胶适合于免疫复合物、核酸与 *** 白的分离、鉴定及纯化。在临床生化检验中常用于LDH、CK等同工酶的检测。 ⒉琼脂糖凝胶电泳分离核酸的基本技术在一定浓度的琼脂糖凝胶介质中，DNA分子的电泳迁移率与其分子量的常用对数成反比；分子构型也对迁移率有影响，如共价闭环DNA＞直线DNA＞开环双链DNA。当凝胶浓度太高时，凝胶孔径变小，环状DNA（球形）不能进入胶中，相对迁移率为0，而同等大小的直线DNA（刚性棒状）可以按长轴方向前移，相对迁移率大于0。 ⑴设备与试剂：琼脂糖凝胶电泳分为垂直及水平型两种。其中水平型可制备低浓度琼脂糖凝胶，而且制胶与加样都比较方便，故应用比较广泛。核酸分离一般用连续缓冲体系，常用的有TBE（0.08mol/l Tris·HCl，pH8.5，0.08mol/L硼酸，0.0024mol/l EDTA）和THE（0.04mol/l Tris·HCl。pH7.8，0.2mol/L醋酸钠，0.0018mol/l EDTA）。 ⑵凝胶制备：用上述缓冲液配制0.5％-0.8％琼脂糖凝胶溶液，沸水浴或微波炉加热使之融化，冷至55℃时加入溴化乙锭（EB）至终浓度为0.5μg/ml，然后将其注入玻璃板或有机玻璃板组装好的模子中，厚度依样品浓度而定。注胶时，梳齿下端距玻璃板0.5-1.0mm，待脱凝固后，取出梳子，加入适量电极缓冲液使板胶浸没在缓冲液下1mm处。 ⑶样品制备与加样：溶解于TBE或THE内的样品应含指示染料（0.025％溴酚蓝或桔黄橙）、蔗糖（10％-15％）或甘油（5％-10％），也可使用2.5％Fico Ⅱ增加比重，使样品集中，每齿孔可加样5-10μg。 ⑷电泳：一般电压为5-15V/cm。对大分子的分离可用电压5V/cm。电泳过程最好在低温条件下进行。 ⑸样品回收：电泳结束后在紫外灯下观察样品的分离情况，对需要的DNA分子或特殊片段可从电泳后的凝胶中以不同的方法进行回收，如电泳洗脱法：在紫外灯下切取含核酸区带的凝胶，将其装入透析袋（内含适量新鲜电泳缓冲液），扎紧透析袋后，平放在水平型电泳槽两电极之间的浅层缓冲液中，100V电泳2-3小时，然后正负电极交换，反向电泳2分钟，使透析袋上的DNA释放出来。吸出含DNA的溶液，进行酚抽提、乙醇沉淀等步骤即可完成样品的回收。 其它还有低融点琼脂糖法、醋酸铵溶液浸出法、冷冻挤压法等，但各种方法都仅仅有利于小分子量DNA片段（＜1kb）的回收，随着DNA分子量的增大，回收量显著下降。 （三）等电聚焦电泳技术 等电聚焦（isoelectric focusing，IEF）是60年代中期问世的利用有pH梯度的介质分离等电点不同的蛋白质的电泳技术。由于其分辨率可达0.01pH单位，因此特别适合于分离分子量相近而等电点不同的蛋白质组分。 ⒈IEF的基本原理在IEF的电泳中，具有pH梯度的介质其分布是从阳极到阴极，pH值逐渐增大。如前所述，蛋白质分子具有两性解离及等电点的特征，这样在碱性区域蛋白质分子带负电荷向阳极移动，直至某一pH位点时失去电荷而停止移动，此处介质的pH恰好等于聚焦蛋白质分子的等电点（pl）。同理，位于酸性区域的蛋白质分子带正电荷向阴极移动，直到它们的等电点上聚焦为止。可见在该方法中，等电点是蛋白质组分的特性量度，将等电点不同的蛋白质混合物加入有pH梯度的凝胶介质中，在电场内经过一定时间后，各组分将分别聚焦在各自等电点相应的pH位置上，形成分离的蛋白质区带。 ⒉pH梯度的组成pH梯度的组成方式有二种，一种是人工pH梯度，由于其不稳定，重复性差，现已不再使用。另一种是天然pH梯度。天然pH梯度的建立是在水平板或电泳管正负极间引入等电点彼此接近的一系列两性电解质的混合物，在正极端吸入酸液，如硫酸、磷酸或醋酸等，在负极端引入碱液，如氢氧化钠、氨水等。电泳开始前两性电解质的混合物pH为一均值，即各段介质中的pH相等，用pH0表示。电泳开始后，混合物中pH最低的分子，带负电荷最多，pI1为其等电点，向正极移动速度最快，当移动到正极附近的酸液界面时，pH突然下降，甚至接近或稍低于PI1，这一分子不再向前移动而停留在此区域内。由于两性电解质具有一定的缓冲能力，使其周围一定的区域内介质的pH保持在它的等电点范围。pH稍高的第二种两性电解质，其等电点为pI2，也移向正极，由于pI2＞pI1，因此定位于第一种两性电解质之后，这样，经过一定时间后，具有不同等电点的两性电解质按各自的等电点依次排列，形成了从正极到负极等电点递增，由低到高的线性pH梯度，如图16-3所示。 ⒊两性电解质载体与支持介质理想的两性电解质载体应在pI处有足够的缓冲能力及电导，前者保证pH梯度的稳定，后者允许一定的电流通过。不同pI的两性电解质应有相似的电导系数从而使整个体系的电导均匀。两性电解质的分子量要小，易于应用分子筛或透析方法将其与被分离的高分子物质分开，而且不应与被分离物质发生反应或使之变性。 图16－3 pH梯度形成示意图 常用的pH梯度支持介质有聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶、葡聚糖凝胶等，其中聚丙烯酰胺凝胶为最常应用。 电泳后，不可用染色剂直接染色，因为常用的蛋白质染色剂也能和两性电解质结合，因此应先将凝胶浸泡在5％的三氯醋酸中去除两性电解质，然后再以适当的方法染色。 （四）其他电泳技术 ⒈IEF/SDS-PAGE双向电泳法1975年O′Farrall等人根据不同组份之间的等电点差异和分子量差异建立了IEF/Sd S-PAGE双向电泳。其中IEF电泳（管柱状）为第一向，SDS-PAGE为第二向（平板）。在进行第一向IEF电泳时，电泳体系中应加入高浓度尿素、适量非离子型去污剂NP-40。蛋白质样品中除含有这两种物质外还应有二硫苏糖醇以促使蛋白质变性和肽链舒展。 IEF电泳结束后，将圆柱形凝胶在SDS-PAGE所应用的样品处理液（内含SDS、β-巯基乙醇）中振荡平衡，然后包埋在SDS-PAGE的凝胶板上端，即可进行第二向电泳。 IEF/ SDS-PAGE双向电泳对蛋白质（包括核糖体蛋白、组蛋白等）的分离是极为精细的，因此特别适合于分离细菌或细胞中复杂的蛋白质组分。 ⒉毛细管电泳 Neuhoff等人于1973年建立了毛细管均一浓度和梯度浓度凝胶用来分析微量蛋白质的方法，即微柱胶电泳，均一浓度的凝胶是将毛细管浸入凝胶混合液中，使凝胶充满总体积的2/3左右，然后将其揿入约厚2mm的代用粘土垫上，封闭管底，用一支直径比盛凝胶的毛细管更细的硬质玻璃毛细管吸水铺在凝胶上。聚合后，除去水层并用毛细管加蛋白质溶液（0.1-1.0μl，浓度为1-3mg/ml）于凝胶上，毛细管的空隙用电极缓冲液注满，切除插入粘土部分，即可电泳。 毛细管电泳分析仪的诞生，特别是美国生物系统公司的高效电泳色谱仪为DNA片段、蛋白质及多肽等生物大分子的分离、回收提供了快速、有效的途径。高效电泳色谱法是将凝胶电泳解析度和快速液相色谱技术溶为一体，在从凝胶中洗脱样品时，连续的洗脱液流载着分离好的成分，通过一个连机检测器，将结果显示并打印记录。高效电泳色谱法既具有凝胶电泳固有的高分辨率，生物相容性的优点，又可方便地连续洗脱样品。

艾格Etam、歌莉娅Gloria、Only女装、茵曼、红袖Hopeshow、哥弟、太平鸟、37°Love、千百惠、锦瑟

可以电泳法，是指带电荷的供试品（蛋白质、核苷酸等）在惰性支持介质（如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等）中，于电场的作用下，向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动，使组分分离成狭窄的区带，用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其百分含量的方法。电泳技术的基本原理和分类在电场中，推动带电质点运动的力（F）等于质点所带净电荷量（Q）与电场强度（E）的乘积。F＝QE质点的前移同样要受到阻力（F）的影响，对于一个球形质点，服从Stoke定律，即：F′＝6πrην式中r为质点半径，η为介质粘度，ν为质点移动速度，当质点在电场中作稳定运动时：F＝F′即QE＝6πrην可见，球形质点的迁移率，首先取决于自身状态，即与所带电量成正比，与其半径及介质粘度成反比。除了自身状态的因素外，电泳体系中其它因素也影响质点的电泳迁移率。电泳法可分为自由电泳（无支持体）及区带电泳（有支持体）两大类。前者包括Tise-leas式微量电泳、显微电泳、等电聚焦电泳、等速电泳及密度梯度电泳。区带电泳则包括滤纸电泳（常压及高压）、薄层电泳（薄膜及薄板）、凝胶电泳（琼脂、琼脂糖、淀粉胶、聚丙烯酰胺凝胶）等。自由电泳法的发展并不迅速，因为其电泳仪构造复杂、体积庞大，操作要求严格，价格昂贵等。而区带电泳可用各种类型的物质作支持体，其应用比较广泛。本节仅对常用的几种区带电泳分别加以叙述。影响电泳迁移率的因素⒈电场强度 电场强度是指单位长度（cm）的电位降，也称电势梯度。如以滤纸作支持物，其两端浸入到电极液中，电极液与滤纸交界面的纸长为20cm，测得的电位降为200V，那么电场强度为200V/20cm＝10V/cm。当电压在500V以下，电场强度在2-10v/cm时为常压电泳。电压在500V以上，电场强度在20-200V/cm时为高压电泳。电场强度大，带电质点的迁移率加速，因此省时，但因产生大量热量，应配备冷却装置以维持恒温。⒉溶液的pH值 溶液的pH决定被分离物质的解离程度和质点的带电性质及所带净电荷量。例如蛋白质分子，它是既有酸性基团（-COOH），又有碱性基团（-NH2）的两性电解质，在某一溶液中所带正负电荷相等，即分子的净电荷等于零，此时，蛋白质在电场中不再移动，溶液的这一pH值为该蛋白质的等电点（isoelctric point，pI）。若溶液pH处于等电点酸侧，即pH＜pl，则蛋白质带正电荷，在电场中向负极移动。若溶液pH处于等电点碱侧，即pH＞pl，则蛋白质带负电荷，向正极移动。溶液的pH离pl越远，质点所带净电荷越多，电泳迁移率越大。因此在电泳时，应根据样品性质，选择合适的pH值缓冲液。⒊溶液的离子强度 电泳液中的离子浓度增加时会引起质点迁移率的降低。其原因是带电质点吸引相反符合的离子聚集其周围，形成一个与运动质点符合相反的离子氛（ionic atmosphere），离子氛不仅降低质点的带电量，同时增加质点前移的阻力，甚至使其不能泳动。然而离子浓度过低，会降低缓冲液的总浓度及缓冲容量，不易维持溶液的pH值，影响质点的带电量，改变泳动速度。离子的这种障碍效应与其浓度和价数相关。可用离子强度I表示。⒋电渗 在电场作用下液体对于固体支持物的相对移动称为电渗（electro-osmosis）。其产生的原因是固体支持物多孔，且带有可解离的化学基团，因此常吸附溶液中的正离子或负离子，使溶液相对带负电或正电。如以滤纸作支持物时，纸上纤维素吸附OH-带负电荷，与纸接触的水溶液因产生H3O+，带正电荷移向负极，若质点原来在电场中移向负极，结果质点的表现速度比其固有速度要快，若质点原来移向正极，表现速度比其固有速度要慢，可见应尽可能选择低电渗作用的支持物以减少电渗的影响。电泳分析常用方法（一）醋酸纤维素薄膜电泳醋酸纤维素是提纤维素的羟基乙酰化形成的纤维素醋酸酯。由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜。这种薄膜对蛋白质样品吸附性小，几乎能完全消除纸电泳中出现的“拖尾”现象，又因为膜的亲水性比较小，它所容纳的缓冲液也少，电泳时电流的大部分由样品传导，所以分离速度快，电泳时间短，样品用量少，5μg的蛋白质可得到满意的分离效果。因此特别适合于病理情况下微量异常蛋白的检测。醋酸纤维素膜经过冰醋酸乙醇溶液或其它透明液处理后可使膜透明化有利于对电泳图谱的光吸收扫描测定和膜的长期保存。⒈材料与试剂 醋酸纤维素膜一般使用市售商品，常用的电泳缓冲液为pH8.6的巴比妥缓冲液，浓度在0.05-0.09mol/L。⒉操作要点⑴膜的预处理：必须于电泳前将膜片浸泡于缓冲液，浸透后，取出膜片并用滤纸吸去多余的缓冲液，不可吸得过干。⑵加样：样品用量依样品浓度、本身性质、染色方法及检测方法等因素决定。对血清蛋白质的常规电泳分析，每cm加样线不超过1μl，相当于60-80μg的蛋白质。⑶电泳：可在室温下进行。电压为25V/cm，电流为0.4-0.6mA/cm宽。⑷染色：一般蛋白质染色常使用氨基黑和丽春红，糖蛋白用甲苯胺蓝或过碘酸-Schiff试剂，脂蛋白则用苏丹黑或品红亚硫酸染色。⑸脱色与透明：对水溶性染料最普遍应用的脱色剂是5％醋酸水溶液。为了长期保存或进行光吸收扫描测定，可浸入冰醋酸：无水乙醇＝30:70（V/V）的透明液中。（二）凝胶电泳以淀粉胶、琼脂或琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等作为支持介质的区带电泳法称为凝胶电泳。其中聚丙烯酰胺凝胶电泳（polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE）普遍用于分离蛋白质及较小分子的核酸。琼脂糖凝胶孔径较大，对一般蛋白质不起分子筛作用，但适用于分离同工酶及其亚型，大分子核酸等应用较广，介绍如下：⒈琼脂糖凝胶电泳的原理概述 琼脂糖是由琼脂分离制备的链状多糖。其结构单元是D-半乳糖和3.6-脱水-L-半乳糖。许多琼脂糖链依氢键及其它力的作用使其互相盘绕形成绳状琼脂糖束，构成大网孔型凝胶。因此该凝胶适合于免疫复合物、核酸与核蛋白的分离、鉴定及纯化。在临床生化检验中常用于LDH、CK等同工酶的检测。⒉琼脂糖凝胶电泳分离核酸的基本技术 在一定浓度的琼脂糖凝胶介质中，DNA分子的电泳迁移率与其分子量的常用对数成反比；分子构型也对迁移率有影响，如共价闭环DNA＞直线DNA＞开环双链DNA。当凝胶浓度太高时，凝胶孔径变小，环状DNA（球形）不能进入胶中，相对迁移率为0，而同等大小的直线DNA（刚性棒状）可以按长轴方向前移，相对迁移率大于0。⑴设备与试剂：琼脂糖凝胶电泳分为垂直及水平型两种。其中水平型可制备低浓度琼脂糖凝胶，而且制胶与加样都比较方便，故应用比较广泛。核酸分离一般用连续缓冲体系，常用的有TBE（0.08mol/L Tris·HCl，pH8.5，0.08mol/L硼酸，0.0024mol/L EDTA）和THE（0.04mol/L Tris·HCl。pH7.8，0.2mol/L醋酸钠，0.0018mol/L EDTA）。⑵凝胶制备：用上述缓冲液配制0.5％-0.8％琼脂糖凝胶溶液，沸水浴或微波炉加热使之融化，冷至55℃时加入溴化乙锭（EB）至终浓度为0.5μg/ml，然后将其注入玻璃板或有机玻璃板组装好的模子中，厚度依样品浓度而定。注胶时，梳齿下端距玻璃板0.5-1.0mm，待脱凝固后，取出梳子，加入适量电极缓冲液使板胶浸没在缓冲液下1mm处。⑶样品制备与加样：溶解于TBE或THE内的样品应含指示染料（0.025％溴酚蓝或桔黄橙）、蔗糖（10％-15％）或甘油（5％-10％），也可使用2.5％Fico Ⅱ增加比重，使样品集中，每齿孔可加样5-10μg。⑷电泳：一般电压为5-15V/cm。对大分子的分离可用电压5V/cm。电泳过程最好在低温条件下进行。⑸样品回收：电泳结束后在紫外灯下观察样品的分离情况，对需要的DNA分子或特殊片段可从电泳后的凝胶中以不同的方法进行回收，如电泳洗脱法：在紫外灯下切取含核酸区带的凝胶，将其装入透析袋（内含适量新鲜电泳缓冲液），扎紧透析袋后，平放在水平型电泳槽两电极之间的浅层缓冲液中，100V电泳2-3小时，然后正负电极交换，反向电泳2分钟，使透析袋上的DNA释放出来。吸出含DNA的溶液，进行酚抽提、乙醇沉淀等步骤即可完成样品的回收。其它还有低融点琼脂糖法、醋酸铵溶液浸出法、冷冻挤压法等，但各种方法都仅仅有利于小分子量DNA片段（＜1kb）的回收，随着DNA分子量的增大，回收量显著下降。（三）等电聚焦电泳技术等电聚焦（isoelectric focusing，IEF）是60年代中期问世的一种利用有pH梯度的介质分离等电点不同的蛋白质的电泳技术。由于其分辨率可达0.01pH单位，因此特别适合于分离分子量相近而等电点不同的蛋白质组分。⒈IEF的基本原理 在IEF的电泳中，具有pH梯度的介质其分布是从阳极到阴极，pH值逐渐增大。如前所述，蛋白质分子具有两性解离及等电点的特征，这样在碱性区域蛋白质分子带负电荷向阳极移动，直至某一pH位点时失去电荷而停止移动，此处介质的pH恰好等于聚焦蛋白质分子的等电点（pl）。同理，位于酸性区域的蛋白质分子带正电荷向阴极移动，直到它们的等电点上聚焦为止。可见在该方法中，等电点是蛋白质组分的特性量度，将等电点不同的蛋白质混合物加入有pH梯度的凝胶介质中，在电场内经过一定时间后，各组分将分别聚焦在各自等电点相应的pH位置上，形成分离的蛋白质区带。⒉pH梯度的组成 pH梯度的组成方式有二种，一种是人工pH梯度，由于其不稳定，重复性差，现已不再使用。另一种是天然pH梯度。天然pH梯度的建立是在水平板或电泳管正负极间引入等电点彼此接近的一系列两性电解质的混合物，在正极端吸入酸液，如硫酸、磷酸或醋酸等，在负极端引入碱液，如氢氧化钠、氨水等。电泳开始前两性电解质的混合物pH为一均值，即各段介质中的pH相等，用pH0表示。电泳开始后，混合物中pH最低的分子，带负电荷最多，pI1为其等电点，向正极移动速度最快，当移动到正极附近的酸液界面时，pH突然下降，甚至接近或稍低于PI1，这一分子不再向前移动而停留在此区域内。由于两性电解质具有一定的缓冲能力，使其周围一定的区域内介质的pH保持在它的等电点范围。pH稍高的第二种两性电解质，其等电点为pI2，也移向正极，由于pI2＞pI1，因此定位于第一种两性电解质之后，这样，经过一定时间后，具有不同等电点的两性电解质按各自的等电点依次排列，形成了从正极到负极等电点递增，由低到高的线性pH梯度，如图16-3所示。⒊两性电解质载体与支持介质 理想的两性电解质载体应在pI处有足够的缓冲能力及电导，前者保证pH梯度的稳定，后者允许一定的电流通过。不同pI的两性电解质应有相似的电导系数从而使整个体系的电导均匀。两性电解质的分子量要小，易于应用分子筛或透析方法将其与被分离的高分子物质分开，而且不应与被分离物质发生反应或使之变性。常用的pH梯度支持介质有聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶、葡聚糖凝胶等，其中聚丙烯酰胺凝胶为最常应用。电泳后，不可用染色剂直接染色，因为常用的蛋白质染色剂也能和两性电解质结合，因此应先将凝胶浸泡在5％的三氯醋酸中去除两性电解质，然后再以适当的方法染色。（四）其他电泳技术⒈IEF/SDS-PAGE双向电泳法 1975年O′Farrall等人根据不同组份之间的等电点差异和分子量差异建立了IEF/SD S-PAGE双向电泳。其中IEF电泳（管柱状）为第一向，SDS-PAGE为第二向（平板）。在进行第一向IEF电泳时，电泳体系中应加入高浓度尿素、适量非离子型去污剂NP-40。蛋白质样品中除含有这两种物质外还应有二硫苏糖醇以促使蛋白质变性和肽链舒展。IEF电泳结束后，将圆柱形凝胶在SDS-PAGE所应用的样品处理液（内含SDS、β-巯基乙醇）中振荡平衡，然后包埋在SDS-PAGE的凝胶板上端，即可进行第二向电泳。IEF/ SDS-PAGE双向电泳对蛋白质（包括核糖体蛋白、组蛋白等）的分离是极为精细的，因此特别适合于分离细菌或细胞中复杂的蛋白质组分。⒉毛细管电泳 Neuhoff等人于1973年建立了毛细管均一浓度和梯度浓度凝胶用来分析微量蛋白质的方法，即微柱胶电泳，均一浓度的凝胶是将毛细管浸入凝胶混合液中，使凝胶充满总体积的2/3左右，然后将其揿入约厚2mm的代用粘土垫上，封闭管底，用一支直径比盛凝胶的毛细管更细的硬质玻璃毛细管吸水铺在凝胶上。聚合后，除去水层并用毛细管加蛋白质溶液（0.1-1.0μl，浓度为1-3mg/ml）于凝胶上，毛细管的空隙用电极缓冲液注满，切除插入粘土部分，即可电泳。目前毛细管电泳分析仪的诞生，特别是美国生物系统公司的高效电泳色谱仪为DNA片段、蛋白质及多肽等生物大分子的分离、回收提供了快速、有效的途径。高效电泳色谱法是将凝胶电泳解析度和快速液相色谱技术溶为一体，在从凝胶中洗脱样品时，连续的洗脱液流载着分离好的成分，通过一个连机检测器，将结果显示并打印记录。高效电泳色谱法既具有凝胶电泳固有的高分辨率，生物相容性的优点，又可方便地连续洗脱样品。各电泳法，除另有规定外，照下述方法操作。一、纸电泳法 1.仪器装置 包括电泳室及直流电源两部分。 常用的水平式电泳室装置如图，包括两个电泳槽A和一个可以密封的玻璃(或相应材料)盖B；两侧的电泳槽均用有机玻璃（或相应材料）板C分成两部分；外格装有铂电极(直径0.5～0.8cm)D；里格为可放滤纸E的有机玻璃电泳槽架F，此架可从槽中取出；两侧电泳槽A内的铂电极D经隔离导线穿过槽壁与外接电泳仪电源相连。 电源为具有稳压器的直流电源，常压电泳一般在100～500V，高压电泳一般在500～10 000V。2. 操作法 (1) 电泳缓冲液 枸橼酸盐缓冲液(pH3.0) 取枸橼酸 (C6H8O7·H2O)39.04g与枸橼酸钠(C6H5Na3O7·2H2O)4.12g，加水4000ml，使溶解。 (2) 滤纸 取色谱滤纸置1mol/L甲酸溶液中浸泡过夜，次日取出，用水漂洗至洗液的pH值不低于4,置60℃烘箱烘干，备用。可按需要裁成长27cm、宽18cm的滤纸，或根据电泳室的大小裁剪，并在距长度方向一端5～8cm处划一起始线，每隔2.5～3cm处做一记号备点样用。 (3) 点样 有湿点法和干点法。湿点法是将裁好的滤纸全部浸入枸橼酸盐缓冲液(pH3.0)中，湿润后，取出，用滤纸吸干多余的缓冲液，置电泳槽架上，使起始线靠近阴极端，将滤纸两端浸入缓冲液中，然后用微量注射器精密点加供试品溶液，每点10μl,共3点，并留2个空白位置。 干点法是将供试品溶液点于滤纸上，吹干、再点，反复数次，直至点完规定量的供试品溶液，然后用喷雾器将滤纸喷湿，点样处最后喷湿，本法适用于稀的供试品溶液。 (4) 电泳 于电泳槽中加入适量电泳缓冲液,浸没铂电极，接通电泳仪稳压电源挡,调整电压梯度为18～20V/cm，电泳约1小时45分钟，取出,立即吹干,置紫外光灯(254nm)下检视，用铅笔划出紫色斑点的位置。 (5) 含量测定 剪下供试品斑点和与斑点位置面积相近的空白滤纸，剪成细条，分别置试管中，各精密加入0.01mol/L盐酸溶液5ml，摇匀，放置1小时，用3号垂熔玻璃漏斗滤过，也可用自然沉降或离心法倾取上清液，按各药品项下的规定测定吸收度，并按吸收系数计算含量。二、醋酸纤维素薄膜电泳法 1.仪器装置 电泳室及直流电源同纸电泳。2.试剂 (1) 巴比妥缓冲液(pH8.6)取巴比妥2.76g，巴比妥钠15.45g，加水溶解使成1000ml。 (2) 氨基黑染色液 取0.5g的氨基黑10B,溶于甲醇50ml、冰醋酸10ml及水40ml的混合液中。 (3) 漂洗液 取乙醇45ml、冰醋酸5ml及水50ml，混匀。 (4) 透明液 取冰醋酸25ml，加无水乙醇75ml，混匀。 3.操作法 (1) 醋酸纤维素薄膜 取醋酸纤维素薄膜，裁成2cm×8cm的膜条，将无光泽面向下，浸入巴比妥缓冲液(pH8.6)中,待完全浸透，取出夹于滤纸中，轻轻吸去多余的缓冲液后,将膜条无光泽面向上,置电泳槽架上,经滤纸桥浸入巴比妥缓冲液(pH8.6)中。 (2) 点样与电泳 于膜条上距负极端2cm处，条状滴加蛋白含量约5％的供试品溶液2～3μl,在10～12V/cm电位梯度下电泳。电泳区带距离以4～5cm为宜。 (3) 染色 电泳完毕，将膜条取下浸于氨基黑染色液中，2～3分钟后，用漂洗液浸洗数次，直至脱去底色为止。 (4) 透明 将洗净并完全干后的膜条浸于透明液中10～15分钟，取出平铺于洁净的玻板上，干后即成透明薄膜，可于分光光度计上测定和作标本长期保存。 (5) 含量测定 未经透明处理的醋酸纤维素薄膜电泳图可按各药品项下规定的方法测定，一般采用洗脱法或扫描法，测定各蛋白质组分的相对百分含量。 洗脱法 将洗净的膜条用滤纸吸干，剪下供试品溶液各电泳图谱的电泳区带，分别浸于1.6％的氢氧化钠溶液中，振摇数次，至洗脱完全， 于一定波长下测定吸收度。同时剪取与供试品膜条相应的无蛋白部位，同法操作作对照。先计算吸收值总和，再计算各蛋白组分所占百分率。 扫描法 将干燥的醋酸纤维素薄膜用色谱扫描仪通过反射 （未透明薄膜） 或透射（已透明薄膜）方式在记录器上自动绘出各蛋白组分曲线图，横坐标为膜条的长度，纵坐标为吸收度，计算各蛋白组分的百分含量。亦可用微机处理积分计算。三、琼脂糖凝胶电泳法 1.仪器装置 电泳室及直流电源同纸电泳。2.试剂 (1) 醋酸－锂盐缓冲液(pH3.0) 取冰醋酸50ml，加水800ml混合后，用氢氧化锂调节pH至3.0，再加水至1000ml。 (2) 甲苯胺蓝溶液 取甲苯胺蓝0.1g，加水100ml使溶解。 3.操作法 (1)制胶 取琼脂糖约0.2g，加水10ml，置水浴中加热使溶胀完全,加温热的醋酸－锂盐缓冲液(pH3.0)10ml，混匀，趁热将胶液涂布于大小适宜(2.5cm×7.5cm或4cm×9cm)的玻璃板上，厚度约3mm，静置，待凝胶结成无气泡的均匀薄层，即得。 (2) 标准品溶液及供试品溶液的制备 照各药品项下规定配制。 (3) 点样与电泳 在电泳槽内加入醋酸－锂盐缓冲液(pH3.0),将凝胶板置于电泳槽架上，经滤纸桥浸入缓冲液。于凝胶板负极端分别点样1μl，立即接通电源，在电压梯度约30V/cm，电流强度1～2mA/cm的条件下，电泳约20分钟，关闭电源。 (4) 染色与脱色 取下凝胶板，用甲苯胺蓝溶液染色，用水洗去多余的染色液至背景无色为止。四、聚丙烯酰胺凝胶电泳法 1.仪器装置 通常由稳流电泳仪和圆盘或平板电泳槽组成。其电泳室有上、下两槽,每个槽中都有固定的铂电极，铂电极经隔离电线接于电泳仪稳流挡上。2.试剂 (1)溶液A 取三羟甲基氨基甲烷36.6g，四甲基乙二胺0.23ml,加0.1mol/L盐酸溶液48ml，再加水溶解并稀释至100ml,置棕色瓶内，在冰箱中保存。 (2)溶液B 取丙烯酰胺30.0g、次甲基双丙烯酰胺0.74g，加水溶解并稀释至100ml,滤过，置棕色瓶内，在冰箱中保存。 (3)电极缓冲液(pH8.3) 取三羟甲基氨基甲烷6g、甘氨酸28.8g,加水溶解并稀释至1000ml，置冰箱中保存，用前稀释10倍。 (4)溴酚蓝指示液 取溴酚蓝0.1g,加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.0ml与90％乙醇5ml,微热使溶解，加20％乙醇制成250ml。 (5)染色液 取0.25％(W/V)考马斯亮蓝G<[250]>溶液2.5ml，加12.5％(W/V)三氯醋酸溶液至10ml。 (6)稀染色液 取上述染色液2ml，加12.5％(W/V)三氯醋酸溶液至10ml。 (7)脱色液 7％醋酸溶液。3.操作法 (1)制胶 取溶液A2ml，溶液B5.4ml，加尿素2.9g使溶解，再加水4ml，混匀，抽气赶去溶液中气泡， 加0.56％过硫酸铵溶液2ml，混匀制成胶液，立即用装有长针头的注射器或细滴管将胶液沿管壁加至底端有橡皮塞的小玻璃管(10×0.5cm)中,使胶层高度达6～7cm, 然后徐徐滴加水少量，使覆盖胶面，管底气泡必须赶走，静置约30分钟，待出现明显界面时即聚合完毕，吸去水层。 (2)标准品溶液及供试品溶液的制备 照各药品项下的规定。 (3)电泳 将已制好的凝胶玻璃管装入圆盘电泳槽内，每管加供试品或标准品溶液50～100μl，为防止扩散可加甘油或40％蔗糖溶液1～2滴及0.04％溴酚蓝指示液1滴,也可直接在上槽缓冲液中加0.04％溴酚蓝指示液数滴，玻璃管的上部用电极缓冲液充满，上端接负极、下端接正极。调节起始电流使每管为1mA，数分钟后，加大电流使每管为2～3mA，当溴酚蓝指示液移至距玻璃管底部1cm处，关闭电源。 (4)染色和脱色 电泳完毕，用装有长针头并吸满水的注射器,自胶管底部沿胶管壁将水压入，胶条即从管内滑出，将胶条浸入稀染色液过夜或用染色液浸泡10～30分钟，以水漂洗干净，再用脱色液脱色至无蛋白区带凝胶的底色透明为止。 (5)结果判断 将胶条置灯下观察，根据供试品与标准品的色带位置和色泽深浅程度进行判断。 相对迁移率 供试品和标准品的电泳区带有时可用相对迁移率(R"<[m]>)进行比较。其计算式如下： 进胶端到供试品或标准品区带的距离 相对迁移率(R"<[m]>)＝——进胶端到溴酚蓝区带的距离 扫描 将清晰的胶条置双波长薄层扫描仪或凝胶电泳扫描仪中扫描并积分，由各组分的峰面积计算百分含量。五、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白分子量,是根据大多数蛋白都能与阳离子表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)按重量比结合成复合物,使蛋白分子所带的负电荷远远超过天然蛋白分子的负电荷，消除了不同蛋白分子的电荷效应,使蛋白分子相对迁移率(R"<[m]>)的大小完全取决于分子量的高低，因此可从已知分子量的标准蛋白的对数和相对迁移率所作的标准曲线中求出供试品的分子量。1.仪器装置 除另有规定外，同聚丙烯酰胺凝胶电泳。2.试剂 (1)丙烯酰胺液溶 称取丙烯酰胺22.2g与双丙烯酰胺0.6g， 溶于100ml水中，贮于褐色瓶中低温保存。 (2) 凝胶缓冲液 称取磷酸二氢钠(NaH2PO4·2H2O)8.82g 、磷酸氢二钠(Na2HPO4 ·12H2O)51.55g与十二烷基硫酸钠2.0g，加水至1000ml(若有沉淀析出,可加温至37℃溶解)。 (3)电泳缓冲液 将凝胶缓冲液稀释1倍。 (4)染色液 称取25mg考马斯亮蓝R<[250]>,溶于57％乙醇与9.2％醋酸混合液100ml中。 (5)脱色液 取无水乙醇75ml，加冰醋酸50ml，用水稀释至1000ml。3.操作法 除下列规定外，其他均同聚丙烯酰胺凝胶电泳。 (1)制胶 用丙烯酰胺溶液－凝胶缓冲液－水－1.6％过硫酸铵溶液-四甲基乙二胺(需冷却)(10.1∶15.0∶3.4∶1.5∶0.045) 配制而成。 (2)标准蛋白溶液及供试品溶液的制备 取标准蛋白，加水制成每1ml中含2～5mg的溶液，与水解液(取尿素21.6g和十二烷基硫酸钠0.04g，溶于40ml水中)1∶3混合，置冰箱中过夜。供试品照上述方法配制。 (3)电泳 调节电流使每管为8mA。4.相对迁移率和分子量计算 将电泳脱色后的区带用卡尺或用扫描定位法测量染料移动的距离、染色前胶条长度、蛋白移动距离和脱色后的胶条长度。按下式计算相对迁移率： 蛋白移动的距离 染色前的胶条长度 相对迁移率(R"<[m]>)＝———×——— 脱色后的胶条长度 染料移动的前沿距离 以R"<[m]>为横坐标,已知分子量标准蛋白的对数为纵坐标,在半对数坐标纸上绘图,由标准曲线中查出供试品分子量。

打电话给消费者协会。爱依服买包包当日买的不能退货，可以选择和商家进行协商处理，协商不成，可以报消费者协会调解处理，调解不成的，可以向相关人民法院提起诉讼处理。爱依服（IEF）公司旗下拥有IEF爱依服，IEF爱依服童装，古缇莉三大品牌，各品牌针对差异化的细分市场，来满足消费群体的多元需求。同时，公司设计师团队与国际知名设计公司紧密合作，每季游走在欧洲、韩国、日本各国，敏锐地捕捉每一季的流行元素，将这些潮流元素带入到新一季的产品当中，快速传递至各品牌终端。

建议您看自己的穿衣风格。卡拉佛COLOVE高级精品女装来自时尚之都米兰，以紧扣时尚精髓，突出个性，注重自我感受，在独特与摩登中见格调，服务于那些追求时尚，不循规蹈矩，喜欢挑战并热爱生活的都市女性。广东爱依服是一家年轻时尚，充满朝气与个性的服饰连锁机构。旗下品牌IEF以经营18-38岁“欧、日、韩”等潮流服饰为主营，并兼营各类时尚鞋帽，时装包，皮带，各类服装配饰等。

吊牌和小票在一般可以退换

不要玩这个，不地道。骗人！！

请问你是在哪里看到的

Sky，原名李晓峰，曾经是星际争霸选手并有着不俗的实力，在转战魔兽争霸后，曾代表中国队参加世界电子竞技大赛，在代表世界电子竞技最高水平的WCG上取得了令国人瞩目的辉煌成绩，第一次让五星红旗飘扬在全球电子竞技的最高峰。Sky2006年再次获得了WCG的世界冠军，成为卫冕WCG魔兽争霸项目的世界第一人，并且进入了WCG名人堂，与BOXER等电子竞技前辈享受同等高的荣誉。如果说魔兽争霸界需要一位王者的话，那他一定是Sky！如果说中国的电子竞技需要一面旗帜和一个飞跃式的里程碑的话，毫无疑问还是Sky！这个传奇式的男人创造了无数的神话。WCG2007决赛中惜败给4K^Creolophus，错失了WCG三连冠的机会。选手资料姓名：李晓峰ID：WE.Pepsi.Sky生日：1985年3月27日项目：魔兽争霸WarcraftIII擅长种族：人族现效力战队：WorldElitePepsiE-SportsClub中国百事世界精英电子竞技俱乐部曾效力战队：HomeLionHunterYoliny所获荣誉星际荣誉2003年GOC中国总决赛季军2005年PTL娱乐赛冠军2006年星际争霸2V2嘉年华冠军魔兽荣誉2004年WCG中国区总决赛亚军2004年第4届华纳游戏大赛冠军2004年ACON4中国总决赛亚军WEG2005第一赛季季军ESWC2005中国赛区冠军ACON5中国赛区冠军WCG2005中国区总决赛季军ESWC2005世界总决赛殿军ACON5世界总决赛冠军WCG2005世界总决赛冠军CEG2005大师杯冠军CKCG2005中国赛区亚军WEG2006Masters季军ESWC2006中国总决赛季军ESWC2006世界总决赛季军IEF2006总决赛冠军WCG2006中国总决赛冠军WCG2006世界总决赛冠军IEST2006中国总决赛冠军IEST2006世界总决赛亚军wc3l第11赛季团队赛冠军PGL第一赛季魔兽天王职业联赛冠军WCG中国赛区亚军国美杯中国区总决赛冠军第二届PPS中韩魔兽明星对抗赛个人赛亚军WCG2007世界总决赛亚军IEST2007中国区总决赛季军IEST2007世界总决赛季军wc3l第12赛季团队赛季军IEF2007大师赛殿军PGL2007第二赛季冠军NSL第二赛季冠军ROTK王者之路团队挑战赛冠军PGL第三赛季季军IEF2008中国赛区亚军2008ESWC大师赛冠军DreamCup第三赛季总决赛冠军2008ESWC世界总决赛亚军EM韩国站季军IEF2008世界总决赛亚军WGT2008世界总决赛亚军DreamCup第五赛季第3周亚军PGL第四赛季线下总决赛亚军WC3L第14赛季线下总决赛冠军IEM亚洲总决赛冠军G联赛2009线下总决赛季军G联赛2009线下总决赛道德风尚奖WCG外卡赛亚军PGL冠军赛冠军G联赛第7赛季线下总决赛冠军WCG2009中国赛区亚军IEM4成都全球挑战赛季军DCup第六赛季第七周冠军IEST2009中国总决赛季军IEST2009全球总决赛冠军DreamCup第六赛季总决赛冠军G联赛第8赛季线下总决赛亚军nsl第三赛季冠军2010中国联通杯全国电子竞技大赛总冠军NSL3中国区总决赛季军ECG2010魔兽争霸精英赛亚军NSL3线下总决赛冠军

1申请条件：Marie Curie冠名的资助主要关注其中的两个：Marie Curie International Incoming Fellowships (以下简称IIF)和Marie Curie Intra-European Fellowships for Career Development (以下简称IEF)。前一个针对身处欧盟以外的申请者，后一个针对身处欧盟的申请者，这两个fellowship申请的过程几乎相同，都需要至少四年的研究经历或者具有博士学位，也可以说就是一个博士后的资助。但是两者都不限国籍（不是欧盟的也可以），资助时间都是最多24个月，申请时需要找到一个欧盟范围内的host，你的工作将在那儿开展。研究的内容则不限，不论哲学、社会科学、自然科学都可以，只要你让欧盟相信值得资助你。IIF除了资助你在欧盟的工作外，还可以涵盖你从欧盟回国后最多一年的工资（当然，根据当地的生活水平有一个修正）。2详细步骤：一 准备proposalIIF和IEF的申请一年一次，一般从3月份开始到8月截至，年底知道结果，第二年开始办理正式合同，加上签证什么的，一般从申请到开始工作至少要一年，因此要提前做好准备。建议你先要找一个host，可以是欧盟内部的大学或研究所甚至公司的研究人员，也就是老板，你的研究计划将在那儿开展，至于idea可以是自己的，也可是老板的，或者你们共同的。但最好是自己的，这样更加锻炼自己。先和未来的老板联系，说你想到他/她那儿干活，想申请IIF或者IEF，你在欧盟外就选择IIF，已经在欧盟了就选择IEF。和老板商量敲定要做什么后，就可以开始准备proposal了。可从网上的申请向导获取更多细节信息。其中，你需要准备三部分材料，part A，part B和推荐信。前两者是必须的，推荐信则不是，且最多可以有三封。A部分由四个表格组成，主要是一些大概的信息，包括你和host的情况，比较容易，照着填就可以了。B部分是最重要的部分，包括六个部分：B1 SCIENTIFIC AND TECHNOLOGICAL QUALITY（你的idea的细节）B2 TRAINING（你能得到的锻炼）B3 RESEARCHER（你自己的情况）B4 IMPLEMENTATION（idea如何实现）B5 IMPACT（你的idea对科学和欧盟的贡献）B6 ETHICAL ISSUES（伦理道德上的问题）申请向导中对每个部分的内容有详细的介绍和规定，照着准备就行了。你能不能得到资助几乎就看B部分了！二上传proposal现在整个过程都可以在网上进行，首先你需要到申请一个帐号，进去后填上相关的信息，就可以在线填PART A了，然后上传你的PART B（只能是PDF格式）。但推荐信不能自己上传，你需要填上推荐人的电子邮件，你的推荐人会收到一封电子邮件，只要照着邮件的内容做，由推荐人自己上传推荐信。在截至日期之前，PART A和B的内容都可以修改。截至日期之后，就以最后一次修改的内容为准。三 等待结果截至日期之后你的proposal会送给专家进行评审，根据PART B的前五个部分分别打分，分数从0到5分。判据 权重（%） 及格分S&T Quality 25 3Training 15 3Researcher 25 4Implementation 15 没有Impact 20 没有可以看到前三者有及格分，如果任何一项低于此就会出局。最后算出总分，排出所有申请者的名次，根据预算的情况决定哪些可以受到资助，平均成功几率在25%-30%之间。祝你好运！

Lucifer，一位被人们称为“恶魔”的与 Fov、 Sweet. gostop齐名的鬼王；一位与 Moon携手创造 MYM辉煌的UDer。曾经的他夺得过ESWC 2006全球总冠军；帮助 MYM登上WC3L冠军宝座；帮助韩国走向SW冠军。虽然最近的糟糕战绩让他跌入低谷，但他仍然值得所有玩家的尊敬。让我们一同走入 Lucifer的世界，感受这位世界顶尖职业选手的职业生涯的快乐与艰辛。 Lucifer--堕落天使的名字，可是在MYM] Lucifer却象是一个神圣天使，凌驾于WAR3之上。　　同样来自韩国，同样也是世界的三大鬼王之一，lucifer却有着很不相同的气质：成熟的外表下，掩藏不住的是来自内心最深处的爆发。一次次的死亡三连击，让每一位与其交战的选手都胆战心惊。　　WCG的失利没有让Lucifer感到丝毫动摇，练习，还是练习，为了心中的那个理想，他在努力着，终于在获得了ESWC冠军以后，他的时代已经来临了。此后Lucifer便一发不可收拾，连夺PPS中韩对抗冠军以及IEST全球总决赛的亚军，成为了最近一年表现最出色的UD选手之一。Lucifer个人资料：名字：Jae Wook NOH（鲁宰旭）年龄：20出生日期：1986年8月19日城市：首尔国籍： 韩国 主要大赛成绩:[2002] ITV War3 League 8强 [2003] ITV War3 Ranking match 16强 [2003.7] HP ongamenet War3 League 8强 [2003.8] Sonogong FrozenThrone League 16强 [2003.9] Suma War3 ProteamLeague 季军 [2004.2] Ongamenet FrozenThrone League 8强 [2004.7] WEG第一赛季 8强 [2004.8] WCG 韩国预选赛第4 [2004.8] CNGL 冠军 [2005.1] PL5 30强 [2005.2] XP Special League 季军 [2005.6] ingame.Warcraft-Cup#9 SpringSeason 冠军 [2005.6] ingame.Warcraft-Cup#10 SpringSeason 冠军 [2005.7] ingame.Warcraft-Cup #2 Summer 2005 冠军 [2005.7] ingame.Warcraft-Cup #1 Summer 2005 冠军 [2005.7] MWL 1 (8th Place) [2005.8] ingame.Warcraft-Cup #6 Summer 2005 冠军 [2005.8] CKCG 2005 8强 [2005.12] ingame.Warcraft-Cup #9 FallSeason2005 冠军 [2005.12] WEG 第三赛季总决赛 季军 [2005.12] inCup Fall 第六赛季 冠军 [2006.1] StarsWars 2 韩国团体冠军 [2006.2] inCup Winter 第四赛季 冠军 [2006.3] Trans-Athlantic Showdown 2ON2 冠军（与MYM]Moon搭档） [2006.4] ingame.Warcraft-Cup 线下总决赛 冠军 [2006.4] ingame.Warcraft-Cup 第十赛季 冠军 [2006.5] V-Sports All-Stars 锦标赛 第4 [2006.6] MIL 亚军 [2006.6] WC3L 第九赛季 MYM团体冠军 [2006.7] ESWC 2006世界总决赛 冠军 [2006.7] ingame.Warcraft-Cup 第十赛季 冠军 [2006.7] InCup 2on2 #11 冠军（与MYM]Moon搭档） [2006.8] WCG 韩国预选赛 季军 [2006.8] NGL-ONE 线下总决赛 MYM团体冠军 [2006.9] IEF 2006 8强 [2006.12] 中韩对抗赛 冠军 [2006.12] IEST 2006 季军 [2007.1] All Stars Series 亚军 [2007.1] Battle.net Global Ladder Season IV Finals 亚军 [2007.1] WC3L 第十赛季 MYM团体亚军 [2007.3] Kespa杯 亚军 [2007.4] NGL-ONE 线下总决赛2006/2007 MYM团体亚军 [2007.4] NSL 季军 Lucifer个人喜好：喜欢吃的食物：任何食物除了kimchi（一种韩国泡菜）喜欢看的电影：蝙蝠侠喜欢的歌曲：hm, EVE"S SONG（韩国歌曲）喜欢的书：任何书！ 喜欢的人：喜欢所有MYM的队友们喜爱的运动：足球喜爱的游戏：War3欣赏的选手：MYM的所有队友们和Lyn各个种族所喜爱的单位：NE：小精灵ORC：咕噜兵HUM：大法师UD：死亡骑士喜欢玩的地图：所有喜爱的车：法拉利喜爱的国家：韩国最喜欢的英雄：死亡骑士最喜欢杀死的英雄：剑圣最喜欢的种族：UD婚姻状况：未婚第一次玩的RTS类游戏：忘记了，总之不是SC 喜欢的单位：憎恶不喜欢的事：没有什么不喜欢的最喜欢的片段和女演员：Giselle Bündchen / Nicole Kidman最喜欢的演员：Brad Pitt

中国星际第一人 个人简介 姓名： 罗贤 中国星际争霸选手 星际ID： LX 生日： 1984年9月7日 星龄： 4年（其间间断无数次） 擅长种族：Protoss 偶像： Nal_Ra , Reach , Kingdom 个人荣誉: 04 CEG武汉赛区亚军 04 CEG联赛团体季军 05 湖北电子竞技大赛 亚军 05 CKCG武汉赛区 冠军 05“世纪杯”电子竞技大赛 冠军 05 CKCG中韩对抗赛 8强 05 CGEL绿色动力杯湖北赛区 冠军 05 VS金币电子竞技大赛全国 亚军 06 WCG沈阳赛区 亚军 06 WCG中国赛区总决赛 冠军 06 WCG世界总决赛 殿军 06 PLU星际第一人争霸战 冠军 06 CEG西安站 冠军 06 GOC联赛全国总决赛 冠军 07 NeoStarLeague 冠军 07 G联赛第一季线上 冠军 07 PGL职业选手联赛第一季 殿军 07 IEF2007大连赛区 冠军 07 IEF2007中国总决赛 冠军 07 IEF2007世界总决赛 殿军 07 WCG外卡赛 亚军 07 WCG中国区决赛 殿军 07 PLU SSL3 冠军 07 G联赛第二季线上 冠军 07 G联赛第二季线下 冠军 07 G联赛第三季线上 亚军 07 G联赛第三季线下 亚军 07 CEG全国电子竞技锦标赛 冠军 07 PGL职业选手联赛第二赛季 冠军 07 WGT沈阳赛区 冠军 07 WGT全国总决赛 冠军 07 CEG武汉站 季军 07 CEG长春站 亚军 07 CEG绍兴站 冠军 08 WCG外卡赛 亚军 08 WCG中国区中决赛 亚军 08 世界传统体育运动会 季军 08 CEG北京站 亚军 08 WGT全国总决赛 亚军 08 CEG全国电子竞标赛 亚军 08 pgl职业选手第三赛季 季军 08 G联赛第二赛季 亚军 08 PLU SSL5 亚军 LX在CKCG2005中一战成名，WCG2006横扫super 66等众高手成为了中国区冠军，更是在WCG2006世界总决赛中取的了第四的好成绩。在接下来的时间里，也希望他能更加强大，也希望各位支持他。 关于罗贤： 罗贤的BLOG： http://blog.sina.com.cn/u/1231425652 百度贴吧： http://post.baidu.com/f?kw=%C2%DE%CF%CD麻烦采纳，谢谢!

1.就是被alone光环咒死的，只要alone没了，super就能成为第一位中国得到WCG冠军的人。2.永远打不过tossgirl的男人2004 CEG湖南赛区亚军2004 国家队选拔赛亚军2004 中韩对抗赛击败韩国天王BOXER2004 CEG全国电子竞技联赛冠军2005 CKCG广州赛区冠军2005 PLU3中国星际个人联赛冠军2005 PLU4中国星际个人联赛冠军2005 PLU5中国星际个人联赛冠军2006 WCG北京赛区亚军2006 IEF北京赛区亚军2006 CEG全国电子竞技运动会北京站冠军2006 CEG全国电子竞技运动会广州站亚军2006 联想IEST湖南赛区冠军2006 联想IEST全国总决赛亚军2006 联想IEST全球总决赛亚军2006 星际第一人站 亚军2007 IEF北京赛区冠军2007 WCG成都赛区亚军2007 CEG西安站冠军2007 CEG绍兴站季军2008 WCG外卡赛冠军2008 WGT武汉赛区冠军2008 【星际十年SSL4ever】之 第四届“超级对战”中国星际超级联赛 super&rushgoon 季军2008 G联赛08第一赛季 季军2008 电竞国家队选拔赛星际比赛 亚军2009 WCG武汉赛区 冠军2009 IEF武汉赛区 冠军2009 PCGA衡阳站 冠军2009 PCGA全国总决赛 亚军2009 G联赛08第三赛季 亚军2009 G联赛第七赛季 季军2009 星际第一人站 八强2010 WCG外卡赛 亚军

　　EHOME (LD)中国 Dota EHOME战队　　2007年10月份，EHOME俱乐部将国内顶尖DotA队伍HtmL战队收至麾下，成立EHOME.DotA分队。这支队伍获得了2007年国内90%的赛事冠军。其成员为：万宁"mN"、黄翔"longdd"、张文立"GK"、王晓宁"amei"、房甍"SatXIII_"、易熙文"IsuN"。在取得IEF2007网吧赛总决赛冠军后，SatXIII_离队，原IfNt核心队员胡天澍"Soulk"、原GL核心邹倚天"820"加盟。新阵容先后获得了IEF国际大师赛亚军、CDL季后赛总决赛冠军等成绩。为了追求更好的赛训成绩，俱乐部安排队员统一线下集训，因此队伍人员调整。mN、amei、IsuN暂停活动，Soulk加盟线上队伍[GOW]，而原GL战队主力成员董灿"dclxjdc"、张知严 "Shasha"和原oNce战队核心伍声"2009_"加盟。新阵容在PGL2008第三赛季总决赛中从败者组中杀出以2:0翻盘获得冠军。5月份，原GL战队核心康钊"Snoy"加盟EHOME担任教练，无疑使这支队伍更让人期待。目前队伍已在2008年北京训练基地（北京中关村E空间游戏体验中心）展开集训，备战各大赛事，向世界冠军发起冲击。　　主要成绩：　　WGT2007中国总决赛　　CNBN杯DotA联赛　　AACC全国电子竞技大赛　　第一届CETC电子竞技大赛　　英特尔IEF2007全国网吧赛总决赛　　ADC中国区　　英特尔IEF2007国际大师赛　　PGL2008 第三赛季DotA全明星邀请赛　　WCG2008北京赛区　　现役阵容：　　董灿"dclxjdc"（队长）　　黄翔"longdd"　　张文立"GK"　　张知严 "Shasha"　　伍声"2009_"　　康钊"Snoy"（教练）　　曾效力队员：　　万宁"mN"　　王晓宁"amei"　　房甍"SatXIII_"　　易熙文"IsuN"　　胡天澍"Soulk"　　邹倚天"820"　　张堃"xt_xxx"　　陈瀚"bubble"Ronaldo　　In the end　　Xwkkx　　Ehome在08过后 G联赛输给7L以后 Sony GK DC离队 队伍重组 招来了Xwkkx In the end Ronaldo（上海马超） 不过成绩并不理想 ACG失败 WCG北京赛区输给大学队伍SMTH未能出线 所以除了357 820以外的3位队员只能遭遇踢队 目前DC归队当教练 GK也回来了 前7L著名队员DGC强势加盟 目前所有人正期待第5人的出现 希望EHOME能有好的发展　　现役阵容　　EHOME.GK　　EHOME.820　　EHOME.357　　EHOME.DGC　　EHOME.Xwkkx

technology environment development

姓名： 罗贤 星际ID： =PNZ=Legend)L.x 生日： 1984年9月7日 星龄： 4年（其间间断无数次） 擅长种族：Protoss 偶像： Nal_Ra , Reach , Kingdom 个人荣誉:04 CEG武汉赛区亚军04 CEG联赛团体季军05 湖北电子竞技大赛 亚军05 CKCG武汉赛区 冠军05“世纪杯”电子竞技大赛 冠军05 CKCG中韩对抗赛 8强05 CGEL绿色动力杯湖北赛区 冠军05 VS金币电子竞技大赛全国 亚军06 WCG沈阳赛区 亚军06 WCG中国赛区总决赛 冠军06 WCG世界总决赛 殿军06 PLU星际第一人争霸战 冠军06 CEG西安站 冠军06 GOC联赛全国总决赛 冠军07 NeoStarLeague 冠军07 G联赛第一季线上 冠军07 PGL职业选手联赛第一季 殿军07 IEF2007大连赛区 冠军07 IEF2007中国总决赛 冠军07 IEF2007世界总决赛 殿军07 WCG中国区决赛 殿军07 SSL 对抗赛 冠军07 G联赛第二季线上 冠军07 G联赛第二季线下 冠军07 CEG全国电子竞技锦标赛 冠军07 PGL职业选手联赛第二赛季 冠军07 WGT沈阳赛区 冠军07 WGT全国总决赛 冠军07 CEG武汉站 季军07 CEG长春站 亚军07 CEG绍兴站 冠军

VxWorks 是美国 Wind River System 公司（ 以下简称风河公司 ，即 WRS 公司）推出的一个实时作业系统。Tornado 是WRS 公司推出的一套实时作业系统开发环境，类似MicrosoftVisual C，但是提供了更丰富的调试、仿真环境和工具。 基本介绍 中文名 ：威克沃 外文名 ：VxWorks 公司 ：Wind River System（风河公司 ） 产品类型 ：实时作业系统 开发时间 ：1983年 产地 ：美国 开发环境 ：Tornado/Wind River Workbench 简介,组成,核心,I/O 系统,档案系统,网路支持,工具,新架构,产品, 简介 VxWorks 作业系统是美国WindRiver公司于1983年设计开发的一种嵌入式实时作业系统（RTOS），是嵌入式开发环境的关键组成部分。良好的持续发展能力、高性能的核心以及友好的用户开发环境，在嵌入式实时作业系统领域占据一席之地。它以其良好的可靠性和卓越的实时性被广泛地套用在通信、军事、航空、航天等高精尖技术及实时性要求极高的领域中，如卫星通讯、军事演习、弹道制导、飞机导航等。在美国的 F-16、FA-18战斗机、B-2 隐形轰炸机和爱国者飞弹上，甚至连1997年4月在火星表面登入的火星探测器、2008年5月登入的凤凰号，和2012年8月登入的好奇号也都使用到了VxWorks上。 组成 VxWorks作业系统有以下部件组成： 核心 多任务调度（采用基于优先权抢占方式，同时支持同优先权任务间的分时间片调度） 任务间的同步 进程间通信机制 中断处理 定时器和记忆体管理机制 I/O 系统 VxWorks 提供了一个快速灵活的与 ANSI C 兼容的 I/O 系统，包括 UNIX 标准的Basic I/O（creat(),remove(),open(),close(),read(),write(),and ioctl().），Buffer I/O (fopen(),fclose(),fread(),fwrite(),getc(),putc()) 以及POSIX 标准的异步 I/O。VxWorks 包括以下驱动程式：网路驱动、管道驱动、RAM盘驱动、SCSI驱动、键盘驱动、显示驱动、磁碟驱动、并口驱动等 。 档案系统 支持四种档案系统：dosFs，rt11Fs，rawFs 和 tapeFs 支持在一个单独的 VxWorks 系统上同时并存几个不同的档案系统。 板级支持包 BSP（Board Support Package） 板级支持包向VxWorks作业系统提供了对各种板子的硬体功能操作的统一的软体接口，它是保证VxWorks作业系统可移植性的关键，它包括硬体初始化、中断的产生和处理、硬体时钟和计时器管理、局域和汇流排记忆体地址映射、记忆体分配等等。每个板级支持包包括一个 ROM 启动（Boot ROM）或其它启动机制。 网路支持 它提供了对其它VxWorks系统和TCP/IP网路系统的"透明"访问，包括与BSD套接字兼容的编程接口，远程过程调用（RPC），SNMP（可选项），远程档案访问（包括客户端和服务端的NFS机制以及使用RSH，FTP 或 TFTP的非NFS机制）以及BOOTP 和代理ARP、DHCP、DNS、OSPF、RIP。无论是松耦合的串列线路、标准的乙太网连线还是紧耦合的利用共享记忆体的背板汇流排，所有的 VxWorks 网路机制都遵循标准的 Inter 协定。 工具 在 Tornado 开发系统中，开发工具是驻留在主机上的。但是也可以根据需要将基于目标机的Shell 和装载卸载模组加入 VxWorks。 嵌入式Vxworks系统的主要套用领域主要有以下几方面： 1．数据网路：如：乙太网交换机、路由器、远程接入伺服器等 2．远程通讯：如：电信用的专用分组交换机和自动呼叫分配器，蜂窝电话系统等 3．医疗设备：如：放射理疗设备 4．消费电子：如：个人数字助理等 5．交通运输：如：导航系统、高速火车控制系统等 6．工业：如：机器人 7．航空航天：如：卫星跟踪系统 8．多媒体：如：电视会议设备 9．计算机外围设备：如：X终端、I/O 系统等 总之，VxWorks的系统结构是一个相当小的微核心的层次结构。核心仅提供多任务环境、进程间通信和同步功能。这些功能模组足够支持VxWorks在较高层次所提供的丰富的性能的要求。 VxWorks6.0版本新增功能： 风河通用平台VxWorks版（GPP）是所有设备软体应用程式的首要基础平台。此通用平台基于全球套用最广泛的运行时作业系统--VxWorks而构建。最新版本（VxWorks 6.1）中的各运行时组件可向后兼容VxWorks的早期版本。此最新版本包含了增强的记忆体保护、容错管理，并支持最新的网路和安全协定以及设备与企业间的连通性。 通用平台组合了最为严格和确定性的实时作业系统，其产品完全集成了现有的产品开发解决方案，从而能够满足贵企业的各种苛刻需求。它无缝集成了业界标准的RTOS（VxWorks 6.1）、功能强大的开发套件（Workbench 2.3）、网路和安全协定、用于工程人员快速启动项目的培训以及迅速扩展您开发团队综合技能的各种专业服务。 新增功能： 通用平台VxWorks 3.1版扩展了的3.0功能：它扩展了架构支持、多处理器讯息处理（基于业界标准的开源式TIPC协定）、增强了网路堆叠以及支持风河Workbench的最新版本。 新架构 - ARM 9,ARM 11 - Intel Pentium M - Intel XScale - MIPS - PowerPC - Renesas SuperH-4,SuperH-4a * 支持通用平台VxWorks 3.0版中的所有架构和BSP * 多处理器讯息通道（基于TIPC协定） * 网路堆叠包括PPP、PPPoE以及多链路PPP * 风河Workbench 2.3 产品 WindNet SNMP WindNet STREAMS WindNet 第三方产品，包括 OSI、SS7、ATM、Frame Relay、CORBA、ISDN、X.25、 CMIP/GDMO、分散式网路管理等。 这些产品扩展了VxWorks的网路特性，并增强了嵌入式处理器的网路特性 虚拟记忆体（ VxVMI）与共享记忆体（VxMP） VxVMI 为带有 MMU 的目标板提供了虚拟记忆体机制。 VxMP 提供了共享信号量，讯息伫列和在不同处理器之间的共享记忆体区域。 目标代理（Target Agent） 目标代理遵循 WBD（Wind Debug）协定，允许目标机与主机上的 Tornado 开发工具相连。在目标代理的预设设定中，目标代理是以 VxWorks 的一个任务tWdbTask 的形式运行的。 Tornado 目标伺服器（Target Server）向目标代理发送调试请求。调试请求通常决定目标代理对系统中其它任务的控制和处理。预设状态下，目标伺服器与目标代理通过网路进行通信，但是用户也可以改变通信方式。 实用库 VxWorks 提供了一个实用例程的扩展集，包括中断处理、看门狗定时器、讯息登录、 记忆体分配、字元扫描、线缓冲和环缓冲管理、炼表管理和 ANSI C 标准。 是一个实时作业系统。

学校生活中的性别歧视都体现在哪些方面性别歧视指一种性别成员对另一种性别成员的不平等对待。尤其是男性对女性的不平等对待。两性之间的不平等，造成社会的性别歧视。但也可用来指称任何因为性别所造成的差别待遇。性别歧视一般是指以下几种信念或态度：1、相信某一种性别比其它种性别更优越的信念。2、相信一个人必定属于男性或女性的信念。3、指称憎恨男性（男性贬抑）或憎恨女性（女性贬抑）的态度概述性别歧视：可粗略的视为本质主义的产物。本质主义者坚持可以根据个体所属群体之特征理解或判断该个体，而性别歧视者则是认为可依照个体所属的性别群体（男性或女性）来理解或判断该个体。这样的观点假定了所有的人都可以清楚地被划分成「男性」或「女性」，而忽略了某些同时拥有两性特质的跨性别者的存在。此外，这种观点也因群体中的同构型，而忽略了群体中的个别差异。在很多国家中，某些特定的性别歧视是违法的，不过几乎所有国家都有立法保障某几种《http://www.888835.cn/html/840921.html》

中文:对不起,我爱你英文:Sorry,I love you德语:Traurig, ich liebe dich法语:Désolé, je t"aime日语:残念、私は爱する韩语:3971210731, 17966739葡萄牙语:Pesaroso, eu te amo意大利语:Spiacente, ti amo西班牙语:Apesadumbrado, te amo阿拉伯文:191115 19151017

我的理解就是给软件挂个号，让电脑知道它是干什么用的，然后电脑会在系统里留个位置给它，就可以用了。

你可以听下室外机启动时候的声音，猛一下压缩机就启动的，就是定频。缓慢启动的就是变频

操作系统

01.《匆匆那年》中这样唱到：“如果再见不能红着眼，是否还能红着脸”分手之后的那种痛苦与不甘，被这首歌写的淋漓尽致。面对爱情，很多人都有着说不出的感觉，因为它让我们感受到了幸福与满足，但同样带给了我们许多深刻的痛苦。只是面对一份不适合的爱情，分手也许是最终的结果。可能放下一个自己曾经过喜欢的人不是一件容易的事，但是两个人之间也没有了另外的选择，而对于那个曾经一起经历了爱情的美好的那个人，也许每个人都会有着属于自己的回忆。02.有的人可能并不愿意提起自己之前的感情经历，因为那种刻骨铭心并不是每个人都能够带给自己的。但是世界只有这么大，分手之后再相见也并不是不可能的，只是再一次遇见时的那种感受可能并不是每个人都能够看清的。也许已经放下了对他的感情，但是心里还是会再次想起原来的回忆有时候我们真正放不下的并不是一个人，而是和那个人在一起时候的所有经历，因为很多事情都是属于自《tele.ph8kk.cn/article/612378.html》《tele.ow1h7f.cn/article/029517.html》《hallo.lxkj.net.cn/article/541903.html》《hallo.105syw.cn/article/312576.html》《tele.ddhhsj.cn/article/938206.html》《tele.hywlsc.cn/article/748365.html》《hallo.lasermir.cn/article/270958.html》《hallo.kfh.org.cn/article/280576.html》《tele.2tmp.cn/article/036527.html》《tele.hkfdsb.cn/article/176530.html》

Kobra反射式瞄准镜Kobra系列战斗瞄准镜是俄罗斯生产的一系列反射式瞄准镜，已经被俄罗斯一些特种部队所采用，并在车臣战场上使用过。这种瞄准镜通过侧镜架可以安装在各国生产的AK步枪或以AK步枪为基础的其他枪支上，例如Saiga霰弹枪、Vepr系列猎枪等。Kobra反射式瞄准镜重量轻、坚固可靠，虽然外形没有西方国家的牌子那么好看，不过是物超所值。EKP-1S-03M是Kobra瞄准镜的第一代，也是目前最流行的型号。这种型号已经被特种部队安装在AK-74M上，在车臣的行动中使用多年。EKP-1S-03M使用标准的AA电池，透镜前方可以附加橡胶制的遮阳筒。通过尾部上方的旋钮可以选择选择4种分划式样（压下旋钮时）和16级亮度。EKP-8-02是Kobra瞄准镜的第二代，使用廉宜的标准3伏锂电池，在极低温下也能持续正常地工作。这个型号通过一个旋钮可以选择4种分划式样，和16级的亮度变化。EKP-8-14是专门为适合于西方枪械如AR-15、FAL等而生产的，实际上就是改变了安装方式的EXP-8型，可以与西方国家的瞄准镜导轨相配合，包括美国的M1913标准。

绘客HK708手绘板安装驱动后依然没有笔压，为什么驱动安装不成功？解决步骤如下：打开驱动光盘，有个文件夹windriver（我的电脑是win7），打开这个文件夹，看到WIN7-32(如果你的是64位就选择64)打开这个文件夹，有个图标是手绘板形状的应用程序，右键双击，一会儿右下角就出现板板图标了。绘客是北京漫友科技发展有限公司旗下的“数位板销售服务平台”网站，网站上线于2011年5月，绘客主要经营销售国内各大品牌数位板和手写板等手写输入产品为主，全方位提供品牌数位板一站式购物体验以及绘图板相关服务支持。

1)运行installkm．bat，安装windriver kernel module。安装完毕后打开设备浏览器，出现jungo→windriver即安装成功。 2)请核实机器背面的激光打印的序列号： 机器序列号印为15位(最后一位为字母“p”)，将不能开机的文曲星v5100通过usb与pc连接，同时按下“桌面”和"f2”键，并按“reset”，按照系统提示信息，先后按“y”、“n”键； 3)第2步正礁操作后，windors；将弹出发现新硬件对话框，按照安装新硬件向导安装设备驱动程序，设备描述文件为boottool．inf。 如果安装成功，在设备浏览器中将出现device一项运行： 1)确认安装驱动成功后，运行“系统初始还原工具．exe”； 2)通过usb线连接文曲星与pc； 3)请核实机器背面的激光打印的序列号： 机器序列号印为15位(最后一位为字母“p”)，将不能开机的文曲星v5100通过usb与pc连接，同时按下“桌面”和“f2”键，并按reset”，按照系统提示信息，先后按“y”、“n”键； 4)左键单击“还原系统”按钮。在弹出的对话框单击“是”开始系统还原进程。 一般会经历读取数据文件→擦除闪存→写入闪存→结束。 大约需要十几分钟，根据您的pc性能而定。 1)运行程序之后，请注意先reset文曲星，然后3秒钟之后再点击“还原系统”按钮。 2)如果v5100与pc连接不成功，请先将“系统初始还原工具”程序退出，然后按运行步骤重试。 3)不要在安装设备驱动程序期间随意reset文曲星。 4)不要在擦除闪存和写入闪存的时候reset文曲星。以免对您的文曲星或者windows造成异常损害。 5)本工具暂不能在win98系统运行。 用户电脑的c盘应该保留至少100m空间。

底座安装方法：1.将4颗螺钉从扇体上取出。2.四个柱扣位对齐并套住后，先将上扣位用力向内推卡住（发出响声），再用同样的方法卡住下扣位。3.将底盘放入扇体后将电源线固定在底盘线扣位，用螺钉固定底盘和扇体后，注意将电源线拉直。

第1—24届 略第25届（1992年）第4名第26届（1996年）季军第27届（2000年）季军第28届（2004年）第4名第29届（2008年）冠军第30届（2012年）冠军 第1—5届 略第6届 （1991年）第8名第7届 （1995年）亚军第9届 （1999年）季军第10届（2003年）亚军第11届（2007年）亚军第12届 (2011年) 第5名 第1—10届 略第11届（1990年）第7名第12届（1994年）亚军第13届（1998年）第4名第14届（2002年）第7名第15届（2006年）亚军第16届（2010年） 亚军第17届（2014年）季军 第1届（1993年）第4名第2届（1994年）冠军第3届（1995年）亚军第4届（1996年）冠军第5届（1997年）未晋级总决赛第6届（1998年）冠军第7届（1999年）亚军第8届（2000年）季军第9届（2001年）第5名第10届（2002年）第4名第11届（2003年）第7名第12届（2004年）冠军第13届（2005年）冠军第14届（2006年）冠军第15届（2007年）第5名第16届（2008年）冠军第17届（2009年）冠军第18届 （2010年） 亚军第19届（2011年） 亚军第20届 （2012年）亚军第21届 （2013年）冠军第22届 （2014年）冠军第23届（2015年）季军 第1—15届 略第16届（2000年）第4名第17届（2001年）季军第18届（2002年）亚军第19届（2003年）季军第20届（2004年）未参赛第21届（2005年）冠军第22届（2006年）冠军第23届（2007年）未参赛第24届（2008年）未参赛第25届 （2009年）冠军第26届（2010年） 未参赛第27届（2011年）未参赛第28届（2013年） 冠军第29届（2014年）第5名 2004年 冠军2005年 第四名2006年 亚军2007年 亚军2008年 冠军2009年 第5名2010年 第8名2011年 冠军2012年 亚军2013年 季军2014年 退赛 第1届 （1993年） 没有获得外卡第2届（1997年） 季军第3届 （2001年） 第4名第4届（2005年） 冠军第5届 （2009年） 亚军第6届 （2013年） 冠军 巴西女排的老将级别的人物。法比亚娜无论是在巴西国内，还是在世界排坛，她都有这非常高的知名度与人气，这也有一部分原因要归于她绝佳的身体素质。她的拦网也是经常名列技术排名前茅。【英文名】Fabiana Claudino【位置】 副攻【生日】1985.01.24　【身高】 193cm【体重】76kg【扣球高度】 314cm　【拦网高度】 293cm　个人成绩：2003年：世界杯女子排球赛亚军、世界女排大奖赛第七名；2004年：雅典奥运会第四名、世界女排大奖赛冠军；2005年：世界大冠军杯女子排球赛冠军、世界女排大奖赛冠军；2006年：世界女子排球锦标赛亚军、世界女排大奖赛冠军；2007年：世界杯女子排球赛亚军、世界女排大奖赛第五名；2008年：北京奥运会冠军、世界女排大奖赛冠军；2009年：世界大冠军杯女子排球赛亚军、世界女排大奖赛冠军；2010年：世界女排锦标赛亚军、世界女排大奖赛亚军。2011年：世界杯女子排球赛第5名、世界女排大奖赛亚军。2012年：世界女排大奖赛亚军。伦敦奥运会女排冠军。法比亚娜的身体素质好，一方面是她的身高有193cm，在女排队员中比较出众的，而且她的强攻非常有力，经常是依靠高点强攻而得分。而且，她也融入了很多的亚洲快球的打法，很多亚洲球队所使用的方法，她也可以熟练应用。这也是巴西女排成为世界王牌队伍的原因之一。 英文名： Danielle Lins性别：女国家：巴西出生日期：1985年1月5日身高：181厘米体重：68kg　项目：排球巴西女排国家队二传个人战绩　2009年世界女排大冠军杯亚军、世界女排大奖赛冠军 姓名：阿德尼兹娅生日： 1986年12月18日性别：女身高：183 厘米体重：62 公斤国家及地区：巴西巴西国家女子排球队球员 中文名： 塔伊萨 外文名： Thaisa Menezes 国籍： 巴西 出生地： 巴西 出生日期： 1987年5月15日 性别： 女 团队:巴西女排身高:196cm体重:79公斤运动项目:排球扣球高度:316cm拦网高度:301cm主要成绩2008年：北京奥运会金牌、世界女排大奖赛冠军。2009年：世界大冠军杯女子排球赛亚军、世界女排大奖赛冠军。2010年：世界女排锦标赛亚军、世界女排大奖赛亚军。2011年：世界杯女子排球赛第五名、世界女排大奖赛亚军。2012年：世界女排大奖赛亚军，伦敦奥运会女排冠军。 玛丽安妮-斯泰因布莱彻（Marianne Steinbrecher），女，1983年08月23日生于荷兰，排球运动员。获得过北京奥运会冠军；世界女排大奖赛冠军等世界级大赛奖项。冷艳版的美女，南美洲白人美女的典范。小嘴，翘眉，娇嫩的肌肤组成了诱人的俏丽面孔。基本上没有见玛丽安妮笑过，但是却会被玛丽安妮的美丽容貌所吸引。玛丽安妮在2004年世界女排大奖赛中一战成名，能够在与雷拉、比亚等名将的激烈竞争中脱颖而出成为巴西女排在奥运会上的主力接应显示了玛丽安妮不俗的实力。20多岁的她身高出众、拦网效果好、进攻点多、扣球力量大，年轻的她具备成为优秀接应的所有条件，如今她也确实是巴西女排最有威胁的扣球点。在激情飞扬的巴西女排中，玛丽安妮因为其安静的性格显得更加与众不同。现今的她实力勿庸置疑，相信不久的将来，她将是世界排坛最让人瞩目的选手。　巴西虽然是个很全面的队伍，可是主攻薄弱一直是他们的弱点。在吉马良斯把玛丽推上主攻位置后，虽然强攻实力得到提升，但玛丽不过关的一传还是不能解决巴西主攻位置的问题。然而，吉马良斯依旧不放弃玛丽，于是把她从巴西一起带向他执教的俱乐部，借此就近训练玛丽。玛丽安妮刚加盟PESARO就是绝对的正选，可以看出吉马良斯对玛丽的厚爱！主攻薄弱是巴西的软肋，而玛丽的强攻实力是巴西迫切需要的。2013年，巴西队虽然已经拥有了谢拉，法比亚娜与索萨，只不过玛丽不成长起来，巴西还是不具备夺取世界冠军的绝对实力。只有玛丽安妮的觉醒，解决了强攻的问题，巴西才有可能成为真正的王者！　奥运会最大的收获无疑是玛丽安妮与谢拉的恋情。2004年前的雅典奥运会，初出茅庐的玛丽安妮担纲接应曾经有过令人惊艳的表现，然而在半决赛对阵俄罗斯的关键战役中，21岁的马列安妮连续三次后攻踩线断送了巴西队的前程，也由此开始在国家队大门外徘徊。2008年玛丽安妮卷土重来，她在主教练吉马良斯的鼎力支持下担纲主攻，她凌厉的前后排进攻以及出色的端拦网使得巴西队网上竞争力得到了极大的提高，同时她的突破也给了队友谢拉最有力的支持。玛丽安妮走向成熟成为了巴西队获胜的关键。 杰奎琳·卡瓦霍（Jaqueline Carvalho,1983.12.31），是一名来自巴西的女子排球运动员。杰奎琳·卡瓦霍（Jaqueline Carvalho）是典型的巴西美女，也是巴西女排的绝对主力，高束的头发，清秀的面庞，186厘米的身高，还有热情奔放的巴西女郎性格，再加上出色的技术，这杰奎琳成了巴西女排的大明 星。　杰奎琳出生于里约热内卢，小时候接触最多的是足球。直到9岁那年，她的父亲才给她买第一个排球，而她的排球运动也是从沙滩排球开始的。由于天赋出色，杰奎琳很快展现了自己在排球项目的实力。17岁那年，她就入选了巴西女排的国家队，成为那届国家队里最年轻的选手。　杰奎琳是典型的兴奋性球员，她在场上比赛气质突出，拼劲十足让巴西女排更具活力。尽管她的强攻绝对实力有限，但是相对全面的技术还是让其成为巴西女排的绝对主力。2007年，在杰奎琳深陷兴奋剂风波的三个月中，巴西女排的成绩一落千丈，在世界女排大奖赛总决赛中，巴西女排跌至谷底，仅仅获得第五名。日本女排世界杯赛，杰奎琳解禁复出，她的回归盘活了整个巴西女排，尽管未能夺冠，但确保了会的入场券，这也证明了杰奎琳的价值。 姓名：费尔南达生日： 1980年01月10日性别：女身高：172 cm体重：66 kg国家及地区：巴西出生地：巴西 萨萨，巴西女排队员，身披10号球衣。姓名：萨萨英文名： Welissa Gonzaga　位置：主攻生日： 1982.09.09身高： 179cm体重：76kg扣球高度： 300cm拦网高度：287cm巴西女排在北京奥运会上力克美国女排夺得冠军,现效力于美国排球俱乐部. 姓名:坦达拉性别:女国籍:巴西团队:巴西女排出生:1988年10月30日　运动项目:排球 生日： 1989年04月24日性别：女身高：183 厘米　体重：75 kg国家及地区：巴西出生地： 巴西 谢拉，巴西女排主力队员之一，面容姣好，是世界排坛为数不多的靓妹级别队员之一，极具魅力。而且她的进攻手段丰富，拦网和发球成绩也都非常突出，这也要归结为她的良好的身体素质。姓名：Sheilla Castro中文名：谢拉性别：女国籍：巴西出生地：巴西贝洛奥里藏特（Belo Horizonte）出生日期：1983年07月01日身高：1.85m体重：68kg项目：女子排球　场上位置：接应二传国家队号码：13扣球高度：3.04cm拦网高度：2.89cm曾经效力队：Mackenzie (1997-2000), MRV/Minas (2001-2004) and Scavolini Pesaro (2004-2008)，S&atilde;o Caetano（2008-至今）Sheilla已签约VAKIFBANK最喜欢的颜色：粉色最喜欢的食物：巴西烤肉最喜欢的音乐：Brazilian最喜欢的书：Ramsés Collection最喜欢的电影：百万宝贝最喜欢的男演员：Tom Hanks最喜欢的女演员：帕米拉.安德森业余体育爱好：网球（排坛美女都爱网球）体育明星偶像：Ayrton Senna （F1的塞纳，巴西人，已故）最喜欢的食物：意大利菜目标：奥运冠军谢拉是巴西女排的进攻核心，也是队中少有的集实力与人气于一身的明星球员。谢拉是一名技术型的接应，她的优势在于手臂长，身体协调性好，脚步灵活，反应敏捷，扣球手法多样，具有敏锐的观察能力，能够将扣球线路的变化与打手出界、打吊结合等战术完美地结合在一起。她的发球也很有特点，能够将大力跳发球和长线跳飘球相结合，以线路刁钻、技巧多变取胜。谢拉的滞空能力强，加之击球点高，扣球经常是落地开花直接得分，她的拦网也不错，判断准确，对手很难顺利通过。谢拉是一个攻防均衡、技术全面且有特点的队员，也是让对手极为头疼、重点盯防的对象 。

一.安装USB驱动1.驱动安装包路径:工具包目录下：driver HandsetWinDriver_win7_64_20140411.rar2.解压缩后双击如下DriverSetup.exe即可,驱动在后台自行安装没有引导.3.安装成功后会有如下界面显示.点击确定即可.二.镜像烧写1.手机和电脑先不要连接，双击工具包中的 “最小系统恢复工具.exe”，不同电脑登陆时间有所差别，如果时间较长请耐心等待2.主界面出现后，选择要烧写的手机型号3.点击 “开始”4.手机重新安装电池和电脑通过USB连接，即开始烧写，烧写成功后出现如下截图5.如果手机连上去后工具1分钟以上界面没有任何变化，请做如下尝试按照 如上1)->2)->3)->4)步骤多试几次如果还是不行，在步骤3）中点击开始按钮后在设备管理器中查看如下preloader端口是否出现，如果没有出现就是驱动没有安装好需要重新安装驱动。三.SD卡升级准备1.在论坛官网中找到合适的卡刷包2.准备一张 microSD 卡，确认已格式化为FAT32格式。3.在 microSD 卡根目录下创建一个【dload】文件夹。4.将软件升级包加压缩，将包中的“UPDATA.APP”拷贝到 microSD 卡【dload】文件夹中。 将 microSD 卡插入手机。5.升级软件之前，请检查电池电量，确保电池电量超过20%四.强制升级1.断开手机跟电脑或其它设备（如充电器）的连接，重新上电池。2.同时按住音量上下键，然后按电源键。3.开机画面出来之后，放开电源键，继续按住音量上下键，直到进入如下升级界面后再松开音量上下键。 整个升级过程大约需要3分钟。在升级过程中，请不要取出电池，建议您最好不要进行任何操作，静静等待

中位数算法为：把所有值由从高到低（或由低到高）排序后找出正中间的一个数作为中位数。方法一：若一共有奇数个要观察的数，则通过把所有值由从高到低（或由低到高）排序后找出正中间的一个数作为中位数。方法二：若一共有偶数个要观察的数，把所有值由从高到低（或由低到高）排列后，再将所有数分为左右两组，将两组靠在一起的两个数相加再除以二，就得到中位数。中位数意思：统计学中的专有名词，是按顺序排列的一组数据中居于中间位置的数，代表一个样本、种群或概率分布中的一个数值，其可将数值集合划分为相等的上下两部分。对于有限的数集，可以通过把所有观察值高低排序后找出正中间的一个作为中位数。如果观察值有偶数个，通常取最中间的两个数值的平均数作为中位数。[z7981.cn][yhpx.net.cn][newbusinessway.cn][v8206.cn][mach-5.cn][capian.cn][tengbaoda.cn][hi0516.cn][midea.fj.cn][jjshunda.cn]

我爱你"这三个字很容易就说出口了,*着激情,*着欲望,我们站在心爱的人面前,带着"怦怦"的心跳说:"我爱你".这三个字即是承诺也是烙印,有人感到沉重,有人感到束缚,逃走了,忘记了,一切宛如烟云.其实,爱是很难说出口的,是需要勇气和毅力的. 爱的最高境界是经得起平淡的流年. 英 语:i love you 法 语:je t"aime,je t"adore 德 语:ich liebe dich 希 腊语:s"agapo 犹 太语:ani ohev otach(male o* **male),ani ohevet otcha (male o* **male) 匈 牙 利:szeretlek 爱 尔 兰:taim i"ngra leat 爱 沙 尼 亚:mina armastan sind 芬 兰:min rakastan sinua 比 利 时佛兰芒语:ik zie u graag 意 大 利语:ti amo,ti vogliobene 拉 丁语:te amo,vos amo 拉 托 维 亚:es tevi milu 里 斯 本:lingo gramo-te bue",chavalinha 立 陶 宛:tave myliu 马 其 顿:te sakam 马 尔 它:inhobbok 波 兰:kocham cie,ja cie kocham 葡 萄 牙:eu amo-te 罗 马 尼 亚:te iu besc,te ador 荷 兰:ik hou van jou 捷 克:miluji te 丹 麦:jeg elsker dig 阿 尔 萨 斯:ich hoan dich gear 亚 美 尼 亚:yes kezi seeroom yem 巴 伐 利 亚:i mog di narrisch gern 保 加 利 亚:ahs te obicham 西 班 牙加泰隆语:t"estim 克 罗 地 亚:volim te 阿 塞 疆 语:men seni serivem 孟 加 拉:ami tomay bhalobashi 缅 甸:chit pa de 柬 埔 寨:bong salang oun 菲 律 宾:mahal kita,iniibig kita 印 度 古 吉 拉 特 语:hoon tane prem karun chuun 北 印 度 语:main tumse pyar karta hoon 印 度 尼 西 亚:saja kasih saudari 日 本:kimi o ai****eru sukiyo 朝 鲜:tangshin-i cho-a-yo 爪 哇 语:aku tresno marang sliromu 老 挝:khoi huk chau 马 来 语:saya cinta mu 马来西亚:saya cintamu 蒙古语:bi chamd hairtai 尼泊尔:ma tumilai maya garchu,ma timilai man parauchu 波斯语:tora dost daram 他加禄语:mahal kita 南非语:ek het jou lief ek is lief vir jou 加纳:me do wo 埃塞俄比亚阿姆哈雷地区:ene ewedechalu(for ladies) ene ewedehalwe(for men) 阿拉伯语:ana ahebak(to a male) arabic ana ahebek(to a female) 瑞士德语:ich li b dich 克里奥尔语:mon kontan ou 豪萨语:ina sonki 肯尼亚班图语:nigwedete 马达加斯加语:tiako ianao 印度阿萨姆邦语:moi tomak bhal pau 南亚泰米尔语:tamil n"an unnaik kathalikkinren 印度泰卢固语:neenu ninnu pra"mistu"nnanu 泰国:ch"an rak khun 乌尔都语:mein tumhay pyar karti hun(woman to man) mein tumhay pyar karta hun(man to woman) 越南:em ye"u anh(woman to man) anh ye"u em(man to woman) 新西兰毛里语:kia hoahai 爱斯基摩:nagligivaget 格陵兰岛:asavakit 冰岛:e"g elska tig 阿尔巴尼亚:t dua shume 俄罗斯:ya vas iyublyu,ya tibia lyublyu 塞尔维亚:volim te 斯洛文尼亚语:ljubim te 西班牙:te amo,tequiero 瑞典:jag lskar dig 土尔其:seni seviyorum 乌克兰:ja vas kokhaju 威尔士:rwy"n dy garu di 亚述语:ana bayanookh(female to male) ana bayinakh(male to female) 高加索切尔克斯语:wise cas 中 国:wo ai ni

日语：斯米马森 韩语：米安四木你大 英语：SORRY 额 楼主啊 你是不是做了对不起女朋友的事啊 要说那么多对不起干嘛 真是的 ...03

首先说说嵌入式开发吧，嵌入式开发就是指在嵌入式操作系统下进行开发，一般常用的系统有WinCE,Palm，Symbian现在又多linux,android等，都有相应的SDK开发包。用单片机汇编开发也算是嵌入式，用高级一点的处理器，arm7,arm9，arm10.arm11 到最新的arm context系列，powerpc什么的开发起来，不过要加操作系统而已，也属于嵌入式的开发. 针对你的问题一般认为搞嵌入式的可以分为两类人：一种是底层硬件的开发还可能写一些底层的驱动程序，另一类是做应用软件或者专职驱动开发的软件开发人员，不管底层的具体硬件实现。以上是我的初浅认识，总之这就看你怎样抉择了，看你擅长哪一类的！

你这个是错的 啊 应该为The only person I have ever known has a skeleton in the cupboard