E3-1230 V2和微星7870hawk需要配多大电源

直接选NAS盘就好了，一般都有企业NAS盘，WD的红盘，希捷的NAS盘因为NAS一般都不关机，所以还是要选质量好一点的硬盘。

华硕MAXIMUS VIII RANGER、Z170 PRO GAMING； 技嘉GA-Z170X-GAMING 7、技嘉GA-Z170X-UD5； 微星Z170A GAMING M5、微星Z170A GAMING PRO。

这种问题是这样，电源电压过低，电源自身IC会保护当然主板也是保护IC会工作至于你说的电压，最可能不是电压电滤波出问题杂相交流进入直流系统硬盘才坏如果是电压 至少需要经过一定时间才会坏不可能通电就烧当然常时间供电接触点虚，也是一个过程，定时检查电脑的说还有办法是硬盘侧进，供电和信号线在机箱右侧正好用右侧机箱板顶住

星火矿池和鱼池相比起来，还个鱼池好。

你这个配置非常不错的高端硬件，CPU都要1900块，显卡需要2500块，内存条440块，海盗船750X，600块，固态硬盘+机械硬盘，1100块，机箱散热器，350块，显示器1100块，华硕z370-P主板，500块，键盘鼠标不清楚型号品牌，

2000左右的i7-10700f都愿意买了。B460主板都不愿意了

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轮大说过 无官方app 盗号不负责 查看原帖>>

终于有了一位同好奇的同学，泪奔......*/-92这里还有一篇测评——新型巨塔来袭 SilverStone Heligon HE02测评 2012-9-10 http://bbs.pceva.com.cn/thread-61638-1-1.html轮大的测评链接—— http://www.chiphell.com/article-5136-1.html

https://www.chiphell.com/thread-1388718-1-1.html

既然说了是品牌，那就理解为奢侈品品牌吧。男士钱包品牌只推荐Hermes，Louis Vuitton，dunhill（登喜路），Bally，montablanc，还有mulberry。

淘洋垃圾网站Chiphell 交易区V2EX这个神奇的论坛多年以来一直不开放注册，所以用户质量非常高，经常会有一些多金的大佬发一些让人大开眼界的开箱。这个网站的二手区自然也是非常靠谱，但是这个这个论坛的二手区是不对外开放的，所以很多人以为这里面的东西都很划算，说实话其实就是东西 比较靠谱而已，价格、东西也没有什么特别的优势。

你可以看看CPU接口是什么型号，然后搜索相应主板，买一线品牌的。。

可以获得更好的性能，并且CPU可以更换缺点，散热要求更高，机子得很厚很笨重

楼主已经有双路E5 V2了？QPI速度可以用hwinfo来查看，看QPI status项，4000MHz对应8GT/shttp://www.chiphell.com/thread-821602-1-1.html

能

　　水冷机箱，全封闭水冷式电脑机箱是一种给电脑内部发热部件散热的一种装置。并且能够降低电脑辐射的泄漏和灰尘对电脑的伤害以及电脑运行时产生的噪音，对保证电脑的稳定运行有着重要意义。　　缺点是普遍体积过大，操作不够简单，价格较昂贵，不普及，不稳定，但不久的将来这些缺点都水冷机箱能得到进一步的完善。背线不是很好走，电源线短的朋友要买延长线。

百度知道给不鸟你答案。chiphell这个论坛去找吧，记得后面加COM，上万配置百度知道少有人答。

亮度调节功能正常的情况下，用万能表量ADJ脚，电压有根据亮度起伏变化就是VCC，只有一个电压就是pwm，或者直接查恒流板、高压板的IC型号，就能知道是PWMIC还是VCCIC了

您好：以下方法供您参考：您可以到官方网站去查询和咨询，这里内容很多，一定由您需要的。您也可以打里面客服电话。戴尔官方网址：http://www.dell.com.cn/

我之前发过一个关于信道的帖子，http://www.chiphell.com/thread-822435-1-1.html，尽量买美版就好了，另外港版好像也同样存在5G信道的问题不过现在有些路由厂商比较良心，只要更改区域，对应的频道号码就能出现。像网件、Linksys 这种就不能在配置页面中改。ASUS的没玩过不清楚。 查看更多答案>>

http://www.chiphell.com/forum.php?mod=viewthread&tid=747646&page=1#pid17568745在这个帖子里面讨论过相关问题，但是最后楼主没说可不可用，我自己又没有ATV，不知道可不可以满足你的需求。

你好，你是想问黑色的十字标志是什么牌子的项链吗?黑色的十字标志是梵克雅宝项链。梵克雅宝的黑色十字形徽标是其标志性的标记之一，代表着其高端、精湛的工艺和设计。梵克雅宝最著名和经典的珠宝设计之一是“Alhambra四叶草”系列，这个系列搭配了黑色十字的形状。这个设计灵感来源于具有西班牙穆斯林历史遗迹的Alhambra遗址，梵克雅宝设计师在此受到了启发，将其转化为了四叶草的形状，并赋予其寓意，每个四叶草都代表着幸运、健康、财富和爱情。

搜一下：氟化物分光光度法测定时候，测定管一个小时后有紫黑色沉淀，导致吸光

Dazzling Red - 这个人（uc774 uc0acub78c）孝琳（sistar）&妮可（kara）&泫雅（4minute）&孝盛（secret）&Nana（after school）Producer：xuxinfinallyI Know this love will kill meBut(I don"t know why) uc65c ub0a0 uc774ub9acub3c4 uad34ub86dud788ub294 ub2c8uac00 为什么你要这样折磨我(I don"t know why) uc65c ub0a0 uc774ub9acub3c4 ubab0ub77cuc8fcub294 ub2c8uac00 为什么你这么不懂我(I don"t know why) ubb50uac00 uadf8ub9acub3c4 ub09c uc88buc740uc9c0 为什么这样我还是喜欢你uc774uc0acub78c uc774uc0acub791 ub55cuc5d0 uc8fduaca0uc5b4Let go 这个人 这份爱 足以令我死去 Let goub9d0ub3c4 ucc38 ubb34ub69dub69dud558uac8cub9cc ud558uace0 说话的时候语气真的很生硬ub098ubcf4ub2e4 uce5cuad6cuac00 ud56duc0c1 uba3cuc800uace0 比起我总是先想到朋友uc8fcub9d0ub9cc ub418uba74 uc2e0ub098uac8c ub180uae30ub9cc ubc14uc058uace0 到了周末就兴奋地忙着玩ub0b4 ub9d8ub3c4 ubaa8ub974ub294 uc774uc0acub78c uc5b4ub5a1ud560uae4cuc694 连我的心都不懂 对你这个人我要怎么办ub2c8uac00 ub2c8uac00 ubb54ub370 你 你算什么uc65c ub098ub97c uc6b8ub824 ubbf8uc6ccuc8fduaca0uc5b4 为什么让我哭泣 讨厌死你了uc18duc0c1ud574 uc0b4 uc218 uc5c6uc796uc544 ub2c8uac00 ub2c8uac00 ubb54ub370 悲伤地要活不下去了 你 你算什么uc790uafb8ub9cc ub04cub824 ubbf8uc6ccuc8fduaca0uc5b4 总是被你吸引 讨厌死你了uc774uc820 uc5b4uca54 uc218 uc5c6uc796uc544 现在我什么也做不了了(I don"t know why) ub0b4 ub9c8uc74cuc774 我的心(I don"t know why) uc65c uc774ub7f0uc9c0 为什么这样(I don"t know why)ubaa8ub974uaca0uc5b4 我不明白uc774uc0acub78c uc774uc0acub791 ub55cuc5d0 uc8fduaca0uc5b4 这个人 这份爱 足以令我死去ub0a0 uc6b8ub9acub294 uc774uc0acub78c uc774uae30uc801uc774 uc774uc0acub78c 让我哭泣的这个人 自私的这个人ubc14ub78c uac19uc740 uc774uc0acub791 ubb50uac00 uadf8ub9acub3c4 uc88buc740uc9c0 像风一样的爱情 为什么我这样喜欢你ub0a0 uc6b8ub9acub294 uc774uc0acub78c uc774uae30uc801uc774 uc774uc0acub78c 让我哭泣的这个人 自私的这个人uac08ub300 uac19uc740 uc774uc0acub791 uc774uc0acub791 ub55cuc5d0 uc8fduaca0uc5b4 像芦苇一样的爱情 这份爱 足以令我死去uc774 uc0acub78cuc740 ub0b4uac8c uc65c uc774ub7f4uae4cuc694? 这个人 为什么要这样对我？ub300uccb4 uc5b4ub290 ubcc4uc5d0uc11c uc654uc744uae4cuc694? 到底是从哪个星球来的啊？uc5b4uca5c uc774ub9acub3c4 uadf8ub807uac8c ub9d0ud574ub3c4 就算我这么向他表明心意ub9e8ub0a0 uc9c0ubc16uc5d0 ubaa8ub97cuae4cuc694? 这个人为什么就是不明白uc774 ub098uc05c uc0acub78cuc774 ub09c ubb50uac00 uadf8ub9ac uc774uc058ub2e4uace0 你这个坏人 到底我觉得你哪里好ub09c ud558ub8e8uac00 uba40ub2e4ud558uace0 uc9d5uc9d5ub300 ub610 ubcf4uace0uc2f6ub2e4uace0 我一天不停地发牢骚 却又想念他ub2c8uac00 ub2c8uac00 ubb54ub370 你 你算什么uc65c ub098ub97c uc6b8ub824 ubbf8uc6ccuc8fduaca0uc5b4 为什么让我哭泣 讨厌死你了uc18duc0c1ud574 uc0b4 uc218 uc5c6uc796uc544 ub2c8uac00 ub2c8uac00 ubb54ub370 悲伤地要活不下去了 你 你算什么uc790uafb8ub9cc ub04cub824 ubbf8uc6ccuc8fduaca0uc5b4 总是被你吸引 讨厌死你了uc774uc820 uc5b4uca54 uc218 uc5c6uc796uc544 现在我什么也做不了了(I don"t know why) ub0b4 ub9c8uc74cuc774 我的心(I don"t know why) uc65c uc774ub7f0uc9c0 为什么这样(I don"t know why) ubaa8ub974uaca0uc5b4 我不明白uc774uc0acub78c uc774uc0acub791 ub55cuc5d0 uc8fduaca0uc5b4 这个人 这份爱 足以令我死去ub0a0 uc6b8ub9acub294 uc774uc0acub78c uc774uae30uc801uc774 uc774uc0acub78c 让我哭泣的这个人 自私的这个人ubc14ub78c uac19uc740 uc774uc0acub791 ubb50uac00 uadf8ub9acub3c4 uc88buc740uc9c0 像风一样的爱情 为什么我这样喜欢你ub0a0 uc6b8ub9acub294 uc774uc0acub78c uc774uae30uc801uc774 uc774uc0acub78c 让我哭泣的这个人 自私的这个人uac08ub300 uac19uc740 uc774uc0acub791 uc774uc0acub791 ub55cuc5d0 uc8fduaca0uc5b4 像芦苇一样的爱情 这份爱 足以令我死去uc81cubc1c ub108 uc815uc2e0 uc880 ucc28ub824 拜托 你清醒点uc81cubc1c ub108 ub0b4 ub9d0 uc880 ub4e4uc5b4Boy 拜托 你听一下我的话Boyuc5b8uc81cuae4cuc9c0 ub0b4 ub9d8 uc544ud504uac8cud560ub798 这样伤害我的心要到何时uc5b8uc81cuae4cuc9c0 ub0b4 ub9d8 ubab0ub77c uc904ub798 这样不懂我的心要到何时(I don"t know why)Baby I know this love will kill me(I don"t know why) Baby you know Can"t stop love you(I don"t know why)Baby I know this love will kill meuc774uc0acub78c uc774uc0acub791 ub55cuc5d0 uc8fduaca0uc5b4 这个人 这份爱 足以令我死去

VCA梵克雅宝四叶草项链Vintage Alhambra吊坠价格￥19900VCA梵克雅宝四叶草项链Vintage Alhambra吊坠价格￥18900VCA梵克雅宝四叶草项链Vintage Alhambra吊坠价格￥18900VCA梵克雅宝四叶草项链Pure Alhambra吊坠价格￥25800VCA梵克雅宝四叶草项链Pure Alhambra吊坠价格￥24200VCA梵克雅宝四叶草钻石项链Sweet Alhambra吊坠价格￥23700VCA梵克雅宝四叶草钻石项链Vintage Alhambra吊坠价格￥58000其实很多人喜欢，又不想花高价买，她们都去御希珠宝定制同样款式的项链。

lizard ....- -+蜥蜴~~

Rainbow Rocks[The Rainbooms]We used to fight with each other(Oh, whoa-oh, whoa-oh, whoa-oh)That was before we discovered(Oh, whoa-oh, whoa-oh, whoa-oh)That when your friendship is real(Oh, whoa-oh, whoa-oh, whoa-oh)Yeah, you just say what ya feelAnd the music, yeah, the musicGets us to the topAs we learn how the rainbow...Rainbow Rocks![Applejack]You can pick up the bass[The Rainbooms](Oh, whoa-oh, whoa-oh, whoa-oh)[Rainbow Dash]And you can play the guitar[The Rainbooms](Oh, whoa-oh, whoa-oh, whoa-oh)[Pinkie Pie]You can bang on the drums[The Rainbooms](Oh, whoa-oh, whoa-oh, whoa-oh)[Twilight Sparkle]Or you can sing like a star[The Rainbooms]And the music, yeah, the musicGets us to the topAs we learn how the rainbow...Rainbow Rocks!As we learn how the rainbow...Rainbow Rocks!Better Than EverPinkie Pie: One two three![The Rainbooms]There was a time we were apartBut that"s behind us nowSee how we"ve made a brand new startAnd the future"s lookin" up, ah-oh, ah-ohAnd when you walk these hallsYou feel it everywhereYeah, we"re the Wondercolts forever, oh, yeah!We are all together(Ah, ah, oh-oh-oh-oh)Now it"s better than ever(Ah, ah, oh-oh-oh-oh)You can feel it, we are back (You... can... feel... it...)And I"m so glad that we"re betterBetter than everWhoa-oh, oh-whoa-ohOh yeah, we"re better than everWhoa-oh, oh-whoa-oh[Rainbow Dash]There was a time we couldn"t seePast the differences[Applejack]That separated you and meAnd it left us on our own[Pinkie Pie]But now you walk these hallsAnd friends are everywhere[The Rainbooms]Yeah, we"re the Wondercolts forever, oh, yeah!We are all together(Ah, ah, oh-oh-oh-oh)Now it"s better than ever(Ah, ah, oh-oh-oh-oh)Now that we are back on track (Now... that... we... are...)Yes, I"m so glad that we"re betterBetter than everWhoa-oh, oh-whoa-ohOh yeah, we"re better than everWhoa-oh, oh-whoa-ohOh yeah, we"re better than everWhoa-oh, oh-whoa-ohOh yeah, we"re better than ever!Battle[The Dazzlings][vocalizing][Adagio Dazzle]We heard you want to get togetherWe heard you want to rock the schoolWe thought of something that is betterSomething that changes all the rulesWhy pretend we"re all the sameWhen some of us shine brighter?[Aria Blaze and Sonata Dusk]Shine brighter[Adagio Dazzle]Here"s a chance to find your flameAre you a loser or a fighter?[The Dazzlings]Me and you, you and meWhy don"t we see who is better?We don"t have to be one and the same thingOh, what"s so wrong with a little competition?Are you afraid of failing the audition?[Adagio Dazzle]You"re a star and you should know itYeah, you rise above the restIt doesn"t matter who you hurtIf you"re just proving you"re the best[The Dazzlings]Ah, ahh-ahhhBattle! You wanna win itLet"s have a battle, battle of the bandsLet"s have a battle, we"ll go all in itLet"s have a battle, battle, battleBattle of the bandsBattle!"Blueberry Cake": I can beat you!The Dazzlings: Battle!"Cherry Crash": Ha! You wish!The Dazzlings: Battle!Trixie Lulamoon: I so want this!The Dazzlings: Battle!"Captain Planet": Not if I get it first![The Dazzlings and students]Me and you, you and meWhy don"t we see who is better?We don"t have to be one and the same thingOh, what"s so wrong with a little competition?[Students]I"m going out and winning the audition[The Dazzlings and students]Battle! We wanna win itLet"s have a battle, battle of the bandsLet"s have a battle, we"ll go all in itLet"s have a battle, battle, battleBattle of the bands!Bad Counter Spell[Twilight Sparkle][singing slightly off-key]Hey, hey, listen[feedback]We"ve got a message for youWe"re not all alikeBut our friendship is trueYeah, we"re really differentBut we still get alongSo hey, hey, listen to our songYou may think you"re in controlBut we"re here to prove you wrongWith the friendship in our musicWith the power of our songGonna stomp our feet, clap our handsWith the magic of friendshipGonna stop your evil planUnder Our Spell[The Dazzlings]Oh-whoa-oh, oh-whoa-ohYou didn"t know that you fellOh-whoa-oh, oh-whoa-oh[Adagio Dazzle]Now that you"re under our spellBlindsided by the beatClapping your hands, stomping your feetYou didn"t know that you fell[Sonata Dusk and Aria Blaze]Oh-whoa-oh-oh-oh[Adagio Dazzle]Now you"ve fallen under our spell[Sonata Dusk and Aria Blaze]Oh-whoa-oh-oh-oh-oh[The Dazzlings]We"ve got the music, makes you move itGot the song that makes you lose itWe say "jump", you say "how high?"Put your hands up to the skyWe"ve got the music, makes you move itGot the song that makes you lose itWe say "jump", you say "how high?"Put your hands up to the skyOh-whoa-oh, oh-whoa-ohYou didn"t know that you fellOh-whoa-oh, oh-whoa-ohNow that you"re under our spell[Adagio Dazzle]Listen to the sound of my voice[Sonata Dusk and Aria Blaze]Oh-oh, whoa-oh-oh[Adagio Dazzle]Soon you"ll find you don"t have a choice[Sonata Dusk and Aria Blaze]Oh-oh, whoa-oh-oh[Adagio Dazzle]Captured in the web of my song[Sonata Dusk and Aria Blaze]Oh-oh, whoa-oh-oh[Adagio Dazzle]Soon you"ll all be singing along[Sonata Dusk and Aria Blaze]Oh, whoa, oh[The Dazzlings]We"ve got the music, makes you move itGot the song that makes you lose itWe say "jump", you say "how high?"Put your hands up to the skyWe"ve got the music, makes you move itGot the song that makes you lose itWe say "jump", you say "how high?"Put your hands up to the skyOh-whoa-oh, oh-whoa-ohYou didn"t know that you fellOh-whoa-oh, oh-whoa-ohNow that you"re under our spellOh-whoa-oh, oh-whoa-ohYou didn"t know that you fellOh-whoa-oh, oh-whoa-ohNow that you"re under our[Adagio Dazzle]Spell[maniacal laughter]Awesome As I Wanna Be[The Rainbooms]Hey! Hey! Hey! Hey! Hey! Hey![Rainbow Dash]Awesome as I wanna be[The Rainbooms]Hey! Hey! Hey! Hey! Hey! Hey![Rainbow Dash]Awesome as I wanna beFirst you see me riding on a sonic boomGot my guitar shreddin" up my latest tuneThere is nothin" you can do to beat meI"m so good that you can"t defeat me[Rainbow and the Rainbooms]Yeah, I"m awesome, take cautionWatch out for me, I"m awesome as I wanna be(Yeah!) I"m awesome, take cautionWatch out for me, I"m awesome as I wanna be[The Rainbooms]Hey! Hey! Hey! Hey! Hey! Hey!Hey! Hey! Hey! Hey! Hey! Hey![Rainbow Dash]Step aside now, you"re just gettin" in my wayI got sick chops you could never hope to playWhen it comes to makin" music, I"m the rulerYou wish you could be twenty percent cooler[Rainbow and the Rainbooms]Yeah, I"m awesome, take cautionWatch out for me, I"m awesome as I wanna be(Yeah!) I"m awesome, take cautionWatch out for me, I"m awesome as I wanna be!Welcome To The Show[The Dazzlings][vocalizing][Adagio Dazzle]Welcome to the show[Sonata Dusk and Aria Blaze]Ah-ah-ah-ah, ah[Adagio Dazzle]We"re here to let you know[Sonata Dusk and Aria Blaze]Ah-ah-ah-ah-ah-ah[Adagio Dazzle]Our time is now[Sonata Dusk and Aria Blaze]Ah-ah-ah-ah, ah[Adagio Dazzle]Your time is running out[Sonata Dusk and Aria Blaze]Ah, ah, ah[The Dazzlings][vocalizing]Feel the wave of soundAs it crashes downYou can"t turn awayWe"ll make you wanna stayWe will be adoredTell us that you want usWe won"t be ignoredIt"s time for our rewardNow you need usCome and heed usNothing can stop us now[The Rainbooms]Oh-oh, oh-whoa-ohI"ve got the music in meOh-oh, oh-whoa-oh[Twilight Sparkle]Don"t need to hear a crowdCheering out my nameI didn"t come here seekingInfamy or fame[The Rainbooms]The one and only thingThat I am here to bringIs music, is the musicIs the music in my soulGonna break out (Out!)Set myself free, yeahLet it all go (Go!)Just let it be, yeahFind the music in your heartLet the music make you startTo set yourself apart[The Dazzlings]What we have in storeAll we want and moreWe will break on throughNow it"s time to finish you![drum solo][Sunset Shimmer]You"re never gonna bring me downYou"re never gonna break this part of meMy friends are here to bring me "roundNot singing just for popularity[Sunset Shimmer and Twilight Sparkle]We"re here to let you knowThat we won"t let it goOur music is a bomb and it"s about to blowAnd you can try to fightBut we have got the light of[The Rainbooms]Friendship on our side!Got the music in our heartsWe"re here to blow this thing apartAnd together, we will neverBe afraid of the darkHere to sing our song out loudGet you dancing with the crowdAs the music of our friendshipSurvives, survives[All sans Dazzlings]Got the music in our heartsWe"re here to blow this thing apartAnd together, we will neverBe afraid of the darkHere to sing our song out loudGet you dancing with the crowdAs the music of our friendshipSurvives, survives, survives!Shine Like Rainbows[Applejack]Once upon a timeYou came into my world and made the stars align[Rarity]Now I can see the signsYou pick me up when I get down so I can shine[The Rainbooms]Shine like rainbowsShine like rainbowsShine like rainbowsShine like rainbows[Rainbow Dash]Friends, you are in my lifeAnd you can count on me to be there by your side[Sunset Shimmer]And when the music comes aliveWe sing our songs to lift us up so we can shine[The Rainbooms]And the sound that we hear in our heartsMakes a crescendoAnd the light that ignites in the darkIt makes us all glowAnd shine like rainbowsWe shine like rainbowsShine like rainbowsWe shine like rainbowsTogether we standAs the rain begins to fallAnd holdin" our heads up highAs the sun shines through it all[The cast]And the sound that we hear in our heartsMakes a crescendoAnd the light that ignites in the darkIt makes us all glowAnd shine like rainbowsWe shine like rainbowsShine like rainbowsWe shine like rainbows[The Rainbooms]We shine like rainbows希望你喜欢，支持我哦！

看了这么多，著名的窗帘品牌都是这一些品牌不变的。还是买窗帘也不一定要买窗帘品牌的。只要捉住款式设计好看、加工方面细致，布料方面过关 就可以了。没必要花大钱选择窗帘品牌 只不过买窗帘品牌能够帮你省下这么多的麻烦

烁【读音】shuò【基本字义】 光亮的样子：闪～。珠～晶莹。【详细字义】形：1.　形声。从火,乐声。本义:发光的样子2.　同本义3.　热;烫;烤灼。如:烁玉流金(烁石流金。动：1.　摇曳;闪烁2.　通“铄”。销熔3.　又如:烁金(熔化金属;另指伤人的谗言)【常用词组】1.　闪烁 指闪闪发光的东西。2.　烁亮 shuòliàng :明亮异常3.　烁烁shuòshuò :〖glisten〗(光芒)闪动的样子

frye包包是中等档次，frye是一个美国的牌子，这个牌子的包包和鞋子都非常受欢迎，皮质特别好，性价比很高。FRYE成立于1863年的美国，曾为二战期间的美军制作战靴。在上世纪60年代，Frye正式进军时装界，其经典造型和所传达的态度使其成为了1960年代最具代表性的商品。从此便以其上乘品质和多元化潮流设计而蜚声时尚界。Frye是美国经营至今的最古老的鞋履品牌，在制鞋领域素来享有美誉。从1863年成立以来，历经美国南北战争和第二次世界大战，最著名的HarnessBoots靴款即受当时骑兵文化的影响。通过邮购，该公司提供给成千上万的二战军人Frye靴子，Frye靴子在二战期间由美国士兵穿着到多很多国家。更多关于frye包包是什么档次，进入：https://m.abcgonglue.com/ask/5543c01615831449.html?zd查看更多内容

常用紫外分光光度法测定蛋白质含量。以下引用：6种方法测定蛋白质含量一、微量凯氏（kjeldahl）定氮法样品与浓硫酸共热。含氮有机物即分解产生氨（消化），氨又与硫酸作用，变成硫酸氨。经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。若以甘氨酸为例，其反应式如下：nh2ch2cooh+3h2so4——2co2+3so2+4h2o+nh3 (1)2nh3+h2so4——(nh4)2so4 (2)(nh4)2so4+2naoh——2h2o+na2so4+2nh3 (3)反应（1）、(2)在凯氏瓶内完成，反应（3）在凯氏蒸馏装置中进行。为了加速消化，可以加入cuso4作催化剂，k2so4以提高溶液的沸点。收集氨可用硼酸溶液，滴定则用强酸。实验和计算方法这里从略。计算所得结果为样品总氮量，如欲求得 样品中蛋白含量，应将总氮量减去非蛋白氮即得。如欲进一步求得样品中蛋白质的含量，即用样品中蛋白氮乘以6．25即得。二、双缩脲法（biuret法）（一）实验原理双缩脲（nh3conhconh3）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中，双缩脲与cuso4形成紫色络合物，称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。测定范围为1-10mg蛋白质。干扰这一测定的物质主要有：硫酸铵、tris缓冲液和某些氨基酸等。此法的优点是较快速 ，不同的蛋白质产生颜色的深浅相近，以及干扰物质少。主要的缺点是灵敏度差。因此双缩脲法常用于需要快速，但并不需要十分精确的蛋白质测定。（二）试剂与器材1. 试剂：（1）标准蛋白质溶液：用标准的结晶牛血清清蛋白（bsa）或标准酪蛋白，配制成10mg/ml的标准蛋白溶液，可用bsa浓度1mg/ml的a280为0.66来校正其纯度。如有需要，标准蛋白质还可预先用微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，计算出其纯度，再根据其纯度，称量配制成标准蛋白质溶液。牛血清清蛋白用h2o 或0.9%nacl配制，酪蛋白用0．05n naoh配制。（2）双缩脲试剂：称以1.50克硫酸铜（cuso4u20225h2o）和6.0克酒石酸钾钠（knac4h4o6u20224h2o），用500毫升水溶解，在搅拌下加入300毫升10% naoh溶液，用水稀释到1升，贮存于塑料瓶中（或内壁涂以石蜡的瓶中）。此试剂可长期保存。若贮存瓶中有黑色沉淀出现，则需要重新配制。2. 器材：可见光分光光度计、大试管15支、旋涡混合器等。（三）操作方法1. 标准曲线的测定：取12支试管分两组，分别加入0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0毫升的标准蛋白质溶液，用水补足到1毫升，然后加入4毫升双缩脲试剂。充分摇匀后，在室温（20～25℃）下放置30分钟，于540nm处进行比色测定。用未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照液。取两组测定的平均值，以蛋白质的含量为横座标，光吸收值为纵座标绘制标准曲线。2、样品的测定：取2～3个试管，用上述同样的方法，测定未知样品的蛋白质浓度。注意样品浓度不要超过10mg/ml。三、folin—酚试剂法（lowry法）（一）实验原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法，由于其试剂乙的配制较为困难（现在已可以订购），近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，只是加入了第二种试剂，即folin—酚试剂，以增加显色量，从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产生深兰色的原因是：在碱性条件下，蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物。folin—酚试剂中的磷钼酸盐—磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原，产生深兰色（钼兰和钨兰的混合物）。在一定的条件下，兰色深度与蛋白的量成正比。folin—酚试剂法最早由lowry确定了蛋白质浓度测定的基本步骤。以后在生物化学领域得到广泛的应用。这个测定法的优点是灵敏度高，比双缩脲法灵敏得多，缺点是费时间较长，要精确控制操作时间，标准曲线也不是严格的直线形式，且专一性较差，干扰物质较多。对双缩脲反应发生干扰的离子，同样容易干扰lowry反应。而且对后者的影响还要大得多。酚类、柠檬酸、硫酸铵、tris缓冲液、甘氨酸、糖类、甘油等均有干扰作用。浓度较低的尿素（0.5%），硫酸纳（1%），硝酸纳（1%），三氯乙酸（0.5%），乙醇（5%），乙醚（5%），丙酮（0.5%）等溶液对显色无影响，但这些物质浓度高时，必须作校正曲线。含硫酸铵的溶液，只须加浓碳酸钠—氢氧化钠溶液，即可显色测定。若样品酸度较高，显色后会色浅，则必须提高碳酸钠—氢氧化钠溶液的浓度1～2倍。进行测定时，加folin—酚试剂时要特别小心，因为该试剂仅在酸性ph条件下稳定，但上述还原反应只在ph=10的情况下发生，故当folin一酚试剂加到碱性的铜—蛋白质溶液中时，必须立即混匀，以便在磷钼酸—磷钨酸试剂被破坏之前，还原反应即能发生。此法也适用于酪氨酸和色氨酸的定量测定。此法可检测的最低蛋白质量达5mg。通常测定范围是20~250mg。（二）试剂与器材1.试剂（1）试剂甲：（a）10克 na2co3，2克 naoh和0.25克酒石酸钾钠 （knac4h4o6u20224h2o）。溶解于500毫升蒸馏水中。（b）0.5克硫酸铜（cuso4u20225h2o）溶解于100毫升蒸馏水中，每次使用前，将50份（a）与1份（b）混合，即为试剂甲。（2）试剂乙：在2升磨口回流瓶中，加入100克钨酸钠（na2wo4u20222h2o）,25克钼酸钠（na2moo4u20222h2o）及700毫升蒸馏水，再加50毫升85%磷酸，100毫升浓盐酸，充分混合，接上回流管，以小火回流10小时，回流结束时，加入150克硫 酸 锂（li2so4），50毫升蒸馏水及数滴液体溴，开口继续沸腾15分钟，以便驱除过量的溴。冷却后溶液呈黄色（如仍呈绿色，须再重复滴加液体溴的步骤）。稀释至1升，过滤，滤液置于棕色试剂瓶中保存。使用时用标准naoh滴定，酚酞作指示剂，然后适当稀释，约加水1倍，使最终的酸浓度为1n左右。（3）标准蛋白质溶液: 精确称取结晶牛血清清蛋白或 g—球蛋白，溶于蒸馏水，浓度为250mg/ml左右。牛血清清蛋白溶于水若混浊，可改用0.9%nacl溶液。2. 器材（1）可见光分光光度计（2）旋涡混合器（3）秒表（4）试管16支（三）操作方法1. 标准曲线的测定：取16支大试管，1支作空白，3支留作未知样品，其余试管分成两组，分别加入0，0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0毫升标准蛋白质溶液（浓度为250mg/ml）。用水补足到1.0毫升，然后每支试管加入5毫升试剂甲，在旋涡混合器上迅速混合，于室温（20～25℃）放置10分钟。再逐管加入0.5毫升试剂乙（folin—酚试剂），同样立即混匀。这一步混合速度要快，否则会使显色程度减弱。然后在室温下放置30分钟，以未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照，于700nm处测定各管中溶液的吸光度值。以蛋白质的量为横座标，吸光度值为纵座标，绘制出标准曲线。注意：因lowry反应的显色随时间不断加深，因此各项操作必须精确控制时间，即第1支试管加入5毫升试剂甲后，开始计时，1分钟后，第2支试管加入5毫升试剂甲，2分钟后加第3支试管，余此类推。全部试管加完试剂甲后若已超过10分钟，则第1支试管可立即加入0.5毫升试剂乙，1分钟后第2支试管加入0.5毫升试剂乙，2分钟后加第3支试管，余此类推。待最后一支试管加完试剂后，再放置30分钟，然后开始测定光吸收。每分钟测一个样品。进行多试管操作时，为了防止出错，每位学生都必须在实验记录本上预先画好下面的表格。表中是每个试管要加入的量（毫升），并按由左至右，由上至下的顺序，逐管加入。最下面两排是计算出的每管中蛋白质的量（微克）和测得的吸光度值。folin—酚试剂法实验表管号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10标准蛋白质 0 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0（250mg/ml）未知蛋白质 0.2 0.4 0.6（约250mg/ml）蒸馏水 1.0 0.9 0.8 0.6 0.4 0.2 0 0.8 0.6 0.4试剂甲 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0试剂乙 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5每管中蛋白质的量（mg）吸光度值（a700）2. 样品的测定：取1毫升样品溶液（其中约含蛋白质20~250微克），按上述方法进行操作，取1毫升蒸馏水代替样品作为空白对照。通常样品的测定也可与标准曲线的测定放在一起，同时进行。即在标准曲线测定的各试管后面，再增加3个试管。如上表中的8、9、10试管。根据所测样品的吸光度值，在标准曲线上查出相应的蛋白质量，从而计算出样品溶液的蛋白质浓度。注意:由于各种蛋白质含有不同量的酪氨酸和苯丙氨酸，显色的深浅往往随不同的蛋白质而变化。因而本测定法通常只适用于测定蛋白质的相对浓度（相对于标准蛋白质）。四、改良的简易folin—酚试剂法（一）试剂1. 试剂甲：碱性铜试剂溶液中，含0.5n naoh、10%na2co3、0.1%酒石酸钾和0.05%硫酸铜，配制时注意硫酸铜用少量蒸馏水溶解后，最后加入。2. 试剂乙：与前面的基本法相同。临用时加蒸馏水稀释8倍。3. 标准蛋白质溶液：同基本法。（二）操作步骤测定标准曲线与样品溶液的操作方法与基本法相同。只是试剂甲改为1毫升，室温放置10分钟后，试剂乙改为4毫升。在55℃恒温水浴中保温5分钟。用流动水冷却后，在660nm下测定其吸光度值。改良的快速简易法，可获得与 folin—酚试剂法（即lowry基本法）相接近的结果。五、考马斯亮兰法（bradford法）（一）实验原理双缩脲法（biuret法）和folin—酚试剂法（lowry法）的明显缺点和许多限制，促使科学家们去寻找更好的蛋白质溶液测定的方法。1976年由bradford建立的考马斯亮兰法（bradford法），是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点，因而正在得到广泛的应用。这一方法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法。考马斯亮兰g-250染料，在酸性溶液中与蛋白质结合，使染料的最大吸收峰的位置（lmax），由465nm变为595nm，溶液的颜色也由棕黑色变为兰色。经研究认为，染料主要是与蛋白质中的碱性氨基酸（特别是精氨酸）和芳香族氨基酸残基相结合。在595nm下测定的吸光度值a595，与蛋白质浓度成正比。bradford法的突出优点是：（1）灵敏度高，据估计比lowry法约高四倍，其最低蛋白质检测量可达1mg。这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大，蛋白质－染料复合物有更高的消光系数，因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比lowry法要大的多。（2）测定快速、简便，只需加一种试剂。完成一个样品的测定，只需要5分钟左右。由于染料与蛋白质结合的过程，大约只要2分钟即可完成，其颜色可以在1小时内保持稳定，且在5分钟至20分钟之间，颜色的稳定性最好。因而完全不用像lowry法那样费时和严格地控制时间。（3）干扰物质少。如干扰lowry法的k+、na+、mg2+离子、tris缓冲液、糖和蔗糖、甘油、巯基乙醇、edta等均不干扰此测定法。此法的缺点是：（1）由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同，因此bradford法用于不同蛋白质测定时有较大的偏差，在制作标准曲线时通常选用 g—球蛋白为标准蛋白质，以减少这方面的偏差。（2）仍有一些物质干扰此法的测定，主要的干扰物质有：去污剂、 triton x-100、十二烷基硫酸钠（sds）和0.1n的naoh。（如同0.1n的酸干扰lowary法一样）。（3）标准曲线也有轻微的非线性，因而不能用beer定律进行计算，而只能用标准曲线来测定未知蛋白质的浓度。（二）试剂与器材1. 试剂：（1）标准蛋白质溶液，用 g—球蛋白或牛血清清蛋白(bsa)，配制成1.0mg/ml和0.1mg/ml的标准蛋白质溶液。（2）考马斯亮兰g—250染料试剂：称100mg考马斯亮兰g—250，溶于50ml 95%的乙醇后，再加入120ml 85%的磷酸，用水稀释至1升。2. 器材：（1）可见光分光光度计（2）旋涡混合器（3）试管16支（三）操作方法1. 标准方法（1）取16支试管，1支作空白，3支留作未知样品，其余试管分为两组按表中顺序，分别加入样品、水和试剂，即用1.0mg/ml的标准蛋白质溶液给各试管分别加入：0、0.01、0.02、0.04、0.06、0.08、0.1ml，然后用无离子水补充到0.1ml。最后各试管中分别加入5.0ml考马斯亮兰g—250试剂，每加完一管，立即在旋涡混合器上混合（注意不要太剧烈，以免产生大量气泡而难于消除）。未知样品的加样量见下表中的第8、9、10管。（2）加完试剂2-5分钟后，即可开始用比色皿，在分光光度计上测定各样品在595nm处的光吸收值a595，空白对照为第1号试管，即0.1mlh2o加5.0mlg—250试剂。注意：不可使用石英比色皿（因不易洗去染色），可用塑料或玻璃比色皿，使用后立即用少量95%的乙醇荡洗，以洗去染色。塑料比色皿决不可用乙醇或丙酮长时间浸泡。

美国 弗莱

常用紫外分光光度法测定蛋白质含量.以下引用：6种方法测定蛋白质含量一、微量凯氏（kjeldahl）定氮法样品与浓硫酸共热.含氮有机物即分解产生氨（消化）,氨又与硫酸作用,变成硫酸氨.经强碱碱化使之分解放出氨,借蒸汽将氨蒸至酸液中,根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量.若以甘氨酸为例,其反应式如下： nh2ch2cooh+3h2so4——2co2+3so2+4h2o+nh3 (1)2nh3+h2so4——(nh4)2so4 (2)(nh4)2so4+2naoh——2h2o+na2so4+2nh3 (3) 反应（1）、(2)在凯氏瓶内完成,反应（3）在凯氏蒸馏装置中进行.为了加速消化,可以加入cuso4作催化剂,k2so4以提高溶液的沸点.收集氨可用硼酸溶液,滴定则用强酸.实验和计算方法这里从略.计算所得结果为样品总氮量,如欲求得 样品中蛋白含量,应将总氮量减去非蛋白氮即得.如欲进一步求得样品中蛋白质的含量,即用样品中蛋白氮乘以6．25即得.二、双缩脲法（biuret法）（一）实验原理双缩脲（nh3conhconh3）是两个分子脲经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物.在强碱性溶液中,双缩脲与cuso4形成紫色络合物,称为双缩脲反应.凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键,或能过一个中间碳原子相连的肽键,这类化合物都有双缩脲反应. 紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关,故可用来测定蛋白质含量.测定范围为1-10mg蛋白质.干扰这一测定的物质主要有：硫酸铵、tris缓冲液和某些氨基酸等.此法的优点是较快速 ,不同的蛋白质产生颜色的深浅相近,以及干扰物质少.主要的缺点是灵敏度差.因此双缩脲法常用于需要快速,但并不需要十分精确的蛋白质测定.（二）试剂与器材1. 试剂：（1）标准蛋白质溶液：用标准的结晶牛血清清蛋白（bsa）或标准酪蛋白,配制成10mg/ml的标准蛋白溶液,可用bsa浓度1mg/ml的a280为0.66来校正其纯度.如有需要,标准蛋白质还可预先用微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量,计算出其纯度,再根据其纯度,称量配制成标准蛋白质溶液.牛血清清蛋白用h2o 或0.9%nacl配制,酪蛋白用0．05n naoh配制.（2）双缩脲试剂：称以1.50克硫酸铜（cuso4u20225h2o）和6.0克酒石酸钾钠（knac4h4o6u20224h2o）,用500毫升水溶解,在搅拌下加入300毫升10% naoh溶液,用水稀释到1升,贮存于塑料瓶中（或内壁涂以石蜡的瓶中）.此试剂可长期保存.若贮存瓶中有黑色沉淀出现,则需要重新配制.2. 器材：可见光分光光度计、大试管15支、旋涡混合器等.（三）操作方法1. 标准曲线的测定：取12支试管分两组,分别加入0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0毫升的标准蛋白质溶液,用水补足到1毫升,然后加入4毫升双缩脲试剂.充分摇匀后,在室温（20～25℃）下放置30分钟,于540nm处进行比色测定.用未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照液.取两组测定的平均值,以蛋白质的含量为横座标,光吸收值为纵座标绘制标准曲线.2、样品的测定：取2～3个试管,用上述同样的方法,测定未知样品的蛋白质浓度.注意样品浓度不要超过10mg/ml.三、folin—酚试剂法（lowry法）（一）实验原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一.过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难（现在已可以订购）,近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代.此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度.这两种显色反应产生深兰色的原因是：在碱性条件下,蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物.folin—酚试剂中的磷钼酸盐—磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原,产生深兰色（钼兰和钨兰的混合物）.在一定的条件下,兰色深度与蛋白的量成正比.folin—酚试剂法最早由lowry确定了蛋白质浓度测定的基本步骤.以后在生物化学领域得到广泛的应用.这个测定法的优点是灵敏度高,比双缩脲法灵敏得多,缺点是费时间较长,要精确控制操作时间,标准曲线也不是严格的直线形式,且专一性较差,干扰物质较多.对双缩脲反应发生干扰的离子,同样容易干扰lowry反应.而且对后者的影响还要大得多.酚类、柠檬酸、硫酸铵、tris缓冲液、甘氨酸、糖类、甘油等均有干扰作用.浓度较低的尿素（0.5%）,硫酸纳（1%）,硝酸纳（1%）,三氯乙酸（0.5%）,乙醇（5%）,乙醚（5%）,丙酮（0.5%）等溶液对显色无影响,但这些物质浓度高时,必须作校正曲线.含硫酸铵的溶液,只须加浓碳酸钠—氢氧化钠溶液,即可显色测定.若样品酸度较高,显色后会色浅,则必须提高碳酸钠—氢氧化钠溶液的浓度1～2倍.进行测定时,加folin—酚试剂时要特别小心,因为该试剂仅在酸性ph条件下稳定,但上述还原反应只在ph=10的情况下发生,故当folin一酚试剂加到碱性的铜—蛋白质溶液中时,必须立即混匀,以便在磷钼酸—磷钨酸试剂被破坏之前,还原反应即能发生.此法也适用于酪氨酸和色氨酸的定量测定.此法可检测的最低蛋白质量达5mg.通常测定范围是20~250mg.（二）试剂与器材1.试剂（1）试剂甲：（a）10克 na2co3,2克 naoh和0.25克酒石酸钾钠 （knac4h4o6u20224h2o）.溶解于500毫升蒸馏水中.（b）0.5克硫酸铜（cuso4u20225h2o）溶解于100毫升蒸馏水中,每次使用前,将50份（a）与1份（b）混合,即为试剂甲.（2）试剂乙：在2升磨口回流瓶中,加入100克钨酸钠（na2wo4u20222h2o）,25克钼酸钠（na2moo4u20222h2o）及700毫升蒸馏水,再加50毫升85%磷酸,100毫升浓盐酸,充分混合,接上回流管,以小火回流10小时,回流结束时,加入150克硫 酸 锂（li2so4）,50毫升蒸馏水及数滴液体溴,开口继续沸腾15分钟,以便驱除过量的溴.冷却后溶液呈黄色（如仍呈绿色,须再重复滴加液体溴的步骤）.稀释至1升,过滤,滤液置于棕色试剂瓶中保存.使用时用标准naoh滴定,酚酞作指示剂,然后适当稀释,约加水1倍,使最终的酸浓度为1n左右.（3）标准蛋白质溶液: 精确称取结晶牛血清清蛋白或 g—球蛋白,溶于蒸馏水,浓度为250mg/ml左右.牛血清清蛋白溶于水若混浊,可改用0.9%nacl溶液.2. 器材（1）可见光分光光度计（2）旋涡混合器（3）秒表（4）试管16支（三）操作方法1. 标准曲线的测定：取16支大试管,1支作空白,3支留作未知样品,其余试管分成两组,分别加入0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0毫升标准蛋白质溶液（浓度为250mg/ml）.用水补足到1.0毫升,然后每支试管加入5毫升试剂甲,在旋涡混合器上迅速混合,于室温（20～25℃）放置10分钟.再逐管加入0.5毫升试剂乙（folin—酚试剂）,同样立即混匀.这一步混合速度要快,否则会使显色程度减弱.然后在室温下放置30分钟,以未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照,于700nm处测定各管中溶液的吸光度值.以蛋白质的量为横座标,吸光度值为纵座标,绘制出标准曲线.注意：因lowry反应的显色随时间不断加深,因此各项操作必须精确控制时间,即第1支试管加入5毫升试剂甲后,开始计时,1分钟后,第2支试管加入5毫升试剂甲,2分钟后加第3支试管,余此类推.全部试管加完试剂甲后若已超过10分钟,则第1支试管可立即加入0.5毫升试剂乙,1分钟后第2支试管加入0.5毫升试剂乙,2分钟后加第3支试管,余此类推.待最后一支试管加完试剂后,再放置30分钟,然后开始测定光吸收.每分钟测一个样品.进行多试管操作时,为了防止出错,每位学生都必须在实验记录本上预先画好下面的表格.表中是每个试管要加入的量（毫升）,并按由左至右,由上至下的顺序,逐管加入.最下面两排是计算出的每管中蛋白质的量（微克）和测得的吸光度值.folin—酚试剂法实验表管号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10标准蛋白质 0 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 （250mg/ml） 未知蛋白质 0.2 0.4 0.6（约250mg/ml）蒸馏水 1.0 0.9 0.8 0.6 0.4 0.2 0 0.8 0.6 0.4试剂甲 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0试剂乙 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5每管中蛋白质的量（mg）吸光度值（a700）2. 样品的测定：取1毫升样品溶液（其中约含蛋白质20~250微克）,按上述方法进行操作,取1毫升蒸馏水代替样品作为空白对照.通常样品的测定也可与标准曲线的测定放在一起,同时进行.即在标准曲线测定的各试管后面,再增加3个试管.如上表中的8、9、10试管.根据所测样品的吸光度值,在标准曲线上查出相应的蛋白质量,从而计算出样品溶液的蛋白质浓度.注意:由于各种蛋白质含有不同量的酪氨酸和苯丙氨酸,显色的深浅往往随不同的蛋白质而变化.因而本测定法通常只适用于测定蛋白质的相对浓度（相对于标准蛋白质）.四、改良的简易folin—酚试剂法（一）试剂1. 试剂甲：碱性铜试剂溶液中,含0.5n naoh、10%na2co3、0.1%酒石酸钾和0.05%硫酸铜,配制时注意硫酸铜用少量蒸馏水溶解后,最后加入.2. 试剂乙：与前面的基本法相同.临用时加蒸馏水稀释8倍.3. 标准蛋白质溶液：同基本法.（二）操作步骤测定标准曲线与样品溶液的操作方法与基本法相同.只是试剂甲改为1毫升,室温放置10分钟后,试剂乙改为4毫升.在55℃恒温水浴中保温5分钟.用流动水冷却后,在660nm下测定其吸光度值.改良的快速简易法,可获得与 folin—酚试剂法（即lowry基本法）相接近的结果. 五、考马斯亮兰法（bradford法）（一）实验原理双缩脲法（biuret法）和folin—酚试剂法（lowry法）的明显缺点和许多限制,促使科学家们去寻找更好的蛋白质溶液测定的方法.1976年由bradford建立的考马斯亮兰法（bradford法）,是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的.这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点,因而正在得到广泛的应用.这一方法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法.考马斯亮兰g-250染料,在酸性溶液中与蛋白质结合,使染料的最大吸收峰的位置（lmax）,由465nm变为595nm,溶液的颜色也由棕黑色变为兰色.经研究认为,染料主要是与蛋白质中的碱性氨基酸（特别是精氨酸）和芳香族氨基酸残基相结合.在595nm下测定的吸光度值a595,与蛋白质浓度成正比.bradford法的突出优点是：（1）灵敏度高,据估计比lowry法约高四倍,其最低蛋白质检测量可达1mg.这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大,蛋白质－染料复合物有更高的消光系数,因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比lowry法要大的多.（2）测定快速、简便,只需加一种试剂.完成一个样品的测定,只需要5分钟左右.由于染料与蛋白质结合的过程,大约只要2分钟即可完成,其颜色可以在1小时内保持稳定,且在5分钟至20分钟之间,颜色的稳定性最好.因而完全不用像lowry法那样费时和严格地控制时间.（3）干扰物质少.如干扰lowry法的k+、na+、mg2+离子、tris缓冲液、糖和蔗糖、甘油、巯基乙醇、edta等均不干扰此测定法.此法的缺点是：（1）由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同,因此bradford法用于不同蛋白质测定时有较大的偏差,在制作标准曲线时通常选用 g—球蛋白为标准蛋白质,以减少这方面的偏差.（2）仍有一些物质干扰此法的测定,主要的干扰物质有：去污剂、 triton x-100、十二烷基硫酸钠（sds）和0.1n的naoh.（如同0.1n的酸干扰lowary法一样）.（3）标准曲线也有轻微的非线性,因而不能用beer定律进行计算,而只能用标准曲线来测定未知蛋白质的浓度.（二）试剂与器材1. 试剂：（1）标准蛋白质溶液,用 g—球蛋白或牛血清清蛋白(bsa),配制成1.0mg/ml和0.1mg/ml的标准蛋白质溶液.（2）考马斯亮兰g—250染料试剂：称100mg考马斯亮兰g—250,溶于50ml 95%的乙醇后,再加入120ml 85%的磷酸,用水稀释至1升.2. 器材：（1）可见光分光光度计（2）旋涡混合器（3）试管16支（三）操作方法1. 标准方法（1）取16支试管,1支作空白,3支留作未知样品,其余试管分为两组按表中顺序,分别加入样品、水和试剂,即用1.0mg/ml的标准蛋白质溶液给各试管分别加入：0、0.01、0.02、0.04、0.06、0.08、0.1ml,然后用无离子水补充到0.1ml.最后各试管中分别加入5.0ml考马斯亮兰g—250试剂,每加完一管,立即在旋涡混合器上混合（注意不要太剧烈,以免产生大量气泡而难于消除）.未知样品的加样量见下表中的第8、9、10管.（2）加完试剂2-5分钟后,即可开始用比色皿,在分光光度计上测定各样品在595nm处的光吸收值a595,空白对照为第1号试管,即0.1mlh2o加5.0mlg—250试剂.注意：不可使用石英比色皿（因不易洗去染色）,可用塑料或玻璃比色皿,使用后立即用少量95%的乙醇荡洗,以洗去染色.塑料比色皿决不可用乙醇或丙酮长时间浸泡.考马斯亮兰法实验表管 号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10标准蛋白质 0 0.01 0.02 0.04 0.06 0.08 0.10 (1.0mg/ml)未知蛋白质 0.02 0.04 0.06 (约1.0mg/ml)蒸馏水 0.1 0.09 0.08 0.06 0.04 0.02 0 0.08 0.06 0.04 考马斯亮蓝g－250试剂 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 每管中的蛋白质量（mg）光吸收值（a595）（3）用标准蛋白质量（mg）为横座标,用吸光度值a595为纵座标,作图,即得到一条标准曲线.由此标准曲线,根据测出的未知样品的a595值,即可查出未知样品的蛋白质含量.0.5mg牛血清蛋白/ml溶液的a595约为0.50.2. 微量法当样品中蛋白质浓度较稀时（10－100mg/ml）,可将取样量（包括补加的水）加大到0.5ml或1.0ml, 空白对照则分别为0.5ml或1.0ml h2o, 考马斯亮蓝g－250试剂仍加5.0ml, 同时作相应的标准曲线,测定595nm的光吸收值.0.05mg牛血清蛋白/ml溶液的a595约为0.29.六、紫外吸收法蛋白质分子中,酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,使蛋白质具有吸收紫外光的性质.吸收高峰在280nm处,其吸光度（即光密度值）与蛋白质含量成正比.此外,蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比.利用一定波长下,蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系,可以进行蛋白质含量的测定.紫外吸收法简便、灵敏、快速,不消耗样品,测定后仍能回收使用.低浓度的盐,例如生化制备中常用的（nh4）2so4等和大多数缓冲液不干扰测定.特别适用于柱层析洗脱液的快速连续检测,因为此时只需测定蛋白质浓度的变化,而不需知道其绝对值.此法的特点是测定蛋白质含量的准确度较差,干扰物质多,在用标准曲线法测定蛋白质含量时,对那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异大的蛋白质,有一定的误差.故该法适于用测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质.若样品中含有嘌呤、嘧啶及核酸等吸收紫外光的物质,会出现较大的干扰.核酸的干扰可以通过查校正表,再进行计算的方法,加以适当的校正.但是因为不同的蛋白质和核酸的紫外吸收是不相同的,虽然经过校正,测定的结果还是存在一定的误差.此外,进行紫外吸收法测定时,由于蛋白质吸收高峰常因ph的改变而有变化,因此要注意溶液的ph值,测定样品时的ph要与测定标准曲线的ph相一致.下面介绍四种紫外吸收法：1. 280nm的光吸收法因蛋白质分子中的酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸在280nm处具有最大吸收,且各种蛋白质的这三种氨基酸的含量差别不大,因此测定蛋白质溶液在280nm处的吸光度值是最常用的紫外吸收法.测定时,将待测蛋白质溶液倒入石英比色皿中,用配制蛋白质溶液的溶剂（水或缓冲液）作空白对照,在紫外分光度计上直接读取280nm的吸光度值a280.蛋白质浓度可控制在0.1～1.0mg/ml左右.通常用1cm光径的标准石英比色皿,盛有浓度为1mg/ml的蛋白质溶液时,a280约为1.0左右.由此可立即计算出蛋白质的大致浓度.许多蛋白质在一定浓度和一定波长下的光吸收值（a1％1cm）有文献数据可查,根据此光吸收值可以较准确地计算蛋白质浓度.下式列出了蛋白质浓度与（a1％1cm）值（即蛋白质溶液浓度为1%,光径为1cm时的光吸收值）的关系.文献值a1％1cm,?称为百分吸收系数或比吸收系数.蛋白质浓度 = (a280′10 )/ a1％1cm,280nm (mg/ml)(q 1%浓度?10mg/ml)例：牛血清清蛋白 ： a1％1cm=6.3 (280nm)溶菌酶 ： a1％1cm=22.8 (280nm)若查不到待测蛋白质的a1％1cm值,则可选用一种与待测蛋白质的酪氨酸和色氨酸含量相近的蛋白质作为标准蛋白质,用标准曲线法进行测定.标准蛋白质溶液配制的浓度为1.0mg/ml.常用的标准蛋白质为牛血清清蛋白（bsa）.标准曲线的测定：取6支试管,按下表编号并加入试剂：管号 1 2 3 4 5 6 bsa（1.0mg/ml） 0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0h2o 5.0 4.0 3.0 2.0 1.0 0a280用第1管为空白对照,各管溶液混匀后在紫外分光光度计上测定吸光度a280,以a280为纵座标,各管的蛋白质浓度或蛋白质量（mg）为横座标作图,标准曲线应为直线,利用此标准曲线,根据测出的未知样品的a280值,即可查出未知样品的蛋白质含量,也可以用2至6管a280值与相应的试管中的蛋白质浓度计算出该蛋白质的a1％1cm,280nm2. 280nm和260nm的吸收差法核酸对紫外光有很强的吸收,在280nm处的吸收比蛋白质强10倍（每克）,但核酸在260nm处的吸收更强,其吸收高峰在260nm附近.核酸260nm处的消光系数是280nm处的2倍,而蛋白质则相反,280nm紫外吸收值大于260nm的吸收值.通常：纯蛋白质的光吸收比值：a280/a260 ? 1.8纯核酸的光吸收比值： a280/a260 ? 0.5含有核酸的蛋白质溶液,可分别测定其a280和a260,由此吸收差值,用下面的经验公式,即可算出蛋白质的浓度.蛋白质浓度(mg/ml)=1.45×a280－0.74×a260 此经验公式是通过一系列已知不同浓度比例的蛋白质（酵母烯醇化酶）和核酸（酵母核酸）的混合液所测定的数据来建立的.3. 215nm与225nm的吸收差法蛋白质的稀溶液由于含量低而不能使用280nm的光吸收测定时,可用215nm与225nm吸收值之差,通过标准曲线法来测定蛋白质稀溶液的浓度.用已知浓度的标准蛋白质,配制成20～100 mg/ml的一系列5.0ml的蛋白质溶液,分别测定215nm和225nm的吸光度值,并计算出吸收差：吸收差d= a215 －a225以吸收差d为纵座标,蛋白质浓度为横座标,绘出标准曲线.再测出未知样品的吸收差,即可由标准曲线上查出未知样品的蛋白质浓度.本方法在蛋白质浓度20~100mg/ml范围内,蛋白质浓度与吸光度成正比,nacl、（nh4）2so4以及0.1m磷酸、硼酸和tris等缓冲液,都无显著干扰作用,但是0.1n naoh, 0.1m乙酸、琥珀酸、邻苯二甲酸、巴比妥等缓冲液的215nm光吸收值较大,必须将其浓度降到0.005m以下才无显著影响.4. 肽键测定法蛋白质溶液在238nm处的光吸收的强弱,与肽键的多少成正比.因此可以用标准蛋白质溶液配制一系列50～500mg/ml已知浓度的5.0ml蛋白质溶液,测定238nm的光吸收值a238,以a238为纵座标, 蛋白质含量为横座标,绘制出标准曲线.未知样品的浓度即可由标准曲线求得.进行蛋白质溶液的柱层析分离时,洗脱液也可以用238nm检测蛋白质的峰位.本方法比280nm吸收法灵敏.但多种有机物,如醇、酮、醛、醚、有机酸、酰胺类和过氧化物等都有干扰作用.所以最好用无机盐,无机碱和水溶液进行测定.若含有有机溶剂,可先将样品蒸干,或用其他方法除去干扰物质,然后用水、稀酸和稀碱溶解后再作测定.

fly[flai]Frye[frai]区别很大啊！一个是fu"le~ai~itheotheroneisfu"ru~ai~i英文名叫什么的都有，有叫花名的，有叫水果名。Frye一般是姓，但没人规定不可以是名啊。还有James，Green。。。都是叫名叫姓的都有

包扎、扎风筝、扎辫子。

　　艾里奥特，一个充满着幻想的小男孩，有个老想着作弄他的哥哥和一个还不太会讲话的小妹妹歌蒂，兄妹三个和不久前离异的母亲住在一起。由于工作忙碌加上心情糟糕，所以母亲时常会忽视和孩子们的关爱和沟通。 　　E.T.，一个被同伴不小心留在地球上的小外星人，却幸运地被善良的小艾里奥特发现，他瞒着妈妈偷偷收留下了孤独无助的E.T.，给它吃巧克力，还把它介绍给自己的狗狗、哥哥和妹妹，虽然语言上E.T.和艾里奥特还无法沟通，但是他们的感情却跨越了一切外在的障碍联系到一起，虽然他们的外型有如此大的差异，但却都有着一颗善良敏感、渴望着爱和呵护的童心。在他们之间，建立起一种奇妙的心灵感应，E.T.难过的时候，艾里奥特也会感觉忧郁，E.T.病了，艾里奥特也跟着不舒服。孤独的E.T.和孤独的艾里奥特成了最好的朋友，于是他们都不再孤独。 　　直到有一天，E.T.不可避免地被大人们发现了。一个活着的外星人！这还得了！于是人们如临大敌，警察、军队、FBI……蜂拥而至，大人们不顾孩子们的苦苦哀求，无情地抓走了E.T.，根本无视此时的它是那么的无辜、脆弱和绝望，他们只想把这个外星人当成千载难逢的珍贵试验品进行研究。 　　艾里奥特在哥哥和伙伴们的帮助下终于从研究中心救出了九死一生的E.T.，不料大人们根本没有放过他们，沿路设下重重关卡意图拦截这支“营救小队”，就在大人的眼皮底下，E.T.展现了它不可思议的神奇力量，带着大家摆脱了“包围圈”。 　　在当初发现E.T.的树林里，来接E.T.回去的外星飞船赶来了，一直念念不忘要回家的E.T.终于要走了，艾里奥特和恋恋不舍地和他的外星朋友告别，望着远去的飞船划破天际艳丽的夕阳，艾里奥特知道，他将会永远永远记住这段短暂却美丽的友谊……

梵克雅宝的五花手链是一款非常出名的经典款手链了，这个系列的手链有着很多种颜色可以选择，戴在手腕上面特别的好看，下面来给大家介绍下梵克雅宝五花手链的尺寸吧。 梵克雅宝五花手链尺寸 梵克雅宝五花手链上面四叶草的尺寸大小是直径15mm。 18K金和珍珠贝母组合而成的四叶草五花手链，也是经典百搭的款式，这款手链可以用作手腕上的饰品佩戴，也可以当作幸运符，展示女人聪明的姿态。梵克雅宝五花手链长度 梵克雅宝五花手链的手腕长度是18cm。 每一款Van Cleef & Arpels梵克雅宝作品均以手工制作。因此，每件作品的宝石克拉数和数量或会有细微的差异。梵克雅宝五花手链详情 梵克雅宝Alhambra系列自面世以来一直深受全球女性顾客喜爱 。这个象征幸运、健康、财富和爱情的四叶草图案不仅是梵克雅宝的标志性设计元素，同时也成为珠宝界最具辨识度的系列之一。 Vintage Alhambra系列和Sweet Alhambra系列始于1968年，如今Van Cleef & Arpels为这两个系列加入了全新的色彩：玫瑰金。玫瑰金的处理工艺非常微妙，需要特定的精湛工艺。 Van Cleef & Arpels的Mains D"Or手工匠编织精致的链子，以相同的间距串起数个珍珠轮廓玫瑰金图案。几十年来，Van Cleef & Arpels一直采用金、银、铜组合成一种特殊合金。因为铜的存在让这种贵重合金透射出微妙的粉红色光泽，令珠宝散发出温暖的光芒。梵克雅宝五花手链日常保养 1 .洗澡和睡觉的时候最好不要佩戴。 2 .游泳的时候不要佩戴，尤其是海水。 3 .当K金手链勾到头发或者是衣服等其它物品时，千万不要用力拉扯，用力过猛会导致断掉。 4 .千万不要直接与硫磺或者是含有化学物质的化妆品等接触，会产生化学反应。 5 .如有需要同时佩戴其它贵金属首饰的时候，要避免碰撞。 6 .每次佩戴完后，要用棉布或面纸拭擦表面，清除水分和污垢，然后放入首饰盒中。

【球队简介】英文名：New York Knicks 繁体名：纽约人 粤语:纽约力博队主场所在城市：纽约州 纽约市主体育馆：麦迪逊广场花园(Madison Square Garde) 可容纳人数：19763人 加入NBA时间：1946年 获总冠军次数：2 现任主教练：伊塞亚-托马斯（Isiah Thomas)官方网站：http://www.nba.com/knicks/回顾NBA历史，自1946年加入美洲篮球协会 (BAA，NBA的前身)的纽约尼克斯虽称不上是一支超级强队，却无疑是一支特点鲜明、人才辈出的球队。从弗雷泽（Walter Frazier）到尤因（Patrick Ewing），从乔-雷普奇（Joe Lapchick）到帕特-莱利（Pat Rilley），尼克斯为美国篮球殿堂奉献了多名名帅、巨星。乔-雷普奇教练是第一次尼克斯盛世的缔造者，自他入主后，球队成绩节节上升，特别是在1950-1953的三个赛季中，他带领球队连续三次杀入NBA总决赛。虽然没能取得一次总冠军头衔，但雷普奇的执教才华却是有目共睹。70年代，由威廉-霍斯曼（William Holzman）挂帅、威利斯-里德领军的尼克斯队在1970和1973赛季总决赛中两次击败湖人，里德本人也荣膺1969-70赛季MVP和1970与1973两年的总决赛MVP。随着里德等球星的淡出，尼克斯队逐渐远离冠军竞争行列。直到80年代末和90年代初，随着尤因（Patrick Ewing）和金牌教练帕特-莱利（Pat Riley）的相继到来才真正找回强队的感觉，但他们在东部季后赛连续四次和公牛队的交锋中均铩羽而归。进入21世纪，纽约尼克斯队内发生惊人巨变，虽然也算是兵强马壮，但期待他们在近期再创以前的辉煌则几乎是不可能的了。纽约尼克斯队1946年加入美洲篮球协会(BAA，NBA的前身)，虽称算不上超级强队，但特点鲜明、人才辈出。从尼克斯走出了多名入选美国篮球名人堂的名帅巨星，这其中包括乔-雷普奇、帕特-莱利、沃尔特-弗雷泽和帕特里克-尤因。乔-雷普奇教练创造了尼克斯的第一次辉煌。自他担任主帅以来，球队成绩不断攀升，常规赛胜利从1947年的26场越升为1949年的40场。在1950-1953的三个赛季中，他率队连续三次杀入总决赛。虽然没能夺得一次总冠军，但雷普奇的执教水平得到了众人的尊崇。后来乔-雷普奇和他麾下的迈克奎尔等球星都被入选了美国篮球名人堂...。【现役球员】3 斯蒂芬-马布里 Stephon Marbury 控球后卫 1728万 4年 7600万，2003/10/7签，2009夏到期 1 史蒂夫-弗朗西斯 Steve Francis 控球后卫 1507万 6年 8500万，2002/8/26签，2009夏到期，2008夏球员选项 34 埃迪-科里 Eddy Curry 中锋 820万 6年 6000万，2005/10/4签，2011夏到期，2009夏球员选项 11 贾马尔-克劳福德 Jamal Crawford 得分后卫 / 控球后卫 720万 7年 5592万，2004/8/5签，2011夏到期，2010夏球员选项 23 昆廷-理查德森 Quentin Richardson 得分后卫 700万 6年 4350万，2004/7/28签，2010夏到期 31 马里克-罗斯 Malik Rose 大前锋 655万 7年 4200万，2002/7/26签，2009夏到期，07&08球员选项 13 杰罗姆-詹姆斯 Jerome James 中锋 540万 5年 3000万，2005/8/2签，2010夏到期 20 贾瑞德-杰弗里斯 Jared Jeffries 大前锋 / 小前锋 520万 5年 3000万，2006/8/8签，2011夏到期 7 钱宁-弗莱 Channing Frye 中锋 233万 4年 1014万，2005/7/1签，2009夏到期 4 内特-罗宾逊 Nate Robinson 控球后卫 119万 4年 558万，2005/7/1签，2009夏到期 32 雷纳多-巴尔克曼 Renaldo Balkman 大前锋 / 小前锋 119万 4年 587万，2006/7/6签，2010夏到期，08&09球队选项 26 凯文-卡托 Kelvin Cato 中锋 / 大前锋 107万 1年 底薪，2006/10/26签，2007夏到期 42 大卫-李 David Lee 大前锋 93万 4年 456万，2005/7/1签，2009夏到期 25 马蒂-科林斯 Mardy Collins 控球后卫 / 得分后卫 90万 4年 477万，2006/7/6签，2010夏到期，08&09球队选项 5 兰多夫-莫里斯 Randolph Morris 中锋/大前锋 80万 2年 160万，2007/3/23签，2009夏到期【退役球员】(10) 沃尔特-弗雷泽（Walter Frazier）(12) 巴奈特（Dick Barnett）(15) 埃尔-门罗（Earl Monroe）(15) 迈克奎尔（Dick McGuire）(19) 威利斯-里德（Willis Reed）(22) 德布斯切尔（Dave DeBusschere）(24) 布拉德利（Bill Bradley）(613) 霍斯曼（Red Holzman）【历史成绩】赛 季 胜 负 胜率 2007-08 23 59 .280 2006-07 33 49 .402 2005-06 23 59 .2802004-05 33 49 .4022003-04 39 43 .4762002-03 37 45 .4512001-02 30 52 .3662000-01 48 34 .5851999-00 50 32 .6101998-99 27 23 .5401997-98 43 39 .5241996-97 57 25 .6951995-96 47 35 .5731994-95 55 27 .6711993-94 57 25 .6951992-93 60 22 .7321991-92 51 31 .6221990-91 39 43 .4761989-90 45 37 .5491988-89 52 30 .6341987-88 38 44 .4631986-87 24 58 .2931985-86 23 59 .2801984-85 24 58 .2931983-84 47 35 .5731982-83 44 38 .5371981-82 33 49 .4021980-81 50 32 .6101979-80 39 43 .4761978-79 31 51 .3781977-78 43 39 .5241976-77 40 42 .4881975-76 38 44 .4631974-75 40 42 .4881973-74 49 33 .5981972-73 57 25 .6951971-72 48 34 .5851970-71 52 30 .6341969-70 60 22 .7321968-69 54 28 .6591967-68 43 39 .5241966-67 36 45 .4441965-66 30 50 .3751964-65 31 49 .3881963-64 22 58 .2751962-63 21 59 .2631961-62 29 51 .3631960-61 21 58 .2661959-60 27 48 .3601958-59 40 32 .5561957-58 35 37 .4861956-57 36 36 .5001955-56 35 37 .4861954-55 38 34 .5281953-54 44 28 .6111952-53 47 23 .6711951-52 37 29 .5611950-51 36 30 .5451949-50 40 28 .5881948-49 32 28 .5331947-48 26 22 .5421946-47 33 27 .550 【2006/2007赛季球队技术统计】排名 球队名 出场 胜 负 投篮 三分 罚球 篮板 助攻 盖帽 抢断 平均得分 进 总 率 进 总 率 进 总 率 16 纽约尼克斯 82 33 49 2774 6086 45.6% 452 1303 34.7% 1615 2262 71.4% 3381 1464 246 513 97.5 历史1946-今 纽约尼克斯队(New York Knicks) 获总冠军年份：1970年、1973年 辉煌奇迹，黑八奇迹：1998-1999缩水赛季，纽约尼克斯以东部第八进入季后赛，对阵宿敌迈阿密热火队。在这个系列赛中，发生了著名的范甘迪抱莫宁大腿事件，尼克斯和热火的比赛被媒体炒得火热，而比赛也如人们预想中的一样激烈，首战尼克斯在热火主场以95-75大胜20分，给了踌躇满志的热火当头一棒。第二场热火勉强将总比分扳平，但在第三场尼克斯以97-73再度胜出热火24分之多，率先到达赛点。第四场，热火总算找回状态，87-72大胜尼克斯15分，将比赛带入第五场生死战。第五场，双方致力于防守，每一次得分都十分困难，终场前4.5秒，热火77-76领先1分，尼克斯发动进攻，“中投王”阿兰·休斯敦佯装跳投，待骗过热火的防守后径直从右侧带球向篮下冲去，随后采用了平时绝少使用的抛射，球先是碰到了篮筐然后弹起又碰到了篮板，最终在全场球迷的注视下缓缓的进入了篮筐，78-77！尼克斯凭借休斯敦这计不可思议的绝杀以3-2的总比分扑灭热火，昂首晋级。如此振奋人心的胜利让尼克斯上下信心大增，随后他们4:0横扫亚特兰大老鹰，并在东部决赛中4:2斩落印第安那步行者夺得东部冠军，跻身总决赛。但是创造“黑八奇迹”的代价是巨大的，尼克斯早就伤痕累累，且因为“大猩猩”尤因脚踵受伤无法上场，双方禁区力量失衡带给马刺压倒性的庞大优势。最终尼克斯1:4不敌“双塔”大卫·罗宾逊和蒂姆·邓肯领衔的圣安东尼奥马刺，但比起掘金那次的黑八奇迹，尼克斯又将奇迹做了一次升级！纽约尼克斯队成为了NBA历史上第一支以第八号种子身份闯进总决赛的队伍。

爱问知识人

看亲要什么号的，四叶草项链有大中小三个号的。

是一个韩国组合的歌，这个组合的名字叫Biuret。该歌曲的名字叫《ifIhave》出自专辑《Deamscometrue》歌词：IfIhavebeautyvoiceIcouldsingasongforyouIfIhavebeautyheartIcouldwriteapoemforyouDon"tforgetthesmilesDon"tforgetthetimewe"vesharedDon"tforgetthepastDon"tforgetthetimewe"vesharedIfIhavebeautyeyes,IcouldsmileforyouIfIhavebeautysoulIcoulddanceforyouDon"tforgetthesmilesDon"tforgetthetimewe"vesharedDon"tforgetthepastDon"tforgetthetimewe"vesharedDon"tforgetthesmilesDon"tforgetthepastDon"tforgetthetimewe"vesharedDon"tforgetthesmilesDon"tforgetthepastDon"tforgetthetimewe"vesharedWhatIonlycoulddoforyouisRememberthosememoriesWhatIonlycoulddoforyouisRememberthosememoriesDon"tforgetthesmilesDon"tforgetthepastDon"tforgetthetimewe"vesharedDon"tforgetthesmilesDon"tforgetthepastDon"tforgetthetimewe"vesharedDon"tforgetthesmilesDon"tforgetthepastDon"tforgetthetimewe"vesharedDon"tforgetthesmilesDon"tforgetthepastDon"tforgetthetimewe"veshared

梵克雅宝四叶草项链分3个号分别为小号、中号、大号小号9mm适合叠戴中号15mm这个尺寸佩戴效果非常棒，所以喜欢的人特别多！大号25mm这个就厉害了、一般人要比较时尚潮流的人佩戴效果非常好！梵克雅宝四叶草项链链条长度为42cm，长项链长度为90cm。吊坠共有四种尺寸：Sweet Alhambra的长宽为9.5mm，Vintage Alhambra的长宽为15mm，Pure Alhambra的长宽为16mm，Magic Alhambra的长宽为26mm。

现在农田使用复合肥越来越多了，但是如果使用不当很有可能产生“缩二脲”，而“缩二脲”含量过高则会导致烧苗、烧根，造成肥害。那么化肥中缩二脲对作物有哪些危害呢？下面小编为大家介绍一下吧。什么是缩二脲缩二脲，英文名称为Biuret，中文别名为氨缩脲，CAS号为108-19-0，分子式为C2H5N3O2，为白色长片结晶体，需储存于阴凉、通风的地方，用作医药中间体、生长、发泡剂、制漆等，避免与强氧化剂、碱接触，带有刺激性，避免直接接触。缩二脲含量超过1%时，不能做种肥，苗肥和叶面肥，其他施用期的尿素含量也不宜过多或过于集中。实验室里可将尿素、磷酸氢二钠溶于水，于150～160℃下反应2h，然后倾入冷水中过夜，分离出结晶，即为缩二脲。农业上复合肥的使用越来越多，但是复合肥的生产过程中如有处理不当，如高温时间持续过长，很可能会产生“缩二脲”，而“缩二脲”含量过高则会导致烧苗、烧根，造成肥害。缩二脲对作物的危害1、缩二脲烧苗。很多使用了尿素肥的农民朋友经常抱怨的是自己的化肥浓度太大，实则不然，真正的原因是缩二脲的含量过高。当使用向叶面的化肥的时候缩二脲含量超过百分之零点五即会造成不良影响。2、防治方法：尽量不要再在地表施肥。一般情况下，如果尿素肥是洒在地表的话，至少要4-5天转化过程才能被作物吸收，而且其中的铵化过程中大部分有效的氮都被浪费掉了，真正能被利用的氮素不会超过百分之三十。所以尽量在施肥过程中减少直接在地表施肥的量。3、不要把尿素作种肥。只要尿素进入种子和幼苗中其中的缩二脲就会使蛋白质变性，影响种子发芽和幼苗生长，因此尽量不要把尿素作为脆弱的种子的肥料。如何补救缩二脲带来的危害防治方法：尽量不要再在地表施肥。一般情况下，如果尿素肥是洒在地表的话，至少要4-5天转化过程才能被作物吸收，而且其中的铵化过程中大部分有效的氮都被浪费掉了，真正能被利用的氮素不会超过百分之三十。所以尽量在施肥过程中减少直接在地表施肥的量。不要把尿素作种肥。只要尿素进入种子和幼苗中其中的缩二脲就会使蛋白质变性，影响种子发芽和幼苗生长，因此尽量不要把尿素作为脆弱的种子的肥料。以上便是小编为大家提供的缩二脲对作物的危害有哪些的相关介绍，希望对你有所帮助。想了解更多农资市场行情，可以关注：微信公众号：huobao3456tv了解更多，关注之后也可以留言回复你想了解的行业信息。

负值肯定是有问题的，在使用分光光度计前有没有校零

阿尔汉布拉宫（Alhambra Palace），又名艾勒哈卜拉宫、阿尔汗布拉宫，是西班牙的著名故宫，为中世纪摩尔人在西班牙建立的格拉纳达王国的王宫。“阿尔汗布拉”，阿拉伯语意为“红堡”。为摩尔人留存在西班牙所有古迹中的精华，有“宫殿之城”和“世界奇迹”之称。始建于13世纪阿赫马尔王及其继承人统治期间。1492年摩尔人被逐出西班牙后，建筑物开始荒废。1828年在斐迪南七世资助下，经建筑师何塞·孔特雷拉斯与其子、孙三代进行长期的修缮与复建，才恢复原有风貌。格拉纳达的阿尔汉布拉宫、赫内拉利费以及阿尔贝辛区建立于公元8世纪，历史上作为政治和文化中心，为格拉纳达省省会。格拉纳达位于安达卢西亚省北部， 内华达山脚下，附近是灌溉便利的平原。古城盘踞在三座小山之上，游人可以从多个角度欣赏古城景色。阿尔汉布拉宫就坐落在山上的最高处。宫殿建于13、14世纪，它是摩尔人所建。是回教艺术在西班牙的瑰宝。中世纪，摩尔人统治者在西班牙建立的格拉纳达王国，这里就是他们当时的宫殿。它建筑在海拔730米高的地形险要的山丘上。宫殿的围墙东西长200米，南北长200米，高达30米。

常用紫外分光光度法测定蛋白质含量。以下引用：6种方法测定蛋白质含量一、微量凯氏（kjeldahl）定氮法样品与浓硫酸共热。含氮有机物即分解产生氨（消化），氨又与硫酸作用，变成硫酸氨。经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。若以甘氨酸为例，其反应式如下： nh2ch2cooh+3h2so4——2co2+3so2+4h2o+nh3 (1) 2nh3+h2so4——(nh4)2so4 (2) (nh4)2so4+2naoh——2h2o+na2so4+2nh3 (3) 反应（1）、(2)在凯氏瓶内完成，反应（3）在凯氏蒸馏装置中进行。为了加速消化，可以加入cuso4作催化剂，k2so4以提高溶液的沸点。收集氨可用硼酸溶液，滴定则用强酸。实验和计算方法这里从略。计算所得结果为样品总氮量，如欲求得 样品中蛋白含量，应将总氮量减去非蛋白氮即得。如欲进一步求得样品中蛋白质的含量，即用样品中蛋白氮乘以6．25即得。二、双缩脲法（biuret法）（一）实验原理双缩脲（nh3conhconh3）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中，双缩脲与cuso4形成紫色络合物，称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。 紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。测定范围为1-10mg蛋白质。干扰这一测定的物质主要有：硫酸铵、tris缓冲液和某些氨基酸等。此法的优点是较快速 ，不同的蛋白质产生颜色的深浅相近，以及干扰物质少。主要的缺点是灵敏度差。因此双缩脲法常用于需要快速，但并不需要十分精确的蛋白质测定。（二）试剂与器材1. 试剂：（1）标准蛋白质溶液：用标准的结晶牛血清清蛋白（bsa）或标准酪蛋白，配制成10mg/ml的标准蛋白溶液，可用bsa浓度1mg/ml的a280为0.66来校正其纯度。如有需要，标准蛋白质还可预先用微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，计算出其纯度，再根据其纯度，称量配制成标准蛋白质溶液。牛血清清蛋白用h2o 或0.9%nacl配制，酪蛋白用0．05n naoh配制。（2）双缩脲试剂：称以1.50克硫酸铜（cuso4u20225h2o）和6.0克酒石酸钾钠（knac4h4o6u20224h2o），用500毫升水溶解，在搅拌下加入300毫升10% naoh溶液，用水稀释到1升，贮存于塑料瓶中（或内壁涂以石蜡的瓶中）。此试剂可长期保存。若贮存瓶中有黑色沉淀出现，则需要重新配制。2. 器材：可见光分光光度计、大试管15支、旋涡混合器等。（三）操作方法1. 标准曲线的测定：取12支试管分两组，分别加入0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0毫升的标准蛋白质溶液，用水补足到1毫升，然后加入4毫升双缩脲试剂。充分摇匀后，在室温（20～25℃）下放置30分钟，于540nm处进行比色测定。用未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照液。取两组测定的平均值，以蛋白质的含量为横座标，光吸收值为纵座标绘制标准曲线。2、样品的测定：取2～3个试管，用上述同样的方法，测定未知样品的蛋白质浓度。注意样品浓度不要超过10mg/ml。三、folin—酚试剂法（lowry法）（一）实验原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法，由于其试剂乙的配制较为困难（现在已可以订购），近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，只是加入了第二种试剂，即folin—酚试剂，以增加显色量，从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产生深兰色的原因是：在碱性条件下，蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物。folin—酚试剂中的磷钼酸盐—磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原，产生深兰色（钼兰和钨兰的混合物）。在一定的条件下，兰色深度与蛋白的量成正比。folin—酚试剂法最早由lowry确定了蛋白质浓度测定的基本步骤。以后在生物化学领域得到广泛的应用。这个测定法的优点是灵敏度高，比双缩脲法灵敏得多，缺点是费时间较长，要精确控制操作时间，标准曲线也不是严格的直线形式，且专一性较差，干扰物质较多。对双缩脲反应发生干扰的离子，同样容易干扰lowry反应。而且对后者的影响还要大得多。酚类、柠檬酸、硫酸铵、tris缓冲液、甘氨酸、糖类、甘油等均有干扰作用。浓度较低的尿素（0.5%），硫酸纳（1%），硝酸纳（1%），三氯乙酸（0.5%），乙醇（5%），乙醚（5%），丙酮（0.5%）等溶液对显色无影响，但这些物质浓度高时，必须作校正曲线。含硫酸铵的溶液，只须加浓碳酸钠—氢氧化钠溶液，即可显色测定。若样品酸度较高，显色后会色浅，则必须提高碳酸钠—氢氧化钠溶液的浓度1～2倍。进行测定时，加folin—酚试剂时要特别小心，因为该试剂仅在酸性ph条件下稳定，但上述还原反应只在ph=10的情况下发生，故当folin一酚试剂加到碱性的铜—蛋白质溶液中时，必须立即混匀，以便在磷钼酸—磷钨酸试剂被破坏之前，还原反应即能发生。此法也适用于酪氨酸和色氨酸的定量测定。此法可检测的最低蛋白质量达5mg。通常测定范围是20~250mg。（二）试剂与器材1.试剂（1）试剂甲：（a）10克 na2co3，2克 naoh和0.25克酒石酸钾钠 （knac4h4o6u20224h2o）。溶解于500毫升蒸馏水中。（b）0.5克硫酸铜（cuso4u20225h2o）溶解于100毫升蒸馏水中，每次使用前，将50份（a）与1份（b）混合，即为试剂甲。（2）试剂乙：在2升磨口回流瓶中，加入100克钨酸钠（na2wo4u20222h2o）,25克钼酸钠（na2moo4u20222h2o）及700毫升蒸馏水，再加50毫升85%磷酸，100毫升浓盐酸，充分混合，接上回流管，以小火回流10小时，回流结束时，加入150克硫 酸 锂（li2so4），50毫升蒸馏水及数滴液体溴，开口继续沸腾15分钟，以便驱除过量的溴。冷却后溶液呈黄色（如仍呈绿色，须再重复滴加液体溴的步骤）。稀释至1升，过滤，滤液置于棕色试剂瓶中保存。使用时用标准naoh滴定，酚酞作指示剂，然后适当稀释，约加水1倍，使最终的酸浓度为1n左右。（3）标准蛋白质溶液: 精确称取结晶牛血清清蛋白或 g—球蛋白，溶于蒸馏水，浓度为250mg/ml左右。牛血清清蛋白溶于水若混浊，可改用0.9%nacl溶液。2. 器材（1）可见光分光光度计（2）旋涡混合器（3）秒表（4）试管16支（三）操作方法1. 标准曲线的测定：取16支大试管，1支作空白，3支留作未知样品，其余试管分成两组，分别加入0，0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0毫升标准蛋白质溶液（浓度为250mg/ml）。用水补足到1.0毫升，然后每支试管加入5毫升试剂甲，在旋涡混合器上迅速混合，于室温（20～25℃）放置10分钟。再逐管加入0.5毫升试剂乙（folin—酚试剂），同样立即混匀。这一步混合速度要快，否则会使显色程度减弱。然后在室温下放置30分钟，以未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照，于700nm处测定各管中溶液的吸光度值。以蛋白质的量为横座标，吸光度值为纵座标，绘制出标准曲线。注意：因lowry反应的显色随时间不断加深，因此各项操作必须精确控制时间，即第1支试管加入5毫升试剂甲后，开始计时，1分钟后，第2支试管加入5毫升试剂甲，2分钟后加第3支试管，余此类推。全部试管加完试剂甲后若已超过10分钟，则第1支试管可立即加入0.5毫升试剂乙，1分钟后第2支试管加入0.5毫升试剂乙，2分钟后加第3支试管，余此类推。待最后一支试管加完试剂后，再放置30分钟，然后开始测定光吸收。每分钟测一个样品。进行多试管操作时，为了防止出错，每位学生都必须在实验记录本上预先画好下面的表格。表中是每个试管要加入的量（毫升），并按由左至右，由上至下的顺序，逐管加入。最下面两排是计算出的每管中蛋白质的量（微克）和测得的吸光度值。folin—酚试剂法实验表管号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10标准蛋白质 0 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 （250mg/ml） 未知蛋白质 0.2 0.4 0.6（约250mg/ml）蒸馏水 1.0 0.9 0.8 0.6 0.4 0.2 0 0.8 0.6 0.4试剂甲 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0试剂乙 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5每管中蛋白质的量（mg）吸光度值（a700） 2. 样品的测定：取1毫升样品溶液（其中约含蛋白质20~250微克），按上述方法进行操作，取1毫升蒸馏水代替样品作为空白对照。通常样品的测定也可与标准曲线的测定放在一起，同时进行。即在标准曲线测定的各试管后面，再增加3个试管。如上表中的8、9、10试管。根据所测样品的吸光度值，在标准曲线上查出相应的蛋白质量，从而计算出样品溶液的蛋白质浓度。注意:由于各种蛋白质含有不同量的酪氨酸和苯丙氨酸，显色的深浅往往随不同的蛋白质而变化。因而本测定法通常只适用于测定蛋白质的相对浓度（相对于标准蛋白质）。四、改良的简易folin—酚试剂法（一）试剂1. 试剂甲：碱性铜试剂溶液中，含0.5n naoh、10%na2co3、0.1%酒石酸钾和0.05%硫酸铜，配制时注意硫酸铜用少量蒸馏水溶解后，最后加入。2. 试剂乙：与前面的基本法相同。临用时加蒸馏水稀释8倍。3. 标准蛋白质溶液：同基本法。（二）操作步骤测定标准曲线与样品溶液的操作方法与基本法相同。只是试剂甲改为1毫升，室温放置10分钟后，试剂乙改为4毫升。在55℃恒温水浴中保温5分钟。用流动水冷却后，在660nm下测定其吸光度值。改良的快速简易法，可获得与 folin—酚试剂法（即lowry基本法）相接近的结果。 五、考马斯亮兰法（bradford法）（一）实验原理双缩脲法（biuret法）和folin—酚试剂法（lowry法）的明显缺点和许多限制，促使科学家们去寻找更好的蛋白质溶液测定的方法。1976年由bradford建立的考马斯亮兰法（bradford法），是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点，因而正在得到广泛的应用。这一方法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法。考马斯亮兰g-250染料，在酸性溶液中与蛋白质结合，使染料的最大吸收峰的位置（lmax），由465nm变为595nm，溶液的颜色也由棕黑色变为兰色。经研究认为，染料主要是与蛋白质中的碱性氨基酸（特别是精氨酸）和芳香族氨基酸残基相结合。在595nm下测定的吸光度值a595，与蛋白质浓度成正比。bradford法的突出优点是：（1）灵敏度高，据估计比lowry法约高四倍，其最低蛋白质检测量可达1mg。这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大，蛋白质－染料复合物有更高的消光系数，因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比lowry法要大的多。（2）测定快速、简便，只需加一种试剂。完成一个样品的测定，只需要5分钟左右。由于染料与蛋白质结合的过程，大约只要2分钟即可完成，其颜色可以在1小时内保持稳定，且在5分钟至20分钟之间，颜色的稳定性最好。因而完全不用像lowry法那样费时和严格地控制时间。（3）干扰物质少。如干扰lowry法的k+、na+、mg2+离子、tris缓冲液、糖和蔗糖、甘油、巯基乙醇、edta等均不干扰此测定法。此法的缺点是：（1）由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同，因此bradford法用于不同蛋白质测定时有较大的偏差，在制作标准曲线时通常选用 g—球蛋白为标准蛋白质，以减少这方面的偏差。（2）仍有一些物质干扰此法的测定，主要的干扰物质有：去污剂、 triton x-100、十二烷基硫酸钠（sds）和0.1n的naoh。（如同0.1n的酸干扰lowary法一样）。（3）标准曲线也有轻微的非线性，因而不能用beer定律进行计算，而只能用标准曲线来测定未知蛋白质的浓度。（二）试剂与器材1. 试剂：（1）标准蛋白质溶液，用 g—球蛋白或牛血清清蛋白(bsa)，配制成1.0mg/ml和0.1mg/ml的标准蛋白质溶液。（2）考马斯亮兰g—250染料试剂：称100mg考马斯亮兰g—250，溶于50ml 95%的乙醇后，再加入120ml 85%的磷酸，用水稀释至1升。2. 器材：（1）可见光分光光度计（2）旋涡混合器（3）试管16支（三）操作方法1. 标准方法（1）取16支试管，1支作空白，3支留作未知样品，其余试管分为两组按表中顺序，分别加入样品、水和试剂，即用1.0mg/ml的标准蛋白质溶液给各试管分别加入：0、0.01、0.02、0.04、0.06、0.08、0.1ml，然后用无离子水补充到0.1ml。最后各试管中分别加入5.0ml考马斯亮兰g—250试剂，每加完一管，立即在旋涡混合器上混合（注意不要太剧烈，以免产生大量气泡而难于消除）。未知样品的加样量见下表中的第8、9、10管。（2）加完试剂2-5分钟后，即可开始用比色皿，在分光光度计上测定各样品在595nm处的光吸收值a595，空白对照为第1号试管，即0.1mlh2o加5.0mlg—250试剂。注意：不可使用石英比色皿（因不易洗去染色），可用塑料或玻璃比色皿，使用后立即用少量95%的乙醇荡洗，以洗去染色。塑料比色皿决不可用乙醇或丙酮长时间浸泡。考马斯亮兰法实验表管 号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10标准蛋白质 0 0.01 0.02 0.04 0.06 0.08 0.10 (1.0mg/ml)未知蛋白质 0.02 0.04 0.06 (约1.0mg/ml)蒸馏水 0.1 0.09 0.08 0.06 0.04 0.02 0 0.08 0.06 0.04 考马斯亮蓝g－250试剂 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 每管中的蛋白质量（mg）光吸收值（a595）（3）用标准蛋白质量（mg）为横座标，用吸光度值a595为纵座标，作图，即得到一条标准曲线。由此标准曲线，根据测出的未知样品的a595值，即可查出未知样品的蛋白质含量。0.5mg牛血清蛋白/ml溶液的a595约为0.50。2. 微量法当样品中蛋白质浓度较稀时（10－100mg/ml）,可将取样量（包括补加的水）加大到0.5ml或1.0ml, 空白对照则分别为0.5ml或1.0ml h2o, 考马斯亮蓝g－250试剂仍加5.0ml, 同时作相应的标准曲线，测定595nm的光吸收值。0.05mg牛血清蛋白/ml溶液的a595约为0.29。六、紫外吸收法蛋白质分子中，酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm处，其吸光度（即光密度值）与蛋白质含量成正比。此外，蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下，蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系，可以进行蛋白质含量的测定。紫外吸收法简便、灵敏、快速，不消耗样品，测定后仍能回收使用。低浓度的盐，例如生化制备中常用的（nh4）2so4等和大多数缓冲液不干扰测定。特别适用于柱层析洗脱液的快速连续检测，因为此时只需测定蛋白质浓度的变化，而不需知道其绝对值。此法的特点是测定蛋白质含量的准确度较差，干扰物质多，在用标准曲线法测定蛋白质含量时，对那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异大的蛋白质，有一定的误差。故该法适于用测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质。若样品中含有嘌呤、嘧啶及核酸等吸收紫外光的物质，会出现较大的干扰。核酸的干扰可以通过查校正表，再进行计算的方法，加以适当的校正。但是因为不同的蛋白质和核酸的紫外吸收是不相同的，虽然经过校正，测定的结果还是存在一定的误差。此外，进行紫外吸收法测定时，由于蛋白质吸收高峰常因ph的改变而有变化，因此要注意溶液的ph值，测定样品时的ph要与测定标准曲线的ph相一致。下面介绍四种紫外吸收法：1. 280nm的光吸收法因蛋白质分子中的酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸在280nm处具有最大吸收，且各种蛋白质的这三种氨基酸的含量差别不大，因此测定蛋白质溶液在280nm处的吸光度值是最常用的紫外吸收法。测定时，将待测蛋白质溶液倒入石英比色皿中，用配制蛋白质溶液的溶剂（水或缓冲液）作空白对照，在紫外分光度计上直接读取280nm的吸光度值a280。蛋白质浓度可控制在0.1～1.0mg/ml左右。通常用1cm光径的标准石英比色皿，盛有浓度为1mg/ml的蛋白质溶液时，a280约为1.0左右。由此可立即计算出蛋白质的大致浓度。许多蛋白质在一定浓度和一定波长下的光吸收值（a1％1cm）有文献数据可查，根据此光吸收值可以较准确地计算蛋白质浓度。下式列出了蛋白质浓度与（a1％1cm）值（即蛋白质溶液浓度为1%，光径为1cm时的光吸收值）的关系。文献值a1％1cm,?称为百分吸收系数或比吸收系数。蛋白质浓度 = (a280′10 )/ a1％1cm,280nm (mg/ml)(q 1%浓度?10mg/ml)例：牛血清清蛋白 ： a1％1cm=6.3 (280nm)溶菌酶 ： a1％1cm=22.8 (280nm)若查不到待测蛋白质的a1％1cm值，则可选用一种与待测蛋白质的酪氨酸和色氨酸含量相近的蛋白质作为标准蛋白质，用标准曲线法进行测定。标准蛋白质溶液配制的浓度为1.0mg/ml。常用的标准蛋白质为牛血清清蛋白（bsa）。标准曲线的测定：取6支试管，按下表编号并加入试剂：管号 1 2 3 4 5 6 bsa（1.0mg/ml） 0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0h2o 5.0 4.0 3.0 2.0 1.0 0a280用第1管为空白对照，各管溶液混匀后在紫外分光光度计上测定吸光度a280，以a280为纵座标，各管的蛋白质浓度或蛋白质量（mg）为横座标作图，标准曲线应为直线，利用此标准曲线，根据测出的未知样品的a280值，即可查出未知样品的蛋白质含量，也可以用2至6管a280值与相应的试管中的蛋白质浓度计算出该蛋白质的a1％1cm,280nm2. 280nm和260nm的吸收差法核酸对紫外光有很强的吸收，在280nm处的吸收比蛋白质强10倍（每克），但核酸在260nm处的吸收更强，其吸收高峰在260nm附近。核酸260nm处的消光系数是280nm处的2倍，而蛋白质则相反，280nm紫外吸收值大于260nm的吸收值。通常：纯蛋白质的光吸收比值：a280/a260 ? 1.8 纯核酸的光吸收比值： a280/a260 ? 0.5含有核酸的蛋白质溶液，可分别测定其a280和a260，由此吸收差值，用下面的经验公式，即可算出蛋白质的浓度。 蛋白质浓度(mg/ml)=1.45×a280－0.74×a260 此经验公式是通过一系列已知不同浓度比例的蛋白质（酵母烯醇化酶）和核酸（酵母核酸）的混合液所测定的数据来建立的。3. 215nm与225nm的吸收差法蛋白质的稀溶液由于含量低而不能使用280nm的光吸收测定时，可用215nm与225nm吸收值之差，通过标准曲线法来测定蛋白质稀溶液的浓度。用已知浓度的标准蛋白质，配制成20～100 mg/ml的一系列5.0ml的蛋白质溶液，分别测定215nm和225nm的吸光度值，并计算出吸收差： 吸收差d= a215 －a225以吸收差d为纵座标，蛋白质浓度为横座标，绘出标准曲线。再测出未知样品的吸收差，即可由标准曲线上查出未知样品的蛋白质浓度。本方法在蛋白质浓度20~100mg/ml范围内，蛋白质浓度与吸光度成正比，nacl、（nh4）2so4以及0.1m磷酸、硼酸和tris等缓冲液，都无显著干扰作用，但是0.1n naoh, 0.1m乙酸、琥珀酸、邻苯二甲酸、巴比妥等缓冲液的215nm光吸收值较大，必须将其浓度降到0.005m以下才无显著影响。4. 肽键测定法蛋白质溶液在238nm处的光吸收的强弱，与肽键的多少成正比。因此可以用标准蛋白质溶液配制一系列50～500mg/ml已知浓度的5.0ml蛋白质溶液，测定238nm的光吸收值a238，以a238为纵座标, 蛋白质含量为横座标，绘制出标准曲线。未知样品的浓度即可由标准曲线求得。进行蛋白质溶液的柱层析分离时，洗脱液也可以用238nm检测蛋白质的峰位。本方法比280nm吸收法灵敏。但多种有机物，如醇、酮、醛、醚、有机酸、酰胺类和过氧化物等都有干扰作用。所以最好用无机盐，无机碱和水溶液进行测定。若含有有机溶剂，可先将样品蒸干，或用其他方法除去干扰物质，然后用水、稀酸和稀碱溶解后再作测定。

泰勒·斯威夫特发布了新专辑《lover》中备受瞩目的标题曲《lover》“女士们先生们，请你们，还有琴弦留在我手上的痕迹见证，我将一个男人的魔力深深爱恋（Ladies and gentleman / Will you please stand / With every guitar string scar on my hand / I take this magnetic force of a man to be my lover,）。”歌词的内容还表现了她正和一个想保持亲密的人住在一起，“我能去你想去的地方吗？”在甜蜜的曲调中，唱出了令人向往的充满爱的生活，夫妇在外面享受美好的夜晚，然后一起回家。

《请不要在我的墓前哭泣》是美国诗人玛莉·伊莉莎白·弗莱的作品，又被叫做《化为千风》。

千里马Rdazzling是一款全新设计的低燃耗经济性轮胎。采用全新耐磨配方，延长了轮胎的使用寿命。基于计算机技术应用，有效降低轮胎燃耗及轮胎噪音，提供更加安全安静的舒适驾乘体验。几何切角设计能防止花纹块在刹车时发生卷边效应，使轮胎接触地面的压力分布均匀，有效增大接地面积；宽排水沟槽设计，采用加宽的主沟设计，提升雨天行驶湿滑路面的排水性能；外侧高刚性花纹条提升操控稳定性，内侧流线型花纹条提升湿地性能。在雄厚的技术力量支撑下，“千里马”又在国内同行中首次将类型众多的子午线轮胎，按照市场实际需求进行应用性、科学性划分。他们重点攻克轮胎内部骨架材料排列结构，成功研发了“四层带束层长途运输全钢子午线轮胎”，与原有产品相比，耐久性增加了近3倍，成为国内首家同时拥有“零度带束层结构”和“四层带束层结构”两种不同生产技术的企业，此后又成功研发中短途高承载和短途重载等系列子午线轮胎。自主创新，带来经济和社会效益双丰收，新品子午线轮胎，每条售价比原来提高了100元左右，可为企业年增收3000万元，且在使用中可比传统的斜交轮胎每辆车节省燃油8%。千里马子午线轮胎获得“江苏省高新技术产品”称号；9月，公司被评为“江苏省高新技术企业”。