PCR没P出条带 很迷茫提了总RNA之后 然后做了反转录 接着用cDNA p一基因 跑胶时 质粒有但没有p的基因 为什么

做琼脂糖凝胶电泳时,怎样使目的条带更清晰?

公克1年前1

彭转转157 共回答了24个问题 | 采纳率79.2%

那要看你的目的基因具体的来源,大小级别的特性.TAE和别的缓冲液什么的,也有些影响,还有就是胶浓度,跑胶时候的电压控制什么的.

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PCR电泳出现非特异条带原因概括地讲……

urcy1年前3

淋雨感觉 共回答了22个问题 | 采纳率95.5%

出现非特异性扩增带
PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致,或大或小,或者同时出现特异性扩增带 与非特异性扩增带.非特异性条带的出现,其原因：一是引物与靶序列不完全互补、 或引物聚合形成二聚体.二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低,及PCR循环次数 过多有关.其次是酶的质和量,往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一来源的酶 则不出现,酶量过多有时也会出现非特异性扩增.其对策有：①必要时重新设计引 物.②减低酶量或调换另一来源的酶.③降低引物量,适当增加模板量,减少循环次 数.④适当提高退火温度或采用二温度点法(93℃变性,65℃左右退火与延伸).

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我跑出来的PCR目的条带很清晰,但是marker很暗,每个加样孔都一样的暗

我跑出来的PCR目的条带很清晰,但是marker很暗,每个加样孔都一样的暗
如题,另外换了其它的maker也是很暗,但是同样的maker别人跑出来的条带就很亮,我想请问是不是我样本的问题,因为除了样本不一样,其它的试剂步骤跟其她同学的都是一样的?

露JJ的木乃伊1年前1

56448507 共回答了18个问题 | 采纳率94.4%

博凌科为-为你你用的凝胶染色剂是EB还是Goldview,如果是后者,那Marker一般都跑的不理想.

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做梯度PCR时,设置梯度值一般怎么结合上下游引物设?怎么让跑出的条带更特异?我一般能详细点回答更好了.

做梯度PCR时,设置梯度值一般怎么结合上下游引物设?怎么让跑出的条带更特异?我一般能详细点回答更好了.
我一般都是以上下游引物中最低的那个开始设,2度一个梯度,这次设计的引物特异性不高,跑出了多个条带,看怎么让条带跑的更特异些.

天上飞的鸟1年前2

65hbrgf 共回答了14个问题 | 采纳率100%

两个策略：1.提高退火温度；2.降低镁离子浓度.如果还不行就两个同时进行.

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质粒双酶切后,目的片段DNA是小片段,才56bp,我做的琼脂糖电泳图目的条带看不到,这么小能不能看到呢?

质粒双酶切后,目的片段DNA是小片段,才56bp,我做的琼脂糖电泳图目的条带看不到,这么小能不能看到呢?
如果因片段太小电泳看不到,那么怎么判断小片段被切下来了呢?

咿吖吖1年前4

shoulderzheng 共回答了19个问题 | 采纳率84.2%

你在旁边跑一道没有酶切的质粒 如果切完的质粒跑的多一个条带 那就说明切下来了 经过酶切的开环质粒跑的位置和原质粒差别还是比较明显的

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怎样分析凝胶电泳图像的条带?PCR扩增的目的是什么?

怎样分析凝胶电泳图像的条带?PCR扩增的目的是什么?
带有Marker的电泳图像怎么分析,怎么确定电泳条带中DNA的大小?另外,我们为什么要对少量的DNA进行PCR扩增?以Marker为参照,DNA扩增前后,DNA相对于Marker的位置是同样的吗?

23zt1年前4

公园5 共回答了13个问题 | 采纳率92.3%

你用的应该是DL2000Marker 每一条带都代表一个分子量 看一下目的条带靠近哪条带能估算出分子量
PCR扩增是为了得到目的带 扩大浓度进行后续试验
DNA扩增前后的位置取决于你扩增的目的片段的长度 以及PCR体系是否合理

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求救!pcr产物没有条带...前8个孔是我两个样品4个梯度的pcr产物,marker,质粒(阳性对照),空白对照觉得这次

求救!pcr产物没有条带...
前8个孔是我两个样品4个梯度的pcr产物,marker,质粒(阳性对照),空白对照
觉得这次的marker还有质粒都有拖尾的现象,质粒可能是浓度太大了,没有稀释,可是marker也这样,这次制胶很小心了,缓冲液也是新的.
问题最大是pcr产物竟然一个都没有出来,我把模板也跑了一次,是有条带的,没有完全降解掉.虽然模板没有很纯,但是以前也是可以P出来了,还有,如果PCR真没P出来,为什么没有出现引物二聚体啊?求救!
目的片段为750左右,跟质粒一样

Begene1年前4

左右偏爱27 共回答了27个问题 | 采纳率96.3%

首先要确定引物是否降解了,pcr常用的引物都是10p浓度的,如果四度放久了会降解,既然以前能做出来,那么很可能是引物降解了,而且你的阳性对照是有条带的说明PCR的体系和条件是没问题的,所以推测引物出问题了,重新稀释一些引物再试试吧,PCR条件也可以变变,做个touchdown试试,

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琼脂糖电泳分离6kb和7kb的片段,用什么浓度的胶?现在是条带太宽,在6000和8000之间只有一条

琼脂糖电泳分离6kb和7kb的片段,用什么浓度的胶?现在是条带太宽,在6000和8000之间只有一条
是一个7338bp的质粒,双酶切下900多的片段,电泳,要回收6000多的片段

lcqhero1年前2

katrinalily 共回答了12个问题 | 采纳率83.3%

你切的时间长一点 质粒不能这么算的 因为切开了就是开环了 和超螺旋的在跑胶上差别很大的 不是只有900BP的差别 所以如果只有一条 那一条就是切开的

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PCR预期目标条带大小

黑色精灵1131年前1

丁香可可 共回答了18个问题 | 采纳率83.3%

PCR预期目标条带大小是根据你设计的前后引物决定的,
1：一般在引物设计原则中,要求达标500bp左右,这样容易扩增
2：PCR扩增时如果目标片段太大,对酶的要求也是很高的

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关于pcr反应体系的问题在做完一轮pcr后,电泳检测没有条带,换条件时候可以用原反应体系,不再重新配制么,反应后的taq

关于pcr反应体系的问题
在做完一轮pcr后,电泳检测没有条带,换条件时候可以用原反应体系,不再重新配制么,反应后的taq还有活性么?是否每次换条件都要换反应体系,如果那样不就很浪费钱么

hellpigdog1年前1

小童同学 共回答了18个问题 | 采纳率88.9%

如果你的实验室对pcr反应体系已摸索很清楚,就不用换反应体系,没有扩出dna可能跟你的操作有关,你可以做个阳性对照,就可以知道是否是体系的问题,一般实验条件体系摸索的很清楚的实验室,体系一般不会有问题.如果你对实验条件还是在探索阶段,当然要通过不断调试来找到最佳反应体系,建议多找些相关文献看看.

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琼脂糖凝胶电泳和醋酸纤维素薄膜电泳的条带出现跑带,拖带,多带以及其他可能出现的状况分别是什么原因啊

琼脂糖凝胶电泳和醋酸纤维素薄膜电泳的条带出现跑带,拖带,多带以及其他可能出现的状况分别是什么原因啊
满意了可以再加分,十万火急啊,谢谢啦

木林黄昏1年前1

knightlan 共回答了29个问题 | 采纳率93.1%

能不能附上你跑完的凝胶图上来?
三个大的方面：
1.样品处理问题.样品纯度差,跑DNA电泳时有杂质蛋白污染（琼脂糖的话可以在紫外光下检查上样孔是否有白色亮团）；样品上样前已有部分程度的降解（拖尾）.
2.试剂问题.凝胶要配好一点（尽量用新鲜的试剂,新鲜配制后即电泳）,胶的浓度把握到位.

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组织提取的cDNA和细胞提取的cDNA用同一引物PCR扩增出来的条带长度不一样,是什么原因?有什么方法改进吗

狐眼看世界1年前1

vavaww 共回答了15个问题 | 采纳率100%

　　这要具体分析.一种可能是你的PCR产物是非特异性片段,所以长度不一,这可以通过和你预期PCR产物的长度进行比较来判断.另一种可能是该基因在不同情况下有不同的剪接模式（alternative splicing）,所以产生的不同的模版cDNA.你先查查ncbi看看你要检测的基因有几种mRNA.

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血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳法中蛋白条带的颜色深浅和宽度表示什么

cjqhy1年前3

wanjiufangnu 共回答了25个问题 | 采纳率92%

深浅表示含量的多少 宽度没啥表示吧 是你泳道大小决定的

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这是细菌16S PCR产物电泳图像,大小为1.5kb,但条带上下出现弥散现象,测序波峰出现重峰现象

海波00001年前4

千分之91思远 共回答了12个问题 | 采纳率83.3%

细菌16S rRNA基因序列是集高度保守和变异性与一身的,现在采用的多数PCR扩增引物都是采用的所有细菌的通用引物,即：几乎能够扩增出所有的真细菌.所以,16S rDNA的扩增面临的主要问题是污染,只要有其他细菌DNA的污染,就可能出现假阳性或测序重叠峰,也就是说一条1500bp的带可能是多个细菌的16s rDNA的扩增产物的混合物.
解决这一问题需要注意的事项很多：
1.所有的物品和试剂都要严格防污染,包括taq酶,有很多公司产的聚合酶是用细菌生产的,如果处理纯化不当可能含有细菌的DNA；
2.扩增模板开始时一定要选取单个菌落来制备；
3.由于该基因在多数细菌基因组内是多拷贝的,所以模板DNA的量不宜太多,否则有非特异性扩增（你的带看上去模板DNA就有些过量）
4.测序宜采用连接T载体后进行,不宜采用PCR产物直接测序的方法.
5.每次PCR都要设立未加模板的空白对照!
6.照片中引物二聚体也很多,需适当减少反应体系中引物的用量.

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western blot实验 非特异性条带啥意思

_lee1年前1

4411190 共回答了17个问题 | 采纳率94.1%

就是抗体的特异性不强,可能是多抗,导致最后压片显影的时候会出现除目的以外的其他条带.

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阳光通过三棱镜能显示出七种颜色的连续光谱。如果将一瓶叶绿素提取液放在光源和三棱镜之间，连续光谱中就会出现一些黑色条带，这

阳光通过三棱镜能显示出七种颜色的连续光谱。如果将一瓶叶绿素提取液放在光源和三棱镜之间，连续光谱中就会出现一些黑色条带，这些条带应位于

[ ]

A．绿光区 B．红光区和绿光区 C．蓝紫光区和绿光区 D．红光区和蓝紫光区

隐藏的天空1年前1

香香星 共回答了23个问题 | 采纳率91.3%

D

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PCR ISSR 条带很少,而且不清楚

PCR ISSR 条带很少,而且不清楚

看文献上做的很多条带,同样体系为啥,我的就最多4调

asss1631631年前1

apple_jean 共回答了24个问题 | 采纳率100%

因为你PCR扩增出来的量不够,所以其他条带都看不清了.从图里看,你的PCR条带都还比较一致,说明引物还好.建议你改一下PCR的条件和体系,可以做一个梯度试试.
可以改的条件包括PCR结合阶段的温度（做一个温度梯度）,延长阶段的时间,PCR循环数（可以加大到32）,PCR体系的Mg离子浓度,模板量等等.

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回答有关遗传病的问题．人类白化病是常染色体隐性遗传病．某患者家系的系谱图如图甲．已知某种方法能够使正常基因A显示一个条带

回答有关遗传病的问题．
人类白化病是常染色体隐性遗传病．某患者家系的系谱图如图甲．已知某种方法能够使正常基因A显示一个条带，白化基因a则显示为不同的另一个条带．用该方法对上述家系中的每个个体进行分析，条带的有无及其位置表示为图乙．根据上述实验结果，回答下列问题：

（1）条带1代表______基因．个体2、3、5的基因型分别为______．
（2）已知系谱图和图乙的实验结果都是正确的，根据遗传定律分析图甲和图乙，发现该家系中有一个体的条带表现与其父母不符，该个体编号为______．产生这种结果的原因是______．
（3）仅根据图乙的个体基因型的信息，若不考虑突变因素，则个体9与一个家系外的白化病患者结婚，生出一个白化病子女的概率为______，其原因是______．

我系yy1年前1

cute_xiao 共回答了16个问题 | 采纳率93.8%

解题思路：由图甲和图乙提供的信息，先确定个体的基因型，再通过比较分析，确定图乙的哪条带代表什么基因．

（1）由题干知，白化病是常染色体隐性遗传病，系谱图中的5号和11号个体为白化病患者，其父母表现型均正常，在对应的图乙中发现5号和11号的条带1中为无，条带2中为有，故可确定条带1是A基因，条带2是a基因，结合图甲和图乙，2号具有两条带为Aa，3号只有条带1为AA，5号为患者，基因型为aa．
（2）结合遗传系谱图和图乙可确定3号和4号的基因型是AA，其子女8、9、10号个体的基因型也应是AA，但图乙条带显示10号个体的基因型是Aa，产生这种结果的原因只能是基因发生了突变．
（3）从图乙给出的个体基因型的信息，9号个体的基因型应为AA，她和白化病个体结婚，后代的基因型全为Aa，不会患病．
故答案为：
（1）A Aa、AA、aa
（2）10 基因突变
（3）0 9号个体的基因型为AA

点评：
本题考点： 常见的人类遗传病．

考点点评： 本题考查学生对基因型、基因突变等遗传概念的理解和应用，只考查一种遗传病的遗传，充分利用分离定律解答即可．

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我这里有一张霉菌的DNA电泳图,求解图中条带长度和亮度与DNA分子量大小的关系,希望有详细点的说明,另外电泳时并未加ma

我这里有一张霉菌的DNA电泳图,求解图中条带长度和亮度与DNA分子量大小的关系,希望有详细点的说明,另外电泳时并未加marker

豹魂鹰瞳1年前1

zirui9096 共回答了21个问题 | 采纳率95.2%

首先越靠近点样孔,分子量越大,如果你加了marker,可以根据厂家给的那张maker的图推测样品的大小,一般来说,在同一水平位置的分子量大致相同.没什么特别高深的技术含量
分子量与亮度和长度无关的,亮度越大只能说明样品里DNA含量越高,或者你曝光越高（不在一张图里的话）但是像右边那张就是过曝了,下次单独曝光一下吧,调低点.
欢迎追问,求采纳

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PCR后电泳结果所得目标条带为什么位置会与Marker发生较大偏差?

PCR后电泳结果所得目标条带为什么位置会与Marker发生较大偏差?
右图为正常目标扩增条带与Marker的相对位置,而左图的目标条带位置很奇怪,PCR体系都是一样的,唯一不同的是电压相差20V,但为什么会有如此大的差异呢?

00涧水蓝1年前3

旋756 共回答了16个问题 | 采纳率93.8%

"PCR体系都是一样的",看来你的样本不一样,是吧?右边的约1kb,左边的似乎超过2kb.
首先要知道的是,样本是什么?你怎么设计的引物?因为可能存在内含子而出现不同长度的片段.还有,如果引物不够保守,就会出现多种产物

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PCR电泳,为什么没有条带啊?PCR电泳,第一次跑,一条带都没有.第二次,六条带又有一条没有,这样的情况以前也出现过一次

PCR电泳,为什么没有条带啊?
PCR电泳,第一次跑,一条带都没有.第二次,六条带又有一条没有,这样的情况以前也出现过一次.可以保证到转录出CDNA这一步没有出错,之后操作也没出错.为什么没有了条带呢,我很无奈,

tianren35511年前4

rabby1 共回答了18个问题 | 采纳率88.9%

开始我以为是退火温度问题,但是你说做了两次,第一次没有条带,第二次有一条没有,这说明你加样有问题,还有你为什么要同一个cDNA要做六个PCR呢?还是lz说的不清楚?同样的条件同样的样品没理由会六条中只有一条没有啊.

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如何让DNA条带更集中更亮?我用浓度很稀但总量很大的质粒跑胶,为什么条带涣散?不集中了呢?

caolingyun1年前1

paulinez 共回答了9个问题 | 采纳率100%

可以先浓缩一下,比如乙醇沉淀.另外质粒理论上本来就不止一条带

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阳光通过三棱镜能显示出七种颜色的连续光谱.如果将一瓶叶绿素提取液放在光源和三棱镜之间，连续光谱中就会出现一些黑色条带，这

阳光通过三棱镜能显示出七种颜色的连续光谱.如果将一瓶叶绿素提取液放在光源和三棱镜之间，连续光谱中就会出现一些黑色条带，这些条带应位于（　　）
A. 绿光区
B. 红光区和绿光区
C. 蓝紫光区和绿光区
D. 红光区和蓝紫光区

pb771941年前5

牢外牢笑主 共回答了21个问题 | 采纳率85.7%

解题思路：阳光通过三棱镜发生色散现象，使显示出七种颜色的连续光谱；而叶绿素提取液可以吸收白光（阳光）中的除绿色之外的光谱．

叶绿体中的色素包括叶绿素a、叶绿素b、叶黄素和胡萝卜素，这些色素对不同光质的光吸收不同：叶绿素a、叶绿素b主要吸收蓝紫光和红橙光；叶黄素和胡萝卜素主要吸收蓝紫光．所以该光谱通过叶绿素后，红橙光、蓝紫光被大量吸收，不能透射而形成黑色条带．
故选：D．

点评：
本题考点： 叶绿体结构及色素的分布和作用．

考点点评： 本题考查了色素吸收光谱的相关内容，考查学生的对课本的熟记内容的掌握程度．

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PCR后进行DNA电泳跑的条带是一条,但不是我想要的条带,是怎么回事啊?

tzxdhospital1年前4

右偏殿 共回答了20个问题 | 采纳率90%

你的结果上的“一条带”位置在哪里?我想你能确定不是目的带的话,那应该结果显示的条带比较靠前,DNA长度较小.
那很有可能是引物二聚体.出现这个情况,可能的原因有3：
1.引物本身不对,不是目的DNA扩增需要的引物.
2.DNA回收提纯的问题
3.PCR体系内镁离子浓度问题.
建议排查下各项.

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跑完rapd 在照相时条带不亮 但在紫外窗口看却有条带 为什么?

跑完rapd 在照相时条带不亮 但在紫外窗口看却有条带 为什么?
已经跑出来了 就是不是很亮 从紫外窗口看能看见谱带 但照相就是一片黑 出现了什么问题 怎么办?
在白光下 调好位置但换紫外光就看不见普带了

siron471年前2

海秀东路走九遍 共回答了18个问题 | 采纳率100%

成像仪坏了吧,人眼都能看到的.要不就是胶块放的位置不好,照相机找不到.还有个问题可能就是你缩放的视野里没有胶块(我们实验室的就经常有这种情况,要ZOOM IN 或者 ZOOM OUT 找一找)
开紫外灯肉眼能看到条带的话 那就是照相机有问题,再做一次也这样么?或者就是电泳失败了吧.

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请教引物的问题 引物二聚体我的几个引物 阴性对照在100bp的地方都有条带 谁能告诉我出现这个现象的原因都有那些呀? 多

请教引物的问题 引物二聚体
我的几个引物 阴性对照在100bp的地方都有条带 谁能告诉我出现这个现象的原因都有那些呀? 多谢多谢哦、、（现在还无力悬赏 呵呵）

平方uu1年前2

wuling 共回答了19个问题 | 采纳率89.5%

引物自身形成发夹结构,或者2条引物之间有互补序列,可以相互结合.都会发生这种情况.

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我们跑了变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后,没有看见条带,是跑的时间太长了么?我们的电压时216V,时间一个半小时

zsy92331年前3

duduka 共回答了20个问题 | 采纳率90%

首先确认你的Loading Buffer中的溴酚蓝有没有跑出去.另外,不知你是跑的场强多大,如果是Mini胶的话216V,跑一个半小时肯定是跑出去了.

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菌液PCR的时候能P出目的条带,为什么测序却完全不正确?

rechelwong1年前1

newff22 共回答了17个问题 | 采纳率88.2%

菌落PCR的假阳性高很可能是因为你做PCR的循环数过大,我们实验室一般对于高拷贝数的质粒,循环数不会超过25个,一般用25个.假阳性出现的原因关键在于做连接的时候加了比较多的目的基因的酶切产物,在转化时,那些没有连接入载体的PCR产物,有的会沾在感受态细胞上,还有的虽然在溶液中,涂板时一起就一起涂在板上了,挑菌的时候可能会挑到,即使没挑到,但菌表面的基因片段也有可能被扩增,如果你的循环数太高,就会在PCR时呈现阳性结果.希望能帮到你

1年前查看全部

高保真酶的PCR结果我之前用TAKARA公司的Ex-Tag酶进行PCR,可以P出较好的条带,但用了TAKARA公司的高保

高保真酶的PCR结果
我之前用TAKARA公司的Ex-Tag酶进行PCR,可以P出较好的条带,但用了TAKARA公司的高保真酶Prime STAR GXL DNA polymerase 之后,完全看不到条带,这是为什么呢?实验做的很郁闷呢,

书成墨未浓1年前3

败家爷儿们 共回答了14个问题 | 采纳率92.9%

EX-TAQ很容易出现杂带的,这个酶本身的BUFFER是高离子浓度.你可以试试用EXTAQ酶扩出条带后,在琼脂糖胶上切下纯化在用高保真酶扩一下,扩出来就是有产物扩不出就是非特异扩增

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用总RNA跑电泳,rRNA是什么样子的条带?三条带是如何排列的?

水养美玉1年前1

duinun 共回答了16个问题 | 采纳率81.3%

总共三条带,从大到小依次是28S,18S,5S,亮度依次递减.正常情况应该是28S比18S条带亮,宽度是它的2倍,5S 则很淡

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PCR扩增电泳后为什么没有条带呢

嘻哈bright1年前1

wmf1982 共回答了24个问题 | 采纳率95.8%

因素很多~是不是忘加东西啦~模板浓度会不会太浓或者不够啊,是不是需要纯化啊~退火温度合不合适啊~是不是要换酶啊~mg离子浓度啊~具体问题具体分析~先跑个温度梯度吧~

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染色体步移法PCR某个基因为什么第一次第二次第三次所P出的条带大小呈现递减?

zhuhaixia1年前1

我不是风风 共回答了15个问题 | 采纳率93.3%

因为你引物的位置变了咯.每次又不是同一对引物在pc

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pcr跑出 想要 结果我做的是RT-PCR.是看目的基因有无表达增加趋势的.想问如果跑出了自己想要的条带的话,是不是可以

pcr跑出 想要 结果
我做的是RT-PCR.是看目的基因有无表达增加趋势的.想问如果跑出了自己想要的条带的话,是不是可以不用做了.还是说要多做几次求个平均值之类的.

蜡笔小心哈欠1年前3

西瓜霜1000 共回答了24个问题 | 采纳率87.5%

不论是半定量的条带法,还是real-time PCR.至少要重复3次（不是做3次PCR）,而是用3次不同的样本.然后求平均值.

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提取的RNA纯度可以,但P不出东西怎么回事?条带中职显maker麻烦告诉我

xjxxiaohuo1年前1

JGGIY 共回答了25个问题 | 采纳率96%

能否说的再清楚些?RNA提取实验是没有P东西这一步的...是Trizol提RNA,反转录,然后PCR没条带吗?追问：不是,我的RNA提取完了,反转录也完成了,但是PCR的过程中P完后跑电泳没有带,只能看到maker条带,是怎么回事?回答：你鉴定RNA纯度是用什么方法呢?测浓度还是mops胶?如果你确定RNA没问题,那么就考虑一下你反转录的过程,会不会是混匀的时候过于剧烈了导致cDNA断裂?会不会是反转录酶失活呢?另外你PCR的引物、温度控制确定没问题吗?总之一点一点排除就好了.另外反转录PCR的话条带一般较浅,曝光时间长一些看看.追问：RNA我是跑了mops胶了,跑出来条带还可以,RNA没问题,我感觉你说的CDNA断裂可以考虑一下,温度控制没什么问题啊,谢谢你的指导!『暧～馨%』 的感言：谢谢您的指导,

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【生物】“在叶绿体中色素分离的纸层析结果中,叶绿素a条带最宽可见其在纸层析中溶解度最大”这句话对不对

【生物】“在叶绿体中色素分离的纸层析结果中,叶绿素a条带最宽可见其在纸层析中溶解度最大”这句话对不对
请说明下理由,

carboncai1年前1

土山 共回答了18个问题 | 采纳率83.3%

条带的宽度代表含量的多少,越宽含量越多.
条带的高低代表溶解度的大小,条带的位置越高,说明溶解度越大,随层析液扩散的越快.

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阳光通过三棱镜能显示出7种颜色的连续光谱。如果将一瓶叶绿素提取液放在光源和三棱镜之间，连续光谱中就会出现一些黑色条带，这

阳光通过三棱镜能显示出7种颜色的连续光谱。如果将一瓶叶绿素提取液放在光源和三棱镜之间，连续光谱中就会出现一些黑色条带，这些条带应位于

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A．绿光区 B．红光区和绿光区 C．蓝紫光区和绿光区 D．红光区和蓝紫光区

舞夜风华1年前1

嗲嗲的小米粥 共回答了23个问题 | 采纳率95.7%

D

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同样的模板,只是引物不同扩增基因组上不同的片段,为什么条带亮度差别很大

同样的模板,只是引物不同扩增基因组上不同的片段,为什么条带亮度差别很大
我是分段扩增一病毒的基因组，用随机引物反转录得到模板，然后进行PCR，采用不同的引物，结果亮度差别太大，是怎么回事啊

ct88661年前2

hmj_2007 共回答了14个问题 | 采纳率92.9%

这个很正常,引物本身的结构和模板的结合牢固程度,就会影响扩增的效率,导致扩增出来的片段亮度不同.

1年前查看全部

tricine蛋白电泳(超低分子)染色后怎么没有条带呢?连Marker都看不到?实验好几次了,都以失败告终.

tricine蛋白电泳(超低分子)染色后怎么没有条带呢?连Marker都看不到?实验好几次了,都以失败告终.
样品是脱脂乳酶解后的水解液,之后冻干所得.

zlighter1年前1

524344435 共回答了14个问题 | 采纳率85.7%

胶的配方改进了么?
浓缩胶：1ml 含0.4% SDS的3M Tris-HCl,pH8.45
0.5ml 甲叉/双甲叉 （29：1）
2.5 ml ddH2O
4ul 40% AP
16ul TEMED
分离胶：2.4 ml 聚乙二醇
2ml 含0.4% SDS的3M Tris-HCl,pH8.45
3.6 ml 甲叉/双甲叉 （19：1）
4ul 40% AP
16ul TEMED
染色前必须固定：
先用ddH2O洗胶,然后用50ml 新鲜配的5%戊二醛去固定30min,再用水洗3X5min,再染色.固定后,小分子蛋白会染的比较好.
如果连Marker正常分子量大小的条带都看不到的话,你也得考虑染液的问题,因为即使没有固定,正常分子量大小的条带也应该能够染出来的.

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做小鼠leptin基因,设计的引物为139bp,从小鼠脂肪提取RNA,通过RT-PCR,电泳跑出来的条带却是500bp,

做小鼠leptin基因,设计的引物为139bp,从小鼠脂肪提取RNA,通过RT-PCR,电泳跑出来的条带却是500bp,求解

我是牟平人1年前1

苏黎士的云 共回答了13个问题 | 采纳率84.6%

这个把PCR产物做一个测序就知道怎么回事了.到底是本来就应该是500, 还是扩增了其他的目标.

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做细菌pcr扩增的时候,琼脂糖电泳在100到250之间有亮条带,但是在250到500之间多出了一亮条带,这是怎么回

wtianqya1年前2

laogongaiwo123 共回答了21个问题 | 采纳率90.5%

那是非特异性扩增片段,因为你使用的引物不光扩增了你的条带,还复制了其他一段DNA,只要非特异性扩增不是很强你也不是做qPCR,基本没有影响的,做PCR常会遇到.

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western blot蛋白 有的有条带 有的没有

szjlxl1年前1

eoro 共回答了18个问题 | 采纳率83.3%

权志龙同学：
你的描述太笼统了,Western blot检测有条带很正常,检测没有条带也很正常.
同一组一模一样的样品在一次检测中有条带,另一次没条带也是可以解释的.所以你要描述清楚具体的状况.

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电泳maker条带依次大小都是多少啊

huangyanpiaohao1年前1

欧尚662 共回答了15个问题 | 采纳率86.7%

什么marker啊,是DNA的电泳marker还是蛋白电泳的marker呢?
常用的DNA电泳marker：DL2000 plus的条带大小依次为5000、3000、2000、1000、750、500、250、100bp共8条带.DL2000的就是少了5000的那条,一共7条带.如果要是D1000的话,就是1000、700、500、400、300、200、100bp共6条,常用的就这些了.
常用的蛋白电泳marker：蛋白预染marker大小依次为170、130、95、72、55、43、34、26、17、10KDa,其中72是红色的那条,10是绿色的那条,共10条带.其他的也是视情况而定.
所以最好还是知道你的那个marker是什么类型的,或者知道你的marker是多少条带,条带的样式,然后你再去百度图片里边对应着你的样式去找一下就知道了.

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用三氯乙酸-丙酮沉淀法提取杨树蛋白,电泳时无条带,不知道是什么原因,这个实验应该注意什么,

用三氯乙酸-丙酮沉淀法提取杨树蛋白,电泳时无条带,不知道是什么原因,这个实验应该注意什么,
电泳系统没问题,marker正常.第一次做这个实验,准备用提取的蛋白做Western.

袍子1年前1

wilielly 共回答了21个问题 | 采纳率90.5%

用这个方法复溶蛋白时很难完全溶解掉,样品处理很是个问题,应该是蛋白浓度不高.我做过类似的 也是用这个方法,电泳出条带很浅甚至没有,很郁闷.

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质粒DNA琼脂糖凝胶电泳图分析其他组在比较明显的条带下能看到另一条比较浅的,为什么我的没有啊,而且上面的有一些变形了,怎

质粒DNA琼脂糖凝胶电泳图分析
其他组在比较明显的条带下能看到另一条比较浅的,为什么我的没有啊,而且上面的有一些变形了,怎么回事啊

chenhanqiu1年前1

赵璟 共回答了14个问题 | 采纳率92.9%

那是他们提取的时候变性时间太长,变性的质粒DNA电泳的时候走在超螺旋DNA的前面,染色较淡.
变形的原因通常是上样量太大,也有可能是凝胶、缓冲液的原因.

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筛选引物PCR扩增后变性聚丙烯酰胺跑不出条带,或条带模糊,是怎么回事?

xxm3051年前3

大土炮 共回答了23个问题 | 采纳率91.3%

首先我想问问pcr的产物不都是跑agarose胶吗?你怎么跑变性聚丙烯酰胺胶呢?
如果是agarose胶,跑不出来,你有没有做阳性对照啊?你的pcr work不work啊?可能是pcr就不work呢?然后你pcr的产物是如何保存的?如果放在4度时间长了,是会降解的.就是出现条带模糊.或者是你agarose胶融的不好?

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有哪些因素会影响到电泳图谱上DNA条带的位置?

天外飞仙20021年前1

km阳光 共回答了17个问题 | 采纳率88.2%

影响的因素很多.主要的有：
1、 DNA的分子大小:
　　线状双链DNA分子在一定浓度琼脂糖凝胶中的迁移速率与DNA分子量对数成反比,分子越大则所受阻力越大,迁移得越慢.
2、 琼脂糖浓度
　　一个给定大小的线状DNA分子,其迁移速度在不同浓度的琼脂糖凝胶中各不相同.分离小于0.5kb的DNA片段所需胶浓度是 1.2-1.5%,分离大于10kb的DNA分子所需胶浓度为0.3-0.7%,DNA片段大小间于两者之间则所需胶浓度为0.8-1.0%.
3、 DNA分子的构象
相同分子量的线状、开环和超螺旋DNA在琼脂糖凝胶中移动速度是不一样的,超螺旋DNA移动最快,而线状双链DNA移动最慢.
4、 电源电压
　　在低电压时,线状DNA片段的迁移速率与所加电压成正比.但是随着电场强度的增加,不同分子量的DNA片段的迁移率将以不同的幅度增长,片段越大,因场强升高引起的迁移率升高幅度也越大,因此电压增加,琼脂糖凝胶的有效分离范围将缩小.要使大于2kb的DNA片段的分辨率达到最大,所加电压不得超过5v/cm.
5、嵌入染料的存在
　　荧光染料溴化乙啶用于检测琼脂糖凝胶中的DNA,染料会嵌入到堆积的碱基对之间并拉长线状和带缺口的环状DNA,使其刚性更强,还会使线状DNA迁移率降低 15％.
6、 离子强度影响
　　电泳缓冲液的组成及其离子强度影响DNA的电泳迁移率.在没有离子存在时(如误用蒸馏水配制凝胶),电导率最小,DNA几乎不移动,在高离子强度的缓冲液中(如误加10×电泳缓冲液),则电导很高并明显产热,严重时会引起凝胶熔化或DNA变性.

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我跑RAPD,一点条带都没有,是什么原因,有marker,请帮我分析

我跑RAPD,一点条带都没有,是什么原因,有marker,请帮我分析
我用了2个DNA,和8个随机引物(10bp ),一共是16个样,都没一点条带

4093337851年前1

求知5460 共回答了11个问题 | 采纳率100%

问题可以分为几个方面:
1:你的DNA有问题.
2.你的PCR控制有问题,包括温度,时间等.
3.你的随机引物是怎么来的?都分别是什么?对这个DNA有效吗?纯度如何?质量有保证吗?
4.听你的意思,marker应该是跑出带了吧?如果marker也没有跑出来带的话,那么你应该认真检查一下电泳的问题了.

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（2010•浦东新区一模）观察叶绿体色素分离的实验结果，发现滤纸条从上往下第三条色素条带的颜色是（　　）

（2010•浦东新区一模）观察叶绿体色素分离的实验结果，发现滤纸条从上往下第三条色素条带的颜色是（　　）
A．黄色
B．蓝绿色
C．黄绿色
D．橙黄色

wandao011年前1

子黔 共回答了19个问题 | 采纳率89.5%

解题思路：提取色素原理：色素能溶解在酒精或丙酮等有机溶剂中，所以可用无水酒精等提取色素．分离色素原理：各色素随层析液在滤纸上扩散速度不同，从而分离色素．溶解度大，扩散速度快；溶解度小，扩散速度慢．

在叶绿体色素分离的实验中，实验结果：滤纸条从上到下依次是：胡萝卜素（橙黄色）、叶黄素（黄色）、叶绿素a（蓝绿色）、叶绿素b（黄绿色）．因此，从上往下第三条色素条带的颜色是蓝绿色．
故选：B．

点评：
本题考点： 叶绿体色素的提取和分离实验．

考点点评： 本题考查叶绿体中色素分离的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题和解决问题的能力．学生应对于色素的提取和分离实验非常熟悉，才能很好的回答问题．

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近期在质粒构建是PCR和酶切后都有目的条带,但是就是连接转化后没有点,或者有点但是是阴性的,

近期在质粒构建是PCR和酶切后都有目的条带,但是就是连接转化后没有点,或者有点但是是阴性的,
感受态不行?
目的片段没有酶切成功?
没有连接上?
载体不行?

逍遥狂草1年前1

暴雨caozhun 共回答了27个问题 | 采纳率88.9%

都有可能
你可以多做几个对照,如空载体转化、空细胞涂板等等,帮助缩问题小范围
你可以询问实验室其他人员,看看酶是否有问题,感受态是否有问题,抗生素是否有问题,等等
按你给的线索,菌落很少,很有可能是切开的线性质粒没有连上片段,转不进细胞,少量没有切开的空载体转进细胞,形成阴性菌落.问题可能在片段酶切上,建议连T载体再切,或双酶切换成两步单酶切,或换酶切位点,或重新设计保护碱基

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