引物的作用?为什么DNA聚合时要引物先与另一条链结合,俩条链才能结合?引物在其中起到了什么作用?PCR技术里引物是启动子

引物设计中Self-Anneal参数和end-anneal参数是什么意思?

安迪的肖申克1年前1

zwg04 共回答了24个问题 | 采纳率95.8%

这两个参数主要是看看你设计的引物做pcr会不会形成引物二聚体.self为自身整体的互补性,end为3‘端的互补性5` AGGCTATGGGCCTCGCGA 3'
3' AGCGCTCCGGGTATCGGA 5'
.我的理解,没用过这个参数.我感觉引物设计没那么多原则,有点二聚体也无所谓的.

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RT-PCR实验中为什么只出现一条引物的带

冰茶沫沫1年前4

摆砖 共回答了10个问题 | 采纳率100%

说明没扩出来呗
建议
1.增加actin等参照管做对照.actin表达比较保守且表达量高,均可以扩出来.如果扩不出来说明你RNA有问题,重新抽提
2.如果参照没问题,和你的引物分别一起扩,配一样的体系,如果你的引物还扩不出来,换用好点的酶试下
3.如果还出不来,重新设计引物吧

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引物设计中忘记加入在上游序列的酶切位点后面加ATG,对蛋白质相互作用研究有影响吗?

无名-氏1年前3

莫鸣 共回答了12个问题 | 采纳率100%

如果该ATG是翻译起始位点,就没有蛋白翻译了.
如果是in frame编码,就会少一个氨基酸

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PCR引物放在-20冰箱里半个多月后,有可能失活吗?或者说,

PCR引物放在-20冰箱里半个多月后,有可能失活吗?或者说,
是扩增DNA的引物

wuyuehehe1年前5

vdge 共回答了16个问题 | 采纳率100%

你的引物是什么形态的?干粉的话一般来说是比较稳定的,如果是制备成了母液或者工作液,那就要保证你的水没有问题,如果水PH值过低或者未经处理含有核酸酶就有可能降解.不过一般实验室的用水都是经过处理了,不会有大问题.建议你合成时要求几管分装,先用一管,或者配成母液再配工作液,因为母液更稳定,母液用Tris配置会比较好,而且不影响后面的扩增.

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同样的模板,只是引物不同扩增基因组上不同的片段,为什么条带亮度差别很大

同样的模板,只是引物不同扩增基因组上不同的片段,为什么条带亮度差别很大
我是分段扩增一病毒的基因组，用随机引物反转录得到模板，然后进行PCR，采用不同的引物，结果亮度差别太大，是怎么回事啊

ct88661年前2

hmj_2007 共回答了14个问题 | 采纳率92.9%

这个很正常,引物本身的结构和模板的结合牢固程度,就会影响扩增的效率,导致扩增出来的片段亮度不同.

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为什么引物中的碱基有小写,与大写的有什么区别

为什么引物中的碱基有小写,与大写的有什么区别
比如AgA gTT TgA TCC Tgg CTC Ag

hbhhw1年前2

一蓑烟雨客_潇潇 共回答了18个问题 | 采纳率94.4%

如果有括号的话
大代表表的是碱基.
括号里面的代表是酶
小写是这种酶能识别的序列.

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没有基因组信息,如何设计引物?我研究的是植物,但是没有任何基因组信息,现在要研究一个叫乙醇脱氢酶这个蛋白质所对应的基因在

没有基因组信息,如何设计引物?
我研究的是植物,但是没有任何基因组信息,现在要研究一个叫乙醇脱氢酶这个蛋白质所对应的基因在组织内的表达情况,我无从下手请多指点,

冬之气息1年前2

agogos 共回答了16个问题 | 采纳率100%

找亲缘性最好的物种,看看能不能找到它们的序列,或者看看有没有人发这方面的文章
又或者,用oligo dT反转录,然后根据亲缘性序列在前端设计引物,看看能不能扩增出来,多设几个,拿扩增出来的进行测序再设计引物

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做小鼠leptin基因,设计的引物为139bp,从小鼠脂肪提取RNA,通过RT-PCR,电泳跑出来的条带却是500bp,

做小鼠leptin基因,设计的引物为139bp,从小鼠脂肪提取RNA,通过RT-PCR,电泳跑出来的条带却是500bp,求解

我是牟平人1年前1

苏黎士的云 共回答了13个问题 | 采纳率84.6%

这个把PCR产物做一个测序就知道怎么回事了.到底是本来就应该是500, 还是扩增了其他的目标.

1年前查看全部

DNA合成石所需引物的合成酶是什么

DNA合成石所需引物的合成酶是什么
我做了好几个题,答案都是Rnase,怎么回事,难道说是因为它从大分子RNA上水解下一部分吗

帅与可乐1年前2

zw5246682 共回答了11个问题 | 采纳率72.7%

正确的说法应该是引物合成酶,其本质是RNA聚合酶,但这种酶往往又具有RNA水解作用.

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引物扩增片段太小(360bp),跑普通PCR去克隆测序可行不

咖啡不加方糖1年前4

失忆的柏拉图 共回答了13个问题 | 采纳率69.2%

看你是实验目的是什么：
如果是为了对目的基因片段测序,用普通taq酶pcr没问题,而且,也没必要做到克隆里再测,可直接用pcr产物测；
如果是为了做克隆已备后续实验,建议你用高保真的taq酶,普通taq错的随时随地,运气好一次就成了,运气不好,能把人折磨死.

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DNA自我复制与转录各是在哪里?它们都是以DNA的两条链为模板链吗?它们都需要引物吗?

小我__1年前3

i曼曼鱼 共回答了16个问题 | 采纳率93.8%

在减数间期或有丝分裂间期复制 转录在细胞核.（细胞核中DNA）,细胞质中的DNA也能复制和转录.
复制是一条DNA双链解旋以自身为模板复制为2条DNA双链
转录是一条DNA双链解旋以自身为模板转录成一条RNA单链就是信使RNA
不需要引物,但PCR技术分工合成DNA需要引物

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已知人胰岛素基因序列怎么用primer5.0设计引物

litiren961年前1

xiazhida 共回答了21个问题 | 采纳率81%

直接将该基因序列粘到primer5的序列框里,将与扩增序列用方括号括起来,然后设置参数 ,基本上采用默认的就行了,运行.

1年前查看全部

引物为100um,我要配置50l的体系,引物为20um.那我要加引物为10ul?

引物为100um,我要配置50l的体系,引物为20um.那我要加引物为10ul?
如题,这样是否正确.
错了··是50ul的体系

123hyf4561年前1

葬花的MM 共回答了19个问题 | 采纳率84.2%

你这引物含量太高了
我的引物为20um,10ul体系的话加0.2ul足够了
50ul体系加1ul肯定没问题,要不了10ul

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梯度PCR疑惑请各位帮帮忙我做梯度升温PCR,从55度到62读的升温,两引物的Tm值相差2度,算的平均值为62度,跑胶后

梯度PCR疑惑请各位帮帮忙
我做梯度升温PCR,从55度到62读的升温,两引物的Tm值相差2度,算的平均值为62度,跑胶后,都跑有目的条带.55度条带最亮,其它亮度较淡且差不多.之后我用55度的退火温度,用第一次的PCR产物做模板进行PCR,跑胶什么都没有,这是怎么回事啊?难道产物降解了?（第一次产物我存于4度.可是再做第一次产物的跑胶还是有条带啊）或是其它原因?）

xsj388483261年前1

闻香拾女人 共回答了15个问题 | 采纳率86.7%

博凌科为-为你我觉得一种可能是模板量过多,如果55度条带最亮的话你可以把它稀释10-50倍做模板.再就是产物降解,这方面也很有可能,我以前也遇到过相同问题,最后还是换了模板成功的.还有建议你下次批的时候做55和62两个梯度,这样比较保险

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已知一段DNA序列,酶是EcoR1和Nde1,如何设计引物呢?

澳洲技术gg1年前2

djtc 共回答了23个问题 | 采纳率100%

设计引物用专业软件如DNA STAR,PRIMER 5,设计好之后加上你提到的限制性内切酶的酶切位点即可

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PCR 中什么是上游内侧引物 上游外侧引物

annycfn1年前1

大尾巴 共回答了14个问题 | 采纳率85.7%

套式PCR 中的术语.扩增内部序列的叫做内侧引物,而能扩增片断全长的叫做外侧引物,你先看懂啥叫套式PCR 才能理解.

1年前查看全部

想做pcr,设计引物,如何查找目的基因?想要具体过程.主要是做lewis大鼠的组织.

华尔街报告1年前2

ww002 共回答了18个问题 | 采纳率100%

NCBI nucleotide栏 输入目的基因英文名称 出来后,选择mus还是rat则是看你做小鼠还是大鼠,你是做大鼠当然是后者.
另外你是做DNA还是cDNA,如果是前者,点开就是了.如果是cDNA,要在点开的页面的左侧找出并点击CDs,这次出来的序列才是cDNA
一般是要提RNA,再逆转录成cDNA的,不知道你是不是直接提DNA,做PCR?

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PCR技术中引物怎么来的?引物是本来就有的,还是人工合成的?他一定是有三个碱基合成吗?为什么合成时引物要从3’端开始到D

PCR技术中引物怎么来的?
引物是本来就有的,还是人工合成的?他一定是有三个碱基合成吗?为什么合成时引物要从3’端开始到DNA5’端结束?有6’端1’端2’端4’端吗?

这是一个好名字1年前2

善良巫婆 共回答了12个问题 | 采纳率83.3%

找生物公司合成需要的引物,脱氧核糖核苷酸之间形成通过形成3',5'-磷酸二酯键,3’端和5’端是根据这个来命名的,没有你说的其他的端.

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pcr技术过程中什么是从“引物的5′端→3′ 端延伸”,谢

Callme清纯pls1年前2

欧阳李宏 共回答了18个问题 | 采纳率83.3%

在PCR中常用的DNA聚合酶Taq只具有5‘->3’的聚合活性（当然还有外切酶活性,这里暂不考虑）
真核细胞有5种DNA聚合酶,分别为DNA聚合酶α（定位于胞核,参与复制引发,不具5'－3'外切酶活性）,β（定位于核内,参与修复,不具5'－3'外切酶活性）,γ（定位于线粒体,参与线粒体复制,不具5'－3',有3'－5'外切活性）,δ（定位核,参与复制,具有3'－5',不具5'－3'外切活性）,ε（定位于核,参与损伤修复,具有3'－5',不具5'－3'外切活性
我们用的taq酶是 Taq DNA 聚合酶 由一种水生栖热菌yT1株分离提取出,是发现的耐热DNA聚合酶中活性最高的一种,达200,000单位/mg.具有5'-3'外切酶活性,但不具有3'-5'外切酶活性,因而在合成中对某些单核苷酸错配没有校正功能.

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产生冈崎片段的原因是"A解螺旋酶引起的 B拓扑异构酶造成的 C复制与解链方向相反 D.RNA引物过短 E多个复制

舒漾1年前3

将得众 共回答了16个问题 | 采纳率93.8%

选C
前导链与解链方向相同
后随链则相反 所以产生冈企片断

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扩增4kb的基因怎么设计引物

pp3101年前1

dan_nad 共回答了16个问题 | 采纳率93.8%

去哪里找最出色的生命科学学术交流论坛?>>> 如果你是直接从DNA中克隆基因的话,设计一对引物,用高保真的Phusion或者Vent酶就可以.NEB的产品很不错.
如果你要从cDNA中克隆的话,考虑到RNA的降解,你不能使用一对引物来克隆.而是设计两对或者多对引物.比如,你你针对序列这几两对引物,前一对引物的下游,和后一对引物的上游,应该设计15个bp的重合.前一对引物的上游和后一对引物的下游则位于整个4kb基因的首位两段.
这样,你用这两对引物先克隆出4kb基因的两个短片段.然后将两个短片段作为模板,以前一对引物的上游引物,和下一对引物的下游引物来在一个PCR反应体系中扩增,获得4kb的全片段.、
如果你要设计多对引物,方法类似,都是上一段的下游和下一段的上游有十几个bp的重合
--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
补充一下,如果你是从基因组中直接克隆的话,那就是设计一对引物.使用高保真的聚合酶做long PCR,目前的Phusion Taq酶对于4kb的片段是没什么问题的.我自己曾经尝试克隆过3kb的片段,非常的清晰,没有任何拖带.但是成功的关键在于你要设计特异性的引物,建议你设计30-50个bp左右的引物（引物越长,对模板的特异性要求越高）,提高退火温度,来保证引物的特异性.
此外,加长PCR程序中的变性时间,来保证基因组DNA的完全接连,适度延长退火时间,加大引物使用的量,来保证引物和模板的结合.毕竟你是从整个基因组中寻找你的目的基因.

1年前查看全部

不同基因组用同一引物扩增的结果会怎样

198410241年前1

58wo4 共回答了14个问题 | 采纳率85.7%

你可以在NCBI中比对这两种基因组mRNA中上下游引物即将扩增的那一段,看看是否一致,若一致,则PCR产物是相同的,不一致的话则不同

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关于pcr扩增上游引物扩增到什么地方终止,怎么终止是上游引物选扩增模板,然后下游引物以新合成的模板为模板扩增?

carol13951年前1

如是忘了多好 共回答了21个问题 | 采纳率90.5%

DNA有终止子的,扩增到终止子的地方就停止了.具体终止子怎么把它终止的,看生化课本吧.不同物种的DNA也不一样.
一般给你碱基序列的那条模板,假设为A链,它的互补链是B链.
第一次延伸：上游引物是识别B链往下延伸的,它延伸出来的碱基序列跟A链一样.下游引物是识别A链往下延伸,它延伸出来的序列跟B链一样.
5'----------------3’A
3------5 上游引物
下游引物5------3
3'----------------5'
第二次延伸：新合成的链同原始的模板一样也可作为模板扩增.

1年前查看全部

大肠杆菌16S rDNA鉴定用27F和1492R引物扩增时候的PCR条件是什么?

黑夜之神1年前1

我是爱相随 共回答了17个问题 | 采纳率88.2%

预变性 94℃ 5min 1 cycles
变性 94℃ 30s
退火54℃ 30s
延伸72℃ 1min30s 35cycles
延伸 72℃ 10min 1cycles

1年前查看全部

DNA的复制过程中引物从哪里来别说深奥了我听不懂

mike14571年前1

果__果 共回答了25个问题 | 采纳率84%

1、如果是细胞内复制,引物就是细胞内合成的一段RNA
因为RNA聚合酶能从头开始合成,而DNA聚合酶不能从头合成.
2、如果是PCR,引物是我们加进去的DNA单链.

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关于信号通路的基因水平鉴定我想做一条信号通路 G蛋白的 主要想研究PLCβ的 我加入药品 设计引物RT-PCR PLCβ

关于信号通路的基因水平鉴定
我想做一条信号通路 G蛋白的 主要想研究PLCβ的 我加入药品 设计引物RT-PCR PLCβ 看条带亮度 判断PLCβ表达变化的方法 请问可不可行

zhouxiang1231年前1

安静的水竹 共回答了19个问题 | 采纳率89.5%

光一个RT-PCR,只能证明你的药物对该基因表达水平有影响,但是否是直接影响则无法证明,还需要其他证据才行.

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关于RNA聚合酶和DNA聚合酶,哪项叙述是正确的：A． 都能利用核苷二磷酸合成多核苷酸链B． 都需要引物C． 都能在链的

关于RNA聚合酶和DNA聚合酶,哪项叙述是正确的：A． 都能利用核苷二磷酸合成多核苷酸链B． 都需要引物C． 都能在链的两端加入核苷酸D． 都以DNA为模板,故都是依赖DNA的合成酶E． 都能在链的5’磷酸端加入核苷酸

belovedjjy1年前4

wyn712 共回答了17个问题 | 采纳率88.2%

选择D.
先弄清楚RNA聚合酶和DNA聚合酶的用处.前者是转录的时候用来合成mRNA的,后者是用来在DNA复制（或者PCR）的时候合成DNA的.
所以显然D是对的,无论转录还是复制还是PCR,都需要DNA做模板,没有DNA模板,反应就无法完成.
A的错误在于,用的是三磷酸核苷,不是二磷酸.
B的错误在于,转录和复制都是不需要引物的（只有PCR反应需要）.所以两个酶都无需引物即可作用（注意区别引物和模板）.
C和E的错误一样.DNA和mRNA的延长方向相同,都是从5'到3',而不会反过来.换言之,核苷酸都是加在3',不是加在5',更不是两边都加.

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我定了一批taqman探针的引物,但是后来决定用sybr做,这两种实验方法的引物可以一样吗?

ly04561年前1

402786515 共回答了30个问题 | 采纳率83.3%

可以一样,但是sybr的引物要求更严格些.因为taqman的探针可以消除很多非特异信号.

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PCR中 设计引物 下面 1,2组都不合理 说明理由

janexx1年前3

beiwuechozhong 共回答了23个问题 | 采纳率91.3%

第一组引物：引物1和引物2是互补的（这个应该能看出来吧）,在PCR的时候两者会因为碱基互补配对而形成双链,起不到引物的作用；
第二组引物：引物1的前面的5个碱基和后面的5个碱基是互补的,会形成发卡结构,起不到引物的作用.

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在PCR引物设计中,要求引物跨外显子,什么叫跨外显子呢?从一个外显子,到另一个外显子,也就是说引物的上游在这个外显子,下

在PCR引物设计中,要求引物跨外显子,什么叫跨外显子呢?从一个外显子,到另一个外显子,也就是说引物的上游在这个外显子,下游就得在下一个外显子?是这个意思吗?
跨外显子了就不在受DNA污染影响了,为什么呢?

甜蜜生活xixi1年前1

359091981 共回答了16个问题 | 采纳率93.8%

这是针对逆转录pcr而言,所谓的跨外显子就是一个引物（比如上游引物）、出现在两个外显子交界,那么做RT-PCR时,dna 由于2个外显子被内含子隔开,引物就不会起作用了

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4,试着写出 a,20微升PCR反应体系; b,初步的PCR反应程序(引物的退火温度55℃); c,操作过程中的2点注意

4,试着写出 a,20微升PCR反应体系; b,初步的PCR反应程序(引物的退火温度55℃); c,操作过程中的2点注意事项
4、试着写出
a、20微升PCR反应体系；
b、初步的PCR反应程序（引物的退火温度55℃）；
c、操作过程中的2点注意事项.

aliu06111年前1

jack006 共回答了21个问题 | 采纳率95.2%

0.5 µLtaq酶
0.5µL上游引物
0.5µL下游引物
0.5µLdNTP
2µL10×buffer
1µL模板
15ddH20µL
95度5min
95度30秒 55度30秒 72度30秒 25到35个循环

最后72度10min
注意事项：模板浓度高可适当减少加入量,buffer量不能调整,其他成分可适当调整.PCR体系在冰盒上配制可有效减少非特异性扩增.

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请问设计动物的上游引物时,必须从ATG开始还是可以从ATG的上游开始?

请问设计动物的上游引物时,必须从ATG开始还是可以从ATG的上游开始?
我的学植物的老师说应该从ATG开始,可是我的学动物的同学说可以从ATG的上游开始,因为他只是个载体的作用.我没学过生物.请问应该采取哪种方法?为什么?

掉在水坑里1年前1

另半杯牛奶 共回答了18个问题 | 采纳率77.8%

没有关系的,不影响,只要PCR能p出ATG不影响基因表达就OK,多几个上游碱基没事.关键不在这里在于设计的引物要符合引物设计的基本原则,越符合越好.

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滚环扩增所需引物有什么要求吗?怎样设计引物?

annie5202041年前1

dr5y2rtg5 共回答了15个问题 | 采纳率73.3%

不知你是要做什么?是要在质粒上进行点突变吗?
如果是的话,引物设计挺简单的,我一般是在突变位点的上下游各加20-25个与模板匹配的序列,保证3‘端以G/C结尾,并且最后5个碱基里有3个是G/C,没有3’封闭.下游引物与上游引物完全互补配对.

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我要做荧光定量PCR,测细胞因子mRNA,要测三种因子,是否是把三种引物和内参基因引物分别加入到四个体系中

duanxingrong1年前1

cgr2008 共回答了13个问题 | 采纳率84.6%

是的,你需要用等量体系分别用每对引物进行PCR.
实际操作时,我们要求至少3份biologic replica,用来检测你所测到的表达变化确实是因为实验组与对照组之间的差别.同时这3份biologic replica需要2份technical replica,以确认差异不是由于具体实验操作过程的失误产生的.

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荧光定量PCR问题荧光定量PCR设的引物260bp可以用吗?师姐他们说最好在100--150之间.

jiangxidai_20051年前1

netear 共回答了19个问题 | 采纳率94.7%

还是可以用的.不过现在SYBR GREEN的方法已经逐渐被淘汰了,建议换用probe-primer的方法.
因为SYBR GREEN的结合是非特异性的,越长越容易出现错误.

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筛选引物PCR扩增后变性聚丙烯酰胺跑不出条带,或条带模糊,是怎么回事?

xxm3051年前3

大土炮 共回答了23个问题 | 采纳率91.3%

首先我想问问pcr的产物不都是跑agarose胶吗?你怎么跑变性聚丙烯酰胺胶呢?
如果是agarose胶,跑不出来,你有没有做阳性对照啊?你的pcr work不work啊?可能是pcr就不work呢?然后你pcr的产物是如何保存的?如果放在4度时间长了,是会降解的.就是出现条带模糊.或者是你agarose胶融的不好?

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关于PCR溶液体系的配制每个PCR反应包括25 ng模板DNA,0.5 μmol/L正反向引物,0.2 mmol/L d

关于PCR溶液体系的配制
每个PCR反应包括25 ng模板DNA,0.5 μmol/L正反向引物,0.2 mmol/L dNTP mix,0.5个单位的Taq DNA聚合酶和1×PCR buffer（Fermentas）,反应体系为10μl.请问每个试剂应该去多少,buffer试剂是10的.

砺以射凶残1年前1

xu88888888 共回答了13个问题 | 采纳率84.6%

加入量和浓度有关,只要知道每一个要加入物质的浓度就可以算出来了：模板的体积=25ng/模板的浓度 （这个值需要测定,如果实在不知道模板浓度,就加0.1-0.5ul左右吧）引物的体积=0.5umol/1000uL * 10uL / 引物浓度 （根据自己配制的情况,有时候可能是100mM或者是200mM）Taq酶体积= 0.5 U / Taq 酶活力单位浓度（标注在管子上,U/uL表示的数字）Buffer的量应该是1uL.（这里需要解释一下,经过确认,没有1X的buffer,因为如果是1X的话,没法加了,所以正确的应该是10X的buffer,加入量就是稀释10倍,所以10uL体系加1uLbuffer）

1年前查看全部

引物中的N代表什么?

oo社会发展1年前1

difeng2121 共回答了26个问题 | 采纳率80.8%

文献中的引物属于兼并引物(Degenerate Primer),最后合成得到的引物是一组混合物,这一般是在根据同源蛋白的保守性来设计引物,并不知道基因组序列的情况下.因为存在密码子的兼并性,在这样的位点上不能确切知道用了哪种密码子.如果你还要用文献中的引物,也要看具体情况的,如果文献中用兼并引物得到的产物序列已经确定了,那你就不需要用兼并引物了,直接看该位点的具体碱基是什么.否则就要用.

1年前查看全部

【求助】引物中的N是什么?

cnpc_chen1年前1

jie娃娃脸 共回答了19个问题 | 采纳率89.5%

建议lz仔细阅读文献原文,搞清为何如此设计文献中的引物属于兼并引物(Degenerate Primer),最后合成得到的引物是一组混合物,这一般是在根据同源蛋白的保守性来设计引物,并不知道基因组序列的情况下,因为存在密码子的兼并性,在这样的位点上不能确切知道用了哪种密码子.

1年前查看全部

启动子和引物有什么区别?是不是以前的生物化学中成为启动子,现在改为引物了?

不便泥1年前3

暖鱼之友 共回答了22个问题 | 采纳率86.4%

不是的,这是两个不同的概念：
启动子：是指转录起始复合物结合的一段DNA序列
引物：是DNA复制时,用于结合DNA一段序列
具体正确的描述可以去生化书上查 肯定是有的

1年前查看全部

真菌的DNA PCR中,我选用的是引物ITS1和ITS4,

真菌的DNA PCR中,我选用的是引物ITS1和ITS4,
那我扩增得到的基因片段包括18S、5.8S和28S吗?

phlogiston1年前1

wowhj 共回答了13个问题 | 采纳率76.9%

这对引物主要是扩增ITS区的,18s的的最后一部分及28s开头的一部分也会扩增,但只有几十个bp
5.8s倒是完全包括在内

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酶切位点如何选择,我正向引物和反向引物的酶切位点选择的是BamHI,和Xho I,可以吗

fdggdfg44k1年前1

wong12 共回答了22个问题 | 采纳率95.5%

首先要看目的基因中是否含有该酶切位点,只有没有的才可以选.其次,如果需要做表达,需要考虑起始密码子,防止移码突变；第三要考虑标签用于后面的蛋白纯化.如果仅仅用来拿到目的基因,那只需要第一点即可

1年前查看全部

DNA复制时所需的RNA引物的组成是脱氧核糖核苷酸还是核糖核苷酸

纳西色斯的影子1年前3

webjiyang 共回答了20个问题 | 采纳率90%

核糖核苷酸

1年前查看全部

小鼠BRAF基因V599E和V600E的基因的序列是多少?怎么查?设计PCR引物呢?

小鼠BRAF基因V599E和V600E的基因的序列是多少?怎么查?设计PCR引物呢?
我是一个本科生,想知道小鼠BRAF基因V599E和V600E的基因的序列是多少?怎么查?如何设计它们PCR引物

猪猪仔1年前1

applejuice666 共回答了20个问题 | 采纳率90%

你的问题太多 我实在没时间.
但愿能引你一下 好运!

1年前查看全部

下列一条PCR引物:5’-CGAGACGGATGAGCTGGTACG-3’,交由生物技术公司合成,得产物

eirb1年前3

chenyuanchi110 共回答了21个问题 | 采纳率85.7%

你只说引物有什么用?把DNA双链说出来才能推 产物啊
引物最后都被切的 引物又不会变……

1年前查看全部

我做的是双向测序,片段300bp左右.请问怎么在测序结果中找出引物?需不需要把某个片段或序列变方向之类的

zhengtong781年前2

茉美眉 共回答了15个问题 | 采纳率80%

正向测序结果可以找到反向引物的反向互补序列
反向测序结果可以找到正向引物的反向互补序列

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5'race 只扩增出一条带 测序回来不对,能找到通用引物,找不到特异引物,是什么原因啊

spcflying1年前1

jingxingweixian 共回答了23个问题 | 采纳率95.7%

可以只加入通用引物做一个control,怀疑你扩出来的片段是只有通用引物结合扩增出来的,而特异性引物并没有结合

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ATGGAATATCTWATACCTGTTTTGC 这段引物有什么问题吗,有出现内含子的剪切位点么?

ATGGAATATCTWATACCTGTTTTGC 这段引物有什么问题吗,有出现内含子的剪切位点么?
我用这段引物可以扩出cDNA全长,但却扩不出基因组全长,请问可能是哪里出现了问题?

zhoulin8ss231年前1

不平坦 共回答了21个问题 | 采纳率90.5%

如果扩的出cDNA却扩不出基因组的话,那么可能你的引物跨了内含子了.

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10ul体系pcr中所加引物的浓度

angelall1年前2

air_force_one 共回答了22个问题 | 采纳率90.9%

一般5~10uM加1uL,相对来说少一点更好

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