基因工程原理与技术的图书目录

基因工程的原理是目的基因的获取，克隆基因载体的选择与改造，目的基因与载体的连接，重组DNA分子导入受体细胞，筛选出含感兴趣基因的重组DNA转化细胞。需要一些重要的工具酶，如限制性内切核酸酶连接酶等。基因工程的含义基因工程geneticengineering又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品的遗传技术。基因工程技术为基因的结构和功能的研究提供了有力的手段。

（1）基因工程技术所依据的遗传学原理是基因重组．基因表达载体的构建过程需要限制酶和DNA连接酶参与． （2）启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，驱动转录过程的进行． （3）基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的获取，②基因表达载体的构建，③将目的基因导入受体细胞，④目的基因的检测与鉴定，一定遵循碱基互补配对原则的是基因表达载体的构建和目的基因的检测和鉴定． （4）由于不同生物DNA分子结构基本相同，所以不同生物之间基因能够转移成功，同时说明不同生物共用一套密码子． （5）检测目的基因是否导入受体细胞染色体的DNA上可采用DNA分子杂交技术，需要用放射性同位素标记的含目的基因的DNA作探针进行检测． （6）基因表达包括转录和翻译两个步骤，产物是蛋白质，故选：C． （7）根据题意，转基因油料植物表达结果是获得高产油，可将该植物制出的植物油与同等质量的非转基因植物制出的植物油称重比较，来判断是否真的具有出油高的特点． 故答案为： （1）基因重组 限制酶和DNA连接 （2）是RNA聚合酶识别和结合的位点，驱动转录 （3）基因表达载体的构建 目的基因的检测和鉴定 （4）不同生物DNA分子的基本结构相同 遗传密码 （5）含目的基因的DNA DNA分子杂交 （6）C （7）将该植物制出的植物油与同等质量的非转基因植物制出的植物油称重比较

基因重组，自然界中基因重组只有在有性生殖过程即减数分裂的联会时期和减一后期非同源自由组合，基因工程是认为的将异源基因重组。我是生物老师有疑问或者补充欢迎继续提，我尽量回答。

DNA的重组

是的，是人工的基因重组，不属于自然条件的变异那个基基因重组，但是确实是人为作用下控制不同性状的基因重新组合。

考点： 基因工程的原理及技术 专题： 分析： 1、所有生物的基因结构和化学组成相同，因此不同生物的基因能连接在一起；2、自然界中所有生物共用一套遗传密码子，因此一种生物的基因能在另一种生物体内表达． 由于自然界中所有生物共用一套遗传密码子，因此一种生物的基因能在另一种生物体内表达．如大肠杆菌细胞内可表达人胰岛素基因而产生胰岛素．故选：B． 点评： 本题知识点简单简单，考查基因工程的原理及技术，要求考生理解两点并注意区分，即不同生物生物的基因能连接在一起的原因、一种生物的基因能在另一种生物体内表达的原因．

考点： 基因工程的原理及技术 专题： 分析： 基因工程的概念：基因工程的别名基因拼接技术或DNA重组技术操作环境生物体外操作对象基因 操作水平DNA分子水平基本过程剪切→拼接→导入→表达结果人类需要的基因产物 基因工程是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品．由此可见，基因工程的原理是基因重组．故选：C． 点评： 本题比较基础，考查基因工程的原理及技术，要求考生识记基因工程的概念，掌握基因工程的原理及相关操作，能根据题干要求作出准确的判断，属于考纲识记和理解层次的考查．

一、诱变育种：诱变育种是指利用人工诱变的方法获得生物新品种的育种方法原理：基因突变方法：辐射诱变，激光、化学物质诱变，太空（辐射、失重）诱发变异→选择育成新品种优点：能提高变异频率，加速育种过程，可大幅度改良某些性状；变异范围广。缺点：有利变异少，须大量处理材料；诱变的方向和性质不能控制。改良数量性状效果较差。二、杂交育种：杂交育种是指利用具有不同基因组成的同种（或不同种）生物个体进行杂交，获得所需要的表现型类型的育种方法。其原理是基因重组。方法：杂交→自交→选优优点：能根据人的预见把位于两个生物体上的优良性状集于一身。缺点：时间长，需及时发现优良性状。

A、基因工程又叫DNA重组技术，基因工程的生物学原理是基因重组，A正确； B、按照人们的意愿，通过体外DNA重组和转基因等技术定向改造生物的性状，B正确； C、DNA重组技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶，其中基因的针线是DNA连接酶，C正确； D、基因工程的运载体包括质粒、噬菌体和动植物病毒，其中质粒是基因工程中最常见的载体，在原核细胞中广泛存在，D错误． 故选：D．

基因工程原理：基因重组。工具：限制性核酸内切酶（来获取目的基因和打开运载体中相同片段的粘性末端），运载体（与目的基因结合的DNA分子，一般作为运载体的有质粒，病毒等），DNA连接酶（把不同基因中的磷酸二酯键连接起来，形成一个结构稳定的DNA）。

在答这个问题之前，首先要区分基因重组和基因突变的含义：基因重组是指非等位基因间的重新组合。能产生大量的变异类型，但只产生新的基因型，不产生新的基因。基因突变是指基因的分子结构的改变，即基因中的脱氧核苷酸的排列顺序发生了改变，从而导致遗传信息的改变。基因突变的频率很低，但能产生新的基因，对生物的进化有重要意义。基因工程中用到的目的基因是自然界已有的，从而培育出的转基因生物只是产生新的基因型，不产生新的基因，所以说基因工程的原理是基因重组而不是基因突变。

基因工程的手段主要是在一段基因中插入或者去掉一段序列.这个插入或者去掉的技术手段都是利用基因重组的原理的. 当然,也有人工诱发点突变的,不过都是在载体上定位诱发,然后还是要通过重组才能整合到表达细胞内. 不管是哪样,都不是增加突变,因为序列的变化都是事先设计好的.

基因重组是由于不同DNA链的断裂和连接而产生DNA片段的交换和重新组合，形成新DNA分子的过程。因此基因工程中的技术是交换了DNA片段,因此属于基因重组.谢谢你的提问!

插入外来DNA可以是引入某个有益基因或导致特定基因失活，引起的基因突变是相对于原基因组而言的。有益的基因突变或重组开展了，不就成了工程了吗？如：原核青霉素生产、真核转基因作物。

不对，还有基因重组。

基因工程的优点这样的答案也是可以的基因工程的有点主要体现在：目的性强，育种周期短，可克服远缘杂交不亲和障碍。基因工程知识点基因工程是生物选修三课本的内容，也是高中生要掌握的重要知识点。下面我为大家整理高中生物选修三基因工程知识点，希望对大家有所帮助!高中生物选修三基因工程知识点一、基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。二、基因工程的原理及技术原理：基因重组技术基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端.2.“分子缝合针”——DNA连接酶两种DNA连接酶的比较：①.相同点：都缝合磷酸二酯键。②.区别：E?coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3.“分子运输车”——载体载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。最常用的载体是质粒：它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3.PCR技术扩增目的基因原理：DNA双链复制过程：①加热至90～95℃DNA解链;②冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链;③加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成第二步：基因表达载体的构建1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2.组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。第三步：将目的基因导入受体细胞1.转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2.常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。3.将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞：4.重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达.第四步：目的基因的检测和表达1.首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术.2.其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原-抗体杂交。4.有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。基因工程的应用:1.植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质。2.动物基因工程：提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物。3.基因治疗：把正常的外源基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥作用。蛋白质工程的概念：蛋白质工程：是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。蛋白质工程崛起的缘由：基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质蛋白质工程的基本原理：它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构，又称为第二代的基因工程。基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列以上是蛋白质工程特有的途径;以下按照基因工程的一般步骤进行。设计中的困难：如何推测非编码区以及内含子的脱氧核苷酸序列高中生物选修三知识要点1.基因工程的诞生基因工程：按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程诞生的理论基础是在生物化学、分子生物学和微生物学科的基础上发展起来，技术支持有基因转移载体的发现、工具酶的发现，DNA合成和测序仪技术的发明等。2.基因工程的原理及技术基因工程操作中用到了限制酶、DNA连接酶、运载体3.基因工程的应用在农业生产上：主要用于提高农作物的抗逆能力，以及改良农作物的品质和利用植物生产药物等方面。基因治疗不是对患病基因的修复，基因检测所用的DNA分子只有处理为单链才能与被检测的样品，按碱基配对原则进行杂交。4.蛋白质工程蛋白质工程的本质是通过基因改造或基因合成，对先有蛋白质进行改造或制造新的蛋白质，所以被形象地称为第二代基因工程;基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质高中生物选修三知识点1.植物的组织培养细胞工程：指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过细胞水平或者细胞器水平上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获取细胞产品的一门综合科学技术。在细胞器水平上改变细胞的遗传物质，属于细胞工程。细胞全能性：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能。考点细化：①都具有该生物全部遗传信息，因此从理论上讲，生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。②细胞在生物体内没有表现出全能性的原因是基因选择性表达。③植物细胞的全能性得以实现的条件是离体，合适的营养和激素，无菌操作。④在生物的所有的细胞中，受精卵细胞的全能性最高。植物组织培养：在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配置的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。考点细化：①已分化的细胞经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程叫脱分化。②再分化是愈伤组织继续进行培养，重新分化出根或芽等器官。③愈伤组织细胞排列疏松而无规则，高度液泡化的呈不定型状态的薄壁细胞。④植物组织培养时培养基的成分有矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素、有机添加物，与动物细胞培养相比需要蔗糖、植物激素，不需要动物血清。⑤在植物组织培养脱分化过程中，需要植物激素⑥植物组织培养全过程中都需要无菌，愈伤组织之前不需要光照植物组织培养技术的用途：微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。考点细化：①用植物体的茎尖、根尖来获得无病毒植物②人工种子中人工胚乳相当于大豆种子的子叶，人工种子与正常种子相比发芽率高。③转基因植物的培育需要植物组织培养将不同种植物的体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体叫做植物体细胞杂交。考点细化：①用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁获得原生质体②物理方法：电刺激、振荡、离心;化学方法：聚乙二醇③植物体细胞杂交完成的标志是新细胞壁的形成④融合后的杂种细胞通过植物组织培养才能发育成完整的植物体植物体细胞杂交这一育种方法的最大优点是克服远缘杂交不亲和障碍2.动物的细胞培养与体细胞克隆动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体、胚胎移植等动物细胞培养经过原代培养和传代培养考点细化：①动物细胞培养液的成分有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等②动物细胞培养基液体，植物细胞培养基固体，培养的动物细胞通常取自胚胎、幼龄动物的组织器官②动物细胞培养时的气体环境是95%的空气+5%二氧化碳的混合气体，CO2起到调节PH值作用③使用胰蛋白酶处理使动物组织分散成单个细胞④动物组织处理使细胞分散后的初次培养称为原代培养⑤贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。这样的培养过程通常被称为传代培养。3.细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与植物原生质体融合的区别：操作步骤不同：植物原生质体融合需要先去除细胞壁，动物细胞无细胞壁;诱导方法不同：动物细胞融合可以用物理、化学和生物三种方法，植物原生质体融合只能用物理、化学方法;最终目的不同：植物原生质体融合最终是为了获得杂种植株，动物细胞融合最主要目的是获得单克隆抗体。单克隆抗体与血清抗体相比特异性强、灵敏度高并可大量制备熟悉单克隆抗体制备过程。考点细化①生产杂交瘤细胞要用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合②注射相应抗原后，从小鼠脾脏中提取出B淋巴细胞③杂交瘤细胞既能大量增殖，又能产生专一抗体。④制备单克隆抗体过程中需要两次筛选基因工程的优点高中生物A、植物体细胞杂交、基因工程都定向改造生物的遗传性状，能够战胜远缘杂交不亲和妨碍，A准确；B、植物体细胞杂交进程需求纤维素酶、果胶酶，动物细胞培育进程需求胰蛋白酶，基因工程需求约束酶、DNA连接酶，B准确；C、克隆动物培育进程涉及到动物细胞核移植、前期胚胎培育和胚胎移植等，而试管婴儿培育进程涉及到体外受精、前期胚胎培育和胚胎移植等，C过错；D、使用动物细胞工程制备的单克隆抗体的长处是特异性强、灵敏度高，可很多制备，D准确．故选：ABD．基因工程的缺点基因工程育种的缺点是：可能会引起生态危机，技术难度大。其原理：基因重组。其方法：提取目的基因→装入载体→导入受体细胞→基因表达→筛选出符合要求的新品种。其优点：不受种属限制，可根据人类的需要，有目的地进行。

生物制法：首先剪切胰岛素基因，再将胰岛素基因转入人的大肠杆菌内，再创造大肠杆菌裂殖的有利环境，对大肠杆菌进行大规模培养，使之产生大量的治疗糖尿病的药物——胰岛素。 基因制法: 在基因工程人胰岛素的生产过程中,一般是先表达胰岛素原,然后对胰岛素原复性,复性后的胰岛素原通过酶切得到有活性的胰岛素.其中胰岛素原的复性效率是决定最终收率的关键因素,正确折叠与错误折益胰岛素原的分子量完全相同,结构非常相似,采用RT-HPLC可对其进行分离检定.Sergeev等利用反相色谱建立了复性液中胰岛素原的检测方法.如果要对正确折叠与错误折盛胰岛素原的结构进一步说明,可将其用蛋白酶V8酶解,然后用RP-HPLC-MS作肤图谱.Damn等用S.aureus protease V8酶解胰岛素原,然后用R"FHPLC做肚谱图,并结合质谱法对重组胰岛素原的折受过程进行了监测.我们的书上就是这么说的

一些载体（如PUC系列质粒）带有β-半乳糖苷酶（lacZ）N端α片段的编码区，该编码区中含有多克隆位点（MCS），可用于构建重组子。这种载体适用于仅编码β-半乳糖苷酶C端ω片段的突变宿主细胞。因此，宿主和质粒编码的片段虽都没有半乳糖苷酶活性，但它们同时存在时，α片段与ω片段可通过α-互补形成具有酶活性的β-半乳糖苷酶。这样，lacZ基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补。由α-互补而产生的LacZ+细菌在诱导剂IPTG（异丙基硫代半乳糖苷）的作用下，在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落。而当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后，几乎不可避免地破坏α片段的编码，使得带有重组质粒的LacZ-细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选，称为蓝白斑筛选。扩展资料：适用方面：设计适用于蓝白斑筛选的基因工程菌为β-半乳糖苷酶缺陷型菌株。这种宿主菌基因组中编码β-半乳糖苷酶的基因突变，造成其编码的β-半乳糖苷酶失去正常N端一个146个氨基酸的短肽（即α肽链），从而不具有生物活性，即无法作用于X-gal产生蓝色物质。用于蓝白斑筛选的载体具有一段称为lacz"的基因，lacz"中包括：一段β-半乳糖苷酶的启动子；编码α肽链的区段；一个多克隆位点(MCS)。MCS位于编码α肽链的区段中，是外源DNA的选择性插入位点。虽然上述缺陷株基因组无法单独编码有活性的β-半乳糖苷酶，但当菌体中含有带lacz"的质粒后，质粒lacz"基因编码的α肽链和菌株基因组表达的N端缺陷的β-半乳糖苷酶突变体互补，具有与完整β-半乳糖苷酶相同的作用X-gal生成蓝色物质的能力，这种现象即α-互补。参考资料来源：百度百科-蓝白斑筛选

　　基因工程是利用重组技术，在体外通过人工“剪切”和“拼接”等方法，对各种生物的核酸（基因）进行改造和重新组合，然后导入微生物或真核细胞内，使重组基因在细胞内表达，产生出人类需要的基因产物，或者改造、创造新特性的生物类型。　　从实质上讲，基因工程的定义强调了外源DNA分子的新组合被引入到一种新的寄主生物中进行繁殖。这种DNA分子的新组合是按工程学的方法进行设计和操作的，这就赋予基因工程跨越天然物种屏障的能力，克服了固有的生物种（species）间限制，扩大和带来了定向改造生物的可能性，这是基因工程的最大特点。　　基因工程包括把来自不同生物的基因同有自主复制能力的载体DNA在体外人工连接，构成新的重组的DNA，然后送到受体生物中去表达，从而产生遗传物质的转移和重新组合。　　基因工程要素：包括外源DNA，载体分子，工具酶和受体细胞等。　　

是的，都是分子水平！DNA和蛋白质都是生物大分子。严格来说，前两者属于分子杂交技术（也算是基因工程原理吧）；第三个不属于基因工程，只是免疫学的一种实验技术。不过，一般基因工程指的是：DNA分子重组技术。

正是限制酶具有专一性，所以才要用同一种限制酶。限制酶的专一性，指的是识别和切割特定的碱基序列。目的基因和载体上有相同的限制酶识别序列（不是相同的基因），用同一种限制酶切割，才能产生相同的粘性末端，才能将目的基因与载体连接起来。限制酶把目的基因切下来后，可以用连接酶将其与载体连接起来。

转基因技术的理论基础来源于进化论衍生来的分子生物学。基因片段的来源可以是提取特定生物体基因组中所需要的目的基因，也可以是人工合成指定序列的基因片段。基因片段被转入特定生物中，与其本身的基因组进行重组，再从重组体中进行数代的人工选育，从而获得具有稳定表现特定的遗传性状的个体。该技术可以使重组生物增加人们所期望的新性状，培育出新品种。人们常说的"遗传工程"、"基因工程"、"遗传转化"均为转基因的同义词。转基因技术的原理是将人工分离和修饰过的优质基因，导入到生物体基因组中，从而达到改造生物的目的。由于导入基因的表达，引起生物体的性状，可遗传的修饰改变，这一技术称之为人工转基因技术（Transgene technology）。人工转基因技术就是把一个生物体的基因转移到另一个生物体DNA中的生物技术。具有不确定性。常用的方法和工具包括显微注射、基因枪、电破法、脂质体等。转基因最初用于研究基因的功能，即把外源基因导入受体生物体基因组内（一般为模式生物，如拟南芥或斑马鱼等），观察生物体表现出的性状，达到揭示基因功能的目的。

嫁接是指把一个植物体的芽或枝，接在另一个植物体上，使结合在一起的两部分长成一个完整的植物体，没有改变生物的遗传物质，嫁接俗称“移花接木”．基因工程是人类根据一定的目的和设计，对DNA分子进行体外加工操作，再引入受体生物，以改变后者的某些遗传性状，从而培育生物新类型或治疗遗传疾病的一种现代的、崭新的、分子水平的生物工程技术，可见改变了生物的遗传物质，其原理不是“移花接木”．可见题中的叙述是错误的．故答案为：×

1、α－互补和插入失活 在LacZ—的大肠杆菌中，在有IPTG诱导物和X-gal生色底物的平板培养中，菌落是白色的。若在该细胞中引入pUC质粒，其上有LacZ′，质粒和大肠杆菌DNA可实现α－互补， 表达出β-半乳糖苷酶，可降解生色底物使菌落呈蓝色。 如果在质粒的多克隆位点的某个酶切点上克隆了外源基因，则LacZ′基因受到破坏，便不能再和缺陷型受体菌中生成有活性的β-半乳糖苷酶，因此菌落呈白色。 实验设计自己设计吧。2、酶谱的原理是：限制性内切酶在DNA上有特异的识别和切割位点，可将DNA切开而得到两个或两个以上的大小不同的片段，这些片段可通过电泳分离并检测其大小。双酶切法酶切图谱构建是使用两种不同的限制性内切酶对同一个DNA分子进行单酶切和双酶切，将所得的片段进行对比组装，对交替区域进行加减以确定酶切位点的相对位置。所以选择的各限制酶识别顺序载体则分散于整个DNA分子中。3、要求是在酶切酶联是不能移码这一原则。而且在选择酶切位点具有唯一性。否则会把载体切成很多段。有一个软件可以用，你把你的序列输进去，他就会显示酶切位点和酶，然后你自己选择。软件是 DNAssist2.2 人工查找很麻烦。你自己去下载自己找吧（或者叫学长帮你找出来，自己分析）。我没有软件。我也在忙考试。4、同第二题。

看高中必修三课本

1、基因工程也称为遗传工程，是生物技术的主体技术。基因工程是指按照人类的愿望，将不同生物的遗传物质在体外人工剪切并和载体重组后转入细胞内进行扩增，并表达产生所需蛋白质的技术。基因工程能够打破种属的界限，在基因水平上改变生物遗传性，并通过工程化为人类提供有用产品及服务。2、细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的方法，通过某种工程学手段，在细胞整体水平或细胞器水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合技术科学。细胞工程涉及的领域相当广泛，就其技术范围而言，大致有细胞融合技术、细胞拆合技术、染色体导入技术、基因转移技术、胚胎移植技术和细胞组织培养技术等。

这里的基因重组是广义上的基因重组，是分子水平的基因重组，是指在人为条件下利用分子生物学手段将该基因与任何其他基因分子进行剪切与拼接，并非孟德尔遗传定律中的基因重组。

基因重组1.目的基因的获取2.克隆载体的选择与构建3.外源基因与载体的连接4.重组DNA导入受菌体5重组体的筛选6基因的表达。 用人工手段对DNA进行改造和重新组合的技术。包括对DNA分子的精细切割、部分序列的去除、新序列的加入和连接、DNA分子扩增、转入细胞的复制繁殖、筛选、克隆、鉴定和序列测定等等，是基因工程技术的核心。

杂交育种操作简便使同种生物的不同优良性状集中于同一个体具有预见性诱变育种能提高变异频率，加速育种过程，可大幅度改良某些性状；变异范围广单倍体育种明显缩短育种年限，加速育种进程多倍体育种可培育出自然界中没有的新品种，且培育出的植物器官大，产量高，营养丰富基因工程不受种属限制，可根据人类的需要，有哗梗糕妓蕹幻革潍宫璃目的地进行（具有目的性）

是基因重组，诱变也是在基因层面上进行操作的，如染色体变异、基因突变。

转基因技术的原理是将人工分离和修饰过的优质基因，导入到生物体基因组中，从而达到改造生物的目的。由于导入基因的表达，引起生物体的性状，可遗传的修饰改变，这一技术称之为人工转基因技术（Transgene technology）。人工转基因技术就是把一个生物体的基因转移到另一个生物体DNA中的生物技术。具有不确定性。常用的方法和工具包括显微注射、基因枪、电破法、脂质体等。转基因最初用于研究基因的功能，即把外源基因导入受体生物体基因组内（一般为模式生物，如拟南芥或斑马鱼等），观察生物体表现出的性状，达到揭示基因功能的目的。 转基因植物是基因组中含有外源基因的植物。通过原生质体融合、细胞重组、遗传物质转移、染色体工程技术获得，改变植物的某些遗传特性，培育优质新品种，或生产外源基因的表达产物，如胰岛素等。在过去的二十年里，随着分子生物学各领域的不断发展，植物基因的分离、基因工程载体的构建、细胞的基因转化、转化细胞的组织培养、植株再生及外源基因表达的检测等各项技术日趋成熟和完善，有关植物基因工程的研究日新月异，许多以前根本不可能的基因转化工作在越来越多的植物上获得成功。研究转基因植物的主要目的是提高多肽或工业用酶的产量，改善食品质量，提高农作物对虫害及病原体的抵抗力。常规的药用蛋白大部分是利用生化的方法提取或微生物发酵获得的，这类活性物质一般在活细胞中含量甚微，且提取过程复杂，成本高，远远满足不了社会的需要。应用转基因植物来生产这些药用蛋白，包括疫苗、抗体、干扰素等细胞因子，可以利用植物大田栽种的方式大量生产，大幅度降低生产成本，提高产量，还可以获得常规手段无法获得的药物。利用植物来生产疫苗的最大优点是他可以作为食品直接口服。通过各种植物转基因技术将多台疫苗基因转入植物，从而得到表达多肽疫苗的转基因植物。随着抗体基因工程能将抗体基因（从小的活性单位到完整抗体的重、轻链基因）从单抗杂交瘤中分离出来，人们就开始想办法利用转基因植物来表达这些抗体。1989年Hiatt将鼠杂交瘤细胞产生的抗体基因转入烟草细胞获得了植物抗体，并且发现植物抗体具有杂交瘤来源抗体同样的抗原结合能力，既有功能性。在这之后，全长抗体、单域抗体和单链抗体在转基因植物中均获得成功表达。用植物抗体进行局部免疫治疗将是一个引人瞩目的领域，应用高亲和性抗体进行局部治疗可以治愈龋齿及其它一些常见病。植物转基因可获得更多的新品种，蔬菜，水果，花卉都能够在保留其优良品质的情况下优化。 人工转基因动物就是基因组中含有外源基因的动物。它是按照预先的设计，融合重组细胞、遗传物质转移、染色体工程和基因工程技术将外源基因导入精子、卵细胞或受精卵，再以生殖工程技术，有可能育成转基因动物。通过生长素基因、多产基因、促卵素基因、高泌乳量基因、瘦肉精基因、角蛋白基因、抗寄生虫基因、抗病毒基因等基因转移，可能育成优良的可养殖品种。基因动物是指用实验导入的方法将外源基因在染色体基因内稳定整合并能稳定表达的一类动物。1974年，Jaenisch应用显微注射法，在世界上首次成功地获得了SV40DNA转基因小鼠。其后，Costantini将兔-珠蛋白基因注入小鼠的受精卵，使受精卵发育成小鼠，表达出了兔β-珠蛋白；Palmiter等把大鼠的生长激素基因导人小鼠受精卵内，获得“超级”小鼠；Church获得了首例转基因牛。到目前为止，人们已经成功地获得了转基因鼠、鸡、山羊、猪、绵羊、牛、蛙以及多种转基因鱼。还可将转基因动物作为生物工厂（Biofactories），包括，乳腺生物反应器和输卵管生物反应器等，如以转基因小鼠生产凝血因子IX、组织型血纤维溶酶原激活因子（t-PA）、白细胞介素2、α1-抗胰蛋白酶，以转基因绵羊生产人的α1-抗胰蛋白酶，以转基因山羊、奶牛生产LAt-PA，以转基因猪生产人血红蛋白等，这些基因产品具有高效、优质、廉价与相应的人体蛋白具有同样的生物活性，且多随乳汁分泌，便于分离纯化，基于系统生物学的发展，转基因系统生物技术-合成生物学成为不仅单基因而且多基因乃至基因组设计、合成与转基因的新一代生物技术。但由于人工转基因动物，它们受遗传镶嵌性和杂合性的影响，其有性生殖后代变异较大，难以形成稳定遗传的转基因品系。因而，尝试从受体动物细胞中分离出线粒体，以外源基因对其进行离体转化，再将人工转基因线粒体导入受精卵，所发育成的人工转基因动物，雌性个体外培养的卵细胞与任一雄性个体交配或体外人工受精，由于线粒体的细胞质遗传，其有性后代可能全都是人工转基因个体。

基因工程,又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。步骤 1)提取目的基因 2)目的基因与运载体结合 3)将目的基因导入受体细胞 4)目的基因的检测和表达　1.转基因鱼 　　生长快、耐不良环境、肉质好的转基因鱼（中国）。 　　2.转基因牛 　　乳汁中含有人生长激素的转基因牛（阿根廷）。 　　3.转黄瓜抗青枯病基因的甜椒 　　4.转鱼抗寒基因的番茄 　　5.转黄瓜抗青枯病基因的马铃薯 　　6.不会引起过敏的转基因大豆</B> 　　7.超级动物 　　导入贮藏蛋白基因的超级羊和超级小鼠 　　8.特殊动物 　　</B>导入人基因具特殊用途的猪和小鼠 　　9.抗虫棉 　　苏云金芽胞杆菌可合成毒蛋白杀死棉铃虫，把这部分基因导入棉花的离体细胞中，再组织培养就可获得抗虫棉。 基因工程胰岛素 基因工程干扰素 其它基因工程药物 SCID的基因工程治疗 等等 细胞工程定义1：通过细胞融合、核移植、细胞器移植或染色体操作，产生杂种细胞并发育成个体的技术。定义2：应用细胞生物学和分子生物学的方法，通过类似于工程学的步骤在细胞整体水平或细胞器水平上，遵循细胞的遗传和生理活动规律，有目的地制造细胞产品的一门生物技术。 高中阶段一般为细胞融合，细胞重组，植物体细胞杂交应用：繁育优良品种，获得可以持续分泌干扰素的体外培养细胞系等等

基因拼接技术和DNA重组技术。超级西红柿利用基因拼接和DNA重组技术原理，把西红柿DNA分离出来，在体外进行切割、拼接和重组，然后通过运载工具将重组的基因导入某种宿主细胞或个体。产生转基因的西红柿，转基因西红柿产品产量高，抗病虫害，耐存储。

基因工程的核心技术是DNA的重组技术。重组即利用供体生物的遗传物质或人工合成的基因，经过体外或离体的限制酶切割后与适当的载体连接起来形成重组DNA分子，然后在将重组DNA分子导入到受体细胞或受体生物构建转基因生物，该种生物就可以按人类事先设计好的蓝图表现出另外一种生物的某种性状。除DNA重组技术外，基因工程还应包括基因的表达技术，基因的突变技术，基因的导入技术等。基因工程一般分为4个步骤：二、工程菌的获得1，确定目的产物。2，找出产该产物的细胞。3，将细胞破碎后提纯出全部信使RNA。这些信使中包含了该细胞内表达的所有蛋白质的合成信息。4，利用基因扩增技术（PCR），找出所需的目的基因。5，将目的基因连接到设计好的质粒载体，形成了重组DNA分子。6，将重组后DNA分子引入到受体细胞内，然后选择合适的培养条件使细胞繁殖。根据选择性标记，从菌落中筛选出目的基因的重组(工程)菌。三、工程菌应具备的条件1，发酵产品是高浓度、高转化率和高产率的，同时是分泌型菌株。2，菌株能利用常用的碳源，并可进行连续发酵。3，菌株不是致病株，也不产内毒素。4，代谢控制容易进行。5，能进行适当的DNA重组，并且稳定，重组的DNA不易脱落。四、工程菌的应用1，基因药物例如，红细胞生成素、胰岛素、干优素、乙肝疫苗、生长激素和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子等。2，其它发酵产品例如酶制剂、氨基酸（苏氨酸、色氨酸）、抗生素等。第二节 工程菌的培养就生产流程而言，从发酵到分离、纯化目标产物，工程菌和常规微生物并无太多的差异。但工程菌在保存过程中及发酵生产过程中表现出不稳定性，以及安全性等问题，使得工程菌的培养有着自身所特有的特点。

E. coli DH5α菌株带有β-半乳糖苷酶C端部分序列的编码信息。 　　载体质粒DNA 上带有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和β-半乳糖苷酶N端146个氨基酸的编码序列。(这个编码区中插入了一个多克隆位点,但并没有破坏lacZ的阅读框架,不影响其正常功能。)　　在各自独立的情况下,载体质粒DNA和DH5α编码的β-半乳糖苷酶的片段都没有酶活性。但在载体质粒DNA和DH5α融为一体时可形成具有酶活性的蛋白质。 　　这种lacZ基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的β-半乳糖苷酸阴性突变体之间实现互补的现象叫α-互补。

基因工程的原理是基因重组

基因工程的原理是基因重组。基因工程又被称为基因拼接技术和DNA重组技术，包括把来自不同生物的基因同有自主复制能力的载体DNA在体外人工连接，构成新的重组的DNA，然后送到受体生物中去表达，从而产生遗传物质的转移和重新组合。而基因重组目的是将一个个体细胞内的遗传基因转移到另一个不同性状的个体细胞内DNA分子，使之发生遗传变异。来自供体的目的基因被转入受体细菌后，可进行基因产物的表达，从而获得用一般方法难以获得的产品，如胰岛素、干扰素、乙型肝炎疫苗等是通过以相应基因与大肠杆菌或酵母菌的基因重组而大量生产的。扩展资料：基因工程特征：1、跨物种性，外源基因到另一种不同的生物细胞内进行繁殖。2、无性扩增，外源DNA在宿主细胞内可大量扩增和高水平表达。基因工程优点：最突出的优点是打破了常规育种难以突破的物种之问的界限，可以使原核生物与真核生物之间、动物与植物之间，甚至人与其他生物之间的遗传信息进行重组和转移。人的基因可以转移到大肠杆菌中表达。参考资料来源：百度百科—基因工程参考资料来源：百度百科—基因重组

基因重组

基因重组

选择育种优点：简便快速缺点：有局限性、不能创造新的基因型原理：基因重组方法：优中选优杂交育种优点：集优缺点：耗时长、无法产生新的基因原理：基因重组方法：杂交、自交、测交诱变育种优点：提高突变频率缺点：盲目性原理：基因突变方法：诱变单倍体育种优点：短时间内获得纯合体缺点：高度不育、技术含量高原理：染色体数目变异方法：花药离体培养多倍体育种优点：器官大、营养丰富缺点：发育延迟、结实率低原理：染色体数目变异方法：秋水仙素处理萌发的种子或幼苗基因工程育种优点：克服远缘杂交不亲和障碍、定向改变生物性状缺点：可能会引起生态危机、技术难度大原理：基因重组方法：将目的基因转入受体细胞你肯定跟我一个学校的、、还是高二不解释…

【 #高二# 导语】既然人生的幕布已经拉开，就必须要用心的演出；既然脚步已经跨出，风雨坎坷也不能退步；既然我已把希望播在那里，就必须要坚持到胜利的谢幕…… 考 网高二频道为你整理了以下文章，希望可以帮到你！ 　　【一】 　　一、基因工程的概念 　　基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。 　　二、基因工程的原理及技术原理：基因重组技术 　　基因工程的基本工具 　　1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶) 　　(1)来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 　　(2)功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。 　　(3)结果：经限制酶切割产生的DN*段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端. 　　2.“分子缝合针”——DNA连接酶 　　(1)两种DNA连接酶(Eu2022coliDNA连接酶和T4DNA连接酶)的比较： 　　①.相同点：都缝合磷酸二酯键。 　　②.区别：Eu2022coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DN*段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。 　　(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DN*段的末端，形成磷酸二酯键。 　　3.“分子运输车”——载体 　　(1)载体具备的条件： 　　①能在受体细胞中复制并稳定保存。 　　②具有一至多个限制酶切点，供外源DN*段插入。 　　③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 　　(2)最常用的载体是质粒： 　　它是一种*露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。 　　(3)其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒 　　基因工程的基本操作程序 　　第一步：目的基因的获取 　　1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。 　　2.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。 　　3.PCR技术扩增目的基因 　　(1)原理：DNA双链复制 　　(2)过程：①加热至90～95℃DNA解链; 　　②冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链; 　　③加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成 　　第二步：基因表达载体的构建 　　1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。 　　2.组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因 　　(1)启动子：是一段有特殊结构的DN*段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。 　　(2)终止子：也是一段有特殊结构的DN*段，位于基因的尾端。 　　(3)标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。 　　第三步：将目的基因导入受体细胞 　　1.转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。 　　2.常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。 　　3.将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞： 　　4.重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是 　　标记基因是否表达. 　　第四步：目的基因的检测和表达 　　1.首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术. 　　2.其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与mRNA 　　杂交。 　　3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取 　　蛋白质，用相应的抗体进行抗原-抗体杂交。 　　4.有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。 　　基因工程的应用: 　　1.植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质。 　　2.动物基因工程：提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物。 　　3.基因治疗：把正常的外源基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥作用。 　　蛋白质工程的概念： 　　蛋白质工程： 　　是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。(基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质) 　　(1)蛋白质工程崛起的缘由：基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质 　　(2)蛋白质工程的基本原理：它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构，又称为第二代的基因工程。 　　(3)基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)以上是蛋白质工程特有的途径;以下按照基因工程的一般步骤进行。(注意：目的基因只能用人工合成的方法) 　　(4)设计中的困难：如何推测非编码区以及内含子的脱氧核苷酸序列 　　【二】 　　1.基因工程的诞生 　　(1)基因工程：按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 　　(2)基因工程诞生的理论基础是在生物化学、分子生物学和微生物学科的基础上发展起来，技术支持有基因转移载体的发现、工具酶的发现，DNA合成和测序仪技术的发明等。 　　2.基因工程的原理及技术 　　基因工程操作中用到了限制酶、DNA连接酶、运载体 　　3.基因工程的应用 　　(1)在农业生产上：主要用于提高农作物的抗逆能力(如：抗除草剂、抗虫、抗病、抗干旱和抗盐碱等)，以及改良农作物的品质和利用植物生产药物等方面。 　　(2)基因治疗不是对患病基因的修复，基因检测所用的DNA分子只有处理为单链才能与被检测的样品，按碱基配对原则进行杂交。 　　4.蛋白质工程 　　蛋白质工程的本质是通过基因改造或基因合成，对先有蛋白质进行改造或制造新的蛋白质，所以被形象地称为第二代基因工程;基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质 　　高中生物选修三知识点 　　1.植物的组织培养 　　(1)细胞工程：指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过细胞水平或者细胞器水平上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获取细胞产品的一门综合科学技术。在细胞器水平上改变细胞的遗传物质，属于细胞工程。 　　(2)细胞全能性：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能。 　　考点细化： 　　①都具有该生物全部遗传信息，因此从理论上讲，生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。 　　②细胞在生物体内没有表现出全能性的原因是基因选择性表达。 　　③植物细胞的全能性得以实现的条件是离体，合适的营养和激素，无菌操作。 　　④在生物的所有的细胞中，受精卵细胞的全能性。 　　(3)植物组织培养：在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配置的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 　　考点细化： 　　①已分化的细胞经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程叫脱分化。 　　②再分化是愈伤组织继续进行培养，重新分化出根或芽等器官。 　　③愈伤组织细胞排列疏松而无规则，高度液泡化的呈不定型状态的薄壁细胞。 　　④植物组织培养时培养基的成分有矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素、有机添加物，与动物细胞培养相比需要蔗糖、植物激素，不需要动物血清。 　　⑤在植物组织培养脱分化过程中，需要植物激素 　　⑥植物组织培养全过程中都需要无菌，愈伤组织之前不需要光照 　　(4)植物组织培养技术的用途：微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。 　　考点细化： 　　①用植物体的茎尖、根尖来获得无病毒植物 　　②人工种子中人工胚乳相当于大豆种子的子叶，人工种子与正常种子相比发芽率高。 　　③转基因植物的培育需要植物组织培养 　　(5)将不同种植物的体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体叫做植物体细胞杂交。 　　考点细化： 　　①用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁获得原生质体 　　②物理方法：电刺激、振荡、离心;化学方法：聚乙二醇 　　③植物体细胞杂交完成的标志是新细胞壁的形成 　　④融合后的杂种细胞通过植物组织培养才能发育成完整的植物体 　　(6)植物体细胞杂交这一育种方法的优点是克服远缘杂交不亲和障碍 　　2.动物的细胞培养与体细胞克隆 　　(7)动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体、胚胎移植等 　　(8)动物细胞培养经过原代培养和传代培养 　　考点细化： 　　①动物细胞培养液的成分有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等 　　②动物细胞培养基液体，植物细胞培养基固体，培养的动物细胞通常取自胚胎、幼龄动物的组织器官 　　②动物细胞培养时的气体环境是95%的空气+5%二氧化碳的混合气体，CO2起到调节PH值作用 　　③使用胰蛋白酶处理使动物组织分散成单个细胞 　　④动物组织处理使细胞分散后的初次培养称为原代培养 　　⑤贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。这样的培养过程通常被称为传代培养。 　　3.细胞融合与单克隆抗体 　　(9)动物细胞融合与植物原生质体融合的区别：操作步骤不同：植物原生质体融合需要先去除细胞壁，动物细胞无细胞壁;诱导方法不同：动物细胞融合可以用物理、化学和生物三种方法，植物原生质体融合只能用物理、化学方法;最终目的不同：植物原生质体融合最终是为了获得杂种植株，动物细胞融合最主要目的是获得单克隆抗体。 　　(10)单克隆抗体与血清抗体相比特异性强、灵敏度高并可大量制备 　　(11)熟悉单克隆抗体制备过程。 　　考点细化 　　①生产杂交瘤细胞要用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合 　　②注射相应抗原后，从小鼠脾脏中提取出B淋巴细胞 　　③杂交瘤细胞既能大量增殖，又能产生专一抗体。 　　④制备单克隆抗体过程中需要两次筛选 　　⑤体外条件下做大规模培养杂交瘤细胞或者注射到小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或者小鼠腹水内就可以提取出大量的单克隆抗体。

生物制法：首先剪切胰岛素基因,再将胰岛素基因转入人的大肠杆菌内,再创造大肠杆菌裂殖的有利环境,对大肠杆菌进行大规模培养,使之产生大量的治疗糖尿病的药物——胰岛素. 基因制法: 在基因工程人胰岛素的生产过程中,一般是先表达胰岛素原,然后对胰岛素原复性,复性后的胰岛素原通过酶切得到有活性的胰岛素.其中胰岛素原的复性效率是决定最终收率的关键因素,正确折叠与错误折益胰岛素原的分子量完全相同,结构非常相似,采用RT-HPLC可对其进行分离检定.Sergeev等利用反相色谱建立了复性液中胰岛素原的检测方法.如果要对正确折叠与错误折盛胰岛素原的结构进一步说明,可将其用蛋白酶V8酶解,然后用RP-HPLC-MS作肤图谱.Damn等用S.aureus protease V8酶解胰岛素原,然后用R"FHPLC做肚谱图,并结合质谱法对重组胰岛素原的折受过程进行了监测.我们的书上就是这么说的

选择育种优点：简便快速缺点：有局限性、不能创造新的基因型原理：基因重组方法：优中选优杂交育种优点：集优缺点：耗时长、无法产生新的基因原理：基因重组方法：杂交、自交、测交诱变育种优点：提高突变频率缺点：盲目性原理：基因突变方法：诱变单倍体育种优点：短时间内获得纯合体缺点：高度不育、技术含量高原理：染色体数目变异方法：花药离体培养多倍体育种优点：器官大、营养丰富缺点：发育延迟、结实率低原理：染色体数目变异方法：秋水仙素处理萌发的种子或幼苗基因工程育种优点：克服远缘杂交不亲和障碍、定向改变生物性状缺点：可能会引起生态危机、技术难度大原理：基因重组方法：将目的基因转入受体细胞你肯定跟我一个学校的、、还是高二不解释…

蓝白筛选 当外源片段插入到pBS质粒的多克隆位点上后会导致读码框架改变, 表达蛋白失活, 产生的氨基酸片段失去α-互补能力, 含重组质粒的转化子在生色诱导培养基上只能形成白色菌落。 而 没有重组质粒的转化子产生α-互补，在生色底物X-gal(5-溴-4氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)下存在下被IPTG(异丙基硫代-β-D-半乳糖苷)诱导形成蓝色菌落。

DNA重组技术是怎样的原理 ，高中生物拜托各位大神 最基本的原理是核酸内切酶的特异切割活性（高中一般只提粘性末端）和连线酶的连结活性，以及碱基互补配对。通过使用特定的核酸内切酶，将目的片段和经改造后的特定载体（质粒、病毒核酸链，其上有特异的切割位点，转录启动、终止序列，以及用于筛选表达的序列）切割，形成能够互补的粘性末端，再通过连线酶进行聚合形成重组子。将重组质粒（以质粒为例）汇入感受态细胞，培养，筛选，最后进行表达 采纳哦 求文件: 高中生物选修3DNA重组技术的基本工具 1.限制性核酸内切酶（简称限制酶）：用于切割载体和目的基因，有专一性，只可形成一种粘性末端。（目的基因和质粒要用同一种限制酶进行切割，为保证粘性末端相同） 2.DNA连线酶：用于连线目的基因与载体（它没有专一性~~可以连线任意粘性末端~~不要把它和DNA聚合酶还有RNA连线酶搞混哦~~） 3.载体：一般选用质粒（细菌中科自主复制的小型环状DNA）还可以用动、植物病毒。 载体的选用需满足的要求：1 要可在受体细胞内自主复制 2 有多个限制酶切点 3 有标记基因，以便筛选含重组基因的细 胞 4 对受体细胞无害 浙江高中生物好学吗，我想选生物，拜托各位大神给点建议 高中的生物没有什么难度，实力中等的人都可以比较好的学习。我是江苏的，实力一般，选的生物，高考A+。也做过其他省的试卷，并不是很难。上课好好听，做做笔记就可以了。说白了，生物其实是半文科半理科，平时多翻翻书就行了。 高中生物各种技术或生物学原理的应用 基因工程的原理是基因重组（也叫基因拼接或者你说的转基因技术）。 抗虫棉的培育，乳腺反应器，膀胱反应器，基因检测，基因治疗这些都是基因工程的应用当然原理也是基因重组。 植物组织培养的原理是植物细胞的全能性。 微型繁殖，作物脱毒，人工种子，花药离体培养，细胞产物的工厂化生产都是植物组织培养的应用，原理当然也是植物细胞的全能性。 植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性（原生质体融合的过程）和细胞的全能性（杂种细胞发育成杂种植株） 像白菜甘蓝，番茄马铃薯等都是植物体细胞杂交的应用。 动物细胞培养的原理是细胞增殖。 蛋白质生物制品的生产，面板移植材料的培育，疫苗等都是动物细胞培养的应用。 动物细胞融合的原理是生物膜的流动性和细胞增殖。 单克隆抗体的制备，单抗诊断盒，生物导弹都是动物细胞融合的应用。 核移植，克隆技术的原理是动物细胞核的全能性。 加速家畜遗传改良，保护濒危物种，克隆器官等都是克隆技术的应用。 手机上一个字一个字敲的，累死了快，希望对你有用。 高中生物(基因重组) 基因重组发生在：减数分裂的减数一期的中期 → 后期过程中，随着同源染色体的分离，非同源染色体就会发生自由组合，即基因重组！ 精卵结合的过程，精卵各自的基因都是一定的，不存在什么基因重组的说法！ 基因重组是指在原有的基因里发生重新组合，排列，就是说基因重组是指在同一个个体中发生的，而受精作用是异体基因第一次的组合，无所谓重组。。。 高中生物必修三人体三道防线疑问拜托各位大神 不对 谁有高中生物必修2 重组DNA技术种子下载，感激不尽 高中生物必修2 重组DNA技术种子下载地址： thunder:QUFodHRwOi8vYWlrYW5keS5vcmcv6auY5Lit55Sf54mp5b+F5L+uMiDph43nu4RETkHmioDmnK8uYXZpP2ZpZD0qM2pIVVJ6cVpsZypCS2tTYjNsZFo5QmFoTUlBQUFBQUFBQUFBQUFBQUFBQUFBQUFBQUFBQUFBQUFBQUFBQUFBJm1pZD02NjYmdGhyZXNob2xkPTE1MCZ0aWQ9RTUxREQ3QkMwMUE5MjgyQkE3N0VDMUMzQkVCM0NCRjcmc3JjaWQ9MTIwJnZlcm5vPTFaWg== 麻烦选为满意答案，谢谢！ 高中生物生物技术实验 高中毕业生可参加普通高等学校招生全国统一考试。截至2016年5月30日，全国高等学校共计2879所，其中：普通高等学校2595所（含独立学院266所），学生们可以根据考试成绩自主择校。 高中生物知识点散乱,怎么从整体上把握?拜托各位大神 有一本书挺好的，不贵6.8元 绿卡凯尔 里面有整个高中的知识点的总结。

　　基因工程是利用重组技术，在体外通过人工“剪切”和“拼接”等方法，对各种生物的核酸（基因）进行改造和重新组合，然后导入微生物或真核细胞内，使重组基因在细胞内表达，产生出人类需要的基因产物，或者改造、创造新特性的生物类型。　　从实质上讲，基因工程的定义强调了外源DNA分子的新组合被引入到一种新的寄主生物中进行繁殖。这种DNA分子的新组合是按工程学的方法进行设计和操作的，这就赋予基因工程跨越天然物种屏障的能力，克服了固有的生物种（species）间限制，扩大和带来了定向改造生物的可能性，这是基因工程的最大特点。　　基因工程包括把来自不同生物的基因同有自主复制能力的载体DNA在体外人工连接，构成新的重组的DNA，然后送到受体生物中去表达，从而产生遗传物质的转移和重新组合。　　基因工程要素：包括外源DNA，载体分子，工具酶和受体细胞等。　　

　　基因工程是生物选修三课本的内容，也是高中生要掌握的重要知识点。下面我为大家整理高中生物选修三基因工程知识点，希望对大家有所帮助! 　　高中生物选修三基因工程知识点 　　一、基因工程的概念 　　基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。 　　二、基因工程的原理及技术原理：基因重组技术 　　基因工程的基本工具 　　1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶) 　　(1)来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 　　(2)功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。 　　(3)结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端. 　　2.“分子缝合针”——DNA连接酶 　　(1)两种DNA连接酶(Eu2022coliDNA连接酶和T4DNA连接酶)的比较： 　　①.相同点：都缝合磷酸二酯键。 　　②.区别：Eu2022coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。 　　(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。 　　3.“分子运输车”——载体 　　(1)载体具备的条件： 　　①能在受体细胞中复制并稳定保存。 　　②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。 　　③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 　　(2)最常用的载体是质粒： 　　它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。 　　(3) 其它 载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒 　　基因工程的基本操作程序 　　第一步：目的基因的获取 　　1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。 　　2.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用 方法 有反转录法和化学合成法。 　　3.PCR技术扩增目的基因 　　(1)原理：DNA双链复制 　　(2)过程：①加热至90～95℃DNA解链; 　　②冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链; 　　③加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成 　　第二步：基因表达载体的构建 　　1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。 　　2.组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因 　　(1)启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。 　　(2)终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段 ，位于基因的尾端。 　　(3)标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。 　　第三步：将目的基因导入受体细胞 　　1.转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。 　　2.常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是 农杆菌转化法，其次还有 基因枪法和 花粉管通道法等。 　　3.将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是 显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞： 　　4.重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是 　　标记基因是否表达. 　　第四步：目的基因的检测和表达 　　1.首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 DNA分子杂交技术. 　　2.其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用 用标记的目的基因作探针与mRNA 　　杂交。 　　3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取 　　蛋白质，用相应的抗体进行抗原-抗体杂交。 　　4.有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如 转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。 　　基因工程的应用: 　　1.植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质。 　　2.动物基因工程：提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物。 　　3.基因治疗：把正常的外源基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥作用。 　　蛋白质工程的概念： 　　蛋白质工程： 　　是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。(基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质) 　　(1)蛋白质工程崛起的缘由：基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质 　　(2)蛋白质工程的基本原理：它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构，又称为第二代的基因工程。 　　(3)基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)以上是蛋白质工程特有的途径;以下按照基因工程的一般步骤进行。(注意：目的基因只能用人工合成的方法) 　　(4)设计中的困难：如何推测非编码区以及内含子的脱氧核苷酸序列 　　高中生物选修三知识要点 　　1.基因工程的诞生 　　(1)基因工程：按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外 DNA 重组和转基因等技术，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 　　(2)基因工程诞生的理论基础是在生物化学、分子生物学和微生物学科的基础上发展起来，技术支持有基因转移载体的发现、工具酶的发现，DNA 合成和测序仪技术的发明等。 　　2.基因工程的原理及技术 　　基因工程操作中用到了限制酶、DNA 连接酶、运载体 　　3. 基因工程的应用 　　(1)在农业生产上：主要用于提高农作物的抗逆能力(如：抗除草剂、抗虫、抗病、抗干旱和抗盐碱等)，以及改良农作物的品质和利用植物生产药物等方面。 　　(2)基因治疗不是对患病基因的修复，基因检测所用的 DNA 分子只有处理为单链才能与被检测的样品，按碱基 配对 原则进行杂交。 　　4. 蛋白质工程 　　蛋白质工程的本质是通过基因改造或基因合成，对先有蛋白质进行改造或制造新的蛋白质，所以被形象地称为第二代基因工程;基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质 　　高中生物选修三知识点 　　1. 植物的组织培养 　　(1)细胞工程：指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过细胞水平或者细胞器水平上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获取细胞产品的一门综合科学技术。在细胞器水平上改变细胞的遗传物质，属于细胞工程。 　　(2)细胞全能性：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能。 　　考点细化： 　　① 都具有该生物全部遗传信息，因此从理论上讲，生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。 　　② 细胞在生物体内没有表现出全能性的原因是基因选择性表达。 　　③ 植物细胞的全能性得以实现的条件是离体，合适的营养和激素，无菌操作。 　　④ 在生物的所有的细胞中，受精卵细胞的全能性最高。 　　(3)植物组织培养：在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配置的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 　　考点细化： 　　① 已分化的细胞经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程叫脱分化。 　　② 再分化是愈伤组织继续进行培养，重新分化出根或芽等器官。 　　③ 愈伤组织细胞排列疏松而无规则，高度液泡化的呈不定型状态的薄壁细胞。 　　④ 植物组织培养时培养基的成分有矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素、有机添加物，与动物细胞培养相比需要蔗糖、植物激素，不需要动物血清。 　　⑤ 在植物组织培养脱分化过程中，需要植物激素 　　⑥ 植物组织培养全过程中都需要无菌，愈伤组织之前不需要光照 　　(4)植物组织培养技术的用途：微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。 　　考点细化： 　　① 用植物体的茎尖、根尖来获得无病毒植物 　　②人工种子中人工胚乳相当于大豆种子的子叶，人工种子与正常种子相比发芽率高。 　　③ 转基因植物的培育需要植物组织培养 　　(5)将不同 种植 物的体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体叫做植物体细胞杂交。 　　考点细化： 　　① 用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁获得原生质体 　　② 物理方法：电刺激、振荡、离心;化学方法：聚乙二醇 　　③ 植物体细胞杂交完成的标志是新细胞壁的形成 　　④ 融合后的杂种细胞通过植物组织培养才能发育成完整的植物体 　　(6)植物体细胞杂交这一育种方法的最大优点是克服远缘杂交不亲和障碍 　　2.动物的细胞培养与体细胞克隆 　　(7)动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体、胚胎移植等 　　(8)动物细胞培养经过原代培养和传代培养 　　考点细化： 　　① 动物细胞培养液的成分有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等 　　② 动物细胞培养基液体，植物细胞培养基固体，培养的动物细胞通常取自胚胎、幼龄动物的组织器官 　　② 动物细胞培养时的气体环境是95%的空气+5%二氧化碳的混合气体，CO2 起到调节 PH值作用 　　③ 使用胰蛋白酶处理使动物组织分散成单个细胞 　　④ 动物组织处理使细胞分散后的初次培养称为原代培养 　　⑤ 贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。这样的培养过程通常被称为传代培养。 　　3.细胞融合与单克隆抗体 　　(9)动物细胞融合与植物原生质体融合的区别：操作步骤不同：植物原生质体融合需要先去除细胞壁，动物细胞无细胞壁;诱导方法不同：动物细胞融合可以用物理、化学和生物三种方法，植物原生质体融合只能用物理、化学方法;最终目的不同：植物原生质体融合最终是为了获得杂种植株，动物细胞融合最主要目的是获得单克隆抗体。 　　(10)单克隆抗体与血清抗体相比特异性强、灵敏度高并可大量制备 　　(11)熟悉单克隆抗体制备过程。 　　考点细化 　　① 生产杂交瘤细胞要用B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合 　　② 注射相应抗原后，从小鼠脾脏中提取出B 淋巴细胞 　　③ 杂交瘤细胞既能大量增殖，又能产生专一抗体。 　　④ 制备单克隆抗体过程中需要两次筛选

生物制法：首先剪切胰岛素基因，再将胰岛素基因转入人的大肠杆菌内，再创造大肠杆菌裂殖的有利环境，对大肠杆菌进行大规模培养，使之产生大量的治疗糖尿病的药物——胰岛素。基因制法:在基因工程人胰岛素的生产过程中,一般是先表达胰岛素原,然后对胰岛素原复性,复性后的胰岛素原通过酶切得到有活性的胰岛素.其中胰岛素原的复性效率是决定最终收率的关键因素,正确折叠与错误折益胰岛素原的分子量完全相同,结构非常相似,采用RT-HPLC可对其进行分离检定.Sergeev等利用反相色谱建立了复性液中胰岛素原的检测方法.如果要对正确折叠与错误折盛胰岛素原的结构进一步说明,可将其用蛋白酶V8酶解,然后用RP-HPLC-MS作肤图谱.Damn等用S.aureusproteaseV8酶解胰岛素原,然后用R"FHPLC做肚谱图,并结合质谱法对重组胰岛素原的折受过程进行了监测.我们的书上就是这么说的

A、该疫苗是编码抗原的基因，该基因的表达产物能充当抗原，引起机体发生特异性免疫反应，而不是DNA分子上具有抗原，A错误；B、引起免疫反应后相应淋巴细胞增多，细胞周期将变短，B正确；C、该疫苗是用病原微生物编码抗原的基因制成的，不能与浆细胞产生的相应抗体发生特异性结合，但其编码的产物能与浆细胞产生的相应抗体发生特异性结合，C错误；D、该疫苗是用病原微生物编码抗原的基因制成的，是基因工程构建表达载体，包括抗原基因（目的基因）、启动子、终止子和标记基因等，D正确．故选：AC．

（1）基因表达载体的构建过程中，需要使用限制酶和DNA连接酶，其中限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使特定部位的两个脱氧梭苷酸之间的磷酸二酯键断开． （2）构建重组质粒时，常用Ti质粒作为载体，是因为Ti质粒上具有T-DNA，它能把目的基因整合到受体细胞染色体DNA． （3）棉花细胞经过E过程形成抗虫棉植株，E过程是利用植物组织培养技术完成的，其原理是植物细胞的全能性．要确定抗虫基因导入棉花细胞后，是否赋予了棉花抗虫特性，还需要在个体水平上做抗虫实验． （4）将目的基因导入植物细胞，除采用上图所示农杆菌转化法外，还可采用基因枪法和花粉管通道法． 故答案为： （1）限制性核酸内切酶（限制酶） DNA连接酶 限制性核酸内切酶（限制酶） （2）T-DNA （3）植物组织培养 植物细胞的全能性 （4）花粉管通道法