动物细胞培养的基本过程

动物细胞培养原理是细胞增殖

动物细胞工程常用的技术手段有：动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体、胚胎移植、核移植等。动物细胞培养是其他技术（如单克隆抗体、胚胎移植、核移植等）的基础，其价值更多的是通过其他技术成果来体现的。而动物细胞融合技术目前较为成熟的最重要的用途便是制备单克隆抗体。动物细胞培养1、概念：动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖.2、原理：细胞增殖3、动物细胞培养的条件:1）.无菌无毒的环境2）.营养3）.温度和pH4）.气体环境4、动物细胞培养技术的应用:1）.蛋白质生物制品的生产如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体2）.健康细胞培养培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植3）.细胞的生理、药理、病理研究

呵呵``好难的题目

动物细胞培养：原理：细胞增殖；有丝分裂以下两个都以动物细胞培养为基础动物细胞融合：原理：细胞膜流动性：；无性繁殖动物细胞核移植技术：原理：动物细胞全能性；无性繁殖（克隆）

先在培养基上, 微生物是固体、半固体培养基都有,成分主要是水、无机盐、生长因子、碳源、氮源等。如果是病毒的话要用细菌进行培养; 动物的话用天然培养基加生长因子比较好,一般是液体培养基,成分主要是水、葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清; 而植物培养基用合成培养基就可以了,一般是...”

常用的消化酶有胰蛋白酶、胆汁酸、胆酸、胆固醇。其原理如下：胰蛋白酶：胰蛋白酶是一种消化蛋白质的酶，能够将蛋白质分解成氨基酸和小肽，在细胞培养中，胰蛋白酶可以用于分离和传代细胞，促进细胞的生长和增殖，胆汁酸和胆酸：胆汁酸和胆酸是一种溶解脂肪的物质，能够将脂肪分解成脂肪酸和甘油，在细胞培养中，胆汁酸和胆酸可以用于分离和传代细胞，促进细胞的生长和增殖，胆固醇：胆固醇是一种重要的细胞成分，能够调节细胞膜的流动性和稳定性，在细胞培养中，胆固醇可以用于增加培养基的营养成分，促进细胞的生长和增殖。

细胞膜的流动性

.动物细胞培养液的成分：体外细胞培养所需营养物质与体内基本相同，例如，需要糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等。将细胞所需的上述物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基，称为合成培养基。由于动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚，所以需要加入动物血清以提供一个类似生物体内的环境，因此在使用合成培养基时，通常需加入血清、血浆等一些天然成分。2.动物细胞培养液的特点：液体培养基、通常含动物血清。3.动物细胞培养的条件：①无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行无菌处理，通常还要在培养液中加入一定量的的抗生素，以防被污染。此外应定期更换培养液，以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害。②营养物质：无机物（无机盐、微量元素等），有机物（糖、氨基酸、促生长因子等） 。③血清和血浆 (提供细胞生长必须的营养成份) 。④温度和pH（36.5±0.5℃，7.2~7.4） 。⑤气体环境（95%的空气+5%CO 2的混合气体） 。其中5%CO2气体是为保持培养液的pH稳定 。3.基本过程取动物胚胎或幼龄动物器官、组织。将材料剪碎，并用胰蛋白酶（或用胶原蛋白酶）处理（消化），形成分散的单个细胞，将处理后的细胞移入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，成为细胞贴壁。当贴壁细胞分裂生长到互相接触时，细胞就会停止分裂增殖，出现接触抑制。此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理。再配成一定浓度的细胞悬浮液。另外，原代培养就是从机体取出后立即进行的细胞、组织培养。当细胞从动植物中生长迁移出来，形成生长晕并增大以后，科学家接着进行传代培养，即将原代培养细胞分成若干份，接种到若干份培养基中，使其继续生长、增殖。通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞称为细胞株。当培养超过50代时，大多数的细胞已经衰老死亡，但仍有部分细胞发生了遗传物质的改变出现了无限传代的特性，即癌变。此时的细胞被称为细胞系。 培养基添加胰岛素可促进细胞对葡萄糖的摄取。与植物细胞的区别1.培养基不同：植物细胞（固体培养基），动物细胞（液体培养基） 。2.培养基的成分不同：动物细胞培养必须利用动物血清，植物组织培养则不需要。3.产物不同：植物组织培养最后一般得到新的植物个体，而动物细胞培养因为动物体细胞一般不能表达其全能性，因此得到的是同一种的细胞。4.原理不同：植物组织培养的原理为植物细胞的全能性，动物细胞培养的原理为细胞的增殖。5.过程不同：植物组织培养的过程为脱分化和再分化，动物细胞培养的过程为原代培养和传代培养。

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　　这个真没什么好解释的，没有细胞培养技术做基础，根本不可能发展处细胞核移植技术。就像走是跑的基础一样，不会走肯定是不会跑的。

如果你的意思是利用动物细胞培养来检测某物质对细胞的毒性如何，即将该物质加入该细胞的培养基当中，浓度高低不同做成一系列梯度（将加了该化学物质的细胞与未加的细胞进行对照比较如果该化学物质不易溶解于该细胞的培养基，则需要多做一个对照组，为加了该物质的溶剂但未加该物质的细胞比较的时候主要看存活率和代谢率两个指标。

幼龄动物或胚胎的细胞分化程度低，增殖能力强，更容易培养。动物细胞培养是指从动物机体中取出相应的组织并将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让细胞生长和增殖。

原理 促融剂 什么是原代培养 传代培养 细胞株 细胞系 酶种类 单克隆抗体的步骤 应用

植物细胞和动物细胞大体上相同，都有细胞核、细胞质和细胞膜。但是也有不同的地方：这就是植物细胞在细胞膜外面有一层厚而坚硬的细胞壁，而动物细胞没有细胞壁。

前者只有有丝分裂后者在有丝分裂的基础上还有分化现象

胞培养动物细胞培养：从动物机体中取出相关的组织，将它们分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，生长，增殖。1丶选材：动物胚胎或幼龄动物的器官或组织。2丶细胞分离：使器官组织分离成单个细胞，常用方法，物理：剪刀剪碎，化学法：胰蛋白酶，胶原蛋白酶3丶制作细胞悬浮液，方法：加培养液。形成细胞悬浮液4丶培养细胞株，原代培养，传代培养5丶形成细胞系，传代培养，遗传物质的改变。2细胞融合方法：物理法，电刺激，振动，离心。化学法，聚乙二醇（PEG）强烈的吸水性，有凝聚蛋白质的作用。病毒法，紫外线照射后灭活仙台病毒，丧失了感染活性，保留了融合活性原理：细胞膜的流动性。用途及意义：制备单克隆抗体。3克隆抗体单克隆：由一个细胞通过有丝分裂形成一个细胞群。单克隆抗体：由一个浆细胞通过有丝分裂形成一个细胞群，这个细胞群可以产生特异性抗体。4原理利用了免疫，细胞融合，动物细胞培养等原理。B淋巴细胞在抗原的刺激下，能够分化、增殖形成具有针对这种抗原分泌特异性抗体的能力。B细胞的这种能力和量是有限的，不可能持续分化增殖下去，因此产生免疫球蛋白的能力也是极其微小的。将这种B细胞与非分泌型的骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，再进一步克隆化，这种克隆化的杂交瘤细胞是既具有瘤的无限生长的能力，又具有产生特异性抗体的B淋巴细胞的能力，将这种克隆化的杂交瘤细胞进行培养或注入小鼠体内即可获得大量的高效价、单一的特异性抗体。这种技术即称为单克隆抗体技术。5材料效应B细胞（只有效应B淋巴细胞才能产生出特异性的抗体）骨髓瘤细胞（能无限增殖）6过程1）免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备，也可采用脾内直接免疫法。2）骨髓瘤细胞的培养与筛选 在融合前，骨髓瘤细胞应经过含8-AG的培养基筛选，防止细胞发生突变恢复HGPRT的活性（恢复HGPRT的活性的细胞不能在含8-AG的培养基中存活）。骨髓瘤细胞用10%小牛血清的培养液在细胞培养瓶中培养，融合前24h换液一次，使骨髓瘤细胞处于对数生长期。3）细胞融合的关键:1技术上的误差常常导致融合的失败。例如，供者淋巴细胞没有查到免疫应答。这必然要失败的。2融合试验最大的失败原因是污染，融合成功的关键是提供一个干净的环境，以及适宜的无菌操作技术。4）阳性克隆的筛选 应尽早进行。通常在融合后10天作第一次检测，过早容易出现假阳性。检测方法应灵敏、准确、而且简便快速。具体应用的方法应根据抗原的性质，以及所需单克隆抗体的功能进行选择。常用的方法有RIA法、ELISA法和免疫荧光法等。其中ELISA法最简便，RIA法最准确。阳性克隆的筛选应进行多次，均阳性时才确定为阳性克隆进行扩增。5）克隆化 克隆化的目的是为了获得单一细胞系的群体。克隆化应尽早进行并反复筛选。这是因为初期的杂交瘤细胞是不稳定的，有丢失染色体的倾向。反复克隆化后可获得稳定的杂交瘤细胞株。克隆化的方法很多，而最常用的是有限稀释法。（1）显微操作法：在显微镜下取单细胞，然后进行单细胞培养。这种方法操作复杂，效率低，故不常用。（2）有限稀释法：将对数生长期的杂交瘤细胞用培养液作一定的稀释后，按每孔1个细胞接种在培养皿中，细胞增值后成为单克隆细胞系。第一次克隆化时加一定量的饲养细胞。由于第一次克隆化生长的细胞不能保证单克隆化，所以为获得稳定的单克隆细胞株需经2～3次的再克隆才成。应该注意的是，每次克隆化过程中所有有意义的细胞都应冷冻保存，以便重复检查，避免丢失有意义的细胞。（3）软琼脂法：将杂交瘤细胞稀释到一定密度，然后与琼脂混悬。在琼脂中的细胞不能自由移动，彼此互不相混，从而达到单细胞培养的目的。但此法不如有限稀释法好。（4）荧光激光细胞分类法：用抗原包被的荧光乳胶微球标记杂交瘤细胞，然后根据抗原与杂交瘤细胞结合的特异性选出细胞，并进行单细胞培养。6）细胞的冻存与复苏7）大规模单克隆抗体的制备 选出的阳性细胞株应及早进行抗体制备，因为融合细胞随培养时间延长，发生污染、染包体丢失和细胞死亡的机率增加。抗体制备有两种方法。一是增量培养法，即将杂交瘤细胞在体外培养，在培养液中分离单克隆抗体。该法需用特殊的仪器设备，一般应用无血清培养基，以利于单克隆抗体的浓缩和纯化。最普遍采用的是小鼠腹腔接种法。选用BALB/c小鼠或其亲代小鼠，先用降植烷或液体石蜡行小鼠腹腔注射，一周后将杂交瘤细胞接种到小鼠腹腔中去。通常在接种一周后即有明显的腹水产生，每只小鼠可收集5～10ml的腹水，有时甚至超过40ml。该法制备的腹水抗体含量高，每毫升可达数毫克甚至数十毫克水平。此外，腹水中的杂蛋白也较少，便于抗体的纯化。

关于“动物细胞的结构”如下：动物细胞的基本结构有细胞膜、细胞质、细胞核．植物细胞的基本结构包括：细胞壁、细胞膜、细胞质、胞核、液泡、叶绿体等结构。一、动物细胞简介动物细胞立体结构图组成动物体的细胞称为动物细胞(Animal Cell)，植物细胞和动物细胞大体上相同，都有细胞核、细胞质和细胞膜。但是也有不同的地方：这就是植物细胞在细胞膜外面有一层厚而坚硬的细胞壁，而动物细胞没有细胞壁。二、细胞培养液的成分葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。动物细胞培养成功的关键在于培养液中是否含有动物血清。因为由于动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚，所以需要加入动物血清以提供一个类似生物体内的环境，此外动物血清中也包含了一些动物的激素和酶，可以促进细胞的发育。三、动物细胞与植物细胞的区别培养基不同，植物细胞（固体培养基），动物细胞（液体培养基）。培养基的成分不同，动物细胞培养必须利用动物血清，植物组织培养则不需要。过程不同，植物组织培养的过程为脱分化和再分化，动物细胞培养的过程为原代培养和传代培养。产物不同，植物组织培养最后一般得到新的植物个体，而动物细胞培养因为动物体细胞一般不能表达其全能性，因此得到的是同一种的细胞。原理不同，植物组织培养的原理为植物细胞的全能性，动物细胞培养的原理为细胞的增殖。四、细胞膜细胞膜是一层由蛋白质分子和磷脂双层分子组成的薄膜，水和氧气等小分子物质能够自由通过，而某些离子和大分子物质则不能自由通过。因此，它除了起着保护细胞内部的作用以外，还具有控制物质进出细胞的作用：既不让有用物质任意地渗出细胞，也不让有害物质轻易地进入细胞。

（1）运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞．进行细胞培养时，必须首先用胰蛋白酶处理内细胞团，使之分散成单个细胞．胚胎干细胞在体外培养条件下可以增殖但不发生分化，因此体外培养胚胎干细胞不能获得动物器官． 动物细胞培养和植物组织培养过程中，就细胞增殖、分化来说，二者除了都需要增殖外，植物细胞不同于动物细胞的是还要进行脱分化和再分化． （2）制备单克隆抗体的过程中，获得的杂交瘤细胞具有既能无限增殖又能产生特定抗体的特点． （3）卵子必须培养至MⅡ中期，才具备受精的能力． （4）在构建的相应基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有使其仅能在牛乳腺细胞中特异性表达的启动子，它是RNA聚合酶识别和结合点部位．在抗虫花生植株培育过程中，将目的基因导入花生受体细胞采用最多的方法是农杆菌转化． （5）过度放牧造成当地的生态系统失衡和破坏，这主要是违背了生态工程的协调与平衡原理． 故答案为： （1）胰蛋白酶（或“胶原蛋白酶”） 不能 胚胎干细胞在体外培养条件下可以增殖但不发生分化（类似答案可酌情给分） 脱分化和再分化 （2）既能无限增殖又能产生特定抗体 （3）MⅡ中期 （4）乳腺蛋白基因的启动子 农杆菌转化 （5）协调与平衡

概念自交是指植物中的自花授粉和雌雄异花的同株授粉，广义的自交也可指基因型相同的个体相互交配。若只考虑一个种群的一对等位基因B和b，种群中个体的基因型为BB、Bb、bb，则其包含的交配组合为BB×BB、Bb×Bb、bb×bb三类。自由交配又叫随机交配，是指在一个有性繁殖的生物种群中，任何一个雌性或雄性个体与任何一个异性个体交配的机会均等。若只考虑一个种群的一对等位基因B和b，种群中个体的基因型为BB、Bb、bb，则其包含的交配组合为BB×BB、Bb×Bb、bb×bb、BB×Bb、Bb×bb、BB×bb。自交和自由交配有什么区别 概念上的不同1．1 自交在遗传学上，动、植物交配方式有杂交和近交（近亲繁殖），其中近交是指有亲缘关系的个体相互交配，如同胞兄妹交、叔父侄女交、堂表兄妹交等。在各类近交中，亲缘关系最近的交配是自交，即同一个体产生的雌、雄配子相互结合产生下一代。自交的概念在植物和动物种群中的含义有所不同，这是解题的关键：大多数植物没有性别分化，为雌雄同株单性花或两性花植物，像水稻、小麦等两性花植物，其自花授粉的过程就称为自交；而像玉米、黄瓜等单性花植物来说，自交是指同株异花授粉。所以自交的概念适用于植物，含义是自花授粉或雌雄同株的异花授粉。对动物而言，大多数为雌雄异体，虽有像蚯蚓等雌雄同体的低等动物，但为防止物种衰退现象，它们也通常进行异体受精。因此，在动物种群中，若没特殊说明，自交的含义是指基因型相同的雌雄异体交配。1．2 自由交配自由交配指在一种群中，不同基因型的个体之间都有交配机会且机会均等，既有基因型相同的个体交配，也有基因型不同的个体交配，强调随机性。在间行种植的玉米种群中，随机交配包括自交和杂交方式，对水稻、小麦等主要进行自花授粉的植物来说，随机交配的概念不适用，而主要是自交。在动物种群中，随机交配指基因型相同或不同的雌雄异体交配，交配组合数为理论应出现的数目。2 后代相关频率变化的比较2．1 自交和自由交配后代中，基因频率变化在一个大的种群中，如果没有突变，也没有任何自然选择的影响，那么无论是生物自交还是自由交配，种群中的基因频率都不改变。例如：在一个Aa种群中，A=50%，a=50%，则该种群自交或者随机交配，后代中A和a的基因频率都不变，仍然是A=50%，a=50%。2．2 自交和自由交配后代中，基因型频率变化自交和自由交配产生的后代中，基因型频率却有不同。如Aa种群自交多代，AA、aa频率升高，而Aa频率趋进于0；而自由交配产生的后代，各种基因型出现的机率相等，因此自由交配不改变后代基因型频率。自交与自由交配自交是指基因型相同的个体杂交。自由交配是指某一群体个体之间的随机交配，交配个体的基因型可以相同也可以不同。自交属于自由交配的范畴。在群体之间自由交配的情况下可采用基因频率来计算。 从计算可看出，①在自由交配的情况下，采用先求基因频率再求基因型频率的方法比较简单；②注意自交和自由交配时各种基因型出现的概率，如F2中Aa自交为1/4Aa×Aa，而Aa自由交配为1/4Aa×1/4Aa。因为自交时,某个体基因型是Aa的机率是1/4,当它的基因型确定后,与之交配的个体(不论是同一个体还是相同基因型的个体),其基因型就随之确定了,因此不用再乘以1/4.如同有两个人如果知道他们穿的衣服颜色是一样的,那么当其中一个穿的衣服颜色决定后,另一个就一定是与他的相同了。自由交配则不同,两个个体基因型都是未知的,所以都要先确定它们各自的概率。总之，在解此类题时，一定要仔细阅读题目，搞清在什么范围内求自交还是自由交配的机率，然后选择合适的解题方法，得出正确的答案。

动植物细胞的主要区别在于有无细胞壁、有无中心体、是否形成细胞板等。1、有无细胞壁：植物细胞一般有细胞壁；动物细胞一般无细胞壁，有的有荚膜或细胞外基质等。2、有无中心体：高等植物细胞无中心体，细胞分裂时直接在细胞两极形成纺锤体；动物细胞有中心体。3、细胞分裂时是否形成细胞板：植物细胞形成细胞板；动物细胞分裂后期缢裂。4、产物不同：植物组织培养最后一般得到新的植物个体；动物细胞培养因为动物体细胞一般不能表达其全能性，因此得到的是同一种的细胞。5、原理不同：植物组织培养的原理为植物细胞的全能性；动物细胞培养的原理为细胞的增殖。6、过程不同：植物组织培养的过程为脱分化和再分化；动物细胞培养的过程为原代培养和传代培养。动物细胞组成部分：动物细胞的结构有细胞膜、细胞质、细胞器、细胞核，它们的主要作用是控制细胞的进出、进行物质转换、生命活动的主要场所、控制细胞的生命活动。细胞核为双层膜，包含有由DNA和蛋白质构成的染色体。内质网分为粗面的与滑面的，粗面内质网表面附有核糖体，参与蛋白质的合成和加工；光面内质网，表面没有核糖体，参与脂类合成。

A、动物细胞培养技术的原理是细胞增殖（有丝分裂），不是细胞的全能性，故A错误；B、传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖，故B正确；C、癌细胞失去接触抑制，所以癌细胞在培养瓶中不会出现接触抑制现象，故C正确；D、动物细胞培养一般需要使用CO2培养箱，目的是维持培养液PH稳定，故D正确．故选A．

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基因工程是指在基因水平上，按照人类的需要进行设计，然后按设计方案创建出具有某种新的性状的生物新品系，并能使之稳定地遗传给后代。基因工程采用与工程设计十分类似的方法，明显地既具有理学的特点，同时也具有工程学的特点。生物学家在了解遗传密码是RNA转录表达以后，还想从分子的水平去干预生物的遗传。1973年，美国斯坦福大学的科恩教授，把两种质粒上不同的抗药基因裁剪下来，拼接在同一个质粒中。当这种杂合质粒进入大肠杆菌后，这种大肠杆菌就能抵抗两种药物，且其后代都具有双重抗菌性，科恩的重组实验拉开了基因工程的大幕。DNA重组技术是基因工程的核心技术。重组，顾名思义，就是重新组合，即利用供体生物的遗传物质，或人工合成的基因，经过体外切割后与适当的载体连接起来，形成重组DNA分子，然后将重组DNA分子导入到受体细胞或受体生物构建转基因生物，该种生物就可以按人类事先设计好的蓝图表现出另外一种生物的某种性状。 （1）目的基因基因工程是一种有预期目的的创造性工作，它的原料就是目的基因。所谓目的基因，是指通过人工方法获得的符合设计者要求的DNA片段。在适当条件下，目的基因将会以蛋白质的形式表达，从而实现设计者改造生物性状的目标。（2）载体目的基因一般都不能直接进入另一种生物细胞，它需要与特定的载体结合,才能安全地进入到受体细胞中。目前常用的载体有质粒、噬菌体和病毒。质粒是在大多数细菌和某些真核生物的细胞中发现的一种环状DNA分子，它位于细胞质中。许多质粒含有在某种环境下可能是必不可少的基因。噬菌体是专门感染细菌的一类病毒，由蛋白质外壳和中心的核酸组成。在感染细菌时，噬菌体把DNA注入到细菌里，以此DNA为模板，复制DNA分子，并合成蛋白质，最后组装成新的噬菌体。当细菌死亡破裂后，大量的噬菌体被释放出来，去感染下一个目标。质粒、噬菌体和病毒的相似之处在于，它们都能把自己的DNA分子注入到宿主细胞中并保持DNA分子的完整，因而，它们成为运载目的基因的合适载体。因此，基因工程中的载体实质上是一些特殊的DNA分子。（3）工具酶基因工程需要有一套工具，以便从生物体中分离目的基因，然后选择适合的载体，将目的基因与载体连接起来。DNA分子很小，其直径只有20埃（10-10米）。基因工程实际上是一种“超级显微工程”，对DNA的切割、缝合与转运，必须有特殊的工具。1968年，科学家第一次从大肠杆菌中提取出了限制性内切酶。限制性内切酶最大的特点是专一性强，能够在DNA上识别特定的核苷酸序列，并在特定切点上切割DNA分子。70年代以来，人们已经分离提取了400多种限制性内切酶。有了它，人们就可以随心所欲地进行DNA分子长链切割了。表4-3是一些限制性内切酶的识别位点1976年，5个实验室的科学家几乎同时发现并提取出一种酶，作DNA连接酶。从此，DNA连接酶就成了 “粘合”基因的“分子粘合剂”。 一个典型的DNA重组包括五个步骤：（1）目的基因的获取目前，获取目的基因的方法主要有三种：反向转录法、从细胞基因组直接分离法和人工合成法。反向转录法是利用mRNA反转录获得目的基因的方法。现在用这种方法人们已先后合成了家兔、鸭和人的珠蛋白基因、羽毛角蛋白基因等。从细胞基因组中直接分离目的基因常用鸟枪法，因为这种方法犹如用散弹打鸟,所以又称散弹枪法。用鸟枪法分离目的基因，具有简单、方便和经济等优点。许多病毒和原核生物、一些真核生物的基因，都用这种方法获得了成功的分离。化学合成目的基因是20世纪70年代以来发展起来的一项新技术。应用化学合成法，可在短时间内合成目的基因。科学家们已相继合成了人的生长激素释放抑制素、胰岛素、干扰素等蛋白质的编码基因。（2）DNA分子的体外重组体外重组是把载体与目的基因进行连接。例如，以质粒作为载体时，首先要选择出合适的限制性内切酶，对目的基因和载体进行切割，再以DNA连接酶使切口两端的脱氧核苷酸连接。于是目的基因被镶嵌进质粒DNA，重组形成了一个新的环状DNA分子（杂种DNA分子）。（3）DNA重组体的导入把目的基因装在载体上后，就需要把它引入到受体细胞中。导入的方式有多种，主要包括转化、转导、显微注射、微粒轰击和电击穿孔等方式。转化和转导主要适用于细菌一类的原核生物细胞和酵母这样的低等真核生物细胞，其他方式主要应用于高等动植物的细胞。（4）受体细胞的筛选由于DNA重组体的转化成功率不是太高，因而，需要在众多的细胞中把成功转入DNA重组体的细胞挑选出来。应事先找到特定的标志，证明导入是否成功。 例如，我们常用抗生素来证明证明导入的成功。（5）基因表达目的基因在成功导入受体细胞后，它所携带的遗传信息必须要通过合成新的蛋白质才能表现出来，从而改变受体细胞的遗传性状。目的基因在受体细胞中要表达，需要满足一些条件。例如，目的基因是利用受体细胞的核糖体来合成蛋白质，因此目的基因上必须含有能启动受体细胞核糖体工作的功能片段。这五个步骤代表了基因工程的一般操作流程。人们掌握基因工程技术的时间并不长，但已经获得了许多具有实际应用价值的成果。基因工程作为现代生物技术的核心，将在社会生产和实践中发挥越来越重要的作用。 关于细胞工程的定义和范围还没有一个统一的说法，一般认为，细胞工程是根据细胞生物学和分子生物学原理，采用细胞培养技术，在细胞水平进行的遗传操作。细胞工程大体可分染色体工程、细胞质工程和细胞融合工程。1、细胞培养技术细胞培养技术是细胞工程的基础技术。所谓细胞培养，就是将生物有机体的某一部分组织取出一小块，进行培养，使之生长、分裂的技术。细胞培养又叫组织培养。近二十年来细胞生物学的一些重要理论研究的进展，例如细胞全能性的揭示，细胞周期及其调控，癌变机理与细胞衰老的研究，基因表达与调控等，都是与细胞培养技术分不开的。体外细胞培养中，供给离开整体的动植物细胞所需营养的是培养基，培养基中除了含有丰富的营养物质外，一般还含有刺激细胞生长和发育的一些微量物质。培养基一般有固态和液态两种，它必须经灭菌处理后才可使用。此外，温度、光照、振荡频率等也都是影响培养的重要条件。植物细胞与组织培养的基本过程包括如下几个步骤：第一步，从健康植株的特定部位或组织，如根、茎、叶、花、果实、花粉等，选择用于培养的起始材料（外植体）。第二步，用一定的化学药剂（最常用的有次氯酸钠、升汞和酒精等）对外植体表面消毒，建立无菌培养体系。第三步，形成愈伤组织和器官，由愈伤组织再分化出芽并可进一步诱导形成小植株。动物细胞培养有两种方式。一种叫非贴壁培养：也就是细胞在培养过程中不贴壁， 条件较为复杂， 难度也大一些，但是容易同时获得大量的培养细胞。这种方法一般用于淋巴细胞、肿瘤细胞和一些转化细胞的培养。另一种培养方式是贴壁培养：也称为细胞贴壁，贴壁后的细胞呈单层生长，所以此法又叫单层细胞培养。大多数哺乳动物细胞的培养必须采用这种方法。动物细胞不能采用离体培养，以人的皮肤细胞培养为例，动物细胞培养的主要步骤如下：第一步，在无菌条件下，从健康动物体内取出适量组织，剪切成小薄片。第二步，加入适宜浓度的酶与辅助物质进行消化作用使细胞分散。第三步，将分散的细胞进行洗涤并纯化后，以适宜的浓度加在培养基中，37℃下培养，并适时进行传代。（图4-31）在细胞培养中，我们经常使用一个词——克隆。克隆一词是由英文clone音译而来，指无性繁殖以及由无性繁殖而得到的细胞群体或生物群体。细胞克隆是指细胞的一个无性繁殖系。自然界早已存在天然的克隆，例如，同卵双胞胎实际上就是一种克隆。基因工程中，还有称为分子克隆(molecular cloning)的，是科恩等在 1973年提出的。分子克隆发生在DNA分子水平上，是指从一种细胞中把某种基因提取出来作为外源基因，在体外与载体连接，再将其引入另一受体细胞自主复制而得到的DNA分子无性系。2、细胞核移植技术由于克隆是无性繁殖，所以同一克隆内所有成员的遗传构成是完全相同的，这样有利于忠实地保持原有品种的优良特性。人们开始探索用人工的方法来进行高等动物克隆。哺乳动物克隆的方法主要有胚胎分割和细胞核移植两种。其中，细胞核移植是发展较晚但富有潜力的一门新技术。细胞核移植技术属于细胞质工程。所谓细胞核移植技术，是指用机械的办法把一个被称为“供体细胞”的细胞核（含遗传物质）移入另一个除去了细胞核被称为“受体”的细胞中，然后这一重组细胞进一步发育、分化。核移植的原理是基于动物细胞的细胞核的全能性。采用细胞核移植技术克隆动物的设想，最初由一位德国胚胎学家在1938年提出。从1952年起，科学家们首先采用两栖类动物开展细胞核移植克隆实验，先后获得了蝌蚪和成体蛙。1963年，我国童第周教授领导的科研组，以金鱼等为材料，研究了鱼类胚胎细胞核移植技术，获得成功。到1995年为止，在主要的哺乳动物中，胚胎细胞核移植都获得成功，但成体动物已分化细胞的核移植一直未能取得成功。1996年，英国爱丁堡罗斯林研究所，伊恩·维尔穆特研究小组成功地利用细胞核移植的方法培养出一只克隆羊——多利，这是世界上首次利用成年哺乳动物的体细胞进行细胞核移植而培养出的克隆动物。图4-33克隆羊示意图。在核移植中，并不是所有的细胞都可以作为核供体。作为供体的细胞有两种：一种是胚胎细胞，一种是某些体细胞。研究表明，卵细胞、卵母细胞和受精卵细胞都是合适的受体细胞。2000年6月，我国西北农林科技大学利用成年山羊体细胞克隆出两只“克隆羊”，这表明我国科学家也掌握了哺乳动物体细胞核移植的尖端技术。核移植的研究，不仅在探明动物细胞核的全能性、细胞核与细胞质关系等重要理论问题方面具有重要的科学价值，而且在畜牧业生产中有着非常重要的经济价值和应用前景。3、细胞融合技术细胞融合技术属于细胞融合工程。细胞融合技术是一种新的获得杂交细胞以改变细胞性能的技术，它是指在离体条件下，利用融合诱导剂，把同种或不同物种的体细胞人为地融合，形成杂合细胞的过程。细胞融合术是细胞遗传学、细胞免疫学、病毒学、肿瘤学等研究的一种重要手段动物细胞融合的主要步骤是：第一步，获取亲本细胞。将取样的组织用胰蛋白酶或机械方法分离细胞，分别进行贴壁培养或悬浮培养。第二步，诱导融合。把两种亲本细胞置于同一培养液中，进行细胞融合。动物细胞的融合过程一般是：两个细胞紧密接触→细胞膜合并→细胞间出现通道或细胞桥→细胞桥数增加扩大通道面积→两细胞融合为一体。植物细胞融合的主要步骤是：第一步，制备亲本原生质体。第二步，诱导融合。微生物细胞的融合步骤与植物细胞融合基本相同。从20世纪70年代开始，已经有许多种细胞融合成功，有植物间、动物间、动植物间甚至人体细胞与动植物间的成功融合的新的杂交植物，如 “西红柿马铃薯”、“拟南芥油菜”和“蘑菇白菜”等。（图4-36是利用细胞融合培育杂交植物）从目前的技术水平来看，人们还不能把许多远缘的细胞融合后培养成杂种个体，尤其是动物细胞难度更大。 现代的发酵工程。又叫微生物工程，指采用现代生物工程技术手段，利用微生物的某些特定的功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程。发酵是微生物特有的作用，几千年前就已被人类认识并且用来制造酒、面包等食品。20世纪20年代主要是以酒精发酵、甘油发酵和丙醇发酵等为主。20世纪40年代中期美国抗菌素工业兴起，大规模生产青霉素以及日本谷氨酸盐(味精)发酵成功，大大推动了发酵工业的发展。20世纪70年代，基因重组技术、细胞融合等生物工程技术的飞速发展，发酵工业进入现代发酵工程的阶段。不但生产酒精类饮料、醋酸和面包，而且生产胰岛素、干扰素、生长激素、抗生素和疫苗等多种医疗保健药物，生产天然杀虫剂、细菌肥料和微生物除草剂等农用生产资料，在化学工业上生产氨基酸、香料、生物高分子、酶、维生素和单细胞蛋白等。从广义上讲，发酵工程由三部分组成：上游工程，发酵工程和下游工程。其中上游工程包括优良种株的选育，最适发酵条件（pH、温度、溶解氧和营养组成）的确定，营养物的准备等。发酵工程主要指在最适发酵条件下，发酵罐中大量培养细胞和生产代谢产物的工艺技术。下游工程指从发酵液中分离和纯化产品的技术。发酵工程的步骤一般包括：第一步，菌种的选育。第二步，培养基的制备和灭菌。第三步，扩大培养和接种。第四步，发酵过程。第五步，分离提纯。发酵工程在医药工业、食品工业、农业、冶金工业、环境保护等许多领域得到广泛应用。 酶工程是指利用酶、细胞或细胞器等具有的特异催化功能，借助生物反应装置和通过一定的工艺手段生产出人类所需要的产品。它是酶学理论与化工技术相结合而形成的一种新技术。酶工程，可以分为两部分。一部分是如何生产酶，一部分是如何应用酶。酶的生产大致经历了四个发展阶段。最初从动物内脏中提取酶，随着酶工程的进展，人们利用大量培养微生物来获取酶，基因基因工程诞生后，通过基因重组来改造产酶的微生物，近些年来，酶工程又出现了一个新的热门课题，那就是人工合成新酶，也就是人工酶。酶在使用中也存在着一些缺点。如遇到高温、强酸、强碱时就会失去活性，成本高，价钱贵。实际应用中酶只能使用一次等。利用酶的固定化可以解决这些问题，它被称为是酶工程的中心。60年代初，科学家发现，许多酶经过固定化以后，活性丝毫未减，稳定性反而有了提高。这一发现是酶的推广应用的转折点，也是酶工程发展的转折点。如今，酶的固定化技术日新月异。它表现在两方面：一是固定的方法。目前固定的方法有四大类：吸附法、共价键合法、交联法和包埋法。二是被固定下来的酶，具有多种酶，能催化一系列的反应。与自然酶相比，固定化酶和固定化细胞具有明显的优点：1.可以做成各种形状，如颗粒状、管状、膜状，装在反应槽中，便于取出，便于连续、反复使用。2.稳定性提高，不易失去活性，使用寿命延长。3.便于自动化操作，实现用电脑控制的连续生产。如今已有数十个国家采用固定化酶和固定化细胞进行工业生产，产品包括酒精、啤酒、各种氨基酸、各种有机酸以及药品等等。

一、与颜色反应有关的试剂1、斐林试剂：成分：0.1g/ml NaOH（甲液）和0.05g/ml CuSO4（乙液）.用法：将斐林试剂甲液和乙液等体积混合,再将混合后的斐林试剂倒入待测液,水浴加热或直接加热,如待测液中存在还原糖,则呈砖红色.2、班氏糖定性试剂：为蓝色溶液.和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀.用于尿糖的测定.3、双缩脲试剂：成分：0.1g/ml NaOH（甲液）和0.01g/ml CuSO4（乙液）.用法：向待测液中先加入2ml甲液,摇匀,再向其中加入3~4滴乙液,摇匀.如待测中存在蛋白质,则呈现紫色.4、苏丹Ⅲ：用法：取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中,摇匀.用于检测脂肪.可将脂肪染成橘黄色（被苏丹Ⅳ染成红色）.5、二苯胺：用于鉴定DNA.DNA遇二苯胺（沸水浴）会被染成蓝色.6、甲基绿：用于鉴定DNA.DNA遇甲基绿（常温）会被染成蓝绿色.7、碘液：用于鉴定淀粉的存在.遇淀粉变蓝.8、龙胆紫溶液：(浓度为0.01g/ml或0.02g/ml)用于染色体着色,可将染色体染成紫色,通常染色3~5分钟.（也可以用醋酸洋红染色,可将染色体染成红色）9、伊红—美蓝试剂：大肠杆菌鉴定,与其中有机酸反应产生深紫色,有金属光泽.10、结晶紫染液：用于自生固氮微生物的鉴定,染色,利于观察.11、重铬酸钾：酸性条件下与酒精反应,由橙红变为灰绿.12、溴麝香草酚蓝：与二氧化碳反应由蓝变绿,在变黄.13、健那绿：与线粒体反应,将线粒体染成蓝绿色.14、甲基绿：与DNA反应,将DNA染成绿色.15、吡罗红：与RNA反应,将RNA染成绿色.二、作为溶剂的试剂1、酒精在不同实验中的作用（1）50%的酒精溶液：在脂肪鉴定中,用苏丹Ⅲ染液染色,再用50%的酒精溶液洗去浮色.（2）75%的酒精溶液：用于杀菌消毒,75%的酒精能渗入细胞内,使蛋白质凝固变性.低于这个浓度,酒精的渗透脱水作用减弱,杀菌力不强；而高于这个浓度,则会使细菌表面蛋白质迅速脱水,凝固成膜,妨碍酒精透入,削弱杀菌能力.75％的酒精溶液常用于手术前、打针、换药、针灸前皮肤脱碘消毒以及机械消毒等.（3）95%的酒精溶液：冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝集DNA.用于DNA的粗提取实验.（4）95%的酒精溶液和15%的盐酸等体积混合可用于解离根尖.用于植物根尖分生区有丝分裂的实验观察,作为解离液可以将植物细胞分离开.2、丙酮(酒精）：用于提取叶绿体中的色素.使色素在有机溶剂丙酮中溶解,便于溶解.3、层析液：（成分：20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成,也可用93号汽油）可用于色素的层析,即将色素在滤纸上分离开.4、0.1g/mL的柠檬酸钠溶液：与鸡血混合,防凝血.用于DNA的粗提取实验.5、氯化钠溶液：（1）可用于溶解DNA.当氯化钠浓度为2mol/L、 0.015mol/L时DNA的溶解度最高,在氯化钠浓度为0.14 mol/L时,DNA溶解度最高.（2）浓度为0.9%时可作为生理盐水.（3）高浓度食盐：选择培养基,金黄色葡萄球菌可以生存.三、作为培养基的成分1、青霉素：选择培养基,使霉菌,酵母菌可以生存,杀死细菌和放线菌.2、牛肉膏,蛋白胨：微生物培养基中的C源、N源和生长因子,作为培养异养型微生物的原料.3、琼脂：固体培养基成分；生长素生理功能（温特实验） 四、育种中使用的试剂1、胰蛋白酶：可用来分解蛋白质,可用于动物细胞培养时分解组织使组织细胞分散.2、纤维素酶、果胶酶：可用于植物细胞培养时分解组织使组织细胞分散.3、秋水仙素：人工诱导多倍体试剂.用于萌发的种子或幼苗,可使染色体组加倍,原理是可抑制正在分裂的细胞纺锤体的形成.4、氯化钙：增加细菌细胞壁的通透性（用于基因工程的转化,使细胞处于感受态）5、细胞工程促溶剂：（1）PEG（聚乙二醇）：动物细胞及植物细胞工程中,用于细胞的融合.（2）灭活（仙台）病毒：动物细胞工程中,用于细胞的融合.6、硫酸二乙酯：生物人工诱变剂,可以导致生物基因突变.7、亚硝酸（盐）：（1）化学致癌因子,导致细胞癌变.（2）生物人工诱变剂,可以导致生物基因突变.五、其他1、20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁：用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率.（新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶）2、蔗糖（1）3%的蔗糖溶液、3%的可溶性淀粉溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液：用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验.(2)植物组织培养的人工合成培养基的原料之一.（3）0.3g/mL的蔗糖溶液：相当于30%的蔗糖溶液,比植物细胞液的浓度大,可用于质壁分离实验.3、色素提取：（1）二氧化硅：在色素的提取的分离实验中研磨绿色叶片时加入,可使研磨充分.（2）碳酸钙：研磨绿色叶片时加入,可中和有机酸,防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏.4、过氧化氢溶液：（1）用来作为验证酶的高效性实验（2）一定浓度的该溶液可以作为消毒剂,有一定的腐蚀性.

高中生物实验的显色反应( 1.斐林试剂 :配制：1）甲液质量浓度为 0.1g/ml,取10gNaOH溶于蒸馏水,稀释至100ml .2）乙液质量浓度为0.05g/ml,取5gCuSO4溶于蒸馏水,稀释至100ml .用时甲乙两夜等量混合,水浴加热,且必须现配现用.鉴别可溶性还原糖（葡萄糖,果糖,麦芽糖）时产生砖红色沉淀. 2.双缩脲试剂：配制：1）甲液质量浓度为 0.1g/ml,取10gNaOH溶于蒸馏水,稀释至100ml .2）乙液质量浓度为0.01g/ml,取1gCuSO4溶于蒸馏水,稀释至100ml .先加入甲液,再加入乙液.用于检测蛋白质 中的肽键.应注意的是蛋白质一定有肽键,有肽键的不一定是蛋白质,如尿素.鉴定蛋白质时,产生紫色反应. 3.班氏尿糖定性试剂：配制：称取17.4克无水硫酸铜（CuSO4）溶解于100毫升热蒸馏水中,冷却后,稀释到150毫升.称取柠檬酸钠（Na2CO3）100克,加蒸馏水600毫升,加热使之溶解,冷却后,稀释到850毫升.把硫酸铜溶液倾入柠檬酸钠及碳酸钠溶液中,搅匀后即为班氏尿糖定性试剂.使用方法同斐林试剂. 4.苏丹红Ⅲ /Ⅳ：配制：取0.1g苏丹Ⅲ,溶解在20ml95%酒精中.用于鉴定脂肪被苏丹红Ⅲ染为橘黄色,被苏丹红Ⅳ染为红色.鉴定时,先制备临时装片,再进行显微观察. 5.甲基绿吡罗红染色剂：用于观察DNA和RNA在细胞中的分布情况.必须现用现配.DNA遇到甲基绿为蓝绿色,RNA遇到吡罗红为红色. 6.盐酸：配置解离液或改变溶液的PH值. 7.碘液：用于鉴定淀粉的存在,遇到淀粉变为蓝色.（用于光合作用实验）. 8.龙胆紫溶液：用于染色体着色,可将染色体染成紫色,显色反应. 9.醋酸洋红溶液：为碱性染料.与龙胆紫溶液一样,都是用于染色体着色,但它却是将染色体染成红色. 10.层析液:配置：苯+丙酮.用于色素的层析,即将色素在滤纸上分离开. 11.二氧化硅：可使绿叶研磨充分. 12.碳酸钙：防止在研磨时,叶绿体中的色素受到破坏. 13.0.3g/ml的蔗糖溶液：相当于30%的蔗糖溶液,用于质壁分离实验.不会使细胞致死,且细胞分离后可复原. 14.胰蛋白酶：用于分离蛋白质.用于动物细胞培养时分解组织,使组织细胞分散开,制成细胞悬浮液. 15.秋水仙素：巨毒.人工诱导染色体组加倍.原理：化学诱变因子抑制有丝分裂时纺锤体的形成. 16.氢氧化钠：用于吸收二氧化碳或改变溶液的PH值.用于细胞呼吸. 17.碳酸氢钠：提供二氧化碳.用于细胞光合作用. 18.澄清石灰水：鉴定二氧化碳. 19.溴麝香草酚蓝水溶液：检测二氧化碳.溴麝香草酚蓝水溶液由蓝色变为黄色 20.重铬酸钾的浓硫酸溶液：检测酒精在酸性条件下,酒精使橙色的重铬酸钾的浓硫酸溶液变为灰绿色.用于探究酵母菌的呼吸方式. 21.健那绿染色剂：专一性用于线粒体染色的活细胞染料.将线粒体染成蓝绿色 22.解离液：固定细胞形态,使细胞分散开. 23.95%的酒精溶液：用于提取叶绿体中的色素.用于与15%的盐酸等体积混合后解离根尖. 24.二苯胺：配制：称取1.5g二苯胺,溶于100mL冰醋酸中,再加1.5mL浓硫酸,避光保存.DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色

就是带有标记的目的基因的一条链

动物细胞培养的原理是细胞增殖，动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。一、细胞增殖的意义：1、细胞增殖是生物繁殖的基础：单细胞生物以细胞分裂的方式产生后代；多细胞生物的繁殖和发育的基础、2、细胞增殖是高等生物完成正常生命活动的基础：细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础。二、细胞通过分裂进行增殖：细胞增殖是细胞重要的生命活动，是生物体生长、发育、繁殖、遗传的基础。1、单细胞生物：细胞增殖而繁衍。2、多细胞生物：从受精卵开始，要进行细胞的增殖和分化逐渐发育成个体。3、真核细胞的分裂方式：有丝分裂、无丝分裂、减数分裂。

分别是细胞增殖（细胞分裂），动物细胞核的全能性。后面两个是一样的核移植就可以克隆动物。。没问题，这个我很熟

动物细胞培养（animal cell culture）就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞（使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶）然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。细胞培养是指细胞在体外条件下的生长，动物细胞在单独细胞培养的过程中不再形成个体。

微生物、动物、植物细胞培养的异同点如下： ◆不同点：首先在培养基上,微生物是固体、半固体培养基都有,成分主要是水、无机盐、生长因子、碳源、氮源等.如果是病毒的话要用细菌进行培养；动物的话用天然培养基加生长因子比较好,一般是液体培养基,成分主要是水、葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清；而植物培养基用合成培养基就可以了,一般是固体培养基,成分主要是矿质元素、蔗糖、纤维素、植物激素、有机添加剂.其次是各自培养的原理上的不同,微生物细胞培养的原理是微生物细胞的增殖,动物细胞培养的原理是细胞的增殖,植物细胞培养原理是细胞的全能性. 最后,微生物细胞培养主要是获得其代谢产物或次级代谢产物或得到细胞本身；植物细胞培养是获得新个体或细胞产品,应用与快速繁殖试管苗、细胞产品、人工种子、转基因植物的培育等.动物细胞培养是获得大量新生细胞或细胞产品,应用是获得细胞的产物或细胞等.另外,动物细胞分散用到的是胰蛋白酶,植物是纤维素酶等. ◆ 相同点：两者都需要培养基、都需要无菌操作,防止染菌、培养时候都需要适当的温度等条件. ◆ 综上所述见下表： 微生物 动物细胞 植物细胞 大小（um） 1~10 10~100 10~100 悬浮生长 可以 多数细胞需附着表面才能生长 可以,但易结团,无单个细胞 营养要求 简单 非常复杂 较复杂 生长速率 快,倍增时间为0.5~5小时 慢,倍增时间为15~100小时 慢,倍增时间为24~74小时 代谢调节 内部 内部,激素 内部,激素 环境敏感 不敏感 非常敏感 能忍受广泛范围 细胞分化 无 有 高 剪切力敏感 低 非常高 高 传统变异,筛选技术 广泛使用 不常使用 有时使用 细胞或产物浓度 较高 低 低 由于它们所用的培养基不同,培养是所要求的条件不同所以在批量生产我们所需的目的产物时就要选择相应的生物反应器.在选择生物反应器时要注意到生物反应器在生物反应过程的剪切力、传质问题如气-液质量传递和液-固质量传递.生物反应器是利用生物催化剂为细胞培养（或发酵）或酶反应提供良好的反应环境的设备,通常称为发酵罐或酶反应器.用于污水生物处理的曝气池或厌气消化罐也可作为生物反应器的一类.生物反应器是生物反应过程中的关键设备,它的结构、操作方式和操作条件对生物技术产品的质量、转化率和能耗有着密切关系.现在就三种生物反应器进行说明. （一）微生物细胞培养生物反应器的选择 生物处理的主体是具有特定功能的各种微生物,由于氧化分解恶臭,微生物细胞一方面获得了生物所需的能量,另一方面获得细胞增殖所需的细胞物质,从而维持了细胞的正常生命活动.微生物有其自身的新陈代谢,代谢活动都是在酶的作用下进行的,只有创造适宜的生存条件,使酶的机能得以充分发挥,微生物才能正常生长,才能利用恶臭物质作为生长所需的能源、碳源和氮源等,因此微生物细胞培养生物反应器的选择首先要确保微生物生长的基本条件.根据微生物的培养特点,一般选择生物反应器为膜生物反应器和光合微生物生物反应器等. （二）动物细胞培养生物反应器的选择 动物细胞与微生物细胞有很大的差异,对体外培养有严格的要求,如动物细胞对剪切非常敏感,反应器的选择不能有像微生物细胞那样高的剪切力,因此,传统的微生物细胞生物反应器应该经过改造才能适用动物生物反应器.动物细胞培养分为三种类型,一类是悬浮培养,指细胞在培养器中自有悬浮生长的过程,要勇于非贴壁依赖性细胞,此类细胞体外生长不需贴壁,可以采用微生物的方法在培养基中悬浮培养.此类细胞培养可以选择的相应反应器为：搅拌反应器、中空纤维反应器、陶质矩形通道蜂窝状反应器、气升式反应器；另一类是贴壁培养,指必须贴附在固体介质表面上生长的细胞培养,主要适用于贴壁依赖型细胞（亦称贴壁型细胞）,大多数动物细胞都属于这一类型.这类细胞生长需要附着于某些带适量正电荷的固体和半固体表面,细胞贴附生长后,不再是原有的形态,一般呈单一化,主要有成纤维细胞型、上皮型、游走型和多形型等.此类细胞培养可以选择的生物反应器为：搅拌反应器（微载体培养）、玻璃珠床反应器、中空纤维反应器、陶质矩形通道蜂窝状反应器等；再有一类是固定化培养,这类培养既适用于贴壁依赖性细胞,又适用于非贴壁依赖性细胞的包埋培养方式,具有细胞生长密度高、抗剪切力和抗污染能力强的优点.这一类细胞培养的生物反应器选择为：流化床反应器、固化床反应器等. （三）植物细胞培养生物反应器的选择 植物细胞培养生物反应器最初大多数采用微生物反应器.由于植物细胞与微生物细胞形态结构不同,植物细胞较微生物细胞大,对氧需求小,对剪切力却很敏感,因此不能像微生物培养那样采用高剪切的搅拌,因而,混合显得更重要.目前,由于植物细胞悬浮技术的发展,单细胞培养的成功加上各种新型生物反应器的问世,使得植物细胞有可能像微生物那样在发酵罐中大规模连续培养.用于植物细胞培养的反应器主要有搅拌式、非搅拌式及其他新型生物反应器,另外还有植物细胞固定化反应器和膜生物反应器等. 总之,在选择相应的生物反应器之前要了解该种细胞培养的特点及其注意事项来选择相应的反应器.

提供全面的营养。

　　1.培养基不同：植物细胞（固体培养基），动物细胞（液体培养基）　　2.培养基的成分不同：动物细胞培养必须利用动物血清，植物组织培养则不需要，而需要加入植物生长激素　　3.产物不同：植物组织培养最后一般得到新的植物个体，而动物细胞培养因为动物体细胞一般不能表达其全能性，因此得到的是只含同一种的细胞的一个细胞系（或者叫细胞群）。　　4.原理不同：植物组织培养的原理为植物细胞的全能性，动物细胞培养的原理为细胞的增殖。　　5.过程不同：植物组织培养的过程为脱分化和再分化，动物细胞培养的过程为原代培养和传代培养　　6.培养目的不同：植物组织培养是为了快速繁殖和获得无病毒植株，动物细胞培养是获得生物制品。

动物细胞培养成功的关键在于培养液中是否含有动物血清，因为由于动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚，所以需要加入动物血清血浆以提供一个类似生物体内的环境，此外动物血清中也包含了一些动物的激素和酶，可以促进细胞的发育。目前用于组织培养的血清血浆主要是牛血清血浆，培养某些特殊细胞也用人血清血浆、马血清血浆清等。选择用牛血清培养细胞的原因是牛血清血浆来源充足、制备技术成熟、经过长时间的应用考验人们对其有比较深入的理解。扩展资料：动物细胞培养原理：动物细胞培养原理是细胞增殖。动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞（使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶），放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。细胞培养是指细胞在体外条件下的生长，动物细胞在单独细胞培养的过程中不再形成个体。体外细胞培养所需营养物质与体内基本相同，例如，需要糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等。将细胞所需的上述物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基，称为合成培养基。

你好，很高兴为你解答：1、有无细胞壁：植物细胞一般有细胞壁；动物细胞一般无细胞壁有的有荚膜或细胞外基质等，广义的动物细胞概念。2、有无中心体：高等植物细胞无中心体细胞分裂时直接在细胞两极形成纺锤体；动物细胞有中心体。3、细胞分裂时是否形成细胞板：植物细胞形成细胞板；动物细胞分裂后期缢裂。4、产物不同：植物组织培养最后一般得到新的植物个体，而动物细胞培养因为动物体细胞一般不能表达其全能性，因此得到的是同一种的细胞。5、原理不同：植物组织培养的原理为植物细胞的全能性，动物细胞培养的原理为细胞的增殖。6、过程不同：植物组织培养的过程为脱分化和再分化，动物细胞培养的过程为原代培养和传代培养。动物细胞有细胞核、细胞质和细胞膜，没有细胞壁，液泡不明显，含有溶酶体,动物细胞的结构有细胞膜、细胞质、细胞器、细胞核；它们的主要作用是控制细胞的进出、进行物质转换、生命活动的主要场所、控制细胞的生命活动。细胞内部有细胞器：细胞核，双层膜，包含有由DNA和蛋白质构成的染色体。内质网分为粗面的与滑面的，粗面内质网表面附有核糖体，参与蛋白质的合成和加工；光面内质网，表面没有核糖体，参与脂类合成。植物细胞由细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核这四部分构成。1、细胞壁：支撑细胞结构形态和保护细胞。2、细胞膜：跟动物的细胞膜具有相似的功能，是半透膜，具有交换物质营养的功能。3、细胞质：为细胞新陈代谢，提供物质和场所。4、细胞核：遗传物质储存和复制的场所、生命活动控制中心。

有：震动，病毒。　 诱导细胞融合的方法有三种：生物方法（病毒）、化学方法（聚乙二醇PEG）、物理方法（离心，震动，电刺激）。某些病毒如：仙台病毒、副流感病毒和新城鸡瘟病毒的被膜中有融合蛋白（fusion protein），可介导病毒同宿主细胞融合，也可介导细胞与细胞的融合，因此可以用紫外线灭活的此类病毒诱导细胞融合。化学和物理方法可造成膜脂分子排列的改变，去掉作用因素之后，质膜恢复原有的有序结构，在恢复过程中便可诱导相接触的细胞发生融合。 培养基的差异：动物细胞的培养基是液体培养基、血清培养基，而植物培养基是固体培养基。以下是动物培养基和植物培养基的具体内容：动物培养基：　　 1.动物细胞培养液的成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。动物细胞培养成功的关键在于培养液中是否含有动物血清，因为由于动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚，所以需要加入动物血清以提供一个类似生物体内的环境，此外动物血清中也包含了一些动物的激素和酶，可以促进细胞的发育。 　　2.动物细胞培养液的特点：液体培养基、含动物血清。 植物培养基： （ 1 ）愈伤组织诱导培养基： MS 培养基（蔗糖含量为 10 g/L ， 2,4 – D 含量为 2 mg/L ，琼脂 10 g/L ）。 　　（ 2 ）试验培养基：在 MS 培养基中加入 IAA 和 6–BA 。 　　吲哚乙酸（IAA)先用少量 0.1 mol/L NaOH 溶解， 6- 苄基氨基腺嘌呤先用少量 0.1 mol/L HCl 溶解，然后用蒸馏水稀释，再加入培养基中。 希望能帮助您。^__^

植物细胞与动物细胞之间的区别主要体现在细胞结构上。下面就和我一起了解一下吧，供大家参考。 动植物细胞有什么区别 1、有无细胞壁：植物细胞一般有细胞壁；动物细胞一般无细胞壁有的有荚膜或细胞外基质等，广义的动物细胞概念。 2、有无中心体：高等植物细胞无中心体细胞分裂时直接在细胞两极形成纺锤体；动物细胞有中心体。 3、细胞分裂时是否形成细胞板：植物细胞形成细胞板；动物细胞分裂后期缢裂。 4、产物不同：植物组织培养最后一般得到新的植物个体，而动物细胞培养因为动物体细胞一般不能表达其全能性，因此得到的是同一种的细胞。 5、原理不同：植物组织培养的原理为植物细胞的全能性，动物细胞培养的原理为细胞的增殖。 6、过程不同：植物组织培养的过程为脱分化和再分化，动物细胞培养的过程为原代培养和传代培养。 动物细胞由哪几部分组成 动物细胞有细胞核、细胞质和细胞膜，没有细胞壁，液泡不明显，含有溶酶体,动物细胞的结构有细胞膜、细胞质、细胞器、细胞核；它们的主要作用是控制细胞的进出、进行物质转换、生命活动的主要场所、控制细胞的生命活动。细胞内部有细胞器：细胞核，双层膜，包含有由DNA和蛋白质构成的染色体。内质网分为粗面的与滑面的，粗面内质网表面附有核糖体，参与蛋白质的合成和加工；光面内质网，表面没有核糖体，参与脂类合成。 植物细胞由什么组成 植物细胞由细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核这四部分构成。 1、细胞壁：支撑细胞结构形态和保护细胞。 2、细胞膜：跟动物的细胞膜具有相似的功能，是半透膜，具有交换物质营养的功能。 3、细胞质：为细胞新陈代谢，提供物质和场所。 4、细胞核：遗传物质储存和复制的场所、生命活动控制中心。

有充足的营养、适宜的温度和PH、气体及无菌、无毒的环境。

你的问题问的有歧义，生物反应器常用于基因工程，是体外生物反应装置，比如让羊的乳汁中具有我们所需要的蛋白质，那么就将特定基因导入羊的基因组，如果能在乳腺细胞中成功表达，那么这只羊叫做“乳腺反应器”。在细胞工程中似乎没有这种说法。可能是我知识有限，请你也在看看。呵呵再有问题再联系

如果你的意思是利用动物细胞培养来检测某物质对细胞的毒性如何，即将该物质加入该细胞的培养基当中，浓度高低不同做成一系列梯度（将加了该化学物质的细胞与未加的细胞进行对照比较如果该化学物质不易溶解于该细胞的培养基，则需要多做一个对照组，为加了该物质的溶剂但未加该物质的细胞比较的时候主要看存活率和代谢率两个指标。

植物细胞培养中有原代培养与传代培养1.培养基不同：植物细胞（固体培养基），动物细胞（液体培养基）2.培养基的成分不同：动物细胞培养必须利用动物血清，植物组织培养则不需要，而需要加入植物生长激素3.产物不同：植物组织培养最后一般得到新的植物个体，而动物细胞培养因为动物体细胞一般不能表达其全能性，因此得到的是只含同一种的细胞的一个细胞系（或者叫细胞群）。4.原理不同：植物组织培养的原理为植物细胞的全能性，动物细胞培养的原理为细胞的增殖。5.过程不同：植物组织培养的过程为脱分化和再分化，动物细胞培养的过程为原代培养和传代培养7.培养目的不同：植物组织培养是为了快速繁殖和获得无病毒植株，动物细胞培养是获得生物制品。根据培养方式：贴壁细胞培养，半悬浮细胞培养，悬浮细胞培养

别人的没意义，归纳就是自己做的才行。

动物细胞培养的无毒环境是指无病毒还是无有毒物质动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体、胚胎移植、核移植等。动物细胞培养是其他技术（如单克隆抗体、胚胎移植、核移植等）的基础，其价值更多的是通过其他技术成果来体现的。而动物细胞融合技术目前较为成熟的最重要的用途便是制备单克隆抗体。动物细胞培养1、概念：动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖.2、原理：细胞增殖3、动物细胞培养的条件:1）.无菌无毒的环境2）.营养3）.温度和pH4）.气体环境4、动物细胞培养技术的应用:1）.蛋白质生物制品的生产如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体2）.健康细胞培养培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植3）.细胞的生理、药理、病理研究

补充下他们的回答：蛋白质------双缩脲试剂——紫色（不用加热）DNA-----二苯胺-----蓝色（沸水浴）还原性糖（葡萄糖、果糖和麦芽糖）------斐林试剂————砖红色（水浴）脂肪————苏丹Ⅲ号————橘黄色（镜检）不用加热淀粉————碘---------蓝色不用加热

A、试管婴儿是体外受精和胚胎移植后形成的，属于有性生殖，A错误； B、试管婴儿和克隆羊都利用了动物细胞培养技术，试管苗采用了植物组织培养技术，因此三者都应用到了细胞工程技术，B正确； C、试管婴儿是有性生殖形成的，发生了基因重组，C错误； D、克隆羊是体细胞核移植后形成的，体现了体细胞细胞核的全能性，D错误． 故选：B．

据这个专业还是挺好学的啦，我一个这个专业的朋友说，如果你有比较强的思维能力，这个专业对你来说就是非常容易的啦。课程学什么生物工程是工科专业，主修基础课程包括三数学（高数、线代、概率）、四化学（无机、有机、物化、分析）、四生物（生化、细胞、分子、微生物）。还有物理和各种生物化学实验，专业课程主要以工程类为主，例如化工原理、生化反应工程、生化分离工程等。听上去很有趣，但是内容主要靠背，尤其是生化和分子，丝毫不逊于文科。所以也非常的考验你的背诵能力，但是主要还是你的思维能力要发散，毕竟这是一个工科专业。就业往何处1.读研读博出国，专家，百万级待遇。本科完了考研，然后继续做实验，或者去生物技术公司。看你研究生读的方向。2.本科出来，实验室实验员，车间技术员工程师等，我朋友的学长的工作就是做微生物，生化等等方面的质检，微生物的培养开发，基因方面。3.改行或者考各种编制，但生物工程专业的公务员事业单位少，只能报考不限专业的。个人感受学生物工程的话首先一定要是自己喜欢这科，喜欢做实验。因为学生物工程话学的是比较杂的，动物、植物、微生物、分子、动物细胞培养、植物组织培养，还有发酵工程，生物工程设备，分离工程什么的都要学。相对于动物医学、食品工程、还有草科什么的这些专业来说学的多，却没有人家专业精细。但该做的实验还是必不可少的。平时上课的体验就是实验课上起来非常久，也比较累，预习报告写起来非常多，学分很少，但是实验课精神较轻松。比如微生物学实验就是和微生物学课程内容联系紧密，可以养菌各种微生物培养操作。生物工程这个专业所学的知识比较广泛，针对性相对来说没有那么强。我觉得不管什么专业，其实更多的是靠自己争取和努力。我身边有不少同学，大学学的热门专业，最后也大都没有从事本专业相关的工作，或者干了不多久跳槽转行的。所以说不要一味的怪你的专业有多冷门，而是要多问问自己有没有好好努力。

动物细胞培养和植物细胞培养 所需营养是微生物、动物、植物细胞培养的异同点如下：◆不同点：首先在培养基上，微生物是固体、半固体培养基都有，成分主要是水、无机盐、生长因子、碳源、氮源等。如果是病毒的话要用细菌进行培养；动物的话用天然培养基加生长因子比较好，一般是液体培养基，成分主要是水、葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清；而植物培养基用合成培养基就可以了，一般是固体培养基，成分主要是矿质元素、蔗糖、纤维素、植物激素、有机添加剂。其次是各自培养的原理上的不同，微生物细胞培养的原理是微生物细胞的增殖，动物细胞培养的原理是细胞的增殖，植物细胞培养原理是细胞的全能性。最后，微生物细胞培养主要是获得其代谢产物或次级代谢产物或得到细胞本身；植物细胞培养是获得新个体或细胞产品，应用与快速繁殖试管苗、细胞产品、人工种子、转基因植物的培育等。动物细胞培养是获得大量新生细胞或细胞产品，应用是获得细胞的产物或细胞等。另外，动物细胞分散用到的是胰蛋白酶，植物是纤维素酶等。◆ 相同点：两者都需要培养基、都需要无菌操作，防止染菌、培养时候都需要适当的温度等条件。

A、动物细胞培养中，细胞具有贴壁生长以及接触抑制的特点，因此在培养中需要用胰蛋白酶处理贴壁的细胞并进行分瓶培养，分瓶后的培养称为传代培养，A错误； B、连续细胞系是指发生了转化的细胞系，有的获得了不死性（癌变），但保留接触抑制现象，B错误； C、动物细胞培养的原理是细胞增殖，植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性，C错误； D、通过动物细胞培养提供动物克隆的供体细胞，一般应选用原代培养中10代以内的细胞，以保证供体细胞正常的遗传基础，D正确． 故选：D．

植物组织培养：用个体部分组织培育出下一代完整个体或部分组织。动物细胞培养：只能用个体细胞培育下一代细胞。微生物培养：用个体培育下一代个体。

所有的外界条件的变化原理上都会影响啊，但是在实验过程中一般进行的是激素种类与浓度，抗生素种类与浓度，温度，湿度，光照强度和时间，以及培养基的研究

植物细胞培养中有原代培养与传代培养1.培养基不同：植物细胞（固体培养基），动物细胞（液体培养基）2.培养基的成分不同：动物细胞培养必须利用动物血清，植物组织培养则不需要，而需要加入植物生长激素3.产物不同：植物组织培养最后一般得到新的植物个体，而动物细胞培养因为动物体细胞一般不能表达其全能性，因此得到的是只含同一种的细胞的一个细胞系（或者叫细胞群）。4.原理不同：植物组织培养的原理为植物细胞的全能性，动物细胞培养的原理为细胞的增殖。5.过程不同：植物组织培养的过程为脱分化和再分化，动物细胞培养的过程为原代培养和传代培养7.培养目的不同：植物组织培养是为了快速繁殖和获得无病毒植株，动物细胞培养是获得生物制品。根据培养方式：贴壁细胞培养，半悬浮细胞培养，悬浮细胞培养