e.coli是什么微生物

【答案】：当葡萄糖和乳糖同时存在时，乳糖操纵子以低水平进行转录。因为阻遏物与别乳糖(乳糖的一个异构体)形成复合物，别乳糖-阻遏物复合物不能与乳糖操纵子的启动子区城结合，从而使该阻遏物不能阻止转录起始。$缺少乳糖的条件下，将不会有别乳糖生成，乳糖阻遏物与乳糖操纵子启动子区结合，阻止转录。$当乳糖作为唯一的碳源时，该乳糖操纵子以最大的速率转录，在别乳糖存在的条件下，转录也是可能发生的，因为乳糖阻遏物不能结合乳糖操纵子的启动子区城。同样在缺少葡萄糖的条件下，转录速率也增加，因为cAMP产物增加，有更多的CAP-cAMP结合乳糖操纵子的启动子区城，促进转录，使细胞在乳糖作为可利用的唯一碳源时合成大量的酶来维持生长。

由于尿嘧啶缺陷型大肠杆菌(E. coli) OP50是尿嘧啶缺陷性，只能从，涂布于NGM（Nematode Growth Media）中获取尿嘧啶，无法自身合成。所以生长速度会比普通的大肠杆菌慢很多，这样既可以提供线虫食物，又不会过度生长。线虫一般从卵到成虫需要3天时间，而且湿度，氧气，以及各种环境因素会制约线虫的生长。所以需要营养合成缺陷型菌种为其食物

简单的说，就是通过RNA的二级结构对翻译进行调控： 该操纵子位于MRNA的前导序列内，前导序列有4个位点1、2、3、4，他们1和2，2和3，3和4之间都能形成剪辑互补配对的2级结构。而基因的核糖体结合位点位于区域4。（1234按照5`到3` 一次编号）。前导序列1能编码一段前导肽，该位点内有连续的2个色氨酸密码子。 当高浓度色氨酸存在时，色氨酸-TRNA是负载的，可以为该位点提供充足的翻译原料。这时，核糖体可以顺利通过区域1，停留在区域2上，此结构导致区域1和2不能互补配对，而3和4配对，导致4区域的核糖体结合位点被屏蔽，以至于无法翻译基因信息。 而当细胞内色氨酸缺乏时，就没有足够的色氨酸-TRNA渗透进正在1位点翻译的核糖体内，核糖体停留在1位点，暴露2位点，这样2和3就互补配对形成2级结构，从而导致4位点暴露，从而开启核糖体结合位点，使基因得以表达。 嗯，大概就是这样子。。。不妨用纸笔画画图，就明白了。上个图给你看

（1）操纵子基因突变 死亡。不能与RNA聚合酶结合，关闭转录，不能运用乳糖，所以将死亡。 （2）结构基因突变 大量增殖。O不能与阻遏因子结合，将持续表达，因此大量增殖。 （3）CAP位点基因突变 存活，增殖减弱。不能形成cAMP-CAP复合物，不能促进转录，但正常转录不受影响。

E·coliDNA连接酶是从大肠杆菌中获得的DNA 连接酶 只能连接粘性末端 而平末端则要交给T4DNA连接酶了 它可以连接粘性末端也可以连接平末端

必须是mRNA反转录的DNA或类似的DNA基因，必须与大肠杆菌启动子、RBS序列、SD序列、起始密码子正确拼接、应该还有大肠杆菌终止子。最后还要转入大肠杆菌中才可能正确表达。

筛选工业高产菌株一般从以下几个方面入手：1.筛选营养缺陷型菌株原理是解除了代谢途径中的协同反馈，这里选择酪氨酸营养缺陷型菌株，使得代谢支路受到阻遏，只要在培养基中加入少量酪氨酸，苯丙氨酸就可大量合成。2.筛选抗结构类似物突变株原理是解除阻遏或抗反馈抑制，对氟苯丙氨酸是苯丙氨酸的结构类似物,因此,对氟苯丙氨酸抗性菌株所产生的苯丙氨酸也不能与阻遏蛋白或变构酶结合,这样必然会在有苯丙氨酸存在的情况下,细胞仍然不断的合成苯丙氨酸,使其得到过量积累,这就是抗阻遏或抗反馈突变株。3.筛选温度敏感型突变株比如e.coli最适温度是37,突变后由于某酶结构改变，使得在37度下失活，等同于37度下的营养缺陷型，原理同第一条。

可以。大肠杆菌也是从一个复制起点开始双向复制，形成θ形

【答案】：尽管两个基因组都由独特序列的DNA组成，E.coli的基因组约大25倍，因而每条变性的E.coliDNA链复性得花费更长的时间来寻找其正确的互补链。

一、指代不同1、E.coliDNA连接酶：从大肠杆菌中获得的DNA连接酶。2、T4连接酶：一单链多肽，分子量为68,000道尔顿，它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。二、原理不同1、E.coliDNA连接酶：一条分子量为75KD的多肽链。对胰蛋白酶敏感，可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性，可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物，但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。2、T4连接酶：T4DNA连接酶与辅助因子ATP形成酶－AMP复合物。三、特点不同1、E.coliDNA连接酶：只连接具有相同黏性末端的DNA分子的基本骨架，即磷酸二酯键。只能连接具有互补配对粘性末端的双链，对平末端效果不佳。2、T4连接酶：分子生物学试验中主要采用T4DNA连接酶，因该酶在正常条件下，即能完成连接反应。T4 DNA 连接酶是一单链多肽，分子量为68,000道尔顿，它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。参考资料来源：百度百科-T4DNA连接酶参考资料来源：百度百科-DNA连接酶

如图.

1、作用不同E.coliDNA 连接酶是生物体内重要的酶，其所催化的反应在DNA 的复制和修复过程中起着重要的作用。T4-DNA连接酶即T4 DNA连接酶，可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5"-P末端和3"-OH末端之间以磷酸二酯键结合，该催化反应需ATP作为辅助因子。2、连接条件不同用DNA连接酶连接具有互补粘性末端的DNA片段；用T4DNA连接酶直接将平末端的DNA片段连接起来，或是用末端脱氧核苷酸转移酶给具平末端的DNA片段加上poly（dA）-poly（dT）尾巴之后，再用DNA连接酶将它们连接起来；先在DNA片段末端加上化学合成的衔接物或接头，使之形成粘性末端之后，再用DNA连接酶将它们连接起来。这三种方法虽然互有差异，但共同的一点都是利用DNA连接酶所具有的连接和封闭单链DNA的功能。扩展资料：粘性末端DNA片段的连接DNA连接酶最突出的特点是，它能够催化外源DNA和载体分子之间发生连接作用，形成重组的DNA分子。平末端DNA片段的连接常用的平末端DNA片段连接法，主要有同聚物加尾法、衔接物连接法及接头连接法。同聚物加尾法这种方法的核心部分是，利用末端脱氧核苷酸转移酶转移核苷酸的特殊功能。末端脱氧核苷酸转移酶是从动物组织中分离出来的一种异常的DNA聚合酶，它能够将核苷酸（通过脱氧核苷三磷酸前体）加到DNA分子单链延伸末端的3′-OH基团上。由核酸外切酶处理过的DNA，以及dATP和末端脱氧核苷酸转移酶组成的反应混合物中，DNA分子的3′-OH末端将会出现单纯由腺嘌呤核苷酸组成的DNA单链延伸。这样的延伸片段，称之为poly（dA）尾巴。反过来，如果在反应混合物中加入的是dTTP，那么DNA分子的3′-OH末端将会形成poly（dT）尾巴。因此任何两条DNA分子，只要分别获得poly（dA）和poly（dT）尾巴，就会彼此连接起来。这种连接DNA分子的方法叫做同聚物尾巴连接法（homopolymertail-joining），简称同聚物加尾法。衔接物连接法所谓衔接物（linker），是指用化学方法合成的一段由10～12个核苷酸组成、具有一个或数个限制酶识别位点的平末端的双链寡核苷酸短片段。衔接物的5′-末端和待克隆的DNA片段的5′-末端，用多核苷酸激酶处理使之磷酸化，然后再通过T4DNA连接酶的作用使两者连接起来。接着用适当的限制酶消化具衔接物的DNA分子和克隆载体分子，这样的结果使二者都产生出了彼此互补的粘性末端。于是我们便可以按照常规的粘性末端连接法，将待克隆的DNA片段同载体分子连接起来。DNA接头连接法DNA接头，是一类人工合成的一头具某种限制酶粘性末端另一头为平末端的特殊的双链寡核苷酸短片段。当它的平末端与平末端的外源DNA片段连接之后，便会使后者成为具粘性末端的新的DNA分子，而易于连接重组。实际使用时对DNA接头末端的化学结构进行必要的修饰与改造，可避免处在同一反应体系中的各个DNA接头分子的粘性末端之间发生彼此间的配对连接。参考资料来源：百度百科-DNA连接酶参考资料来源：百度百科-T4DNA连接酶参考资料来源：百度百科-T4-DNA连接酶

一、指代不同1、E.coliDNA连接酶：从大肠杆菌中获得的DNA连接酶。2、T4连接酶：一单链多肽，分子量为68,000道尔顿，它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。二、原理不同1、E.coliDNA连接酶：一条分子量为75KD的多肽链。对胰蛋白酶敏感，可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性，可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物，但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。2、T4连接酶：T4DNA连接酶与辅助因子ATP形成酶－AMP复合物。三、特点不同1、E.coliDNA连接酶：只连接具有相同黏性末端的DNA分子的基本骨架，即磷酸二酯键。只能连接具有互补配对粘性末端的双链，对平末端效果不佳。2、T4连接酶：分子生物学试验中主要采用T4DNA连接酶，因该酶在正常条件下，即能完成连接反应。T4 DNA 连接酶是一单链多肽，分子量为68,000道尔顿，它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。参考资料来源：百度百科-T4DNA连接酶参考资料来源：百度百科-DNA连接酶

1、作用不同E.coliDNA 连接酶是生物体内重要的酶，其所催化的反应在DNA 的复制和修复过程中起着重要的作用。T4-DNA连接酶即T4 DNA连接酶，可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5"-P末端和3"-OH末端之间以磷酸二酯键结合，该催化反应需ATP作为辅助因子。2、连接条件不同用DNA连接酶连接具有互补粘性末端的DNA片段；用T4DNA连接酶直接将平末端的DNA片段连接起来，或是用末端脱氧核苷酸转移酶给具平末端的DNA片段加上poly（dA）-poly（dT）尾巴之后，再用DNA连接酶将它们连接起来；先在DNA片段末端加上化学合成的衔接物或接头，使之形成粘性末端之后，再用DNA连接酶将它们连接起来。这三种方法虽然互有差异，但共同的一点都是利用DNA连接酶所具有的连接和封闭单链DNA的功能。扩展资料：粘性末端DNA片段的连接DNA连接酶最突出的特点是，它能够催化外源DNA和载体分子之间发生连接作用，形成重组的DNA分子。平末端DNA片段的连接常用的平末端DNA片段连接法，主要有同聚物加尾法、衔接物连接法及接头连接法。同聚物加尾法这种方法的核心部分是，利用末端脱氧核苷酸转移酶转移核苷酸的特殊功能。末端脱氧核苷酸转移酶是从动物组织中分离出来的一种异常的DNA聚合酶，它能够将核苷酸（通过脱氧核苷三磷酸前体）加到DNA分子单链延伸末端的3′-OH基团上。由核酸外切酶处理过的DNA，以及dATP和末端脱氧核苷酸转移酶组成的反应混合物中，DNA分子的3′-OH末端将会出现单纯由腺嘌呤核苷酸组成的DNA单链延伸。这样的延伸片段，称之为poly（dA）尾巴。反过来，如果在反应混合物中加入的是dTTP，那么DNA分子的3′-OH末端将会形成poly（dT）尾巴。因此任何两条DNA分子，只要分别获得poly（dA）和poly（dT）尾巴，就会彼此连接起来。这种连接DNA分子的方法叫做同聚物尾巴连接法（homopolymertail-joining），简称同聚物加尾法。衔接物连接法所谓衔接物（linker），是指用化学方法合成的一段由10～12个核苷酸组成、具有一个或数个限制酶识别位点的平末端的双链寡核苷酸短片段。衔接物的5′-末端和待克隆的DNA片段的5′-末端，用多核苷酸激酶处理使之磷酸化，然后再通过T4DNA连接酶的作用使两者连接起来。接着用适当的限制酶消化具衔接物的DNA分子和克隆载体分子，这样的结果使二者都产生出了彼此互补的粘性末端。于是我们便可以按照常规的粘性末端连接法，将待克隆的DNA片段同载体分子连接起来。DNA接头连接法DNA接头，是一类人工合成的一头具某种限制酶粘性末端另一头为平末端的特殊的双链寡核苷酸短片段。当它的平末端与平末端的外源DNA片段连接之后，便会使后者成为具粘性末端的新的DNA分子，而易于连接重组。实际使用时对DNA接头末端的化学结构进行必要的修饰与改造，可避免处在同一反应体系中的各个DNA接头分子的粘性末端之间发生彼此间的配对连接。参考资料来源：百度百科-DNA连接酶参考资料来源：百度百科-T4DNA连接酶参考资料来源：百度百科-T4-DNA连接酶

一、指代不同1、E.coliDNA连接酶：从大肠杆菌中获得的DNA连接酶。2、T4连接酶：一单链多肽，分子量为68,000道尔顿，它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。二、原理不同1、E.coliDNA连接酶：一条分子量为75KD的多肽链。对胰蛋白酶敏感，可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性，可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物，但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。2、T4连接酶：T4DNA连接酶与辅助因子ATP形成酶－AMP复合物。三、特点不同1、E.coliDNA连接酶：只连接具有相同黏性末端的DNA分子的基本骨架，即磷酸二酯键。只能连接具有互补配对粘性末端的双链，对平末端效果不佳。2、T4连接酶：分子生物学试验中主要采用T4DNA连接酶，因该酶在正常条件下，即能完成连接反应。T4 DNA 连接酶是一单链多肽，分子量为68,000道尔顿，它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。参考资料来源：百度百科-T4DNA连接酶参考资料来源：百度百科-DNA连接酶

可能是E.coli C600比较容易筛选吧，含有Rifampicin抗性。。。

大肠杆菌的的色氨酸合成系统操纵子，其从启动基因开始至转录衰减区附近所转录的信使RNA（mRNA），在细胞内色氨酸浓度高过一定程度时，则在该位置终止，但在色氨酸浓度低时，则通过该点进行mRNA的合成。在此操纵子中，最初的结构基因是从mRNA5′末端数第163个碱基开始的，而转录衰减区存在于稍前方，即约在第130个碱基附近。在此区域的前面，有产生由14个氨基酸所成的小肽的信息，其中有2个为色氨酸的遗传信号。所以当色氨酸缺乏时，此肽的合成在该位置迟滞以至完全停止，而妨碍参与肽合成核糖体向衰减区接近。反之当色氨酸浓度高时，则核糖体接近该区域，随之在mRNA上的衰减区（有回文结构）形成与转录终止相适应的二级结构，转录停止。在其它操纵子上也有同样的小肽的信息，例如组氨酸操纵子在16个氨基酸中有7个为组氨酸的遗传信号，而苯丙氨酸操纵子在15个中有7个为苯丙氨酸的遗传信号。这样氨基酸合成系统的操纵子，利用翻译机制来监测其操纵子所合成的氨基酸的浓度，即具有根据这浓度而确定mRNA是否继续合成的机制。

一、指代不同1、E.coliDNA连接酶：从大肠杆菌中获得的DNA连接酶。2、T4连接酶：一单链多肽，分子量为68,000道尔顿，它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。二、原理不同1、E.coliDNA连接酶：一条分子量为75KD的多肽链。对胰蛋白酶敏感，可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性，可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物，但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。2、T4连接酶：T4DNA连接酶与辅助因子ATP形成酶－AMP复合物。三、特点不同1、E.coliDNA连接酶：只连接具有相同黏性末端的DNA分子的基本骨架，即磷酸二酯键。只能连接具有互补配对粘性末端的双链，对平末端效果不佳。2、T4连接酶：分子生物学试验中主要采用T4DNA连接酶，因该酶在正常条件下，即能完成连接反应。T4 DNA 连接酶是一单链多肽，分子量为68,000道尔顿，它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。参考资料来源：百度百科-T4DNA连接酶参考资料来源：百度百科-DNA连接酶

?这两个一培养不就看出来了么，菌落不一样。革兰氏染色，大肠杆菌红色，金黄葡萄球菌紫色看看形态也不一样的，大肠杆菌，金黄葡萄球菌

培养什么菌的？ 一般比如大肠杆菌有M9培养基，酵母有合成培养基

（1）操纵子基因突变 死亡。不能与RNA聚合酶结合，关闭转录，不能运用乳糖，所以将死亡。 （2）结构基因突变 大量增殖。O不能与阻遏因子结合，将持续表达，因此大量增殖。 （3）CAP位点基因突变 存活，增殖减弱。

蛋白质的合成过程在蛋白质合成过程中，mRNA从5′→3′阅读，而肽链从N-端向C-端合成。（一）氨基酸的活化氨基酸在氨酰-tRNA合成酶的作用下，活化成氨酰-tRNA(氨基酸以高能酯键与tRNA的3′-末端腺苷酸的2′或3′的羟基相连的)。AA + tRNA + ATP---AA～tRNA + AMP + PPi氨酰-tRNA合成酶有氨基酸和tRNA两种底物的专一性结合位点。每一种tRNA只专一携带一种氨基酸，而一种氨基酸可分别被几种tRNA专一携带(因为有密码子简并现象)。氨基酸一旦与tRNA结合成AA- tRNA，进一步的去向就由tRNA来决定。tRNA凭借自身的反密码子与mRNA上的密码子相识别，而把所携带的氨基酸定位在肽链的一定位置上。 各种氨酰-tRNA都具备后，就可以进行蛋白质的合成 （二）多肽链的起始合成参与起始的成分：IF1，IF2，IF3，核糖体的小、大亚基，mRNA，fMet-tRNAf，GTP。起始过程：1、IF1，IF3，30S小亚基，mRNA结合并定位；2、GTP，IF2，fMet-tRNAf加入，形成30S起始复合物；3、IF1，IF2，IF3，GDP，Pi释放，50S大亚基加入，形成70S起始复合物。 至此，起始过程完成，fMet-tRNA位于核糖体上的P位点（给位，即肽酰-tRNA结合位点），而A位点（受位，即氨酰-tRNA结合位点）空着，用于接受下一个AA-tRNA。（三）肽链的延伸此阶段包括氨酰tRNA进入核糖体A位点（进入）、肽键的形成（转肽）和核糖体在mRNA上移位（移位）三个步骤。这三步每重复一次，肽链上就增加一个氨基酸，直到mRNA上的终止密码出现在核糖体的A位时为止。1、进入开始延伸过程时，fMet-tRNAf位于核糖体上的P位点，而一个能与AUG后的密码子互补AA-tRNA进入A位点。具体过程：1、AA-tRNA与EF-Tu-GTP结合生成复合物Tu-GTP-AA-tRNA；2、复合物进入A位，GTP水解，EF-Tu-GDP从核糖体上释放， AA-tRNA留在A位；3、在EF-Ts帮助下，EF-Tu-GDP重新形成EF-Tu-GTP，以便于下一轮反应。2、转肽AA-tRNA的游离氨基与fMet的羧基形成肽键，此过程在肽酰转移酶催化下进行。反应后fMet转移到A位点，形成fMet-AA-tRNA，而P位点留下一空载的tRNAf3、移位在延伸因子EF-G（又称移位酶）帮助下，核糖体在mRNA上移动一个密码子的距离，结果使A位点的fMet-AA-tRNA移到P位，P位的tRNAf移出了核糖体，而A位点空出，以便于接受下一分子AA-tRNA。这样，一轮反应结束，肽链延长了一个氨基酸单位。紧接着进行下一轮延伸，直至肽链合成终止。（四）肽链合成的终止和释放肽链的合成过程同时也是核糖体沿mRNA 5′→3′方向移动，并翻译mRNA上密码子的过程。当核糖体移到终止密码子时，没有对应终止密码的氨酰-tRNA可以进入A位，终止因子进入A位，肽链合成停止。有三种终止因子(RF1、RF2、 RF3)参与终止步骤：RF1：识别终止密码UAA、UAG ；RF2：识别UAA、UGA；RF3：促进RF1、RF2的识别 。、RF2结合到核糖体后，使肽酰转移酶构象转变，表现出水解酶活力，催化肽酰基与tRNA的酯键水解，合成的肽链便从核糖体上释放下来。空载的tRNA接着从核糖体上脱落，核糖体便解离成50S和30S两个亚基离开mRNA，一条多肽链的合成便告结束。四、肽链合成后的加工肽链合成后多数还要经过加工处理，才能变为有生物活性的蛋白质分子，这个过程称为翻译后加工作用，内容包括：1、剪切由氨肽酶将N-端fMet（Met）以及多余氨基酸的切除。2、剪接将蛋白质分子内多余的片段切除3、氨基酸的修饰修饰方式多种多样，如：磷酸化、羟基化、糖基化、甲基化、乙酰化等等。4、二硫键的形成在专一性的氧化酶催化下，特定的Cys-SH之间连接形成二硫键。5、与辅基或辅酶结合对于结合蛋白质，与辅基或辅酶结合后才表现出活性。6、形成特定的构象，亚基间的聚合 我现在正在学生物化学，这个是生物化学上的蛋白质的合成步骤。比较专业化，希望能对你有所帮助。

E.coli Electro-Cells E.coli Electro-Cell JM109 制品名 TaKaRa Code 包装量 价格(人民币元) E.coli Electro-Cell JM109 D9022 1 Set (50 μl×10支) 300 ■ GenotypeE.coli JM109recA1, endA1, gyrA96, thi-1, hsdR17, supE44, relA1, Δ(lac-proAB)/F"[traD36, proAB+, lac Iq, lacZ ΔM15]■ 细胞浓度1～2×1010 Bacteria/ml ■ 保存-80℃■制品说明用高电压脉冲电流瞬间击穿大肠杆菌，从而导致DNA转入大肠杆菌内的转化方法称为电穿孔法。电穿孔法是各种转化方法中效率最佳的方法之一，比Ca2+处理的感受态细胞的转化效率高，在转化少量DNA时，特别能发挥其特有的威力。TaKaRa使用独自开发的菌体培养法，制作出了效果极佳的E.coli Electro-Cell JM109。 ■细胞种类α-互补性选择宿主E.coli JM109E.coli JM109在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时, 由于载体DNA产生的LacZα多肽和JM109 F"编码的lacZΔM15的结合，显示β-半乳糖苷酶活性 (α-互补性)。利用这一特性，可以很容易鉴别重组体菌株。因为具有F"质粒，除可用于制作基因库、进行亚克隆等之外，也可作为M13载体DNA的宿主，调制单链DNA。■质量标准 使用10 pg的质粒DNA进行转化时：50 μl E.coli JM109 Electro-Cell/10 pg pUC19 plasmid转化时产生的菌落数>1×109 transformants/1 μg pUC19 plasmid F"质粒的稳定性检测对E.coli JM109使用pUC19 DNA进行电穿孔法转化后，在含有100 μg/ml的Ampicillin、0.2 mM的IPTG, 40 μg/ml的X-Gal的L-琼脂平板培养基上，产生的白色菌落在1%以下。 50 μl的E.coli JM109 Electro-Cell在含有100 μg/ml的Ampicillin L-琼脂平板培养基上不产生菌落。 --------------------------------BL21（DE3）pLysS细菌菌株 BL21（DE3）pLysS细菌菌株可以表达T7控制并核糖体结合位点的高效蛋白表达。BL21（DE3）pLysS对λDE3（1）是溶源性的。λDE3含有T7噬菌体基因I，编码的T7 RNA聚合酶受lac UV5启动子的控制。BL21（DE3）pLysS含有pLysS质粒，他携带编码T7溶菌酶基因。在T7启动子控制下，T7溶菌酶降低靶基因的背景表达但并不干扰由IPTG诱导的表达水平。包装： P9811 500μlhttp://www.promega.com/tbs/tb095/tb095.pdf

（1）操纵子基因突变 死亡。不能与RNA聚合酶结合，关闭转录，不能运用乳糖，所以将死亡。 （2）结构基因突变 大量增殖。O不能与阻遏因子结合，将持续表达，因此大量增殖。 （3）CAP位点基因突变 存活，增殖减弱。不能形成cAMP-CAP复合物，不能促进转录，但正常转录不受影响。

大肠杆菌乳糖操作子。

肠杆菌科细菌

DNA解旋酶，DNA聚合酶

DNA连接酶的种类有很多，用的较多的是E·coliDNA连接酶和T4DNA 连接酶。从大肠杆菌中获得的DNA连接酶只能连接具有互补配对粘性末端的双链，对平末端效果不佳，T4DNA连接酶具有较好的平末端双链连接的作用。 E·coliDNA连接酶所有从大肠杆菌中获得的DNA 连接酶的称。酶的命名是有规律的。所以不能笼统的根据来源叫。

还有抗性筛选位点，比如氨苄Amp、卡那霉素Kana等等……

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小黄人电影简介：Minions Stuart, Kevin and Bob are recruited by Scarlett Overkill, a super-villain who, alongside her inventor husband Herb, hatches a plot to take over the world.小黄人个人介绍：Minions is a 2015 3D computer-animated family comedy film, and a prequel/spin-off to the Despicable Me franchise. Produced by Illumination Entertainment for Universal Pictures, it was directed by Pierre Coffin and Kyle Balda, written by Brian Lynch, and produced by Chris Meledandri and Janet Healy. The film stars Coffin (as the Minions), Sandra Bullock, Jon Hamm, Michael Keaton, Allison Janney, and Steve Coogan, and is narrated by Geoffrey Rush. It was first foreshadowed in the end credits of Despicable Me 2, where Stuart, Kevin, and Bob, three of the Minions, are seen auditioning for the film.

popular a. 受欢迎(受喜爱)Examples:1. The reporter is popular with his audience.这个报告者很受听众的欢迎。2. She"s a lively child and popular with everyone.她是个活泼的孩子, 大家都喜欢她.3. Baker"s act was certainly very popular with the audience.贝克的表演无疑受到观众们的欢迎。be popular in……在……有名望be popular for……因……受爱戴（受欢迎）be popular among……在……中评价很高be popular with受……欢迎；有名气

歌曲名:Ark歌手:sound horizon专辑:Pico Magic Reloaded「--箱庭を骗る槛の中で 禁断の海马に手を加えて骄れる无能の创造神にでも 成った心算なの……」(崩壊 其れは孕み続けた季节 二月の雪の日 「妹」の记忆)「我々を楽园へ导ける箱舟は 哀れなる魂を大地から解き放つ救いを求める贵女にArkを与えよう」<Arkと呼ばれる物>は月光を受けて银色に煌いた…想い出まで裏切った 冷たい言叶の雨幸せだった二人 永远に届かなくなる前に…「ねぇ何故変わってしまったの？ あんなにも爱し合っていたのに…」涙を微笑みに换え诘め寄る 「Arkと呼ばれる物」を握って…--爱憎の箱舟(因果 其れは手缲り寄せた糸 六月の雨の日 「兄」の记忆)信じてたその人に裏切った少女逃げ込んだ楽园は信仰という狂気新しい世界へと羽ばたける自己暗示澄み渡る覚醒は进行という凶器最期の瞬间に廻った 歪な爱の记忆脆弱な精神が堪えきれず あの日嘘を吐いた…律すれば律する程堕ちる 赦させぬ想いに灼かれながらまぐわう伤は深く甘く 破灭へ诱う…--背徳の箱舟被験体#1096 通称「妹」同じく被験体#1076 通称「兄」を杀害<症例番号12>过剰投影型依存における袋小路の模型即ち<虚妄型箱舟依存症候群>限りなく同一に近づける 追忆は狂気にも似た幻想求める尽に唇を夺い合い 少しずつ楽园を追われてゆく同じ心的外伤重ねれば响きあう けれどそれ以上には…「--箱庭を骗る槛の中で 禁断の海马に手を加えて骄れる无能の创造神にでも 成った心算なの？」か…在りし日に咲かせた花弁は 暗闇に散り逝くように凛と少女の声色で嗫く「楽园へ还りましょう」…监视卿は天を仰ぎ深い溜息を吐く失った筈の<左手の薬指>が虚しく疼いた--ふと彼が监视镜の向こうへ视线を戻すと呜呼…いつの间にか少女の背後には「仮面の男」が立っていた--http://music.baidu.com/song/17807631

歌名 ：The King 歌手 ：Brian Tyler这是音乐啊 没有唱词

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Xiaohuang people are looking for one evil master after another, but each master is "killed" by them. Three little yellow people went out of the cave, looking for a new owner...

　　popular表流行的，大众化的意思，popular的 同义词 也有很多，现在就跟着我一起来学习下面的popular的同义词及相关知识吧，希望对你有帮助哦! 　　popular的同义词辨析 　　common, ordinary, commonplace, general, usual, popular, universal 　　这些形容词均含有"普通的，普遍的"之意。 　　common ： 多用于指物，侧重很常见，不稀奇。 　　ordinary ： 用于物，指每天发生，十分平淡无奇;用于人，指无特别之处，很一般。 　　commonplace ： 强调缺少新意。 　　general ： 语气强于common，侧重大多如此，很少有例外情况。 　　usual ： 指常见常闻和常做的事或举动，强调惯常性。 　　popular ： 指适应大众 爱好 、需要，为大家所公认或接受。 　　universal与general同义，但语气较强，侧重对每个人或事物都适用，根本没有例外。 　　poplar的词组习语 　　the common good 　　1. 公益 　　该是我们选出的公务员们维护公益的时候了。 　　it is time our elected officials stood up for the common good. 　　common ground 　　1. (冲突矛盾双方或多方承认的)共同立论基础 　　有着不同 文化 背景的艺术家们找到了共同基础。 　　artists from different cultural backgrounds found common ground. 　　common knowledge 　　1. 大多数人都知道的事，众所周知之事;常识 　　common or garden 　　1. (英，非正式)平常的，普通的，平凡的 　　英国的普通家雀。 　　Britain"s common or garden house sparrow. 　　common property 　　1. 共同财产;公共财产 　　the common touch 　　1. 平易近人的能力;与普通人相处(或打动普通人)的能力 　　have something in common 　　1. 有共同之处(或兴趣、特征) 　　这两个人没什么共同之处。 　　the two men had little in common. 　　in common with 　　1. 与u2026一样，与u2026相同 　　和其他军官一样，我不得不承担警戒任务。 　　in common with other officers I had to undertake guard duties. 　　out of the common 　　1. (英)不平常的;非同寻常的 　　in common 　　1. 一样，同样：与所有的都相同地 　　in ordinary 　　1. (英)(头衔)常任的(尤指皇家御用的) 　　女王陛下的御用画家。 　　painter in ordinary to Her Majesty. 　　in the ordinary way 　　1. (主英)通常地;正常地，平常地 　　out of the ordinary 　　1. 不寻常的;特别的 　　没有任何异常情况发生。 　　nothing out of the ordinary happened. 　　popular的例句 　　1. The military government has been unable to win popular support. 　　军政府一直未能赢得广泛的支持。 　　2. The fusty old establishment refused to recognise the demand for popularmusic. 　　这一古板的老旧机构拒绝承认人们对流行音乐的需求。 　　3. Some of the finer type-faces are corrupted by cheap, popular computer printers. 　　有些比较优美的字体经过价廉、通用的电脑打印机处理后就面目全非了。 　　4. A spoilt child is rarely popular with other children. 　　被宠坏的孩子很难得到其他孩子的喜爱。 　　5. The most popular items are located toward the back of the store. 　　最受欢迎的产品放在靠近商店最里面的地方。 　　6. Popular support—it"s music to the ears of any politician. 　　大众的支持对任何一名政界人士来说都是佳音。 　　7. Despite its demonstrable speed and safety, the boat failed to become popular. 　　虽然其速度和安全性都可得到证明，但这种船还是不受欢迎。 　　8. Howard wanted to be a popular singer, but stage fright crippled him. 　　霍华德想成为流行歌手，但因怯场而心生畏惧。 　　9. In summer this hotel is a hugely popular venue for wedding receptions. 　　夏天时这家饭店是个非常受欢迎的婚宴举办地。 　　10. The bicycle reigned supreme as Britain"s most popular mode of transport. 　　当时自行车是英国最流行的交通工具。 　　11. Potatoes are still the most popular food, followed by white bread. 　　马铃薯仍然是最受欢迎的食物，其次是白面包。 　　12. The popular ceramics industry expanded towards the middle of the 19th century. 　　到19世纪中期，大众制陶业得到了发展。 　　13. Do book ahead as the restaurant is very popular. 　　该饭店非常受欢迎，请务必提前预订。 　　14. The popular papers all have photo features on their inside pages. 　　通俗报纸的内页都有照片专栏. 　　15. This discovery seems to validate the claims of popular astrology. 　　这个发现似乎能印证流行占星术的一些说法。 　　popular的同义词例句 　　1. His destination was Chobham Common, a long way from his Cotswold home. 　　他的目的地是乔伯姆公地，那里和他在科茨沃尔德的家离得很远。 　　2. Eczema is a common skin complaint which often runs in families. 　　湿疹是一种常见的皮肤病，通常具遗传性。 　　3. Canadian libel law is based on English common law. 　　加拿大的诽谤法是以英国的习惯法为基础的。 　　4. The crew are of different nation-alities and have no common language. 　　船员来自不同国家，语言不通。 　　5. His name was Hansen, a common name in Norway. 　　他的名字叫汉森，在挪威是一个常见的名字。 　　6. He had very little in common with his sister. 　　他和姐姐几乎没有什么共同语言。 　　7. Hallucination is common in patients who have suffered damage to the brain. 　　脑部受损的病人常会产生幻觉。 　　8. Sri Lankans share a common ancestry with their Indian brethren. 　　斯里兰卡人和他们的印度兄弟有共同的祖先。 　　9. We happened to discover we had a friend in common. 　　我们凑巧发现我们有一个共同的朋友。 　　10. Deliveries are made by common carrier or van line. 　　货物运输采用普通货车或厢式货车。 　　11. I think the only common denominator of success is hard work. 　　我认为取得成功唯一的共同要素是勤奋。 　　12. They were conversing in German, their only common language. 　　他们正用德语交谈，这是他们唯一的共同语言。 　　13. Rest assured, he probably has rather more common sense than you realize. 　　放心吧，他知道的常识很可能比你以为的要多得多。 　　14. Einstein had the chutzpah to discard common sense and long-established theory. 　　爱因斯坦敢于抛弃常识和长期公认的理论。 　　15. He lacked any of the practical common sense essential in management. 　　管理方面基本的实用常识他一点也不懂。 　　popular的英语 句子 带翻译 　　1. It was just an ordinary voice, but he sang in tune. 　　他声音很一般，但唱得都在调子上。 　　2. Ordinary people are at the mercy of faceless bureaucrats. 　　普通人的命运任凭那些平庸刻板的官僚们摆布。 　　3. This Human Rights Act is enforceable in the ordinary courts. 　　这项《人权法案》适用于普通法庭。 　　4. Food for the ordinary Soviet troops and NCOs was very poor. 　　苏联普通士兵的伙食很糟糕。 　　5. It may also appeal to the latent chauvinism of many ordinary people. 　　它可能也迎合了许多普通人心中的沙文主义情结。 　　6. The needs and opinions of ordinary working people were ignored. 　　普通劳动者的需求和意见遭到忽视。 　　7. A real pizza oven gives better results than an ordinary home oven. 　　专门的比萨烤箱比普通家用烤箱效果更好。 　　8. Your life since then must have seemed very ordinary. 　　你的生活从那时起一定非常平淡无奇。 　　9. It was undeniably a revolt by ordinary people against their leaders. 　　不可否认，这是一场平民百姓反抗领导人的起义。 　　10. This is by no means out of the ordinary. 　　这丝毫不足为奇。 　　11. Life continues to be a terrible grind for the ordinary person. 　　生活对于平头百姓而言依然是理不清的琐事。 　　12. I strongly suspect that most ordinary people would agree with me. 　　我坚定地认为绝大部分老百姓会赞同我的观点。 　　13. It has 25 calories less than ordinary ice cream. 　　它所含热量比普通的冰激凌少了25卡路里。 　　14. It is his popularity with ordinary people that sets him apart. 　　正是他在普通民众中的声望使他与众不同。 　　15. Cheaper housing would vastly improve the living standards of ordinary people. 　　更低廉的房价可大大改善老百姓的生活水平。 猜你喜欢： 1. conclude的同义词和例句 2. store的同义词是什么 3. consider的同义词 4. borrow的同义词和例句 5. provide的同义词 6. adjust的同义词和例句 7. achieve同义词是什么

“in the US”做了“infrastructure”的介短后置定语，同时“of the infrastructure in the US”又一起做了history的介短后置定语。第二句解析不说，可能因为和第一句一样，编者认为不必再说了吧

《阿凡达》电影系列共有**五部**，分别是：《阿凡达》、《阿凡达2:水之道》、《阿凡达3:带种者》、《阿凡达4:祖古骑士》、《阿凡达5:追寻伊娃》。

地点

popular是形容词，而-ing是动词词尾。因此，先要把popular转化为动词popularize，再给动词popularize加-ing，得到popularizing，现在分词或动名词。

1、阿凡达结局是什么意思？电影《阿凡达》结局时，潘多拉星球击败了人类的侵略和掠夺，重新夺回星球主权，纳威族人利用神树和感应器的力量，将杰克的精神转移到阿凡达身上，杰克摆脱了人类身体，成为纳威族的新领袖，和涅提妮在一起了。 2、阿凡达讲的是一个什么故事？故事发生在2154年，杰克萨利是一个双腿瘫痪的前海军陆战队成员，被公司派去潘多拉星球采矿。在矿过程中，杰克又被公司派去操纵克隆的纳威人，希望掠夺潘多拉星球的资源。 3、杰克在潘多拉星偶遇了纳威族公主涅提妮，深入了解了纳威族文化和潘多拉星球的知识，反对人类掠夺潘多拉星，和纳威族人一起反抗人类，纳威族被人类高科技逼得节节败退。 4、杰克在纳威族领袖战死后，主动带领纳威族人展开血战，赶走了人类侵略军，度过了这次难关。杰克的行为得到了纳威族人的认可，被大家留下来推举为族长，还娶了公主涅提妮。 5、这个电影呢？讲真的主演看的是特效！开创了科幻电影的一次里程碑吧！故事情节参考哥伦布发现新大陆！结局有点不同！男主背叛人类帮助当地土著，赶跑了侵略者。剧情可能比较俗套，不过特效确实非常赞，赞到什么地步呢？就是去普通激光厅看2D不戴眼镜都能看到震撼的3D效果，如果去imax厅看，那真是一种视觉冲击！ 6、阿凡达主要讲述了，有些人为了自己的生活私自利益，去破坏别人的家园，不管他人的感受，来达到自己的目的。最终 受破坏的人团结起来，不管对方有多强大，最终还是战胜了敌人，保护了自己的家人和家园，事实证明，团结就是力量。

李嘉诚家族就是秦始皇家族投胎转世过来的。

小黄人外文名Minions是格鲁和老搭档纳瓦利欧博士用变种DNA、脂肪酸和香蕉泥组成的胶囊状生物，身穿蓝色背带装，听命于格鲁和纳瓦利欧，小黄人主要为纳瓦利欧建造工程、充当格鲁的试验品，或者格鲁三个可爱的女儿表演没人看时，数量庞大的小黄人可以充当观众，小黄人爱闹内讧，如果打起架来，轻则十几个对打，重则动辄火箭筒，小黄人的语言通常为中文之外的各种混杂，但小黄人会说中文（参见《神偷奶爸2》），由于自身是香蕉组成，小黄人酷爱香蕉，《神偷奶爸2》中，小黄人被注射PX-41药剂，不仅变得更加无脑，而且刀枪剑戟无法伤它们分毫，最后纳瓦利欧博士将解药配置在超级难吃的果冻时，将数量庞大的小黄人恢复正常

略览一遍啊！可以翻译啊！有一个问题啊，原文中36---55，请问数字何来啊？大意就是讲：一个人按照自己的方式完成自己的人生，此生足矣！

1、英[u02c8pu0252pju0259lu0259(r)]美[u02c8pɑu02d0pju0259lu0259r]，popular，英文单词，形容词，作形容词时意为“流行的，通俗的；受欢迎的；大众的；普及的”。 2、双语例句：To this day it remains one of the most popular in use.直到今天它在使用中保持最受欢迎的之一。

事发17日上午，广州某报娱乐部主任的微博上赫然写着：“好险，刚做完阿凡达观影便民手册，报纸印好还散发着热度的时候，禁令就下来了。”这条消息被近500人转发，引起轩然大波。洪晃、胡淑芬等知名文化人士纷纷对此消息表示惊讶。不久，曾供职《财经》的媒体人王以超表示“被禁”这一说法不太准确：“是要求媒体低调处理，不要炒作。同时，也暗示影院压缩相应的放映规模和档期

信托是委托投资，基金是把钱交给专业机构运作，不一样的

minions 本来就是英语电影……