线虫的培养基 为什么要用尿嘧啶缺陷型的E.coli

E.coli（大肠杆菌）是一种常见的细菌，属于革兰氏阴性菌。它存在于人和动物的肠道中，有些菌株对人体有益，但也有一些具有致病性。E.coli在环境中易于生存和繁殖，可以通过污染的食物或水传播给人类，引起食物中毒和胃肠道感染。尽管大多数E.coli菌株对人体无害，但某些菌株产生肠毒素，可引发严重的健康问题，如腹泻、腹痛和发热等。因此，正确处理食品、保持卫生和良好的个人卫生习惯对预防E.coli感染至关重要。

【答案】：当葡萄糖和乳糖同时存在时，乳糖操纵子以低水平进行转录。因为阻遏物与别乳糖(乳糖的一个异构体)形成复合物，别乳糖-阻遏物复合物不能与乳糖操纵子的启动子区城结合，从而使该阻遏物不能阻止转录起始。$缺少乳糖的条件下，将不会有别乳糖生成，乳糖阻遏物与乳糖操纵子启动子区结合，阻止转录。$当乳糖作为唯一的碳源时，该乳糖操纵子以最大的速率转录，在别乳糖存在的条件下，转录也是可能发生的，因为乳糖阻遏物不能结合乳糖操纵子的启动子区城。同样在缺少葡萄糖的条件下，转录速率也增加，因为cAMP产物增加，有更多的CAP-cAMP结合乳糖操纵子的启动子区城，促进转录，使细胞在乳糖作为可利用的唯一碳源时合成大量的酶来维持生长。

简单的说，就是通过RNA的二级结构对翻译进行调控： 该操纵子位于MRNA的前导序列内，前导序列有4个位点1、2、3、4，他们1和2，2和3，3和4之间都能形成剪辑互补配对的2级结构。而基因的核糖体结合位点位于区域4。（1234按照5`到3` 一次编号）。前导序列1能编码一段前导肽，该位点内有连续的2个色氨酸密码子。 当高浓度色氨酸存在时，色氨酸-TRNA是负载的，可以为该位点提供充足的翻译原料。这时，核糖体可以顺利通过区域1，停留在区域2上，此结构导致区域1和2不能互补配对，而3和4配对，导致4区域的核糖体结合位点被屏蔽，以至于无法翻译基因信息。 而当细胞内色氨酸缺乏时，就没有足够的色氨酸-TRNA渗透进正在1位点翻译的核糖体内，核糖体停留在1位点，暴露2位点，这样2和3就互补配对形成2级结构，从而导致4位点暴露，从而开启核糖体结合位点，使基因得以表达。 嗯，大概就是这样子。。。不妨用纸笔画画图，就明白了。上个图给你看

（1）操纵子基因突变 死亡。不能与RNA聚合酶结合，关闭转录，不能运用乳糖，所以将死亡。 （2）结构基因突变 大量增殖。O不能与阻遏因子结合，将持续表达，因此大量增殖。 （3）CAP位点基因突变 存活，增殖减弱。不能形成cAMP-CAP复合物，不能促进转录，但正常转录不受影响。

E·coliDNA连接酶是从大肠杆菌中获得的DNA 连接酶 只能连接粘性末端 而平末端则要交给T4DNA连接酶了 它可以连接粘性末端也可以连接平末端

必须是mRNA反转录的DNA或类似的DNA基因，必须与大肠杆菌启动子、RBS序列、SD序列、起始密码子正确拼接、应该还有大肠杆菌终止子。最后还要转入大肠杆菌中才可能正确表达。

筛选工业高产菌株一般从以下几个方面入手：1.筛选营养缺陷型菌株原理是解除了代谢途径中的协同反馈，这里选择酪氨酸营养缺陷型菌株，使得代谢支路受到阻遏，只要在培养基中加入少量酪氨酸，苯丙氨酸就可大量合成。2.筛选抗结构类似物突变株原理是解除阻遏或抗反馈抑制，对氟苯丙氨酸是苯丙氨酸的结构类似物,因此,对氟苯丙氨酸抗性菌株所产生的苯丙氨酸也不能与阻遏蛋白或变构酶结合,这样必然会在有苯丙氨酸存在的情况下,细胞仍然不断的合成苯丙氨酸,使其得到过量积累,这就是抗阻遏或抗反馈突变株。3.筛选温度敏感型突变株比如e.coli最适温度是37,突变后由于某酶结构改变，使得在37度下失活，等同于37度下的营养缺陷型，原理同第一条。

可以。大肠杆菌也是从一个复制起点开始双向复制，形成θ形

【答案】：尽管两个基因组都由独特序列的DNA组成，E.coli的基因组约大25倍，因而每条变性的E.coliDNA链复性得花费更长的时间来寻找其正确的互补链。

一、指代不同1、E.coliDNA连接酶：从大肠杆菌中获得的DNA连接酶。2、T4连接酶：一单链多肽，分子量为68,000道尔顿，它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。二、原理不同1、E.coliDNA连接酶：一条分子量为75KD的多肽链。对胰蛋白酶敏感，可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性，可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物，但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。2、T4连接酶：T4DNA连接酶与辅助因子ATP形成酶－AMP复合物。三、特点不同1、E.coliDNA连接酶：只连接具有相同黏性末端的DNA分子的基本骨架，即磷酸二酯键。只能连接具有互补配对粘性末端的双链，对平末端效果不佳。2、T4连接酶：分子生物学试验中主要采用T4DNA连接酶，因该酶在正常条件下，即能完成连接反应。T4 DNA 连接酶是一单链多肽，分子量为68,000道尔顿，它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。参考资料来源：百度百科-T4DNA连接酶参考资料来源：百度百科-DNA连接酶

如图.

1、作用不同E.coliDNA 连接酶是生物体内重要的酶，其所催化的反应在DNA 的复制和修复过程中起着重要的作用。T4-DNA连接酶即T4 DNA连接酶，可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5"-P末端和3"-OH末端之间以磷酸二酯键结合，该催化反应需ATP作为辅助因子。2、连接条件不同用DNA连接酶连接具有互补粘性末端的DNA片段；用T4DNA连接酶直接将平末端的DNA片段连接起来，或是用末端脱氧核苷酸转移酶给具平末端的DNA片段加上poly（dA）-poly（dT）尾巴之后，再用DNA连接酶将它们连接起来；先在DNA片段末端加上化学合成的衔接物或接头，使之形成粘性末端之后，再用DNA连接酶将它们连接起来。这三种方法虽然互有差异，但共同的一点都是利用DNA连接酶所具有的连接和封闭单链DNA的功能。扩展资料：粘性末端DNA片段的连接DNA连接酶最突出的特点是，它能够催化外源DNA和载体分子之间发生连接作用，形成重组的DNA分子。平末端DNA片段的连接常用的平末端DNA片段连接法，主要有同聚物加尾法、衔接物连接法及接头连接法。同聚物加尾法这种方法的核心部分是，利用末端脱氧核苷酸转移酶转移核苷酸的特殊功能。末端脱氧核苷酸转移酶是从动物组织中分离出来的一种异常的DNA聚合酶，它能够将核苷酸（通过脱氧核苷三磷酸前体）加到DNA分子单链延伸末端的3′-OH基团上。由核酸外切酶处理过的DNA，以及dATP和末端脱氧核苷酸转移酶组成的反应混合物中，DNA分子的3′-OH末端将会出现单纯由腺嘌呤核苷酸组成的DNA单链延伸。这样的延伸片段，称之为poly（dA）尾巴。反过来，如果在反应混合物中加入的是dTTP，那么DNA分子的3′-OH末端将会形成poly（dT）尾巴。因此任何两条DNA分子，只要分别获得poly（dA）和poly（dT）尾巴，就会彼此连接起来。这种连接DNA分子的方法叫做同聚物尾巴连接法（homopolymertail-joining），简称同聚物加尾法。衔接物连接法所谓衔接物（linker），是指用化学方法合成的一段由10～12个核苷酸组成、具有一个或数个限制酶识别位点的平末端的双链寡核苷酸短片段。衔接物的5′-末端和待克隆的DNA片段的5′-末端，用多核苷酸激酶处理使之磷酸化，然后再通过T4DNA连接酶的作用使两者连接起来。接着用适当的限制酶消化具衔接物的DNA分子和克隆载体分子，这样的结果使二者都产生出了彼此互补的粘性末端。于是我们便可以按照常规的粘性末端连接法，将待克隆的DNA片段同载体分子连接起来。DNA接头连接法DNA接头，是一类人工合成的一头具某种限制酶粘性末端另一头为平末端的特殊的双链寡核苷酸短片段。当它的平末端与平末端的外源DNA片段连接之后，便会使后者成为具粘性末端的新的DNA分子，而易于连接重组。实际使用时对DNA接头末端的化学结构进行必要的修饰与改造，可避免处在同一反应体系中的各个DNA接头分子的粘性末端之间发生彼此间的配对连接。参考资料来源：百度百科-DNA连接酶参考资料来源：百度百科-T4DNA连接酶参考资料来源：百度百科-T4-DNA连接酶

一、指代不同1、E.coliDNA连接酶：从大肠杆菌中获得的DNA连接酶。2、T4连接酶：一单链多肽，分子量为68,000道尔顿，它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。二、原理不同1、E.coliDNA连接酶：一条分子量为75KD的多肽链。对胰蛋白酶敏感，可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性，可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物，但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。2、T4连接酶：T4DNA连接酶与辅助因子ATP形成酶－AMP复合物。三、特点不同1、E.coliDNA连接酶：只连接具有相同黏性末端的DNA分子的基本骨架，即磷酸二酯键。只能连接具有互补配对粘性末端的双链，对平末端效果不佳。2、T4连接酶：分子生物学试验中主要采用T4DNA连接酶，因该酶在正常条件下，即能完成连接反应。T4 DNA 连接酶是一单链多肽，分子量为68,000道尔顿，它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。参考资料来源：百度百科-T4DNA连接酶参考资料来源：百度百科-DNA连接酶

1、作用不同E.coliDNA 连接酶是生物体内重要的酶，其所催化的反应在DNA 的复制和修复过程中起着重要的作用。T4-DNA连接酶即T4 DNA连接酶，可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5"-P末端和3"-OH末端之间以磷酸二酯键结合，该催化反应需ATP作为辅助因子。2、连接条件不同用DNA连接酶连接具有互补粘性末端的DNA片段；用T4DNA连接酶直接将平末端的DNA片段连接起来，或是用末端脱氧核苷酸转移酶给具平末端的DNA片段加上poly（dA）-poly（dT）尾巴之后，再用DNA连接酶将它们连接起来；先在DNA片段末端加上化学合成的衔接物或接头，使之形成粘性末端之后，再用DNA连接酶将它们连接起来。这三种方法虽然互有差异，但共同的一点都是利用DNA连接酶所具有的连接和封闭单链DNA的功能。扩展资料：粘性末端DNA片段的连接DNA连接酶最突出的特点是，它能够催化外源DNA和载体分子之间发生连接作用，形成重组的DNA分子。平末端DNA片段的连接常用的平末端DNA片段连接法，主要有同聚物加尾法、衔接物连接法及接头连接法。同聚物加尾法这种方法的核心部分是，利用末端脱氧核苷酸转移酶转移核苷酸的特殊功能。末端脱氧核苷酸转移酶是从动物组织中分离出来的一种异常的DNA聚合酶，它能够将核苷酸（通过脱氧核苷三磷酸前体）加到DNA分子单链延伸末端的3′-OH基团上。由核酸外切酶处理过的DNA，以及dATP和末端脱氧核苷酸转移酶组成的反应混合物中，DNA分子的3′-OH末端将会出现单纯由腺嘌呤核苷酸组成的DNA单链延伸。这样的延伸片段，称之为poly（dA）尾巴。反过来，如果在反应混合物中加入的是dTTP，那么DNA分子的3′-OH末端将会形成poly（dT）尾巴。因此任何两条DNA分子，只要分别获得poly（dA）和poly（dT）尾巴，就会彼此连接起来。这种连接DNA分子的方法叫做同聚物尾巴连接法（homopolymertail-joining），简称同聚物加尾法。衔接物连接法所谓衔接物（linker），是指用化学方法合成的一段由10～12个核苷酸组成、具有一个或数个限制酶识别位点的平末端的双链寡核苷酸短片段。衔接物的5′-末端和待克隆的DNA片段的5′-末端，用多核苷酸激酶处理使之磷酸化，然后再通过T4DNA连接酶的作用使两者连接起来。接着用适当的限制酶消化具衔接物的DNA分子和克隆载体分子，这样的结果使二者都产生出了彼此互补的粘性末端。于是我们便可以按照常规的粘性末端连接法，将待克隆的DNA片段同载体分子连接起来。DNA接头连接法DNA接头，是一类人工合成的一头具某种限制酶粘性末端另一头为平末端的特殊的双链寡核苷酸短片段。当它的平末端与平末端的外源DNA片段连接之后，便会使后者成为具粘性末端的新的DNA分子，而易于连接重组。实际使用时对DNA接头末端的化学结构进行必要的修饰与改造，可避免处在同一反应体系中的各个DNA接头分子的粘性末端之间发生彼此间的配对连接。参考资料来源：百度百科-DNA连接酶参考资料来源：百度百科-T4DNA连接酶参考资料来源：百度百科-T4-DNA连接酶

一、指代不同1、E.coliDNA连接酶：从大肠杆菌中获得的DNA连接酶。2、T4连接酶：一单链多肽，分子量为68,000道尔顿，它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。二、原理不同1、E.coliDNA连接酶：一条分子量为75KD的多肽链。对胰蛋白酶敏感，可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性，可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物，但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。2、T4连接酶：T4DNA连接酶与辅助因子ATP形成酶－AMP复合物。三、特点不同1、E.coliDNA连接酶：只连接具有相同黏性末端的DNA分子的基本骨架，即磷酸二酯键。只能连接具有互补配对粘性末端的双链，对平末端效果不佳。2、T4连接酶：分子生物学试验中主要采用T4DNA连接酶，因该酶在正常条件下，即能完成连接反应。T4 DNA 连接酶是一单链多肽，分子量为68,000道尔顿，它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。参考资料来源：百度百科-T4DNA连接酶参考资料来源：百度百科-DNA连接酶

可能是E.coli C600比较容易筛选吧，含有Rifampicin抗性。。。

大肠杆菌的的色氨酸合成系统操纵子，其从启动基因开始至转录衰减区附近所转录的信使RNA（mRNA），在细胞内色氨酸浓度高过一定程度时，则在该位置终止，但在色氨酸浓度低时，则通过该点进行mRNA的合成。在此操纵子中，最初的结构基因是从mRNA5′末端数第163个碱基开始的，而转录衰减区存在于稍前方，即约在第130个碱基附近。在此区域的前面，有产生由14个氨基酸所成的小肽的信息，其中有2个为色氨酸的遗传信号。所以当色氨酸缺乏时，此肽的合成在该位置迟滞以至完全停止，而妨碍参与肽合成核糖体向衰减区接近。反之当色氨酸浓度高时，则核糖体接近该区域，随之在mRNA上的衰减区（有回文结构）形成与转录终止相适应的二级结构，转录停止。在其它操纵子上也有同样的小肽的信息，例如组氨酸操纵子在16个氨基酸中有7个为组氨酸的遗传信号，而苯丙氨酸操纵子在15个中有7个为苯丙氨酸的遗传信号。这样氨基酸合成系统的操纵子，利用翻译机制来监测其操纵子所合成的氨基酸的浓度，即具有根据这浓度而确定mRNA是否继续合成的机制。

一、指代不同1、E.coliDNA连接酶：从大肠杆菌中获得的DNA连接酶。2、T4连接酶：一单链多肽，分子量为68,000道尔顿，它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。二、原理不同1、E.coliDNA连接酶：一条分子量为75KD的多肽链。对胰蛋白酶敏感，可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性，可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物，但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。2、T4连接酶：T4DNA连接酶与辅助因子ATP形成酶－AMP复合物。三、特点不同1、E.coliDNA连接酶：只连接具有相同黏性末端的DNA分子的基本骨架，即磷酸二酯键。只能连接具有互补配对粘性末端的双链，对平末端效果不佳。2、T4连接酶：分子生物学试验中主要采用T4DNA连接酶，因该酶在正常条件下，即能完成连接反应。T4 DNA 连接酶是一单链多肽，分子量为68,000道尔顿，它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。参考资料来源：百度百科-T4DNA连接酶参考资料来源：百度百科-DNA连接酶

?这两个一培养不就看出来了么，菌落不一样。革兰氏染色，大肠杆菌红色，金黄葡萄球菌紫色看看形态也不一样的，大肠杆菌，金黄葡萄球菌

培养什么菌的？ 一般比如大肠杆菌有M9培养基，酵母有合成培养基

（1）操纵子基因突变 死亡。不能与RNA聚合酶结合，关闭转录，不能运用乳糖，所以将死亡。 （2）结构基因突变 大量增殖。O不能与阻遏因子结合，将持续表达，因此大量增殖。 （3）CAP位点基因突变 存活，增殖减弱。

蛋白质的合成过程在蛋白质合成过程中，mRNA从5′→3′阅读，而肽链从N-端向C-端合成。（一）氨基酸的活化氨基酸在氨酰-tRNA合成酶的作用下，活化成氨酰-tRNA(氨基酸以高能酯键与tRNA的3′-末端腺苷酸的2′或3′的羟基相连的)。AA + tRNA + ATP---AA～tRNA + AMP + PPi氨酰-tRNA合成酶有氨基酸和tRNA两种底物的专一性结合位点。每一种tRNA只专一携带一种氨基酸，而一种氨基酸可分别被几种tRNA专一携带(因为有密码子简并现象)。氨基酸一旦与tRNA结合成AA- tRNA，进一步的去向就由tRNA来决定。tRNA凭借自身的反密码子与mRNA上的密码子相识别，而把所携带的氨基酸定位在肽链的一定位置上。 各种氨酰-tRNA都具备后，就可以进行蛋白质的合成 （二）多肽链的起始合成参与起始的成分：IF1，IF2，IF3，核糖体的小、大亚基，mRNA，fMet-tRNAf，GTP。起始过程：1、IF1，IF3，30S小亚基，mRNA结合并定位；2、GTP，IF2，fMet-tRNAf加入，形成30S起始复合物；3、IF1，IF2，IF3，GDP，Pi释放，50S大亚基加入，形成70S起始复合物。 至此，起始过程完成，fMet-tRNA位于核糖体上的P位点（给位，即肽酰-tRNA结合位点），而A位点（受位，即氨酰-tRNA结合位点）空着，用于接受下一个AA-tRNA。（三）肽链的延伸此阶段包括氨酰tRNA进入核糖体A位点（进入）、肽键的形成（转肽）和核糖体在mRNA上移位（移位）三个步骤。这三步每重复一次，肽链上就增加一个氨基酸，直到mRNA上的终止密码出现在核糖体的A位时为止。1、进入开始延伸过程时，fMet-tRNAf位于核糖体上的P位点，而一个能与AUG后的密码子互补AA-tRNA进入A位点。具体过程：1、AA-tRNA与EF-Tu-GTP结合生成复合物Tu-GTP-AA-tRNA；2、复合物进入A位，GTP水解，EF-Tu-GDP从核糖体上释放， AA-tRNA留在A位；3、在EF-Ts帮助下，EF-Tu-GDP重新形成EF-Tu-GTP，以便于下一轮反应。2、转肽AA-tRNA的游离氨基与fMet的羧基形成肽键，此过程在肽酰转移酶催化下进行。反应后fMet转移到A位点，形成fMet-AA-tRNA，而P位点留下一空载的tRNAf3、移位在延伸因子EF-G（又称移位酶）帮助下，核糖体在mRNA上移动一个密码子的距离，结果使A位点的fMet-AA-tRNA移到P位，P位的tRNAf移出了核糖体，而A位点空出，以便于接受下一分子AA-tRNA。这样，一轮反应结束，肽链延长了一个氨基酸单位。紧接着进行下一轮延伸，直至肽链合成终止。（四）肽链合成的终止和释放肽链的合成过程同时也是核糖体沿mRNA 5′→3′方向移动，并翻译mRNA上密码子的过程。当核糖体移到终止密码子时，没有对应终止密码的氨酰-tRNA可以进入A位，终止因子进入A位，肽链合成停止。有三种终止因子(RF1、RF2、 RF3)参与终止步骤：RF1：识别终止密码UAA、UAG ；RF2：识别UAA、UGA；RF3：促进RF1、RF2的识别 。、RF2结合到核糖体后，使肽酰转移酶构象转变，表现出水解酶活力，催化肽酰基与tRNA的酯键水解，合成的肽链便从核糖体上释放下来。空载的tRNA接着从核糖体上脱落，核糖体便解离成50S和30S两个亚基离开mRNA，一条多肽链的合成便告结束。四、肽链合成后的加工肽链合成后多数还要经过加工处理，才能变为有生物活性的蛋白质分子，这个过程称为翻译后加工作用，内容包括：1、剪切由氨肽酶将N-端fMet（Met）以及多余氨基酸的切除。2、剪接将蛋白质分子内多余的片段切除3、氨基酸的修饰修饰方式多种多样，如：磷酸化、羟基化、糖基化、甲基化、乙酰化等等。4、二硫键的形成在专一性的氧化酶催化下，特定的Cys-SH之间连接形成二硫键。5、与辅基或辅酶结合对于结合蛋白质，与辅基或辅酶结合后才表现出活性。6、形成特定的构象，亚基间的聚合 我现在正在学生物化学，这个是生物化学上的蛋白质的合成步骤。比较专业化，希望能对你有所帮助。

E.coli Electro-Cells E.coli Electro-Cell JM109 制品名 TaKaRa Code 包装量 价格(人民币元) E.coli Electro-Cell JM109 D9022 1 Set (50 μl×10支) 300 ■ GenotypeE.coli JM109recA1, endA1, gyrA96, thi-1, hsdR17, supE44, relA1, Δ(lac-proAB)/F"[traD36, proAB+, lac Iq, lacZ ΔM15]■ 细胞浓度1～2×1010 Bacteria/ml ■ 保存-80℃■制品说明用高电压脉冲电流瞬间击穿大肠杆菌，从而导致DNA转入大肠杆菌内的转化方法称为电穿孔法。电穿孔法是各种转化方法中效率最佳的方法之一，比Ca2+处理的感受态细胞的转化效率高，在转化少量DNA时，特别能发挥其特有的威力。TaKaRa使用独自开发的菌体培养法，制作出了效果极佳的E.coli Electro-Cell JM109。 ■细胞种类α-互补性选择宿主E.coli JM109E.coli JM109在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时, 由于载体DNA产生的LacZα多肽和JM109 F"编码的lacZΔM15的结合，显示β-半乳糖苷酶活性 (α-互补性)。利用这一特性，可以很容易鉴别重组体菌株。因为具有F"质粒，除可用于制作基因库、进行亚克隆等之外，也可作为M13载体DNA的宿主，调制单链DNA。■质量标准 使用10 pg的质粒DNA进行转化时：50 μl E.coli JM109 Electro-Cell/10 pg pUC19 plasmid转化时产生的菌落数>1×109 transformants/1 μg pUC19 plasmid F"质粒的稳定性检测对E.coli JM109使用pUC19 DNA进行电穿孔法转化后，在含有100 μg/ml的Ampicillin、0.2 mM的IPTG, 40 μg/ml的X-Gal的L-琼脂平板培养基上，产生的白色菌落在1%以下。 50 μl的E.coli JM109 Electro-Cell在含有100 μg/ml的Ampicillin L-琼脂平板培养基上不产生菌落。 --------------------------------BL21（DE3）pLysS细菌菌株 BL21（DE3）pLysS细菌菌株可以表达T7控制并核糖体结合位点的高效蛋白表达。BL21（DE3）pLysS对λDE3（1）是溶源性的。λDE3含有T7噬菌体基因I，编码的T7 RNA聚合酶受lac UV5启动子的控制。BL21（DE3）pLysS含有pLysS质粒，他携带编码T7溶菌酶基因。在T7启动子控制下，T7溶菌酶降低靶基因的背景表达但并不干扰由IPTG诱导的表达水平。包装： P9811 500μlhttp://www.promega.com/tbs/tb095/tb095.pdf

（1）操纵子基因突变 死亡。不能与RNA聚合酶结合，关闭转录，不能运用乳糖，所以将死亡。 （2）结构基因突变 大量增殖。O不能与阻遏因子结合，将持续表达，因此大量增殖。 （3）CAP位点基因突变 存活，增殖减弱。不能形成cAMP-CAP复合物，不能促进转录，但正常转录不受影响。

大肠杆菌乳糖操作子。

肠杆菌科细菌

DNA解旋酶，DNA聚合酶

DNA连接酶的种类有很多，用的较多的是E·coliDNA连接酶和T4DNA 连接酶。从大肠杆菌中获得的DNA连接酶只能连接具有互补配对粘性末端的双链，对平末端效果不佳，T4DNA连接酶具有较好的平末端双链连接的作用。 E·coliDNA连接酶所有从大肠杆菌中获得的DNA 连接酶的称。酶的命名是有规律的。所以不能笼统的根据来源叫。

还有抗性筛选位点，比如氨苄Amp、卡那霉素Kana等等……

popular的比较级是：more popular，最高级是：most popular。在英语中多音节词汇，比较级和最高级变化规则为：在形容词或副词前加more表示比较级，在形容词或副词前加most表示最高级，因为popular是多音节形容词，所以它的比较级就是在它前面加more。用法popular是形容词，意思是受大众喜爱的，受欢迎的；普遍的；通俗的。例句有：The restaurant is deservedly popular.这餐馆为大众喜爱是理所当然的。Gardening is very popular in Maryland.园艺在马里兰州很受欢迎。短语有：most popular最受欢迎；popular with受…欢迎；popular among受…欢迎popular culture通俗文化；popular science大众科学

17亿人民币。统计数据显示，第一部《阿凡达》在中国影视圈内累计票房破27.98亿，除去耗费的人力、物力等，总计获得了17亿人民币票房收益。该影片是由二十世纪福克斯电影公司出品，于2009年12月16日在北美上映，2010年1月4日在中国部分地区上映，是一部科幻电影。

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小龙虾作为入侵物种之一，即使它得长相不容乐观，依旧逃脱不了成为我们食物的结局，经过烹饪、油炸、煸炒等方式，小龙虾已经成为了一道被大众喜爱的美味，那么你在吃小龙虾的过程是不是有“唆”一下虾头的习惯呢？虾头里面都有什么很多人说虾头包含了很多的有害物质，不能吃，只能吃虾尾，“唆”虾头那一下，就可能吃了很多有害物质，但是吃货告诉你，那是不可多得的美食。虾头到底能不能吃，虾头里面是否含有有害物质呢？很多人都不清楚，不过经过相关生物学家的解剖和研究已经证实，其是虾头确实是能吃的，但是它里面含有有害物质也是真的，因为龙虾除了虾尾，其余的重要器官都是藏在虾脑之中。虾头中包括了虾脑、心脏、胃以及消化腺，特别是胃和消化腺残留这很多有害物质，吃多了确实会对身体产生不好的影响，甚至于“哈夫病”（HAFF）。哈夫病又叫做“横纹肌溶解症”，一旦患上这种病，病人身上的骨骼肌和心肌会被病毒破坏，从而导致严重的代谢紊乱严重的甚至会已发急性肾衰竭。到底“唆”不“唆”如果我们只是“唆”一下虾头，只吃虾头中黄色的膏（虾的卵巢），这是不会对身体产生不好的影响，而作为一只虾最美味的地方，很多吃货虽然不大清楚其是否有害，但依旧挡不住诱惑去尝试，并且热衷于“唆”那一下。不过很多人在吃小龙虾的时候，都不去掉虾线，因为太过于麻烦，但是虾线是除了虾头最脏的地方，不仅不健康，更是会影响口感，所以在吃小龙虾的时候，建议是耐心的处理下虾线，这样不仅健康，更不会破会小龙虾的口感。

无纺布(英文名:NonWovenFabric或者Nonwovencloth)又称不织布，是由定向的或随机的纤维而构成，是新一代环保材料，因具有布的外观和某些性能而称其为布。 无纺布的缺点是： （1）与纺织布相比强度和耐久性较差。 （2）不能像其他布料一样清洗。 （3）纤维按一定方向排列，所以容易从直角方向裂开。

小黄人是3D动画电影《卑鄙的我》中主角格鲁（Gru）使用变种DNA、脂肪酸加香蕉泥做成的机器人。这些小黄人数量众多，拥有自己的语言，短胳膊短腿走起路来非常可爱，他们看似做事不专心但工作能力极强，听令于格鲁但却拥有自己的思想。小黄人拥有极其丰富的表演能力，并且几乎什么都能笑。其中的代表有Stuart、Phil、Kevin、Bob、Dave、Jerry、Jorge、Tim、Mark，虽然每个小黄人都有自己的名字，但统称做Minions。望采纳

加p成为一个单词park公园

which关系代词定语句做所引导句主语宾语显shakespearewasborn主谓宾都完整句缺少where(代表in+点)状语原shakespearewasborninthishousewhere由inwhich词组代替词性变isinthishousewhich……种题目关键看句完整缺(主语、宾语及状语等等)懂

这里的lacking是形容词，而不是动词lack的现在分词，所以有lacking in这个搭配～

《阿凡达2》原版和英文版的区别在于语言的不同，但剧情是一样的。英语版本是由20世纪福克斯制作的，原版是印度语版本，阿凡达2英语版改编了20世纪福克斯公司的英语对白，由于语言不同，对白部分也有所不同，大部分剧情和内容完全一致。《阿凡达2》讲述故事发生十多年后，曾经的截瘫的前海军士兵杰克萨利永久变身为拥有地球人基因和纳威人基因的“阿凡达”，并与奥马蒂卡亚部落的族长之女妮特丽结为夫妇，杰克已经完全适应了他的新身体和族长的身份。并和奈蒂莉有了三个孩子，还收养了格蕾丝留下的女儿琪莉，四个孩子里，老大纳特亚姆最为懂事听话，也很会照顾弟弟妹妹，老二琪莉因为不知道自己的父亲是谁，有些敏感，老三洛克酷爱冒险，是家里的闯祸精。最小的妹妹图克总是黏着哥哥姐姐们，四人跟人类留下的孤儿蜘蛛是形影不离的好朋友，原本，将地球人赶走后，杰克一家与族人过上了田园牧歌般的生活，然而，原本死去的迈尔斯夸里奇上校化身阿凡达重新归来，一心要找杰克和奈蒂莉复仇。为了族人的安危，也为了保护孩子，杰克决定带着家人离开，前往不易被找到的由罗娜尔和特诺瓦里领导的海洋部落，展开全新的生活。电影是什么：电影，也被称为运动画面或动态画面，即映画，是作品视觉艺术形式，通过使用移动图像来表达沟通思想，故事，认知，情感，价值观，或各类大气模拟体验，这些图像通常伴随着声音，很少有其他感官刺激。电影一词是电影摄影的缩写，通常用于指代电影制作和电影业，以及由此产生的艺术形式，膜的运动图像被用创建拍摄具有实际场景运动画面相机，通过拍摄使用传统的图纸或微缩模型动画技术，借助于CGI和计算机动画。传统上，电影通过光化学过程记录在赛璐珞胶片上，然后通过电影放映机放映到大屏幕上，当代电影在制作，发行和展览的整个过程中通常是完全数字化的，而以光化学形式录制的电影传统上包括类似的光学配乐。

苹果手机浙政钉第二次下载：浏览器搜索“浙政钉”点击下载即可。1、打开苹果自带的浏览器。2、搜索“浙政钉”，点击“前往”。3、点击图中第一个搜索结果。4、点击“下载iPhone版”。5、输入信息验证身份后，即可下载。浙政钉浙政钉2.0苹果版是一款专门为广大浙江地区政府公务员打造的内部办公软件。平台覆盖省内所有政府单位，拥有极其全面的即时通讯、协作办公、资料查询等功能，创新、开放且安全。支持pc、手机端同步操作，让广大地区公务员办公效率得到质的提升。按单位、职级、业务条线、人员类型，可快速搭建专属通讯录，提供按政务用户习惯直接搜索单位和用户信息，实现高效找人、快速建群。建设“浙政钉”开放平台，统筹通讯录、安全服务、标准规范，整合手写签批、电子签章、天地图、视联网等平台能力，谋划建设场景化的多业务协同应用。建设客户端安全、接入安全、链路安全、应用及数据安全等全链路的安全防护能力和全链路安全能力架构，对密码体系、工作文档和工作信息的转发、下载等泄密行为进行动态监测管理。

中文名称：明天我要嫁给你了所属专辑：花心歌曲原唱：周华健填词：周华健编曲：johnlee歌词：秒针分针滴答滴答在心中我的眼光闪烁闪烁好空洞我的心跳扑通扑通地阵阵悸动我问自己要你爱你有多浓我要和你双宿双飞多冲动我的内心忽上忽下地阵阵悸动明天我要嫁给你啦明天我要嫁给你啦要不是每天的交通烦扰着我所有的梦明天我要嫁给你啦明天我要嫁给你啦要不是你问我要不是你劝我要不是适当的时候你让我心动秒针分针滴答滴答在心中我的眼光闪烁闪烁好空洞我的心跳扑通扑通地阵阵悸动我问自己要你爱你有多浓我要和你双宿双飞多冲动我的内心忽上忽下地阵阵悸动明天我要嫁给你啦明天我要嫁给你啦要不是停电的一夜才发现我寂寞空洞明天我要嫁给你啦明天我要嫁给你啦要不是你问我要不是你劝我要不是适当的时候你让我心动明天我要嫁给你啦明天我要嫁给你啦要不是每天的交通烦扰着我所有的梦明天我要嫁给你啦明天终于嫁给你啦要不是你问我要不是你劝我可是我就在这时候害怕惶恐

第一集出现的。小黄人中纳米枪在第一集中被用来缩小月球的，所以是第一集。小黄人（Minions），出自美国动画电影《神偷奶爸》及其衍生相关作品中的角色。在《神偷奶爸》系列设定中是格鲁和尼法里奥博士用两杯香蕉泥、变种DNA和脂肪酸组成的胶囊状生物，而在小黄人的自传片《小黄人大眼萌》中，小黄人是亿万年前单细胞进化的生物，小黄人的历史至少可追溯到恐龙时期。小黄人的语言通常为各种语言的混杂。小黄人的现任主人是格鲁和纳瓦利欧，他们主要为纳瓦利欧建造工程、充当格鲁的试验品，或者格鲁三个可爱的女儿表演没人看时，数量庞大的小黄人可以充当观众。

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问题一：什么是无纺布 无纺布的确切名称应是非织造布，或叫不织布。因为它是一种不需要纺纱织布而形成的织物，只是将纺织短纤维或者长丝进行定向或随机排列，形成纤网结构，然后采用机械、热粘或化学等方法加固而成。非织造布突破了传统的纺织原理，并具有工艺流程短、生产速度快，产量高、成本低、用途广、原料来源多等特点。 无纺布优缺点： 无纺布有很多优点：1）通气性 2）过滤性 3）保温性 4）吸水性 5）防水性 6）伸缩性 7）不蓬乱 8）手感好、柔软 9）轻盈 10）有弹性、可复原11）没有布料的方向性 12）与纺织布相比生产性高、生产速度快 13）价格低、可大量生产 等等。 缺点是：1）与纺织布相比强度和耐久性较差 2）不能象其他布料一样清洗 3）纤维按一定方向排列、所以容易从直角方向裂开 等等。因此最近生产方法的改善主要放在防止分裂的改良上。 它的主用途大致可分为： (1) 医疗、卫生用无纺布：手术衣、防护服、消毒包布、口罩、尿片、民用抹布、擦拭布、湿面巾、魔术毛巾、柔巾卷、美容用品、卫生巾、卫生护垫、及一次性卫生用布等； (2)家庭装饰用无纺布：地毯、贴墙布、台布、床单、床罩、窗帘、百洁布、拖把等； (3)服装用无纺布：衬里、粘合衬、絮片、定型棉、各种合成革基布等； (4)工业用无纺布；汽车顶蓬布、过滤材料、绝缘材料、水泥包装袋、土工布、包覆布等； (5)农业用无纺布：作物保护布、育秧布、灌溉布、保温幕帘等 ⑹军事用无纺布: 高性能纤维防弹衣、擦枪布、军用地图基布等 ⑺其它无纺布：太空棉、保温隔音材料、吸油毡、烟过滤嘴、袋包茶袋、彩旗等 无纺布的分类 一、 水刺无纺布 水刺工艺是将高压微细水流喷射到一层或多层纤维网上，使纤维相互缠结在一起，从而使纤网得以加固而具备一定强力。 二、热合无纺布 热粘合无纺布是指在纤网中加入纤维状或粉状热熔粘合加固材料，纤网再经过加热熔融冷却加固成布。 三、浆粕气流成网无纺布 气流成网无纺布又可称做无尘纸、干法造纸无纺布。它是采用气流成网技术将木浆纤维板开松成单纤维状态，然后用气流方法使纤维凝集在成网帘上，纤网再加固成布。 四、湿法无纺布 湿法无纺布是将置于水介质中的纤维原料开松成单纤维，同时使不同纤维原料混合，制成纤维悬浮浆，悬浮浆输送到成网机构，纤维在湿态下成网再加固成布。 五、纺粘无纺布 纺粘无纺布是在聚合物已被挤出、拉伸而形成连续长丝后，长丝铺设成网，纤网再经过自身粘合、热粘合、化学粘合或机械加固方法，使纤网变成无纺布。 六、熔喷无纺布 熔喷无纺布的工艺过程：聚合物喂入---熔融挤出---纤维形成---纤维冷却---成网---加固成布。 七、针刺无纺布 针刺无纺布是干法无纺布的一种，针刺无纺布是利用刺针的穿刺作用，将蓬松的纤网加固成布。 八、缝编无纺布 缝编无纺布是干法无纺布的一种，缝编法是利用经编线圈结构对纤网、纱线层、非纺织材料（例如塑料薄片、塑料薄金属箔等）或它们的组合体进行加固，以制成无纺布。 三、无纺布影响增长率的因素-- 所有影响人造纤维增长的因素都可或多或少地对以人造纤维为原料的纺织品造成一定的影响，其中对无纺布纺织品影响最大。 人口增长因素对无纺布影响较其他用于服饰类的纺织品要小。但如果考虑到无纺布在婴儿纸尿裤中的重要应用，则人口增长也是一个重要的影响因素。 天然纤维部分被取代对纺织品影响较大，但对无纺布影响不大，因为无纺布的生产基本上依赖于人造纤维。 ......>> 问题二：无纺布是什么材质 最常用的无纺布（non-woven fabric，non-woven cloth，不织布，非织造布）材料： 厚型的为聚酯（polyester，PET，涤纶）纤维无纺布；薄型的为聚丙烯（polypropylene，PP，丙纶）纤维无纺布。两种材质可以复合成复合纤维无纺布。 【以上答案非网络抄袭】 问题三：无纺布是什么材料 无纺布（英文名：Non Woven Fabric 或者 Nonwoven cloth）又称不织布，是由定向的或随机的纤维而构成，是新一代环保材料，具有防潮、透气、柔韧、质轻、不助燃、容易分解、无毒无 *** 性、色彩丰富、价格低廉、可循环再用等特点。如多采用聚丙烯（pp材质）粒料为原料，经高温熔融、喷丝、铺纲、热压卷取连续一步法生产而成。因具有布的外观和某些性能而称其为布。 女性用品一般用的是这种材料 问题四：无纺布是什么材料做的 无纺布袋无纺布袋的材料： 无纺布袋的主要材料是无纺布。无纺布是一种非织造布，它直接利用高聚物切片、短纤维或长丝通过各种纤网成形方法和固结技术形成的具有柔软、透气和平面结构的新型纤维制品。其具有工艺流程短、产量高、成本低、品种变化快、原料来源广泛等特点. 无纺布袋的优点：无纺布袋价廉物美，环保实用，应用广泛，有突出的广告位置，适用于各类业务活动及展览展销会，是企事业单位理想的广告促销礼品赠品. 无纺布袋分类 无纺布袋根据生产工艺的不同可以分为： 1、水刺无纺布袋：是将高压微细水流喷射到一层或多层纤维网上，使纤维相互缠结在一起，从而使纤网得以加固而具备一定强力。 2、热合无纺布袋：是指在纤网中加入纤维状或粉状热熔粘合加固材料，纤网再经过加热熔融冷却加固成布。 3、浆粕气流成网无纺布袋：又可称做无尘纸、干法造纸无纺布。它是采用气流成网技术将木浆纤维板开松成单纤维状态，然后用气流方法使纤维凝集在成网帘上，纤网再加固成布。 4、湿法无纺布袋：是将置于水介质中的纤维原料开松成单纤维，同时使不同纤维原料混合，制成纤维悬浮浆，悬浮浆输送到成网机构，纤维在湿态下成网再加固成布。 5、纺粘无纺布袋：是在聚合物已被挤出、拉伸而形成连续长丝后，长丝铺设成网，纤网再经过自身粘合、热粘合、化学粘合或机械加固方法，使纤网变成无纺布。 6、熔喷无纺布袋： 其工艺过程：聚合物喂入---熔融挤出---纤维形成---纤维冷却---成网---加固成布。 7、针刺无纺布袋：是干法无纺布的一种，针刺无纺布是利用刺针的穿刺作用，将蓬松的纤网加固成布。 8、缝编无纺布袋：是干法无纺布的一种，缝编法是利用经编线圈结构对纤网、纱线层、非纺织材料（例如塑料薄片、塑料薄金属箔等）或它们的组合体进行加固，以制成无纺布。 问题五：什么叫无纺面料？ 无纺布没有经纬线，剪裁和缝纫都非常方便，而且质轻容易定型，深受手工爱好者的喜爱。 因为它是一种不需要纺纱织布而形成的织物，只是将纺织短纤维或者长丝进行定向或随机排列，形成纤网结构，然后采用机械、热粘或化学等方法加固而成。 它不是由一根一根的纱线交织、编结在一起的，而是将纤维直接通过物理的方法粘合在一起的，所以，当你拿到你衣服里的粘称时，就会发现，是抽不出一根根的线头的。非织造布突破了传统的纺织原理，并具有工艺流程短、生产速率快，产量高、成本低、用途广、原料来源多等[1]特点。 问题六：什么是无纺布，和白棉布有什么区别？ 无纺布又称不织布，是由定向的或随机的纤维而构成，是新一代环保材料，具有防潮、透气、柔韧、质轻、不助燃、容易分解、无毒无 *** 性、色彩丰富、价格低廉、可循环再用等特点。如多采用聚丙烯（pp材质）粒料为原料，经高温熔融、喷丝、铺纲、热压卷取连续一步法生产而成。因具有布的外观和某些性能而称其为布。 棉布多用来制作时装、休闲装、内衣和衬衫。它的优点是轻松保暖，柔和贴身、吸湿性、透气性甚佳。它的缺点则是易缩、易皱，外观上不大挺括美观，在穿著时必须时常熨烫。参考：细棉布、印染棉布、松江棉布、高昌棉布、北朝棉布。 问题七：帆布和无纺布的区别是什么 材料的区别你可以在家里找帆布鞋和环保袋对比，就知道区别了！ 第一，材料不同 帆布材料为棉或者麻，无纺布材料是聚丙烯 第二，组织方式不同 帆布一般是平纹组织，较少用斜纹组织；无纺布也叫不织布，原理跟造纸差不多，说白了就是用聚丙烯这种聚合高分子材料造出来的纸性布。 问题八：尼龙布和无纺布有什么区别 尼龙布是用尼龙材料做成的布，指的是制造布的材料。 无纺布指的是制造布的工艺过程。 一般的纺织布料的生产过程是先用纤维（有天然纤维如棉、麻等和合成短纤维如尼龙、 聚酯等之分）纺丝，纺出的丝再织成布。 而无纺布的生产过程是：将纤维（不管是天然纤维还是合成纤维都一样）切成小段， 然后不经过纺丝的过程，将纤维碎段铺成片状，经压紧密实、增强等过程，形成布。 因此，尼龙布有纺织面料（一般称锦纶）也有尼龙无纺布， 而无纺布也有天然材料的棉麻无纺布和合成纤维无纺布之分。

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区别如下：《方舟：生存进化（Ark: Survival Evolved）》是一款开放世界的以恐龙为主题的游戏，游戏采用虚幻4引擎打造，画面出彩，题材独特。（ARK：Survival Of The Fittest）游戏最早是方舟里面的一个大逃杀MOD，后来独立出来做成了ARK：Survival Of The Fittest。独立工作室Wildcard旗下由虚幻引擎4（Unreal Engine 4）打造的生存类开放世界游戏，由蜗牛代理的方舟生存进化online已于2017年1月1日上线。游戏故事主要讲述，一群人醒来便出现在神秘海滩，为了生存而探索远古开放世界，玩家需要通过合作/竞技来获取生活必需品。人类需要打猎、收获、研究技术，甚至要根据动态天气变化（酷热白昼、冰冷夜晚）搭建住处，而危险的远古动物会随机出现威胁人类生存。

the house is big enough for us to live这房子大得足以让我们住

流行

《阿凡达》电影系列共有**五部**，分别是：《阿凡达》、《阿凡达2:水之道》、《阿凡达3:带种者》、《阿凡达4:祖古骑士》、《阿凡达5:追寻伊娃》。

“in the US”做了“infrastructure”的介短后置定语，同时“of the infrastructure in the US”又一起做了history的介短后置定语。第二句解析不说，可能因为和第一句一样，编者认为不必再说了吧