cr

你的问题我都没有搞清楚，你是要从质粒上扩一小段序列出来，还是通过PCR扩增出完整的质粒并在其中引入点突变？

sncr最佳反应温度在850-920之间，炉温低，反映效率就会低，增大氨水消耗量，脱硝效果明显差！

90℃左右，但是温度超过92℃的时候，双氧水会分解成为氧气和水，而氧气是没有氧化作用的，温度越高，氧化作用越明显，脱硝效率越高。因为，双氧水氧化的作用主要在于氢氧基·OH，脱硝效率反而下降。所以，温度升高时，双氧水分解产生的·OH也较多，所以初期

一般加装1-2支喷枪补氨，逃逸的氨不够。如果成本允许，最好将氨水气化，通过喷氨格栅来喷射，不过这样设备成本就增加很多了。

设计时SNCR的氨氮比为1.5，SCR的氨氮比0.8-0.9具体用量都需要需要在调试时确定。

1）投入前应对各喷qiang做雾化试验，避免溶液雾化不良引起氨逃逸率增加；2）投入后应检查各喷qiang流量分配是否均匀，压缩空气压力是否正常；3）脱硝系统运行中应加强巡视，发现喷qiang流量异常时及时检查分析；4）喷qiang停运时应进行彻底冲洗，避免管路尿素溶液沉积发生结晶堵塞。

脱硝声波清灰器设备，主要用于清除SCR反应器进出口及催化剂表面或内部钢构件表面积灰的清除，延长SCR中催化剂活性和使用寿命，同时降低系统中压力阻力，清除飞灰过分波动对后续除尘器的影响，并可减少每年用于维修的人力及材料费用，缩短生产停工周期，以及延长两次检修之间的运行时间。

很多做水冷壁表面喷涂的能缓解腐蚀。

明显选择A

由脱硝效率可知升高温度平衡逆向移动，所以该反应的正反应是放热反应

A．如仅考虑脱硝效率越高，升高温度，脱硝效率先增大后减小，说明升高温度平衡向逆向移动，正反应放热，但如从氨气的浓度变化的角度考虑，升高温度氨气的浓度降低，说明反应向正向移动，则正反应为吸热反应，二者矛盾，不能说明正反应为放热反应，故A错误；B．从图2判断，增大氨气的浓度有助于提高NO的转化率，故B错误；C．从图1判断，脱硝的最佳温度约为925℃，此时脱硝效率最大，故C正确；D．从图2判断，综合考虑脱硝效率和运行成本最佳氨氮摩尔比应为2.0，2.0～2.5时脱硝效率变化不大，故D错误．故选C．

scr烟气脱硝原理公式没有四个吧，在催化剂的作用下，scr技术的主要化学反应为：2no2+4nh3+o2→3n2+6h2o；4no+4nh3+o2→4n2+6h2o。由于燃煤中含有硫的原因，同时也会产生一些负反应：so2+1/2o2→so3；so3+h2o→h2so4；nh3+so3+h2o→nh4hso4（so3过量情况下）；2nh3+so3+h2o→（nh4）2so4（nh3过量情况下）后者容易造成催化剂中毒、沉积腐蚀设备、降低催化效力等副作用。影响烟气脱硝效率的因素很多，主要有：1、反应器和烟气流场设计是否合理；2、喷氨装置和混合器设计是否合理；3、催化剂选择及立体布置是否合理；4、还原剂量是否合理，过多过少均不利于还原反应；5、反应器入口温度，根据煤质不同，应在300到400之间，这个温度对催化剂性能最有利；6、辅助设备如吹灰器等运行情况。

简单说就是让烟气中的氮氧化物和氨水反映生成水和氮气！中间必须达到反映温度！不用加其他催化剂！

非选择性还原脱硝。是在900到1100℃的温区，没有催化剂的作用，喷入氨，氨均匀分布于烟气中，氨会迅速与氮氧化物反应，实现脱硝。但一般脱硝效率不会超过75%，氨逃逸浓度相对较高。

　　更多了解····莱特.莱德···根据水泥窑氮氧化物的形成机理，水泥窑降氮减排的技术措施有两大类：一类是从源头上治理。控制煅烧中生成NOx。其技术措施：①采用低氮燃烧器;②分解炉和管道内的分段燃烧，控制燃烧温度;③改变配料方案，采用矿化剂，降低熟料烧成温度。另一类是从末端治理。控制烟气中排放的NOx，其技术措施：①“分级燃烧+SNCR”，国内已有试点;②选择性非催化还原法(SNCR)，国内已有试点;③选择性催化还原法(SCR)，欧洲只有三条线实验;③SNCR/SCR联合脱硝技术，国内水泥脱硝还没有成功经验;④生物脱硝技术(正处于研发阶段)。总之，国内开展水泥脱硝，尚属探索示范阶段，还未进行科学总结。各种设计工艺技术路线和装备设施是否科学合理、运行可靠的脱硝效率、运行成本、水泥能耗、二次污染物排放有多少等都将经受实践的检验。　　选择性非催化还原技术(SNCR)选择性非催化还原法是一种不使用催化剂，在 850～1100℃温度范围内还原NOx的方法。最常使用的药品为氨和尿素。　　一般来说，SNCR脱硝效率对大型燃煤机组可达 25%～40% ,对小型机组可达 80%。由于该法受锅炉结构尺寸影响很大，多用作低氮燃烧技术的补充处理手段。其工程造价低、布置简易、占地面积小，适合老厂改造，新厂可以根据锅炉设计配合使用。　　选择性催化还原技术(SCR)SCR 是目前最成熟的烟气脱硝技术, 它是一种炉后脱硝方法, 最早由日本于 20 世纪 60~70 年代后期完成商业运行, 是利用还原剂(NH3, 尿素)在金属催化剂作用下, 选择性地与 NOx 反应生成 N2 和H2O, 而不是被 O2 氧化, 故称为“ 选择性” 。世界上流行的 SCR工艺主要分为氨法SCR和尿素法 SCR 2种。此 2种方法都是利用氨对NOx的还原功能 ,在催化剂的作用下将 NOx (主要是NO)还原为对大气没有多少影响的 N2和水 ,还原剂为 NH3。在SCR中使用的催化剂大多以TiO2为载体，以V2O5或V2 O5 -WO3或V2O5-MoO3为活性成分，制成蜂窝式、板式或波纹式三种类型。应用于烟气脱硝中的SCR催化剂可分为高温催化剂(345℃～590℃)、中温催化剂(260℃～380℃)和低温催化剂(80℃～300℃)， 不同的催化剂适宜的反应温度不同。如果反应温度偏低，催化剂的活性会降低，导致脱硝效率下降，且如果催化剂持续在低温下运行会使催化剂发生永久性损坏;如果反应温度过高，NH3容易被氧化，NOx生成量增加，还会引起催化剂材料的相变，使催化剂的活性退化。国内外SCR系统大多采用高温，反应温度区间为315℃～400℃。优点：该法脱硝效率高，价格相对低廉，广泛应用在国内外工程中，成为电站烟气脱硝的主流技术。缺点：燃料中含有硫分, 燃烧过程中可生成一定量的SO3。添加催化剂后, 在有氧条件下, SO3 的生成量大幅增加, 并与过量的 NH3 生成 NH4HSO4。NH4HSO4具有腐蚀性和粘性, 可导致尾部烟道设备损坏。 虽然SO3 的生成量有限, 但其造成的影响不可低估。另外,催化剂中毒现象也不容忽视。　　活性炭吸附配合使用　　电子束脱硝新技术

简单的说几点：1、氨水的成本比尿素成本高；2、在催化剂效率相同的情况下，用尿素要比氨水好，原因是即便是尿素喷多了，对设备的腐蚀性还可以控制；如果直接喷氨水，多了会直接污染设备，氨的吸附性和腐蚀性是很强的，附着在烟道上很难消除。同时，氨也易溶于水，在工业情况下，氨溶于水的比例为500:1。以上是氨水的缺点，下面是氨水的优点，1、脱硝效率高，尿素不是纯氨。2、实在想不出为啥不用尿素而用氨水了。抱歉。。。

SNCR脱硝是将还原剂（an水）喷入炉内800～1050度区间，在高温下将氮氧化物还原成氮气和水， 实现氮氧化物达标排放，脱硝效率大于50%。水泥窑炉SNCR烟气脱硝工艺系统主要包括还原剂储存系统、循环输送模块、稀释计量模块、分配模块、背压模块、还原剂喷射系统和相关的仪表控制系统等。sncr脱硝原理介绍燃烧烟气中去除氮氧化物的过程，防止环境污染的重要性，已作为世界范围的问题而被尖锐地提了出来。世界上比较主流的工艺分为：SCR和SNCR。这两种工艺除了由于SCR使用催化剂导致反应温度比SNCR低外，其他并无太大区别，但如果从建设成本和运行成本两个角度来看，SCR的投入至少是SNCR投入的数倍，甚至10倍不止。

sncr脱硝原理：SNCR即选择性非催化还原技术，原理是不使用催化剂，在锅炉炉膛或旋风分离筒入口适当位置喷入氨基还原剂，将NOx还原为N2的一种脱硝技术。反应温度窗口在800度到1100度左右，且在烟道内停留时间长，反应充分。SNCR技术主要使用氨水作为还原剂。工艺：脱硝工艺一般用于锅炉炉膛，用炉内SNCR系统的还原剂制备、稀释、喷射、控制系统的基础上，加装烟气尾部脱硝装置。燃烧烟气中去除氮氧化物的过程，防止环境污染的重要性，已作为世界范围的问题而被尖锐地提了出来。世界上比较主流的工艺分为：SCR和SNCR。这两种工艺除了由于SCR使用催化剂导致反应温度比SNCR低外，其他并无太大区别，但如果从建设成本和运行成本两个角度来看，SCR的投入至少是SNCR投入的数倍，甚至10倍不止。

sncr脱硝原理及工艺：1、SNCR即选择性非催化还原技术，原理是不使用催化剂，在锅炉炉膛或旋风分离筒入口适当位置喷入氨基还原剂，将NOx还原为N2的一种脱硝技术。反应温度窗口在800度到1100度左右，且在烟道内停留时间长，反应充分。SNCR技术主要使用氨水作为还原剂。2、脱硝工艺一般用于锅炉炉膛，用炉内SNCR系统的还原剂制备、稀释、喷射、控制系统的基础上，加装烟气尾部脱硝装置。燃烧烟气中去除氮氧化物的过程，防止环境污染的重要性，已作为世界范围的问题而被尖锐地提了出来。世界上比较主流的工艺分为：SCR和SNCR。这两种工艺除了由于SCR使用催化剂导致反应温度比SNCR低外，其他并无太大区别，但如果从建设成本和运行成本两个角度来看，SCR的投入至少是SNCR投入的数倍，甚至10倍不止。

我翻译成了，隐身水，哈哈，有没有跟我一样的

合格车用尿素配比为32.5% ，例如100kg车用尿素溶液 需要32.5kg车用尿素原料 67.5kg三级过滤水。但好的车用尿素对水与原料都有要求否则会损害车辆scr系统。山东新蓝环保 拥有专业车用尿素原料跟生产设备

简单的说几点：1、氨水的成本比尿素成本高；2、在催化剂效率相同的情况下，用尿素要比氨水好，原因是即便是尿素喷多了，对设备的腐蚀性还可以控制；如果直接喷氨水，多了会直接污染设备，氨的吸附性和腐蚀性是很强的，附着在烟道上很难消除。同时，氨也易溶于水，在工业情况下，氨溶于水的比例为500:1。以上是氨水的缺点，下面是氨水的优点，1、脱硝效率高，尿素不是纯氨。2、实在想不出为啥不用尿素而用氨水了。抱歉。。。

A．如仅考虑脱硝效率越高，升高温度，脱硝效率先增大后减小，说明升高温度平衡向逆向移动，正反应放热，但如从氨气的浓度变化的角度考虑，升高温度氨气的浓度降低，说明反应向正向移动，则正反应为吸热反应，二者矛盾，不能说明正反应为放热反应，故A错误；B．从图2判断，增大氨气的浓度有助于提高NO的转化率，故B错误；C．从图1判断，脱硝的最佳温度约为925℃，此时脱硝效率最大，故C正确；D．从图2判断，综合考虑脱硝效率和运行成本最佳氨氮摩尔比应为2.0，2.0～2.5时脱硝效率变化不大，故D错误．故选C．

（1）< (2分)（2）+179.8 (2分) （3）NO 2 ＋NO 3 － －e － ＝N 2 O 5 (2分)（4）①Cr 2 O 7 2 － + 6Fe 2+ + 14H + = 2Cr 3+ + 6Fe 3+ +7 H 2 O (2分)②13.44 (2分) 试题分析：（1）要想反应2NO＋2CO 2CO 2 ＋N 2 能够自发进行，则有ΔH—TΔS＜0，该反应为气体物质的量减小的熵减反应，ΔS＜0，则该反应的ΔH＜0；（2）根据盖斯定律：①—②得N 2 (g)＋O 2 (g) 2NO(g)的ΔH＝+179.8kJ?mol －1 ；（3）由题给燃料电池装置图知，NO 2 在负极发生氧化反应，生成N 2 O 5 ,电极反应式为：NO 2 ＋NO 3 － －e － ＝N 2 O 5 ；（4）①用Fe作两极电解含Cr 2 O 7 2- 的酸性废水，阳极电极反应式为：Fe - 2e - =Fe 2+ ，电解过程中Cr 2 O 7 2 － 被还原为Cr 3+ 的离子方程式为Cr 2 O 7 2 － + 6Fe 2+ + 14H + = 2Cr 3+ + 6Fe 3+ +7 H 2 O；②根据题给反应和电子守恒得Cr 2 O 7 2 － 和氧气的关系式：Cr 2 O 7 2 － ——3O 2 ；100L Cr 2 O 7 2- 浓度为0.002mol/L废水中Cr 2 O 7 2- 的物质的量为0.2mol，消耗氧气为0.6mol，标准状况下的体积为13.44L。

SCR脱硝技术即为选择性催化还原技术，选择性是指在催化剂的作用和在氧气存在条件下，NH3优先和NOx发生还原脱除反应，生成N2和H20，而不和烟气中的氧进行氧化反应。

PNCR是基于选择性非催化还原（Selective Catalytic Reduction，SCR）技术的脱硝技术，而SNCR是基于选择性非催化还原（Selective Non-Catalytic Reduction，SNCR）技术的脱硝技术。PNCR是通过将氨水或尿素喷入烟气中，与NOx发生反应，还原成氮气和水，从而达到脱硝的目的。PNCR需要在高温下进行，一般需要在200℃以上才能发生反应，因此需要在锅炉后部设置脱硝催化剂，以提高脱硝效率。SNCR是在燃烧区域中喷入氨水或尿素，通过高温下的非催化还原反应，将NOx还原成氮气和水，从而达到脱硝的目的。SNCR不需要在高温下进行，一般在800℃以下即可发生反应，因此不需要设置脱硝催化剂，但脱硝效率相对较低。

SCR是用催化剂降低脱硝反应的活化能，从而在较低温度下200到400℃对氮氧化物还原。而SNCR是在800到1100℃的高温条件下，将氮氧化物还原的。

循环流化床锅炉NOX排放低的主要原因是：（1）低温燃烧，燃烧温度一般控制在850~900左右，此时空气中的氮一般不会生成NOX (降低热力型的产生）；（2）分段燃烧，抑制燃料中的氮转化为NOX ，并使部分已生成的NOX得到还原。（降低燃料型的产生）NOX的生成机理：热力型，快速型和燃料型循环流化床SNCR应用：一般布置在分离器入口；如果是紧凑型分离器，可布置在分离器后墙。特点：1、脱硝效率达到 60%～80% (最佳温度：850-1050℃；流化床混合良好；对一般燃煤锅炉混合不良时达到 40%～50% ）2、简单可靠，脱硝系统可用率：>95%(系统设备少,控制简单)3、对锅炉燃烧、运行不造成影响，不降低锅炉效率循环流化床SCR应用SCR脱硝反应（选择性催化还原法）需要的温度条件：在催化剂的条件下，合适的反应温度范围320-400℃。脱硝效率达到 70%～90% (最佳温度：350℃左右)锅炉设计位置、受热面布置及材质选择问题。

SNCR工作原理：选择性非催化还原(SNCR)脱硝工艺是将含有 NHx 基的还原剂(如氨气、 氨水或者尿素等)喷入炉膛温度为850℃-1150℃的区域，还原剂通过安装在屏式过热器区域的喷枪喷入，该还原剂迅速热分解成 NH3和其它副产物，随后 NH3 与烟气中的 NOx 进行 SNCR 反应而生成 N2和H2O。SNCR 脱硝技术是一种较为成熟的商业性NOx控制处理技术，SNCR脱硝方法主要是将还原剂在850～1150 ℃温度区域喷入含 NOx 的燃烧产物中，发生还原反应脱除 NOx , 生成氮气和水。相关信息：SNCR 脱硝在实验室试验中可达到 90%以上的 NOx脱除率，在大型锅炉应用上，短期示范期间能达到75%的脱硝效率。SNCR 脱硝技术是 20世纪 70 年代中期在日本的一些燃油、燃气电厂开始应用的，80 年代末欧盟国家一些燃煤电厂也开始了SNCR 脱硝技术的工业应用，美国 90 年代初开始应用 SNCR 脱硝技术，目前世界上燃煤电厂SNCR 脱硝工艺的总装机容量在 2GW 以上。

sncr脱硝原理及工艺：1、SNCR即选择性非催化还原技术，原理是不使用催化剂，在锅炉炉膛或旋风分离筒入口适当位置喷入氨基还原剂，将NOx还原为N2的一种脱硝技术。反应温度窗口在800度到1100度左右，且在烟道内停留时间长，反应充分。SNCR技术主要使用氨水作为还原剂。2、脱硝工艺一般用于锅炉炉膛，用炉内SNCR系统的还原剂制备、稀释、喷射、控制系统的基础上，加装烟气尾部脱硝装置。燃烧烟气中去除氮氧化物的过程，防止环境污染的重要性，已作为世界范围的问题而被尖锐地提了出来。世界上比较主流的工艺分为：SCR和SNCR。这两种工艺除了由于SCR使用催化剂导致反应温度比SNCR低外，其他并无太大区别，但如果从建设成本和运行成本两个角度来看，SCR的投入至少是SNCR投入的数倍，甚至10倍不止。

参加PCR反应的物质主要有五种即：引物、酶、dNTP、模板和缓冲液。1、引物有多种设计方法，由PCR在实验中的目的决定，但基本原则相同。PCR所用的酶主要有两种来源：Taq和Pfu，分别来自两种不同的噬热菌。其中Taq扩增效率高但易发生错配。Pfu扩增效率弱但有纠错功能。所以实际使用时根据需要必须做不同的选择。2、酶一般是DNA水解酶和DNA聚合酶，DNA水解酶用于切断磷酸二酯键的酶，这些酶使糖磷酸酯主链上的磷酸二酯键水解。3、模板即扩增用的DNA，可以是任何来源，但有两个原则，第一纯度必须较高，第二浓度不能太高以免抑制4、在PCR反应中,使用低dNTP浓度,可减少非靶位置启动和延伸时的核苷酸错误掺入。一般可根据靶序列的长度和组成来决定最低dNTP浓度。例如在100μl的反应体系中,4种dNTP的浓度为20μmol/L,可基本满足合成2.6μg DNA或10pmol/L的400bp序列。5、缓冲液的成分最为复杂，除水外一般包括四个有效成分：缓冲体系，一般使用HEPES或MOPS缓冲体系；一价阳离子，一般采用钾离子，但在特殊情况下也可使用铵根离子；二价阳离子，即镁离子，根据反应体系确定，除特殊情况外不需调整。参考资料来源：百度百科-聚合酶链式反应参考资料来源：百度百科-dNTP

使用一些高保真的酶，譬如takara的pyrobest，PCR反应结束后不会加A的

为什么这么做？非要这样两步来扩增，可以考虑nest PCR另外，纯化后的第一次PCR产物，稀释1000倍左右后再用作二次扩增的模板

看你的2XPFU是什么形式,如果是mix的形式,一般已经有染料在里面了,可以看到mix的溶液就是蓝色,这样的话,样品可以直接上样的. 但是如果你加的溶液都是透明的,完成后还是需要加loading buffer.普通自己配的loading都是5X的,就按照样品：loading=4:1的比例混合就可以了.

2kb

两者都是DNA聚合酶，区别在于，pfu是高保真DNA聚合酶，即DNA合成时碱基错配率比taq酶低，一般情况，不太长的片段或序列准确度要求不是很严格的用taq酶，对于长片段或序列准确度要求高的用pfu酶。在实际使用中，往往鉴于pfu酶价格比taq酶高，出于节省的目的，两种酶混合使用也可达到提高保真度的效果。

5U/ul，一共250 U/支可以算出一共50ul，加入0.25ul就相当于加入0.25x5U=1.25U。第二个问题我完全不懂意思，正常20ul体系中一般就使用0.5~2个U吧

你分别做阴阳性对照了吗？如果阳性能扩出才说明没有问题。以前能扩出来不代表现在酶没有问题。一般都是Taq能扩出来，pfu反而扩不出，因为后者高保真效率低一些

lilychency说得对。完毕。

酶切位点是你切过之后才是粘性末端 Pfu扩增出来是平末端 所以没法连普通的T载体 不过也有平末端链接的T载体

看你的2XPFU是什么形式，如果是mix的形式，一般已经有染料在里面了，可以看到mix的溶液就是蓝色，这样的话，样品可以直接上样的。但是如果你加的溶液都是透明的，完成后还是需要加loading buffer。普通自己配的loading都是5X的，就按照样品：loading=4:1的比例混合就可以了。

两者都是DNA聚合酶,区别在于,pfu是高保真DNA聚合酶,即DNA合成时碱基错配率比taq酶低,一般情况,不太长的片段或序列准确度要求不是很严格的用taq酶,对于长片段或序列准确度要求高的用pfu酶.在实际使用中,往往鉴于pfu酶...

歌曲名:Crucify歌手:Tori Amos专辑:Legs And Boots: Lied Center - Lawrence, Ks - November 9, 2007Crucify Tori AmosEvery finger in the room was pointing at meI wanna spit in their facesThen I get afraid of what that could bringI got a bowling ball in my stomachI got a desert in my mouthFigures that my courage would choose to sell out nowI"ve been looking for a savior in these dirty streetsLooking for a savior beneath these dirty sheetsI"ve been raising up my handsDrive another nail inJust what God needsOne more victimWhy do we crucify ourselvesEvery dayI crucify myselfNothing I do is good enough for youI crucify myselfEvery dayI crucify myselfAnd my heart is sick of being inI said my heart is sick of being inChainsChainsGot a kick for a dog beggin" for loveI gotta have my suffering so that I can have my crossI know a cat named EasterYou"re just an empty cage girlHe says will you ever learnIf you kill the birdI"ve been looking for a savior in these dirty streetsLooking for a savior beneath these dirty sheetsI"ve been raising up my handsDrive another nail inGot enough guilt to start my own religionWhy do we crucify ourselvesEvery dayI crucify myselfNothing I do is good enough for youI crucify myselfEvery dayI crucify myselfAnd my heart is sick of being inI said my heart is sick of being inChainsChainsPlease save me I cryLooking for a savior in these dirty streetsLooking for a savior beneath these dirty sheetsI"ve been raising up my handsDrive another nail inWhere"re those angels when you need them?Why do we crucify ourselvesEvery dayI crucify myselfNothing I do is good enough for youI Crucify myselfEvery dayI Crucify myselfAnd my heart is sick of being inI said my heart is sick of being inChainsChains...http://music.baidu.com/song/9326567

歌曲名:Crucify歌手:Tori Amos专辑:Legs And Boots: Vancouver, Bc - December 3, 2007Crucify Tori AmosEvery finger in the room was pointing at meI wanna spit in their facesThen I get afraid of what that could bringI got a bowling ball in my stomachI got a desert in my mouthFigures that my courage would choose to sell out nowI"ve been looking for a savior in these dirty streetsLooking for a savior beneath these dirty sheetsI"ve been raising up my handsDrive another nail inJust what God needsOne more victimWhy do we crucify ourselvesEvery dayI crucify myselfNothing I do is good enough for youI crucify myselfEvery dayI crucify myselfAnd my heart is sick of being inI said my heart is sick of being inChainsChainsGot a kick for a dog beggin" for loveI gotta have my suffering so that I can have my crossI know a cat named EasterYou"re just an empty cage girlHe says will you ever learnIf you kill the birdI"ve been looking for a savior in these dirty streetsLooking for a savior beneath these dirty sheetsI"ve been raising up my handsDrive another nail inGot enough guilt to start my own religionWhy do we crucify ourselvesEvery dayI crucify myselfNothing I do is good enough for youI crucify myselfEvery dayI crucify myselfAnd my heart is sick of being inI said my heart is sick of being inChainsChainsPlease save me I cryLooking for a savior in these dirty streetsLooking for a savior beneath these dirty sheetsI"ve been raising up my handsDrive another nail inWhere"re those angels when you need them?Why do we crucify ourselvesEvery dayI crucify myselfNothing I do is good enough for youI Crucify myselfEvery dayI Crucify myselfAnd my heart is sick of being inI said my heart is sick of being inChainsChains...http://music.baidu.com/song/7895371

歌曲名:Crucify歌手:Tori Amos专辑:Legs And Boots: Milwaukee, Wi - November 3, 2007Crucify Tori AmosEvery finger in the room was pointing at meI wanna spit in their facesThen I get afraid of what that could bringI got a bowling ball in my stomachI got a desert in my mouthFigures that my courage would choose to sell out nowI"ve been looking for a savior in these dirty streetsLooking for a savior beneath these dirty sheetsI"ve been raising up my handsDrive another nail inJust what God needsOne more victimWhy do we crucify ourselvesEvery dayI crucify myselfNothing I do is good enough for youI crucify myselfEvery dayI crucify myselfAnd my heart is sick of being inI said my heart is sick of being inChainsChainsGot a kick for a dog beggin" for loveI gotta have my suffering so that I can have my crossI know a cat named EasterYou"re just an empty cage girlHe says will you ever learnIf you kill the birdI"ve been looking for a savior in these dirty streetsLooking for a savior beneath these dirty sheetsI"ve been raising up my handsDrive another nail inGot enough guilt to start my own religionWhy do we crucify ourselvesEvery dayI crucify myselfNothing I do is good enough for youI crucify myselfEvery dayI crucify myselfAnd my heart is sick of being inI said my heart is sick of being inChainsChainsPlease save me I cryLooking for a savior in these dirty streetsLooking for a savior beneath these dirty sheetsI"ve been raising up my handsDrive another nail inWhere"re those angels when you need them?Why do we crucify ourselvesEvery dayI crucify myselfNothing I do is good enough for youI Crucify myselfEvery dayI Crucify myselfAnd my heart is sick of being inI said my heart is sick of being inChainsChains...http://music.baidu.com/song/7990526

1、下载安装kalilinux。2、在kalilinux中installRainbowcrack，在root终端里进入。3、打开终端(terminal)操作窗口，退出到初始位置，使用“cdusr/share/rainbowcrack”命令切换到RainbowCrack工作目录，然后使用“ls”命令查看。4、使用“./rtgen"命令打开帮助文档。以上就是kali打开phohcrack的方法。

RUV的意思为英文Recreational Utility Vehicle即：休闲型多功能车，它包含了两层意思，一是休闲，即虽然没有运动越野功能，但具备城市休闲功能；二是多功能，即乘客载物两相宜，不仅适应于城市家庭用车，也适应于商务用车。驾驶室后座椅组合灵活多变，第二排座椅可折叠并向前翻转，第三排座椅可向前移动或放平，使载货空间长度增大，形成一个特别大的空间，长城赛影正是具备了这种特征，因充分体现出了乘客载货两相宜的功能，外观时尚漂亮，针对了不同客户的群体，倍受广大用户青睐，市场销量一直很好。SUV的全称为：Sports Utility Vehicle，即“运动型多功能车”。SUV起源于美国，同样也是近年美国市场最畅销的车型。20世纪80年代，SUV是为迎合年青白领阶层的爱好，在皮卡底盘上发展起来的一种厢式车。SUV采用四轮驱动，一般前悬挂是轿车车型的独立螺旋弹簧悬架；后悬挂则是非独立钢板弹簧悬架，离地间隙较大；在一定程度上既有轿车的舒适性，又有越野车的越野性能。这类车既可载人，又可载货，行驶范围广，具有豪华轿车的功能。

SUV的全称为：Sports Utility Vehicle，即“运动型多功能车”。CRV——CRV是本田的一款车，国产的版本叫做东风本田CR-V，取英文City Recreation Vehicle之意，即城市休闲车。SRV的英文全称是Small Recreation Vehicle，翻译过来的意思是“小型休闲车”，一般指两厢轿车，比如上海通用赛欧SRV。

MPV是“多用途车”的英文缩写，又称APV。在中国它有一个直观、生动而形象 的名字——子弹头，或许是因为它独特的外形。 MPV诞生于年代，在美国许多青年人特别钟爱日本小轿车，或许是因为它比美式 大轿车更精致、经济、实用。但是几年后他们成家立业有了孩子，原来又比较宽敞的日本小车就显得有些局促了。美国人天性喜欢长途旅行，夏天带着妻子、儿女，还有自己的宠物、行李，离开城市到环境优美的乡村度假。当时的旅行车早已出现，但貌不惊人，若强调其实用性、舒适性、安全性这几项综合性能，它就不太理想了，在这种形势之下，MPV的流行看起来是十分合理的了。 尽管MPV的车身重新设计，拥有独一无二的子弹头风格，但方正的车身还是能够 叫你想起单厢面包车。但是为什么它会如此受人欢迎呢？ 第一，MPV的设计是以轿车结构为基础，一般采轿车底盘，因而它具有接近轿车 的舒适感受。其发动机的装置打破了单厢面包车的发动机都装在车厢内这个特点，而将发动机横置装在车头内，因而可以缓冲来自前方的碰撞从而提高前排乘员的安全。 第二，MPV的单厢式车身设计洽谈室它有面包车一样的乘载空间。车厢内可以布 置下8个人的座位，还有一定的行李空间，所以非常适合一家人外出长途旅行。车厢内的座椅布置灵活，可全部折叠放倒或部分折叠，历而可以提供一个大的载货空间，可以为假日外出购物服务。 MPV的车身设计还融入了低风阻流线型的赛车风格，因而具有赛车的享受，叫人 兴奋不已的子弹头外观更让人感到无比的刺激。

六角形深绿钻石池塘肮脏的摩天大楼从上望下对应你从左往右的意思

【答案】B【答案解析】试题分析：A、铁为活泼电极，铁板作阳极时电解过程中电极本身失电子，电极反应式为：Fe-2e-=Fe2+，正确；B、根据题意知，反应过程中溶液中的氢离子浓度减小，溶液pH增大，错误；C、根据Cr2O72+6Fe2++14H+=2Cr3++6Fe3++7H2O知，反应过程中消耗了大量H+，使得Cr3+和Fe3+都转化为氢氧化物沉淀，正确；D、电路中每转移12 mol电子，有6molFe2+，结合题给反应知最多有1 mol Cr2O72-被还原，正确。考点：考查电解原理的应用。

PDF本身就是adobe制定出来的格式，就是adobe发明的，那你说它的acrobat是不是最好的？特别是acrobat XI的文字识别功能相当好用，比X版好用多了。

ROX Reference Dye,可用于需要Dye的Real Time PCR扩增仪,用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR扩增仪上,用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差.并不是每次都会用到.一般有ROX Reference Dye和ROX Reference Dye II两种,针对不同的PCR仪.一般ABI PRISM 7000/7700/7900HT和7300 Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye,而7500 Real-Time PCR System和7500 Fast Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye II.其它牌子如Thermal Cycler Dice Real Time System、LightCycler 等Real Time PCR扩增仪时不必使用.

如图所示：普通的PCR大多数是定性实验，而实时荧光定量PCR则定量和定性都可以做。应用领域也不一样，普通PCR一般应用于基因组克隆、DNA测序、RNA反转录等，而实时荧光定量PCR一般应用于mRNA表达量分析、绝对定量、蛋白表达、SNP分析、阴阳性解析等领域。调度电力系统的电力和进行电力系统规划。电力系统的负荷涉及广大地区的各类用户，每个用户的用电情况很不相同，且事先无法确知在什么时间、什么地点、增加哪一类负荷。因此，电力系统的负荷变化带有随机性。扩展资料：实时荧光定量PCR是利用荧光信号的变化，实时检测PCR扩增反应中每次循环扩增产物量的变化，通过循环阈值和标准曲线的分析对标本中起始模板拷贝数进行定量分析。在实时荧光定量PCR进程中，每次循环进行一次荧光信号的收集，以荧光强度为纵轴，循环次数为横轴，所得到的曲线称为PCR扩增曲线。在前面十多次循环中，虽然目标产物呈指数增加，但其引发的荧光总强度未达到仪器的检测限，所以仪器检测到的荧光强度无变化，该时间段荧光强度的平均值称为基线。当荧光信号达到一定强度后，荧光强度的_加才能够如实地被检测仪器检测到。参考资料来源：百度百科-定量PCR

影响不大 如果严格点；引物的退火温度实际上是和浓度有关的，所以多加了相当于降低了退火温度，会产生非特异性扩增产物影响不大 如果严格点，引物的退火温度实际上是和浓度有关的，所以多加了相当于降低了退火温度，会产生非特异性扩增产物

这个具体得问厂家或经销商，他们会准确告诉你。。。有的需要，有的不需要，机子型号情况不一样

ROX是一种荧光染料。RTPCR“原理是:提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增,而获得目的基因或检测基因表达。”

silkscreen top:是字符层，一般称顶层字符或元件面字符，为各元器件的外框及名称标识等，都用此层进行布局，个人认为最好与place_bound_top相同，且带有1脚标识。assemly top：是装配层，就是元器件的实际大小，用来产生元器件的装配图。也可以使用此层进行布局；外框尺寸应该为元件除焊盘外的部分（body size）；place_bound_top：是元器件封装实际大小，用来防止两个元器件叠加在一起不报错。外框尺寸需要包括焊盘在内。

Col1a2-sCreER转基因小鼠，简单说就是利用sCreER重组酶方法进行Col1a2基因敲除的转基因小鼠sCreER就是可自我剪切的诱导型CreER（self-cleaved inducible CreER, sCreER）重组酶，是一种新的可通过自我剪切将诱导型CreER转变成持续活化的Cre，实现时间可控的高效遗传操作。Col1a2是基因名称，能够编码“胶原蛋白I型alpha 2链”这个蛋白。

冒泡，你去了解他的原理，这样写最直观，可以用一次循环，但是有些人不容易理解两层循环，就别说一层了

Microsoft：微软，始建于1975年，是一家美国跨国科技公司，也是世界PC软件开发的先导，由比尔·盖茨与保罗·艾伦创办于1975年，公司总部设立在华盛顿州的雷德蒙德（Redmond，邻近西雅图）。以研发、制造、授权和提供广泛的电脑软件服务业务为主。最为著名和畅销的产品为Microsoft Windows操作系统和Microsoft Office系列软件，目前是全球最大的电脑软件提供商。2018年4月22日，2017年全球最赚钱企业排行榜发布，微软排名第15。 2018年5月29日，《2018年BrandZ全球最具价值品牌100强》发布，微软名列第4位。2018年7月19日，《财富》世界500强排行榜发布，微软位列71位。2018年12月18日，世界品牌实验室编制的《2018世界品牌500强》揭晓，微软排名第4位。扩展资料：微软的主要产品：1、操作系统Windows 95、Windows 98 、WindowsME、Windows 2000、Windows XP、Windows Server 2003、Windows Vista、 Windows 7 、 Windows 8、Windows 8.1、Windows 10、Windows 10S。2、应用软件Internet Explorer （简称 IE）是为全世界所广泛使用的 Windows Internet Explorer 浏览器系列的最新版本，它集成了更多个性化、智能化、隐私保护的新功能，为网络生活注入新体验，让每一天的网上冲浪更快捷、更简单、更安全，并且充满乐趣（非开源软件）。3、硬件Xbox 360是世界最大的电脑软件公司微软所开发的第二代家用视频游戏主机，在开发时被称为“Xenon”、“Xbox 2”及“Xbox Next”等。微软Xbox360是唯一一款具备定时功能的游戏机，家长们可轻松设定相应游戏时间，同时也能对孩子们所玩、所观看的内容加以限制。参考资料来源：百度百科-微软

Real-timePCR是在PCR扩增过程中，通过荧光信号，对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期，模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系，所以成为定量的依据。每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系，公式如下。Ct=-1/lg(1+Ex)*lgX0+lgN/lg(1+Ex)所谓实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。检测方法1.SYBRGreenⅠ法:在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。SYBR定量PCR扩增荧光曲线图PCR产物熔解曲线图(单一峰图表明PCR扩增产物的单一性)2.TaqMan探针法:探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时，Taq酶的5"-3"外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成完全同步。

高分辨率溶解曲线

荧光定量pcr仪是怎样测试dna，rna的普通的基因扩增仪（PCR仪）只能够定性地分析是否存在目标片段。但是价格要低很多，而且运行成本也要低很多。不过不能直接得到扩增结果，还需要做电泳检测。实际中检测遗传疾病，品种分子标记筛选，甚至亲自鉴定等都可以由普通PCR仪完成。但是，某些需要定量的实验就必须用到实时定量PCR了。比如检测某些病原物的数量（血液乙肝病毒复制程度），特定基因的表达量（比如结合反转录做的RNA定量分析），某些基因在染色体组中拷贝数（以前往往使用southern blot技术）等等。荧光定量PRC一般不需要对扩增产物进行电泳分析，操作相对简单些，但是耗材实在是贵。简单来说，看有没有用普通PCR仪，看有多少用荧光定量PCR

看CT值、起始拷贝数、标准偏差等如果是SYBR做的话，再看下溶解曲线

溶解曲线的意思是：当温度高于扩增产物的TM值时，双链产物变单链，荧光值因为这样的变化而产生变化，根据这一原理，你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化，比如你用的是TAQMAN探针，taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的，那么在只有温度变化的情况下，是没有荧光值变化的，自然就没有溶解曲线了。但是假如你用的分子信标探针或者sybgreen燃料，情况就不同了。

sg荧光定量PCR（也称TaqMan PCR,以下简称FQ-PCR）是美国PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术， 该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的 ，与变通PCR相比，FQ-PCR具有许多优点。 本文拟就该技术的特点、原理和方法以及应用作一简要叙述。

首先我先看看我理解的问题对不对：你说的RT-PCR是指reverse transcription PCR。那么这种PCR属于半定量PCR，它的定量结果只能全部跑完PCR（终点法）以后，通过琼脂糖电泳的方式，观察最终的核酸条带的亮度，来反映mRNA的量。荧光定量PCR（real-time RT-PCR）可以实时监测PCR的扩增过程，通过达到某个荧光阈值的循环数来反映模板（mRNA）的含量，这种方式比终点法的定量更具有准确度度。因为终点法的结果收到更多的因素干扰（如：酶活等因素），即使是同样的模板，可能最终的条带亮度都不一致，但是荧光定量PCR的结果，在PCR循环的前期，收到多种因素的干扰小，更准确的反映模板含量的不同。

为什么荧光定量pcr可以准确定量实时定量的引物设计要求比较高，可以按普通引物设计的方法来做，但是设计时要注意扩增的片段不能太大，最好在250bp-100bp之间。同时要保证这对引物有绝对的特异性，因为要是产生非特异性扩增的话，就不能准确的计量模板量了，这样就失去了实时定量的意义了用已知浓度的DNA样本（通常是质粒）梯度稀释成一系列的样本。做实验的时候，这些标准品和待测样本加在同样一块96孔盘的不同孔内。一起做PCR。标准品的荧光强度和已知的浓度作图，可以得到一条标准曲线。而待测样本的荧光强度测出以后，就可以在标准曲线上算出样本浓度了。

荧光定量PCR和半定量RT-PCR都可以用来检测基因的表达量的,但二者检测的东西多少有些不同.荧光定量PCR是在PCR反应体系中加入可以和双链DNA特异性结合的荧光染料（sybr green）或者和目的DNA片段结合的荧光探针（taqman),通过监控PCR过程中的荧光的变化,并且和某些管家基因的荧光变化进行对比反应出目标基因的表达量.荧光定量PCR的主要有效数据是荧光信号增长到最大值的一半时的时间.半定量RT-PCR则是通过RT-PCR最终产物电泳后电泳条带的明暗来间接反应出原始模板的丰度.荧光定量PCR因为是全程监控PCR扩增的变化,并且能够同管家基因的扩增曲线进行相对定量,而将基因的表达量数值化,准确度高于半定量RT-PCR.半定量RT-PCR因为是监控的最终产物,而在基因表达水平很高的时候,PCR体系很可能在反应中后期就饱和了,所以对于高水平表达的基因来说,用半定量RT-PCR并不能很准确的说明问题.但是如果要发表比较高档次的论文的话,某些变态的老外审稿并不认可单一的荧光定量PCR的结果,他们会同时需要作者做一个半定量RT-PCR来作为辅助证明. 半定量RT-PCR的引物和荧光定量PCR的引物设计原则并不是一样的,换而言之,二者的引物并不是可以通用的.所以退火温度自然是不同的,具体怎么不同,要根据实际用到的引物去算.

PCR扩增为指数扩增，每一扩增周期后产物的量可以下式表达： Yn=Yn-1·(1+E) = Yn-2·(1+E)2=…= X·(1+E)n 0≤E≤1 其中E表示扩增效率，Yn表示在n个周期后PCR产物的分子数量，Yn-1为n-1个周期后PCR产物的分子数量。 等式仅在限定的扩增周期数（通常为20或30）内成立。超过此周期数，扩增过程即由指数扩增降低至稳定的扩增速率，最终达到平台，不再扩增.

原理不同：荧光定量pcr实时监测与dna结合的荧光染料激发的荧光；普通pcr通过检测插入dna中核算染料的量来测定pcr最终产物量，一般是紫外光。反应要求：荧光定量

概述荧光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR，RTFQ PCR) 是1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术，它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析，计算待测样品模板的初始浓度。原理PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;刚开始时, 探针结合在DNA任意一条单链上;PCR扩增时，Taq酶的5"端-3"端外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。

实时荧光定量PCR和定量PCR有什么区别实时荧光是反应荧光数值定量，普通那种是通过条带半定量，现在做半定量的已经很少了，除非是一些验证试验必须要图的

fq-pcr技术用于定量或定性检测病原体核酸需在扩增曲线（指数增长期）实现。实时检测PCR扩增，在扩增的指数期对起始模板进行定量。荧光阈值是在荧光扩增曲线上人为设定的一个值，它可以设定在荧光信号指数扩增阶段任意位置上。研究表明，每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系，起始拷贝数越多，Ct值越小。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线，其中横坐标代表起始拷贝数的对数，纵坐标代表Ct值如下图所示。因此，只要获得未知样品的Ct值，即可从标准曲线上计算出该样品的起始拷贝数。PCR扩增时，加入一对引物的同时再加入一个特异性的荧光探针。该探针为一直线型的寡核苷酸，两端分别标记一个荧光报告基团和一个荧光淬灭基团，探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收，PCR 仪检测不到荧光信号。PCR扩增时（在延伸阶段），Taq 酶的 5" － 3" 切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条 DNA 链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与 PCR 产物形成完全同步，这也是定量的基础所在。发展过程：荧光定量PCR最早称TaqMan PCR，后来也叫Real-Time PCR，是美国PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术。该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针或相应的荧光染料来实现其定量功能的。其原理：随着PCR反应的进行，PCR反应产物不断累计，荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环，收集一个荧光强度信号，这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线图。一般而言，荧光扩增曲线可以分成三个阶段：荧光背景信号阶段，荧光信号指数扩增阶段和平台期。在荧光背景信号阶段，扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖，无法判断产物量的变化。而在平台期，扩增产物已不再呈指数级的增加，PCR 的终产物量与起始模板量之间没有线性关系，根据最终的 PCR 产物量也不能计算出起始 DNA 拷贝数。只有在荧光信号指数扩增阶段， PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系，我们可以选择在这个阶段进行定量分析。为了定量和比较的方便，在实时荧光定量 PCR 技术中引入了两个非常重要的概念：荧光阈值和 CT值（如下图所示）。

你要检测什么东西啊？实时荧光定量PCR是检测模板DNA的拷贝数、基因表达量、基因突变等的

检测某个基因的mRNA水平表达量

分别百度下不就知道了前两个是一回事 测mRNA表达量的 第三个只不过是把反转录和pcr放在一个程序里面做了 扩增的

荧光定量PCR是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析，计算待测样品模板的初始浓度。|||原理不同：荧光定量pcr实时监测与dna结合的荧光染料激发的荧光；引物长度，20bp；Tm值可以设置在55度（实验的时候可以用60度退火，两条引物的退火温度不要相差大于2度）；产物长度，100-150bp（如果没有合适的引物，产物长度可以设置在80-200）。