cr

擦 [cā]动词（摩擦） rub:strike a match;擦根火柴rubbing one"s hands together;摩拳擦掌just a scratch on the hand手上擦破一点皮（用布、 手巾等摩擦使干净; 揩拭; 抹） wipe; scrub; clean:mop [scrub] the floor;擦地板wipe the sweat away;擦汗dry one"s face;擦脸polish [shine] shoes;擦皮鞋clean a gun;擦枪wipe the table;擦桌子scrub oneself with a towel; towel oneself用毛巾擦身

Scrub在化妆品中是磨砂膏的意思。磨砂膏是一款乳化型洁肤品，通常该产品内含有均匀、细微的颗粒。其主要用于去除皮肤深层的污垢，通过在皮肤上摩擦可使老化的鳞状角质剥起，除去死皮。scrub化妆品中的意思是什么?有很多化妆品上对英文的表示，对于中国的用户就不清楚死什么意思，接下来就让她时代的小编给大家详细解答一下。感兴趣的伙伴快来了解一下情况吧。scrub化妆品中的意思Scrub在化妆品中是磨砂膏的意思。磨砂膏是指含有均匀细微颗粒的乳化型洁肤品。其主要用于去除皮肤深层的污垢，通过在皮肤上摩擦可使老化的鳞状角质剥起，除去死皮。使用用磨砂膏注意事项在使用用磨砂膏时，按摩动作都一定要轻柔，同一部位按摩5次就可以了，不宜过多。如果用力过大也会伤害皮肤。并且在使用前，要保证脸上有足够的水分，以免过干而磨伤皮肤。磨砂膏适合肤质磨砂膏比较适合油性和混合性皮肤，干性皮肤慎用，过敏皮肤不能使用。有的部位角质过厚，也可以采用磨砂的方式来使肌肤光滑。如长有粉刺的部位，使用磨砂膏去除死皮也有助于油脂的顺利排出，有一定的治疗作用。磨砂膏可以天天用吗身体磨砂膏无论是什么肌肤，都不可以天天使用。因为身体磨砂膏里面含有磨砂颗粒，如果天天使用的话会给身体肌肤带来刺激，而且身体磨砂膏的作用是深度清洁，如果天天使用的话相当于天天在给肌肤进行深度清洁，很容易导致肌肤角质层变薄，让身体肌肤变得敏感脆弱，所以身体磨砂膏不能天天使用。以上介绍的关于scrub化妆品中的意思的内容，以及关于磨砂膏的使用方法和适合肤质，以及使用注意事项的解析，希望可以帮助大家更清楚怎么正确使用磨砂膏。

scrub读音: 英 [skrʌb] 美 [skrʌb]vt.& vi. 用力擦洗，刷洗； 取消（原有安排）；

body scrub身体磨砂；身体磨砂膏；身体去角质霜例句1.Why don"t you get a body scrub or a scalp massage instead? Maybe that"ll calm your nerves.你为什么来个身体磨砂或头皮按摩？也许这样会让你的神经放松。2.A sweet smelling body scrub which will leave your skin feeling silky smooth.甜美香浓的身体磨砂将使您的皮肤感觉如丝般滑爽。3.Swedish Spa Minerals Sea Salt Body Scrub矿物海盐身体磨砂膏4.A week using a two body scrub, can effectively remove the old waste cell, smooth skin;一星期使用一道两次身体磨砂膏，能有效去除老废细胞，平滑肌肤；5.The Body Shop Tea Tree Oil Body Scrub美体小铺茶树身体磨砂膏

修改ip地址mac地址本来就不会变，uboot的ip和mac地址是以环境变量的方式存储的，可以移植后手动配置，也可以在你目标板的.h配置文件中定义

之前阿

white scrub白色磨砂-----------------------------------如有疑问欢迎追问！满意请点击右上方【选为满意回答】按钮

nand scrub 0xc000000 0x4000000这条命令是没错的，也可以使用。结果失败要看是那种问题导致的失败：1.有可能超出nand大小，192M+64M = 256M2.最大可能是硬件损伤，这种坏块是擦不掉的，不过一般驱动会自动屏蔽坏块，使用无区别

是磨砂膏，scrub在化妆品中是磨砂膏的意思。其主要用于去除皮肤深层的污垢，通过在皮肤上摩擦可使老化的鳞状角质剥起，除去死皮。娇韵诗磨砂膏又称磨面膏，是一种配有微粒子的膏体。按摩微粒与表皮接触，去除皮肤表面的污垢，而且能用物理的方法，去除皮肤表面老化陈腐的角质层、深藏的黑头，并且能促进皮肤血液循环和新陈代谢。柔和的磨砂粒子，能帮助去除面部死皮而又不伤肌肤，是油性皮肤和问题性皮肤的首选。普通油性皮肤的人选用细砂的娇韵诗磨砂膏，即可达到较好的清洁效果。娇韵诗磨砂膏的作用原理就是：附着于老化角质细胞的多余油脂可以随着去角质的动作而清除，如此以来毛孔周围就不会那么阻塞，之后再搭配使用深层清洁产品，效果就会更快速和显著。娇韵诗磨砂膏不能深层清洁，它的作用是“清除老化角质”，但它却可间接辅助深层清洁。娇韵诗磨砂膏娇韵诗是娇韵诗公司旗下一个品牌，成立于1954年，是法国美容界的著名品牌。它的崛起不同于那些由流行服饰起家的化妆品牌，也有别于一般由脸部护肤开始发展的保养品。娇韵诗磨砂膏主要指的是含有均匀细微颗粒的乳化型洁肤品，将其涂抹在皮肤上，再适当按摩，可以起到去除皮肤深层污垢、死皮的作用。以上内容来自 百度百科-娇诗韵

真够巧的，自己正好在用这两种哦。scrub是磨砂去角质，MM你仔细看下你的scrub，内有小颗粒对吧？它是能力比较strong那种，你自己感觉哪里角质层感觉厚就用它，效果特别好，慢慢揉，千万别太用力了，方法和洗面奶一样就可以的。 body polish是身体去角质乳，每次用完，皮肤光光滑滑的，白了许多，但不能用的太多，否则会把皮肤自身的保护层破坏，一周一次就好了。如果对付厚角质的地方，脚啦，肘啦等地方，就要先用scrub强力去一下，再用polish比较柔和的去一下，而且polish因为是乳液，还可以有滋养皮肤的成份。如果MM你想去比较薄的皮肤的角质，比较脸等地方，个人感觉polish就可以搞定啦！我自己用滴是strawberry body polish草莓身体去角质乳 和 pink grapefruit body scrub粉红葡萄柚身体磨砂，从国外带回来的。功能差不多的情况下，挑选polish和scrub时，肯定会挑花眼，那就选味道喜欢的好了。我每次都是先用polish以后，再打上shower gel按摩一会，再冲洗干净，我自己滴看法，希望对MM有用啦！^_^

检测底层对象是否一致，开启scrub和deep-scrub后性能会降低很多，因为在做scrub的时候，ceph会对这个chunk进行加锁，这个也就是为什么有slow request，读锁和写锁都会进行。 注： 测试以上参数优化后IO降低了40%左右 https://ceph.com/planet/关于scrub的详细分析和建议/

mask是面膜．scrub是去角质的！！！Facial Scrub是脸部去角质的～～～

你好，我是服装行业的，scrub没有特定的中文名对应，大家都是直接讲医院工作服，因为手术医生或护士，及其他进入到手术室都人都会穿。 Scrubs are the shirts and trousers or gowns worn by surgeons, midwives and other operating room personnel when sterilizing themselves, or "scrubbing in", before surgery.

scour重在冲刷 就是刷完了冲冲 冲完了再刷scrub重在擦 就是擦了又擦~

scrub [skru028cb]音标是k，但是念是念sg，因为在s间后面，相对的清浊辅音的音要掉换。比如t 念d，d念t；k念g，g念k；p念b，b念p；等。重音是在r的前面标示，读的时候是在u028c音那里读。因为只有一个元音，也就是只有一个音节，所以重音就标在元音前面，读在元音上。如果有两个或以上的元音，就要看音标中重音是标在那个元音前面来读了。这样说，希望能帮助你解决你的问题。

TLC有首歌叫 No scrubs，意思是不要小人物，个人觉得在俚语里应该就是指小人物的意思

有.scrub vt.& vi.用力擦洗 ,对…不予考虑; 取消n.擦洗俚语中有 擦洗者; 做苦工者的意思.同scrubman[美俚]做杂役的人.

基本概念 1、什么是 Scrub Scrub是 Ceph 集群副本进行数据扫描的操作，用于检测副本间数据的一致性，包括 scrub 和 deep-scrub。其中scrub 只对元数据信息进行扫描，相对比较快；而deep-scrub 不仅对元数据进行扫描，还会对存储的数据进行扫描，相对比较慢。 2、Scrub默认执行周期 OSD 的scrub 默认策略是每天到每周（如果集群负载大周期就是一周，如果集群负载小周期就是一天）进行一次，时间区域默认为全体（0时-24时），deep-scrub默认策略是每周一次。 配置scrub策略 为了避开客户业务高峰时段，建议在晚上0点到第二天早上5点之间，执行scrub 操作。 1、设置标识位 在任一monitor节点进行如下操作: 2、临时配置 先通过tell 方式，让scrub 时间区间配置立即生效，在任一monitor节点进行如下操作: 3、修改配置文件 为了保证集群服务重启或者节点重启依然有效，需要修改Ceph集群所有节点的配置文件 /etc/ceph/ceph.conf 添加以下区段配置： 注意: 该时间设置需要参考物理节点的时区设置 4、取消标识位 5、向 OSD {osd-num} 下达一个scrub命令. (用通配符 * 把命令下达到所有 OSD 。实测ceph 12.2.x版本不能加*) 6、设置 light scrub 周期 将osd_scrub_min_interval 和 osd_scrub_max_interval都设为4分钟,这里的单位是秒 7、通过命令手动启动scrub ： 8、尝试 pg repair 9、(Deep)Scrub的相关配置选项 同前端IO和Recovery一样，Ceph通过控制PGScrub来间接控制Scrub的所有IO优先级。

Scrub在化妆品中是磨砂膏的意思。磨砂膏是一款乳化型洁肤品，通常该产品内含有均匀、细微的颗粒。其主要用于去除皮肤深层的污垢，通过在皮肤上摩擦可使老化的鳞状角质剥起，除去死皮。scrub化妆品中的意思是什么?有很多化妆品上对英文的表示，对于中国的用户就不清楚死什么意思，接下来就让她时代的小编给大家详细解答一下。感兴趣的伙伴快来了解一下情况吧。scrub化妆品中的意思Scrub在化妆品中是磨砂膏的意思。磨砂膏是指含有均匀细微颗粒的乳化型洁肤品。其主要用于去除皮肤深层的污垢，通过在皮肤上摩擦可使老化的鳞状角质剥起，除去死皮。使用用磨砂膏注意事项在使用用磨砂膏时，按摩动作都一定要轻柔，同一部位按摩5次就可以了，不宜过多。如果用力过大也会伤害皮肤。并且在使用前，要保证脸上有足够的水分，以免过干而磨伤皮肤。磨砂膏适合肤质磨砂膏比较适合油性和混合性皮肤，干性皮肤慎用，过敏皮肤不能使用。有的部位角质过厚，也可以采用磨砂的方式来使肌肤光滑。如长有粉刺的部位，使用磨砂膏去除死皮也有助于油脂的顺利排出，有一定的治疗作用。磨砂膏可以天天用吗身体磨砂膏无论是什么肌肤，都不可以天天使用。因为身体磨砂膏里面含有磨砂颗粒，如果天天使用的话会给身体肌肤带来刺激，而且身体磨砂膏的作用是深度清洁，如果天天使用的话相当于天天在给肌肤进行深度清洁，很容易导致肌肤角质层变薄，让身体肌肤变得敏感脆弱，所以身体磨砂膏不能天天使用。以上介绍的关于scrub化妆品中的意思的内容，以及关于磨砂膏的使用方法和适合肤质，以及使用注意事项的解析，希望可以帮助大家更清楚怎么正确使用磨砂膏。

在OpenStack中，Scrub是一个自动化的数据清理工具，用于清除已删除实例的相关数据。当在OpenStack中删除实例时，实例的数据并不会立即被清除，而是被移动到一种称为“scrubbing”的过渡状态。在这个状态下，Scrub工具会自动清理实例的相关数据，包括虚拟硬盘、日志文件和元数据等。这可以帮助释放存储空间并提高系统性能。Scrub工具是OpenStack Compute服务的一部分，通过调用Compute API中的相关功能来执行数据清理操作。它可以自动执行清理操作，也可以手动执行清理操作以及查看清理日志。Scrub工具还支持对多个实例进行并行清理，提高了清理效率和速度。需要注意的是，Scrub工具只能清理已删除的实例的相关数据，对于未删除的实例数据无法进行清理。因此，需要在OpenStack中定期删除不再需要的实例，以便Scrub工具可以及时清理相关数据。

scrub是护士服。现代护士穿的多是“scrub”，即刷手服。这种衣服轻便、简单，拥有的各种颜色可以帮助大家辨识医院里复杂的角色，多种款式也让护士服显得既时尚又有趣。此外，它的中性设计也让女护士和男护士可以共同使用。简介：真正的护士服装应该起始于南丁格尔时代，也就是说，19世纪60年代始有护士服问世。南丁格尔首创护士服装时，以“清洁、整齐并利于清洗”为原则。样式虽有不同，却也大同小异。此后，世界各地的护士学校皆仿而行之。如美国许多护士学校的服装各具特点，样式不一，且要求在政府注册，彼此不准仿制，并规定不许着护士服上街或外出等。欧洲对护士服的限制则松宽得多。

scrub英 [skru028cb] 美 [skru028cb] vt.& vi.用力擦洗，刷洗; 取消（原有安排）vt.对…不予考虑，取消; 使净化，用力擦洗n.灌木丛，矮树丛; 矮小的人; 擦，擦洗第三人称单数： scrubs 复数： scrubs 现在分词： scrubbing 过去式： scrubbed 过去分词： scrubbed

……………………百度百科有 - - 打开就是。

是啊百度百科都有的还蛮全的

歌名：Talk That所属专辑：《TALK THAT》发行时间：2012.12.04歌手：secret韩文歌词：D DD DD DD DD DD DD DD Duadf8ub9ccud574 uadf8ub9ccud574 uc81cubc1cTalk that talk that talk thatTalk that talk that talk thatuc5b4ub5bbuac8c ub124uac00 uc774ub7f4 uc218 uc788ub294uc9c0 ub0b4uac00 uc774ub807uac8c uc544ud30cuc57c ud558ub294uc9c0ub0b4 uc0dduac01uc744 ub10c ud558uae30ub294 ud55cuac74uc9c0 ub0b4uac00 uc6b0uc2a4uc6b4uc9c0uadf8ub798 ub4e4uc5b4uc904uac8c uc5b4ucc28ud53c ub2e4 uac70uc9d3uc774uaca0uc9c0ub9cc uadf8ub798 uc6c3uc5b4uc904uac8c ub124uac00 ub180ub358 uadf8 uc5ecuc790ub4e4ucc98ub7fc uadf8ub807uac8c(Talk that) ub9d0ub3c4 uc548 ub418ub294 uc18cub9ac ud574ubd10(Talk that) ubbffuc744 uac70ub780 uc0dduac01ud558uc9c0 ub9c8(Talk that) ub124uac00 ud55c ub9d0 ubaa8ub450 ud5dbuc18cub9ac uc18cub9ac uc18cub9acub2c8uae4c(Talk that) uc788ub294ub300ub85c ub0b4uac8c ub9d0ud574ubd10(Talk that) ub098ub97c uadf8ub9cc uac00uc9c0uace0 ub180uc544(Talk that) ub0b4uac8c ud55c ub9d0 uc804ubd80 ud5dbuc18cub9ac uc18cub9ac uc18cub9ac uac19uc544 ub108Talk that talk that talk that Talk that talk that talk thatucc98uc74cubd80ud130 ub2e4 ub611uac19uc740 uac70uc9d3ub9d0 uc9c4uc2ecuc774uc5c8ub2e8 ub9d0uc740 ud558uc9c0ub3c4 ub9c8uc774uc820 ub110 ubbffuae30 ud798ub4e4 uac83 uac19uc544 ub098. ub0b4uac00 uc6b0uc2a4uc6b4uc9c0uadf8ub798 ub4e4uc5b4uc904uac8c uc54cuace0 uc788ub294 ubcc0uba85uc77c ud14cuc9c0ub9ccuadf8ub798 uc6c3uc5b4uc904uac8c uc774uc81c uadf8ub9cc uaebcuc838uc904ub798 uc0c1uad00 uc548 ud560uac8c(Talk that) ub9d0ub3c4 uc548 ub418ub294 uc18cub9ac ud574ubd10(Talk that) ubbffuc744 uac70ub780 uc0dduac01ud558uc9c0 ub9c8(Talk that) ub124uac00 ud55c ub9d0 ubaa8ub450 ud5dbuc18cub9ac uc18cub9ac uc18cub9acub2c8uae4c(Talk that) uc788ub294ub300ub85c ub0b4uac8c ub9d0ud574ubd10(Talk that) ub098ub97c uadf8ub9cc uac00uc9c0uace0 ub180uc544(Talk that) ub0b4uac8c ud55c ub9d0 uc804ubd80 ud5dbuc18cub9ac uc18cub9ac uc18cub9ac uac19uc544 ub108..ub0b4uac8c ub610 ub9d0uc744 ud558uc9c0ub9cc ub4e3uae30 uc2ebuc5b4 uadf8ub9ccud574 ub2e4 Don"t say my nameDon"t say my nameDon"t say my nameTalk that talk that talk thatTalk that talk that talk that uc81cubc1c(Talk that) ub9d0ub3c4 uc548 ub418ub294 uc18cub9ac ud574ubd10(Talk that) ubbffuc744 uac70ub780 uc0dduac01ud558uc9c0 ub9c8(Talk that) ub124uac00 ud55c ub9d0 ubaa8ub450 ud5dbuc18cub9ac uc18cub9ac uc18cub9acub2c8uae4c(Talk that) uc788ub294ub300ub85c ub0b4uac8c ub9d0ud574ubd10(Talk that) ub098ub97c uadf8ub9cc uac00uc9c0uace0 ub180uc544(Talk that) ub0b4uac8c ud55c ub9d0 uc804ubd80 ud5dbuc18cub9ac uc18cub9ac uc18cub9ac uac19uc544 ub108..Talk that talk that talk thatTalk that talk that talk that中文歌词：Da Da Da Da Da Da Da……Talk that talk that talk that……智恩：停止吧 停止吧 拜托善花：你怎么能这样子 让我如此痛苦你到底有没有想过我 还是我太可笑Zinger：好吧 我听你说 孝盛：反正都不是真心话 Zinger：好吧 笑给你看智恩：就像你玩弄过的那些女人一样孝盛：（Talk That）尽管胡说八道试试吧（Talk That）别妄想我会再相信（Talk That）因为你说的全部都是废话 废话 废话智恩：（Talk That）向我如实交代试试吧（Talk That）别再打算玩弄我（Talk That）对我说的一切都如同废话 废话 废话的你Talk that talk that talk that……Zinger ：从一开始就是一样的谎话 别再说你是真心的从今开始难以再相信你的我 真的很可笑善花：好吧 我听你说孝盛：虽然知道你只是在辩解善花：好吧 笑给你看智恩：现在拜托给我滚吧 一切与我无关孝盛：（Talk That）尽管胡说八道试试吧（Talk That）别想着我会再相信（Talk That）因为你说的全部都是废话 废话 废话智恩：（Talk That）向我如实交代试试吧（Talk That）别再打算玩弄我（Talk That）对我说的一切都如同废话 废话 废话的你 智恩：别再跟我说话 我不想听 一切到此为止善花：Don"t say my nameZinger：Don"t say my name 孝盛：Don"t say my nameTalk that talk that talk that…… 拜托 孝盛：（Talk That）尽管胡说八道试试吧（Talk That）别想着我会再相信（Talk That）因为你说的全部都是废话 废话 废话 智恩：（Talk That）向我如实交代试试吧（Talk That）别再打算玩弄我（Talk That）对我说的一切都如同废话 废话 废话的你Talk that talk that talk that罗马音译：D dd dd dd dD dd dd dd dGeumanhae geumanhae jebal[All] Talk that talk that talk thatTalk that talk that talk that[Sunhwa] Eotteoke nega ireol su inneunji naega ireoke apaya haneunjiNae saenggageul neon hagineun hangeonji naega useuunji[Zinger] Geurae deureojulge [Hyosung]eochapi da geojisigetjiman[Zinger] Geurae useojulge [Jieun] neganoldeon geu yeojadeulcheoreom geureoke(Talk that) [Hyosung] maldo an doeneun sori haebwa(Talk that) [Hyosung] mideul georan saenggakhaji ma(Talk that) [Hyosung] nega han mal modu heossori sori sorinikka(Talk that) [Jieun] inneundaero naege malhaebwa(Talk that) [Jieun] nareul geuman gajigo nora(Talk that) [Jieun] naege han mal jeonbu heossori sori sori gata neo[All] Talk that talk that talk thatTalk that talk that talk that[Zinger] Cheoeumbuteo da ttokgateun geojitmal jinsimieotdan mareun hajidomaIjen neol mitgi himdeul geot gata na. Naega useuunji[Sunhwa] Geurae deureojulge [Hyosung] algo inneun byeonmyeongil tejiman[Sunhwa] Geurae useojulge [Jieun] ije geuman kkeojyeojullae sanggwan an halge(Talk that) [Hyosung] maldo an doeneun sori haebwa(Talk that) [Hyosung] mideul georan saenggakhaji ma(Talk that) [Hyosung] nega han mal modu heossori sori sorinikka(Talk that) [Jieun] inneundaero naege malhaebwa(Talk that) [Jieun] nareul geuman gajigo nora(Talk that) [Jieun] naege han mal jeonbu heossori sori sori gata neo..[Jieun] Naege tto mareul hajiman deutgi sirheo geumanhae da[Sunhwa] Don"t say my name[Zinger] Don"t say my name[Hyosung] Don"t say my name[All] Talk that talk that talk thatTalk that talk that talk that [Jieun] jebal(Talk that) [Hyosung] maldo an doeneun sori haebwa(Talk that) [Hyosung] mideul georan saenggakhaji ma(Talk that) [Hyosung] nega han mal modu heossori sori sorinikka(Talk that) [Jieun] inneundaero naege malhaebwa(Talk that) [Jieun] nareul geuman gajigo nora(Talk that) [Jieun] naege han mal jeonbu heossori sori sori gata neo..[All] Talk that talk that talk thatTalk that talk that talk that

优点：1.弹性很好，旋转很好。2.强力攻击性。3.在拉弧圈时表现出色。缺点：1.防守要加强，建议反手用蝴蝶2.底板太差，可以换成斯地卡或蝴蝶。

无明显同源性。 引物量： 每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以最低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。 酶及其浓度 目前有两种Taq DNA聚合酶供应， 一种是从栖热水生杆菌中提纯的天然酶，另一种为大肠菌合成的基因工程酶。催化一典型的PCR反应约需酶量2.5U(指总反应体积为100ul时)，浓度过高可引起非特异性扩增，浓度过低则合成产物量减少。 dNTP的质量与浓度 dNTP的质量与浓度和PCR扩增效率有密切关系，dNTP粉呈颗粒状，如保存不当易变性失去生物学活性。dNTP溶液呈酸性，使用时应配成高浓度后，以1M NaOH或1M Tris。HCL的缓冲液将其PH调节到7.0～7.5，小量分装， -20℃冰冻保存。多次冻融会使dNTP降解。在PCR反应中，dNTP应为50～200umol/L，尤其是注意4种dNTP的浓度要相等( 等摩尔配制)，如其中任何一种浓度不同于其它几种时(偏高或偏低)，就会引起错配。浓度过低又会降低PCR产物的产量。dNTP能与Mg2+结合，使游离的Mg2+浓度降低。 模板(靶基因)核酸 模板核酸的量与纯化程度，是PCR成败与否的关键环节之一，传统的DNA纯化方法通常采用SDS和蛋白酶K来消化处理标本。 SDS的主要功能是： 溶解细胞膜上的脂类与蛋白质，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜，并解离细胞中的核蛋白，SDS 还能与蛋白质结合而沉淀；蛋白酶K能水解消化蛋白质，特别是与DNA结合的组蛋白，再用有机溶剂酚与氯仿抽提掉蛋白质和其它细胞组份，用乙醇或异丙醇沉淀 核酸。提取的核酸即可作为模板用于PCR反应。一般临床检测标本，可采用快速简便的方法溶解细胞，裂解病原体，消化除去染色体的蛋白质使靶基因游离，直接 用于PCR扩增。RNA模板提取一般采用异硫氰酸胍或蛋白酶K法，要防止RNase降解RNA。 Mg2+浓度 Mg2+对PCR扩增的特异性和产量有显著的影响，在一般的PCR反应中，各种dNTP浓度为200umol/L时，Mg2+浓度为1.5～2.0mmol/L为宜。Mg2+浓度过高，反应特异性降低，出现非特异扩增，浓度过低会降低Taq DNA聚合酶的活性，使反应产物减少。 PCR反应条件的选择 PCR反应条件为温度、时间和循环次数。 温度与时间的设置： 基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法，双链DNA在90～95℃变性，再迅速冷却至40 ～60℃，引物退火并结合到靶序列上，然后快速升温至70～75℃，在Taq DNA 聚合酶的作用下，使引物链沿模板延伸。对于较短靶基因(长度为100～300bp时)可采用二温度点法， 除变性温度外、退火与延伸温度可合二为一，一般采用94℃变性，65℃左右退火与延伸(此温度Taq DNA酶仍有较高的催化活性)。 ①变性温度与时间：变性温度低，解链不完全是导致PCR失败的最主要原因。一般情况下，93℃～94℃lmin足以使模板DNA变性，若低于93℃则 需延长时间，但温度不能过高，因为高温环境对酶的活性有影响。此步若不能使靶基因模板或PCR产物完全变性，就会导致PCR失败。 ②退火(复性)温度与时间：退火温度是影响PCR特异性的较重要因素。变性后温度快速冷却至40℃～60℃，可使引物和模板发生结合。由于模板DNA 比引物复杂得多，引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞。退火温度与时间，取决于引物的长度、碱基组成及其浓度，还有靶基序列的长 度。对于20个核苷酸，G+C含量约50%的引物，55℃为选择最适退火温度的起点较为理想。引物的复性温度可通过以下公式帮助选择合适的温度： Tm值(解链温度)=4(G+C)＋2(A+T) 复性温度=Tm值-(5～10℃) 在Tm值允许范围内， 选择较高的复性温度可大大减少引物和模板间的非特异性结合，提高PCR反应的特异性。复性时间一般为30～60sec，足以使引物与模板之间完全结合。 ③延伸温度与时间：Taq DNA聚合酶的生物学活性： 70～80℃ 150核苷酸/S/酶分子 70℃ 60核苷酸/S/酶分子 55℃ 24核苷酸/S/酶分子 高于90℃时， DNA合成几乎不能进行。 PCR反应的延伸温度一般选择在70～75℃之间，常用温度为72℃，过高的延伸温度不利于引物和模板的结合。PCR延伸反应的时间，可根据待扩增片段的长度而定，一般1Kb以内的DNA片段，延伸时间1min是足够 的。3～4kb的靶序列需3～4min；扩增10Kb需延伸至15min。延伸进间过长会导致非特异性扩增带的出现。对低浓度模板的扩增，延伸时间要稍长些。 循环次数 循环次数决定PCR扩增程度。PCR循环次数主要取决于模板DNA的浓度。一般的循环次数选在30～40次之间，循环次数越多，非特异性产物的量亦随之增多。 PCR反应特点 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为： ①引物与模板DNA特异正确的结合； ②碱基配对原则； ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性； ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。 灵敏度高 PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中最小检出率为3个细菌。 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活组织等粗制的DNA扩增检测。 PCR扩增产物分析 PCR产物是否为特异性扩增 ，其结果是否准确可靠，必须对其进行严格的分析与鉴定，才能得出正确的结论。PCR产物的分析，可依据研究对象和目的不同而采用不同的分析方法。 凝胶电泳分析：PCR产物电泳，EB溴乙锭染色紫外仪下观察，初步判断产物的特异性。PCR产物片段的大小应与预计的一致，特别是多重PCR，应用多对引物，其产物片断都应符合预讦的大小，这是起码条件。 琼脂糖凝胶电泳： 通常应用1～2%的琼脂糖凝胶，供检测用。 聚丙烯酰胺凝胶电泳：6～10%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离效果比琼脂糖好，条带比较集中，可用于科研及检测分析。 酶切分析：根据PCR产物中限制性内切酶的位点，用相应的酶切、电泳分离后，获得符合理论的片段，此法既能进行产物的鉴定，又能对靶基因分型，还能进行变异性研究。 分子杂交：分子杂交是检测PCR产物特异性的有力证据，也是检测PCR 产物碱基突变的有效方法。 Southern印迹杂交： 在两引物之间另合成一条寡核苷酸链(内部寡核苷酸)标记后做探针，与PCR产物杂交。此法既可作特异性鉴定，又可以提高检测PCR产物的灵敏度，还可知其分子量及条带形状，主要用于科研。 斑点杂交： 将PCR产物点在硝酸纤维素膜或尼膜薄膜上，再用内部寡核苷酸探针杂交，观察有无着色斑点，主要用于PCR产物特异性鉴定及变异分析。 核酸序列分析：是检测PCR产物特异性的最可

因为里面有空气，空气里的水分遇冷就结冰了。

PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性，不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①模板中含有杂蛋白质，②模板中含有Taq酶抑制剂，③模板中蛋白质没有消 化除净，特别是染色体中的组蛋白，④在提取制备模板时丢失过多，或吸入酚。⑤模 板核酸变性不彻底。在酶和引物质量好时，不出现扩增带，极有可能是标本的消化处 理，模板核酸提取过程出了毛病，因而要配制有效而稳定的消化处理液，其程序亦应 固定不宜随意更改。 酶失活：需更换新酶，或新旧两种酶同时使用，以分析是否因酶的活性丧失或不够而 导致假阴性。需注意的是有时忘加Taq酶或溴乙锭。 引物：引物质量、引物的浓度、两条引物的浓度是否对称，是PCR失败或扩增条带不 理想、容易弥散的常见原因。有些批号的引物合成质量有问题，两条引物一条浓度 高，一条浓度低，造成低效率的不对称扩增，对策为：①选定一个好的引物合成单 位。②引物的浓度不仅要看OD值，更要注重引物原液做琼脂糖凝胶电泳，一定要有 引物条带出现，而且两引物带的亮度应大体一致，如一条引物有条带，一条引物无条 带，此时做PCR有可能失败，应和引物合成单位协商解决。如一条引物亮度高，一条 亮度低，在稀释引物时要平衡其浓度。③引物应高浓度小量分装保存，防止多次冻融 或长期放冰箱冷藏部分，导致引物变质降解失效。④引物设计不合理，如引物长度不 够，引物之间形成二聚体等。 Mg2+浓度：Mg2+离子浓度对PCR扩增效率影响很大，浓度过高可降低PCR扩增的特 异性，浓度过低则影响PCR扩增产量甚至使PCR扩增失败而不出扩增条带。 反应体积的改变：通常进行PCR扩增采用的体积为20ul、30ul、50ul。或100ul，应用多 大体积进行PCR扩增，是根据科研和临床检测不同目的而设定，在做小体积如20ul 后，再做大体积时，一定要模索条件，否则容易失败。 物理原因：变性对PCR扩增来说相当重要，如变性温度低，变性时间短，极有可能出 现假阴性;退火温度过低，可致非特异性扩增而降低特异性扩增效率退火温度过高影 响引物与模板的结合而降低PCR扩增效率。有时还有必要用标准的温度计，检测一下 扩增仪或水溶锅内的变性、退火和延伸温度，这也是PCR失败的原因之一。 靶序列变异：如靶序列发生突变或缺失，影响引物与模板特异性结合，或因靶序列某 段缺失使引物与模板失去互补序列，其PCR扩增是不会成功的。 假阳性 出现的PCR扩增条带与目的靶序列条带一致，有时其条带更整齐，亮度更高。 引物设计不合适：选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性，因而在进行PCR扩增 时，扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短，容易出现假阳 性。需重新设计引物。 靶序列或扩增产物的交叉污染：这种污染有两种原因：一是整个基因组或大片段的交 叉污染，导致假阳性。这种假阳性可用以下方法解决：①操作时应小心轻柔，防止 将靶序列吸入加样枪内或溅出离心管外。②除酶及不能耐高温的物质外，所有试剂或 器材均应高压消毒。所用离心管及样进枪头等均应一次性使用。③必要时，在加标本 前，反应管和试剂用紫外线照射，以破坏存在的核酸。二是空气中的小片段核酸污 染，这些小片段比靶序列短，但有一定的同源性。可互相拼接，与引物互补后，可扩 增出PCR产物，而导致假阳性的产生，可用巢式PCR方法来减轻或消除。 出现非特异性扩增带 PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致，或大或小，或者同时出现特异性扩增带 与非特异性扩增带。非特异性条带的出现，其原因：一是引物与靶序列不完全互补、 或引物聚合形成二聚体。二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低，及PCR循环次数 过多有关。其次是酶的质和量，往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一来源的酶 则不出现，酶量过多有时也会出现非特异性扩增。其对策有：①必要时重新设计引 物。②减低酶量或调换另一来源的酶。③降低引物量，适当增加模板量，减少循环次 数。④适当提高退火温度或采用二温度点法(93℃变性，65℃左右退火与延伸)。 出现片状拖带或涂抹带 PCR扩增有时出现涂抹带或片状带或地毯样带。其原因往往由于酶量过多或酶的质量 差，dNTP浓度过高，Mg2+浓度过高，退火温度过低，循环次数过多引起。其对策有：①减少酶量，或调换另一来源的酶。②减少dNTP的浓度。③适当降低Mg2+浓 度。④增加模板量，减少循环次数。 克隆PCR产物的最优条件是什么？ 最佳插入片段：载体比需实验确定。1：1（插入片段：载体）常为最佳比，摩尔数比1：8或8：1也行。应测定比值范围。连接用5ul 2X连接液, 50ng质粒DNA,1Weiss单位的T4连接酶，插入片段共10ul。室温保温1小时，或4oC过夜。在这2种温度下，缺T-凸出端的载体会自连，产生蓝斑。室温保温1小时能满足大多数克隆要求，为提高连接效率，需4oC过夜。 PCR产物是否需要用凝胶纯化？ 如凝胶分析扩增产物只有一条带，不需要用凝胶纯化。如可见其他杂带，可能是积累了大量引物的二聚体。少量的引物二聚体的摩尔数也很高，这会产生高比例的带有引物二聚体的克隆，而非目的插入片段。为此需在克隆前做凝胶纯化。 如果没有回收到目的片段，还需要作什么对照实验？ A）涂布未转化的感受态细胞。如有菌落，表明氨苄失效，或污染上带有氨苄抗型的质粒，或产生氨苄抗型的菌落。 B）转化完整质粒，计算菌落生长数，测定转化效率。例如，将1ug/ul质粒1:100稀释,1ul用于100ul感受态细胞转化。用SOC稀释到1000ul后，用100ul铺板。培养过夜，产生1000个菌落。转化率为： 产生菌落的总数/铺板DNA的总量。铺板DNA的总量是转化反应所用的量除以稀释倍数。具体而言转化用10ng DNA，用SOC稀释到1000u后含10 ng DNA，用1/10铺板，共用1 ng DNA。转化率为：1000克隆X10（3次方） ng /铺板1 ng DNA ug=10（6次方）cfu/ ug转化pGEM-T应用10（8次方）cfu/ ug感受态细胞如没有菌落或少有菌落，感受态细胞的转化率太低。 C）如用pGEM-T正对照，或PCR产物，产生>20-40蓝斑（用指定步骤10（8次方）cfu/ ug感受态细胞），表明载体失去T。可能是连接酶污染了核酸酶。T4 DNA连接酶（M1801，M1804，M1794）质量标准好无核酸酶污染，不应用其它来源的T4 DNA连接酶替换。 D）用pGEM-T或pGEM-T Easy载体，连接pGEM-T正对照，转化高频率感受态细胞（10（8次方）cfu/ug）,按照指定的实验步骤，可得100个菌落，其中60%应为白斑，如产生>20-40蓝斑, 没有菌落或少有菌落，连接有问题。 对照实验结果好，却没有回收到目的片段，实验出了什么问题？ A）连接用室温保温1小时，能满足大多数克隆，为提高效率，需4oC过夜。 B）插入片段带有污染，使3`-T缺失，或抑制连接，抑制转化。为此，将插入片段和pGEM-T正对照混合，再连接。如降低了对照的菌落数，插入片段需纯化，或重新制备。如产生大量的蓝斑，插入片段污染有核酸酶，使pGEM-T或pGEM-T Easy载体3`-T缺失。 C）插入片段不适于连接。用凝胶纯化的插入片段，因受UV过度照射，时有发生。UV过度照射会产生嘧啶二聚体，不利于连接，DNA必需重新纯化。 D）带有修复功能的耐热DNA聚合酶的扩增产物末端无A，后者是pGEM-T或pGEM-T Easy载体克隆所需。加Taq DNA聚合酶和核苷酸可在末端加A。详情查pGEM-T pGEM-T Easy载体技术资料（TM042）。 E）高度重复序列可能会不稳定，在扩增中产生缺失和重排，如发现插入片段高频率地产生缺失和重排，需用重组缺陷大肠杆菌菌株，如SURE细胞

引物为聚合酶提供指导，聚合酶直接合成DNA。

博凌科为的产品都挺好的，很多实验室都在用，这个品牌挺值得信赖的！■ 显著提高PCR 反应的特异性和灵敏度，还能有效扩增GC 含量高、二级结构等复杂模板。最低可扩增2 个拷贝的目的模板，使实验结果更加精确。■ 独创的Taq MasterMix 配方使整个反应体系非常稳定，多次冻融或长期放于4℃亦不会影响活性。■ 稳定高效预配好的PCR 混合液快速简便，大大降低劳动强度和取样误差，而且加入了高性能的PCR 增强剂和优化剂，降低了对PCR 条件的要求。■ 分成含染料和不含染料两种体系。含染料的MasterMix 产品在PCR结束后可以直接电泳，无需加入上样缓冲液。质量控制检测经检测无外源核酸酶活性；PCR 方法检测无宿主DNA残留；能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因；室温存放一周，无明显活性改变。产品稳定性一管便捷式PCR MasterMix系列所有产品在-20℃条件下可保存一年以上，多次冻融或长期放于4℃不影响活性。4℃放置三个月，无明显活性改变。保存条件: -20℃可长期保存，多次冻融不会影响活性。如需经常使用，可存放于4℃

为了完成任务~~~~

会生成粘性末端

Taq聚合酶是一种耐热的DNA聚合酶, Taq聚合酶的缺点之一为催化DNA合成时的相对低保真性. 它缺乏3"→5"核酸外切酶的即时校正机制,出错率为1/9000. 不过PCR的反应都是在冰上进行的, Taq聚合酶也是比较容易降解的,是最后一步加入的.

楼上第一点：不赞同，PCR的酶是比较稳定的，过去的酶，没有热启动功能，先加会导致非特异扩增或更多引物二聚体，后加是尽量保证扩增的是目的片段和更少的二聚体，现在的基本都有热启动功能所以无所谓了第二点：认同，其他常用的解释是便宜的加错无所谓。

Taq DNA聚合酶是第一个被发现的耐高温DNA聚合酶

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无明显同源性。 引物量： 每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以最低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。 酶及其浓度 目前有两种Taq DNA聚合酶供应， 一种是从栖热水生杆菌中提纯的天然酶，另一种为大肠菌合成的基因工程酶。催化一典型的PCR反应约需酶量2.5U(指总反应体积为100ul时)，浓度过高可引起非特异性扩增，浓度过低则合成产物量减少。 dNTP的质量与浓度 dNTP的质量与浓度和PCR扩增效率有密切关系，dNTP粉呈颗粒状，如保存不当易变性失去生物学活性。dNTP溶液呈酸性，使用时应配成高浓度后，以1M NaOH或1M Tris。HCL的缓冲液将其PH调节到7.0～7.5，小量分装， -20℃冰冻保存。多次冻融会使dNTP降解。在PCR反应中，dNTP应为50～200umol/L，尤其是注意4种dNTP的浓度要相等( 等摩尔配制)，如其中任何一种浓度不同于其它几种时(偏高或偏低)，就会引起错配。浓度过低又会降低PCR产物的产量。dNTP能与Mg2+结合，使游离的Mg2+浓度降低。 模板(靶基因)核酸 模板核酸的量与纯化程度，是PCR成败与否的关键环节之一，传统的DNA纯化方法通常采用SDS和蛋白酶K来消化处理标本。 SDS的主要功能是： 溶解细胞膜上的脂类与蛋白质，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜，并解离细胞中的核蛋白，SDS 还能与蛋白质结合而沉淀；蛋白酶K能水解消化蛋白质，特别是与DNA结合的组蛋白，再用有机溶剂酚与氯仿抽提掉蛋白质和其它细胞组份，用乙醇或异丙醇沉淀 核酸。提取的核酸即可作为模板用于PCR反应。一般临床检测标本，可采用快速简便的方法溶解细胞，裂解病原体，消化除去染色体的蛋白质使靶基因游离，直接 用于PCR扩增。RNA模板提取一般采用异硫氰酸胍或蛋白酶K法，要防止RNase降解RNA。 Mg2+浓度 Mg2+对PCR扩增的特异性和产量有显著的影响，在一般的PCR反应中，各种dNTP浓度为200umol/L时，Mg2+浓度为1.5～2.0mmol/L为宜。Mg2+浓度过高，反应特异性降低，出现非特异扩增，浓度过低会降低Taq DNA聚合酶的活性，使反应产物减少。 PCR反应条件的选择 PCR反应条件为温度、时间和循环次数。 温度与时间的设置： 基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法，双链DNA在90～95℃变性，再迅速冷却至40 ～60℃，引物退火并结合到靶序列上，然后快速升温至70～75℃，在Taq DNA 聚合酶的作用下，使引物链沿模板延伸。对于较短靶基因(长度为100～300bp时)可采用二温度点法， 除变性温度外、退火与延伸温度可合二为一，一般采用94℃变性，65℃左右退火与延伸(此温度Taq DNA酶仍有较高的催化活性)。 ①变性温度与时间：变性温度低，解链不完全是导致PCR失败的最主要原因。一般情况下，93℃～94℃lmin足以使模板DNA变性，若低于93℃则 需延长时间，但温度不能过高，因为高温环境对酶的活性有影响。此步若不能使靶基因模板或PCR产物完全变性，就会导致PCR失败。 ②退火(复性)温度与时间：退火温度是影响PCR特异性的较重要因素。变性后温度快速冷却至40℃～60℃，可使引物和模板发生结合。由于模板DNA 比引物复杂得多，引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞。退火温度与时间，取决于引物的长度、碱基组成及其浓度，还有靶基序列的长 度。对于20个核苷酸，G+C含量约50%的引物，55℃为选择最适退火温度的起点较为理想。引物的复性温度可通过以下公式帮助选择合适的温度： Tm值(解链温度)=4(G+C)＋2(A+T) 复性温度=Tm值-(5～10℃) 在Tm值允许范围内， 选择较高的复性温度可大大减少引物和模板间的非特异性结合，提高PCR反应的特异性。复性时间一般为30～60sec，足以使引物与模板之间完全结合。 ③延伸温度与时间：Taq DNA聚合酶的生物学活性： 70～80℃ 150核苷酸/S/酶分子 70℃ 60核苷酸/S/酶分子 55℃ 24核苷酸/S/酶分子 高于90℃时， DNA合成几乎不能进行。 PCR反应的延伸温度一般选择在70～75℃之间，常用温度为72℃，过高的延伸温度不利于引物和模板的结合。PCR延伸反应的时间，可根据待扩增片段的长度而定，一般1Kb以内的DNA片段，延伸时间1min是足够 的。3～4kb的靶序列需3～4min；扩增10Kb需延伸至15min。延伸进间过长会导致非特异性扩增带的出现。对低浓度模板的扩增，延伸时间要稍长些。 循环次数 循环次数决定PCR扩增程度。PCR循环次数主要取决于模板DNA的浓度。一般的循环次数选在30～40次之间，循环次数越多，非特异性产物的量亦随之增多。 PCR反应特点 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为： ①引物与模板DNA特异正确的结合； ②碱基配对原则； ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性； ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。 灵敏度高 PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中最小检出率为3个细菌。 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活组织等粗制的DNA扩增检测。 PCR扩增产物分析 PCR产物是否为特异性扩增 ，其结果是否准确可靠，必须对其进行严格的分析与鉴定，才能得出正确的结论。PCR产物的分析，可依据研究对象和目的不同而采用不同的分析方法。 凝胶电泳分析：PCR产物电泳，EB溴乙锭染色紫外仪下观察，初步判断产物的特异性。PCR产物片段的大小应与预计的一致，特别是多重PCR，应用多对引物，其产物片断都应符合预讦的大小，这是起码条件。 琼脂糖凝胶电泳： 通常应用1～2%的琼脂糖凝胶，供检测用。 聚丙烯酰胺凝胶电泳：6～10%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离效果比琼脂糖好，条带比较集中，可用于科研及检测分析。 酶切分析：根据PCR产物中限制性内切酶的位点，用相应的酶切、电泳分离后，获得符合理论的片段，此法既能进行产物的鉴定，又能对靶基因分型，还能进行变异性研究。 分子杂交：分子杂交是检测PCR产物特异性的有力证据，也是检测PCR 产物碱基突变的有效方法。 Southern印迹杂交： 在两引物之间另合成一条寡核苷酸链(内部寡核苷酸)标记后做探针，与PCR产物杂交。此法既可作特异性鉴定，又可以提高检测PCR产物的灵敏度，还可知其分子量及条带形状，主要用于科研。 斑点杂交： 将PCR产物点在硝酸纤维素膜或尼膜薄膜上，再用内部寡核苷酸探针杂交，观察有无着色斑点，主要用于PCR产物特异性鉴定及变异分析。 核酸序列分析：是检测PCR产物特异性的最可

----Taq DNA聚合酶 在 PCR 反应中，毫无疑问的DNA聚合酶是最关键的因素。PCR最初使用的DNA聚合酶是大肠杆菌DNA聚合酶 I的Klenow片段。但该酶存在很多缺陷，使之不能广为应用，比如：热稳定性差，每次DNA热变性后大部分酶都被灭活，需要重新加入，每个循环都要重新加入；Klenow酶反应温度较低，引物和模板容易形成非特异性配对，产生非特异性扩增。后来人们曾使用过T4DNA聚合酶和T7DNA聚合酶，两者虽使扩增特异性增加，且使DNA合成速度提高了，但是由于其对热的稳定性差而未能广泛应用。直到耐热的DNA聚合酶发现，才使得 PCR 技术得到迅速的发展和广泛的应用。 Taq DNA 聚合酶 是从一种嗜热水生菌Thermus aquaticus YT-1菌株中分离提纯得到的。是1969见从美国黄石国家森林公园火山温泉中分离得到的，它生长在70～75℃极富矿物质的环境中。 Taq DNA 聚合酶 基因全长为2496碱基，编码832个氨基酸，酶蛋白分子量为94KD。该酶在70～75℃时具有最高的生物活性。75～80℃条件下每一个酶蛋白分子每秒可延伸约150个碱基。70℃时，酶分子延伸速率每秒在60个碱基以上。温度降低时，延伸速率明显下降。55℃时为每秒22个碱基，37℃时约每秒1.5个碱基，22℃时约每秒0.25个碱基。当温度超过80℃时，合成速度也明显下降，这可能和引物或引物-模板复合物的稳定性遭到破坏有关。 Taq DNA 聚合酶 具有良好的热稳定性。曾有测试：在92.5℃、95℃、97.5℃下，Taq DNA 聚合酶的生物半衰期分别为130分钟、40分钟和5～6分钟。与大肠杆菌DNA聚合酶I相比较，Taq DNA 聚合酶具有5"→3"聚合酶活性和5"→3"外切酶活性，缺乏3"→5"外切酶活性。因此，在PCR反应中如果发生某些氨基酸的错配，这种酶是没有修正功能的。使用Taq DNA聚合酶的PCR反应出现碱基错配的几率为2.1×10-4左右。 和其他许多聚合酶一样，Taq DNA聚合酶是Mg2+依赖性酶，该酶的催化活性对Mg2+浓度非常敏感。以鲑鱼精子DNA为模板，dNTP的浓度为0.7～0.8 mmol/L时，用不同浓度Mg2+进行PCR反应10min，测定结果为MgCl2浓度在2.0 mmol/L时该酶催化活性最高，此浓度能最大限度地激活Taq DNA聚合酶的活性，Mg2+过高就抑制酶活性，当MgCl2浓度在10 mmol/L时可抑制40～50%的酶活性。由于Mg2+能与dNTP结合而影响PCR反应液中游离的Mg2+浓度，因而MgCl2的浓度在不同的反应体系中应适当调整。一般反应中Mg2+浓度至少应比dNTP总浓度高0.5～1.0mmol/L。另外适当浓度的KCl能使Taq DNA聚合酶的催化活性提高50～60%，其最适浓度为50mmol/L，高于75mmol/L时明显抑制该酶的活性。

投下一记孤注 定四海沉浮此心却寄予何处这江山谁主 才不算一场辜负冥冥之中轮回转昨世今生换半声叹相逢 相欠 去而复返仇怨作因缘成败似云烟聚复散天意如狂澜争拍岸云潼关 乱军前 掀惊涛一片撤身难 恨如绵 妄厮缠忆往昔悔太迟 谁情深如诗谁情薄如纸 谁作证这长天烈日我归去来辞 见谁夤夜绘相思是天谴是天赐 浮生如游丝为你夺乾坤社稷若前缘如洗 生有何欢死何惧深宵残梦里 温存桃花碎如雨封疆万里心如铁铸一寸河山一寸血杀伐 难歇 情真情切寒香随彩蝶若刹那因缘无生灭却爱恨同根谁能解两相知 豪情烈 心花空开谢杯酒尽 英雄血 永诀别便有情惊天地 结一世痴迷再不问悲喜 只问你心中千万缕断弦如何续 续完你我这结局风云改烟月寂 变幻帝王旗到头犹记曾相惜余生付一句 生若尽欢死无惧问世间情为何物 无人不臣服为你守护 百年家国荣枯纵然繁华成朝露 明珠化尘土至万劫不复 或粉身碎骨惟愿你知我 葬何处忆往昔悔太迟 谁情深如诗谁情薄如纸 谁作证这长天烈日我归去来辞 见谁夤夜绘相思是天谴是天赐 浮生如游丝为你夺乾坤社稷若前缘如洗 生有何欢死何惧便有情惊天地 结一世痴迷再不问悲喜 只问你心中千万缕断弦如何续 续完你我这结局风云改烟月寂 变幻帝王旗到头犹记曾相惜余生付一句 生若尽欢死无惧若情到荼蘼 爱恨参商月天西愿情动天地 执手千秋忘别离

为了确认在白斑里面确实是插入了目标片段。因为有的时候，可能插入的是非特异片段，所以筛完再确认一下。不然其他片段插进去，也是白斑，后续做实验就白做了。当然菌液PCR也不是最准确的，最后还是需要测序的。

--蓝白斑筛选过程中,T载体:DNA=1:4,DNA为PCR纯化产物,--如果是摩尔比没什么问题.其实只要目的片段摩尔数高于载体就会有很好的结果.但是如果产物量太大,则会有不良的效果. 根据你的问题 1：检测纯化产物.出了问题后纯化产物一定要走电泳查看,确认回收效率. 2：连接的产物量不用太大.3000bp的T载体如果用25ng,你的643bp产物用10~30ng足够了,这个量在凝胶上只是明确的条带而已, 3：检测感受态：感受态细胞如果是自己做的,也许会有杂菌.买来的也存在一定的几率.做一个空转对照,确认感受态不会有问题. 4：休克温度：42度即可,没必要45度.45秒没问题,实际上30~90秒都可以,我一般用45秒. 5：连接：4度过夜已经足够,除非你的片段很长. 6：蓝白斑筛选：有可能淡蓝色的蓝斑是你需要的克隆,如果你的克隆浅蓝色的斑很多,更可能是这样.一般效率高的话只有少于10%的蓝斑,效率一般则可能超过半数蓝斑甚至更多. 7：生长速度：关于生长速度你的概念是错误的,数百道数千bp的插入克隆生长速度不会差太多,不可以此作为依据.即使你转纯化的质粒克隆也会不一样大小.但是有插入的克隆会略略慢一点点. 8：再确认一下载体吧.

我觉得浓度应该影响不大，只要保证回收后有DNA就行，建议回收后跑一下胶看看，如果有条带就没问题。在就是看看平板抗性是否正确，感受态是否有问题等。还有就是我们都是16度连接过夜的，长的都很好啊，阳性比例挺高。

你挑的白斑，检测阳性，你凭什么说它是假阳性。提醒你注意一下，白斑是有插入片段的，蓝斑是空载体。

信贷机构。和中行没有业务往来。风险高。。和著名公司 credit suisse 名字相仿，深意自己理解。哈哈

更新1: 瑞信 ,以总资产值及第一级资本计，Credit　Suisse　Group是瑞士最大的银行集团之一，亦是全球最大的20个银行集团之一。 Credit　Suisse　Group的全资附属公司Credit　Suisse（CS）于二零零零年十一月二十四日中国香港金融管理局授予银行牌照。自一九八八年起，CS以代表办事处形式在中国香港运作。CS中国香港分行的主要业务为提供私人银行服务，包括存款和外汇、融资，以及投资顾问服务等。 HK office: Three Exchange Square 22nd Floor 8 Connaught Place, Central Hongkong Phone +852 2101 6000 ,

分类: 教育/科学 >> 外语学习 问题描述: 谁了解这家公司的？其特点是什么？ 解析: “第一波士顿”的名字源于1933年，当时波士顿第一国民银行的证券机构和大通国民银行的证券机构合并组成了第一波士顿公司，主要经营投行业务。到1988年，成立了现在的瑞士信贷第一波士顿公司，瑞士信贷拥有44.5%的股权。1996年，公司进行重组，原先第一波士顿的股东通过换股方式，放弃第一波士顿股权转而成为瑞士信贷股东，而瑞士信贷通过换股，取得了瑞士信贷第一波士顿公司的全部股权。自此，公司进一步演化为大型金融控股集团，利用多个专业子公司开始从事银行、证券、信托等多种金融业务。 瑞士信贷第一波士顿（CSFB）将被整合到母公司中，有着72年历史的“第一波士顿”品牌，将逐渐被放弃，集团力争到2007年把净利润提高至每年80亿瑞士法郎以上 国际投资银行瑞士信贷“第一波士顿”（CSFB， Credit Suisse First Boston）的品牌，到底还能用多久。关于这一点，答案也许只有奥斯瓦尔多格鲁贝尔（Oswald Grübel）心里清楚。这位瑞士信贷集团（Credit Suisse）的首席执行官，在12月7日宣布了对集团下属金融机构的整合计划。其中一项是，将其旗下的瑞士信贷第一波士顿（CSFB）整合到母公司中，有着72年历史的“第一波士顿”品牌，将逐渐被放弃。 “这一变化意味着，我们将以同一个面孔出现在客户面前。”格鲁贝尔说。但对于何时将最终弃用“第一波士顿”，他拒绝发表看法。 瑞士信贷称，今后它将继续开展有关合并、收购、IPO等业务，通过这次的调整，旨在更专注于自身优势领域，来提高集团的盈利，随之而来的也将会是对CSFB不超过300人的裁员。

的确不怎么样，上次在香港莎莎导购最爱推这个，知道为什么吗？楼上的回答有道理，还真是买回去才发现东西使用感太一般了严重怀疑是国内厂家贴标

如果随机号并不能当天用药，那么PFS怎么计算呢？有什么依据吗？

OS：总生存期（overall survival），PFS：无进展生存期（progression-free survival），DCR：疾病控制率(disease control rate)，ORR：客观缓解率（Objective Response Rate）OR：总缓解率 （overall response或者overall remission），PD：疾病进展（progression disease），MTD：最大耐受剂量(maximum tolerated dose)。

这可能是因为您的MT-Viki切换器的设置发生了变化。您可以尝试按照以下步骤进行解决：检查MT-Viki切换器的设置：您可以尝试进入MT-Viki切换器的设置页面，查看是否可以将切换方式改回"按两次scroll lock+方向上"。不同品牌的切换器设置方式可能不同，您可以参考产品说明书或联系客服获得帮助。检查鼠标设置：双击鼠标切换的行为通常与鼠标设置相关。您可以尝试在鼠标设置中查看是否启用了双击鼠标切换功能。如果是，请尝试将其禁用或更改为其他行为。重新安装驱动程序：如果以上方法都无效，您可以尝试重新安装MT-Viki切换器的驱动程序。有时候驱动程序可能会出现问题，导致切换器的功能出现异常。如果您仍然无法解决问题，建议您联系MT-Viki切换器的厂商或客服，获取更多的技术支持和帮助。

　　新媒体百科名片　　新媒体新媒体是新的技术支撑体系下出现的媒体形态，如数字杂志、数字报纸、数字广播、手机短信、移动电视、网络、桌面视窗、数字电视、数字电影、触摸媒体等。相对于报刊、户外、广播、电视四大传统意义上的媒体，新媒体被形象地称为“第五媒体”。　　目录　　简介　　何谓新媒体　　新媒体的特点新媒体特点介绍　　新媒体的优点　　聚焦几种新媒体手机媒体，开创媒体新时代　　IPTV，传受互动进行时　　数字电视，产业链有望增长　　移动电视，强制收视的是与非　　博客，颠覆传统的传播方式　　播客，新一代的广播　　新媒体产业在中国的发展　　简短结语新媒体在中国　　新媒体相关研究机构　　研究院机构设置　　手机电视台成立新媒体教育　　简介　　何谓新媒体　　新媒体的特点 新媒体特点介绍　　新媒体的优点　　聚焦几种新媒体 手机媒体，开创媒体新时代　　IPTV，传受互动进行时　　数字电视，产业链有望增长　　移动电视，强制收视的是与非　　博客，颠覆传统的传播方式　　播客，新一代的广播　　新媒体产业在中国的发展　　简短结语 新媒体在中国　　新媒体相关研究机构　　研究院机构设置　　手机电视台成立 新媒体教育　　展开 编辑本段简介　　美国《连线》杂志对新媒体的定义：“所有人对所有人的传播。” 清华大学新闻与传播学院熊澄宇教授：“在计算机信息处理技术基础之上出现和影响的媒体形态。” 上海戏剧学院新媒体领域陈永东副教授：“新媒体是相对于传统媒体而言的媒体及各种应用形式，目前主要有互联网媒体、掌上媒体、数字互动媒体、车载移动媒体、户外媒体及新媒体艺术等。” 新传媒产业联盟秘书长王斌：“新媒体是以数字信息技术为基础，以互动传播为特点、具有创新形态的媒体。” 新媒体　　分众传媒CEO江南春：“分众就是区分受众，分众传媒就是要面对一个特定的受众族群，而这个族群能够被清晰地描述和定义，这个族群恰好是某些商品或品牌的领先消费群或重度消费群。” 阳光文化集团首席执行官吴征：“相对于旧媒体，新媒体的第一个特点是它的消解力量——消解传统媒体(电视、广播、报纸、通信)之间的边界，消解国家与国家之间、社群之间、产业之间边界，消解信息发送者与接收者之间的边界，等等。” BlogBus副总裁兼首席运营官魏武挥的定义：“受众可以广泛且深入参与（主要是通过数字化模式）的媒体形式。” 中国传媒大学黄升民：构成新媒体的基本要素是基于网络和数字技术所构筑的三个无限，即需求无限、传输无限和生产无限。——社会关系层面的理解。 可以肯定的是“新传媒”是建立在数字技术和网络技术的基础之上，延伸出来的各种媒体形式。“新”最根本体现在技术上，也同时会体现在形式上，有些新媒体是崭新的，比如互联网；而有些是在旧媒体的基础上引进新技术后，新旧结合的媒体形式，比如电子报纸。 新媒体就是能对大众同时提供个性化的内容的媒体，是传播者和接受者融会成对等的交流者、而无数的交流者相互间可以同时进行个性化交流的媒体。 近两年来，随着科技的飞速发展，新媒体越来越受到人们的关注，成为人们议论的热门话题。新媒体在业界的繁荣也使得学界对其研究进一步加强，2005年新闻传播学核心期刊关于此论题的文章有数十篇之多，这些文章分别从不同的角度对新媒体进行了分析。　　编辑本段何谓新媒体　　对于新媒体的界定，学者们可谓众说纷纭，至今没有定论。一些传播学期刊上设有“新媒体”专栏，但 交互网络电视　　所刊载文章的研究对象也不尽相同，有数字电视、移动电视、手机媒体、IPTV等，还有一些刊物把博客、播客等也列入新媒体专栏。那么，到底什么是新媒体? 所谓新媒体是相对于传统媒体而言的，清华大学的熊澄宇教授认为，新媒体是一个不断变化的概念。“在今天网络基础上又有延伸，无线移动的问题，还有出现其他新的媒体形态，跟计算机相关的。这都可以说是新媒体”。 也有专家提出：“只要媒体构成的基本要素有别于传统媒体，才能称得上是新媒体。否则，最多也就是在原来的基础上的变形或改进提高。”“目前的新媒体应该定义为在电信网络基础上出现的媒体形态——包括使用有线和无线通道的方式。” 还有学者把新媒体定义为“互动式数字化复合媒体”。　　编辑本段新媒体的特点　　新媒体特点介绍　　较之于传统媒体，新媒体自然有它自己的特点。对此，吴征认为：“相对于旧媒体，新媒体的第一个特 电子杂志　　[1]点是它的消解力量——消解传统媒体(电视、广播、报纸、通信)之间的边界，消解国家与国家之间、社群之间、产业之间边界，消解信息发送者与接收者之间的边界，等等”。 周进指出，新媒体可以与受众真正建立联系，同时，它还具有交互性和跨时空的特点。同时，新媒体给媒体行业带来了许多新的理念和模式，如节目专业化越来越强，卖方市场转向买方市场等。 郭炜华认为：“新媒体与传统媒体最大的区别，在于传播状态的改变：由一点对多点变为多点对多点”。“从传播学的角度来分析，新媒体传播有四个特点——每个人都可以进行大众传播；‘信息"与‘意义"无关；受众的主动性大大增强；大众传播的‘小众化"”。 有研究者从另一个角度提出：“新媒体近乎于零费用信息发布，对受众多为免费，这对传统媒体的新闻产品制作成本造成挑战。”张毓强还以“伦敦爆炸案”为个案提出了新媒体的多媒体整合态势。“市民威廉·达顿拍摄了手机照片，在朋友的博客上以近乎于图片直播的方式‘报道"了灾难现场状况。这些照片很快进入各大电视网的新闻头条。在这次‘报道"中，手机、博客、互联网以及‘播客"密切配合，将‘第一时间、第一现场"权力牢牢抓在手中，新的媒体形式与媒体工具的结合，显示出了巨大威力”。　　新媒体的优点　　新媒体既拥有人际媒体和大众媒体的优点：完全个性化的信息可以同时送达几乎无数的人；每个参与者，不论是出版者、传播者、还是消费者，对内容拥有对等的和相互的控制。又免除了人际媒体和大众媒体的缺点：当传播者想向每个接受者个性化地交流独特的信息时，不再受一次只能针对一人的限制；当传播者想向大众同时交流时，不再不能针对每个接受者提供个性化内容。同时他指出新媒体完全依赖于技术，不是人类先天自然拥有的技能。没有数字化等技术，新媒体完全不可能。　　编辑本段聚焦几种新媒体　　手机媒体，开创媒体新时代　　杨春兰在她的文章指出：“如今的手机已不再单单是通讯工具，它还担当起了‘第五媒体"的重任”。 新媒体-手机报　　对手机广播的研究不外乎“政策支持”和“运营模式”的探索，有学者就此分析了其典型的运行模式，并且提出在手机媒体产业链中，“内容提供商、移动网络运营商和终端设备制造商之间，如何相互合作发展是非常关键的。” 还有研究者则着重在手机媒体与传统媒体之间的广告互动上进行了一些探讨，认为无论从技术上还是政策上来看，手机媒体成为新广告媒介具有一定的可能性，并分析了手机媒体与传统媒体广告之间的互动形式和广告互动中存在的不足。 对于手机电视的发展趋势，有学者却认为，尽管新技术的狂热崇拜者及追随者们，坚信手机电视是新技术催生下的又一颗金蛋，但手机电视受到受众心理、内容和媒介繁荣的制约，因此“手机电视是辅助媒介的主流想像”，“技术的指挥棒为人类指向的下一站，有可能是‘技术的高地"，也有可能是‘技术的漩涡"”。 有学者认为，“现在也许还没有人认为手机报纸的用户会赶上或超过报纸网络版或印刷版的读者数量。但是，手机报纸确实是用一种21世纪的方式向渴望得到新闻又忙于行路的公众提供了一种快乐阅读的享受”。　　IPTV，传受互动进行时　　IPTV即交互网络电视，一般是指通过互联网络，特别是宽带互联网络传播视频节目的服务形式。 互动性是IPTV的重要特征之一。有人指出，“IPTV用户不再是被动的信息接受者，可以根据需要有选择地收视节目内容”。 网络电视迅速发展的同时也暴露出了一些制度上的弊端。业界人士提出，“网络电视不仅是电信运营商的一场盛宴，对节目制作商而言，也是一个巨大的市场机会。”然而，“在新媒体产业领域，广播电视已不再享有原先的政策保护和市场垄断优势，与市场接轨的企业制度安排至关重要”。 数字交互电视是集合了电视传输影视节目的传统优势和网络交互传播优势的新型电视媒体，它的发展给电视传播方式带来了革新。有学者指出，数字交互电视“颠覆了电视观众的‘受众"定位与电视传媒的‘传者"定位”，“数字交互电视的互动传播，使传播者与接收者之间的位置不再是固定的或先在规定的，而是不断在互相共享的、移动的。”数字交互电视的发展还使得“大众传播研究的重心”转移到了“信息使用者”身上。　　数字电视，产业链有望增长　　作为新媒体之一的数字电视同样在吸引着人们的眼球，广电总局正式将2004年定为“数字电视年”，并计划2005年完成3000万用户的目标。2005年对数字电视的研究依然集中呼吁加快完善广电政策的制定，以有利于数字电视产业链的增长。有人指出，“可以预见，快速增长的数字电视用户将推动传媒产业价值链的快速发展，虽然要实现市场意义上的盈利仍需要一段时间的培育，但作为政府作用的体现，传媒产业政策的放开、数字电视产业政策的推进为传媒企业指明了发展道路，提供了新的发展平台。” 还有文章从实证调查入手，对数字电视进行了深入的分析。浙江传媒学院课题组通过市场调查数据说明：“数字电视点潜在用户的经济承受能力是影响数字电视发展前景的决定性因素”。 另外，还有学者提出了数字付费推广的USP（Unique Sel l in gProposi t ion）发展模式，即认为数字电视应该有独特的销售主张，因为数字电视是“技术层面”和“内容层面”两者合一的综合体，而且必须以后者为核心，否则就失去了存在的意义。 老年人收视群体日渐受到人们的重视。有专家提出，老年受众是付费数字电视的潜在用户之一。因此付费数字电视要兼顾老年人，启动老年市场。　　移动电视，强制收视的是与非　　作为一种新兴媒体，移动电视的发展迅速是人们所始料未及的，它具有覆盖广、反映迅速、移动性强的特点，除了传统媒体的宣传和欣赏功能外，还具备城市应急信息发布的功能。 对于公交移动电视来说，“强迫收视”是其最大的特点。有学者认为：“公交移动电视的强制性传播使得受众身在公交车上，没有选择电视频道的余地。这种受众被动接收状态，无疑会降低公交移动电视的收视率，然而目前尚无良策改变这种状态”。 但也有人持相反的看法，他们提出：“传播内容的强制性有利于拓展‘无聊经济"巨大利润空间”，“移动电视正是抓住了受众在乘车、等候电梯等短暂的无聊空间进行强制性传播，使得消费者在别无选择时被它俘获，这对于某些预设好的内容（比如广告）来说，传播效果更佳”。 还有学者从另一个角度提出了这种强制收视的缺陷：“公交移动电视虽然为乘客提供了电视节目，但也必须保护乘客的公共利益”。　　博客，颠覆传统的传播方式　　从2002年博客正式在中国兴起以来，学界对它的研究就没有中断过。2005年对博客的研究依然方兴未艾，较之于以前的研究更加深入，而且考量的角度更加多样化。博客的发展使得有的研究者对其充满了信心，“信息爆炸的互联网也的确需要具备信息收集、阐释、整理能力，同时提供个人想法的信息收集者，无论是否走向商业道路，无论是否代表个人或机构或政府组织，博客们有望成为公众的网络信息代言人。” 还有学者对博客传播中的传者进行分析，认为博客实现了多重的传播效果，“即横跨人内传播、人际传播和大众传播3种类型。”同时，还指出博客传者的传播动机与“外部环境的挤压、内心需求和经济利益的驱动”等几方面的因素有关。 从传播学角度对博客的研究中，有学者总结了博客的传播模式及传播性质，认为“博客突破传统的网络传播，实现了个人性和公共性的结合”。 对于博客的自由问题，有学者认为，博客的即时性、自主性、开放性和互动性为人们提供了一定程度的话语自由，这种自由颠覆了“把关人”的概念，但事实上，博客世界里的自由同时也带了很多负面的东西，需要网民有自律的意识。　　播客，新一代的广播　　“播客”是2005年新闻传播学术期刊上的又一个让人们耳目一新的词汇。“同21世纪初低调诞生的博客相比，播客似乎一问世就受到了人们的特别关注。”“通常指把那些自我录制广播节目并通过网络发布的人称为播客。” 2005年8月，上海还举办了中国首届播客大赛。对于“播客”的研究始终避免不了与“博客”的对比。有人认为，“如果说博客是新一代的报纸，那么播客就是新一代的广播。” 朱红梅撰文主要从传播学的角度对“播客”现象进行了深入的分析。她认为，播客实现了从文字传播向音频、视频传播转化，增加了娱乐成分。播客还满足了人们自我表达、张扬个性的需求，同时还加强了媒介汇流与互动。并且，播客将来会从业余走向专业，从免费走向收费，免费与收费播客共存。　　编辑本段新媒体产业在中国的发展　　互联网和移动增值作为新媒体最重要的两个领域，在2007年得到了快速发展。2007年互联网市场规模超过400亿元，并保持超过40%的年均增长速度，各细分市场如网络游戏、B2B、网络教育、搜索引擎是目前盈利的主流，占59%的市场比例。 2007年移动增值市场规模达到733亿元，同比增长23%。2006年移动互联网规模不到70亿元，2007年达到111亿元，同比增长超过70%，市场格局也发生变化，腾讯、三讯门户和空中网占领先地位。 此外，在发展迅速的新媒体市场中，还有一类户外电子屏广告市场，2007年这块市场规模达到41.8亿元，同比增长91%。 2007年，新媒体产业快速发展，广阔的市场与日渐凸显的影响力，吸引资本大规模流入，营销价值加强，国际化竞争加剧，整体产业向纵深挺进。 2008北京奥运会，新媒体首次作为奥运会独立传播机构与传统媒体一起被列入奥运会的传播体系。互联网等新媒体平台被正式纳入赛事转播渠道，充分表明新媒体作为一种新传播渠道的社会价值和商业价值。奥运的巨大商机推动新媒体布局和发展，新媒体版权保护受到重视。　　编辑本段简短结语　　新媒体在中国　　2009年，中国 · 北京 · 大稿国际艺术区发布将于2010年春季举办第一届“国际新媒体艺术节”，并为此成立了“新媒体专项基金”，大力推进中国的新媒体的发展。 新媒体　　新媒体相关研究机构　　目前，国内率先成立的、致力于新媒体相关的研究机构有北京大学创意产业研究中心新媒体研究室、中国传媒大学新媒体研究院等。 其中，北京大学创意产业研究中心新媒体研究室在09年开办了中心主站，并进入运营。定位为搭建新媒体研究者、互联网使用者的互动、分享平台。除首页门户外，下设网站论坛BBS、网络社交平台、资料分享平台等版块，并积极促进与其他网站的交流合作，主、协办有关新媒体和创意产业相关的线上、线下交流与分享活动。该研究室目前正在进行着互联网和手机传播的多个研究项目。包括BBS、SNS、博客和手机；一直重视与国内外的新媒体研究者们分享和互动；已有若干研究成果与学界、业界分享，并组织多次与国内外的学界、业界的交流活动。 中国传媒大学新媒体研究院 IDMR（Institute of Digital Media Research of CUC）是专注于数字化、信息化和全球化背景下的新媒体综合发展研究的专业性科学研究机构。以“多媒体数字内容”、“移动媒体”、“数字电视”和“宽带互联网”为核心，持续开展深入的、体系化的新媒体理论研究、行业应用研究和产品创新研发工作。 新媒体研究院联合国内外专家和高级研究人才团队，以严谨的科学研究为根基，努力实现并不断开拓“新媒体”研究的最大价值。 新媒体研究院积极推进科学研究成果面向行业实践应用的转化。用科学的方法研究新媒体，以正确的观点指导新媒体，不断激发新媒体行业生命力，切实推动新媒体产业健康发展。 新媒体研究院始终是开放的、保持最前沿水平的新媒体知识传播的基地和信息互动交流的平台。致力于创建并规划一个科学、完善的，具有中国特色的新媒体学科体系；肩负着广泛传播前沿新媒体知识和行业经验，促进全球新媒体行业友好交流、共同发展的重要使命。　　研究院机构设置　　研究院已经初步搭建起体系完整、产学研贯通的新媒体科研体系，并在快速建设中。研究院机构设置如下： 1、 数字内容中心 2、 移动媒体中心(中国传媒大学手机电视台、CMMB媒介数据研究实验室、MMDC中传移动媒体学术委员会) 3、 数字电视中心 4、 宽带互联网中心(中国传媒大学网络电视台) 5、 新媒体示范基地 中国传媒大学新媒体研究院NGB实验室是专注于未来国家信息化和“三网融合”背景下的中国下一代广播电视网（Next Generation Broadcasting network，简称NGB）研究的专业性科学研究机构。NGB实验室以承担国家科技部和广电总局下达的“NGB用户行为和运营模式”这一重大项目为契机，以“NGB用户行为”、“NGB运营模式”、“NGB技术体系”、“NGB产业政策”为核心板块，持续开展深入的、体系化的NGB理论研究、行业应用研究和产品创新研发工作。NGB实验室的目标是发展成为三个平台，并为此开展一系列的工作。（1）NGB实验室要成为NGB行业的信息交流平台，定期举办不同层次的研讨会，邀请校内外专家、政府官员、企业代表参加；建立NGB演示中心，面向校内外讲解NGB，分享观点、传播知识。（2）NGB实验室要成为中国传媒大学的NGB科研平台，承担政府企事业单位的研究项目，持续出版NGB行业报告、NGB行业通讯、NGB基础教材等。（3）NGB实验室要成为NGB行业在教育界的试验平台，开展NGB校域网技术试验、NGB校园网络电视台和校园手机电视台内容试验，积极推进科学研究成果向行业实践应用的转化、创新和孵化。　　编辑本段手机电视台成立　　中国传媒大学手机电视台于2009年4月经学校批准正式成立，是全球首家由高等学府设立的手机电视台。电视台隶属中国传媒大学新媒体研究院，是中国传媒大学专注于开展（广播式、移动通信式、无线互联网式）手机电视领域教学实训、科研、对外交流与合作的专门机构。电视台下设“专家委员会”和“运行中心”两大主要职能板块。目前，一期建设工程已全面启动，计划于2009年10月系统开展手机电视教学、实训工作。 中国传媒大学网络电视台隶属于新媒体研究院，目前已启动一期建设工程。将于本年度内建设成为能够支持网络视频点播、直播、轮播等媒体播放功能及视频博客等互动功能的，基于宽带互联网的“中国传媒大学网络电视台”。网络电视台将服务于中国传媒大学学生的教学、实验、训练等需求，打造体现学术前瞻性与专业领先性的产学研究平台。　　新媒体教育　　据英国总领事馆文化教育处2009年12月发布的全球学生留学决策调查，自2006年以来，大众传播课程已经连续3年进入最受欢迎的五大课程行列。为适应高等教育这一新形势，2010年3月27日，欧文国际教育集团与英国传媒专业排名前5的英国伯明翰传媒学院举行签约仪式，率先于沪上开设新媒体传媒专业，伯明翰传媒学院是英国为数不多的影视传媒行业资格认证委员会成员之一，具有严格的教育质量保障体系及雄厚的新媒体专业教学与研究力量。学生在国内完成部分课程的学习，修满规定的学分后，通过国际学分转移系统，直接进入伯明翰传媒学院完成后续课程，获得英国本科和硕士学位，为广大中国学子提供一条通往英国学习该专业的便捷留学之旅。 上海欧文学院成立于1999年，是中国最早推行英式教育的国际化学院之一。在原有的开设商科本硕连读课程的基础上，顺应中国学生发展的需求，于今年增设新媒体传媒专业。在引入英国优质的新媒体教育资源的同时，学院还为此特别聘请了12位沪上传媒界领军人物组成阵容强大的顾问咨询委员会和教学指导委员会，与中英传媒领域专家学者、业界高层人士共同承担培养适应多元文化、通晓国际惯例、具有出色的语言能力的高层次新媒体传媒人才的重任。该项目顾问咨询委员会成员有传媒界权威人士及学者贾树枚、丁锡满、丁法章、赵凯和童兵等，教学指导委员会成员有传媒界资深专家、教授尹明华、徐世平、滕俊杰、俞璟璐、孟建、纪华强和周葆华等。 上海欧文经济学院传媒专业主要为2＋3（2年国内＋3年英国）本硕连读课程模式。该专业以计划外自主招生的方式招收有意向攻读传媒专业的高中毕业生，除新媒体专业外，学院还开设公共关系专业和新闻、广播、电视、音乐产业、媒体摄影等传统的传媒专业。 入学考试：申请人参加欧文学院的面试，面试合格后参加入学语言测试（高考英语成绩达到100分以上者可以免笔试）；如有个人创作的申请人同时提交其个人作品（例如摄影作品、绘画作品、个人主页等。此项不做必须要求）。 录取：如果申请人入学面试和笔试评估合格，即可获准入学，并由欧文学院发出录取通知书。

除开像素smx-f70bp是160万这个是优势外，smx-f70bp没有什么比dcr-sx21e好的！相信三星也是用这个作为嘘头来卖，但是像素并不是画质的决定因素。首先F70的普通CMOS就败在SX21的CCD的传感器上。实际焦距F70是f=2.1-109.2mm，而SX21是f=1.8-102.6mm，也要优于F70.SX21有57倍光学变焦，1800倍数字变焦，F70只有52倍光学变焦和130倍的数字变焦！所以综合来说SX21拍摄能力要强于F70，不过F70的价钱也相对便宜，这就要看楼主你的预算了，个人推荐SX21，在数码领域索尼的造诣远高于三星。而且对于拍视频来说80万像素也足够了。祝楼主购机愉快！

1、crime英[kra_m]美[kra_m]，n.罪行;罪;犯罪活动;不法行为;不道德的行为;罪过;v.指控犯罪;判定犯罪;处罚军事犯。2、[例句]Morepoliceofficersoutonthebeatmayhelptocutcrime.增加巡逻的警察可能有助于减少罪行。

重新到安全模式杀毒及清除恶意插件对所有磁盘进行错误扫描用安全卫士打上所有安全补丁并修复系统还有问题的话建议重新安装系统。

UI偶遇IT预报

啊地方是古巴首都

ISTIC是中国科学技术信息研究所（Institute of Scientific and Technical Information of China）的缩写。CR是美国化学文摘。CSTPCD每年对收录期刊（即“中国科技论文统计源期刊”）的范围进行调整，有效期三年，三年后中国科技信息研究所将对其进行重新评定，遵守“优入劣汰”原则，因此“统计源期刊”的学术影响力越来越被各学术单位和科研机所接受，用它作为科研论文的学术水平的评价指标之一。医学期刊是以医学和与医学相关学科为内容的情报载体，按卷与期和(或)年与期的顺序编号，意欲长期印行下去的连续出版物。国内公开发行的医学期刊是由国家新闻出版广电总局批准，由国家直属机构、一级协会、地方性医学组织，医学院校、医院科研单位等承办的主要以刊载医学学术论文为主的连续出版物。【简介】医学期刊汇集着医学工作者的医药经验和工作成果，反映了医药学的进展及水平，是医药学研究的重要的情报来源。广大医务工作者可借以掌握该学科的现状和动态，利用他人的研究成果开展新的研究。它在传播和交流学术思想，沟通情报信息方面，起着纽带和桥梁作用。据不完全统计，全世界出版的科技期刊约12万种,年发行近30亿册,其中25%为生物、医学期刊约3万种，发行量在7亿册左右。与图书相比期刊的特点为出版周期短、专业性强、选题机动灵活、作者众多，具检索性能。【医学期刊分类】按目录分类，可以分为医学中文核心期刊，医学科技核心期刊和普通期刊(国家级和省级期刊)其中医学中文核心期刊250本，停刊一本;医学科技核心期刊996本(有和中文核心期刊重复的期刊)普通期刊未做统计;

ISTIC是中国科学技术信息研究所（Institute of Scientific and Technical Information of China）的缩写。该机构受国家科技部委托，从1987年开始对我国科技人员在国内外表论文数量和被引用情况进行统计分析，利用统计数据建立中国科技论文与引文数据库（CSTPCD）对期刊学术质量进行考核。CSTPCD每年对收录期刊（即“中国科技论文统计源期刊”）的范围进行调整，有效期三年，三年后中国科技信息研究所将对其进行重新评定，遵守“优入劣汰”原则，因此“统计源期刊”的学术影响力越来越被各学术单位和科研机所接受，用它作为科研论文的学术水平的评价指标之一。ISTIC收录期刊，即中国科技核心期刊。CR(美国化学文摘)

1、简单介绍下ssh 的key原理：Publick Key 认证简介Publick Key 认证的主要魅力在于认证时承诺不必提供密码就能够同远程系统建立连接。Publick Key 认证的基础在于一对密钥，public key和private key ，public key对数据进行加密而且只能用于加密，private key 只能对所匹配的public key加密过的数据进行解密。我们把public key放在远程系统合适的位置，然后从本地开始进行ssh 连接。此时，远程的sshd会产生一个随机数并用我们产生的public key进行加密后发给本地，本地会用privatekey 进行解密并把这个随机数发回给远程系统。最后，远程系统的sshd会得出结论我们拥有匹配的private key 允许我们登录。2、以前用的是putty，生成了PUB/PRIVATE KEY的，现在用puttygen.exe load private key，然后用Conversions导出到openssh格式的private key，名为identy，接着把pubkey也导出来，叫identy.pub，放到相同的目录下，最后在securecrt的session里指定private key就OK了，一定要弄成xx xx.pub的，否则笨笨会说找不到密钥。　　以上内容是从网上摘抄的，也的确适用。不过新的SecureCRT 5.5版本已经可以直接支持OPENSSH格式的密钥。3、关于需要跳转的服务器使用本机key认证： 在putty：在登录时，会跳出一一个“Putty Configuration”的配置界面，在connection--SSH---Auth页，在“Allow agent forwarding”选项前打钩； 在securecrt:，"session options"的 连接----高级中选中“启用OpenSSH代理程序转发”即可

下面我来谈谈我的看法。XShell的理解:1、与Linux搭配颜色，也可以改进单一字体枯燥无味，偶尔看不清的问题。2、来自Windows命令行的支持，输入用户名和密码，并直接连接到SSH，例如:【Xshell。Exe - url SSH:/ /用户名:密码@ IP:port]3。每个标题可以直接显示IP连接形式，不需要修改Linux系统。Xshell有一个反日函数:您可以在一个窗口中编写命令，然后在所有其他窗口中同步执行命名。其他的介绍:1、Cygwin:关于这个软件，我认为他的基本功能的缺乏，使用起来十分麻烦。安装和卸载都很麻烦，有损坏系统的情况。2、Putty:设置连接窗口标题以显示IP，您需要更改Linux系统。3、SSH安全外壳:没有颜色匹配。4、SecureCRT:颜色不对。5、Mobaxterm:无法从命令行输入SSH用户名和密码，从而直接连接SSH。6、Openssh:无法输入密码。我忘了在哪里下载二进制包，我将系统的环境变量路径改为[C:程序文件(x86) OpenSSH bin](程序类人猿错误地编写了append操作作为集合操作)……总结任何时候到要养成良好的使用软件的习惯，对你以后发展极其有帮助。幸运的是，我养成了在沙箱中测试的好习惯，如果我要直接在工作机器上测试，我就必须重新加载计算机。更新:注意!XShell不仅是Windows连接Linux的最佳工具，而且也是一个非常好的工具。在国外购买一个VPN，然后在GFW附近购买高速的海外路线，用少量的xshell支持多个IP，然后到国外去。

以实际经验给你介绍一下，旨在通俗易懂JIT 是即时生产或实时生产CAD 是计算机辅助设计 这个比较好理解，就是使用计算机软件，帮助设计如图片，图像，工程图等，Photoshop .autucad 等都是这类软件。ERP 是企业资源计划系统 就是将生产原材料，生产计划，流程，设置好，优化好。减少浪费。CRM 客户关系管理SCM 供应链管理CIMS 计算机集成制造

雪铁龙C5Aircross在欧洲NCAP进行的碰撞测试中获得了4星安全评级。C5Aircross的成人乘员安全得分为33.4，相当于87%。在正面偏置碰撞测试中，该车为前排乘客的头部、胸部和大腿提供了良好的保护。它为驾驶员的头部、大腿和脚部提供了良好的保护，并为胸部和小腿提供了足够的保护。在额头宽度测试中发现，前排乘客头部、胸部和大腿的保护分别为边缘、合适和良好，而驾驶员头部和大腿的保护较好。这辆车在侧面碰撞测试中提供了很好的保护。研究还发现，在向后撞击时，鞭打保护效果良好。在正面偏移测试中，乘客舱保持稳定。C5Aircross的儿童乘员安全得分为42.6(86%)，而行人安全得分为27.9(58%)。在欧洲，这款车配备了自动紧急制动(AEB)，在低速测试中表现良好。百万购车补贴

雪铁龙C5Aircross在欧洲NCAP进行的碰撞测试中获得了4星安全评级。C5Aircross的成人乘员安全得分为33.4，相当于87%。在正面偏置碰撞测试中，该车为前排乘客的头部、胸部和大腿提供了良好的保护。它为驾驶员的头部、大腿和脚部提供了良好的保护，并为胸部和小腿提供了足够的保护。在额头宽度测试中发现，前排乘客头部、胸部和大腿的保护分别为边缘、合适和良好，而驾驶员头部和大腿的保护较好。这辆车在侧面碰撞测试中提供了很好的保护。研究还发现，在向后撞击时，鞭打保护效果良好。在正面偏移测试中，乘客舱保持稳定。C5Aircross的儿童乘员安全得分为42.6(86%)，而行人安全得分为27.9(58%)。在欧洲，这款车配备了自动紧急制动(AEB)，在低速测试中表现良好。百万购车补贴

后桥包括主减速器，负责减速增大扭力。差速器，使左右车轮可以不同速度转动。半轴，连接车轮与差速器，两动力传至车轮

歌曲名:Sailing歌手:CHRISTOPHER CROSS专辑:Oh What A Night - 70"s ClassicsChristopher CrossSailingEdit by SeanIt"s not far down to paradiseAt least it"s not for meAnd if the wind is right you can sail awayAnd find tranquilityThe canvas can do miraclesJust you wait and seeBelieve meIt"s not far to never never landNo reason to pretendAnd if the wind is right you can find the joyOf innocence againThe canvas can do miraclesJust you wait and seeBelieve meSailingTakes me awayTo where I"ve always heard it could beJust a dream and the wind to carry meAnd soon I will be freeFantasyIt gets the best of meWhen I"m sailingAll caught up in the reverieEvery word is a symphonyWon"t you believe meSailingTakes me awayTo where I"ve always heard it could beJust a dream and the wind to carry meAnd soon I will be freeIt"s not far back to sanityAt least it"s not for meAnd when the wind is right you can sail awayAnd find serenityThe canvas can do miraclesJust you wait and seeBelieve meSailingTakes me awayTo where I"ve always heard it could beJust a dream and the wind to carry meAnd soon I will be freehttp://music.baidu.com/song/31164114

歌曲名:Sailing 歌手:Crossbones专辑:SailingSAILINGRod StewartI am sailing, I am sailing home again cross the sea.I am sailing stormy waters, to be near you, to be free.I am flying, I am flying like a bird cross the sky.I am flying passing high clouds, to be near you, to be free.Can you hear me, can you hear me, thru the dark night far away?I am dying, forever crying, to be with you; who can say?Can you hear me, can you hear me, thru the dark night far away?I am dying, forever, crying to be with you; who can say?We are sailing, we are sailing home again cross the sea.We are sailing stormy waters, to be near you, to be free.Oh Lord, to be near you, to be free.Oh Lord, to be near you, to be free.Oh Lord, to be near you, to be free.http://music.baidu.com/song/27316708

符号 | 为位运算符，将数字先转换为2进制表示形式，然后对它进行位操作， 平时用得比较少，找了个位运算的资料，有兴趣可以看看http://www.111cn.net/wy/js-ajax/44975.htm

对……疯狂

歌曲名:Linger歌手:The Cranberries专辑:Everybody Else Is Doing It, So Why Can"T We? (The Complete Sessions 1991-1993)If you, if you could returndon"t let it burndon"t let it fadeI"m sure I"m happierbut it"s just your attitudeit"s tearing me apartit"s ruining everydayI swore, I swore I would be truebut honey so did youso why were you holding her handis that the way you standwere you lying all the timewas it just a game to youBut I miss youyou know I"m such a fool for youyou got me wrapped around your fingerdo you have to let it lingerdo you have todo you have todo you have to let it lingerOh, I thought I loved youI thought that nothing could go wrongbut I was wrongI was wrongIf you, if you could get bytrying not to liethings wouldn"t be so confusedand I wouldn"t feel so usedbut you always <something>I just wanna be with youand I miss youyou know I"m such a fool for youyou got me wrapped around your fingerdo you have to let it lingerdo you have todo you have todo you have to let it lingerand I miss youyou know I"m such a fool for youyou got me wrapped around your fingerdo you have to let it lingerdo you have todo you have todo you have to let it lingeryou know I"m such a fool for youyou got me wrapped around your fingerdo you have to let it lingerdo you have todo you have todo you have to let it lingerhttp://music.baidu.com/song/8281286

【Loco】和同一所大学前后辈关系，Loco是晚3年的后辈。在同一个社团活动，但因为年级上有一定差异，所以当时并没有太亲近。真正变得亲近是从Loco加入"VV:D" 开始，现在是独一无二的兄弟关系，CP Loray（Loco&Gray）也很有名。【Zion.T(Crush，Elo】在"VV:D"里一起活动中，Gray对ZionT的才能表示非常羡慕和嫉妒过。在<Radio Star>里模仿过Zion.T的《杨花大桥》也隐约有点像。Crush，Elo等也作为同一组合的成员亲密地相处着。cr.h-167

歌曲名:Linger歌手:The Cranberries专辑:Stars-The Best Of 1992-2002If you, if you could returndon"t let it burndon"t let it fadeI"m sure I"m happierbut it"s just your attitudeit"s tearing me apartit"s ruining everydayI swore, I swore I would be truebut honey so did youso why were you holding her handis that the way you standwere you lying all the timewas it just a game to youBut I miss youyou know I"m such a fool for youyou got me wrapped around your fingerdo you have to let it lingerdo you have todo you have todo you have to let it lingerOh, I thought I loved youI thought that nothing could go wrongbut I was wrongI was wrongIf you, if you could get bytrying not to liethings wouldn"t be so confusedand I wouldn"t feel so usedbut you always <something>I just wanna be with youand I miss youyou know I"m such a fool for youyou got me wrapped around your fingerdo you have to let it lingerdo you have todo you have todo you have to let it lingerand I miss youyou know I"m such a fool for youyou got me wrapped around your fingerdo you have to let it lingerdo you have todo you have todo you have to let it lingeryou know I"m such a fool for youyou got me wrapped around your fingerdo you have to let it lingerdo you have todo you have todo you have to let it lingerhttp://music.baidu.com/song/1505432

歌曲名:Linger歌手:The Cranberries专辑:MTV UnpluggedIf you, if you could returndon"t let it burndon"t let it fadeI"m sure I"m happierbut it"s just your attitudeit"s tearing me apartit"s ruining everydayI swore, I swore I would be truebut honey so did youso why were you holding her handis that the way you standwere you lying all the timewas it just a game to youBut I miss youyou know I"m such a fool for youyou got me wrapped around your fingerdo you have to let it lingerdo you have todo you have todo you have to let it lingerOh, I thought I loved youI thought that nothing could go wrongbut I was wrongI was wrongIf you, if you could get bytrying not to liethings wouldn"t be so confusedand I wouldn"t feel so usedbut you always <something>I just wanna be with youand I miss youyou know I"m such a fool for youyou got me wrapped around your fingerdo you have to let it lingerdo you have todo you have todo you have to let it lingerand I miss youyou know I"m such a fool for youyou got me wrapped around your fingerdo you have to let it lingerdo you have todo you have todo you have to let it lingeryou know I"m such a fool for youyou got me wrapped around your fingerdo you have to let it lingerdo you have todo you have todo you have to let it lingerhttp://music.baidu.com/song/55295669

歌曲名:Linger歌手:The Cranberries专辑:This Is The Sound Of...The CranberriesIf you, if you could returndon"t let it burndon"t let it fadeI"m sure I"m happierbut it"s just your attitudeit"s tearing me apartit"s ruining everydayI swore, I swore I would be truebut honey so did youso why were you holding her handis that the way you standwere you lying all the timewas it just a game to youBut I miss youyou know I"m such a fool for youyou got me wrapped around your fingerdo you have to let it lingerdo you have todo you have todo you have to let it lingerOh, I thought I loved youI thought that nothing could go wrongbut I was wrongI was wrongIf you, if you could get bytrying not to liethings wouldn"t be so confusedand I wouldn"t feel so usedbut you always <something>I just wanna be with youand I miss youyou know I"m such a fool for youyou got me wrapped around your fingerdo you have to let it lingerdo you have todo you have todo you have to let it lingerand I miss youyou know I"m such a fool for youyou got me wrapped around your fingerdo you have to let it lingerdo you have todo you have todo you have to let it lingeryou know I"m such a fool for youyou got me wrapped around your fingerdo you have to let it lingerdo you have todo you have todo you have to let it lingerhttp://music.baidu.com/song/7377345

歌曲名:Linger歌手:The Cranberries专辑:Live 2010 Zenith Paris 22 03 10If you, if you could returndon"t let it burndon"t let it fadeI"m sure I"m happierbut it"s just your attitudeit"s tearing me apartit"s ruining everydayI swore, I swore I would be truebut honey so did youso why were you holding her handis that the way you standwere you lying all the timewas it just a game to youBut I miss youyou know I"m such a fool for youyou got me wrapped around your fingerdo you have to let it lingerdo you have todo you have todo you have to let it lingerOh, I thought I loved youI thought that nothing could go wrongbut I was wrongI was wrongIf you, if you could get bytrying not to liethings wouldn"t be so confusedand I wouldn"t feel so usedbut you always <something>I just wanna be with youand I miss youyou know I"m such a fool for youyou got me wrapped around your fingerdo you have to let it lingerdo you have todo you have todo you have to let it lingerand I miss youyou know I"m such a fool for youyou got me wrapped around your fingerdo you have to let it lingerdo you have todo you have todo you have to let it lingeryou know I"m such a fool for youyou got me wrapped around your fingerdo you have to let it lingerdo you have todo you have todo you have to let it lingerhttp://music.baidu.com/song/20734474

一般是按启运港和目的港分，在启运港产生的费用出口商承担，在目的港产生的费用进口商承担。

歌曲名:Cross Oceans歌手:First Aid Kit专辑:Drunken Trees EpFirst Aid Kit - Cross OceansThere"s something about youThat I"m never going to find outI want to live that life againI want to live that life againThe way that you say thingsSo they sound so rightI want to cross oceansI want to cross oceansBut everything I say I keep in the wrong side of my mouthAnd when the words come out they don"t sound anything likeI imagined, "cause I imaginedIt feels like I amWaiting for the rainI want to live that life againI want to live that life againOr an endless secretParade of changeI want to cross oceansI want to cross oceansStare at the ground a second to long then it"s goneAnd everything I can see looks nothing likeI imagined, "cause I imaginedI want to cross oceansI want to cross oceansI want to cross oceansI want to cross oceansI want to cross oceansI want to cross oceanshttp://music.baidu.com/song/8007738

状态说明s固体 未指明状态 cr结晶固体 am非晶态固体 l液体纯净物 g气体 aq水溶液 未指明组成 ao非电离物质水溶液 ai电离物质水溶液

基因敲出质粒转染可以构建稳定细胞株一种是脂质体转染后,单克隆筛选稳定细胞株.另外一种是应用逆转录病毒,慢病毒转染,筛选稳定细胞株.脂质体转染：在转染24小时后,消化细胞并计数.将细胞种到96孔板,保证每个孔2-3个细胞,这样才能得到单克隆.待细胞贴壁后,加入抗生素筛选.筛选时间和浓度视细胞而定.一般G418一个星期作用,嘌呤霉素2-3天.脂质体法筛单克隆时间较长,且效率低,大概只有1%.病毒转染：先要用包装细胞,一般为293细胞,包装出病毒,再用病毒转染目的细胞.包装病毒视不同类型的病毒而定,一般要3-5天的时间.包装好的病毒要测滴度,根据滴度决定转染目的细胞的病毒量.转染目的细胞1-2天后加抗生素筛选得到稳定细胞株.病毒转染得到稳定细胞株的效率高,只是步骤繁琐.

screech owl的区别为：指代不同、语法不同、侧重点不同。一、指代不同1、screech：尖叫。2、owl：猫头鹰。二、语法不同1、screech：基本意思是“尖叫,尖叫声”,是可数名词。有时也可作“极其滑稽可笑的人(或事物)”解。2、owl：直接源自古英语的ule，意为猫头鹰。nocturnal bird of prey with hawk-like beak and claws and large head with front-facing eyes夜间活动的猛禽，有鹰一样的喙和爪，头大，眼睛朝前。三、侧重点不同1、screech：一个拟声词。2、owl：是一种动物的名称。