细胞

【答案】：E透镜的作用是将激光和荧光变成平行光，同时去除离散的室内光。滤片包括长通、短通和带通滤片，分别允许不同波长的光通过。

1生物学颗粒分析原理2流式细胞仪细胞分选原理

正确答案:A解析：其主要检测原理是细胞经荧光染色后，通过高速流动系统，细胞排成单行，逐个流经检测区进行测定。当细胞从流动室喷嘴处流出时，细胞经激光束照射产生荧光和散射光，由光电倍增管接收，转换成脉冲信号，数据经电脑处理，分辨细胞的类型。本题正确答案是A。

实验原理：流式细胞仪的工作原理是将待测细胞放入样品管中，在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。在鞘液的约束下细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出，形成细胞柱。通过对流动液体中排列成单列的细胞进行逐个检测，得到该细胞的光散射和荧光指标，分析出其体积、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等物理及化学特征。细胞内的DNA含量随细胞周期进程发生周期性变化，如G0/G1期的DNA含量为2C，而G2期的DNA含量是4C。利用PI标记的方法，通过流式细胞仪对细胞内DNA的相对含量进行测定，可分析细胞周期各时相的百分比。

流式细胞仪是通过激光对通过激光束的颗粒进行计数。当颗粒或者细胞通过激光束的时候，会对光线产生折射和反射。这个折射和反射的信号被探测器记录下来。每通过一个细胞，就会产生一个峰值，最后记录峰值的个数，就可以计数了

将待测细胞染色后制成单细胞悬液。用一定压力将待测样品压入流动室，不含细胞的磷酸缓冲液在高压下从鞘液管喷出，鞘液管入口方向与待测样品流成一定角度，这样，鞘液就能够包绕着样品高速流动，组成一个圆形的流束，待测细胞在鞘液的包被下单行排列，依次通过检测区域。流式细胞仪通常以激光作为发光源。经过聚焦整形后的光束，垂直照射在样品流上，被荧光染色的细胞在激光束的照射下，产生散射光和激发荧光。这两种信号同时被前向光电二极管和90°方向的光电倍增管接收。光散射信号在前向小角度进行检测，这种信号基本上反映了细胞体积的大小；荧光信号的接受方向与激光束垂直，经过一系列双色性反射镜和带通滤光片的分离，形成多个不同波长的荧光信号。这些荧光信号的强度代表了所测细胞膜表面抗原的强度或其核内物质的浓度，经光电倍增管接收后可转换为电信号，再通过 A/D转换器，将连续的电信号转换为可被计算机识别的数字信号。计算机把所测量到的各种信号进行计算机处理，将分析结果显示在计算机屏幕上，也可以打印出来，还可以数据文件的形式存储在硬盘上以备日后的查询或进一步分析。检测数据的显示视测量参数的不同由多种形式可供选择。单参数数据以直方图的形式表达，其X轴为测量强度，Y轴为细胞数 目。一般来说，流式细胞仪坐标轴的分辨率有512或1024通道数，这视其模数转换器的分辨率而定。对于双参数或多参数数据， 既可以单独显示每个参数的直方图，也可以选择二维的三点图、等高线图、灰度图或三维立体视图。细胞的分选是通过分离含有单细胞的液滴而实现的。在流动室的喷口上配有一个超高频电晶体，充电后振动，使喷出的液流断裂为均匀的液滴，待测定细胞就分散在这些液滴之中。将这些液滴充以正负不同的电荷，当液滴流经带有几千伏特的偏转板时，在高压电场的作用下偏转，落入各自的收集容器中，不予充电的液滴落入中间的废液容器，从而实现细胞的分离。

一般常规的流式细胞仪都是采用荧光激发和探测来检测信号的。基本的原理如下：荧光的产生。荧光素再受到光线（激发光，一般是激光）的照射后，会释放出波长较长的光线。发出的释放光通过光纤维传到检测区域。检测区域，不同的机器构造有所差异。基本的原理就是先通过各种滤镜的组合，来控制相应波长的光线可以到达指定的检测器。流式机器的检测器一般都是光电倍增管（PMT）。PMT可以有效的把微弱的光信号转变为电信号，并且放大，这样最终变为计算机可以读取的数据。PMT是不能区分颜色的。那种颜色的光到达哪个PMT，由滤镜组合来决定。

流式细胞仪工作的原理是使悬浮在液体中分散的细胞或微粒一个个地依次通过样品池，细胞的流速可达9米/秒，同时由荧光探测器捕获荧光信号并转换成分别代表前向散射角、侧向散射角和不同荧光强度的电脉冲信号，经计算机处理形成相应的点图、直方图和假三维结构图像进行分析。

一、原理在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧。AnnexinV是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此AnnexinV被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将AnnexinV进行荧光素（EGFP、FITC）标记，以标记了的AnnexinV作为荧光探针，利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶（PropidiumIodide,PI）是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但对凋亡中晚期的细胞和死细胞，PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将AnnexinV与PI匹配使用，就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。二、注意事项1、必须活细胞检测，不能用能破坏细胞膜完整性的固定剂和穿透剂固定或穿膜。2、特殊细胞的染色方法：在消化或吹打时，有些细胞（如神经元细胞）很容易受到损伤，导致晚期凋亡或坏死比例非常高，不能反映真实结果。实验的解决方法：先低速离心，吸取细胞培养板中的液体，留少许液体，加入适量PI和Annexin-V染色10min后，将漂浮细胞吸至离心管中，离心洗涤两次，用PBS漂洗贴壁细胞两次，加胰酶消化后将细胞悬液移至另一离心管中，离心洗涤，再与漂浮细胞合并后上流式细胞仪检测。应用该法可降低晚期凋亡和坏死比例，增加早期凋亡细胞比例。3、由于Annexin-V为钙离子依赖的磷脂结合蛋白，只有在钙离子存在的情况下与PS的亲和力才大，因而在消化细胞时，建议一般不采用含EDTA的消化液。4、必须设置阴性对照和补偿对照（分别单染）。

流式细胞仪是一种用于分析细胞的仪器。它通过将单个细胞通过一束激光束，并测量从细胞中反射或散射的光来检测细胞的物理和化学特性。通过调节激光的颜色和强度，可以检测细胞的大小、形状、表面标记和细胞内成分等特性。流式细胞仪还可以分离出不同类型的细胞，因为不同类型的细胞在大小、表面标记和细胞内成分等方面有所不同。

流式细胞仪的工作原理：借鉴了荧光显微镜技术，将激发光改为激光，使具有更好的单色性；利用荧光染料与单克隆抗体技术，提高特异性与灵敏度；将固定的标本台改为流动的单细胞悬液，并用计算机进行信号的数据处理分析，能同时从一个细胞上获得多种参数资料。

基本的流程（主要是抗体染色）http://www.scbt.com/protocols/protocol_08.pdf基本原理clip.lf2.cuni.cz/files/board/minikurz.pptwww.abdserotec.com/uploads/Flow-Cytometry.pdf

我简单说一下：x0dx0a1.首先，机器吸取细胞混悬液，射入由鞘液（一般都是磷酸盐缓冲液）。由于鞘液的流速大，所以细胞混悬液通过轴流的形式在中央，一般是单个细胞排队的形式。x0dx0ax0dx0a2.然后细胞通过检测窗口。有激光束照射。一般细胞都经过荧光染色，被激光照射后，会有不同波长的激发光产生。机器设有检测器来探测激发光的强弱x0dx0ax0dx0a3.根据激发光的强弱，来判断细胞和染色物质的结合情况，从而得到要检测的结果（比如抗原量，DNA量，等等）

流式细胞术工作原理是在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。它可以高速分析上万个细胞，并能同时从一个细胞中测得多个参数，具有速度快、精度高、准确性好的优点，是当代最先进的细胞定量分析技术之一。光源、液流通路、信号检测传输和数据的分析系统是流式细胞仪的主要组成。临床中运用流式细胞仪进行外周血白细胞、骨髓细胞以及肿瘤细胞等的检测是临床检测的重要组成部分。流式细胞技术（flow cytometry，FCM）是利用流式细胞仪进行的一种单细胞定量分析和分选技术。流式细胞术是单克隆抗体及免疫细胞化学技术、激光和电子计算机科学等高度发展及综合利用的高技术产物。基本结构：流式细胞仪由三部分构成：液流系统，包括流动室和液流驱动系统；光学系统，包括激发光源和光束收集系统；电子系统，包括光电转换器和数据处理系统。流式细胞仪的工作原理是使悬浮在液体中分散的经荧光标记的细胞或微粒逐个通过样品池，同时由荧光探测器捕获荧光信号并转换成分别代表前向散射角、侧向散射角和不同荧光强度的电脉冲信号，经计算机处理形成相应的点图，直方图和加三维结构图像进行分析。用于FCM的样本是单细胞悬液，可以是血液、悬浮细胞培养液、各种体液、新鲜实体瘤的单细胞悬液以及石蜡包埋组织的单细胞悬液等。

　　1、流式细胞仪原理是参数测量原理。 　　2、流式细胞仪（Flowcytometer）是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量，并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器，它只能测量一个细胞的诸如总核酸量，总蛋白量等指标，而不能鉴别和测出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是说，它的细节分辨率为零。

利用染色体变异原理和杂交育种，没有进入到细胞水平

无血清培养基可以提供细胞贴壁需要的一些基质，本文总结了利用无血清培养基OPTI-MEM进行贴壁细胞的脂质体转染试验材料，步骤、个人经验以及问题分析。贴壁细胞的脂质体转染一、实验材料1、宿主细胞CHO(贴壁细胞)2、脂质体LIPOFECTAMINE 2000(invitrogen公司)3、6孔细胞培养版4、无血清培养基OPTI-MEM(GIBICO)5、转染级质粒二、实验步骤invitrogen的LIPOFECTAMINE 2000说明书上列举了24孔、12孔、6孔......板的实验体系，因为需要转染的细胞量大，所以一直采用的是6孔版做的转染。以下是以6孔板为例说明一下我的体系和方法吧!1、转染前一天，以合适的细胞密度接种到6孔培养板上。(我的接种密度是3~4*105/ml.)转染时，细胞要达到90~95%的融合。2、溶液1：240ul 无血清培养基 + 10 ul lipofectamine 2000 per well (总体积250 ul)(温育5min)3、溶液2：X ul 无血清培养基 + 4 ug 质粒 per well(总体积250 ul)……详细资料请参考：on http://www.bio1000.com/experiment/cell/237988.html

用电动移液器轻轻混匀，分布均匀，边加边轻轻晃匀。以293T为例293细胞是贴壁依赖型呈上皮样细胞。 4，将细胞送回培养箱：细胞是生物体基本的结构和功能单位。已知除病毒之外的所有生物均由细胞所组成。 6;WPREDU3 载体质粒，1% 青霉素-链霉素;CMV/，168 μg pCD/. 第二天. 养293细胞和293T一样，但病毒生命活动也必须在细胞中才能体现,表现出典型的腺病毒转化细胞的表型，加入20ml的Opti-MEM培养基，镜下检查细胞. 将细胞分到12分到12个T150瓶中. 室温孵育20分钟。 5. 转染前1小时，预先准备3个T150瓶的293T细胞。细胞 （英文名;l Trans-EZ溶液和17。另一支中加入500 μ：cell）并没有统一的定义，1% Glutamax ，比较普遍的提法是.5 ml Opti-MEM培养基. 取两支无菌的50ml离心管。 2，每瓶的细胞密度是8×106个。 3。将Trans-EZ稀释液滴加到质粒管中。 关键步骤。细胞融合度应大致为30-40%;NL-BH*DDD 包装质粒和84 μg pLTR-G质粒。 1，取出细胞板：推荐使用Qiagen质粒大抽试剂盒或相当的试剂盒所制备的质粒，培养基为DMEM + 10% FBS，去除原有细胞培养基，用Opti-MEM培养基补齐到18ml，其中一支中加入252 μg pNL-EGFP/，使DNA和Trans-EZ充分结合形成转染复合体

无血清无双抗的培养基，含极微量血清，用来稀释转染试剂和质粒

opti是无血清培养基，如果是癌细胞之类比较皮实的细胞好像没什么关系的，转染时间差不多了早点换液就行。

正确的是B。A细胞呼吸跟光没有关系，有光无光都能进行；CA瓶中的是为了排除空气中CO2的干扰，以确定C瓶的浑浊是由细胞呼吸产生的CO2引起；D溴麝香草酚蓝溶液是用来检测CO2是否生成的，单位时间内需氧呼吸产生的CO2比厌氧呼吸多，所以C变黄的快。

该项技术在国外已经开展了20多年了，2009年国家卫生部已经把这项技术列入第三类医疗技术管理，目前已在国内各大城市三甲医院开展，治疗已经很成熟了。经过治疗后的患者，从近期疗效来看，不同程度得到了改善，比如生活质量：饮食、睡眠、精神、疼痛减轻等方面得到改善。一部分患者因个体差异而疗效体现不同。

CR：完全缓解急性白血病疗效标准一、缓解标准：（1）完全缓解（complete remission，CR)骨髓象：原粒（原单+幼单或原淋+幼淋）≦5%，红系和巨核细胞系正常。(注意M2b、M3、M4、M6、M7的标准）血象：男性Hb ≧100g/L,女性和儿童Hb ≧90g/L，中性粒细胞绝对值≧1.5X10^9 /L，血小板≧100X10^9 /L，外周血分型中无白血病细胞临床：无白血病浸润的症状和体征，生活正常或接近正常（2）部分缓解（partial remission，PR)骨髓：原粒（原单+幼单或原淋+幼淋）>5% 但≦20%或临床、血象2项中有一项未达完全缓解标准者（3）未缓解（non-remission，NR) ：骨髓象、血象及临床3项均未达上述标准者二、复发标准：有下列三者之一者称为复发（relapse):(1)骨髓原粒（原单+幼单或原淋+幼淋）>5%但≦20%，经过有效抗白血病治疗一个疗程仍未达完全缓解者；（2）骨髓原粒（原单+幼单或原淋+幼淋） > 20%者；（3）骨髓外白血病细胞浸润者三、持续完全缓解(continual complete remission，CCR)：从CR起其间无白血病复发达3-5年者四、长期存活：白血病自确诊之日起，存活时间（包括无病或带病生存）达5年或5年以上者五、临床治愈：指停止化疗5年或无病生存达10年者

　　疟原虫的主要致病阶段是红细胞内期的裂体增殖期。致病力强弱与侵入的虫种、数量和人体免疫状态有关。潜伏期潜伏期(incubation period)，指疟原虫侵入人体到出现临床症状的间隔时间，包括红细胞外期原虫发育的时间和红细胞内期原虫经几代裂体增殖达到一定数量所需的时间。潜伏期的长短与进入人体的原虫种株、子孢子数量和机体的免疫力有密切关系。恶性疟的潜伏期为7~27天；三日疟的潜伏期为18~35天；卵形疟的潜伏期为11~16天；间日疟的短潜伏期株为11~25天，长潜伏期株为6~12个月或更长。对我国河南、云南、贵州、广西和湖南等省志愿者进行多次感染间日疟原虫子孢子的实验观察，表明各地均兼有间日疟长、短潜伏期2种类型，而且二者出现的比例有由北向南短潜伏期比例增高的趋势。由输血感染诱发的疟疾，潜伏期一般较短。疟疾发作疟疾发作(paroxysm)，疟疾的一次典型发作表现为寒战、高热和出汗退热三个连续阶段。发作是由红细胞内期的裂体增殖所致，当经过几代红细胞内期裂体增殖后，血中原虫的密度达到发热阈值(threshold)，如间日疟原虫为10~500个/μl血，恶性疟原虫为500~1300个/μl血。红细胞内期成熟裂殖体胀破红细胞后，大量的裂殖子、原虫代谢产物及红细胞碎片进入血流，其中一部分被巨噬细胞、中性粒细胞吞噬，刺激这些细胞产生内源性热原质，它和疟原虫的代谢产物共同作用于宿主下丘脑的体温调节中枢，引起发热。随着血内刺激物被吞噬和降解，机体通过大量出汗，体温逐渐恢复正常，机体进入发作间歇阶段。由于红细胞内期裂体增殖是发作的基础，因此发作具有周期性，此周期与红细胞内期裂体增殖周期一致。典型的间日疟和卵形疟隔日发作1次；三日疟为隔2天发作1次；恶性疟隔36~48小时发作1次。若寄生的疟原虫增殖不同步时，发作间隔则无规律，如初发患者。不同种疟原虫混合感染时或有不同批次的同种疟原虫重复感染时，发作也多不典型。疟疾发作次数主要取决于患者治疗适当与否及机体免疫力增强的速度。随着机体对疟原虫产生的免疫力逐渐增强，大量原虫被消灭，发作可自行停止。再燃和复发疟疾的再燃和复发(recrudescence)，疟疾初发停止后，患者若无再感染，仅由于体内残存的少量红细胞内期疟原虫在一定条件下重新大量繁殖又引起的疟疾发作，称为疟疾的再燃(recrudescence)。再燃与宿主抵抗力和特异性免疫力的下降及疟原虫的抗原变异有关。疟疾复发（relapse）是指疟疾初发患者红细胞内期疟原虫已被消灭，未经蚊媒传播感染，经过数周至年余，又出现疟疾发作，称复发。关于复发机理仍未阐明清楚，其中子孢子休眠学说认为由于肝细胞内的休眠子复苏，发育释放的裂殖子进入红细胞繁殖引起的疟疾发作。恶性疟原虫和三日疟原虫无迟发型子孢子，因而只有再燃而无复发。间日疟原虫和卵形疟原虫既有再燃，又有复发。贫血贫血(anemia)，疟疾发作数次后，可出现贫血，尤以恶性疟为甚。怀孕妇女和儿童最常见，流行区的高死亡率与严重贫血有关。贫血的原因除了疟原虫直接破坏红细胞外，还与下列因素有关：①脾功能亢进，吞噬大量正常的红细胞。②免疫病理的损害。疟原虫寄生于红细胞时，使红细胞隐蔽的抗原暴露，刺激机体产生自身抗体，导致红细胞的破坏。此外宿主产生特异抗体后，容易形成抗原抗体复合物，附着在红细胞上的免疫复合物可与补体结合，使红细胞膜发生显著变化而具有自身免疫原性，并引起红细胞溶解或被巨噬细胞吞噬。疟疾患者的贫血程度常超过疟原虫直接破坏红细胞的程度。③骨髓造血功能受到抑制。脾肿大初发患者多在发作3~4天后，脾开始肿大，长期不愈或反复感染者，脾肿大十分明显，可达脐下。主要原因是脾充血和单核—巨噬细胞增生。早期经积极抗疟治疗，脾可恢复正常大小。慢性患者，由于脾包膜增厚，组织高度纤维化，质地变硬，虽经抗疟根治，也不能恢复到正常。在非洲或亚洲某些热带疟疾流行区，出现“热带巨脾综合症”，可能是有疟疾的免疫反应所引起。患者多伴有肝大、门脉高压、脾功能亢进、巨脾症、贫血等症状；血中IgM水平增高。凶险型疟疾凶险型疟疾绝大多数由恶性疟原虫所致，但间日疟原虫引起的脑型疟国内已有报道。多数学者认为，凶险型疟疾的致病机制是聚集在脑血管内被疟原虫寄生的红细胞和血管内皮细胞发生粘连，造成微血管阻塞及局部缺氧所致。此型疟疾多发生于流行区儿童、无免疫力的旅游者和流动人口。临床表现复杂，常见的有脑型和超高热型，多表现为持续高烧、全身衰竭、意识障碍、呼吸窘迫、多发性惊厥、昏迷、肺水肿、异常出血、黄疸、肾功能衰竭、血红蛋白尿和恶性贫血等。凶险型疟疾来势凶猛，若不能及时治疗，死亡率很高。脑型疟疾（cerebral malaria, CM）大多数发生于恶性疟患者，但国内已报道由间日疟引起的，是儿童和无免疫力成人患者的主要死亡原因，临床上中枢神经系统症状明显，如剧烈头痛、昏迷、谵妄、抽搐、惊厥、体温高达40～41oC、但个别也有不发热者。常因昏迷并发感染而死亡。CM的发病机制、学说不一，据报道是一种多因素参与的免疫病理性疾病。患者体内某些细胞因子、粘附因子和一氧化碳是引起CM发病的重要因素，如过量的TNF-α、IFN-γ等细胞因子激活内皮细胞表达粘附受体，增强内皮细胞的粘附性，使受染红细胞粘附与脑的微血管内，导致血管阻塞，制成脑局部缺氧和营养耗竭而引起脑并发症。在不同疟疾流行区，凶险型疟疾的高发人群和临床表现都很不同。在稳定的高度疟疾流行区，出生几个月的婴儿和5岁以下的幼童是凶险型疟疾的高发人群，主要的临床表现是恶性贫血。在中度疟疾流行区，脑型疟疾和代谢性酸中毒是儿童常见的凶险型疟疾。在低度疟疾流行区，急性肾衰竭、黄疸和肺水肿是成年人常见的临床表现，贫血、低血糖症和惊厥在儿童中比较多见，而脑型疟疾和代谢性酸中毒在所有的年龄组都可有。免疫种类

一、进入游戏按”ESC“键进入设置系统；选择SKIP INTEODUCTION，如下图所示：二、接着选择”DISPLAY SUBTITLES“，如下图所示：三、然后选择”ENGLISH“，然后右键更改为中文，如下图所示：四、最后即可设置为中文模式了，再次按键右键就会变回英文模式，如下图所示：

基因工程靶向细胞疗法治疗尖锐湿疣、生殖器疱疹技术可以打破患者病部免疫抵制状态。根据患者不同感染状态和尖锐湿疣、疱疹病毒型别，先从患者体内提取部分单个核细胞，以特有技术赋予识别抗原的特异性，诱导患者自体免疫细胞增殖，然后再回输到患者体内，高效靶向性杀灭血液中和细胞内的人类乳头瘤病毒（HPV）、单纯疱疹病毒（HSV）病毒。此种技术能够高效减缓和阻止HPV、HSV病毒扩散进程，从内在消除尖锐湿疣、生殖器疱疹患者生命之威胁。还可杀灭尖锐湿疣、生殖器疱疹病毒，使相当部分尖锐湿疣、生殖器疱疹患者在短时间内达到治疗目标。也就是说，基因工程靶向细胞疗法是通过患者本身健康的免疫细胞，通过体外诱导，再回输会患者身体，实现自愈。因此基因工程靶向细胞治疗是切实可行的技术手段，是目前最新、最好的生物治疗方法。

生物技术包括以下5项技术（工程）：基因工程；细胞工程；酶工程；发酵工程；蛋白质工程。

基因工程,又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。步骤 1)提取目的基因 2)目的基因与运载体结合 3)将目的基因导入受体细胞 4)目的基因的检测和表达　1.转基因鱼 　　生长快、耐不良环境、肉质好的转基因鱼（中国）。 　　2.转基因牛 　　乳汁中含有人生长激素的转基因牛（阿根廷）。 　　3.转黄瓜抗青枯病基因的甜椒 　　4.转鱼抗寒基因的番茄 　　5.转黄瓜抗青枯病基因的马铃薯 　　6.不会引起过敏的转基因大豆</B> 　　7.超级动物 　　导入贮藏蛋白基因的超级羊和超级小鼠 　　8.特殊动物 　　</B>导入人基因具特殊用途的猪和小鼠 　　9.抗虫棉 　　苏云金芽胞杆菌可合成毒蛋白杀死棉铃虫，把这部分基因导入棉花的离体细胞中，再组织培养就可获得抗虫棉。 基因工程胰岛素 基因工程干扰素 其它基因工程药物 SCID的基因工程治疗 等等 细胞工程定义1：通过细胞融合、核移植、细胞器移植或染色体操作，产生杂种细胞并发育成个体的技术。定义2：应用细胞生物学和分子生物学的方法，通过类似于工程学的步骤在细胞整体水平或细胞器水平上，遵循细胞的遗传和生理活动规律，有目的地制造细胞产品的一门生物技术。 高中阶段一般为细胞融合，细胞重组，植物体细胞杂交应用：繁育优良品种，获得可以持续分泌干扰素的体外培养细胞系等等

1、基因工程也称为遗传工程，是生物技术的主体技术。基因工程是指按照人类的愿望，将不同生物的遗传物质在体外人工剪切并和载体重组后转入细胞内进行扩增，并表达产生所需蛋白质的技术。基因工程能够打破种属的界限，在基因水平上改变生物遗传性，并通过工程化为人类提供有用产品及服务。2、细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的方法，通过某种工程学手段，在细胞整体水平或细胞器水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合技术科学。细胞工程涉及的领域相当广泛，就其技术范围而言，大致有细胞融合技术、细胞拆合技术、染色体导入技术、基因转移技术、胚胎移植技术和细胞组织培养技术等。

自己去看原理！百度百科就行 不要没文化！

我对他并不是很了解，也不知道他有哪些优秀作品，但是无论怎样，他这样的结果都是比较令人惋惜的。

原生动物门 鞭毛虫纲 肉足虫纲 孢子虫纲 纤毛虫纲

首先在这里和大家解释一下色斑色斑其实是指和周围肤色颜色不同的斑点，属色素障碍性皮肤病，是由于皮肤黑色素的增加而形成的一种常见于面部呈褐色或黑色素沉着性、损容性的皮肤疾病，多发于面颊和前额部位，包括雀斑、咖啡斑、日晒斑、老年斑、太田痣、伊藤痣等，多见于女性，与遗传、日晒、皮肤老化有关，日晒后有的斑会加重。色斑的发生率高，又缺乏理想的治疗，一直是皮肤美容的一大难题，而激光治疗为色斑提供了较理想的治疗方法。激光祛斑不同于传统的化学性或物理性的剥脱方法，它采用一种对皮肤创伤更小的方式来根本性地祛除色斑，所以更安全，效果也更好。激光祛斑的原理激光可以选择性地作用于不同的皮肤组织，只要采用特定的光源就可以保证只对色斑产生作用，而不会影响到正常的皮肤组织。激光能量可在极短的时间内被病变中的色素颗粒吸收，产生极高的温度，使其迅速膨胀，形成微型爆破，产生汽化、粉碎成非常小的颗粒，然后被组织内的巨噬细胞吞噬、清除。像常听说的红宝石(RUBY)激光就是运用激光原理，以红宝石为媒介，主要针对黑色及咖啡色色素、色斑，将光线和色素结合，使之被分解，当色素渐渐被身体吸收后，色斑的颜色就会随之变淡了最后强调一下瘢痕体质的患者有可能出现瘢痕过度增生反应

引自百度百科： 激光")去色素斑的原理是由于不同类型的激光产生光线") 颜色不同，某一特定波长的激光只被相应颜色的色素")吸收。因此整形机构利用激光仪产生强度大的光束") ，使色素消退，以达到去除色素斑的目的。并且，只有病变") 的细胞") 才吸收特定的激光，而正常的皮肤组织是不会受到损伤")的，所以激光去色素斑不会留下疤痕") 在操作过程中，被受术者会有针刺一样的感觉，不需要使用麻醉药物。 直白的理解，就是把斑用激光烧掉，而不伤害正常皮肤，烧掉的部分愈合后会结痂。第一次做的时候疼哭了啊（斑实在太多）做完以后水泡、红肿都有，冰敷了一阵才稍微好一点，过后的一两周都满脸痂，戴口罩出门。防晒避光饮食注意一个都不能少。 关于治疗效果，这个肯定是治标的。 我一个疗程应该去五次，现在做了三次，仍然有顽固的斑点浮出来，也许长的深去不干净吧。再说各人体质不同，饮食起居生活习惯不同，比如天天熬夜抽烟或者经常晒太阳，还是会重新长斑的；以后可能妊娠斑、老年斑仍然会长（医生原话）。

试剂1．Ringer 溶液氯化钠 0.85g氯化钾 0.25g氯化钙 0.03g蒸馏水 100ml2. l%、1/5000詹纳斯绿B溶液称取50rug詹纳斯绿B溶于5mi Ringer溶液中．稍加微热(30—40℃)，使之溶解，用滤纸过滤后，即为1%原液1mI，加入49ml Ringer溶解，即生1/5000工作液装入瓶中备用。最好现用现配，以保持它的充分氧化能力。实验操作 1. 人口腔粘膜上皮细胞线粒体的超活染色观察(1) 取清洁载玻片放在37℃恒温水浴锅的金属板上，滴2 滴詹纳斯绿B 应用染液。(2) 实验者用牙签宽头在自己口腔粘膜处稍用力刮取上皮细胞，将刮下的粘液状物放入载玻片的染液滴中，染色10～15min(注意不可使染液干燥，必要时可再加滴染液)，盖上盖玻片，用吸水纸吸去四周溢出的染液，置显微镜下观察。(3) 在低倍镜下，选择平展的口腔上皮细胞，换高倍镜或油镜进行观察。可见扁平状上皮细胞的核周围胞质中，分布着一些被染或蓝绿色的颗粒状或短棒状的结构，即是线粒体。 顺便推荐一下“生物秀”这个网站

氯化钠，氯化钾，氯化钙，重碳酸钠，磷酸氢二钠，葡萄糖，水。Ringer氏溶液的配方：氯化钠8.5克，氯化钙0.12克，重碳酸钠0.20克，氯化钾0.14克，磷酸氢二钠0.01克，葡萄糖2.0克，水1000毫升。林格氏(Ringer"s)液，即复方氯化钠注射液。包含成分氯化钠0.82%~0.9%、氯化钾0.025%~0.035%、氯化钙0.03%~0.036%，渗透压与血浆渗透压相等。

如果不动笔写出来笔记，就永远也不会动笔了。看文献可以修身养性平天下何乐而不为。 关于德隆大学 Cancer-associated fibroblasts，文章中的解释如下： 正常的纤维细胞产生维持细胞外基质的组分如collagens胶原蛋白质, fibres纤维, glycosaminoglycans葡萄氨聚糖 and glycoproteins糖蛋白 and are therefore vital in tissue repair in wound healing.( Circulation Research. 2018;122:540–542 ) 一张图来解释纤维细胞类型： 然而，CAFs来源于正常的 成纤维细胞 、 周细胞 、 平滑肌细胞 、 纤维细胞 或 间充质干细胞 。这些CAFs通过分泌生长因子如血管内皮生长因子( VEGF )、血小板衍生生长因子( PDGF )、成纤维细胞生长因子( FGF )和其他 趋化因子 来刺激血管生成从而支持肿瘤生长。 在血管内皮和基板之间的散在分布的一种扁平而有突起的细胞叫 周细胞 （pericyte）。内含肌动蛋白丝，肌球蛋白等，具有收缩功能。他还参与毛细血管直径的双向调控；毛细血管受损时，周细胞还可增殖，分化为内皮细胞和成纤维细胞。 细胞质内除含有一定数量的线粒体之外，还有少量的粗面内质网、游离核糖体、高尔基体及散在的溶酶体和脂粒等。间充质的间质是无色透明的液体。有很强的分裂和分化能力，在胚胎发育的过程中不仅是各种结缔组织的共同祖先，而且分化和发育成血管的内皮及平滑肌等其他种类的组织。在成年的动物的结缔组织中仍然可以看见一些具有发育潜力的间充质细胞。 MSCs是干细胞家族的重要成员，可分化为脂肪、骨、软骨、心肌等多种组织细胞，在修复骨骼、软骨及受损心脏细胞，治疗炎症和免疫系统疾病方面具有很大潜力。 细胞外基质蛋白和相关因子的集合 ECM-related genes ： 在于对CAF定义了三个亚群。

1.PV是一种多能干细胞疾病根据干细胞增殖分化理论，干细胞的异常可直接导致各系造血细胞的异常。由于PV在外周血表现为全血细胞增多，在骨髓组织学上表现为三系细胞增生，故在50年代人们就推测PV为干细胞疾患。1976年，Adamson等对两名PV的妇女进行了葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)同功酶分析，结果发现其皮肤成纤维细胞、淋巴细胞含有两型G-6-PD同功酶(GdA/GdB)，而外周红细胞、粒细胞、血小板均只含相同的A型G-6-PD(GdA)。这表明它们来源于A型同功酶的干细胞，从而证实了PV是干细胞疾患的推断。应用Southem杂交和PCR等分子生物学技术，采用X连锁基因多态性和灭活式样分析，进一步肯定了上述结论，发现约80%女性PV患者其外周血中性粒细胞为单克隆性，而T淋巴细胞为多克隆。2.PV的细胞和分子水平缺陷在半固体培养基中，PV患者骨髓细胞培养能形成自发性的CFU-E和BFU-E集落，而正常人和继发性细胞增多症患者均无或很少有自发性集落形成。且与继发性红细胞增多症不同，PV患者血浆及尿中的促红细胞生长素(EPO)水平不增高，因此人们推测可能与EPO)信号传导途征异常，也许是EPO受体(EPO-R)本身异常有关，但对PV患者EPOY-R结构的研究表明PV患者并无EPO-R基因结构异常。最近研究发现PV系祖细胞对EPO、胰岛素样生长因子1(1GF-1)高度敏感，从而导致了红系细胞的不可控制的产生。PV患者随着病程进展，骨髓中纤维母细胞不断增多是对巨核细胞释放的血小板衍生生长因子(PDGF)反应性增殖的结果，Pv本身并不累及纤维母细胞。3.大系列的PV细胞遗传学研究表明约40%的患者有染色体核型异常，初诊时常见异常有del(20)(q11)、+8和+9，这些异常可见于PV病程的始终，对临床表现和病程影响很少，可能与疾病本身有关。目前认为与PV可能相关的染色体异常还有del(1)(P11)、del(3)(P11;p14)、t(1;6)(q11;p21)和t(1;9)(q19;q14)。由于del(20)(q11)是PV最为常见的染色体异常，人们正在就此着手寻找PV的发病靶基因，现已确定一个共同缺失片段并已构建跨越此片段的人工酵母染色体，此工作正在进一步研究之中。在欧洲血统犹太人中发现的家族性PV，表明PV可能存在有遗传易感因素。此外有人认为PV是受Friend病毒变种“红细胞增生性病毒”感染所致，将含有这种病毒的小鼠脾滤过液注射入正常的小白鼠体内，可引起红细胞容量增多和脾肿大，但在人类还未得到充分证实。(一)发病原因本病的病因尚不清楚。大多数病人的血浆和尿中EPO水平不但不增加，反而显著减少。细胞培养显示PV患者红系祖细胞EPO受体的数目、亲和力和表达与正常人无差异，对编码EPO基因进行序列分析也未发现异常，上述结果显示该病的发病无EPO受体这一环节。近代研究表明PV不是正常干细胞的过度增生，而是由单一细胞起源的异常克隆性增殖所致。(二)发病机制骨髓红细胞系显著增生导致外周血细胞容量增多的发病机制可能与下列因素有关。1.“内生性”红细胞克隆的形成骨髓体外进行干细胞培养时，正常骨髓细胞形成晚期红系祖细胞集落(CFU-E)需要在培养基中加EPO，而PV患者的骨髓细胞不加入EPO即能生长，提示本病患者这种不依赖EPO生成的红细胞克隆具有“肿瘤”性质。如果PV患者的骨髓培养也另外加入EPO，则在形成的CFU-E中，既有PV的细胞，又有正常红细胞，说明PV患者体内除PV细胞克隆外，尚残留正常干细胞，但其增殖受到PV克隆的抑制。目前认为PV的异常克隆是从单一细胞起源，持续增生，具有优势抑制正常克隆，同时具有细胞遗传学不稳定性，临床上可发现PV转化为急性白血病的病例。2.红系祖细胞对EPO敏感性增强PV患者及正常人的骨髓细胞做干细胞培养时，加入相同浓度EPO，PV患者早期红系祖细胞集落(BFU-E)和CFU-E数均比正常人显著增多，亦比患者不加EPO时生长CFU-E明显增多。当培养中加入EPO抗体后，PV患者CFU-E生成数即减少。上述结果提示PV患者红系祖细胞对EPO的敏感性增强，这也是导致红细胞增多的原因之一。3.多能干细胞水平增殖异常正常红细胞含A型和B型2种葡萄糖6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)的同工酶，而PV患者的红、粒细胞和血小板仅含A型一种，而成纤维细胞和淋巴细胞中仍含A、B二型G-6-PD同工酶，说明本病是起源于同一多能干细胞水平的单一克隆性疾病。4.细胞凋亡的异常有研究发现PV患者有核红细胞生存时间明显长于正常人，PV集落对IL-3，SCF都高度敏感，而这些因子均能延缓红系祖细胞发生凋亡。细胞培养发现PV患者和正常对照在缺乏细胞因子的培养条件下均发生细胞凋亡，但PV患者的细胞凋亡少于正常对照，这种差异可能与PV患者bcl-2高表达有关。5.其他另有实验提示PV患者血清中可能有一种糖蛋白，能刺激红细胞生成，对粒细胞和血小板也有刺激作用，称为骨髓刺激因子。此因子的抗原性与：EPO不同，但需要少量EPO参与才能起作用。其性质有待进一步研究。

细胞因子（Cytokine）是由免疫细胞或非免疫细胞合成和分泌的小分子多肽。天然免疫和特异性免疫的效应阶段大部分是由细胞因子介导的。细胞因子作为免疫活性细胞间相互作用的介质（mediator），对免疫应答的发生、调节及效应等均起重要作用。细胞因子：细胞分泌的具有免疫调节和调节活性的多肽分子，包括：淋巴因子（Lymphokine）：淋巴细胞产生的细胞因子单核因子（Monokine）：单核巨噬细胞产生的细胞因子白细胞介素（IL）：介导白细胞间相互作用的细胞因子，包括IK-1~IL-23。集落刺激因子（CSF）：刺激造血干/祖细胞的细胞因子，包括Multi-CSF(IL-3),GM-CSF,G-CSF,M-CSF，红细胞生成素（Epo），干细胞因子（SCF），白血病抑制因子（Leukemia inhibitory factor, LIF），血小板生成素（Tpo）等。干扰素（IFN）：抑制病毒复制，调节免疫应答的细胞因子，包括IFNa，IFNb，IFNg等肿瘤坏死因子（TNF）：具有诱导肿瘤凋亡效应的细胞因子，包括TNFa，TNFb（LTa），LTb，TRAIL， FAS配体等。趋化因子（Chemokine）：具有吸引白细胞到局部效应的细胞因子，根据分子结构分为4种亚家族，包括CXC，CC，C和CX3C亚家族。TGFb（Transforming growth factor b）超家族：包括TGFb1，2，3、 inhibin 、BPM-2--15 （ Bone morphogenetic protein-2--15）等。生长因子（Growth factor）：对细胞具有促生长作用的细胞因子，包括IGF-1，EGF， PDGF，FGF， VEGF等。

研究人员发现，在脂肪层再度增长和头发再生的过程中，一种能够产生脂肪前体细胞的干细胞发挥了重要作用。这种细胞会产生一种名为PDGF（血小板衍生生长因子）的分子，这种分子能恢复小鼠毛发的生长。霍斯利团队正试图确定在毛发生长中可能起作用的、由脂肪前体干细胞产生的其他分子信号，以完善该结论。此外，他们还将进一步展开实验，以确定这种机制是否在人体中也同样存在并发挥作用。

　参与细胞免疫应答的细胞因子主要分以下几类，下面将会介绍他们在各自的岗位上发挥的主要作用吧1.白细胞介素　　白细胞介素（IL）简称白介素，由白细胞（和其他细胞）产生，并在细胞间发挥广泛炎症、刺激活化作用的细胞因子。已报道的白细胞介素有30余种。Th1细胞因子主要是IL-2、IL-12、IFNγ；Th2细胞因子主要是IL-4、IL-5、IL-6、IL-10，分别促进Th1、Th2分化和功能，分别促医学""教育网搜集整理进细胞免疫和体液免疫应答。IL-10和TGFβ是调节性T细胞的效应因子。ILs 主要产生细胞 主要生物学作用IL-1 单核-吞噬细胞血管内皮细胞 ① 促进T、B淋巴细胞活化、增生；②增强NK细胞和单核巨噬细胞活性；③刺激下丘脑体温调节中枢，引起发热；④介导炎症反应IL-2 活化T细胞（Th1）NK细胞 ① 促进T、B细胞增殖分化；②增强Tc细胞、NK细胞和NK巨噬细胞杀伤活性；③诱导LAK形成，产生抗瘤作用；④作用具有沿种系谱向上的约束性IL-4 活化T细胞（Th2）肥大细胞 ① 促进T、B细胞增殖分化；②诱导Ig类别转换，促进肥IgE或IgG类抗体生成；③抑制Th1分泌IFN-γ、TNF-β、IL-2、等细胞因子，下调细胞免疫应答；④诱导活化CD4+T细胞分化为Th2细胞IL-5 活化T细胞（Th2）肥大细胞 ① 促进B细胞增殖分化，诱导Ig类别转换，产生IgA类抗体；②促进嗜酸性粒细胞增殖分化IL-6 单核-吞噬细胞活化T细胞 ① 促进B细胞增殖分化，合成分泌Ig，②促进T细胞增殖分泌，③参与炎症反应，引起发热IL-8 单核-吞噬细胞血内皮细胞活化T细胞（Th2） ① 吸引中性粒细胞，嗜碱性粒细胞和T细胞作定向趋势运管动；②激活中性粒细胞、嗜碱性粒细胞，使之脱颗粒释放生物活性介质，增强炎症和过敏反应IL-10 单核-吞噬细胞 ① 抑制巨噬细胞功能，降低抗原递呈作用，减少单核因子生成；②抑制Th1细胞分泌IL-2、IFN-γ、TNF-β等细胞因子，下调细胞免疫应答；③促进B细胞增殖和抗体生成，上调体液免疫应答IL-12 单核-吞噬细胞 ① 促进Tc、NK细胞增殖分化，增强其杀伤活性；②诱导活化CD4+T细胞分化为CD4+Th1细胞，③作用有种属特异性　　2.干扰素　　干扰素（IFN）是最早发现的细胞因子，因其具有干扰病毒感染和复制的能力故称干扰素。可分为I型和Ⅱ型干扰素：I型干扰素包括IFN-α、IFN-β，由APC和成纤维细胞产生，有较强抗病毒转录复制作用；II型干扰素即IFN-γ，主要由活化T细胞产生，通过激活APC功能和巨噬细胞、NK、CTL细胞功能发挥抗病毒作用。IFN-α已被成功应用于慢性乙肝的治疗。　　3.肿瘤坏死因子　　肿瘤坏死因子（TNF）：使肿瘤发生出血、坏死的细胞因子。肿瘤坏死因子超家族（TNFSF）目前至少有19个成员，在调节适应性免疫、杀伤靶细胞和诱导细胞凋亡等过程中发挥重要作用。肿瘤坏死因子分为TNF-α和淋巴毒素（LT，或TNF-β）。　　4.集落刺激因子　　集落刺激因子（CSF）是指能够刺激多能造血干细胞和不同发育分化阶段的造血祖细胞增殖分化，在半固体培养基中形成相应细胞集落的细胞因子。目前发现的集落医学""教育网搜集整理刺激因子有粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）、粒细胞集落刺激因子（G-CSF）、红细胞生成素（EPO）、干细胞生长因子（SCF）、血小板生成素（TPO）和白细胞介素-11等。　　5.生长因子　　生长因子（GF）是具有刺激细胞生长作用的细胞因子，包括转化生长因子-β（ TGF-β）、表皮细胞生长因子（EGF）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）、成纤维细胞生长因子（FGF）、神经生长因子（NGF）、血小板衍生的生长因子（PDGF）等。　　6.趋化因子　　趋化性细胞因子：是一个蛋白质家族，分子量多为8-10kDa的多肽组成。趋化性细胞因子的主要功能是招募血液中的单核细胞、中性粒细胞、淋巴细胞等进入感染发生的部位。分为4种亚家族：1.CC亚家族；2.CXC亚家族3.C亚家族4.CX3C亚家族。

　　近年来，以干细胞为核心的再生医疗项目备受关注，从抗衰老、皮肤毛发再生、性功能改善，再到骨骼再生、免疫力提升等，其以促进组织再生或自我修复的治疗模式为人类带来了无限可能。　　目前在日本干细胞治疗中，最受欢迎的、效果最显着的、风险最低的就是干细胞上清液疗法。　　什么是脂肪干细胞上清液疗法？　　脂肪干细胞上清液疗法，是将脂肪干细胞分泌出来的复数的成长因子以及胶原蛋白、玻尿酸等数百种蛋白质用于实际医疗中的治疗方法。　　最大限度的使用人类自身的再生能力，来调和自身的成长因子，是安全有效的美容、抗衰、提高身体机能的疗法。　　什么是干细胞培养上清液？　　首先采取人类脂肪组织→2.进行干细胞分离→3.干细胞增殖培养（干细胞培养上清液）　　在干细胞增殖培养过程中，干细胞会分泌出各种细胞因子，所以干细胞培养上清液中富含从干细胞分泌出来的各种细胞因子，这些细胞因子拥有细胞分泌出来的数百种蛋白质，可以调节细胞的增值及分化，使细胞中受损组织及细胞恢复功能受损组织及细胞的恢复及再生是让我们恢复美丽与健康的关键。干细胞上清液的功能与效果　　抗衰老，美容　　IGF（胰岛素样生长因子）可促进皮肤再生，有改善皱纹，肌肤弹性再生、增发的效果。　　EGF（表皮生长因子）可改善色斑，皮肤暗淡，预防皱纹。　　增发，育发　　VEGF（血管内皮生长因子）增发，育发　　KGF(角质化细胞生长因子)增发，育发　　男性功能障碍，组织修复再生，提高免疫力　　HGF（干细胞生长因子），PDGF（血小板衍生生长因子）,转化生长因子：治疗男性功能障碍，产生抗原抗体反应，有消炎作用及组织修复作用。　　预防老年痴呆　　NGF（神经生长因子），BDNF（脑源性神经营养因子）：促进神经细胞成长，预防老年痴呆。　　独特治疗理念的医疗中心　　日本银座干细胞诊所，位于东京都中央区银座，该院已获得日本厚生劳动省批准的自体脂肪干细胞临床应用资质。是日本少数获得厚生劳动省认可的两种再生医疗机构，厚生劳动省发布的再生医疗委员会委员。　　“再生医学”抗衰与疾病治疗为理念，独特而全面的治疗流程：通过自体脂肪培养，让抗衰老、关节炎、谢顶脱发各类患者都可以享受健康快乐的精彩人生。解决顾客对于容颜和身体上的困扰，更致力于利用安全可靠的再生医疗技术，让患者拥有一个由内而外的健康身体。　　多睦健康，提供完善的海外就医服务　　从患者进行咨询开始到出国就医再回国，提供完善的就医服务,协助患者完成从病例资料的专业翻译、签证的申请、海外的全程陪同翻译服务，都有着严格的要求和标准。公司有自营海外医疗经验团队，势必成为服务于客户的贴心、专业、全面的海外医疗顾问团队。

肉芽组织（granulation tissue）：由新生薄壁的毛细血管以及增生的成纤维细胞构成，并伴有炎性细胞浸润，肉眼表现为鲜红色，颗粒状，柔软湿润，形似鲜嫩的肉芽故而得名。为幼稚阶段的纤维结缔组织.镜下可见大量由内皮细胞增生形成的实性细胞索及扩张的毛细血管，向创面垂直生长，并以小动脉为轴心，在周围形成袢状弯曲的毛细血管网。在毛细血管周围有许多新生的纤维母细胞，此外常有大量渗出液及炎性细胞。炎性细胞中常以巨噬细胞为主，也有多少不等的中性粒细胞及淋巴细胞,因此肉芽组织具有抗感染功能。巨噬细胞能分泌PDGF、FGF、TGF－β、IL－1及TNF，加上创面凝血时血小板释放的PDGF，进一步刺激纤维母细胞及毛细血管增生。巨噬细胞及中性粒细胞能吞噬细菌及组织碎片，这些细胞破坏后释放出各种蛋白水解酶，能分解坏死组织及纤维蛋白，肉芽组织中毛细血管内皮细胞亦有吞噬能力，并有强的纤维蛋白溶解作用。 瘢痕性修复或称不完全性修复，是在组织细胞不能进行再生性修复的情况下，由损伤局部的间质新生出的肉芽组织溶解吸收异物并填补缺损，继之肉芽组织逐渐成熟，转变为瘢痕组织，使缺损得到修复。一、肉芽组织（一）概念肉芽组织（granulation tissue）是新生的富含毛细血管的幼稚阶段的纤维结缔组织。（二）肉芽组织的成分及形态特点肉芽组织是由纤维母细胞、毛细血管及一定数量的炎性细胞等有形成分组成的。其形态特点如下。1．肉眼观察 肉芽组织的表面呈细颗粒状，鲜红色，柔软湿润，触之易而无痛觉，形似嫩肉故名。2．镜下观察 基本结构为：①大量新生的毛细血管，平行排列，均与表面相垂直，并在近表面处互相吻合形成弓状突起，肉眼呈鲜红色细颗粒状。②新增生的纤维母细胞散在分布于毛细血管网络之间，很少有胶原纤维形成。③多少不等的炎性细胞浸润于肉芽组织之中。肉芽组织内常含一定量的水肿液，但不含神经纤维，故无疼痛。（三）肉芽组织的作用肉芽组织在组织损伤修复过程中有以下重要作用：①抗感染保护创面；②填补创口及其它组织缺损；③机化或包裹坏死、血栓、炎性渗出物及其他异物。机化（organization）是指由新生的肉芽组织吸收并取代各种失活组织或其它异物的过程。最后肉芽组织成熟，转变为纤维瘢痕组织。包裹（encapsulation）是一种不完全的机化。即在失活组织或异物不能完全被机化时，在其周围增生的肉芽组织成熟为纤维结缔组织形成包膜，将其与正常组织隔离开。（四）肉芽组织的结局肉芽组织在组织损伤后2～3天内即可开始出现，填补创口或机化异物。随着时间的推移，肉芽组织按其生长的先后顺序，逐渐成熟。其主要形态标志为：水分逐渐吸收；炎性细胞减少并逐渐消失；毛细血管闭塞、数目减少。最终肉芽组织成熟为纤维结缔组织并转变为瘢痕组织。

（一）根据产生细胞因子的细胞种类不同分类1.淋巴因子（lymphokine)　于命名，主要由淋巴细胞产生，包括T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞等。重要的淋巴因子有IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10、IL-12、IL-13、IL-14、IFN-γ、TNF-β、GM-CSF和神经白细胞素等。2.单核因子（monokine）　主要由单核细胞或巨噬细胞产生，如IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α、G-CSF和M-CSF等。3.非淋巴细胞、非单核-巨噬细胞产生的细胞因子　主要由骨髓和胸腺中的基质细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞等细胞产生，如EPO、IL-7、IL-11、SCF、内皮细胞源性IL-8和IFN-β等。（二）根据细胞因子主要的功能不同分类1.白细胞介素（interleukin, IL)　1979年开始命名。由淋巴细胞、单核细胞或其它非单个核细胞产生的细胞因子，在细胞间相互作用、免疫调节、造血以及炎症过程中起重要调节作用，凡命名的白细胞介素的cDNA基因克隆和表达均已成功，已报道有三十余种（IL-1―IL-38）。2.集落刺激因子（colony stimulating factor, CSF)　根据不同细胞因子刺激造血干细胞或分化不同阶段的造血细胞在半固体培养基中形成不同的细胞集落，分别命名为G（粒细胞）-CSF、M（巨噬细胞）-CSF、GM（粒细胞、巨噬细胞）-CSF、Multi（多重）-CSF（IL-3）、SCF、EPO等。不同CSF不仅可刺激不同发育阶段的造血干细胞和祖细胞增殖的分化，还可促进成熟细胞的功能。3.干扰素（interferon, IFN)　1957年发现的细胞因子，最初发现某一种病毒感染的细胞能产生一种物质可干扰另一种病毒的感染和复制，因此而得名。根据干扰素产生的来源和结构不同，可分为IFN-α、IFN-β和IFN-γ，他们分别由白细胞、成纤维细胞和活化T细胞所产生。各种不同的IFN生物学活性基本相同，具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等作用。4.肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor, TNF)　最初发现这种物质能造成肿瘤组织坏死而得名。根据其产生来源和结构不同，可分为TNF-α和TNF-β两类，前者由单核-巨噬细胞产生，后者由活化T细胞产生，又名淋巴毒素（lymphotoxin, LT)。两类TNF基本的生物学活性相似，除具有杀伤肿瘤细胞外，还有免疫调节、参与发热和炎症的发生。大剂量TNF-α可引起恶液质，因而TNF-α又称恶液质素（cachectin)。5.转化生长因子-β家族（transforming growth factor-β family, TGF-β family)　由多种细胞产生，主要包括TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3、TGFβ1β2以及骨形成蛋白（BMP）等。6.生长因子（growth factor,GF）如表皮生长因子（EGF）、血小板衍生的生长因子（PDGF）、成纤维细胞生长因子（FGF）、肝细胞生长因子（HGF）、胰岛素样生长因子-I（IGF-1）、IGF-Ⅱ、白血病抑制因子（LIF）、神经生长因子（NGF）、抑瘤素M（OSM）、血小板衍生的内皮细胞生长因子（PDECGF）、转化生长因子-α（TGF-α）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）等。7.趋化因子家族（chemokinefamily)　包括四个亚族：（1）C-X-C/α亚族，主要趋化中性粒细胞，主要的成员有IL-8、黑素瘤细胞生长刺激活性(GRO/MGSA）、血小板因子-4（PF-4）、血小板碱性蛋白、蛋白水解来源的产物CTAP-Ⅲ和β-thromboglobulin、炎症蛋白10（IP-10）、ENA-78；（2）C-C/β亚族，主要趋化单核细胞，这个亚族的成员包括巨噬细胞炎症蛋白1α（MIP-1α）、MIP-1β、RANTES、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1/MCAF）、MCP-2、MCP-3和I-309。（3）C型亚家族的代表有淋巴细胞趋化蛋白。（4）CX3C亚家族，Fractalkine是CX3C型趋化因子，对单核-巨噬细胞、T细胞及NK细胞有趋化作用。

免疫调节因子通过结合细胞表面相应的细胞因子受体而发挥生物学作用。免疫调节因子与其受体集合后启动复杂的细胞内分子间的相互作用，最终引起细胞基因转录的变化。免疫调节因子参与免疫应答与免疫调节，调节固有免疫和适应性免疫应答；刺激造血功能；刺激细胞活化、增殖和分化；诱导或抑制细胞毒作用，诱导其凋亡。作用1.自分泌作用。2.旁分泌作用。3.内分泌作用。免疫调节因子的作用特点：多效性、重叠性、协同性、拮抗性和双重性。免疫调节因子研究具有非常重要的理论和实用意义，它有助于阐明分子水平的免疫调节机理，有助于疾病的预防、诊断和治疗，特别是利用基因工程技术生产的重组细胞因子已用于治疗肿瘤、感染、炎症、造血功能障碍等，并收到良好疗效，具有非常广阔的应用前景。免疫调节因子正逐渐作为佐剂用于疫苗的研制特点（1）绝大多数细胞因子为质量小于25kDa的糖蛋白，质量低者如IL-8仅8kDa。多数细胞因子以单体形式存在，少数细胞因子如IL-5、IL-12、M-CSF和TGF-β等以双体形式发挥生物学作用。大多数编码细胞因子的基因为单拷贝基因（IFN-α除外），并由4-5个外显子和3-4个内含子组成。（2）主要与调节机体的免疫应答、造血功能和炎症反应有关。（3）通常以旁分泌（paracrine)或自分泌（autocrine)形式作用于附近细胞或细胞因子产生细胞本身。在生理状态下，绝大多数细胞因子只有产生的局部起作用。（4）高效能作用，一般在pM(10-12M）水平即有明显的生物学作用。（5）存在于细胞表面的相应高亲和性受体数量不多，在10-10000/每个细胞。细胞因子受体的研究进展相当迅速，根据细胞因子受体基因DNA序列以及受体胞膜外区氨基酸序列、同源性和结构，可分为四个类型：免疫球蛋白超家族、造血因子受体超家族、神经生长因子受体超家族和趋化因子受体。（6）多种细胞产生，一种IL可由许多种不同的细胞在不同条件下产生，如IL-1除单核细胞、巨噬细胞或巨噬细胞系产生外，B细胞、NK细胞、成纤维细胞、内皮细胞、表皮细胞等在某些条件下均可合成和分泌IL-1。（7）多重的调节作用（multipleregulatoryaction),免疫调节因子不同的调节作用与其本身浓度、作用靶细胞的类型以及同时存在的其它细胞因子种类有关。有时动物种属不一，相同的细胞因子的生物学作用可有较大的差异，如人IL-5主要作用于嗜酸性粒细胞，而鼠IL-5还可作用于B细胞。（8）重叠的免疫调节作用（overlappingregulatoryaction),如IL-2、IL-4、IL-9和IL-12都能维持和促进T淋巴细胞的增殖。（9）以网络形式发挥作用，免疫调节因子的网络作用主要是通过以下三种方式：（1）一种细胞因子诱导或抑制另一种细胞因子的产生，如IL-1和TGF-β分别促进或抑制T细胞IL-2的产生；（2）调节同一种细胞因子受体的表达，如高剂量IL-2可诱导NK细胞表达高亲和力IL-2受体；（3）诱导或抑制其它细胞因子受体的表达，如TGF-β可降低T细胞IL-2受体的数量，而IL-6和IFN-γ可促进T细胞IL-2受体的表达。（10）与激素、神经肽、神经递质共同组成了细胞间信号分子系统。（11）自限性分泌。卓大生物是国内第一家生产禽用免疫调节因子的企业,目前也是唯一家。 其研发生产的奇抗免疫调节因子是一款可提升免疫 系统功能的产品。养殖场使用有效控制阻止疾病在养殖场中延。而且还能够提升免疫力,一药多用,治病防病都就可以搞定。

通常培养细胞的生长需要多种纤维细胞生长因子顺序的协调作用，肿瘤细胞具有不依赖纤维细胞生长因子的自主性生长的特点。在分泌特点上，纤维细胞生长因子主要属于自分泌（autocrine）和旁分泌（paracrine）。许多纤维细胞生长因子已被提纯和确定了其结构组成。如血小板来源的纤维细胞生长因子（PDGF）是个热稳定、具较高正电荷的蛋白质，由含有二硫键的二聚体组成，分子量30000道尔顿左右。又如表皮纤维细胞生长因子（EGF）是个热稳定、含有53个氨基酸残基的多肽，分子量为6000道尔顿左右。各类纤维细胞生长因子都有其相应的受体，是普遍存在于细胞膜上的跨膜蛋白，不少受体具有激酶活性，特别是酪氨酸激酶活性（如PDGF受体、 EGF受体等）。纤维细胞生长因子有多种，如血小板类纤维细胞生长因子（血小板来源纤维细胞生长因子，PDGF；骨肉瘤来源纤维细胞生长因子ODGF）、表皮纤维细胞生长因子类（表皮纤维细胞生长因子，EGF、转化纤维细胞生长因子，TGFα和TGFβ）、成纤维细胞纤维细胞生长因子（αFGF、βFGF）、类胰岛素纤维细胞生长因子（IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ）、神经纤维细胞生长因子（NGF）、白细胞介素类纤维细胞生长因子（IL-1、IL-1、IL-3等）、红细胞生长素（EPO）、集落刺激因子（CSF）等。由于纤维细胞生长因子是由正常细胞分泌，既无药物类毒性，也无免疫反应，因此在研究其生理作用机制同时，有的已试用于临床治疗。如白细胞介素-2已用于治疗癌症，对肾癌、黑色素瘤效果明显；也用于免疫调节剂和自家免疫有关的疾病。白细胞介素-3用于治疗骨髓功能衰竭与血小板缺失等适应症。表皮纤维细胞生长因子用于人烧伤、创伤、糖尿病皮肤溃疡、褥疮、静脉曲张性皮肤溃疡和角膜损伤，可促进伤口愈合。纤维细胞生长因子是具有刺激细胞生长活性的细胞因子。所以

商号タカラバイオ株式会社设立平成14年4月1日资本金90亿6918万8496円（平成24年5月31日现在）本社滋贺県大津市瀬田三丁目4番1号従业员数タカラバイオグループ 1,128名（平成24年3月31日现在）主要株主宝ホールディングス株式会社

Senescence-associated beta-galactosidase (SA-β-gal or SABG) is a hypothetical hydrolase enzyme that catalyzes the hydrolysis of β-galactosides into monosaccharides only in senescent cells.Its existence was proposed in 1995 by Dimri et al.following the observation that when beta-galactosidase assays were carried out at pH 6.0, only cells in senescence state develop staining. They proposed a cytochemical assay based on production of a blue-dyed precipitate that results from the cleavage of the chromogenic substrate X-Gal. Since then, even more specific quantitative assays were developed for its detection at pH 6.0.Today this phenomenon is explained by the overexpression and accumulation of the endogenous lysosomal beta-galactosidasespecifically in senescent cells. Its expression is not required for senescence. However, it remains as the most widely used biomarker for senescent and aging cells, because it is easy to detect and reliable both in situ and in vitro.More in http://en.wikipedia.org/wiki/Senescence-associated_beta-galactosidaseb-半乳糖苷酶会在衰老的细胞中活化，它是在溶酶体内的水解酶，ph4的时候才有活性，但在衰老细胞中一样可以活化，而且不断积累细胞衰老的两个表型就是 b-半乳糖苷酶积累 和 细胞生长停滞，分裂停止。

Senescence-associated beta-galactosidase (SA-β-gal or SABG) is a hypothetical hydrolase enzyme that catalyzes the hydrolysis of β-galactosides into monosaccharides only in senescent cells.Its existence was proposed in 1995 by Dimri et al. following the observation that when beta-galactosidase assays were carried out at pH 6.0, only cells in senescence state develop staining. They proposed a cytochemical assay based on production of a blue-dyed precipitate that results from the cleavage of the chromogenic substrate X-Gal. Since then, even more specific quantitative assays were developed for its detection at pH 6.0.Today this phenomenon is explained by the overexpression and accumulation of the endogenous lysosomal beta-galactosidasespecifically in senescent cells. Its expression is not required for senescence. However, it remains as the most widely used biomarker for senescent and aging cells, because it is easy to detect and reliable both in situ and in vitro.http://en.wikipedia.org/wiki/Senescence-associated_beta-galactosidase书上写的是b-半乳糖苷酶会在衰老的细胞中活化，它是在溶酶体内的水解酶，ph4的时候才有活性，但在衰老细胞中一样可以活化细胞衰老的两个表型就是 b-半乳糖苷酶积累 和 细胞生长停滞，分裂停止。

开刊词||单细胞新药研发导论 单细胞新药研发导论|| 新药研发管线 人类开展药物筛选的方法与科学技术的发展密不可分，先后经历了活体评价（神农尝百草）、器官/组织筛选，再到现代的分子靶向、细胞表型等方法。在这个历程中，单细胞技术将怎样推进药靶的发现呢？ 在讲单细胞技术加速药靶发现之前，我们先来理解一下什么叫药靶以及相关的几个问题： 药物与机体生物大分子的结合部位即药物靶点。药物作用靶点涉及受体、酶、离子通道、转运体、免疫系统、基因等。可见，药靶不是有机体中天然存在的，它是疾病固有的特征，举两个例子： 但是生物大分子依然使一类最大的经典靶点，那么仅看人体的生物大分子的话，人体到底有多少潜在靶点呢？在后基因组时代我们可以回答这个问题，人类共有20000--25000个蛋白质编码的基因，加上人体微生物基因组编码蛋白基因，这个总量是可以衡量的。研究表明大约有5000个潜在的 可成药 的大分子靶点适合用于小分子药物开发，另外有3200个靶点可适用与生物学治疗。 以上，我们简单明白了靶点的基本性质，那么我的单细胞分析流程可以从哪些方面来入手药靶发现呢？ 首先，单细胞技术把我们认识靶点的精度拉到组织器官和生物大分子之间，这就是生命的基本单位：细胞。把细胞的类型和状态及其表达的基因、受体配体、通路、TCR/BCR、酶、离子通道、转运体的改变放入到新药研发的流程中我们不难发现，单细胞技术几乎重新为这个管线新着了一遍色。 单细胞水平的靶点更加接近真是世界。如EGFR调控的下游信号通路主要有RAS-RAF-MAPK通路和PI3K-AKT -mTOR通路，是细胞增殖和存活的重要信号通路，针对肿瘤细胞，EGFR是抗癌药物的重要靶点。那么肿瘤细胞还有哪些特有的通路呢？这时候我们可以做一个差异分析，于是，单细胞水平的生物标志物（biomarker）和靶点（target）是那样的接近： 随着单细胞多组学和空间技术的成熟，基于系统生物学和生物信息学的生物标志物及靶标发现系统日益成熟，人们得以快速确定与疾病发生、发展密切相关的关键因素，以发现新生物标志物和新靶标。 参考： 白东鲁，沈竞康，《创新药物研发经纬》，2019 Blass,白仁仁（译）《药物研发基本原理》，2019 Sarah Middleton,《Cell types to targets Single cell RNA sequencing for drug discovery》 阿波斯托利亚－玛蒂亚·钦巴瑞多，等 编 赵维莅，张俊 主译《癌症转化医学研究中的靶向治疗 》 Single-Cell Sequencing for Drug Discovery and Drug Development 2017 Single-Cell Mass Cytometry of Differential Immune and Drug Responses Across a Human Hematopoietic Continuum 2011 Heath, J., Ribas, A. & Mischel, P. Single-cell analysis tools for drug discovery and development. Nat Rev Drug Discov 15, 204–216 (2016). https://doi.org/10.1038/nrd.2015.16 DRUG-NEM: Optimizing drug combinations using single-cell perturbation response to account for intratumoral heterogeneity https://otd.harvard.edu/explore-innovation/technologies/single-cell-high-throughput-drug-screening

ok

决定同意多细胞生物体不同，真核细胞在时间和空间上的差异性。找到他们的原因，那就是真核生物和原核细胞比起来还可以复原。也就是拥有使得一生物的生存存。原核生物的界限并不清晰。

应该是嵌合型性染色体异常；随机计数100个细胞，分析核型，其中50个细胞是46，xy（正常），4个细胞是47，xxy（异常：x染色体多了一条），异常的细胞所占比例较少。

loom文件简介： http://linnarssonlab.org/loompy/format/index.html seurat： https://satijalab.org/seurat/mca_loom.html https://satijalab.org/loomR/loomR_tutorial.html loom文件结构 The loom file is simply an HDF5 file with a strict structure imposed on it. This structure helps keep consistency in an otherwise unordered binary file and provides security in the knowledge of which data is which. Below is a summary of the file structure and rules imposed on each dataset; for more details, please read the loom file specification. matrix The root of a loom file"s structure, it has two dimensions of n genes and m cells layers Alternative representations of the data in matrix, must have the same dimensions as matrix row_attrs and col_attrs Metadata for rows (genes) and columns (cells), respectively; each dataset in these groups must be one- or two-dimensional and the first dimension must be n for row_attrs or m forcol_attrs row_graphs and col_graphs Sparse cluster graphs in coordinate form; each graph is a group with three equal-length datasets: a (row index), b (column index), and w (value) 查看loom文件中的关键信息 从loom中提取信息 As metadata is stored in several datasets within a loom file, each loom object has a get.attribute.df method: a method for collecting various metadata datasets and organizing them into a data frame for ease of use. This method takes a direction to look in (either 1 or 2 for row (gene) or column (cell) metadata, respectively) and a list of metadata dataset names. See below in the “Chunk-based iteration” section for details about MARGINs in loomR. MARGIN: Several methods for a loom object have a MARGIN argument; this argument tells the loom file on which dimension to iterate over, add, or fetch data. To keep consistent with other R tools for single-cell RNAseq analysis, a MARGIN of 1 represents the rows, or genes, while a MARGIN of 2 represents the columns, or cells. This also applies to the shape field of a loom object: index 1 represents the number of genes in a loom file while index 2 represents the number of cells. 向loom中添加信息 We can layers, gene-level metadata (row_attrs), and cell-level metadata (col_attrs) to a loom object using loomR. You can read full details at the loom file specification. Methods for adding layers and matrices are provided by the loom class with add.layer, add.row.attribute, and add.col.attribute. All of the adding methods take a named list of either matrices or vectors. For example, to ENSEMBL IDs to gene-level metadata would be done as follows: 进行seurat操作 关闭loom

单细胞数据格式目前有这么几大派： 这么一来，很多分析流程就被固定在某个包中了，比如使用Seurat会一用到底，也不会去学习scater或其他R包了，但也许就错过了其他R包好用的一些功能（比如我感觉 scater 的 uniquifyFeatureNames 就很好用） 既然有需求，就有开发者添加功能 ，这里Davis McCarthy 和Alex Wolf就为Seurat添加了和其他数据类型转换的函数 还记得上次在 单细胞交响乐16-处理大型数据 中说到：处理大型数据遇到内存不足时，可以使用这个 HDF5Array R包（类似的还有 bigmemory , matter ），它会将底层数据做成HDF5格式，用硬盘空间来存储数据，必要时再调用一部分数据到内存。loom格式就是处理HDF5使用的 如果使用Seurat V2 ，还有一个自带的函数 Convert Seurat有一个函数 ReadH5AD 可以读取AnnData的H5AD文件 目前还不能直接将Seurat写成H5AD文件，因此不能之间将Seurat转为Scanpy；但是可以将loom文件作为桥梁实现Seurat转Scanpy，例如 Scanpy 有一个函数 scanpy.read_loom()

通常在单细胞RNA测序数据中观察到文库之间测序覆盖率的系统差异。它们通常是由细胞间的cDNA捕获或PCR扩增效率方面的技术差异引起的，这归因于用最少的起始材料难以实现一致的文库制备。标准化旨在消除这些差异，以使它们不干扰细胞之间表达谱的比较。这样可以确保在细胞群体中观察到的任何异质性或差异表达都是由生物学而不是技术偏倚引起的。 在这一点上，规范化和批次校正之间的区别需要注意。归一化的发生与批次结构无关，并且仅考虑技术偏差，而批次矫正仅在批次之间发生，并且必须同时考虑技术偏差和生物学差异。技术偏倚倾向于以相似的方式或至少以与它们的生物物理特性（例如长度，GC含量）有关的方式影响基因，而批次之间的生物学差异可能是高度不可预测的。这样，这两个任务涉及不同的假设，并且通常涉及不同的计算方法（尽管某些软件包旨在一次执行两个步骤，例如zinbwave）。因此，避免混淆“标准化”和“批次校正”的数据非常重要，因为这些数据通常表示不同的事物。 我们将主要关注缩放标准化，这是最简单和最常用的标准化策略。这涉及将每个细胞的所有计数除以特定于细胞的比例因子，通常称为“大小因子”。这里的假设是，任何细胞特异性偏倚（例如，捕获或扩增效率）均会通过缩放该细胞的预期平均数来同等地影响所有基因。每个细胞的大小因子表示该细胞中相对偏差的估计，因此，将其计数除以其大小因子应消除该偏差。然后可以将所得的“归一化数据”用于下游分析，例如聚类和降维。为了演示，我们将使用来自scRNAseq软件包的数据集。 文库大小归一化是执行缩放归一化的最简单策略。 我们将文库的大小定义为每个细胞中所有基因的计数总和，假定其预期值随任何细胞特异性偏倚而缩放。 然后，在定义比例常数的情况下，每个细胞的“库大小因子”直接与其库大小成正比，从而使所有细胞的平均大小因子等于1。此定义可确保归一化的表达值与原始计数处于相同规模 ——这对解释很有用——尤其是在处理转换后的数据时。 在Zeisel脑数据中，文库大小因子在细胞之间的差异最大10倍。 这是scRNA-seq数据覆盖范围变异的典型表现。 严格来说，文库大小因子的使用是假设任何一对细胞之间的差异表达（DE）基因中都没有“不平衡”。也就是说，基因的一个子集的任何上调都可以通过不同基因子集中的相同下调幅度来抵消。这样可以通过避免合成效应来确保文库大小是相对于细胞特异性相对偏倚的无偏估计。但是，平衡的DE通常在scRNA-seq应用中不存在，这意味着文库大小归一化可能无法为下游分析产生准确的归一化表达值。 在实践中，标准化的准确性不是探索性scRNA-seq数据分析的主要考虑因素。成分偏差通常不会影响细胞群的分离，而只会影响细胞群或细胞类型之间的对数倍数变化的幅度——向着程度较小的方向。因此，库大小归一化通常在许多应用中都是足够的，这些应用的目的是识别细胞群和定义每个细胞群的top标记。 如前所述，当样本之间存在任何不平衡的差异表达时，就会出现成分偏差。以两个细胞举例，其中单个基因X与细胞B相比在细胞A中被上调。这种上调意味着（i）更多的测序资源用于A中的X，从而当每个细胞的总文库大小通过实验确定时（例如，由于文库量化）；其他的非差异基因的覆盖率降低，或（ii）当为X分配更多的读数或UMI时，A的文库大小增加，从而增加了文库大小因子，并为所有非DE基因产生了较小的归一化表达值。在这两种情况下，最终结果是，与B相比，A中的非DE基因将被错误地下调。 对于大量RNA测序数据分析，消除成分偏差是一个经过充分研究的问题。可以使用 DESeq2 包中的 estimateSizeFactorsFromMatrix（） 函数或 edgeR 包中的 calcNormFactors（） 函数来执行规范化。这些假设大多数基因不是细胞之间的DE。假设两个细胞之间多数非DE基因之间的计数大小的任何系统性差异都代表了偏差，该偏差用于计算适当的大小因子以将其去除。 然而，由于存在大量的低计数和零计数，单细胞数据应用这些bulk归一化方法可能会有问题。为了克服这个问题，我们汇总了许多细胞的计数以进行准确的大小因子估算。然后，将基于库的大小因子“分解”为基于细胞的大小因子，以标准化每个细胞的表达谱。如下所示，这是使用来自scran的 computeSumFactors（） 函数执行的。 我们使用带有 quickCluster（） 的预聚类步骤，其中每个聚类中的细胞分别进行归一化，并且将大小因子重新缩放以在各个聚类中具有可比性。这避免了在整个种群中大多数基因都是非DE的假设-在成对的簇之间仅需要非DE多数，这对于高度异质的种群来说是一个较弱的假设。默认情况下， quickCluster（） 将基于irlba软件包中的方法对PCA使用近似算法。近似值依赖于随机初始化，因此我们需要设置随机种子（通过set.seed（））以实现可重现性。 我们看到，解卷积大小因子与图7.2中的库大小因子表现出特定于细胞类型的偏差。这与由细胞类型之间强烈的差异表达引入的成分偏倚的存在是一致的。去卷积大小因子的使用针对这些偏差进行调整，以提高下游应用程序的归一化精度。 准确的归一化对于涉及对每个基因统计信息的估计和解释的过程而言最重要。 例如，成分偏倚会通过系统性地将对数倍数变化沿一个方向或另一个方向转移来破坏DE分析。 但是，对于基于细胞的分析（如聚类分析），与简单的库大小归一化相比，它往往提供的好处较少。 成分偏差的存在已经暗示了表达谱的巨大差异，因此更改标准化策略不太可能影响聚类过程的结果。 spike-in归一化基于以下假设：向每个细胞中添加了相同量的spike-in RNA。spike-in转录本覆盖范围的系统差异仅归因于细胞特异性偏差，例如捕获效率或测序深度。为了消除这些偏差，我们通过缩放“ spike-in size factor”来均衡细胞间的spike-in覆盖范围。与以前的方法相比，spike-in归一化不需要系统的生物学假设（即，没有许多DE基因）。取而代之的是，它假定将掺入的spike-in转录本（i）以恒定的水平添加到每个细胞中，并且（ii）以与内源基因相同的相对方式响应偏倚。 实际上，如果需要关注单个细胞的总RNA含量差异，并且必须保留在下游分析中，则应使用加标归一化。对于给定的细胞，内源RNA总量的增加不会增加其spike-in大小因子。这确保了总RNA含量在群体间的表达差异不会在缩放时消除。相比之下，上述其他标准化方法将仅将总RNA含量的任何变化解释为偏差的一部分，并将其消除。 举个例子，在不同亲和力的T细胞受体配体刺激后，在涉及T细胞活化的不同数据集上使用spike-in归一化 我们应用 computeSpikeFactors（） 方法来估计所有细胞的spike-in大小因子。 通过使用与 librarySizeFactors（） 中相同的推理，将每个细胞的总spike-in计数转换为大小因子来定义。 scaling将随后消除细胞间spike-in覆盖率的任何差异。 我们观察到每种处理条件下spike-in大小因子和解卷积大小因子之间存在正相关关系（图7.3），表明它们在测序深度和捕获效率上捕获了相似的技术偏倚。 但是，我们还观察到，就亲和力或时间的增加而言，对T细胞受体的刺激不断增加，导致spike-in因子相对于文库大小因子而言有所降低。 这与刺激过程中生物合成活性和总RNA含量的增加一致，这减少了每个文库中的相对spike-in覆盖率（从而减少了spike-in大小因子），但增加了内源基因的覆盖率（因此增加了文库大小因子）。 两组尺寸因子之间的差异对下游解释产生了实际影响。 如果将spike-in 大小因子应用于计数矩阵，则未刺激细胞中的表达值将按比例放大，而受刺激细胞中的表达将按比例缩小。 但是，如果使用反卷积大小因子，则会发生相反的情况。 当我们在标准化策略之间切换时，这可以表现为条件之间DE的大小和方向的变化，如下Malat1所示（图7.4）。 一旦计算出大小因子，就可以使用scater中的 logNormCounts（） 函数为每个细胞计算归一化的表达值。 这是通过将每个基因/spike-in转录本的计数除以该细胞的合适大小因子来完成的。 该函数还对归一化后的值进行对数转换，从而创建了一个称为“ logcounts”的新assay。 这些对数值将在以下各章中作为我们下游分析的基础。 对数转换很有用，因为对数值的差异表示基因表达的对数倍变化。这在基于欧几里得距离的下游过程中很重要，下游过程包括许多形式的聚类和降维。通过对对数转换后的数据进行操作，我们确保这些过程基于基因表达的对数倍变化来测量细胞之间的距离。比如，一个在细胞类型A中平均表达量为50，在细胞类型B中表达量为10的基因，或在A中为1100，B中为1000的基因，对数转化可以展现出具有强烈相对差异，因此会关注前者。 在进行对数转换时，我们通常会添加一个伪计数以避免值为零。对于低丰度基因，较大的伪计数将有效地将细胞之间的对数倍变化缩小至零，这意味着下游的高维分析将更多地由高丰度基因的表达差异来驱动。相反，较小的伪计数将增加低丰度基因的相对贡献。常见的做法是使用1的伪计数，原因很简单，即实用的原因是它保留原始矩阵中的稀疏性（即原矩阵中的零在变换后仍为零）。除大多数病理情况外，此方法在所有情况下均有效。 顺便说一句，伪计数的增加是出于将尺寸因子居中统一的动机。这确保了伪计数和规范化的表达式值都在同一范围内。伪计数为1可以解释为每个基因的额外reads或UMI。实际上，居中意味着随着计数深度的提高，伪计数的收缩效果减小。这正确地确保了表达的对数倍变化的估计（例如，根据细胞组之间对数值的差异）随着覆盖范围的扩大而变得越来越准确。相反，如果将恒定的伪计数应用于类似百万分之一的度量，则无论我们执行了多少额外的测序，后续对数倍更改的准确性都将永远不会提高。 在极少数情况下，出于由A.Lun所描述的影响，不适合直接对计数进行缩放。 简而言之，这是由于对数归一化计数的平均值与对数变换后的归一化计数的平均值不同而造成的。 它们之间的差异取决于原始计数的均值和方差，因此相对于计数大小，对数计数的平均值存在系统的趋势。 这通常表现为即使在文库大小归一化之后，轨迹也与文库大小密切相关，如图7.5所示，通过合并和拆分方法生成的合成scRNA-seq数据如图5所示。 由于问题是由于计数大小的差异而引起的，因此最直接的解决方案是降低取样高覆盖率细胞的以匹配低覆盖率细胞。 这使用大小因子来确定达到大小因子的第1个百分位数所需的每个细胞的减采样。 （只有少数几个具有较小尺寸因子的细胞被简单地按比例放大。我们不会尝试将采样缩减为最小尺寸因子，因为这将导致一个尺寸因子非常低的异常细胞过度丢失信息。）我们可以看到 这消除了前两个PC中与库大小因子相关的轨迹，从而提高了基于混合比的已知差异的分辨率（图7.6）。 对数转换仍然是必需的，但是当细胞之间的计数大小相似时，不再会导致均值变化。 虽然减采样是一种方便的解决方案，但由于需要增加高覆盖率细胞的噪声以避免与低覆盖率细胞之间的差异，因此它在统计上是无效的。 它也比简单缩放慢。 因此，我们只建议在按比例缩放的初始分析显示与大小因子高度相关的可疑轨迹后再使用此方法。 在这种情况下，通过减采样重新确定轨迹是否是对数转换的伪像是一件简单的事情。

T3L1是出了名的转染效率低的细胞，Lipo是肯定不行的，且不说分化后的，分化前的转染效率都很低，而且用Nucleofector电转也只能做到20%左右的效率，引起转染效率低的因素太多啦，细胞的因素首当其冲，如果细胞的状态不好，无论你用什么试剂，实验环境多好都是没用的。细胞的状态是首先要考虑的，再去考虑其他。试剂对实验的结果影响也不小，我们实验室刚开始做hela细胞转染的时候用Lipo发现细胞毒性有点大，听了其他实验室同学的介绍换了RFECT，用下来飘起来的细胞没有Lipo多

如果要详细的点话，对照可以是，细胞+lipo2000，另外再加组细胞空白组，做毒性检测，最好这两个对照都加吧

稳转还是瞬时转染与转染试剂无关，与转进去是什么东西有关。如果不是插入到基因组内的话，都不能算稳转。siRNA明显是瞬时转染，一会儿就降解了。如果做shRNA，可以做稳转。

当然可以啊，要多少lipo2000是根据细胞种类来看的，有些细胞对lipo2000毒性的耐受力差，就不能多用。我知道的HEK 293细胞一般可以用到30ul的lipo2000，而siRNA的用量一般是1ug/1ul lipo2000.

孵育，已形成复合体

看看lipo的说明书不就知道啦 以6孔板的一个孔为例吧 一管200ul OPTI+5ul lipo 静置5分钟 另一管200ul OPTI+4mg质粒 两管混匀静置20分钟后加到一个孔里 4-6小时后换液

转dna吗？293t怎么转都好转的。。。随便哪个都行。。。

HepG2细胞一直是公认的比较难转染的细胞，一般都是采用电转。但我在invitrogen官网看到他们使用lipo3000竟然转染效率可以达到50-60%。出于好奇我也用lipo3000转然后，失败。 失败点主要基于2个， 答案：错误，此时细胞的培养环境改变，胞膜的渗透性改变，会加大转染难度。而使用opti后的细胞生长环境也发生了变化，会使细胞产生应激，加大转染难度。 答案：错误，过多最多造成浪费。 （1）最好使用24孔板进行转染，转染完成细胞长满可以传代，这样不会造成lipo浪费。 （2）lipo的用量在预实验时可以调整到说明书的最高与最低，最低看转染效率，最高看细胞耐受（死亡率） （3）当使用opti稀释lipo，使用P3000稀释DNA时，不需要各自孵育5min，而且两者混合后最多孵育15min； （4）转然后或者转染中的细胞使用无双抗的完全培养基； （5）HepG2如果在转染时是80%左右，在转然后就会长满，影响转染效率，最好调整细胞密度为60%时转染。第二天再荧光显微镜下观察，看一下转染效率； A:opti-DMEM 25ul+lipo1.5ul B：opti 25ul+P3000 2ul+DNA 1ug 混合孵育12min，加入细胞中，细胞中含有无双抗培养基500ul； 6孔板： A opti 125ul+lipo 7.5ul B：opti-125ul+P3000 5ul+DNA 5ug 混合孵育12min，加入细胞中，细胞中含有无双抗培养基800ul；

放大倍数不一样，看到的细胞器也不一样

几十年了，以下是几个代表性重组蛋白药物，专利都快过期了Enbrel Companies: Amgen, Wyeth, Takeda 安进，惠氏，武田 Sales: $7.66 billion in 2008 76.6亿美元 Indications: Rheumatoid Arthritis, Juvenile Idiopathic Arthritisc, Ankylosing Spondylitis, Plaque Psoriasis Remicade (Infliximab) Companies: J&J, Schering Plough, Mitsubishi Tanabe 先灵葆雅，三菱，田边 Sales: $6.2 billion in 2008 62亿美元 Indications: Plaque Psoriasi, Rheumatoid Arthritis, Psoriatic Arthritis, Adult Crohn"s Disease, Pediatric Crohn"s Disease, Ulcerative Colitis, Ankylosing Spondylitis Rituxan (Rituximab) Company: Roche 罗氏 Sales: $5.5B in 2008 Indications: Non-Hodgkin"s Lymphoma and Rheumatoid arthritis Avastin (Bevacizumab) Company: Roche 罗氏 Sales: $3.8 billion in 2008 38亿美元 Indications: Metastatic colorectal cancer, Non-squamous non-small cell lung cancer, Metastatic breast cancer, Glioblastoma, Metastatic renal cell carcinoma Herceptin (Trastuzumab) Company: Roche 罗氏 Sales: $4.7B in 2008 47.8亿美元 Indications: Breast Cancer Humira (Adalimumab) Company: Abbott 雅培 Sales: $4.5 billion in 2008 45亿美元 Indications: Rheumatoid Arthritis, ployarticular juvenile idiopathic arthritis, psoriatic arthritis, Chronic plaque psoriasis, Ankylosing Spondylitis, Chrone"s disease Lovenox (Enoxaparin) Company: Sanofi Aventis 赛诺菲-安万特 Sales: $4 billion in 40亿美元 Indications: DVT Blood Clots Lantus (Insulin) Company: Sanofi Aventis 赛诺菲-安万特 Sales: $3.6 billion in 2008 36亿美元 Indications: Diabetes Aranesp (Darbepoetin) Company: Amgen 安进 Sales: $3.1 in 2008 31亿美元 Indications: Anemia Gardasil Company: Merck 默克 Sales: $2.8 billion in 2008 28亿美元 Indications: HPV and Cervical cancer prevention

A、放能反应的部位，如叶绿体的类囊体膜、细胞质基质和线粒体释放能量用于合成ATP，需要ATP合成酶，故A错误；B、细胞质基质和叶绿体的类囊体膜合成ATP，而叶绿体基质进行暗反应需要消耗ATP受到影响，故B错误；C、叶绿体的类囊体膜、线粒体和细胞质基质部位合成ATP，故C错误；D、TBT的类似物三甲基锡可以抑制三磷酸腺苷酶的活性，则抑制ATP的水解，影响所有吸能反应，故D正确．故选：D．

昆虫体内抗菌蛋白的产生或合成，是外界因素诱导作用下发生的生物效应。即可用细菌直接感染诱导，也可用一些物理或化学因素诱导，例如超声波、射线、生理盐水、聚肌胞核苷(p0ly Ⅰ:C)等。我国科学家用超声波处理家蚕(Bombyx mori)蓖麻蚕丫philosamia cynthia ricina)或柞蚕(Antheraea Pemyi)或直接用大肠杆菌(Eseheriehia coIi)注射均可诱导这些昆虫产生抗菌物质，实验结果表明，同一种昆虫经不同诱导源处理后形成相同的抗菌物质。龚琪等[2]用60Co、丫射线、活的大肠杆菌及热灭活的金黄色葡萄球菌(StaphyIococcusa儿rcus)绿脓杆菌(psard○monas aeruginosa)和生理盐水作诱导源，诱导美洲大蜂(Peri Planeta americana)的结果表明，不同诱导源诱导产生的抗菌物的活性大小有所不同，抗菌特性上也有一些差异。刘玉滨等用小自鼠肝癌细胞，大肠杆菌或巨大芽孢杆菌诱导柞蚕、蓖麻蚕等昆虫，均获得抗菌蛋白。除以上昆虫外，在大头金蝇(Chrysomyia megacePhala)[4]，家蝇(Musca domestica)[5]，麻蝇(SarcoPhaga Peregrina)[6]果蝇(Dtosophia melanogaster)[7]、密蜂(Apismellifera)[8]及粉虫甲(Zephobas atratus)[9]寄昆虫它卜都诱导岀抗菌蛋白。由此可见，在外界诱导源的刺激下产生抗菌蛋白是昆虫一个共同的普遍特性，但昆虫对诱导源不能区分，抗菌蛋白是非专一性的免疫应答产物，白细胞介素2等。因此，昆虫抗菌蛋白的研究正引起人们极大的兴趣

。。。。。。。貌似很多机制啊~~！

来源于 Benchmarking single-cell RNA-sequencing protocols for cell atlas projects 对比了13 commonly used scRNA-seq and single-nucleus RNA-seq的方法对比，也算是各有千秋。结果来看，不尽相同。在采用方法策略时候，还是要结合自己的课题，选择合适的方法，不能乱来。 Abstract 测试样品是一个包含人、鼠、狗细胞的混合细胞样品，用于测试13种单细胞测序方案。获得的reads分别mapping到人、鼠、犬的参考序列上，分别计算不同物种的不同测序方法的基因表达量。 The reference sample consists of human PBMCs (60%), and HEK293T (6%), mouse colon (30%), NIH3T3 (3%) and dog MDCK cells (1%). The sample was prepared in one single batch, cryopreserved and sequenced by 13 different sc/snRNA-seq methods. Sequences were uniformly mapped to a joint human, mouse and canine reference, and then separately to produce gene expression counts for each sequencing method. a, Color legend of sc/snRNA-seq protocols. b, 人细胞UMAP of 30,807 cells from the human reference sample (Chromium) colored by cell-type annotation. c, 鼠细胞UMAP of 19,749 cells from the mouse reference (Chromium) colored by cell-type annotation. d, Boxplots displaying the minimum, the first, second and third quantiles, and the maximum number of genes detected across the protocols, in down-sampled (20,000) HEK293T cells, monocytes and B cells. Cell identities were defined by combining the clustering of each dataset and cell projection on to the reference. e, Number of detected genes at stepwise. down-sampled, sequencing depths. Points represent the average number of detected genes as a fraction of all cells of the corresponding cell type at the corresponding sequencing depth. f, Dropout probabilities as a function of expression magnitude, for each protocol and cell type, calculated on down-sampled data (20,000) for 50 randomly selected cells. a,b, Principal component analysis on down-sampled data (20,000) using highly variable genes between protocols, separated into HEK293T cells, monocytes and B cells, and color coded by protocol (a) and number of detected genes per cell (b). c, Pearson"s correlation plots across protocols using expression of common genes. For a fair comparison, cells were down-sampled to the same number for each method (B cells, nu2009=u200932; monocytes, nu2009=u200957; HEK293T cells, nu2009=u200955). Protocols are ordered by agglomerative hierarchical clustering. d, Average log(expression) values of cell-type-specific reference markers for down-sampled (20,000) HEK293T cells, monocytes and B cells. e, Log(expression) values of reference markers on down-sampled data (20,000) for HEK293T cells, monocytes and B cells (maximum of 50 random cells per technique). f, Cumulative gene counts per protocol as the average of 100 randomly sampled HEK293T cells, monocytes and B cells, separately on down-sampled data (20,000). a, The tSNE visualizations of unsupervised clustering in human samples from 13 different methods. Each dataset was analyzed separately after down-sampling to 20,000u2009readsu2009per cell. Cells are colored by cell type inferred by matchSCore2 before down-sampling. Cells that did not achieve a probability score of 0.5 for any cell type were considered unclassified. b, Clustering accuracy and ASW for clusters in each protocol. a–d, UMAP visualization of cells after integrating technologies for 18,034 human (a,b) and 7,902 mouse (c,d) cells. Cells are colored by cell type (a,c) and sc/snRNA-seq protocol (b,d). e,f, Barplots showing normalized and method-corrected (integrated) expression scores of cell-type-specific signatures for human HEK293T cells, monocytes, B cells (e), and mouse secretory and TA cells (f). Bars represent cells and colors methods. g,h, Evaluation of method integratability in human (g) and mouse (h) cells. Protocols are compared according to their ability to group cell types into clusters (after integration) and mix with other technologies within the same clusters. Points are colored by sequencing method. Methods are scored by key analytical metrics, characterizing protocols according to their ability to recapitulate the original structure of complex tissues, and their suitability for cell atlas projects. The methods are ordered by their overall benchmarking score, which is computed by averaging the scores across metrics assessed from the human datasets. 参考文献： Elisabetta Mereu, Atefeh Lafzi Holger Heyn* Nature Biotechnology volume 38 , pages747–755(2020) Cite this article

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细胞质微管对秋水仙素最为敏感，秋水仙碱能抑制有丝分裂，破坏纺锤体，使染色体停滞在分裂中期。这种由秋水仙碱引起的不正常分裂，称为秋水仙碱有丝分裂。在这样的有丝分裂中，染色体虽然纵裂，但细胞不分裂，不能形成两个子细胞，因而使染色体加倍。自1937年美国学者布莱克斯利（A.F.Blakeslee）等，用秋水仙碱加倍曼陀罗等植物的染色体数获得成功以后，秋水仙碱就被广泛应用于细胞学、遗传学的研究和植物育种中。扩展资料秋水仙碱能抑制有丝分裂，破坏纺锤体，使染色体停滞在分裂中期。这种由秋水仙碱引起的不正常分裂，称为秋水仙碱有丝分裂（C-mitosis）。在这样的有丝分裂中，染色体虽然纵裂，但细胞不分裂，不能形成两个子细胞，因而使染色体加倍。自1937年美国学者布莱克斯利（A.F.Blakeslee）等，用秋水仙碱加倍曼陀罗等植物的染色体数获得成功以后，秋水仙碱就被广泛应用于细胞学、遗传学的研究和植物育种的工作中。例如，小麦与黑麦杂交，杂种是不育的，用秋水仙碱处理，使染色体加倍，就能变成可育的异源八倍体小黑麦，在云贵高寒地区种植，产量和品质都比小麦和黑麦好。参考资料来源：百度百科-秋水仙碱

同上!

浸泡秋水仙素

（1）与肺炎的联系肺炎是个较为广义的肺部疾病名称。其具体包括普通型间质性肺炎( usual interstitial pneumonia, UIP) 、脱屑性间质性肺炎( desquamative interstitial pneumonia, DIP)、急性间质性肺炎( acute interstitial pneumonia, AIP)以及非特异性间质性肺炎( nonspecific interstitial pneumonia, NSIP)[8]。也有从组织学上分为UIP、NSIP、DIP、机化性肺炎(OP)、弥漫性肺泡损伤(DAD)、呼吸性细支气管炎(RB)和淋巴细胞性间质性肺炎(LIP)[9]。其中有研究发现对ATⅡ有影响的肺炎有NSIP[10]、UIP、AIP、LIP和OP(主要是隐原性机化性肺炎)[11]，其表现的共同特点为ATⅡ出现肥大、增生，而增生的主要目是为修复上皮细胞，其中有关促进ATⅡ增生的因子, 经3H胸腺脱氧嘧啶核苷和溴化脱氧尿核苷的DNA合成能试验证实有: 肝细胞增殖因子(HGF)、角化细胞生长因子(KGF),上皮增殖因子(EGF)、a 纤维母细胞增殖因子(aFGF)、转化生长因子α(TGFα) 等增殖因子, 据报道, 这些因素系促进初代培养ATⅡ DNA合成的因子[12]。其增生原因及参与肺部炎症反应包括：AT II 通过分泌细胞因子、炎症介质参与炎性细胞间的相互作用，AT II 能抑制淋巴细胞增生,但对淋巴细胞的激活无抑制。具体包括分泌的细胞因子能够增强MΦ,PMN粘附作用而增强其免疫和吞噬能力；调控进入肺泡中的炎性细胞量；调节免疫反应，避免炎症反应太强而造成组织损伤；分泌a-酸性糖蛋白(AGP)，从而调节炎症细胞的活化，抑制PMN细胞趋化因子及丝裂原诱导的淋巴细胞增生，诱导巨噬细胞产生大量IL-1Rα,有助于抗炎；促进自身的增生，利于损伤肺的修复[13]。（2）与呼吸性疾病的联系主要相关的疾病是急性呼吸窘迫综合症(ARDS),AT II对肺泡内水份的清除能力，合成、分泌及损伤后的修复能力，以及对其生长、分化的调节在病程的进展和转归中起着重要作用[15]。具体过程[14]可见流程图所示主要的尝试治疗有：使肺泡细胞再生；调节纤维蛋白的代谢和成纤维细胞的增生。例如肺泡细胞生长因子的引入，从而使AT II恢复再生的能力，或是使其增生达到修复的目的，如果损伤的上皮得不到恢复，就会使上皮下黏性基膜持续暴露而受到损害，进而破坏了基膜可以为募集的细胞和增生的细胞提供迁移路径，使正常肺结构不能保持，破坏了肺组织的修复的支架[16]。同时又研究发现严重急性呼吸综合症(SARS)的早期和中期，有冠状病毒颗粒侵染了AT II，表现为AT II胞质中冠状病毒包涵体。其中有A型病毒样颗粒,具有同心圆外膜、低电子密度核心,大小为80～160 nm[17]。（3）相关治疗肺炎的尝试利用化学药物治疗，例如有研究发现利用氨溴索可以治疗铜绿假单包菌肺炎对AT II的损伤治疗，包括减小板层小体的损伤趋势，和增加内源性表面活性物质的产生及释放[18]；也有通过AT II为肺中干细胞的特点，利用分子克隆法制作转基因载体，并利用显微注射法注入小鼠的受精卵中，构建了AT II特异表达SARS冠状病毒蛋白的转基因小鼠，为深入研究该基因的病理生理学效应提供基础[19]。

为什么细胞可以分泌抗菌肽而不被杀伤？抗菌肽的种类非常非常的多,并不是所有的抗菌肽都不杀死益生菌,也有抗菌肽对真核细胞有杀伤能力,比如对肿瘤细胞的杀伤能力.从你的提问来看,你问的应该是包含在乳酸菌素中的一类抗菌肽吧,益生菌是属于乳酸菌的.给你几个关键词：乳酸菌、乳酸菌素、Nisin、益生菌,你去查一下吧.此外：抗菌肽是益生菌产生的,对其他细菌是一种竞争性的抑制作用抗菌肽对正常哺乳动物细胞及昆虫细胞无不良影响,但对癌细胞株则有明显杀伤作用.这种选择性机理可能与细胞骨架有关.已有有关抗菌肽对宫颈癌细胞、直肠癌细胞及肝癌细胞的杀伤作用与剂量相关的效应的报道

细菌的肽聚糖中有一个N-乙酰葡糖胺和N-乙酰胞壁酸通过β-1，4糖苷键交替连接的骨干，此结构对溶菌酶敏感，而溶菌酶在泪水，唾液等中，因次可以用溶菌酶处理细胞壁。此法可以用于任何时期的细菌。肽聚糖中还含有一个四肽尾和肽桥结构，青霉素可以影响该结构的形成，故可以用青霉素处理细胞壁，但只能用于细菌合成时期。

抗菌肽的种类非常非常的多，并不是所有的抗菌肽都不杀死益生菌，也有抗菌肽对真核细胞有杀伤能力，比如对肿瘤细胞的杀伤能力。从你的提问来看，你问的应该是包含在乳酸菌素中的一类抗菌肽吧，益生菌是属于乳酸菌的。给你几个关键词：乳酸菌、乳酸菌素、Nisin、益生菌，你去查一下吧。此外：抗菌肽是益生菌产生的，对其他细菌是一种竞争性的抑制作用抗菌肽对正常哺乳动物细胞及昆虫细胞无不良影响，但对癌细胞株则有明显杀伤作用。这种选择性机理可能与细胞骨架有关。已有有关抗菌肽对宫颈癌细胞、直肠癌细胞及肝癌细胞的杀伤作用与剂量相关的效应的报道。

鹅血冻干粉与肿瘤中国中医药大学孙毅坤博士，在实验中发现，鹅血中的低分子蛋白对小鼠ec可使癌性腹水形成减慢，而且能使癌细胞核发生质变和消失。美国科学家teicher通过血红蛋白对13762只肿瘤小鼠实验发现：在化疗前给予血红蛋白，肿瘤细胞对化疗药物的敏感度成倍增加。进入21世纪,，哈佛大学托马斯卢克领导的研究小组实验证实，一种被称为“slug”的蛋白，可保护造血干细胞不受辐射和化疗药物的毒杀。简单的说就是：slug蛋白给正常放、化疗过程中的机体正常的造血干细胞穿上了一层盔甲，让化疗药物和放射线在毒杀肿瘤细胞的同时，对正常细胞毫发无伤。鹅血冻干粉中富含血红蛋白、slug蛋白，以及能够直接抑杀肿瘤细胞的低分子蛋白。《健康报》等数家媒体曾同时报道：“张先生1997年3月不幸患右中心型肺癌，病理类型属未分化小细胞型。几次化疗下来，张先生白细胞曾降到2000。后通过服用鹅血冻干粉，白细胞升到4500，食欲恢复正常，且肺部肿块明显缩小。”这一惊喜发现让肿瘤患者及医学界重新关注起含有丰富动物蛋白的鹅血。2002年，哈尔滨医科大学肿瘤研究所对小鼠肝癌腹水细胞、纤维肉瘤两种移植瘤进行了抑瘤实验。结果显示：生鹅血及鹅血冻干粉确有显著的抑癌作用，且后者效果更佳。早在清代，医书上就有记载：“苍鹅血，治噎膈反胃。噎膈反胃，即食道癌、胃癌也”，民间也一直流传着用鹅血抑制肿瘤的说法。直到今天，肿瘤学界的科学家们通过对鹅血冻干粉进行反复实验研究，其抗肿瘤功效终被证实。鹅血冻干粉中所含的丰富的血红蛋白，可以成倍提高肿瘤细胞对放化疗及药物的敏感度，如同溶解了肿瘤细胞的坚壳，让下一步的药物“杀瘤”事半功倍。鹅血冻干粉中的低分子抗肿瘤物质，可以“靶向性”迅速识别转移到血液、淋巴液中的肿瘤细胞，抑杀“四处游走”的肿瘤细胞，消除手术、放化疗后的隐患，而且这种低分子抗癌物质不会被人体消化系统的酸、碱、酶所破坏，它能使肿瘤细胞核由退变直至消失。鹅血冻干粉中特含的slug蛋白，能保护造血干细胞等正常细胞免受放化疗及药物的侵害，在对肿瘤细胞“赶尽杀绝”的同时，确保正常细胞毫发无伤，真正实现了“无毒放化疗”，并使放化疗治疗肿瘤的疗效得到成倍加强，从而实现肿瘤患者梦寐以求的“带瘤生存”。此方宜于各种消化道癌、食管癌、胃癌、肺癌、肝癌、淋巴瘤、鼻咽癌、白血病等，有效率很高。

T细胞产生淋巴因子有增加巨噬细胞吞噬功能的能力